细菌的分离、接种和培养
实验五 微生物的分离、接种及培养法
实验五微生物的分离、接种及培养法一目的要求1.掌握倒平板的方法、划线分离法、稀释平板分离法和菌落（活菌）计数法。
2.熟练掌握微生物的接种技术，学会微生物的一般培养方法和无菌操作技术。
二实验原理从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
常用的分离方法有： 1) 平板划线分离法；2）稀释平板分离法。
在食品发酵工业中，通过微生物的分离、纯化，选育优良的微生物菌种，以提高产品的质量和产量；在食品卫生管理方面，需要进行微生物检测，必须将微生物单一分离出来，加以鉴别和研究。
土壤是微生物生活的大本营，它所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。
因此土壤是微生物多样性的重要场所，可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。
微生物的分离和接种是微生物学中重要的技术之一，需要严格的无菌操作，否则使得微生物实验毫无意义。
三实验材料1.菌种：葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、酵母菌、毛霉、曲霉、青霉等含菌样品。
2.培养基：肉汤蛋白胨培养基（斜面、平板）、肉汤蛋白胨液体培养基、蔡氏琼脂培养基（斜面、平板）。
3.土壤（自带）或其他物品；无菌水，无菌培养基，无菌吸管，无菌三角瓶等。
四实验内容与步骤（一）微生物的分离技术1. 平板划线分离法借助划线使混杂的微生物在平板的表面分散开，以获得单个菌落，从而达到分离的目的。
具体方法如下：倒制平板→制备含菌样品稀释液→划线→倒置适温培养→观察记录（1)倒制平板：将固体培养基熔化→冷却至 50-55℃→注入培养皿内 15ml（无菌操作）→旋匀→静置凝固→即成平板→在皿盖边贴标。
（2)含菌样液制备：样品少许（1-10g），加入盛有无菌水的试管内，摇匀，制成菌悬液即可，能直接划线的样品（如体液、黏液、污水等），可省去这操作。
（3)划线：左手持平板，接种环经灼烧灭菌后，以无菌操作取样，迅速将接种环伸入培养皿，轻轻划线（切勿把平板表面划破）。
然后将培养皿倒置放入恒温培养箱37℃，培养24-48 小时，观察平板上出现的现象，注意菌落的形状，并做记录。
细菌的分离培养
细菌的分离培养实验目的：掌握在各种培养基上的接种方法并观察生长现象。
实验材料：菌种、普通琼脂平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基、接种环、接种针、酒精灯。
实验内容：一、平板划线接种法（分离培养法）原理：通过在平板上划线，将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的分散开，使单个细菌能固定在一点上生长繁殖，形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。
若需从平板上获取纯种，则挑取一个单个菌落作纯培养。
用途：分离出纯种细菌，以利作纯培养。
操作方法（三区划线法）：1、右手拿接种环，烧灼冷却后，取菌液一环。
2、左手抓握琼脂平板（让皿盖留于桌上），在酒精灯火焰左前上方，使平板面向火焰，以免空中杂菌落入，右手将已沾菌的接种环在琼脂表面密集而不重叠的来回划线，面积约占整个平板的1/5-1/6，此为第一区。
划线时接种环与琼脂呈30-40度角轻轻接触，利用腕力滑动，切忌划破琼脂。
3、接种环上多余的细菌可烧灼（每划完一个区域是否需要烧灼灭菌视标本中含菌量多少而定），待冷后，在划线末端重复2-3根线后，再划下一区域（约占1/4面积），此为第二区。
4、第二区划完后可不烧灼接种环，用同样方法划第三区，划满整个平皿。
5、划线完毕，将平板扣入皿盖并作好标记，置37°C温箱孵育18-24小时观察琼脂表面菌落分布情况，注意是否分离出单个菌落，并记录菌落特征（如大小、形状、透明度、色素等）。
二、液体培养基接种法用途：凡肉汤、蛋白胨水，各种单糖发酵均用此法接种。
可以观察细菌不同的生长性状、生化特性以供鉴别之用。
操作方法：右手执笔式握住接种环，灭菌冷却后取单个菌落。
1、左手拇指、食指、中指托住液体培养基之下端，右手小指和无名指（或手掌）拔取试管塞，将管口移至火焰上旋转烧灼。
2、将沾菌的接种环移入培养基管中，在液体偏少侧接近液面的管壁上轻轻研磨，沾取少许液体与之调和，使菌液混合于培养基中（图5）。
3、管口通过火焰，塞好试管塞，将接种环灭菌后放下，经37C温箱孵育18-24小时，取出观察生长情况。
细菌的分离培养实习报告
细菌的分离培养实习报告一、实验目的通过本次实习，掌握细菌的分离培养和接种技术，了解细菌的形态特征及生长习性，并能够正确使用细菌培养基和培养设备。
二、实验原理细菌的分离培养和接种技术是一种将混合菌液中的不同种类的细菌分离出来并进行单独培养的方法。
该方法主要是通过对细菌的生长特性进行观察和分析，从而将不同种类的细菌分离开来。
三、实验材料与设备1. 实验材料：- 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎球菌等。
- 培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基等。
- 接种工具：接种环、接种针等。
- 实验仪器：高压蒸汽灭菌器、生物安全柜、显微镜、培养箱等。
2. 实验步骤1) 菌种的准备：将各种菌种分别接种在斜面培养基上，37℃培养24小时。
2) 培养基的制备：按照配方制备牛肉膏蛋白胨琼脂平板、肉汤培养基、半固体培养基等，高压蒸汽灭菌法灭菌。
3) 接种方法：a) 平板划线法：将菌种接种环在琼脂平板表面划线，使细菌分散生长，形成单个菌落。
b) 稀释涂布平板法：将菌种接种环在液体培养基中稀释后，涂布在琼脂平板表面。
4) 培养：将接种后的琼脂平板倒置放入培养箱中，37℃培养24小时。
3. 实验结果与分析1) 菌落的观察：观察不同菌种在琼脂平板上的生长情况，记录菌落的形状、大小、颜色等特征。
2) 菌种的鉴定：根据菌落的特征和生长习性，对不同菌种进行鉴定。
四、实习心得通过本次实习，我对细菌的分离培养和接种技术有了更深入的了解。
在实验过程中，我学会了如何准备菌种、制备培养基、进行接种操作以及观察菌落等技能。
同时，我也明白了细菌分离培养的重要性，它不仅可以帮助我们研究细菌的生物学特性，还可以为临床诊断和防治疾病提供依据。
在实验过程中，我注意到了无菌操作的重要性，严格遵循无菌操作规程，避免交叉污染。
同时，我也学会了如何使用显微镜观察细菌的形态特征，从而对菌种进行初步鉴定。
总之，本次实习让我对细菌的分离培养和接种技术有了更全面的了解，也为我今后的科研和工作打下了坚实的基础。
细菌分离培养实验报告
细菌分离培养实验报告
实验目的：
通过对样品的细菌分离和培养，观察和鉴定细菌种类及其生长特征，为日后的研究奠定基础。
实验原理：
细菌分离培养是指将样品中的微生物通过特定的方法分离出来，并且在适宜的培养基上进行培养。
主要步骤包括选择样品、消毒、接种、分离和鉴定。
实验步骤：
1.选择样品：本次实验选用的是口腔拭子样品。
2.消毒：将口腔拭子放入细菌营养液中，充分均匀振荡，将细
菌营养液倒入灭菌瓶中。
3.接种：将灭菌瓶中的细菌营养液，均匀地涂抹在培养基平板上，用铁环进行接种。
4.分离：将铁环进行细菌分离，标记好分离点。
5.鉴定：根据样品的菌落形态、生长特征及其他相关检测方法，进行初步鉴定和筛选，待进一步的鉴定。
实验结果与分析：
在培养基平板上观察到了菌落的生长，初始生长时间为48小时。
根据菌落的形态、颜色、大小和特征等，初步判断菌落为链球菌属（Streptococcus）。
结论：
通过细菌分离培养实验，成功分离出一株链球菌属的菌落，并进行初步鉴定，为日后的进一步研究提供了基础。
细菌的接种分离与培养实验报告实验结论
细菌的接种分离与培养实验报告实验结论下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢！本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注！Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!一、实验目的本实验旨在研究细菌的接种分离与培养方法，进一步了解细菌的生长特性和培养条件。
实验四：细菌的接种、培养和分离技术
实验四：细菌的接种、培养和分离技术一、实验目的与要求：（1）掌握从环境土壤、水体、活性污泥等中分离培养细菌的方法;从而获得若干种细菌纯培养技能（2）掌握细菌纯种分离的方法：稀释平板分离法和平板划线法..（3）掌握几种接种技术：斜面接种技术、穿刺接种、稀释平板涂布法等..二、实验原理在土壤、水、空气或人及动、植物体中;不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起;当我们希望获得某一种微生物时;就必须从混杂的微生物类群中分离它;以得到只含有这一种微生物的纯培养;这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化..为了获得某种微生物的纯培养..一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同;而供给它适宜的培养条件;或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长;而抑制其他菌生长的环境;从而淘汰其他一些不需要的微生物;再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或平板划线分离法等分离、纯化该微生物;直至得到纯菌株..三、实验器材1、牛肉膏蛋白胨培养基2、盛9ml无菌水的试管;盛90m1无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶;1ml和5ml无菌吸管;无菌培养皿；3、接种环;土样;酒精灯等..四、操作步骤1、倒平板将加热融化的牛肉膏蛋白胨培养基倒平板;并标明培养基的名称..2、贴标签接种前在试管上贴上标签;注明菌名、接种日期、接种人姓名等..贴在距试管口径2-3厘米的位置..3、点燃酒精灯..4、接种取接种环右手拿接种环如握钢笔一样、在火焰上将环端烧红灭菌;然后将有可能伸入试管的其余部分;均用火烧过灭菌..环冷却将灼烧过的接种环伸入菌种管;先使环接触边壁;使其冷却..取菌种待环冷却后轻轻沾取经稀释10倍的土壤悬液-环;然后将接种环移出菌种管;注意不要使环的部分碰到管壁;取出后不可使环通过火焰..接种在火焰旁迅速将沾有菌种的接种环在平板上划线..划线的方法很多;但无论哪种方法划线;其目的都是通过划线将样品在平板上进行稀释;使形成单个菌落..常用的划线方法有下列二种：⑴用接种环以无菌操作挑取土壤悬液一环;先在平板培养基的一边作第一次平行划线3-4条;再转动培养皿约70°角;并将接种环上剩余物烧掉;待冷却后通过第一次划线部分作第二次平行划线;再用同法通过第二次平行划线部分作第三次平行划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线图A..划线完毕后;盖上皿盖;倒置于温室培养..⑵将挑取有样品的接种环在平板培养基上作连续划线图 B..划线完毕后;盖上皿盖;倒置温室培养..环灭菌将接种环烧红灭菌..5、挑菌将培养后长出的单个菌落分别挑取接种到上述三种培养基的斜面上;分别置25℃和28℃温室中培养;待菌苔长出后;检查菌苔是否单纯;也可用显微镜涂片染色检查是否是单一的微生物;若有其他杂菌混杂;就要再一次进行分离、纯化;直到获得纯培养..四、注意事项1、实验操作过程中无菌操作..。
细菌分离培养、接种技术及培养方法-精品医学课件
革兰染色法
Gram staining
临床微生物与免疫学检验教研室
一、实验目的
1.掌握细菌涂片制作方法； 2.掌握革兰染色法和细菌的基本形态； 3.了解革兰染色法的临床意义。
二、革兰染色原理
原理
细胞壁学说 等电点学说 化学学说
革兰阳性菌 细胞壁肽聚糖形成网状 结构，乙醇处理时，脱水 引起网状结构孔径变小， 通透性降低，结晶紫-碘 复合物不易脱去
实验步骤和方法
1)连续划线分离法：①将接种环火焰灭菌，待冷后取标 本少许；②左手持平板，五指固定平皿盖边缘，向外反 转手掌，装有培养基的平板于手掌内用拇指、小指和 无名指固定，并将平板边缘稍微提高呈现30～45度角， 置酒精灯前上方5～6cm；③右手持已取材的接种环， 先在平板一端涂布，然后快速大幅度左右来回以密而 不重的曲线形式作连续划线接种，使整个平板布满曲 线④划线完毕，将平板作好标记，置35℃孵育18-
革兰阴性菌
细胞壁肽聚糖含量低， 脂类物质含量高，乙醇处 理时，脂类物质溶解，细 胞壁的通透性增加，结晶 紫-碘复合物易脱去
三、实验器材和试剂
1.标本 ：金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的培养物。 2.试剂 ：革兰染液。 3.其他 ：载玻片、生理盐水、接种环、酒精灯、显微镜。
四、操作步骤
1. 细菌涂片制备 ⑴涂片：取洁净载玻片一张，按无菌的方法取1~2环生 理盐水于载玻片上，按无菌的方法各取葡萄球菌和大肠埃 菌 培养物少许，在生理盐水中均匀研磨，涂好的菌膜直径 1cm左右。 ⑵干燥：室温下自然干燥或于酒精火焰半尺高处烘干。 ⑶固定：火焰加热法。目的是杀死细菌，并使菌体与载 玻片粘附牢固，染色时不致于被染液和水冲掉。
培养方法
2 二氧化碳培养法 (1)二氧化碳孵箱：能自动调节二氧化碳的含量和温度， 使用较为方便。 (2)烛缸法：取有盖磨口标本缸或玻璃干燥器，在盖及磨 口处涂以凡士林。将接种细菌的培养基放入缸中，点燃 缸内蜡烛，加盖密封。当蜡烛燃烧时会消耗缸内氧气并 产生CO2，随着缸内氧气的逐渐减少，蜡烛会自行熄 灭，此时缸内CO2浓度约为5％左右。 (3)化学法(重碳酸钠一盐酸法)：（自学）
微生物的分离、接种和培养技术
微生物的分离、接种和培养技术一、实验的目的和内容目的：掌握微生物接种和分离纯化技术，掌握无菌操作技术。
内容：用平板划线法分离微生物；学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术。
二、基本原理在自然界中，各种微生物是在互为依赖的关系下共同生活的。
因此，为了取出特定的微生物进行纯培养，必须从中把他们分离出来。
微生物接种技术是进行微生物实验和相关研究的基本操作技能。
无菌操作是微生物接种技术的关键。
接种是将微生物或微生物悬液引入新鲜培养基的过程。
由于实验目的、培养基种类及实验器皿等不同，所用接种方法不尽相同。
斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种操作均以获得生长良好的纯种微生物为目的。
分离培养微生物时，要考虑微生物对外界的物理、化学等因素的影响。
即选择该类微生物最适合的培养基和培养条件。
在分离、接种、培养过程中，均需严格的无菌操作，防止杂菌侵入，所用的器具必须经过灭菌，接种工具无论使用前后都要经过灭菌，且在无菌室或无菌箱中进行。
三、材料及器材（一）菌种：大肠杆菌、枯草杆菌，金黄色葡萄球菌，酵母菌。
（二）培养基：肉汤培养基试管斜面，肉汤半固体培养基，肉汤固体培养基试管斜面，肉汤固体培养基平板，查氏培养基试管斜面，查氏培养基平板。
易（三）仪器及其他工具：接种环，接种针，接种钩，镊子，酒精灯，火柴，酒精棉，试管架，标签纸，恒温培养箱等。
四、方法与步骤（一）接种。
1、试管菌种转接：试管细菌菌种转接主要用于菌种的活化、分离、纯化。
（1）将菌种试管与待接种的试管培养基依次排列，挟于左手的拇指与其他四指之间，用右手的无名指与小指和手掌边拔出棉塞并挟住。
（2）置试管口于酒精火焰附近。
（3）将接种工具垂直插入酒精火焰中烧红，再横过火焰3次，然后再放入有菌试管中，在管壁上停留片刻待其冷却。
（4）取少许菌种置于另一支试管中，按一定的接种方式把菌种接种到新的培养基上。
（5）取出接种工具，试管口和棉塞进行火焰灭菌。
（6）重新塞上棉塞。
（7）烧死接种工具上的残余菌，把试管和接种工具放回原处。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
（三）平板划线分离法
浙江工商大学环境科学与工程学院
12
浙江工商大学环境科学与工程学院
制备土壤稀释液
13
浙江工商大学环境科学与工程学院 14
倾注平板
浙江工商大学环境科学与工程学院
15
培养
浙江工商大学环境科学与工程学院
16
挑菌落
浙江工商大学环境科学与工程学院
接种和分离工具
1．接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接
9
浙江工商大学环境科学与工程学院
3. 培养与移植 待平板完全冷凝后，将平板倒置37℃恒温箱中培养
24～48小时，检查分离结果。将培养后长出的单个菌落 分别挑取接种到牛肉膏蛋白胨培养基的斜面上，然后置 于37℃恒温箱中培养，待菌苔长出后，检查菌苔是否单 纯，也可用显微镜涂片染色检查是否是单一的微生物， 若有其它杂菌混杂，就可再一次进行分离、纯化，直至 获得纯培养。
浙江工商大学环境科学与工程学院
32
浙江工商大学环境科学与工程学院 33
浙江工商大学环境科学与工程学院
六、作 业 1. 简述无菌操作过程中的注意点。 2. 拟出从土壤中分离细菌的主要实验步骤。 3. 如何检验平板上某个单菌落是不是纯培养？ 4. 培养时为什么要将培养皿倒置培养？
34
浙江工商大学环境科学与工程学院
21
浙江工商大学环境科学与工程学院
纯化（平板划线法） 倒平板——划线——培养——挑菌落——纯种（纯培养）
22
浙江工商大学环境科学与工程学院 23
浙江工商大学环境科学与工程学院
平板划线分离的方法 1.斜线法 2.曲线法 3.方格法 4.放射法 5.四格法
24
浙江工商大学环境科学与工程学院
五、微生物实验技术操作规范示例 （一）斜面接种无菌操作技术 （二）倒平板及平板划线接种
8
浙江工商大学环境科学与工程学院
2. 平板制作 将无菌培养皿编上10-3、10-4、10-5号码，每一号码设
三个重复，用1ml无菌吸管按无菌操作要求吸10-5稀释液 各1ml，分别放入编号10-5的三个培养皿中。同法吸取10-5 稀释液各1ml，分别放入编号10-4的三个培养皿中。再吸 取10-3稀释液各1ml，分别放入编号10-3的三个培w1养皿中。 然后在9个培养皿中分别倒入15ml已融化并且冷却至45℃ 左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，加盖后轻轻摇动培养 皿，使培养基均匀分布，平置于桌面上，待凝固后即成 平板，整个操作过程应严格按照无菌操作。
• 一、视频演示 • 二、取自己做的培养皿，观察，并作图 • 三、挑取菌落，进行革兰氏染色，初步判别革兰
氏阴性或阳性菌 • 四、将自己的培养皿、试管清洗干净，放入抽屉 • 五、作业：从土壤中分离细菌的主要实验步骤。
三、实验试剂与器材 ① 土壤样品（环境样品） ② 牛肉膏蛋白胨培养基； ③ 无菌试管、无菌三角瓶、无菌玻
璃涂棒、无菌吸管、接种环、无 菌培养皿； ④ 超净工作台
6
四、实验步骤 （一） 稀释混合平板法
浙江工商大学环境科学与工程学院
7
浙江工商大学环境科学与工程学院
1. 土壤稀释液的制备
① 称取土样10g，放入盛90ml无菌水三角瓶中，振荡15～20
大家好
1
实验五 细菌的分离、接种 和培养
2
浙江工商大学环境科学与工程学院
一．目的要求 二．实验原理 三．实验材料 四．实验步骤 五．操作规范示例 六．作 业
3
一、目的要求
掌握从环境（土壤、水体、活性污泥等）中分离和纯化 微生物的方法和原理；
倒平板； 细菌纯种分离：稀释混合平板分离法、稀释涂布平板
分离法和平板划线法； 接种技术； 无菌操作技术；
浙江工商大学环境科学与工程学院
二、实验原理
在自然界中，不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一 起的，为了生产和科学研究的需要，当我们希望获得某一种微生 物时，就必须从混杂的微生物类群中分离出它，以得到只含有这 一种微生物的纯培养物，这种获得纯培养物的方法称为微生物的 分离与纯化。
分钟，使微生物细胞分散，静置约20～30秒，即成10-1的土壤 悬液。 ② 另取装有9ml无菌水的试管，编号为10-2、10-3、10-4、10-5、 10-6，用无菌吸管吸取10-1土壤悬液l ml，加入编号10-2的无菌 试管中，吹吸三次，使之混合均匀，即成10-2的土壤稀释液。 再用另一支吸管吸取10-2试管中的土壤稀释液1ml，加入编号 10-3的无菌试管中，轻轻摇动，使之混合均匀，即成10-3的土 壤稀释液，一定要每次更换一支无菌吸管（连续稀释）。同 法依次分别稀释成10-4、10-5和10-6等一系列稀释度菌悬液。
种锄 8.小解剖刀
17
浙江工商大学环境科学与工程学院 18
浙江工商大学环境科学与工程学院 19
移接斜面
常用的接种方法 划线接种 点接种 穿刺接种 涂布接种 液体接种 注射接种
浙江工商大学环境科学与工程学院 20
浙江工商大学环境科学与工程学院
斜面接种时的无菌操作 (1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞
为了获得纯种的微生物，一般根据该微生物营养或培养特点 (微生物对营养、酸碱度、氧等条件)，或对某种抑制剂的耐受性不 同，或对某种环境条件要求不同，从而制作或设置一些选择性培 养基，或选择性培养条件，再用稀释涂布平板法或稀释混合平板 法或划线法分离，纯化该微生物，直至得到该纯种菌株。
5
浙江工商大学环境科学与工程学院
25
（一）斜面接种无菌操作技术
浙江工商大学环境科学与工程学院
26
浙江工商大学环境科学与工程学院 27
浙江工商大学环境科学29
浙江工商大学环境科学与工程学院 30
(二）倒平板及平板划线接种
浙江工商大学环境科学与工程学院
31
（三）平板划线接种：
10
浙江工商大学环境科学与工程学院
（二）稀释涂布平板法
此法与稀释混合平板法基本相同，无菌操作也一样， 所不同的是先将牛肉膏蛋白胨培养基融化，在火焰旁注入 培养皿，摇匀后制成平板，然后用三支1ml无菌吸管分别 由10-4、10-5、10-6三管土壤稀释液中各吸取0.2ml对号放入 已写好稀释度的平板中，用无菌玻璃涂棒在培养基表面轻 轻地涂布均匀，然后分别倒置于37℃温箱中培养后，再挑 取单个菌落，直至获得纯培养。