微生物的分离培养方法
微生物的分离方法
微生物的分离方法
微生物的分离方法是指将混合的微生物菌落分离出来，单独培养，以便进行鉴定和研究。
常见的分离方法有以下几种：
1.平板分离法：将微生物接种在含有固体培养基的平板上，使微生物随机分布并生长形成菌落，然后使用无菌的环针将单个菌落挑出，转移到新的培养基上进行单独培养。
2.液体分离法：将微生物接种在含有液体培养基的试管中，经过适当的震荡或搅拌，使细菌均匀分散在培养基中，再逐步地将其中的微生物转移到新的培养基上进行单独培养。
3.滤膜分离法：将微生物培养在含有滤膜的培养基中，待微生物穿过滤膜并在其表面生长形成菌落后，用无菌的镊子将单个菌落挑出，转移到新的培养基上进行单独培养。
4.扩散分离法：将微生物接种在含有半固态培养基的试管中，将试管在水平面上移动，使微生物扩散生长，最终形成一个斑点，再使用无菌的环针将单个斑点挑出，转移到新的培养基上进行单独培养。
以上是常见的微生物分离方法，不同的方法适用于不同类型的微生物，选择合适的方法对于微生物研究和鉴定具有重要意义。
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微生物纯种分离的5种方法
微生物纯种分离有5种方法，分别是：1.倾注平板法：首先把微生物悬液通过一系列稀释，取一定量的稀释液与熔化好的保持在40-50°左右的营养琼脂培养基充分混合，然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中，待凝固之后，把这平板倒置在恒箱中培养。
单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落，取单个菌落制成悬液，重复上述步骤数次，便可得到纯培养物。
2.涂布平板法：首先把微生物悬液通过适当的稀释，取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上，然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液均匀地涂布在培养基表面上，经恒温培养便可以得到单个菌落。
3.平板划线法：最简单的分离微生物的方法是平板划线法。
用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。
划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。
当接种环在培养基表面上往后移动时，接种环上的菌液逐渐稀释，最后在所划的线上分散着单个细胞，经培养，每一个细胞长成一个菌落。
4.富集培养法：富集培养法的方法和原理非常简单。
我们可以创造一些条件只让所需的微生物生长，在这些条件下，所需要的微生物能有效地与其他微生物进行竞争，在生长能力方面远远超过其他微生物。
如果要分离一些专性寄生菌，就必须把样品接种到相应敏感宿主细胞群体中，使其大量生长。
通过多次重复移种便可以得到纯的寄生菌。
5.厌氧法：在实验室中，为了分离某些厌氧菌，可以利用装有原培养基的试管作为培养容器，把这支试管放在沸水浴中加热数分钟，以便逐出培养基中的溶解氧。
然后快速冷却，并进行接种。
接种后，加入无菌的石蜡于培养基表面，使培养基与空气隔绝。
另一种方法是，在接种后，利用N2或CO2取代培养基中的气体，然后在火焰上把试管口密封。
有时为了更有效地分离某些厌氧菌，可以把所分离的样品接种于培养基上，然后再把培养皿放在完全密封的厌氧培养装置中。
微生物的分离方法
微生物的分离方法
微生物的分离方法可以根据具体的研究目的和微生物的特性选择不同的方法。
以下是一些常用的微生物分离方法：
1. 均匀涂布法：将微生物样品均匀涂布在培养基上，适用于寻找和分离菌落。
2. 稀释法：将微生物样品逐渐稀释成一定浓度，在培养基上涂布，以分离单个菌落。
3. 筛选法：使用特定的筛选培养基，如差凝固培养基、高盐培养基等，培养出特定菌种。
4. 血平板法：将微生物样品与含有血液成分的平板培养基接触，以便检测对血液的反应，如血清试验。
5. 选择性培养法：使用含有特定抑制剂的培养基，可抑制某些微生物的生长，从而选择性地培养目标菌种。
6. 过滤法：将微生物悬液通过滤膜，滤膜上的微生物可通过培养和分离。
7. 对流传播法：通过将液体培养基倒于分性培养皿内，当液滴干燥后会形成核，因范围受限，易于分离。
8. 转移法：通过转移微生物样品至不同培养基进行连续培养，以分离不同菌种。
9. 表面划线法：在平板培养基上进行菌落划线，可分离不同类型的菌落。
10. 生理生化性状检测：通过观察微生物的代谢及反应特性，如氧需求、乳酸发酵等，进行分离。
以上方法只是一些常用的微生物分离方法，具体的选择应根据研究目的和微生物的特性决定。
2.微生物的分离培养
一、微生物接种
1．琼脂斜面接种法
主要用于菌落的移种，以获得纯种进 行鉴定和保存菌种等。用接种环（针）挑 取单个菌落或培养物，从培养基斜面底部 向上划一条直线，然后再从底部沿直线向 上曲折连续划线，直至斜面近顶端处止。
2．穿刺接种法
此法多用于半固体培养基或双糖铁、明 胶等具有高层的培养基接种，半固体培养基 的穿刺接种可用于观察细菌的动力。接种时 用接种针挑取菌落，由培养基中央垂直刺入 至距管底0.4cm处，再沿穿刺线退出接种针。
4．衰亡期
稳定期后如再继续培养，细菌死亡率逐渐 增加，以致死亡数大大超过新生数，群体中活 菌数目急剧下降，出现了“负生长”--叫衰亡 期。其中有一段时间，活菌数按几何级数下降， 故有人称之为“对数死亡阶段”，这一阶段的 细胞，有的开始自溶，产生或释放出一些产物， 菌体细胞也呈现多种形态，大小悬殊，有的细 胞内多液泡，革兰氏染色反应的阳性菌变成阴 性反应等 。
（5）比浊法
原理是悬液中细胞浓度与混浊度成正比，
与透光度成反比。细菌越多，透光量越低。 此法比较简便。 但样品颜色不宜太深；样品中不要混杂其 他物质；同时菌悬液浓度必须在107／毫升以上 才能显示可信的混浊度。
2．间接计数法
是基于每个分散的有机体在适宜的培 养基中具有生长繁殖的能力，并且一个活 细胞能形成一个菌落。菌落数就是待测样 品所含的活菌数。
3．稳定期
又称恒定期或最高生长期。长短与菌种和
外界环境条件有关。
处于稳定期的微生物，新增殖的细胞数与 老细胞的死亡数几乎相等，培养物中细胞总数 达到最高水平，此时生长速度逐渐趋向零。接
着死亡细胞数大大超过新增殖细胞数，曲线出
现下降趋势。
3．稳定期
稳定期产生的原因：由于对数期细菌活跃
微生物分离纯化方法
微生物分离纯化方法微生物的分离纯化是微生物学研究中的一项重要工作，也是微生物学实验的基础。
微生物的分离纯化方法主要包括：传代分离、菌落接种法、涂布法、稀释法、摇瓶分离法等。
下面将详细介绍这些方法。
1. 传代分离传代分离法是指将微生物涂布于固体培养基上，通过连续传代的方式分离纯化目标微生物。
这种方法适用于真菌和细菌的分离纯化。
首先，选择适当的固体培养基，可以是含有特定培养物质的普通富养基或特定选择性培养基。
然后，将待分离的微生物悬浮液均匀涂布在固体培养基表面。
在培养过程中，单个微生物菌落会逐渐生长并形成纯化菌落。
最后，将纯化菌落挑取至新的培养基上进行进一步培养和鉴定。
2. 菌落接种法菌落接种法是指以微生物营养琼脂平板为基础，在平板表面单独培养微生物，通过菌落形态和特征来分离纯化目标微生物。
首先，将待分离的微生物悬浮液均匀涂布在营养琼脂平板表面。
在培养过程中，微生物会形成单个菌落，每个菌落代表着一个细胞或一组具有相同基因型的细胞。
通过观察和鉴定菌落形态、色素、质地等特征来筛选出目标微生物的纯化菌落。
3. 涂布法涂布法是指将待分离的微生物悬浮液均匀涂布于特定培养基固体表面，通过菌落形态和特征来分离纯化目标微生物。
这种方法适用于分离纯化微生物群落中的特定微生物。
首先，选择适当的富养基或选择性培养基，将待分离的微生物悬浮液均匀涂布于固体培养基表面。
在培养过程中，微生物会形成不同的菌落，其中包含目标微生物。
通过观察和鉴定菌落形态、色素、质地等特征来筛选出目标微生物的纯化菌落。
4. 稀释法稀释法是指将待分离的微生物悬浮液通过连续稀释的方式进行纯化。
首先，将待分离的微生物悬浮液进行适当稀释，然后取一定体积的稀释液均匀涂布在固体培养基表面。
在稀释过程中，微生物会逐渐被稀释至单个细胞的数量，从而使目标微生物单独生长并形成纯化菌落。
5. 摇瓶分离法摇瓶分离法是指将待分离的微生物悬浮液均匀地放置在摇瓶中，并通过不同时间和速度的连续摇动来分离纯化微生物。
微生物分离纯化方法
微生物分离纯化方法
微生物分离纯化方法有很多种，以下介绍几种常用的方法：
1. 均质法：将微生物样品加入适量的缓冲液中，然后将样品经过均质器处理，使细胞壁破碎，释放细胞内物质。
通过在不同的培养基中分离培养，可以得到不同的菌落。
2. 筛选法：将微生物样品铺在含有不同成分的培养基上，根据对某种成分的利用能力，筛选出适应该成分的细菌。
3. 纯化法：通过连续传代培养，将一种菌落的单个菌株剔除出去，再进行单独培养，即可得到纯菌株。
4. 浓缩法：从土壤、水体等微生物来源中提取微生物样品，然后利用离心、滤网、浓缩膜等方法将细菌浓缩到一定程度，再用分离纯化方法进行分离。
5. 选择性富集法：根据特定的培养基条件，利用微生物自身的代谢特征在培养基中乘以菌落数量，然后利用纯化方法进行分离。
以上几种方法均可用于微生物的分离纯化，具体方法的选择应根据实际情况和实验目的来进行。
微生物菌种的分离和纯化方法
微生物菌种的分离和纯化方法1.空气平板法空气平板法是一种常用的微生物菌种分离方法。
将待分离的微生物样品进行适当的稀释并均匀涂布在含有经过固化的琼脂平板上，然后放置在适宜的温度下进行培养。
微生物在平板上呈现为单个菌落，每个菌落都代表一个来自单一细胞的微生物。
通过挑取单个菌落，将其再次传代培养，最终可以得到纯净的菌种。
2.稀释平板法稀释平板法也是一种常用的微生物菌种分离方法，在空气平板法的基础上进行了改进。
先将待分离的微生物样品按一定比例稀释，然后将稀释后的样品均匀涂布在琼脂平板上。
由于稀释后的样品中菌落之间的距离更远，因此每个菌落代表的是来自更少数的微生物细胞，得到纯净的菌种的几率更高。
3.前体菌种法前体菌种法是一种通过选择性培养基将目标微生物分离出来的方法。
选择性培养基可以通过添加特定的抗生素、酸碱度调节和特定营养物等来抑制其他微生物的生长而促进目标微生物的生长。
将待分离的微生物样品进行适当的稀释后接种在选择性培养基上，利用培养基的选择性促使目标微生物生长并抑制其他微生物的生长，最终得到纯净的菌种。
4.形态学分离法形态学分离法是一种根据微生物在形态和结构上的差异进行分离的方法。
先选择合适的培养基和培养条件，将待分离的微生物样品进行培养。
在培养过程中，观察并挑选出形态和结构上有明显差异的微生物，然后将其进行单菌维持培养，并通过形态特征进一步分离和纯化菌种。
5.生理生化特性分离法生理生化特性分离法是一种根据不同微生物菌株在代谢和物质转化方面的差异进行分离的方法。
根据微生物菌株的生理生化特性，如生长速度、氨基酸利用能力、产酸产气等，将微生物菌株进行初步分离，然后通过进一步的生化鉴定和特性测试，最终得到纯净的菌种。
总结起来，微生物菌种的分离和纯化方法有很多种类，选择合适的方法依赖于待分离的微生物特性和研究目的。
这些方法在微生物学的研究中起到了关键作用，为了获得纯净的微生物菌种提供了有效的手段。
微生物分离的方法
微生物分离的方法
微生物分离的主要方法包括传统培养法、筛选培养法和分离富集法。
1. 传统培养法：将微生物样品分散在富含营养物的培养基上，将其培养在适宜的温度和pH条件下。
通过不同培养基的选择、不同的温度、pH等条件的调节，可以促进特定微生物的生长和繁殖，从而分离出目标微生物。
2. 筛选培养法：筛选培养法是根据目标微生物的特殊生理特性和营养需求，设计特定的培养条件，以促进目标微生物的生长和繁殖。
例如，通过特定的培养基、温度、pH、气氛条件等，选择性地分离出某些特定类型的微生物，如厌氧菌、耐高盐菌等。
3. 分离富集法：分离富集法是根据微生物在自然环境中的特定生理特性和生境适应性，通过特定的分离富集技术，富集出目标微生物。
常用的富集方法包括传统的液体培养富集法、固体培养富集法和连续扩增培养富集法等。
这些方法通过提供适宜的环境条件，使目标微生物在其他微生物中相对优势，从而实现分离。
以上是常用的微生物分离方法，不同的方法适用于不同的微生物分离目的和环境条件。
在实际操作中，还可以根据具体情况，结合不同的方法进行综合分离。
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微生物的接种、分离纯化与培养方法一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。
１、接种工具和方法在实验室或工厂实践中，用得最多的接种工具是接种环、接种针。
由于接种要求或方法的不同，接种针的针尖部常做成不同的形状，有刀形、耙形等之分。
有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。
在固体培养基表面要将菌液均匀涂布时，需要用到涂布棒。
（图３－３）图３－３接种和分离工具1．接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀常用的接种方法有以下几种：１）划线接种这是最常用的接种方法。
即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。
常用的接种工具有接种环，接种针等。
在斜面接种和平板划线中就常用此法。
２）三点接种在研究霉菌形态时常用此法。
此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。
除三点外，也有一点或多点进行接种的。
３）穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。
做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。
用的培养基一般是半固体培养基。
它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。
４）浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。
待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。
５）涂布接种与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。
６）液体接种从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。
７）注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。
８）活体接种活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。
所用的活体可以是整个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴肾等；也可以是发育的鸡胚。
接种的方式是注射，也可以是拌料喂养。
２、无菌操作培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具（如接种针和吸管等）在无菌条件下接种含菌材料（如样品、菌苔或菌悬液等）于培养基上，这个过程叫做无菌接种操作。
在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。
实验台面不论是什么材料，一律要求光滑、水平。
光滑是便于用消毒剂擦洗；水平是倒琼脂培养基时利于培养皿内平板的厚度保持一致。
在实验台上方，空气流动应缓慢，杂菌应尽量减少，其周围杂菌也应越少越好。
为此，必须清扫室内，关闭实验室的门窗，并用消毒剂进行空气消毒处理，尽可能地减少杂菌的数量。
空气中的杂菌在气流小的情况下，随着灰尘落下，所以接种时，打开培养皿的时间应尽量短。
用于接种的器具必须经干热或火焰等灭菌。
接种环的火焰灭菌方法：通常接种环在火焰上充分烧红（接种柄，一边转动一边慢慢地来回通过火焰三次），冷却，先接触一下培养基，待接种环冷却到室温后，方可用它来挑取含菌材料或菌体，迅速地接种到新的培养基上。
（图３－４）然后，将接种环从柄部至环端逐渐通过火焰灭菌，复原。
不要直接烧环，以免残留在接种环上的菌体爆溅而污染空间。
平板接种时，通常把平板的面倾斜，把培养皿的盖打开一小部分进行接种。
在向培养皿内倒培养基或接种时，试管口或瓶壁外面不要接触底皿边，试管或瓶口应倾斜一下在火焰上通过。
图３－４斜面接种时的无菌操作(1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞二、分离纯化含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物（Mixed culture）。
如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞，那么这个菌落称为纯培养（Pure culture）。
在进行菌种鉴定时，所用的微生物一般均要求为纯的培养物。
得到纯培养的过程称为分离纯化，方法有许多种。
１、倾注平板法首先把微生物悬液通过一系列稀释，取一定量的稀释液与熔化好的保持在40~50°左右的营养琼脂培养基充分混合，然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中，待凝固之后，把这平板倒置在恒箱中培养。
单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落，取单个菌落制成悬液，重复上述步骤数次，便可得到纯培养物。
（图３－５，a）图３－５倾注平板法（a）涂布平板法（b）图解1.菌悬液2.熔化的培养基3.培养物4.无菌水２、涂布平板法首先把微生物悬液通过适当的稀释，取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上，然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液均匀地涂布在培养基表面上，经恒温培养便可以得到单个菌落。
（图３－５，b）３、平板划线法最简单的分离微生物的方法是平板划线法。
用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。
划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。
（图３－６）当接种环在培养基表面上往后移动时，接种环上的菌液逐渐稀释，最后在所划的线上分散着单个细胞，经培养，每一个细胞长成一个菌落。
（图３－７）４、富集培养法富集培养法的方法和原理非常简单。
我们可以创造一些条件只让所需的微生物生长，在这些条件下，所需要的微生物能有效地与其他微生物进行竞争，在生长能力方面远远超过其他微生物。
所创造的条件包括选择最适的碳源、能源、温度、光、pH、渗透压和氢受体等。
在相同的培养基和培养条件下，经过多次重复移种，最后富集的菌株很容易在固体培养基上长出单菌落。
如果要分离一些专性寄生菌，就必须把样品接种到相应敏感宿主细胞群体中，使其大量生长。
通过多次重复移种便可以得到纯的寄生菌。
图３－６平板划线分离法1.斜线法2.曲线法3.方格法4.放射法5.四格法５、厌氧法在实验室中，为了分离某些厌氧菌，可以利用装有原培养基的试管作为培养容器，把这支试管放在沸水0浴中加热数分钟，以便逐出培养基中的溶解氧。
然后快速冷却，并进行接种。
接种后，加入无菌的石蜡于培养基表面，使培养基与空气隔绝。
另一种方法是，在接种后，利用N2或CO2取代培养基中的气体，然后在火焰上把试管口密封。
有时为了更有效地分离某些厌氧菌，可以把所分离的样品接种于培养基上，然后再把培养皿放在完全密封的厌氧培养装置中。
三、培养微生物的生长，除了受本身的遗传特性决定外，还受到许多外界因素的影响，如营养物浓度、温度、水分、氧气、ＰＨ等。
微生物的种类不同，培养的方式和条件也不尽相同。
１、影响微生物生长的因素微生物的生长，除了受本身的遗传特性决定外，还受到外界许多因素的影响。
影响微生物生长的因素很多，简要介绍如下。
1)营养物浓度细菌的生长率与营养物的浓度有关:μ=μmax*C/(K+C)营养物浓度与生长率的关系曲线是典型的双曲线。
K值是细菌生长的很基本的特性常数。
它的数值很小，表明细菌所需要的营养浓度非常之低，所以在自然界中，它们到处生长。
然而营养太低时，细菌生长就会遇到困难，甚至还会死亡。
这是因为除了生长需要能量以外，细菌还需要能量来维持它的生存。
这种能量称为维持能。
另一方面，随着营养物浓度的增加，生长率愈接近最大值。
２）温度在一定的温度范围内，每种微生物都有自已的生长温度三基点：最低生长温度、最适生长温度和最高生长温度。
在生长温度三基点内，微生物都能生长，但生长速率不一样。
微生物只有处于最适生长温度时，生长速度才最快，代时最短。
超过最低生长温度，微生物不会生长，温度太低，甚至会死亡。
超过最高生长温度，微生物也要停止生长，温度过高。
也会死亡。
一般情况下，每种微生物的生长温度三基点是恒定的。
但也常受其它环境条件的影响而发生变化。
根据微生物最适生长温度的不同，可将它们分为三个类型：a.嗜冷微生物：其是适生长温度多数在-10℃－20℃之间b.中温微生物：其最适生长温度一般在20℃－45℃之间c.嗜热微生物：生长温度在45℃以上。
３）水分水分是微生物进行生长的必要条件。
芽孢、孢子萌发，首先需要水分。
微生物是不能脱离水而生存的。
但是微生物只能在水溶液中生长，而不能生活在纯水中。
各种微生物在不能生长发育的水分活性范围内，均具有狭小的适当的水分活性区域。
４）氧气按照微生物对氧气的需要情况，可将它们分为以下五个类型。
a.需氧微生物这类微生物需要氧气供呼吸之用。
没有氧气，便不能生长，但是高浓度的氧气对需氧微生物也是有毒的。
很多需氧微生物不能在氧气浓度大于大气中氧气浓度的条件下生长。
绝大多数微生物都属于这个类型。
b.兼性需氧微生物这类微生物在有氧气存在或无氧气存在情况下，都能生长，只不过所进行的代谢途径不同罢了。
在无氧气存在的条件下，它进行发酵作用，例如酵母菌的无氧乙醇发酵。
c.微量需氧微生物这类菌是需要氧气的，但只在0.2大气压下生长最好。
这可能是由一它们含有在强氧化条件下失活的酶，因而只有在低压下作用。
d.耐氧微生物这类微生物在生长过程中，不需要氧气，但也不怕氧气存在，不会被氧气所杀死。
c.厌氧微生物这类微生物在生长过程中，不需要分子氧。
分子氧存在对它们生长产生毒害，不是被抑制，就是被杀死。
２、培养方法1）根据培养时是否需要氧气，可分为好氧培养和厌氧培养两大类。
好氧培养：也称“好气培养”。
就是说这种微生物在培养时，需要有氧气加入，否则就不能生长良好。
在实验室中，斜面培养是通过棉花塞从外界获得无菌的空气。
三角烧瓶液体培养多数是通过摇床振荡，使外界的空气源源不断地进入瓶中。
厌氧培养：也称“厌气培养”。
这类微生物在培养时，不需要氧气参加。
在厌氧微生物的培养过程中，最重要的一点就是要除去培养基中的氧气。
一般可采用下列几种方法：a.降低培养基中的氧化还原电位：常将还原剂如谷胱甘肽、硫基醋酸盐等，加入到培养基中，便可达到目的。
有的将一些动物的死的或活的组织如牛心、羊脑加入到培养基中，也可适合厌氧菌的生长。
b.化合去氧：这也有很多方法，主要有：用焦性没食子酸吸收氧气；用磷吸收氧气；用好氧菌与厌氧混合培养吸收氧气；用植物组织如发芽的种子吸收氧气；用产生氢气与氧化合的方法除氧。
c.隔绝阻氧：深层液体培养；用石蜡油封存；半固体穿刺培养。
d.替代驱氧用二氧气碳驱代氧气；用氮气驱代氧气；用真空驱代氧气；用氢气驱代氧气；用混和气体驱代氧气。
２）根据培养基的物理状态，可分为固体培养和液体培养两大类。
固质培养：是将菌种接至疏松而富有营养的固体培养基中，在合适的条件下进行微生物培养的方法。
液体培养：在实验中，通过液体培养可以使微生物迅速繁殖，获得大量的培养物，在一定条件下，还是微生物选择增菌的有效方法。