S6 Kinase Substrate Peptide 32_测定磷酸化核糖体蛋白S6的激酶活性__Apexbio
糖尿病性心肌病的发病机制及治疗方法研究进展
糖尿病性心肌病的发病机制及治疗方法研究进展李婉娇;李强【摘要】心血管疾病是2型糖尿病的主要并发症,约占2型糖尿病患者死亡人数的2/3.血糖异常、血脂异常、胰岛素抵抗、慢性低度炎症、氧化应激、内皮功能障碍、血管钙化和高凝状态等多种病理生理过程可加快2型糖尿病患者糖尿病心脏病的进展.糖尿病性心肌病是糖尿病心脏病中较为常见的一种,可导致心功能异常并最终进展为心力衰竭、心律失常,甚至猝死.本文综述了糖尿病性心肌病的发病机制,以及当前及未来潜在的治疗方法.【期刊名称】《中华老年多器官疾病杂志》【年(卷),期】2019(018)007【总页数】4页(P536-539)【关键词】糖尿病性心肌病;抗高血糖药物;心脏重塑;发病机制;治疗【作者】李婉娇;李强【作者单位】哈尔滨医科大学附属第二医院内分泌科,哈尔滨150086;哈尔滨医科大学附属第二医院内分泌科,哈尔滨150086【正文语种】中文【中图分类】R541糖尿病(diabetes mellitus，DM)大血管病变是继发于DM动脉粥样硬化的心血管疾病。
糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy，DCM)是指DM患者在没有其他心脏危险因素(如冠心病、高血压和显著的瓣膜病)的情况下存在异常的心脏结构和表现。
临床上，DCM的特征在于舒张功能障碍，而射血分数保持不变。
Tate 等[1]认为DCM结构改变的标志是间质和周围血管纤维化以及左心室(left ventricle，)肥大。
目前认为DCM的病理生理机制包括氧化应激、炎症、代谢以及能量产生改变等[2]，但其潜在的致病机制仍不清楚。
1 DCM的临床特征DCM的特征在于对DM患者心脏舒张功能的早期损害，并伴随心肌细胞肥大、心肌纤维化和心肌细胞凋亡。
LV肥厚是DCM的主要形态学改变，超声心动图可示LV后壁和隔膜壁厚度增加。
代谢功能障碍、高胰岛素血症、氧化应激和炎症是DM患者中LV质量增加的主要原因。
(高考生物)生物英语证书考试(PEC)生物化学词汇
（生物科技行业）生物英语证书考试(PEC)生物化学词汇生物英语证书考试(PEC)-生物化学常用词汇nucleoside核苷Okazakifragment冈崎片段oncogene癌基因，原癌基因onecarbonunit一碳单位operator操纵基因operon操纵子oroticacid乳清酸ossification成骨作用oxaloaceticacid草酰乙酸oxidases氧化酶类oxidativephosphorylation氧化磷酸化oxidoreductase氧化还原酶palindrome回文结构pancreaticlipase胰脂肪酶pantothenicacid遍多酸pentose戊糖pentosephosphatepathway磷酸戊糖途径pepsin胃蛋白酶pepsinogen胃蛋白酶原peptide肽peptidebond肽键peptidylsite肽基位或P位peroxidase过氧化物酶phenylalanine苯丙氨酸phosphatidicacid磷脂酸phosphogluconate磷酸葡萄糖酸phospholipase磷脂酶plasmid质粒polycistron多作用子polypeptide多肽porphyrin卟啉precipitation沉淀preproalbumin前清蛋白原primarystructure一级结构primase引发酶primer引物glucogenicaminoacid生糖氨基酸glucokinase葡萄糖激酶gluconeogenesis糖(原)异生作用glutamicacid谷氨酸glutaminase谷氨酰胺酶glutamine谷氨酰胺glutathione谷胱甘肽glycerol甘油glycine甘氨酸glycogen糖原glycogenphosphorylase糖原磷酸化酶glycogensynthase糖原合成酶glycolysis糖酵解guanosine鸟苷helicase解链酶(解旋酶)heme血红素heteroduplex杂化双链hexokinase己糖激酶histamine组胺histidine组氨酸housekeepinggene管家基因hybridization杂交hydrogenbond氢键hydrolase水解酶类hydroperoxidases氢过氧化酶类hydrophobicbond(hydrophobicinteraction)疏水键hydroxyapatite羟磷灰石hydroxymethylglutarylCoAcleavageenzymeHMGCoA裂解酶hydroxymethylglutarylCoAsynthetaseHMGCoA合酶Hydroxyproline羟脯氨酸acceptorsite受位acetone丙酮activator激活蛋白，激活剂，活化物adenine(A)腺嘌呤adenosine腺苷aerobicdehydrogenase需氧脱氢酶alanine丙氨酸albumin白蛋白，清蛋白allopurinol别嘌呤醇allostericeffect别构(位)效应allostericenzyme变构酶，别位酶allostericregulation别构调节amine胺aminoacylsiteA位，氨酰基位anticodon反密码子arginine精氨酸ascorbicacid抗坏血酸(维生素C) asparagine天冬酰胺asparticacid天冬氨酸asymmetrictranscription不对称转录attenuator衰减子base碱基basepairing碱基配对bilepigment胆色素biotin生物素biotransformation生物转化calcitriol１，２５二羟胆骨化醇（钙三醇）calciumdependentproteinkinaseCa依赖性蛋白激酶，蛋白激酶C(C激酶) Calmodulincarbohydrate糖carnitine肉毒碱catalase触酶，过氧化氢酶cephalin脑磷脂denovosynthesis从头合成degradation降解denaturation变性deoxycholicacid脱氧胆酸deoxyribonucleotide脱氧核糖核苷酸dialysis透析dihydroxyacetonephosphate磷酸二羟丙酮disulfidebond二硫键DNApolymeraseDNA聚合酶domain域,结构域,功能区donorsite给位doublehelix双螺旋effector效应器,效应物elongation延长endopeptidase内肽酶enhancer增强子enolphosphopyruvate磷酸烯醇式丙酮酸enzyme酶essentialaminoacid必需氨基酸essentialfattyacid必需脂肪酸exon外显子exopeptidase外肽酶fat脂肪feedbackinhibition反馈抑制作用feritin铁蛋白ferrochelatase亚铁螯合酶folicacid叶酸freefattyacid游离脂肪酸freeradicals自由基fructosediphosphatase果糖二磷酸酶genecloning基因克隆geneexpression基因表达genelibrary基因文库genetransfer基因导入,转基因geneticcode遗传密码geneticengineering基因工程geneticrecombination基因重组genome染色体基因，基因组globin珠蛋白hypocalcemia低钙血症induction诱导initiatorcodon起动信号,起始密码子intermediarymetabolism中间代谢ionicbond离子键isocitratedehydrogenase异柠檬酸脱氢酶isoleucine异亮氨酸isomerase异构酶类isozyme同工酶jaundice黄疸ketogenicaminoacid生酮氨基酸keyenzyme关键酶kinase激酶lactate乳酸盐lecithin卵磷脂leucine亮氨酸ligase连接酶linoleate亚油酸linolenate亚麻酸lipoicacid硫辛酸lipoid类脂lipoprotein脂蛋白lithocholicacid石胆酸lyases裂合酶类malate苹果酸malateaspartateshuttle苹果酸天冬氨酸穿梭metabolicregulation代谢调节mitogenactivatedproteinkinase分裂原活化蛋白激酶mixedfunctionoxidase混合功能氧化酶molecularcloning分子克隆moleculardisease分子病monooxygenase单加氧酶monooxygenasesystem单加氧酶体系nicotinamide烟酰胺，尼克酰胺nitrogenbalance氮平衡pyruvatecarboxylase丙酮酸羧化酶pyruvatedehydrogenasecomplex丙酮酸脱氢酶复合体pyruvatekinase丙酮酸激酶quaternarystructure四级结构recombinantDNA重组DNA geneticengineering基因工程regulatorygene调节基因renaturation复性repair修复replication复制repression阻遏residue残基respiratorychain呼吸链restrictionendonuclease限制性内切核酸酶retinol视黄醇(维生素A) reversetranscriptase逆转录酶reversetranscription逆转录作用saltingout盐析salvagepathway补救(重新利用)途径screening筛选secondarystructure二级结构semiconservativereplication半保留复制sensestrand有意义链sequence序列serine丝氨酸signalrecognitionparticle信号肽识别颗粒silencer抑制子simpleprotein单纯蛋白质specificity特异性splicing剪接作用squalene鲨烯stagespecificity阶段特异性stercobilinogen粪胆素原stress应激structuralgene结构基因substrate作用物substratelevelphosphorylation作用物(底物)水平磷酸化subunit亚单位，亚基succinatedehydrogenase琥珀酸脱氢酶supersecondarystructure超二级结构Taurine牛磺酸telomerase端粒酶telomere端区(端粒)templatestrand模板链termination终止terminator终止子terminatorcodon终止信号tertiarystructure三级结构thiamine硫胺素(维生素B1) threonine苏氨酸thymidine胸苷，胸腺嘧啶核苷thymine(T)胸腺嘧啶tocopherol生育酚proalbumin清蛋白原processing加工proenzyme酶原proline脯氨酸promoter启动基因(启动子)，催化剂prostheticgroup辅基protease蛋白酶pyridoxal吡哆醛pyridoxamine吡哆胺。
生物化学重要术语
供学生使用的《生物化学》重要术语中英语对照碳水化合物〔carbohydrate〕单糖〔monosaccharide〕寡糖〔oligosaccharide〕多糖〔polysaccharide〕醛糖〔aldose〕酮糖〔ketose〕蔗糖〔sucrose〕乳糖〔lactose〕麦芽糖〔maltose〕纤维二糖〔cellobiose〕多糖〔polysaccharides〕淀粉〔starch〕直链淀粉〔amylose〕支链淀粉〔amylopectin〕纤维素〔cellulose〕半纤维素〔hemicellulose〕糖原〔glycogen〕几丁质〔chitin〕糖胺聚糖〔glycosaminolgycan〕脂类〔lipids〕脂肪酸〔fatty acid〕甘油三酯〔glycerol triester〕亲水脂类〔amphipathic lipids〕蜡〔wax〕磷酸甘油脂〔phosphoglyceride〕甘油磷脂〔glycerophospholipid〕磷脂酰胆碱〔phosphatidylcholine〕磷脂酰乙醇胺〔phosphatidylethanolamine〕磷脂酰丝氨酸〔phoshatidylserine〕磷脂酰肌醇〔phosphatidylinositol, PI〕肌醇三磷酸〔inositol-1,4,5-trisphosphate，IP3〕二脂酰甘油〔diacylglycerol，DAG〕磷脂酸〔phosphatidic acid，PA〕磷脂酶A2〔phospholipase A2，PLA2〕磷脂酶C〔phospholipase C，PLC〕磷脂酶D〔phospholipase D，PLD〕溶血磷脂(1ysophospholipid)鞘磷脂〔sphingomyelin〕神经酰胺〔ceramide〕类固醇〔steroids〕萜类〔terpenes〕胆固醇〔cholesterol〕麦角固醇〔ergosterol〕蛋白质 protein简单蛋白质 simple protein氨基酸 amino acid结合蛋白质 conjugated protein多肽 polypeptide肽 peptide肽键 peptide bond介电常数 dielectric constant德华力 van der waals force层析法 chromatography吸附层析法 adsorption chromatography分配系数 partition or distribution confficient活性肽 active peptide二硫键 disulfide bond兼性离子 zwitterion一级结构 primary structure疏水效应 hydrophobic effectSDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE毛细管电泳〔capillary eletrophoresis, CE〕离子交换层析 ion exchange chromatography 同源蛋白 homologous protein构象 conformation构象角 conformatiomal angle糖脂〔glycolipid〕糖基甘油酯〔glycosylglyceride〕鞘糖脂〔glycosphingolipid〕脑苷脂〔cerebroside〕N-乙酰神经氨酸〔N-acetylneuraminic acid〕神经节苷脂〔ganglioside〕硫酸脑苷脂〔cerebroside sulfate〕糖蛋白〔glycoproteins〕蛋白聚糖〔proteoglycans〕生物膜〔biomembrane〕膜脂〔membrane lipids〕膜蛋白〔membrane proteins〕脂质双层分子〔lipid bilayers〕外周蛋白〔peripheral protein〕外源性〔extrinsic protein〕在蛋白〔integral protein〕源性蛋白〔intrinsic protein〕跨膜蛋白〔transmembrane proteins〕流动镶嵌模型〔fluid mosaic model〕简单扩散〔simple diffusion〕协助扩散〔facilitated diffusion〕被动运输〔passive transport〕主动运输〔active transport〕介导性运输〔mediated transport〕非介导性运输〔nonmediated transport〕载体蛋白〔carrier protein〕通道蛋白〔channel protein〕离子通道〔ionic channel〕离子载体〔ionophore〕吞作用〔endocytosis〕胞饮作用〞〔pinocytosis〕外排作用〔exocytosis〕基团转移〔group translocation〕脂蛋白〔lipoprotein〕染色体〔chromosome〕染色质〔chromatin〕组蛋白〔histone〕核小体〔nucleosome〕病毒〔virus〕噬菌体〔bacteriophage或简称phage〕变性 denaturation沉降系数〔S〕Svedberg(S)抗体 antibody亲和层析法 affinity chromatography盐溶 salting in盐析 salting out二级结构 secondary structure三级结构 tertiary structure -螺旋-helix超二级结构 super-secondaery structure 结构域 structure domain氢键 hydrogen bend疏水相互作用 hydrophoblic interaction 肌红蛋白 myoglobin寡聚蛋白质 oligomeric protein无规那么卷曲 randon coil复性 renaturation镰刀状细胞贫血病 sickle-cell anermia酶〔enzyme〕酶的专一性〔specificity〕单体酶〔monomeric enzyme〕寡聚酶〔oligomeric enzyme〕多酶复合体系〔multienzyme system〕酶活性中心〔active center of enzyme〕催化基团〔catalytic site〕酶原〔zymogen or proenzyme〕诱导契合〔induced-fit theory〕抗体酶〔abzyme〕酸碱催化〔acid-base catalysis〕共价催化(covalent catalysis)激活剂〔activator〕抑制剂〔inhibitor〕可逆抑制〔reversible inhibition〕竞争性抑制作用〔competitive inhibition〕非竞争性抑制作用〔noncompetitive inhibition〕调节酶〔modulator〕别构酶〔allosteric enzyme〕同配位效应〔isosteric effect〕变构效应〔allosteric effect〕变构激活〔allosteric activation 〕正协同效应〔positive cooperative effect〕负协同效应〔negative cooperative effect〕效应物〔effector〕维生素〔vitamin〕维生素缺少症〔avitaminosis〕调节中心〔regulatory center〕催化亚基〔catalytic subunit〕调节亚基〔regulatory subunit〕诱导酶〔induced enzyme〕结构酶〔structural enzyme〕核酶〔ribozyme〕辅酶〔coenzyme〕比活力〔specific activity〕脱氧核酶〔deoxyribozyme〕酶工程〔enzyme engineering〕酶纯度〔purity of enzyme〕酶活力〔enzyme activity〕-淀粉酶〔-amylase〕-淀粉酶〔-amylase〕脱支酶〔debranching enzyme〕淀粉的磷酸化酶〔amylophosphorylase〕糖酵解〔glycolysis〕三羧酸循环〔tricarboxylic acid cycle，TCA〕磷酸戊糖途径〔pentose phosphatepathway，PPP〕生物氧化〔biological oxidation〕烟酰胺脱氢酶类〔nicotinamide dehydrogenase〕黄素脱氢酶类〔flavin dehydrogenase〕铁硫蛋白类〔iron-sulfur protein〕泛醌〔ubiquinone〕细胞色素类〔cytochromes〕细胞色素氧化酶〔cytochromeoxidase〕鱼藤酮〔rotenone〕安密妥〔amytal〕杀粉蝶菌素〔piericidine〕抗霉素A〔antimycin A〕底物水平磷酸化〔substrate-level phosphorylation〕氧化磷酸化〔oxidative phosphorylation〕化学渗透假说〔chemiosmotic coupling hypothesis〕化学偶联假说〔chemical coupling hypothesis〕构象偶联假说〔conformational coupling hypothesis〕甘油-磷酸穿梭途径〔glycerophosphate shuttle〕苹果酸-天冬氨酸穿梭途径〔malate- aspartate shuttle〕异柠檬酸穿梭途径〔isocitrate shuttle〕能荷〔energy charge〕肉碱〔肉毒碱，carnitine〕乙醛酸体〔乙醛酸循环体，glyoxysome〕乙醛酸循环〔glyoxylate cycle〕酮体〔ketone bodies〕饱和脂肪酸的从头合成〔de novo synthesis〕谷氨酸脱氢酶〔glutamate dehydrogenase, GDH〕转氨基作用〔transamination〕转氨酶〔transaminase〕磷酸吡哆醛〔pyridoxal phosphate，PLP〕谷丙转氨酶〔glutamic pyruvic transaminase，GPT或 alanine transaminase，ALT〕谷草转氨酶〔glutamic oxaloacetic transaminase，GOT或 aspartate transaminase，AST〕γ-谷氨酰-半胱氨酸合成酶〔γ-glutamyl systeine synthetase，γ-ECS〕谷胱甘肽〔glutathione〕谷胱甘肽合成酶〔glutathione synthetase〕生物固氮〔biological nitrogen fixation〕固氮酶〔nitrogenase〕自身固氮微生物〔diazatrophs〕共生固氮微生物〔symbiotic microorganism〕硝酸复原酶〔nitrate reductase，NR〕亚硝酸复原酶〔nitrite reductase，NiR〕谷氨酸合酶〔glutamate: oxo-glutarate aminotransferase，GOGAT〕谷氨酰胺合成酶〔glutamine synthetase，GS〕腺苷-5'-磷酸硫酸酐〔adenosine-5'-phosphosulfate，APS〕3'-磷酸腺酐-5'-磷酰硫酸〔3'-phosphoadenosine-5'-phosphosulfate，PAPS〕5-磷酸核糖焦磷酸〔phosphoribosyl pyrophosphaet，PRPP〕天冬氨酸转氨甲酰酶〔aspartate trsnscarbamoy lase〕腺嘌呤磷酸核糖转移酶〔adenine phosphoribosyl fransferase，APRT〕黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶〔hypoxanthineguanine phosphoribosyl transferase，HGPRT〕谷胱甘肽复原酶〔glutathione reductase，GR〕谷氧还蛋白〔glutaredoxin〕谷氧还蛋白复原酶〔glutaredoxin reductase〕胸腺嘧啶核苷酸合酶〔thymidylate synthase〕DNA复制〔DNA replication〕中心法那么〔central dogma〕冈崎片段〔Okazaki fragement〕前导链〔leading strand〕滞后链〔lagging strand〕引物〔primer〕复制叉〔replication fork〕半保存式复制〔semiconservative replication〕模板〔template〕反转录〔reverse transcription〕转换〔transition〕颠换〔transversion〕错配修复〔mismatch repair〕核苷酸切除修复〔nucleotide excision repair〕碱基切除修复〔base excision repair〕同源重组〔homologous recombination〕特异性重组〔site-specific recombination〕转座子〔transposon〕启动子〔promoter〕限制性切酶〔restriction endonuclease 〕修饰〔modification〕单链结合蛋白〔single stranded binding proteins,SSB〕遗传密码〔genetic code〕读码框架〔reading frame〕移码突变〔frame-shift mutation〕简并性〔degeneracy〕同义密码子〔synonymous codon〕起始密码子〔initiatlon codon〕终止密码子〔termination codon〕摆动假说〔wobble hypothesis)同功受体tRNA〔isoaccepting tRNA〕反密码子〔anticodon〕多核糖体〔polyribisome〕氨酰-tRNA合成酶〔aminoacyl-tRNA synthetase〕Shine –Dalgarno序列〔Shine –Dalgarno sequence〕起始因子〔initiation factor〕延伸因子〔elongation factor〕释放因子〔release factor〕转肽〔transpeptidation〕移位〔translocation〕分子伴侣〔molecular chapeones〕共翻译转移〔co-translational translocation〕翻译后转移〔post-translational translocation〕信号肽〔signal sequence〕信号识别颗粒〔signal recognition particle SPR〕代〔metabolism〕代调节〔metabolic regulation〕共价修饰〔covalent modification〕反应抑制〔feedback inhibition〕操纵子模型〔operon model〕衰减作用〔attenuation〕级联放大作用〔amplification cascade〕变〔别〕构效应〔allosteric effect〕诱导和阻遏〔induction and repression〕蛋白激酶 C 〔protein kinase C，PKC〕第二信使〔second messenger〕受体〔receptor〕G 蛋白〔guanosine triphosphate-bindingprotein〕信号转导〔signal transduction〕钙调素〔calmodulin，CaM〕磷酯酶〔phospholipase C，PLC〕。
细胞自噬与心肌肥厚
细胞自噬与心肌肥厚宋洁;李乐【期刊名称】《中国医药生物技术》【年(卷),期】2017(012)005【总页数】4页(P441-444)【作者】宋洁;李乐【作者单位】310014杭州,浙江工业大学药学院;310014杭州,浙江工业大学药学院【正文语种】中文自噬是真核细胞内特有的一种进化上高度保守的代谢过程，通过降解功能异常或错误折叠的蛋白质以及受损或老化的细胞器来维持细胞能量的提供、物质的循环以及细胞的自我更新。
研究发现自噬与多种心血管疾病关系密切，而在心肌肥厚中也发现有自噬的发生。
Nakai 等[1]观察到小鼠敲除Atg5 基因后抑制自噬，导致心肌肥厚，并且有多项研究表明，自噬减弱可促进心脏肥厚反应，但两者关系的具体机制尚未阐明。
本文对近期关于自噬与心肌肥厚的关系研究作一综述。
目前自噬可以分为巨自噬（macroautophagy）、微自噬（microautophagy）和分子伴侣介导的自噬（chaperone-mediated autophagy），其中巨自噬研究最为成熟。
巨自噬是底物蛋白被一种双层膜结构包裹形成自噬小泡，自噬小泡的外膜与溶酶体膜或者液泡膜融合，释放包裹底物蛋白的泡状结构到溶酶体或液泡中，并最终在一系列水解酶的作用下将其降解的过程，用以维持内环境能量的平衡以及高分子的合成。
在微自噬中，底物蛋白通过溶酶体膜或者液泡内膜的内陷进行包裹并降解。
分子伴侣介导的自噬特点是选择性地降解细胞内蛋白质的氨基酸序列KFERQ。
分子伴侣鉴别出该序列后溶酶体相关性膜蛋白（lysosome-associated membrane protein，LAMP）2A促进蛋白将其运输到溶酶体中进行降解。
目前微自噬和分子伴侣介导的自噬在心血管疾病中的意义并未具体阐明[2]。
细胞自噬过程中有多种相关蛋白参与，如促凋亡蛋白 B 淋巴细胞瘤 2 家族的成员Bcl2/腺病毒 E1B 相互作用蛋白 3（BNIP3）、酵母自噬基因 Atg6 的同系物Beclin-1、腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine 5'-monophosphate activated protein kinase，AMPK）及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）、叉头蛋白 O（forkhead box O，FOXO）、溶酶体相关膜蛋白-2（LAMP-2）等[3]。
PKCξ激活机制及其功能
PKCξ激活机制及其功能PKCg激活机制及其功能术许顺江丛斌(河北医科大学病理生理学教研室,石家庄050017)摘要蛋白激酶C∈(proteinkinaseC∈,PKC∈)是非典型PKC家族成员,广泛参与细胞功能的调节.作为信息分子,PKC'在多种细胞外刺激因素诱导的胞内信号转导通路中发挥重要作用,如丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-avtivatedproteinkinase,MAPK)通路,核转录因子.KB(nucleartranscriptionalfactor-KB,NF-KB)的活化和核糖体s6蛋白激酶通路等.许多研究表明,PKC∈的激活机制具有组织细胞特异性.本文综述了PKC∈的激活机制及其参与的细胞内信号转导通路,以更好地阐明PKC'的功能.关键词蛋白激酶C∈;三磷酸肌醇;磷酸肌醇依赖性蛋白激酶中图分类号R34;R392.12 ActivationMechanismsofProteinKinaseCandItsCellularFunctionsXUShun.Jiang,CON GBin(DepartmentofPathophysiology,HebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050017) AbstractThe∈isotypeofproteinkinaseC(PKC ∈)isamemberoftheatypicalPKCsubfamilyandhas beenwidelyimplicatedintheregulationofcellularfunctions.PKC',asanimportantmessage molecular,isinvolvedinmanyintracellularsignalingpathways,suchasthemitogen-avtivatedproteinki nase(MAPK)cascade,transcriptionalfactorNF-KBactivation,ribosomals6-proteinkinasesign alingandSOon.IncreasingevidencefromstudiessupporttheconceptthattheactivationmechanismsofP KC∈aretis-sue/cellspecific.TheunderstandingofthemechanismsunderlyingPKC∈-mediatedcontrolofintracellular signalingisbeginningtoprovideimportantinsightsintotherolesofPKC∈invariouscells. KeywordsPKC(;PIP3;PDK蛋白激酶C(ProteinkinaseC,PKC)广泛分布于哺乳动物的器官,组织和细胞中,对细胞的代谢,生长,增殖和分化起着重要的调节作用.PKC(最早是作为PKC唯一的同工酶被发现的,因其与人的PKCL和鼠的PKCk结构相似,它们共同组成非典型PKC(atypicalPKC,aPKC),aPKC与典型PKC(con-ventionalPKC,cPKC,包括:,pI,p1I和亚型)和新型PKC(novelPKC,nPKC,包括8,￡,,0亚型)组成PKC家族;PKC家族又与蛋白激酶A(cAMP-dependentproteinkinase,PKA)和蛋白激酶G(cGMP-dependentproteinkinase,PKG)共同构成丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶AGC(PKA,PKG和PKC)超家族...PKC的同工酶在分子结构上互不相同,在功能作用和激活机制上均表现出组织细胞特异性.越来越多的体内和体外试验表明,PKC(在多种细胞外刺激因素诱导的胞内信号转导过程中发挥重要的调节作用.探明PKC∈的激活机制以及其参与的细胞内信号转导通路,将有助于更好地阐明PKC'的功能.本文将就这方面的最新研究进展作一综述.一,PKCg的分子结构PKC'的分子结构与PKCK/L一样,由四个功能域和模体(motifs)组成,包括氨基端的PB1结构域,假性底物(pseudosubstrate,PS)区,Cl区(包含一个富含半胱氨酸的"锌指"结构)和羧基端的催化区.PB1结构域为蛋白结合域,可以识别其它蛋白的OPCA(OPR/PC/AID)位点,比如PAR-6,ZIP/P62和MEK5等j.PS区是一段较短的类似于真底物结合位点的氨基酸序列,其差别在于磷酸化位点的丙氨酸取代了丝氨酸/苏氨酸残基作为磷酸基团的接受体,阻断了与底物的结合,因而不被磷酸化,从而封闭酶的活化中心,这种假性底物位点的自我抑制作用是多种蛋白激酶所共有的自身活性调节机制之一.aPKC的Cl区与cPKC和nPKC不同,cPKC国家自然科学基金(3027059)和河北省自然科学基金(303452)资助课题通讯作者和nPKC的C1区含有两个重复的富含半胱氨酸和组氨酸残基的"锌指"结构C1A和C1B,是第二信使二酰基甘油(diacylglycerol,DAG)或促瘤剂佛波酯(PMA)的结合佗点,对其本身的激活是必须的.虽然aPKC的cl区与C1A相似,但仅有一个"锌指"结构,故表现出DAG或PMA非依赖性活化方式. PKc'的催化区(丝/苏氨酸激酶区)与AGC超家族的其它成员一样,包括ATP结合位点,激活域,磷酰基转移位点和疏水性模体.ATP结合位点包含一个赖氨酸残基Lys一281,对保持酶的活性非常关键. Lys-281被其它氨基酸置换发生的变异体通常被用作PKc'酶活性缺失模型(PKC'一kn).激活域和磷酰基转移位点分别包含一个重要的苏氨酸残基Thr一410和Thr一560,当PKC被激活时Thr-410和Thr一560 将被磷酸化.二,PKC[的激活机制PKC的激活机制主要分两部分,一是假性底物从底物结合腔内释放出来,一是催化区的磷酸化.一些脂类对于PKC的假性底物依赖性自身抑制的解除发挥重要作用.如细胞膜上的磷酯酰丝氨酸(phosphatidyIserine),还有脂类代谢产物DAG均可作用于cPKCs和nPKCs,诱导其假性底物的释放,导致底物蛋白的磷酸化.PKCi~同样可被脂类成分激活,比如磷酯酰肌醇(phosphatidylinositols,PIs),磷月旨酸(phosphatidicacid,DA),花生四烯酸(arachidonicacid,AA)和神经酰胺(ceramide)等,其中三磷酸肌醇(PI一3,4,5一trisphosphate,PIP3)和神经酰胺对各种细胞内aPKC的调节倍受关注.有报道称酶促反应合成的PIP3可刺激小牛肾脏PKc'的自身磷酸化从而活化PKCi~,提示aPKC的活性可被磷酸肌醇一3激酶(PI一3kinase,PI3K)调节,因为多种生长因子可刺激PI3K使PIP2进一步磷酸化产生PIP3.表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF),血小板源性生长因子(platelet—derivedgrowthfactor,PDGF)和PI3K的催化亚单位Pll0蛋白的过度表达等均可使大鼠3Y1细胞内PKCh/L活性增强.迄今有很多证据表明PI3K在多种细胞内可以激活PKc'和PKCh/L,比如脂肪细胞和单核细胞等.那么PIP5与aPKC之间是如何相互作用的?PIP3可以直接与含有PH功能域(pleckstrinho—mology,PH)的蛋白激酶结合,如蛋白激酶B(PKB或Akt)和3一磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1).PDK1的PH功能域与PIP3的亲和力高生理科学进展2005年第36卷第4期于PKB/Akt.PDK1通过其PH功能域与PIP3结合而被激活,然后附着于AGC激酶的疏水性模体,使其激活域的苏氨酸残基被磷酸化j.aPKC的疏水模体包含一段短的氨基酸序列(phe—Glu—Gly—phe—Glu—Tyr),它与其它PKC相关蛋白激酶的PDK1结合位点(phe—x—x—phe—Asp—Tyr)非常相似.PKC/~激活域的Thr-410被PDK1磷酸化.用基因敲除的方法造成PDKI表达缺失的胚胎干细胞,其PKc'的Thr一410不被磷酸化,从而表明PKc'是PDK1的生理性底物.尽管PKc'催化区410位的苏氨酸被丙氨酸取代的突变体将失去酶催化活性,但410位的苏氨酸若被谷氨酸取代,可能会模仿苏氨酸的磷酸化而维持其催化活性.这些发现表明410位的苏氨酸磷酸化对PKc'的激活是必须的.在Thr410被磷酸化之后,PKc'的催化区被充分暴露,以便进一步磷酸化.PKc'磷酰基转移位点的Thr一560对其活化是一个关键的氨基酸残基(图1).T410E突变体仍能表现出自身磷酸化,但体外标记实验表明,T560A和T560E突变体则使PKc'完全丧失活性.提示Thr一560是PKc'关键的自身磷酸化位点.在机体细胞内,PKC/~的Thr一560残基是被其自身磷酸化还是PKCi~分子之间相互作用或者是被其它蛋白激酶磷酸化尚不清楚.图1PKc'活化机制的模式图磷酸肌醇.3激酶(PI3K)的P85亚基与磷酸化的受体酪氨酸激酶(RTKs)相互作用,激活Pl1O催化亚基产生PIP3,3一磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)通过PH结构域与PIP3结合并被活化,使PKc'激酶域(Kinasedomain,KD)的Thr-410和Tin"一560磷酸化,最终使PKc'完全活化激活PDK1是否是PIP3活化aPKC的唯一途径?有实验表明,如果将PKCi~和PKCh./~的假性底物序列截去,那么PIP3将不能使其催化区活化,提示PIP3诱导aPKC活化至少部分地依赖于氨基端假性底物序列的存在.尽管PKc'分子没有PIP3生理科学进展2005年第36卷第4期结合位点被发现,但PIP3激活PKC'可能有两种途径,一是通过假性底物依赖性自身磷酸化的直接调节;二是通过PDKI使催化区磷酸化的间接调节.二者均是完全而稳定地激活PKC(所必须的.PKC'活化的另一重要途径是神经酰胺通路.LPS等刺激因素作用于机体的免疫细胞,通过与其受体结合引起G蛋白变构,G蛋白的Ot或亚基激活PLC,活化的PLC催化磷脂酰胆碱(phosphati—dylcholine,PC)水解产生DAG,然后DAG再激活鞘髓磷脂酶(sphingomyelinase)催化鞘髓磷脂水解产生神经酰胺,而后直接激活PKC'.PC.PLC还可以通过活化鞘髓磷脂合酶(sphingomye|insynthase)来增加神经酰胺的产生,协同激活PKcf.另外,特异性的蛋白质一蛋白质之间的相互作用也可影响PKC的活性.有一些蛋白质可以增强或抑制aPKC的活性.如Par-4与aPKCs的C1模体相互作用而抑制其活性,Par一3与aPKCs催化区结合也可抑制其活性.这种蛋白质之间的相互作用也是aPKC活性调节的一种方式.三,PKC[的功能(一)PKC/~与MAPK通路很多研究表明PKC'参与丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated proteinkinase,MAPK)信号转导通路.用肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactorOt,TNF.Ot)刺激猴子COS细胞(一种PKc'活化的突变体)可以活化MAPK激酶MEK1和MAPKERK1,但是用TNF一刺激PKc'表达缺陷的细胞(PKc'.kn)却没有㈠活性.在甲状腺细胞,过度表达的野生型PKc'¨丁以激活ERK1和ERK2,并且可以提高EIK.1(ERK1 和ERK2的靶序列)的转录活性,但促甲状腺激素(thyroid.stimulatinghormone,TSH)没有上述功能.那么在MAPK信号转导级联反应中,什么是PKC'的靶蛋白?有趣的是在COS细胞内高浓度表达的活化形式PKC尽管缺乏假性底物序列,仍能活化MEK1,但不能活化Rafl.在人的肺泡巨噬细胞内,脂多糖(1ip0p0lysaccharide,LPS)可以激活MEK1, ERK1和ERK2,但不能激活RaflLs/.从这一点上讲,内源性PKC'的活化和诱导与MEK1有关.另外PKC'特异性抑制剂可阻断LPS的上述效果.这些发现表明PKC'不依赖于Rafl途径而作为MEK1激酶发挥作用.然而,PKC'是直接还是间接使MEK1磷酸化还不清楚,这对阐明PKC(在MAPK 级联反应中的作用至关重要.有报道称不同亚型的PKC通过MAPK通路参与调节LPS诱导的促炎细胞因子和抗炎细胞因子的产生,比如cPKC(Ot,B)调节TNF—Ot的产生,而PKC'调节IL一10的产生. 另一方面,PKC'可作为表皮生长因子活化的MAPK级联反应的另一关键途径MEK5.ERK5的接合子(adapter)j.在人转化细胞系HEK293细胞内,表皮生长因子可诱导PKC'与MEK5的OPCA模体结合从而提高ERK5的活性.相反地,能够干预PKC/~与MEK5结合的物质(MEK5一OPCApep. tide或PKC(一PB1.domainpeptide)却抑制ERK5的活性.更为重要的是过量表达的PKC'一kn也能提高EGF诱导的ERK5活性,提示PKC'在MEK5?ERK5途径中仅作为接合子而发挥作用.再有PKc'可以与PKBy/Akt3结合并通过使其羧基端丝氨酸残基磷酸化而激活之,但这种磷酸化不依赖于PKC'的活性.可能与一种尚未确定类型的PDK有关,人们称之为PDK2.PKC'作为接合子不依赖于其酶促活性而发挥作用,但其确切机制尚需进一步研究.(二)PKC(与NF.KB通路在细胞生长和生存过程中,细胞外配基如TNF.Ot,IL.1和NGF等,通过调节由转录因子如NF—KB等,介导的从受体复合体至靶基因的表达之间的信号转导通路而发挥它们的作用.PKC'.kn阻断了NF.KB对这些刺激因素的反应,表明PKC'在TNF.Ot和IL.1诱导的NF?KB活化信号转导通路中发挥着关键作用.在此过程中,一个重要的问题是PKC如何与其受体复合体发生作用.为探讨PKC'的作用机制,含有OPCA模体的ZIP(zeta.interactiogprotein)类似物(同源体)给了我们重要的启示¨.Puls等利用酵母双杂交实验首次报道PKC'可以与大鼠的ZIP结合.因为含有一个62kD的人Lek结合蛋白(p62)的ZIP同源基因已被用不同的方法克隆,所以我们称之为ZIP/ p62.还有两个ZIP同源体ZIP2和ZIPB也被报道...ZIWp62包含一个TNF.受体相关因子6 (TNF—Otreceptor.associatedfactor6,TRAF6)结合位点,但ZIP2没有此位点.通过ZIP/P62连结PKC'或PKCk/~的TNF?Ot受体复合体包括TRAF2和受体交互蛋白(receptor. interactingprotein,RIP).在人肿瘤细胞系Hela细胞和HEK293细胞,ZIP/p62选择性地与RIP结合, 但不与TRAF2结合.另外,ZIP/p62也可以将PKC' 与含有TRAF6的IL.1和NGF受体复合体相结合.在此过程中,ZIP/p62仅作为接合子(接头)起作用.然而,ZIP/p62可以拮抗Par-4诱导的PKc∈活性抑制和TNF-仅诱导的人骨肉瘤U2OS细胞凋亡,这表明ZIP/p62除了起接头作用外,对PKc∈的活化起着关键作用¨.虽然其确切机制尚不清楚,但是其构象的改变可能使PKc∈更易于接近其底物从而诱导NF.KB活化.NF-KB的活化由其抑制亚单位IKB的磷酸化所启动.在静息细胞,NF-KB通过与IKBct及IKB[3结合存在于细胞质中,当细胞受到刺激时(如LPS,细胞因子,病毒等),IKB首先在IKB激酶(IKBKinase, IKK)复合物作用下发生磷酸化,随之而产生泛素化,最终在蛋白酶体的作用下IKB发生降解,从而释放NF-KB二聚体,使其从细胞质中转位入核,调控其靶基因表达.PKc∈在体外可以使IKK[3亚单位磷酸化,可能是通过直接的作用.在HEK293细胞中,PKc∈通过其催化域以TNF.仅刺激依赖的方式作用于IK'K[3,从而使IKK[3活化.在PKc∈表达缺陷的小鼠肺内,TNF.仅诱导IKKB活化降低.表明PKc∈通过参与IKK信号复合体来调节NF-KB的活性.PKc∈还可以直接使p65(RelA)亚单位的Ser.311残基磷酸化,从而活化NF-KB.总之,aPKC参与体内由TNF.仅,IL.1和NGF受体介导的NF-KB活化信号转导过程,另外aPKC也可能参与由转录因子活化介导的从受体复合物至靶基因的表达之间的多条信息通路¨.还有待进一步研究证明.(三)PKc∈与p70S6蛋白激酶信号通路p70核糖体S6蛋白激酶(p70ribosomalS6Proteinki. nase,p70S6k)可以调节编码核糖体蛋白和翻译延伸因子的RNA的翻译过程,丝裂原刺激可使其磷酸化并被激活.Akimoto等首次报道了PKCL/t直接参与p70S6k的激活,并且在PKCk/%负性表达的突变体,血清诱导的p70S6k活性降低.PKc∈-kn也拮抗由EGF,PDK和PI3K诱导的p70S6k的活性上调,并且体内实验证明,PKc∈与PDK1一样,均以不依赖于生长因子的方式调节p70S6k的活性.提示机体内存在一个多聚PI3k.p70S6k信号复合体,那么PKc∈是否通过该复合体调节p70S6k的活化?p70S6k是AGC蛋白激酶超家族成员之一,激活域的Thr.229和疏水模体的Thr-389两个氨基酸残基的磷酸化对其活性至关重要.肉豆蔻酰化的PKc∈是PKc的固有活性形式,可以协同PDK1增强或单独增强诱导p70S6k持续活性的这些氨基酸残基的磷酸化¨.因此,aPKC~显然在p70S6k活化过程中发挥重要作用.然而重组的aPKC~在体外不能生理科学进展2005年第36卷第4期直接使p70S6k磷酸化,肉豆蔻酰化的PKc∈也不能排除p70S6k的EGF依赖性活化,而且对催化感受态的p70S6k只能增加Thr389残基的磷酸化¨.这表明aPKC~本身不足以促使p70S6k完全活化, p7OS6k的活化需要多信息的分子参与,如mTOR和PKB/Akt等,所以aPKC~可能和其它调节因素一起调控核蛋白的翻译过程.四,存在的问题和展望有关PKc∈的功能研究已取得很多进展,除本文提及的以外,尚有其它方面的研究成果,如PKc∈参与细胞的极性(cellpolarity),学习和记忆的长时程增强(1ong-termpotentiation,LTP)的调节过程等'J.但仍有许多问题需要进一步阐明,如PKc∈与PKCL/t生理功能的区别,尽管有报道研究了它们在核转位过程中的不同,但体外实验没有揭示他们的功能区别.PKc∈表达缺陷的小鼠外观正常,只是在其B细胞成熟过程有轻微的损害,但PKCL/t表达缺陷的小鼠却在胎儿期死亡,无法发育为成熟个体¨.显然,对哺乳动物而言,个体发育过程中的调控更依赖于PKCL/t,而PKc∈在此过程中的确切作用尚不清楚.有关PKc∈功能的研究13益受到人们的关注.可以预见,阐明PKc∈在细胞和生物水平的功能和调控将为期不远.参考文献1OhnoS,NishizukaY.ProteinkinaseCisotypesandtheir specificfunctions:prologue.JBiochem,2002,132:509 ～5l1.2PontingCP,ltoT,MoscatJ,eta1.OPR,PCandAID:allinthePB1family.TrendsBiochemSci,2002,27:10—15.3ParkerPJ.ParkinsonSJ.AGCproteinkinasephosphoryla? tionandproteinkinaseC.BiochemSocTrans,2001.29:860～863.4StandaertML,BandyopadhyayG,KanohY,eta1.Insulin andPIP3activatePKC.(bymechanismsthatarebothde—pendentandindependentofphosphorylationofactivationloop(T410)andautophosphorylation(T560)sites.Bio? chemistry,2001,40:249～255.5MonickMM,CarterAB,FlahertyDM,eta1.ProteinkinaseC'playsacentralroleinactivationofthep42/44mitogen? activatedproteinkinasebyendotoxininalveolarmacropha- ges.JImmunol,2000,165:4632～4639.6FoeyAD,BrennanFM.ConventionalproteinkinaseCand atypicalproteinkinaseCzetadifferentiallyregulatemacro phageproductionoftumournecrosisfactor—alphaandinter理科学进展20H05年第36卷第4leukin一10.Immunology,2004,112:44～53.7Diaz—MecoMT,MoscatJ.MEK5.anewtargetoftheatypi—calproteinkinaseCisoformsinmitogenicsignaling.Mol CellBiol,2001.21:1218～1227.8HodgkinsonCP,SaleEM,SaleGJ.CharacterizationofPDK2activityagainstproteinkinaseB.Biochemistry,2002,41:10351～10359.9SanzL,Diaz—MecoMT,NakanoH,eta1.Theatypical PKC—-interactingproteinp62channelsNF—-KBactivationbytheIL一1一TRAF6pathway.EMBOJ.2000,19:1576～1586.10GeethaT,WootenMW.Structureandfunctionalproperties oftheubiquitinbindingproteinp62.FEBSLett,2002.512:19～24.11CariouB,PerdereauD,CailliauK,eta1.Theadapterpro—teinZIPbindsGrbl4andregulatesitsinhibitoryactionon insulinsignalingbyrecruitingproteinkinaseC∈.MolCellBio1.2002.22:6959～6970.12WootenMW,SeibenhenerML,MamidipudiV,eta1.The atypicalproteinkinaseC—interactingproteinp62isascaf-f0ldf0rNF—KBactivationbynervegrowthfactor.JBiol Chem,2001,276:7709～7712.13ChangS,KimJH,ShinJ.p62formsaternarycomplex withPKC￡andPAR-4andantagonizesPAR-4一induced PKC(inhibition.FEBSLett.2002.510,57～61.3l3?14LeitgesM,SanzL,MartinP,eta1.Targeteddisruptionofthe∈PKCgeneresultsintheimpairmentoftheNF—KB pathway.MolCell,2001,8:771～780.15PowellDJ,TurbanS,GrayA.eta1.Intracellularceramide synthesisandproteinkinaseCzetaactivationplayanessen—tialroleinpalmitate—inducedinsulinresistanceinmtIJ6 skeletalmusclecells.BiochemJ,2004,1:382(Pt2):619～629.16RomanelliA,DreisbachnVC,BlenisJ.Characterizationof phosphatidyljnositol3-kinase—dependentphosphorylationof thehydrophobicmotifsiteThr389inp70S6kinase1.JBiolChem,2002,277:40281～40289.17OhnoS.Intercellularjunctionsandcellularpolarity:thePAR—aPKCcomplex,aconservedcorecassetteplayingfun—damentalrolesincellpolarity.CurrOpinCellBiol,2001,13:641～648.18SuzukiA,Y amanakaT,HiroseT,eta1.Atypicalprotein kinaseCisinvolvedintheevolutionarilyconservedPAR proteincomplexandplaysacriticalroleinestablishingepi—thelia—specificjunctionalstructures.JCellBiol,2001,152:1183～1l96.19Woda~A,RamrathA,GrimmA,eta1.Drosophilaatypi—calproteinkinaseCassociateswithbazookaandcontrols polarityofepitheliaandneuroblasts.JCellBiol,2000,】50:1361～1374.缺血导致树突棘结构的快速可逆改变目前流行的溶血栓剂有效治疗的时问窗口是中风后3～6小时.尽管这种治疗可以改善预后,但人们仍不能确定在这个关键时期,体内突触的精细结构究竟发生了怎样的变化.已知成年动物在正常情况下树突棘结构是相对稳定的,那么在中风的情况下,树突棘的结构能否依然保持稳定呢?为此,Zhang等选取了一种可以在躯体感觉皮层的第5层神经元某亚群中特异性地表达黄色荧光蛋白(YFP)的H系成年小鼠,通过皮层微注射内皮素一1(ET一1)降低局部血流建立了中等脑缺血动物模型,又通过尾静脉注射四碘四氯荧光素二钠(RB)建立了光化学诱导的严重脑缺血动物模型,并用双光子显微镜观察小鼠躯体感觉皮层相应部位在缺血前后血流量的变化,以及树突和树突棘在结构和数量上的变化.通过微循环和树突的成像,发现树突和树突棘结构在中等缺血的最初5小时内保持相对稳定,但7小时后就发生了缺失和降解;而在严重缺血的情况下,树突在10～30分钟内就迅速损坏并且发生肿胀,同时树突棘也难以辨认,在显微镜下似乎消失.不过研究者认为,此时树突棘的消失是肿胀的树突遮蔽r树突棘,或细胞骨架降解使树突棘塌陷造成的;如果严重缺血后20～60分钟内发生再灌注,那么这种结构的改变会部分恢复;若没有再灌注,这种严重缺血造成的损伤将进行性加重.该项研究提示,如果能够在中风出现5小时内应用强有力的神经保护治疗方法,将会使中等缺血的预后变好,因为此时神经元之间的突触联系和相关的树突棘还是完整的.而在严重缺血的病例中,如果药物的再灌注刺激例如组织纤溶酶原的激活可以发生在20～60分钟之间,就可能会部分恢复树突结构.(JNeurosci,2005,25:5333～5338)(王宁罗非)。
探索分子磷酸化位点
探索分子磷酸化位点英文回答：Exploring Molecular Phosphorylation Sites.Phosphorylation is a common post-translational modification that plays a crucial role in regulating protein function and cellular signaling pathways. As a researcher in the field, I am fascinated by the complexity and importance of phosphorylation events in molecular biology.One of the key aspects of my work is to identify and explore different molecular phosphorylation sites. These sites are specific amino acid residues within a protein that are targeted by protein kinases to add a phosphate group. By understanding the location and function of these phosphorylation sites, we can gain insights into the regulatory mechanisms of protein activity and cellular processes.To identify phosphorylation sites, I employ various experimental techniques and computational tools. Mass spectrometry is a powerful tool that allows us to identify and quantify phosphorylated peptides in complex protein mixtures. By comparing the mass spectra of phosphorylated and non-phosphorylated peptides, we can pinpoint the exact location of phosphorylation sites.In addition to experimental approaches, bioinformatics tools are also crucial in predicting potential phosphorylation sites. These tools analyze the protein sequence and predict the likelihood of phosphorylationbased on known phosphorylation motifs and kinase-substrate interactions. This information helps guide our experimental efforts and provides valuable insights into the functional consequences of phosphorylation events.Once we have identified potential phosphorylation sites, the next step is to investigate their functional significance. This involves studying the impact of phosphorylation on protein structure, activity, andinteractions with other molecules. For example, phosphorylation of a specific residue may enhance orinhibit protein-protein interactions, leading to downstream signaling events.To illustrate the importance of phosphorylation sites, let's consider the example of the tumor suppressor protein p53. Phosphorylation of specific serine and threonine residues in p53 regulates its stability and activity. When these phosphorylation sites are modified, it can either activate p53 and induce cell cycle arrest or promote its degradation, leading to uncontrolled cell growth and cancer development.中文回答：探索分子磷酸化位点。
磷酸化蛋白质组如何鉴定
磷酸化蛋白质组如何鉴定接着上次的内容，今天，小编跟您聊聊磷酸化蛋白质组鉴定！蛋白质翻译后修饰（PTMs）几乎参与了细胞所有正常生命活动的过程，并发挥十分重要的调控作用。
蛋白修饰已经成为国际上蛋白质研究的一个极其重要的领域，目前研究比较成熟的有磷酸化、乙酰化、糖基化、泛素化等。
蛋白质磷酸化是生物体中最常见、最重要的一种蛋白质翻译后修饰方式，它可以通过激发、调节诸多信号通路进而参与调控生物体的生长、发育、逆境应激、疾病发生等多种生命过程，一直是生物学研究的重点与热点。
根据客户需求，金开瑞蛋白质组平台可提供磷酸化蛋白质组全谱鉴定、label-free定量技术服务。
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适用范围：●已知物种基因组序列、ESTs序列或蛋白质序列全库；●无其他特别要求。
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HECTD1激活mTOR信号促进心肌细胞肥大的机制研究
doi :10.3969/j.issn.1002-7386.2022.15.009·论著·HECTD1激活mTOR 信号促进心肌细胞肥大的机制研究焦薇 郭娜 祖秀光 郝杰 孟明杰 谢亚囡 高伟年作者单位:050000 石家庄市,河北医科大学第二医院心血管内三科(焦薇、祖秀光、郝杰、孟明杰、谢亚囡),心脏大血管外科(高伟年);河北省石家庄市中医院心病一科(郭娜)通讯作者:祖秀光 E⁃mail:zxg100109@ 【摘要】 目的 探讨含与E6⁃AP 羧基末端同源结构域的E3泛素化蛋白连接酶1(HECT Domain E3Ubiquitin Protein Ligase 1,HECTD1)在心肌细胞肥大过程中的功能与分子机制。
方法 选取心肌肥厚患者和对照心肌组织,荧光定量PCR 分析心肌肥厚标志基因和HECTD1表达水平。
在新生大鼠原代心肌细胞中用siRNA 干扰HECTD1,用qRT⁃PCR 和Western blot 验证。
利用血管紧张素Ⅱ在心肌细胞中诱导心肌肥厚,分析心肌细胞大小和肥厚标志基因表达。
利用Western blot 检测哺乳动物雷帕霉素受体(mammalian target of rapamycin ,mTOR )信号通路激活情况。
结果 在心肌肥厚患者心肌组织中肌凝蛋白重链7(myosin heavy chain 7,MYH7)、心房钠尿肽(natriuretic peptide A ,ANP )和利尿钠肽(natriuretic peptide B ,BNP )的表达增加,同时HECTD1表达水平增加。
在血管内紧张素Ⅱ诱导的心肌肥厚大鼠心脏中,ANP 、BNP 、MYH7和HECTD1表达水平增加。
siRNA 敲低HECTD1表达可以抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大和心肌肥厚标志基因ANP 、BNP 和MYH7的表达水平。
敲低Hectd1表达可以抑制血管紧张素Ⅱ诱导的mTOR 信号通路活性。
生物化学专业英语单词
单词表第一章Prokaryote 原核生物Eukaryote 真核生物fractionation 分级、分馏biomolecule 生物分子organism 生物体、有机体membrane 膜nucleus 细胞核cocci 球菌bacilli 杆菌spirilla 螺旋菌Eubacteria 真细菌Archaebacteria 原细菌Gram—positive 革兰氏阳性菌Gram negative bacteria 革兰氏阴性菌Cyanobacteria 蓝细菌Plasma 细胞浆Mesosome 间体Nuleoid 拟核Sytosol 细胞质、原生质Bilayer 双分子层（膜）Protein 蛋白质Lipid 脂类Carbohydrate 糖类、碳水化合物osmotic pressure 渗透压Peptidoglycan 肽聚糖Subcellular 亚细胞的Ganelle 细胞器Genetic 遗传的Chromosome 染色体ribosomal ribonucleic acid rRNA Endoplasmic reticulum 内质网Phospholipid 磷脂Detoxification 解毒Golgi apparatus 高尔基体Refresh 更新Mitochondria 线粒体oxidative phosphorylation 氧化磷酸化fatty acid 脂肪酸degradation 降解Chloroplasts 叶绿体thylakoid vesicles 类囊体photosynthesis 光合作用Lysosomes 溶酶体Macromolecule 大分子Enzyme 酶Cytoskeleton 细胞支架Metabolic 新陈代谢的Centrifugation 离心Isolate 分离Equilibrium 平衡Density 密度Friction 摩擦力Velocity 速率Supernatant 上清夜Pellet 沉淀第二章Amino acid 氨基酸Enantiomers 对映体Tetrahedral 正四面体的Hydrophobic 疏水的、憎水的Aliphatic 脂肪族的Aromatic 芳香族的Polar 极性的Charged 带电荷的Glycine Gly,甘氨酸alanine Ala,丙氨酸valine Val，缬氨酸leucine Leu，亮氨酸isoleucine Ile，异亮氨酸methionine Met，甲硫氨酸proline Pro,脯氨酸cystine Cys,半胱氨酸Phenylalanine Phe，苯丙氨酸Tyrosine Tyr,酪氨酸Tryptophan Trp，色氨酸Asparagines Asn, 天冬酰胺Glutamine Gln,谷氨酰胺Serine Ser,丝氨酸Threonine Thr,苏氨酸Varginine Arg, 精氨酸Lysine Lys,赖氨酸Histidine His,组氨酸aspartic acid Asp，天冬氨酸glutamic acid Glu,谷氨酸base 碱carboxyl 羧基isoelectric point 等电点positive 正的、阳性的negative 负的、阴性的buffering 缓冲physiological 生理的Primary structure 一级结构Secondary structure 二级结构Tertiary structure 三级结构Quaternary structure 四级结构peptide bond 肽键sequence 顺序、序列covalent Bond 共价键polypeptide 多肽terminal 末端carbonyl 羰基resonance structures 共振结构rigid 刚性的rotate 旋转trans configuration 顺式构象disulfide bonds 二硫键α-helix α—落选hydrogen bond 氢键β-pleated sheet β—折叠片parallel 平行的antiparallel 反平行的random coil 无规卷曲unique 唯一的spatial 空间的arrangement 排列、安排linear sequence 线性序列residue 残基Hydrophobic interaction疏水相互作用Interior 内部的Electrostatic force 静电力salt bridge 盐桥、盐键van der Waals force 范德华力subunit 亚基 allosteric effect 变构效应 Noncovalent interactions 非共价相互作用 protein stability 蛋白质的稳定 dimensional 空间的、维的 proton 质子donor 供体、赠与者 lone pair of electrons 孤对电子 collinear 在同一直线上 Hydrophobic force 疏水力 Nonpolar 非极性 Minimize 最小化 protein folding 蛋白质折叠 Accessory protein 辅助蛋白质molecular chaperones 分子伴侣Myoglobin 肌红蛋白Hemoglobin 血红蛋白prosthetic group 辅基 essential 必需的 heme 血红素 crevice 缝隙 protoporphyrin 原卟啉 porphyrin 卟啉 ferrous 含铁的 proximal 最接近的 cooperative 协同的 noncooperative 非协同的 dissociation curve 解离曲线 sigmoidal S 形曲线 hyperbolic 双曲线affinity 亲和性 blood capillaries 血管Bohr effect 波尔效应2,3—biphosphoglycerate 2,3—二磷酸甘油酸Mechanism 机制Relaxed state 松弛状态tense state 紧张状态hemoglobinopathies 血红蛋白分子病Sickle—cell anemia 镰刀形细胞贫血症Erythrocyte 红血球sticky patch 粘性小区therapeutic 治疗的Collagen 胶原蛋白Skin 皮肤Bone 骨骼Tendon 腱Cartilage 软骨blood vessel 血管mammal 哺乳动物fibrous 纤维状的tripeptide 三肽的triple—helical 三股螺旋的cross—linke 交联Allysine 醛基赖氨酸Antibodie 抗体immune system 免疫系统pathogen 病原体trigger 引发、触发response 响应、应答antigen 抗原antigenic determine 抗原决定簇epitope 抗原决定簇Immunolocalization 免疫定位Antibody 抗体Enzyme-linked immunosorbent assayELISA酶联免疫吸附测定purification 提纯、纯化Homogenization 匀浆solubilization 溶解Ammonium sulfate 硫酸铵Precipitation 沉淀Dialysis 透析Chromatographic techniques 层析技术gel filtration 凝胶过滤affinity chromatography 亲和层析Electrophoretic techniques 电泳技术isoelectric focusing 等电聚焦SDS polyacrylamide gel eletrophoresis SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳semi—permeable 半透性ligand 配基inert 惰性的matrix 基质elute 洗出、流出lectin 外源凝集素glycoprotein 糖蛋白molecular sieve 分子筛polyampholytes 聚两性电解质gradient 梯度migrate 迁移、移动chymotrypsin 胰凝乳蛋白酶sequencing 测序2—mercaptoethanol ２－巯基乙醇ninhydrin 茚三酮fluorescamine 荧光胺fluorodinitrobenzene 二硝基氟苯dansyl chloride 丹磺酰氯phenyl isothiocyanate PITC苯异硫氰酸酯fragment 片断、碎片encoding 编码decipher 解读、破译anchor 锚定第三章biocatalyst 生物催化剂active site 活性中心substrate 底物The induced –fit model 诱导契合学说Stereospecificity 立体异构专一性Specificity 专一性Trypsin 胰蛋白酶Elastase 弹性蛋白酶Oxidoreductase 氧化还原酶Transferase 转移酶Hydrolase 水解酶Lyase 裂合酶Isomerase 异构酶Ligase 连接酶Ribozyme 核酶Abzyme 抗体酶catalytic antibody 抗体酶analog 类似物assay 化验、测定optimal 最佳的Coenzyme 辅酶Cofactor 辅因子apoenzyme 脱辅酶holoenzyme 全酶acetylcholinesterase 乙酰胆碱酯酶Nicotinamide 烟酰胺Adenine 腺嘌呤Dinucleotide 二核苷酸Phosphate 磷酸Oxidation 氧化reduction 还原Flavin 黄素Mononucleotide 单核苷酸Acyl 酰基thiamine pyrophosphate 焦磷酸硫胺素decarboxylase 脱羧酶Pyridoxal 吡哆醛Pyridoxamine 吡哆胺Pyridoxine 吡哆醇Ubiquinone 泛醌Isoenzymes 同功酶Kinetic 动力学lactate dehydrogenase 乳酸脱氢酶proportional 成比例的saturate 使饱和thermal 热的denaturation 变性optimum 最适宜的diversity 多样性Michaelis—Menten equation 米氏方程double—reciprocal plot 双倒数作图法inhibition 抑制Inhibitor 抑制剂Metabolite 代谢物Irreversible 不可逆的Reversible 可逆的Competitive 竞争性的Noncompetitive 非竞争性的Probe 探测Clinically 临床上Regulation 调节committed step 关键步骤activator 激活剂Adjust 调节Feedback 反馈Sequential 连续的Branched 分支的Conformational 构象的homotropic effect 同促效应heterotropic effect 异促效应Phosphofructokinase 磷酸果糖激酶Citrate 柠檬酸盐Fructose 2，6 bisphosphate 2,6-二磷酸果糖phosphorylation 磷酸化dephosphorylation 去磷酸化hydroxyl 羟基hormone 激素Glycogen phosphorylase 糖原磷酸化酶Phosphorylate 使磷酸化glycogen synthase 糖原合酶unphosphorylate 使去磷酸化proteolytic 蛋白质水解的proenzymes 酶原zymogen 酶原hydrolysis 水解pancreatic 胰腺的pancreas 胰腺small intestine 小肠blood clotting 血液凝固amplification 扩大cascade 级联第四章boundary 边界compartments 小室Mechanical 机械的signaling 发信号insoluble 不可溶的glycerophospholipids 甘油磷脂类sphingolipids 鞘脂类sterols 固醇类glycerol 甘油sphingosine 鞘氨醇sphingomyelins 鞘磷脂cholesterol 胆固醇steroid 类固醇Amphipathic 两性的Hydrophilic 亲水的Bulky 体积大的self-assemble 自组装的fluidity 流动性rotational 转动的lateral 侧向的Fluid mosaic model 流体镶嵌模型Integral 整体的、内在的Flip 翻跟头integral membrane proteins 内在膜蛋白peripheral membrane proteins外周膜蛋白asymmetry 不对称asymmetrically 不对称地membrane—spaning protein 跨膜蛋白Multiple 多重的Lipid-anchored proteins 脂锚定蛋白Heterokaryon 异核体Fusion 融合Reconstitution 重建Reincorporated 重新合并Extracellular 细胞外的Intercellular 细胞内的Passive transport 被动运输active transport 主动运输concentration 浓度diffusion 扩散saturable 可饱和的facilitated 协助的、推动的symport 同向运送antiport 逆向运送epithelial cells 上皮细胞exocytosis 分泌作用endocytosis 内吞作用phagocytosis 吞噬作用pinocytosis 胞饮作用Receptor mediated endocytosis fusion受体介导的内吞作用debris 碎片transduction 转导Lipophilic 亲脂性的Receptors 受体second messengers 第二信使第五章Nucleic acid 核酸Replication 复制Nucleotide 核苷酸Pyrimidine 嘧啶Guanine 鸟嘌呤Thymine 胸腺嘧啶Cytosine 胞嘧啶Nucleoside 核苷Deoxyribonucleoside 脱氧核糖核苷ribonucleoside 核糖核苷deoxyribonucleotide 脱氧核糖核苷酸genes 基因complementarily 互补地nucleosome 核小体loop 突环rosette 玫瑰花结semi-conservative 半保留的polymerase 聚合酶template 模板primer 引物fork 叉Bidirectional 双向的Okazaki fragments 冈崎片段semi—discontinuous 半不连续的strand 链、一股hybridization 杂交melting temperature 熔融温度renaturation 复性labeled 标记的fluorescent 荧光的tag 标记、标签annealing 退火amplify 增强、扩大The central dogma 中心法则Transcription 转录initiation 起始Elongation 延伸termination 终止promoters 启动子palindrome 回文结构processing 加工splicing 拼接reverse transcription 逆转录第六章genetic code 遗传密码intermediate 中间的、媒介codons 密码子unambiguous 明确的correspond 相应、符合degenerate 简并的mutation 变异incorporation 合并nonoverlapping 不相重叠的reading frames 阅读框aminoacyl—tRNA 氨酰—tRNA peptidyl-tRNA 肽酰-tRNA stem 茎、干、臂anticodon 反密码子translocation 移位第七章metabolism 代谢Saccharides 糖类monosaccharides 单糖aldehyde group 醛基ketone group 酮基Stereoisomers 立体异构体Oligosaccharides 寡糖Glycosidic bond 糖苷键Polysaccharides 多糖Starch 淀粉Cellulose 纤维素Dextran 葡聚糖Amylose 直链淀粉amylopectin 支链淀粉Glycolysis 糖酵解Cytoplasm 细胞质Glucose 葡萄糖Galactose 半乳糖Mannose 甘露糖Sucrose 蔗糖Trehalose 海藻糖Lactose 乳糖Hexokinase 己糖激酶Fructose 果糖Phosphoglucoisomerase 磷酸葡萄糖变位酶Bisphosphate 二磷酸glyceraldehydes 甘油醛dihydroxyacetone 二羟丙酮aldolase 醛缩酶triose 丙糖1，3-bisphosphoglycerate 1,3 二磷酸甘油酸dehydrogenase 脱氢酶3—phosphoglycerate 3—磷酸甘油酸kinase 激酶mutase 变位酶phosphoenolpyruvate 磷酸烯醇式丙酮酸enolase 烯醇化酶pyruvate 丙酮酸Gluconeogenesis 糖异生Noncarbhydrate 非糖的Liver 肝脏skeletal muscle 骨骼肌phosphorylase 磷酸化酶Phosphorolysis 磷酸化pyrophosphorylase 焦磷酸化酶glucosyl 葡萄糖基nonreducing end 非还原端Epinephrine 肾上腺素glucagon 胰高血糖素Insulin 胰岛素第八章fatty acid 脂肪酸hydrocarbon 烃、碳氢化合物carboxylic acid 羧酸Unsaturated 不饱和的Triacylglycerol 三酰甘油Acetyl 乙酰基Thioester 硫酯Carnitine 肉（毒)碱Hydration 水合作用Thiolysis 硫解Consume 消耗ketone bodies 酮体acetoacetate 乙酰乙酸D—3-hydroxybutyrate D-3-羟基丁酸Acetone 丙酮diabetes 糖尿病toxic 有毒的lethal 致命的multifunctional 多功能的malonyl 丙二酰基carboxylation 羧化condensation 缩合acetoacetyl 乙酰乙酰基hydroxybutyryl 羟丁酰基crotonyl 丁烯酰基butyryl 丁酰基hydrolyzation 水解作用palmitoyl 软脂酰基palmitate 软脂酸lipoproteins 脂蛋白globular 球状的micelle 胶束、微囊第九章Respiration 呼吸作用citric acid cycle 柠檬酸循环、三羧酸循环concomitant 伴随的isocitrate 异柠檬酸酸盐α-ketoglutarate α—酮戊二酸succinate 琥珀酸盐succinyl 琥珀酰基fumarate 延胡索酸盐malate 苹果酸盐oxaloacetate 草酰乙酸盐cytochrome 细胞色素oxidase 氧化酶reductase 还原酶Rotatory 旋转的engine 发动机第十章Nitrogen 氮Diet 常吃的食物Erythrose 赤藓糖Ribose 核糖Transamination 转氨基作用Deamination 脱氨基作用Transdeamination 联合脱氨基作用Ammonia 氨Excrete 排泄Aquatic 水生uric acid 尿酸terrestrial 陆生的reptile 爬行动物urea 尿素vertebrates 脊椎动物ornithine 鸟氨酸arginine 精氨酸citrullin 瓜氨酸permanently 不变地。
芯片类检测：Luminex PLEXMAP BIOPLEX 液相芯片检测
sCD30 可溶性CD30
sCD40L可溶性CD40L
sEGFR可溶性表皮生长因子受体
sgp130 可溶性糖蛋白130
sIL-2Rα可溶性白细胞介素-2受体α
sIL-4R可溶性白细胞介素-4受体
sTNF RI 可溶性肿瘤坏死因子受体I
sTNF RII可溶性肿瘤坏死因子受体II
p70 S6 Kinase (Thr412) 磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体
STAT1 (Tyr701)磷酸化信号转导与转录激活因子1
STAT1 (Tyr707)磷酸化信号转导与转录激活因子1
STAT3 (Tyr705)磷酸化信号转导与转录激活因子3
STAT5A/B (Tyr694/699) 磷酸化信号转导与转录激活因子
ZAP-70 (pan Tyr)磷酸化zeta相关蛋白70
Syk (pan Tyr)磷酸化非受体型酪氨酸蛋白激酶
Active Caspase 3 活化半胱胺酸蛋白酶 3
Active Cleaved PARP活化切割的多腺苷二磷酸多聚酶
ATF2 (Thr69/71)活化复制因子2
BAD (Ser112)磷酸化相关死亡促进因子
IFNγ干扰素γ
IL-10白介素-10
IL-12 (p70) 白介素-12
IL-13白介素-13
IL-17白介素-17
IL-1ra白介素-1ra
IL-2白介素-2
IL-20 白介素-20
IL-28a 白介素-28a
IL-29 白介素-29
IL-4 白介素-4
IL-5 白介素-5
IL-8 白介素-8
IL-9 白介素-9
sIL-1RII可溶性白细胞介素-1受体II
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化学性质
产品名: S6 Kinase Substrate Peptide 32 修订日期: 6/30/2016
产品名: Cas No.: 分子量: 分子式: 别名:
化学名: SMILES: 溶解性: 储存条件: 一般建议:
运输条件:
S6 Kinase Substrate Peptide 32
3630.1 C149H270N56O49 H2N-Lys-Glu-Ala-Lys-Glu-Lys-Ar g-Gln-Glu-Gln-Ile-Ala-Lys-Arg-A rg-Arg-Leu-Ser-Ser-Leu-Arg-Ala -Ser-Thr-Ser-Lys-Ser-Gly-Gly-Se r-Gln-Lys-OH
生物活性
靶点 :
Cancer Biology
信号通路:
Cancer Biology Peptie that measures the activity of kinases that phosphorylate ribosomal protein S6. It can also be used as a substrate.
参考文献:
特别声明
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