肝衰竭模型研究进展
・１６４・阳ｔｓ．ＣＩｉｎＭｅｄＪ，２００５．１１８：１９２—１９７．１５ＣｈｉｓｔｏｐｈｅｒＪ．Ｐａｒｓｏｎｓ，ＢＩａｉｒＵ，Ｂｒａｄｆｏｒｄ，ｅｔａ１．ＡｎｔｉｆｉｂｍｔｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｅｒｏｆＭｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ．１ＡｎｔｉｂｏｄｙｏｎＥｓｔａｂｌｉｓｈｅｄＬｉｖｅｒＦｉｂｒｏｓｉｓｏｆＲａｔｓ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，２ＩＪＩ）４，４ｌ，ｚ１１０６—１１１５．１６ＧｕｉｄｏＭ．ＤｅＦＬ。（）ｌｉｖａｒｉＮ．ｅｔａ１．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｐｌｕｓｒｉｂａｖｉｒｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎＮＦｋａｐｐａＢ、ＴＧＦ－ｂｅｔａｌａｎｄｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｃｈｍｎｉｃｈｅｐａｔｉｔｉｓＣ．ＭｏｄＰａｔｈｏｌ，２Ｉ）Ｉ）６，１９ｌ１Ｉ）４７—１０５４．１７ＬｅｂｅｎｓｚｔｅｊｎＤＭ．Ｄａ而ｕｓｚＭ，ＳＤｂａｎｌｅｃ－ＬｏｔｏｗｓｋａＭＥ。ｅｔａ１．！；ｅｒｕｍｆｉｂｒｏｓｉｓｍａｒｋｅｒｓａｓＤｒｅｄｉｃｔｏｒｓｏｆａｎａｎｔｉｆｉｂｒｏｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｆ
ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎａｌｆａｉｎｃｈｉｌｄｒｅｎｗｉｔｈｃｈｒｏｎｉｃｈｅｐａｔｉｔｉｓＢ．ＥｕｒＪ
ＧａｓｔｆｏｅｎｔｅｒｏｌＨｅｐａｔｏｌ，２Ｉ）Ｉ）５，１７；８４３—８４８．
１８Ｓｃ．ｏｔｔＩ。．Ｆｒｉｅｄｍａｎ．ＭｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＨｅｐａｔｉｃＦＩｂｍｇｅｎｅｓｉｓ．ＧａＳｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２（Ｊｔ）８，１３４：１６５５—１６６９．（收稿ｆ１期；２Ｉ）ＩＪ８一１１８一‘）１）（本文编辑：赖荣陶）
肝衰竭模型研究进展王华利杨永峰赵伟肝衰竭（ＨＦ）病因主要包括病毒、药物、血流动力学异常、代谢异常等【１。２】。研究合适ＨＦ的模型不仅可以更好的理解ＨＦ的病理生理学状态，还可为发展和改进ＨＦ的治疗措施提供条件。在过去３０年中，已发展了多种动物模型，多为急性肝衰竭（ＦＨＦ）模型，方法主要包括外科手术、药物和基因敲除。近年来，有学者用肝衰竭患者血浆培养ＨｅｐＧ２，Ｃ３Ａ，ＨＨＹ４１，猪肝．成人肝等细胞。观察其对细胞影响，方法多集中于对细胞生长和活力的影响，抑制细胞大分子生物合成，对肝细胞凋亡及肝细胞解毒作用的影响。一、动物模型（一）外科手术模型（ＳｕｒｇｉｃａｌＭｏｄｅｌｓ）外科手术模型是较早发展的ＦＨＦ模型，包括肝全部或部分切除模型和肝血流阻断模型。通过切除全部肝脏或大部肝脏制造出ＦＨＦ动物模型，均不可逆转，主要应用人工肝支持系统方面的研究［３“。早期动物模型是门腔静脉吻合术（ＰＣＡ）加肝动脉结扎术（ＨＡＬ）［５］。与肝切除模型一样，通过永久结扎肝动脉造成完全血流阻断模型也不可逆，因此学者们转而关注暂时性缺血模型，允许肝脏有恢复潜能【６］。（二）化学药物模型（ＣｈｅｍｉｃａｌＭｏｄｅｌｓ）ｎ氨基半乳糖（Ｄｇａｌ）是一种选择性肝毒性药物。不同的物种对半乳糖胺的易感性不同，大鼠较敏感。而小鼠可抵抗其毒性至给药剂量大于１９／ｋｇｃ”。不论是大动物还是小动物模型均显示，给予半乳糖胺后引起的ＦＨＦ是一可逆过程。对乙酰氨基酚主要在肝脏代谢，其主要缺点是可重复性较差，因动物种类不同，其肝毒性也不同；此外，对氨基乙酰酚还可引起肝外毒性，包括肾毒性、心脏毒性以及肺损伤等ｎ‘１…。在七√ｋ十年代，四氯化碳广泛用于制造肝损伤的动物模型，但发现其可重复性差，动物种属差异也较明显【ｌ“。硫代乙酸胺（ＴＡＡ）在大鼠和小鼠模型中应用广泛，但在作者单位：２１（×，ｔ＇３东南大学附属南京市第二医院通信作者：赵伟。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｏｗｅｉｌ９５６１２＠１６３．ｃｏｍ其他动物中应用时个体差异较大。特别是家兔ＴＡＡ模型在临床表现和组织学改变中都体现了较大差异。刀豆球蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）是一种植物凝血素，用于诱导小鼠肝损伤【Ｉ“。而不累及其他器官。该模型的发病机制与自身免疫性肝炎和病毒性肝炎致肝损伤的机制相似，常用于上述疾病的研究。脂多糖（ＬＰＳ）是革兰氏阴性菌细胞壁的一种成分，单独使用ｌ，ＰＳ常用于制备内毒素休克模型【ｌ”“。制备ＨＦ模型时，常使用小剂量的Ｉ。ＰＳ和其他肝毒性药物合用，可引起明显肝损害，并使动物对ＬＰＳ的敏感性提高近千倍，例如和胁ｇａｌ、ＴＮＦ－ａ等合用。（三）基因修饰模型最早用于ＦＨＦ研究的基因模型是ａｌｂ＿ｕＰＡ转基因模型【”】，在该裸鼠系中，白蛋白启动子（ＡｌｂｕｍｉｎＰｒｏｍｏｔｅｒ）促进尿激酶型纤维蛋白溶解酶原（ｕＰＡ）活
性，异位ｕＰＡ过渡表达可引起肝细胞坏死，使小鼠死于肝衰竭。除非ａｌｂＩｕＰＡ转基因自发突变而失活。（）、，ｅｒｔｕｒｆ等［川用基因敲除的方法，将小鼠延胡索酰乙酰乙酸水解酶（ＦＡＨ）基因敲除。制成ＦＡＨ“一小鼠，该小鼠可做为Ｉ型遗传性高酪氮酸血症的基因模型，该模型可出现ＦＨＦ。以上两种模型主要用于研究代谢性疾病的病理生理过程，肝细胞生长，肝细胞移植的可能性及其增生潜能。Ｓｃｈｕｃｈｍａｎｎ等【”３报道了一种白喉毒素（ＤＴ）受体为媒介的转基因鼠动物模型，自然条件下，鼠细胞不存在ＤＴ受体，因此对ＤＴ有抵抗力；而在ＤＴ受体转基因鼠，注射ＤＴ后可引起肝细胞损伤和ＦＨＦ，该模型的主要优点是具有重复性。二、细胞模型正常培养液多采用ＤＭＥＭ、ＲＰＭｌ－１６４０等加小牛血清（ＦＣＳ）或胎牛血清（ＦＢｓ），与此相比，肝衰竭患者（ＬＦＰ）或肝衰竭患者血清（１，Ｆｓ）对体外培养肝细胞生长有抑制作用¨…，因此用这种特定ＬＦＰ或Ｉ。Ｆｓ培养肝细胞。构建ＨＦ细胞模型，对进一步研究ＨＦ的临床治疗有一定意义。（一）ＨｅｐＧ２细胞模型Ｈ印Ｇ２细胞来源于一例１５岁白
万方数据人肝癌组织。该细胞分泌多种血浆蛋白：清蛋白、ａ２一巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、铁传递蛋白等。该细胞能大容量培养。乙型肝炎表面抗原阴性。分化程度较高，人类原代肝实质细胞分离后。只能经历有限的几次分裂，其内在的代谢酶很快失活¨…，因此常用ＨｅｐＧ２替代肝细胞用于实验研究。很早就有学者发现ＬＦＳ能抑制ＨｅｐＧ２细胞生长，ＤＮＡ合成也是减少的‘２…。（二）Ｃ３Ａ细胞模型Ｃ３Ａ细胞株是从肝纤维母细胞瘤细胞转化获得。分化程度高于ＨｅｐＧ２细胞。并具有良好的肝细胞特异功能，如分泌白蛋白与甲胎蛋白，参与尿素合成与糖原合成等。陈煜等【２¨与国外研究结果不同的是从ＭＴＴ结果及形态学上均观察到Ｃ３Ａ细胞在慢性ＬＦＰ中的增殖速度明显高于正常血浆组。反映生物转化功能的安定代谢量与国外研究结果一致，在慢性组明显低于ＮＨＰ组。（三）ＨＨＹ４１细胞ＨＨＹ４１是经传代建立的永生化细胞株，Ｋｏｎｏ等［２２］将人肝实质细胞培养于胶原中，在强化条件下培养获得。持续传代１年以上，仍与正常人肝细胞功能相同。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ转印证实胞浆内存在人白蛋白ｍＲＮＡ，细胞核型与正常人肝细胞相同。体外培养时具有快速增殖能力，并能低温保存。ＭｃＣｌｏｓｋｅｙ等［２３］发现与ＮＨＰ、ＦＢｓ相比，用急性Ｉ，ＦＰ培养ＨＨＹ４１细胞１６ｈ后，细胞的氧化应激和毒性反应增强；细胞活性、ＤＮＡ合成、蛋白合成及细胞色素Ｐ４５０１Ａ（ＣＹＰ４５０１Ａ）活性都降低。（四）猪肝细胞猪肝细胞能合成多种蛋白、凝血物质等，但不能代替人自身功能，只能利用猪肝细胞的解毒功能。有研究提示，猪肝细胞分泌的促肝细胞生长类物质能对ＨＦ患者有一定的促肝细胞生长作用。另外，从细胞分离、培养生长的角度考虑，乳猪肝细胞明显优于成年猪肝细胞。但存在免疫反应和内源性反转录病毒感染的问题。程永波等乜们研究发现用Ｉ。ＦＰ体外培养的猪肝细胞。在培养第１ｄ时即抑制。对体外培养猪肝细胞大分子合成也有抑制作用，ＡＳＴ和ｌ。ＤＨ漏出比对照组显著升高。另外形态变化显示细胞膜有损害，细胞浆中出现大量空泡。（五）肝细胞株肝细胞是细胞模型中最理想的细胞材料，主要体现在细胞生物学功能相同。但来源匮乏，价格昂贵，细胞分离困难，活力难以长时间维持。Ｐａｐａｄｉｍｉｔｒｉｏｕ等［２５］研究发现在解毒方面，肝细胞新鲜分离时比冷冻保存时能力强。Ｓａｉｃｈ等［２６１发现ＬＦＰ培养原代肝细胞时。可通过ｃａｓｐａｓｅ３和ｃａｓｐａｓｅ８等死亡受体途径诱导肝细胞凋亡。三，讨论细胞模型与动物模型相比具有价格低廉、易获取、重复性好、模型范围广泛，可采用不同Ｉ。ＦＰ，对其代谢、解毒、合成、生物转化功能进行研究。同时ＨＦ研究离不开动物实验，合适的动物模型是各种基础和治疗的性能评价及进一步临床应用的重要条件。细胞模型和动物模型互相补充，可从不同角度对ＨＦ进行研究。参考文献ｔＣｈａｎｇＡＪ，ＤｉｘｉｔＶ，ＳａａｂＳ．Ｆｕｌｍｉｎａｎ“ｅｐａｔｉｃｆａｉｌｕｒｅ．ＣｕｒｒＴｒ∞ｔ・１６５・（）ｐｔｉｏｎｓＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ。２（＇（）３，６：４７３—４７９．２ＫｅｖｉｎＥＪ．ＧｕｎｎｉｎｇＨｅｐａｔｉｃｆａ订ｕｒｅ．Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉａ＆ｉｎｔｅｎｓｉｖｅｃａｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅ。２０Ｉ）６．７：１１９—１２（Ｊ．３ＮｉｌｓＲ。Ｆ巾ｈａｕｆ・ＫａｒｌＪ．ｅｔａ１．Ａｂｉｏａｎｉｆｉｃｉａｌｌｉｖｅｒｓｕｐｐｏｒｔｓｙｓｔｅｍｕｓｉｎｇｐｒｉｍａｒｙｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ：ａｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｙｉｎａｎｅｗｐｏｒｃｉｎｅｈｅｐａｔｅｃｔｏｍｙｍｏｄｅｌ．Ｓｕｒｇｅｒｙ，２ｌＭ｝４，１３６：４７—５６．４ＮｉｅｕｗｏｕｄｔａＭ．ＫｕｎｎｉｋｅｂＲ，ＳｍｕｔｓｃＭ，ｅｔａ１．Ｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎｃｒｉｔｅｒｉａｆｂｒａｎｉｓｃｈｅｍｉｃｓｕｒｇｊｃａｌｍｏｄｅｌｏｆａｃｕｔｅｈｅｐａｌｉｃｆａｉ】ｕｆ芑ｉｎｐｉｇｓ．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ，２Ｉ＇‘１６．２７：３８３６・３８４５．５ＨａｎｉｄＭＡ．ＭａｃｋｅｎｚｉｅＲＬ。ＪｅｎｎｅｒＲＥ。ｅｔａ１．Ｉｎｔｒａｃｒａｎｉａｌｐｒｅｓｓｕｒｅｉｎｐｉｇｓｗｉｔｈｓｕｒｇｉｃａｌｌｙｉｎｄｕｃｅｄａｃｕｔｅｌｉｖｅｒｆａｉｌｕｒｅ．ＧａＳｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，１９７９，７６：１２３—１３１．６ＢｅｎｏｉｓｔＳ，ＳａｒｋｉｓＲ，ＢａｕｄｒｉｍｏｎｔＭ．ｅｔａ１．ＡＲｅｖｅｒｓｉｂＩｅＭｏｄｅｌｏｆＡｃｕｔｅＨｅｐａｔｉｃＦａｉｌｕｆｅｂｙＴｅｍｐｏｒａｒｙＨｅｐａｔｉｃｌｓｃｈｅｍｉａｉｎｔｈｅＰｉｇ．ＪＳｕｒＲｅｓ，２ｌＪ（）【）．８８：６３．６９．７Ｉ。ｅｉｓｔＭ，ＧａｎｔｎｅｒＦ．ＫｕｎｓｔｌｅＧ，ｅｔａ１．Ｔｈｅ５５－ｋＤｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｄＣ【为５ｉｒＩｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｙｓｉｇｎａｌｍｕｒｉｎｅｈｅｐａｔｏｃｙｔｅａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｉｖｅｒｆａｉｌｕｒｅ．ＭｏｌＭｅｄ，１９９６。２：１｛）９—１２４．８ＥｇｕｉａＬ。ＭａｔｅｒｓｏｎＢＪ．Ａｃｅｔａｍｉｎｏｐｈｅ小ｒｅｌａｔｅｄａｃｕｔｅｒｅｎａｌｆａ订ｕｒｅｗｉｔｈｏｕｔｆｕｌｍｉｎａｎｔｌｉｖｅｒｆａｉｌｕｒｅ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ，１９９７．１７：３６３—３７０．９ＬｕｂｅｋＢＭ，ＢａｓｕＰＫ，ＷｅｌｌｓＰＧ．ＭｅｔａｂｏＩｉｃｅｖｉｄｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｅｎｚｙｍａｔｉｃｂｉｏａｃｔｉｖａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃａｔａｒａｃｔｏｇｅｎｉｃｉｔｙｏｆａｃｅｔａｍｉｎｏｐｈｅｎｉｎｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｓｕｓｃｅｐｔｉｂＩｅ（Ｃ５７ＢＩ。／６）ａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｔ（ＤＢＡ／２）ｍｕｒｉｎｅｓｔｒａｉｎｓ．ＴｏｘｉｃｏｌＡｐｐｌＰｈａｍａｃ０１．１９８８。９４：４８７－４９５．１０ＢａｕｄｏｕｉｎＳＶ。ＨｏｗｄｌｅＰ．（）’ＧｒａｄｙＪＧ．ｅｔａ１．Ａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙ
肝细胞移植治疗肝衰竭研究进展
实用 肝 脏 病 杂 志 ２０ ０ ７年 ６月 第 １ Ｏ卷 第 ３期
ＪＣｉ ｐ ｔｌＪ ｎ ０ ７ Ｖｏ．０， ． ｌ Ｈｅ ａｏ ，ｕ ｅ２ ０ ． ［１ Ｎｏ ３ ｎ
Ｐａ ｈｏ ， ９９ ９２： １ ｔ ｌ １ ７， ４ｌ ．
［ ５ 范 建 高 ， 民德 ， 继 强 ， ．肝 内 脂 肪 和脂 质 过 氧 化 与 １］ 曾 李 等
ｅｃｅ ｒ－ｅｒｔｒ ｎｉ ｎｏ ｓａｉ ｓｒｍ［］．Ｉｄａ ｘｒｔ ｙｓｃｅ ｙａ ｔ ｅ ｆ ｃｒ ｅｕ Ｊ ｏ ｏ ｇ ａ ｓ ｎｉ ｎ
Ｊ Ｇａ ｔｏ ｎ ｅ ｏ ｓ ｒ ｅ ｔ ｒ ｌ，２ ０ ，１ （ ） ｌ ９ １ １ ００ ９ ３ ： １ —２ ．
［ Ｏ 程 明 亮 ， 长 青 ． 纤 维 化 的 基 础 研 究 及 临 床 ［ ． ２］ 杨 肝 Ｍ］ 北
［ ７ 李 培 建 ， 保 忠 ， 爱 民 ， ． 四氯 化 碳 、 血 白 蛋 白所 １］ 梁 王 等 人 致 大 鼠 肝纤 维 化动 物 模 型 的 实 验 研 究 ［］ Ｊ ．实 验 动 物 科 学 与 管理 ，０ ０ １ （） ３ ． ２ ０ ，７２ ：２ ［８ 朱 起 贵 ， 步 武 ， 贺 算 ， ． 血 清 白蛋 白致 免 疫 损 伤 １］ 方 吴 等 牛 性肝纤维 化 动物 模 型 的 研 究 ［ ］ 中 华 病 理 学 杂 志 ， Ｊ．
［］ 宋健 ， 惠 闽 ， 平 ， ２ 钟 姚 等． 苦 参 素 对 实 验 性 大 鼠 肝 纤 维 化 的 防 治作 用 ［］． 中 国 中 西 医 结 合 消 化 杂 志 ，０ ２ ，１ Ｊ ２０ ０
（ ） ２ ２ ２ ６ ５ ：８ — ８ ．
肝 纤 维 化 关 系 的 实 验 研 究 ［ ］ 中华 内 科 杂 志 ，９ ７ ３ Ｊ． １９ ， ６
急性肝功能衰竭的研究进展
Ａ Ｌ Ｆ早期可 出现 恶心 、 呕吐 、 腹泻等 临床表现 ， 急性期 可表 现 为黄疸 、 凝血障碍 、 昏迷等 ， 肝性脑 病主要表 现为精 神迟钝 、
间为 ８— ２ ８ ｄ ） 、 亚急性 肝衰 竭型 （ 时间 为 ２ ９ ｄ一１ ２ ｗ） 。其 中超
４ 治 疗
定义 ， ２ ０ ０ ５年 ， 美 国肝病 学 会 在 Ａ Ｈ Ｆ的基 础 上进 行 完 善 ， 将
Ａ Ｌ Ｆ确定为 ： 在发 病 ２ ６周 内出现凝血障碍 （ Ｉ Ｎ Ｒ≥１ ． ５ ） 和肝性
脑病的首次发病者 。在我 国， 病毒是 引起肝 衰竭 的主要病
因， 而病 毒性 肝衰竭多引起 慢性肝 衰竭 ， 且首次 发病类 似 以急
急性肝功能衰竭 （ ａ ｃ ｕ ｔ ｅ ｌ ｉ ｖ ｅ ｒ ｆ ａ ｉ ｌ ｕ ｒ ｅ ， Ａ Ｌ Ｆ ） 是 由多种 因素引 起 肝细胞在短期 内发生严 重损 害 ， 且 可并发 肝性脑病 、 凝 血功 能障碍及其他器 官衰竭 的临 床综合 征 ， 其病 死率 高达 ７ ０ ％～ ８ ０ ％ … 。在我 国 ， Ａ Ｌ Ｆ最常见 的病因是 病毒性 肝炎 ， 其 次为药 物性原 因。 目前 ， 对 Ａ Ｌ Ｆ的治疗 最 为有效 的方 法是 原位肝 移 毒性肝衰竭患者 中乙型肝炎所致 占 ６ ２ ． ９ ％ 。而 Ｆ ｏ ｒ ｂ ｅ ｓ 等 报 道美 国非 甲非 乙或丙 型肝 炎所致 Ａ Ｌ Ｆ占３ ８ ％。单纯丙 型肝病 毒不易 引起肝衰竭 ， 往往是 重叠其 他类型病 毒才会 引起 Ａ Ｌ Ｆ 。 在这 几种病毒 引起的肝衰竭 中 ， 以甲型肝炎预后 最好 ， 生 存率 为７ ０ ％， 而非 甲非 乙型肝炎最差 ， 生存率 ＜２ ０ ％【 １ ０ ３ 。 在英 、 美等发达 国家 ， 药 物损 害是 引起 Ａ Ｌ Ｆ的主要 原 因。 如在英 国 ， 对 乙酰氨基酚服用过量是 Ａ Ｌ Ｆ的主要原 因 ， 病 死率
药物肝毒性评价体外细胞模型的相关研究进展
1.3 多能干细胞来源的肝样细胞随着干细胞技术的革新，多个研究团队通过模拟胚胎发育过程中肝脏的发育过程，定向诱导胚胎干细胞(human embryonic stem cells，ESCs)为肝样细胞[17]，并能够表达包括药物代谢酶和外排转运蛋白在内的几乎完整的生物转化系统[18]然而，无论何种诱导分化方案，所获得的肝样细图1 2D培养的人原代肝细胞用于非酒精性脂肪肝病模型研究[31]图2 肝素-水凝胶三明治夹心培养体系[37]。
(A) 肝素-聚乙二醇水凝胶夹心法培养肝细胞体系制备示意图。
(B) 分别培养7天，15天后肝素-水凝胶夹心与胶原夹心体系MRP2（形成胆小管网络）表达水平Figure 2. Heparin-hydrogel sandwich. (A) Schematic diagram of preparation of heparin-polyethylene glycol hydrogel sandwich model. expression of MRP2 (forming a bile duct network) in the heparin-hydrogel or collagen sandwich system after 7 or 15days of culture基于生物支架的3D培养模型结合高内涵技术的药物安全性评价体系[42]。
(A) 基于生物支架的3D培养模型构建及高内涵成像分析示意图。
(B) 利用高内涵成像技术对多种潜在肝毒性药物可能引起的关键事件分析Figure 3. A 3D culture drug safety evaluation system based on biological scaffolds combined with a high-content . (A) Schematic diagram of 3D culture modelbiological scaffolds and high-content(B) Using high-content imaging technologykey events that may be caused bypotentially hepatotoxic drugs图4 多种细胞混合培养模型与微流控技术结合构建人工[51]。
肝功能衰竭预后模型及其应用评价
重要工具 ， 现对几个有影响力的模型特点及应用情况作一简
要介绍 。
１ Ｃ Ｐ（ ｈｌ Ｔ ｒｏｔ— ｕ ｈ 评 分 和 分 级 Ｔ Ｃ ｉ— ｕｃ ｔ Ｐ ｇ ） ｄ ｅ
脏的干细胞能够在短期 内达到改善肝功能的 目的 ， 不能在 但 脾脏内形成有效的肝 小叶等排泌结构 ， 其依赖于脾脏 内于细 胞的分化 ， 长期效果主要是脾脏 回流到肝脏的干细胞分化增 殖所致 ， ａｕ 等将卵 圆细 胞移植 到 Ｎ ｇｓ 鼠（ Ｙ ｓｉ ａａｅ大 一种 遗传 性血清 白蛋白缺乏症大鼠） 肝脏 ， 血清 白蛋 白升高并维持 １ ０ 周， 表明肝干细胞 在受体 鼠体 内分化为成熟的具有功能的肝 细胞 Ｋ ｓｌ 等通过 门静脉进 行干细胞 移植治疗 Ｗｉｏ ｕｈｄ ａ ｌ ｎＳ ｓ 病模 型小 鼠， 移植 后 ｌ ， 内发现 干细胞 来源 的肝细胞 ， ４天 肝 而腹腔 内移植则无此 发现。Ｆｎ等 在此途 径进行 干细胞 移 ａ 植 亦有类似发现 ， 并发现干 细胞可经肝脏种植于脾及骨髓 中。在经 门静脉移植临床应用 中， 由于移植后 门静脉及肝小 静脉的血栓形成而影响其 广泛应用。杜智等采 用 Ｄ 氨基半 一 乳糖制备大鼠暴发性肝功能衰竭模 型， 以同系大 鼠来源 的肝 于细胞经肝脏 移植 ， 结果表明肝干细胞移植组 大鼠 一 般情况
性 的结果 ）②外源性基因导入 肝干细胞相对容易 ； ； ③不但 可
分 化为肝细胞 ， 而且可 分化 为胆 管上皮 细胞 及其他 间质 细
胞， 对肝组织结构重建及功能恢 复更为有利 ； 分化 不成熟 ， ④
免 疫 原性 弱 。 ２ 肝 干 细胞 移 植 的 现状
激素治疗肝衰竭前期
104 (91.2% ) 12.1± 5.9 6.3± 1.5
152.0±40.9
0.272 0.274 0.533 0.649
1111.0±765.0 0.525
1009.3±734.9 0.076
38.0±3.9
0.634
267.9±102.4 60.6±19.5 234.3±468.7 6.20±1.49 1.32±0.85
---SAHF 起病4周至24周出现的肝功能衰竭，以腹水 或肝性脑病为主要特征
肝衰竭临床分型的历史变更
2005年美国肝病学会将既往无肝硬化基础者 突然出现的肝功能丧失定义为急性肝衰竭，其 标准是：
---既往无肝硬化基础，2008年改为无慢性肝病 ---凝血酶原时间国际化比率(INR)≥1.5 ---存在不周程度的肝性脑病 ---从起病至肝性脑病的时间小于26周
消化道症状 ---黄疸迅速加深 ，TB ≥171μmol/L，或每日上升
≥17.1μmol/L ---凝血酶原时间明显延长，PTA≤40% 暴 发 性：无慢性肝病，起病2周内达到标准 亚暴发性：无慢性肝病，起病15天-26周内达到标准 慢加急性：慢性肝病，急性发作， 26周内达到标准
急性肝衰竭的临床分期
0.284 0.829 0.386
0.552 0.138
4.60±3.37 0.585
激素治疗对肝衰竭前期患者预后的影响
120
100
96.4
80
70.2
60
40
激素组
52.6
对照组
20 8.9
0 肝衰竭发生率
存活率
短疗程激素治疗能有效减轻pre-ACLF患者肝组织炎症坏死
肝衰竭前期患者治疗前后肝功能变化
终末期肝病的模型与评价指标的研究进展
１ ． １ Ｃ ｈ ｉ ｌ ｄ ． Ｔ ｕ ｒ ｃ ｏ Ｒ ｅ ． Ｐ ｕ ｇ ｈ ￣型 （ Ｃ Ｔ Ｐ） １ ９ ６ ７ 年Ｃ ｈ ｉ ｌ ｄ ￣ １ ］ Ｔ ｕ ｒ ｃ ｏ ｔ ｔ ｅ 联合 ，得 到的ＭＥ Ｌ Ｄ联合血清钠模型 （ ＭＥ Ｌ Ｄ — Ｎａ ）＝ＭＥ Ｌ Ｄ
ｉ ｆ ｌ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ａ ｔ ｅ ，ＧＦ Ｒ）。本文就上述预 后评分模 型和 临床评 化 腹 水 患 者 死 亡 的独 立 预 测 指 标 ， 其 导致 终 末 期 肝 病 患 者
价 指标 的研 究进 展作如下综述 。
１ 终 末 期 肝 病 的模 型
的病 死率 远高于 由其 他并 发症 引起 的患者［ １ … 。Ｂｉ ｇ ｇ ｉ ｎ ｓ 等¨ 】 １ ］
９ ８ ・综 述
・
中 国肝 脏病 杂 志 （ 电子 版 ） 》２ ０ １ ４ 年 第６ 卷 第３ 期
终末期肝病的模型与评价指标的研究进展
耿 明凡 ，高方媛 ，谷 莉 莉 ，曾辉 ，王 宪波 （ １ ． 首 都医科 大 学 附属北 京地 坛 医院 ，北京 １ ０ ０ ０ １ ５ ；２ ． 首都
医科大 学 附属 北京 地坛 医 院 传染 病研 究 所 ，北 京 １ ０ ０ ０ １ ５ ；３ ． 新发 突发 传染 病 研 究北 京市 点实验 室 ，北
京 １ ０ ０ ０ １ ５ ）
终 末 期 肝病 临床 病 死 率 高一 直 是 困扰 医学 界 的 重 要 汁淤积性和酒精性肝硬化为０ ，其他原 因为 １ ）。临床研 究中 Ｌ Ｄ 模 型评价肝脏疾病严重程度得 到了广泛 的关注。 难题 。患 者多 由于肝脏储 备功 能 、疾 病病 因、肝脏 肿瘤 等 关于ＭＥ 因素 而导致病 情严 重程度 不 同。因此 ，真 实、客观 地判 断 Ｌ ｅ ｅ 等 对 ５ ３ 例 爆 发 型 肝 衰 竭 的 患 者 进 行 分 析 ，发 现 ＭＥ Ｌ Ｄ
分子吸附再循环系统(MARS)治疗肝衰竭临床研究进展
子毒 素 ， 血浆 不与活性 炭和树脂 直接接 触 ， 不会发 生 凝血 因子和蛋 白质 的吸附和破坏 ， 不会 丢失激素 、 生
长因子 等有 益物 质 。最后 是借 用常规 透析机 进行 透 析循环 。 Ｒ 人工肝透 析器是特 殊 的低通 透析器 ， Ａ Ｍ Ｓ 膜 的总面 积 １ ８ ２ ． ｍ 。血 液 中的大 部分水 溶性 物质 如 尿 素 、尿 酸 、肌酐 、氨可 被有效清 除 ，同时， 还可 去 除部分 水份， 维持 白蛋 白浓 度， 使透析 液酸碱 及 电解 质浓 度恢 复正常 。 总之 ，通 过血液循 环 、 白蛋 白再生循环 和透析
维普资讯
虫国 血液 渔化 ２ Ｑ ２玺 ｌ Ｑ且簋 鲞 筵 ｌ 期 ｉ 』四趔 旦 ￡ Ｑ 盟 Ｑ ！ 盟 ， ！ 照 １。 ２ ！ 垒！ ・ ５ 』 ｏ Ｑ￡ ２ ２ ， ， Ｑ ５ １・
・
人 工 肝 ・
分子吸附再循环系统 （Ａ Ｓ 治疗肝衰竭 临床研究进展 Ｍ Ｒ）
胞 的再 生 ，使 衰竭肝 脏功 能得 以恢 复或 为肝移 植提 供 桥梁 的作用 ］ 。
２ ＭＲ Ａ Ｓ人工肝在 肝衰竭 治疗 中的临床应 用
２ １ 在肝移 植 围手 术期 的应 用 ．
病 毒 性 肝 炎及 各 种 原 因所 致 肝 衰 竭 死 亡率 较
作者单位： ２ １ ０ 上海 ，上海市 （ ０ ５８ 复旦大学附属） 公共卫生 临床 中心 血液净化室
型 的人工 肝支持 系统 ，可有 效地清 除体 内脂溶性 蛋
白结合毒 素和 中小分子 水溶性 毒素 ，初步 研 究显示 ＭＲ Ａ Ｓ对多种 原因所致 的肝衰竭 和多脏器 衰竭 有 良好 的治疗作 用 ｎ。。本 文结合 国内外 近几 年文 献 ，就 一】 Ａ Ｓ Ｍ Ｒ 在 肝衰竭 治疗 中的临床应用 进展作 一综述 。
肝衰竭肝细胞凋亡和膨胀性坏死分子机制研究进展
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Ｉ ｆｃ ｓＩ ｆ ， ０ ， １ ， ． ｎ ｅ ｔ ｎ ｏ ２ ０８ Ｖｏ． Ｎｏ２ Ｄｉ ２１
肝衰竭肝细胞凋亡和膨胀性坏死分子机制研究进展
胡瑾华
解放 军第三 。二 医院
中 图 分 类 号 ： ５ ２６ Ｒ １ ．
北京
ｐｓ 化 ， 终激 活 ｃｓａｅ３导致 细胞 凋 亡 。肝 ａｅ ９活 最 ａｐｓ ， 细胞属 于 Ⅱ型凋亡 细胞路径［ ５ １ 。
素 ｃ释放。目前细胞色素 ｃ释放机制仍有争议 ， 较 为认 可的有两种机制：第一种机制是 Ｂ ｌ２ ｃ 家族中 一 促凋亡分子 ， ｔｉ、ａ、ａ 如 Ｂｄ ＢｘＢｋ能促进线粒体外膜上 细胞色素 ｃ特异性释放通道形成， 但关于通道 的分 子组成仍不清楚 。第二种机制的研究者认为线粒 体 内膜小孔能非特异的让小 于 １ ０ ａ的溶质 自 ０Ｄ ５ 由出入 ，这些小孔又称为线粒体通透性转换 （ ｉ～ ｍｔ ｏ
ｃｏｄ Ｍ ｐｒ ａｉｔ ａｓｉ ， Ｔ） Ｌ ， 孑 开 放 ｈｎｆ ｅｍｅｂｌｙｔ ｎｉｏ ＭＰ 孑 ，Ｊ Ｌ ｉ ｉ ｒ ｔｎ 、
１ ． 细胞 内路径 在细胞线粒体水平触发完成 。 ．２ １ 刺激物在细胞 内激活 Ｂ ３ Ｂ ｘ引起线粒体外膜 Ｈ 和 ａ， 通透性改变， 细胞色素 ｃ 释放人胞浆 ， 诱导 ｃｓａｅ ａ ｓ９ ｐ
细胞 内途径 还是 细胞外途 径 ，其 中心 环节为细 胞色
Ｉ 型凋亡细胞 ， ｓａｅ 直接激活 ｃ ｐｓ ３ ｃ ｐｓ ８ ａ ａ ａ 导致细 ｓ ｅ 胞 凋 亡 ；Ｉ 凋 亡 细 胞 ，ａｐｓ Ｉ型 ｃｓａｅ８先激 活 促 细胞 凋 亡 因子 Ｂ 蛋 白， ｉ ｄ 引起线粒体外膜通透性改变 ， 细胞 色素 ｃ释放入细胞浆 ， 凋亡信号被放大和加速 ，ａ ｃｓ ～
物理型人工肝治疗肝衰竭的研究近况
以 是 基 于 膜 平 衡 原 理 ． 过 半 透 膜 把 血 液 的治疗作用 作者基 于 ＨＦ及异体肝 移 浆 引入 装有 固态吸附剂 的灌流 器 中． 通 个体外肝支 持模 型， １ 清 除 某 些外 娠性 或 内 源性 毒 素 的 一 种方 将 ２ 与透析灌隔开 ， 小分子物 质借 助浓度 植原理提 出 一 中、 常用的 吸附材料是活性 炭和树脂等 ＝ 梯度在 膜两侧弥 散 ， 而达到清 除血液 只猪 行 肝 动 脉结 扎 并行 门体 循 环 分流 制 法 ， 从
陈耀 凯 （ 述 ）王 宇日 审校 ） 综 ， 月（
（ 三 军 医大 学 西 南 医院 全 军 感 染 病研 究 所 。 庆 第 重 ４０ ３ ） ０ ０ ８
中图分类号 ： ７ ． Ｒ５３ ３
文献标识码 ： Ａ
文章编号 ｛０３— ６ ３２ ０ ） ４ ２ ０— ３ １ ０ ０ ０ （０ ２０ —０ ４ ０
术 的不断进步 ， 其血液 净化效 果不断 提 除体 内氨等亲 水性物 质 ， 但不 易去 除脂 换术联 合应用 ， 可抵 消血浆置 换所致 的
高 ， 为 体 外 人 工肝 支 持 的重 要 方 法 ， 成 可 肪 酸 、 醇 、 硫 酚等 亲脂性 物 质 ， 人研制 高钠 血症、 有 代谢性 碱中毒 、 胶体渗透 压改
单 独或 与生物型人工肝联合组成混合型 出亲脂性高 流量聚 砜膜透析 器 。 该装置 变等 不 良反 应 ， 增 加肝 衰 竭 、 昏迷 时 并 肝
生物 人 工 肝 用 于 肝 衰 竭 的临 床 治 疗 现 与聚丙烯 腈膜透 析器 联合使 用， 可迅速 中分 子 物 质 清 除量 。 ｏ ｈｂ Ｙ ｓｉａ等 采用 将 近 儿 年 国井 在 物 理 型 Ａ 工肝 研 究 方 面 去 除 亲 脂 和 亲 水 性 肝 衰 竭 代 谢 产物 的主要进展作一综述 。 ２ 血 液 滤 过 （ｅ ｆ ｔａｉｎ， Ｆ ｈｍｏｉｒｔ ｌ ｏ Ｈ ）
HBV相关慢加急性肝衰竭免疫病理发病机制研究进展
HBV相关慢加急性肝衰竭免疫病理发病机制研究进展李晓东【期刊名称】《实用肝脏病杂志》【年(卷),期】2015(018)003【摘要】慢加急性肝衰竭(ACLF)是在慢性肝病基础上发生的急性肝功能失代偿.在我国,引起ACLF的首要病因是乙型肝炎病毒感染,其中病毒诱发的淋巴毒性T细胞活化和细胞因子大量分泌为代表的免疫病理损伤是肝衰竭发病的中心环节.本文将从抗原递呈、效应细胞的直接杀伤、宿主遗传背景、免疫相关细胞因子和免疫过激状态的抑制性调节等方面介绍HBV相关A-CLF免疫病理发病机制的研究进展.%Acute-on-chronic liver failure (ACLF) refers to an acute decompensated liver function in patients with chron-ic liver diseases and the most common cause of ACLF in China is HBV infection. Activation of cytotoxic T lymphocytes and increased cytokines can cause immunopathogenetic injuries in liver tissues. This article mainly reviewed the immunopathogenesis progress of HBV related ACLF.【总页数】4页(P317-320)【作者】李晓东【作者单位】100853 北京市解放军医学院;解放军第302医院【正文语种】中文【相关文献】1.HBV相关慢加急性肝衰竭患者Treg细胞、Th17细胞表达特点及其与HBV前C 区/BCP区变异的相关性 [J], 高海兵;郑瑞丹;王香梅;刘宝荣;潘晨;方建凯;林升龙;马华晳;陈秀敏;林明华2.磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶在急性肝衰竭小鼠模型及HBV相关慢加急性肝衰竭患者肝组织中的表达及意义磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶在急性肝衰竭小鼠模型及HBV相关慢加急性肝衰竭患者肝组织中的表达及意义 [J], 陈婧;刘晓燕;杨昊臻;黄坤;胡瑾华;辛绍杰3.HBV相关慢加亚急性肝衰竭患者外周血Th1、Th2、Th17的表达和意义 [J],顾静;甘建和;陈丽;王艳;姚运海4.HBV相关性慢加亚急性肝衰竭中医症候群积分与疾病分期及预后相关性研究 [J], 周意;孙克伟;阳航;黄裕红;张涛;朱文芳5.HBV相关慢加亚急性肝衰竭患者中Th17细胞、Treg细胞的变化及其与肝功能和HBV-DNA载量间的研究 [J], 沈敏;林明强;冯奇桃;吕友凯;李永武因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。