卵黄抗体在水产中的应用
卵黄抗体在水产上的使用状况
卵黄抗体又称卵黄免疫球蛋白（IgY），一般以鸡作为供体，经一种或多种特定抗原免疫诱导后在卵黄中蓄积，机体所产生的特异性抗体，具有类似哺乳动物IgG的免疫活性，可有效防治特定疾病。
近年来，在畜禽疾病的诊断与防治方面卵黄抗体的运用已非常广泛，可将其作为抗生素替代品或饲料添加剂等进行使用，在动物养殖业中具有广阔的应用前景。
目前，用卵黄抗体防治水产动物疾病的研究报道较少，但因其具有疗效确切、使用安全、无毒副作用、制备工艺简单、生产成本低等优点，使得以其防治水产动物疾病逐渐受到重视。
1.IgY的发展以及研究状况
1893年，著名德国医生莱比锡通过免疫蛋鸡的试验发现其所产鸡蛋的蛋黄中具有能中和免疫原的特异性蛋白质，即卵黄抗体IgY。
自此，各国学者相继对其分子结构、理化性质、制备工艺、检测方法及应用等领域进行了广泛而深入的研究。
20世纪80年代以来，归因于商品试剂的推广，IgY抗体开始进入商品应用。
1996年，IgY抗体的生产和应用被定义为IgY技术。
如今，它己是一个世界性的标准化技术。
1996年，欧洲实验方法替换确认中心推荐使用IgY来代替哺乳动物IgG，以减少由于抗体采集而造成对动物的伤害。
1999年，基于对动物权益的保护，IgY技术被瑞士联邦政府兽医办公室接受为可行的替代办法。
美国的FDA己将特异性卵黄免疫球蛋白视为替代抗生素的首要候选药物，日本政府投入巨资扶持“禽源抗体产业”。
美国、韩国、台湾等发达国家和地区利用卵黄抗体成功研制了各种功能性食品、饲料添加剂和防制动物疫病的生物制品。
目前，在人类医学、动物医学、动物科学和其他诸多生命科学领域，有关卵黄抗体产品的研发与应用呈逐年上升趋势，尤其是卵黄抗体代替抗生素在动物生产中的应用被广泛认可。
2.IgY的理化性质
IgY是一种7S免疫球蛋白，分子量约180kD，由两条重链(分子量67-70kDa)和两条轻链(分子量22-30kDa)组成，含氮量为14.8%。
IgY的结构与哺乳动物的
IgG相似，具有典型的免疫球蛋白的空间构象，也可与抗原结合。
IgY的pH稳定性较好，在pH4.0-11.0时比较稳定，pH 3.0-3.5时活性迅速下降，pH 12.0时活性亦有所下降，在pH > 12.0 时迅速失活。
此外，IgY也具有良好的耐热能力。
在低于75℃条件下，具有良好的热稳定性，高于80℃大部分IgY 将失去活性。
IgY制剂在4℃存贮5年或在室温贮存6个月其活性仍无明显变化或下降，IgY对胃蛋白酶有较好的抵抗力，但对胰蛋白酶十分敏感。
IgY具有耐巴氏消毒，而且耐反复冻融的特性。
3.IgY的分离纯化
鸡卵黄提供了一个大量的、廉价的、易纯化的抗体来源。
一只蛋鸡每年可产200-300枚蛋，从一枚鸡蛋中可获得100-200mgIgY。
如何将大量的卵黄抗体提取出来，是决定IgY能否被广泛应用的一个重要前提。
鸡卵黄中含有水48.0%、蛋白质17.8%和脂肪30.5%，其中几乎所有脂肪都与蛋白质相结合而以脂蛋白的形式存在。
卵黄中不与脂肪结合的蛋白为水溶性蛋白，IgY则为水溶性蛋白，它以Y活性蛋白的形式与另外两种水溶性蛋白-α活性蛋白(鸡血清蛋白)、β活性蛋白以及其他各种脂蛋白一起存在于卵黄中。
从卵黄中获得IgY的过程包括分离、提取、纯化。
IgY分离纯化的原则是简便、高效、经济。
目前常用的分离方法主要有：有机物沉淀法、有机溶剂抽提法、水稀释法、超临界气体提取法、去污剂分离法等（表1）。
为了将IgY提取出来，主要通过超滤法或沉淀法来完成。
沉淀法所用的沉淀剂可以是无机物、有机物或有机溶剂，也可以采用多种方法联合沉淀，或沉淀法和超滤法相结合提取。
其中水稀释法最为简单和经济，利用卵黄抗体可溶于水的特性，除去不溶的脂蛋白。
Akita等使用此法，每毫升卵黄中获得9.8mg的抗体，回收率达到了91%。
有机物沉淀法使用的有机溶剂主要有PEG6000、硫酸葡聚糖等，有机溶剂如氯仿，生物制剂如角叉藻胶等也都能够较好地去除脂蛋白，获得卵黄抗体。
为满足不同的使用目的，多数情况下需对提取得到的卵黄抗体进一步纯化，纯化时常用的方法有：凝胶层析、离子交换层析以及亲和层析。
目前使用的提取、纯化方法各有优缺点：沉淀法简单、经济，但其提取的物质纯度低；亲和层析能得到高纯度的特异性卵黄抗体，但因产率低、费用高而不能得到大规模应用，仅
适用于科研。
从工艺路线上看，水稀释法具有工艺简便、生产成本较低、采用适当的方法进行纯化，产品纯度和回收率高等优点，比较适合大规模工业化生产。
4.IgY的稳定性的保护
对于幼龄动物，消化系统尚未发育完全，IgY可抵抗其消化酶的消化，故可将一定量的针对某些疾病的IgY添加到饲料或饮用水中，使幼龄动物获得被动免疫保护。
对于成年动物，为了减少添加的IgY的损失，可采用一定的措施，如IgY的优化和设计。
Shimizu等(1992)用蛋黄中提取的卵磷脂和胆固醇为壁材，用脱水-复水法对IgY进行包埋制成脂质体，试验发现脂质体包埋的IgY在酸性条件下稳定性显著
提高！在pH2.8条件下处理1h后，稳定性变化不大。
此外，柠檬酸盐、磷酸盐、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、乳糖等对IgY的热稳定性均有一定保护作用。
Li等(2009)研究了以壳聚糖-海藻酸钠微囊为载体对卵黄抗体的口服保护效果。
5.IgY在水产上的应用
5.1 IgY在细菌性水产疾病中的应用
在126种病害中，细菌性疾病有61种，约占48%。
水产养殖细菌性疾病主要有弧菌病、爱德华氏菌病、出血病、烂鳃病、赤皮病、腐皮病、腹水病、细菌性败血症和细菌性肾病等。
引起这些疾病的病原主要有：鳗弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、灿烂弧菌、迟缓爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、鳗败血假单胞菌和鲑鱼肾杆菌等。
目前，使用卵黄抗体技术防治水产动物细菌性疾病已有诸多研究报道且防治效果良好（见表1）。
表1卵黄抗体在细菌性水产疾病中的应用
5.2 IgY在病毒性水产疾病中的应用
白斑综合症病毒是一种传播速度快，传染范围广的强感染力病毒，使对虾养殖业经济受损严重。
雷勇等用提纯的白斑综合征病毒( WSSV) 接种蛋鸡后制备卵黄干粉，将其按照0.1%和0.2%比例添加到螯虾的基础饲料中，连续投喂7d后进行攻毒试验，攻毒后恢复相应的饲料投喂。
结果表明: 低剂量组在攻毒后螯虾死亡率虽然达到100%，但死亡时间得到延迟；而高剂量对螯虾有明显的保护作用，使其死亡率不到30%。
5.3 IgY在水产品保鲜中的应用
Xu等制备冷藏牙鲆的特定腐败菌—腐败希瓦氏菌和荧光假单胞菌的特异性卵黄抗体。
在4℃条件下，将试验组鱼片浸于100mg/mL的特异性卵黄抗体溶液中后无菌包装，4℃冷藏，每3d取样进行微生物分析、化学分析和感官评定。
结果表明，特异性卵黄抗体处理后，试验组鱼片的细菌总数明显降低；货架期从8—9d延长至12—15d；化学分析结果证明，挥发性盐基氮值和硫代巴比妥酸值均明显低于对照组；感官评定中，评分低于4分（判定为不新鲜）的时间!也延长了3—6d。
微生物、化学及感官指标保持很好的一致性。
5.4 IgY在水产寄生虫诊断中的应用
Young等制备了抗太平洋鲑鱼微孢子虫的特异性卵黄抗体。
间接免疫荧光抗体试验结果显示，检测固定化的Loma salmonae孢子，有特异性荧光反应。
免疫组化试验结果显示L.salmonae孢子孢子在鲑鱼各组织中染色程度强，最早可在接触感染4周后，在鳃和心脏感染组织切片中，检测出生长阶段的寄生虫寄主复合体。
交叉反应试验中，卵黄抗体与其他微孢子虫如Pseudolomaneurophilia和Glugeaanomala无交叉反应，表明其具有良好的特异性，适于其他水产动物的病原诊断。
6.IgY在水产上的应用方式
用卵黄抗体控制水产动物疾病的方式主要有注射、口服和浸浴。
理论上认为，注射方式效果最为直接，血清中的抗体水平更高。
用腹腔注射、口服和加入饲料
中等方式研究抗鳗弧菌特异性卵黄抗体对虹鳟的被动免疫保护作用发现，这3种方式均能明显提高虹鳟的抗病能力，其中注射效果最好，死亡率明显低于口服组和饲喂组。
卵黄抗体的使用方式不同，保护效果也不同。
饲喂方式延长了卵黄抗体在胃酸和消化酶环境中的时间使卵黄抗体极容易被破坏，影响了其免疫保护效果。
但是，注射对鱼体刺激较大，腹腔注射卵黄抗体很容易引起鱼体的免疫应答，使其产生相应抗体与之结合，调动其他免疫机制清除进入鱼体的卵黄抗体。
口服特异性卵黄抗体，能够直接有效地抑制肠道病原菌的黏附、聚集和增殖，调节肠道菌群平衡。
卵黄抗体使用方式不同、保护效果不同，其原因可能是不同病原菌对鱼的感染方式不同。
7.问题与展望
卵黄抗体高效、低成本、收集抗体无需采血符合动物权益，且对环境友好，无毒副作用，无残留，作为抗生素类药物和化学保鲜剂的替代品，在水产疾病防治、水产保鲜及病害诊断中具有巨大学术意义和应用价值!
虽然卵黄抗体有很多优点，但是目前生产的卵黄抗体也存在着一定的缺点，如可能带有传染性疾病的病原，将会对养禽业造成潜在的威胁。
卵黄抗体是高蛋白物质，营养丰富容易带菌，或于生产过程中感染细菌。
同时，多种卵黄抗体对相对应的疾病在早期都有很好的疗效，但当病情严重的时候，其效果不佳。
卵黄抗体使用后一般7—5d保护率很高，14d后保护率降低较明显。
说明卵黄抗体的半衰期短，适合紧急预防和治疗。
嗜水气单胞菌亚单位成分卵黄抗体在鳗鲡养殖中应用的开题报告
嗜水气单胞菌亚单位成分卵黄抗体在鳗鲡养殖中应用的开题报告一、研究背景鳗鲡是一种重要经济鱼类，其肉质鲜美，深受市场欢迎。
但是，鳗鲡养殖过程中，常受到各种细菌和病毒的侵袭，严重威胁养殖效益和生产能力。
因此，寻找有效的预防和治疗方法显得尤为重要。
嗜水气单胞菌是一种常见的水产细菌，常常导致鱼类的感染。
根据以往的研究，卵黄抗体可以有效地抑制嗜水气单胞菌的生长和感染。
因此，本研究将探讨嗜水气单胞菌亚单位成分卵黄抗体在鳗鲡养殖中的应用。
二、研究目的1. 提取嗜水气单胞菌亚单位成分。
2. 制备卵黄抗体。
3. 检测卵黄抗体对嗜水气单胞菌的抑制作用。
4. 将卵黄抗体应用于鳗鲡养殖中，研究其预防和治疗效果。
三、研究内容和方法1. 提取嗜水气单胞菌亚单位成分选取常见的嗜水气单胞菌菌株进行培养，并采用离心法获得细菌菌体沉淀。
将菌体沉淀与去离子水混合，震荡后超声离解，离解液中含有嗜水气单胞菌的亚单位成分。
2. 制备卵黄抗体将采集的鸡蛋卵黄分离出来，加入亚单位成分离解液进行混合和提取。
采用硫酸铵分级沉淀和酵母蛋白A亲和层析法进行纯化，获得具有高抗体活性的纯化卵黄抗体。
3. 检测卵黄抗体对嗜水气单胞菌的抑制作用采用琼脂扩散法和生物测定法进行检测，确认卵黄抗体是否对嗜水气单胞菌有抑制作用。
4. 将卵黄抗体应用于鳗鲡养殖中，研究其预防和治疗效果将卵黄抗体喂养给鳗鲡，观察鳗鲡的存活率和病情，研究卵黄抗体对鳗鲡的预防和治疗效果。
四、研究意义本研究旨在寻找一种新型的鳗鲡养殖方法，尝试通过卵黄抗体来预防和治疗嗜水气单胞菌病，提高养殖效益和产能。
研究成果可为其他鱼类的养殖提供借鉴和推广，有极大的经济和社会意义。
大连理工大学科技成果——特异性卵黄抗体替代抗生素技术
大连理工大学科技成果——特异性卵黄抗体替代抗
生素技术
一、产品和技术简介
针对国内外食品安全存在的现实问题，研究开发了具有高度专一性的特异性卵黄抗体系列产品，应用于家畜、水产动物重大疾病的防控（如仔猪大肠杆菌性腹泻、奶牛乳腺炎、对虾白斑综合征、鱼细菌性败血症、海参腐皮综合征等），水果保鲜剂以及口臭防治等方面。
产品具有安全无残留、不产生抗药性、价廉易得等优点，是一种具有广阔应用前景的抗生素替代品。
目前，全球用于促进动物生长和保健的抗生素所占市场份额为100亿美元，如果本项目产品预计取代饲用抗生素10%的国际市场，将意味着具有近10亿的市场份额。
二、应用范围：
人、陆生和水产动物
生产条件：主体生产设备：蛋黄粉加工设备；辅助设备：设备操作台、贴标机、电控柜等。
三、规模与投资
年产400吨卵黄抗体系列产品（全蛋粉、蛋黄粉、卵黄抗体粉），设备总投资：500万元；厂房：1000M2；年产值可达1.25亿元，年净利可达6000万元。
保守估计，一个鸡蛋生产150毫克卵黄抗体计算，7枚蛋就可以生产1克IgY，7枚鸡蛋的成本约2.5元，加上提纯纯化、设备投资等方面的成本，其生产成本为12元/克。
四、提供技术的程度和合作方式：可工业化生产，合作开发。
卵黄抗体在疾病防治中应用的研究进展
卵黄抗体在疾病防治中应用的研究进展安芳兰;李菁;张荣;武发菊;武永淑;董文教;马全英;王凡;刘学荣【摘要】卵黄抗体是一种多克隆抗体,由禽类经特异性抗原刺激后通过B淋巴细胞产生并运行至卵黄中所形成,具有强大的免疫功能.对卵黄抗体的结构特点、理化性质、作用机理及其在各类动物疾病治疗预防方面的应用进行了综述,并指出了目前存在的问题.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2016(000)005【总页数】4页(P68-71)【关键词】卵黄抗体;免疫;疾病治疗;应用【作者】安芳兰;李菁;张荣;武发菊;武永淑;董文教;马全英;王凡;刘学荣【作者单位】中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046【正文语种】中文【中图分类】S855.3Abstract Egg yolk antibody is a kind of polyclonalantibody by specific antigen stimulation of poultry, which is produced by B lymphocyte and migrated to the yolk of polyclonal antibody, with a strong immune function. In this research, we reviewed the application of structural characteristics, physicochemical property and action mechanism of egg yolk antibody in prevention treatment of animal disease. The existing problems were pointed at present.Key words Egg yolk antibody; Immunity; Disease treatment; Application卵黄抗体(IgY)又称为卵黄免疫球蛋白(Egg yolk immunoglobulin)，是禽类经特异性抗原刺激，由B淋巴细胞产生并移行至卵黄中的多克隆抗体，大多数为IgG，具有强大的免疫功能。
特异性卵黄抗体作为药效营养品在饲料中应用
２卵黄抗体作用机理
关于ＩｇＹ的抗病机理，目前尚未完全阐明，推测 主要有两种：①可直接黏附于病原菌的细胞壁上，改 变病原菌细胞的完整性，直接抑制病原菌生长（Ｚｈｅｎ 等，２００８；Ｌｅｅ等，２００２）；②可黏附于病原菌的菌毛 上，减少或阻断菌毛对肠黏膜上皮细胞的黏附，抑制 病原菌侵染（Ｙｏｋｏｙａｍａ等，１９９２；Ｊｉｎ等，１９９８），从而减少腹泻的发生，促进仔猪生长。
ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｌｙ－ｆｒｉｅｎｄｌｙ ａｎｄ ｅｌｉｃｉｔｓ ｎｏ ｕｎｄｅｓｉｒａｂｌｅ ｓｉｄｅ ｅｆｆｅｃｔｓ，ｄｉｓｅａｓｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ Ｏｒ ｔｏｘｉｃ ｒｅｓｉｄｕｅｓ．Ｔｈｉｓ ｒｅｖｉｅｗ ｐｒｅｓｅｎｔｓ
ａｎ ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＩｇＹ ｉｎ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉａｌ ａｎｄ ａｑｕａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ｅｇｇ ｙｏｌｋ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（ＩｇＹ）；ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌｓ；ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ；ｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅ ａｎｉｍａｌ
犊牛在出生后最初两周最易发生腹泻，主要的 病原体有轮状病毒、冠状病毒、大肠杆菌Ｋ９９和 隐孢子等。Ｅｒｈａｒｄ等（１９９３）和Ｏｚｐｉｎａｒ等（１９９６） 给初生犊牛（０～１４日龄）补充抗大肠杆菌Ｋ９９和 ＨＲＶ的ＩｇＹ鸡蛋粉，从腹泻率、腹泻程度以及腹泻 的时间等几项指标来看，使用ＩｇＹ鸡蛋粉的效果显 著，特别是添加ＩｇＹ组的日增重显著高于对照组（彭 玉耩等，２００２）。
WSSV口服卵黄抗体的制备及在螯虾中的应用
１ １ 实验 材料 ．
实验 于 ２ ０ ０５年 ３月 至 ２０ ０ ５年 １ ２月 在广 东 省农科 院畜 牧研 究 所 进 行 ， Ｓ 毒 种 为 中 科 院 ＷＳ Ｖ 武汉病 毒研究 所 提供 ， 试 动物 蛋鸡 和螫 虾 ， 供 蛋鸡 为２ ０周龄 自来航 ， 净养殖 场养 至 产蛋期 。螯 虾 洁
以螫虾 为 病 毒 增 殖 模 型进 行 病 毒 感 染 ， ５天
后收集 血淋 巴 ， 于 蔗 糖 梯 度 密 度 上进 行 超 速 离 铺 心提 纯 ］得 到 的 病 毒 用 Ｂ Ａ 法 检 测 浓 度 为 ， Ｃ ０ ８８ ／ 。 病 毒适 当稀 释 ， 弗 氏佐 剂 等 量 ．７ ｍｇｍＬ 将 同 混合后 于蛋 鸡 胸 肌 分 点注 射 ， 只 ０ ５ 。首 免 每 ．ｍＬ
后的第 １ ４天 和第 ２ ８天各 加 强 免 一 次 ， 量加 大 剂
一
克隆抗 体 、 组 蛋 白 ＿． 等 特 效 药 物 和 免疫 制 重 ３］ ８ 剂来 预 防 或治 疗 对 虾 ＷＳ ， 实 有 一 定 的效 果 ， Ｓ证 但 这些 方法 和药物 技术 门槛 高 ， 大规模 生 产 困难 ，
只 。１ 喂给 含．％ ｇ ２组
０研 究 探讨 天死 亡 率 即 达 到 １ ０ ， ． ％ ＩＹ 组 在 第 １ ０％ ０１ ｇ ２天
时也达 到 了 １ ０ ０ ％。而 ０ ２ ． ％的 ＩＹ 预饲 组 及 非 ｇ
于低 温干燥 处 保存 。 本 实 验 中虾 基 础 日粮 采 用 半 纯 化 日粮 配 方 ，
饲料组 成 见表 １ 。
表 １ 螯 虾 目粮 配 方 组 成
卵黄抗体在饲料添加剂中的应用
卵黄抗体在饲料添加剂中的应用韩水仲;田泽华;赵津子;张小莺;陈琛【摘要】卵黄抗体是从产蛋鸡中提取的针对特异性抗原的免疫球蛋白,产量高,成本低廉,防病效果好,理化性质稳定.本文综述了卵黄抗体作为添加剂在猪、家禽及水产动物中的应用,旨在更好地利用卵黄抗体,促进畜牧业发展.【期刊名称】《中国饲料》【年(卷),期】2010(000)015【总页数】5页(P3-7)【关键词】卵黄抗体;饲料【作者】韩水仲;田泽华;赵津子;张小莺;陈琛【作者单位】西北农林科技大学动物医学院;西北农林科技大学动物医学院;西北农林科技大学动物医学院;西北农林科技大学动物医学院;陕西理工学院【正文语种】中文【中图分类】S816.7卵黄抗体（IgY）是从经过免疫注射特定抗原的产蛋鸡卵黄中提取的特异性抗体。
相对于哺乳动物，由于种系发生学距离的优势，禽更适合生产针对哺乳动物细菌和病毒性疾病的抗体，而对肠道正常的菌群无副作用，避免产生药物残留和耐药性。
卵黄抗体具有产量高，制备简单，生产成本低，便于大规模产业化生产，并且理化性质稳定，具有一定的抗酶解能力（张小莺等，2004）。
饲喂含卵黄抗体的饲料在节约成本的同时，能够有效预防疾病，增强机体的免疫机能，且卵黄本身也是很好的蛋白来源，卵黄中除了含有特异性卵黄抗体外还含有蛋氨酸、丙氨酸、甘氨酸等多种氨基酸，同时还含有卵黄高磷蛋白、唾液酸、低聚糖等抗细菌和病毒、免疫调节等功能生物活性物质，这增加了其作为饲料添加剂的优势。
1 IgY的理化性质IgY是一种7 S免疫球蛋白，与哺乳动物IgG略有不同，等电点为5.7～7.6，分子质量约为180 ku，由两条轻链和两条重链组成，分子质量分别为22～30 ku和60～70 ku。
IgY的pH值稳定性较好，活性保持良好，在pH 4.0～11.0时比较稳定，pH 3.0～3.5时活性迅速下降，pH 12.0时活性亦有所下降，在pH>12.0时迅速失活。
IgY也具有良好的耐热能力。
卵黄抗体在水产中的应用
卵黄抗体在水产上的使用状况卵黄抗体又称卵黄免疫球蛋白（IgY），一般以鸡作为供体，经一种或多种特定抗原免疫诱导后在卵黄中蓄积，机体所产生的特异性抗体，具有类似哺乳动物IgG的免疫活性，可有效防治特定疾病。
近年来，在畜禽疾病的诊断与防治方面卵黄抗体的运用已非常广泛，可将其作为抗生素替代品或饲料添加剂等进行使用，在动物养殖业中具有广阔的应用前景。
目前，用卵黄抗体防治水产动物疾病的研究报道较少，但因其具有疗效确切、使用安全、无毒副作用、制备工艺简单、生产成本低等优点，使得以其防治水产动物疾病逐渐受到重视。
1.IgY的发展以及研究状况1893年，著名德国医生莱比锡通过免疫蛋鸡的试验发现其所产鸡蛋的蛋黄中具有能中和免疫原的特异性蛋白质，即卵黄抗体IgY。
自此，各国学者相继对其分子结构、理化性质、制备工艺、检测方法及应用等领域进行了广泛而深入的研究。
20世纪80年代以来，归因于商品试剂的推广，IgY抗体开始进入商品应用。
1996年，IgY抗体的生产和应用被定义为IgY技术。
如今，它己是一个世界性的标准化技术。
1996年，欧洲实验方法替换确认中心推荐使用IgY来代替哺乳动物IgG，以减少由于抗体采集而造成对动物的伤害。
1999年，基于对动物权益的保护，IgY技术被瑞士联邦政府兽医办公室接受为可行的替代办法。
美国的FDA己将特异性卵黄免疫球蛋白视为替代抗生素的首要候选药物，日本政府投入巨资扶持“禽源抗体产业”。
美国、韩国、台湾等发达国家和地区利用卵黄抗体成功研制了各种功能性食品、饲料添加剂和防制动物疫病的生物制品。
目前，在人类医学、动物医学、动物科学和其他诸多生命科学领域，有关卵黄抗体产品的研发与应用呈逐年上升趋势，尤其是卵黄抗体代替抗生素在动物生产中的应用被广泛认可。
2.IgY的理化性质IgY是一种7S免疫球蛋白，分子量约180kD，由两条重链(分子量67-70kDa)和两条轻链(分子量22-30kDa)组成，含氮量为14.8%。
【开题报告】自制鳗弧菌卵黄抗体抑菌效果研究
开题报告生物技术自制鳗弧菌卵黄抗体抑菌效果研究一、选题的背景与意义鳗弧菌（Vabrio anguallanim）是一种对水产鱼类危害严重的细菌病原，其流行区域广泛，能引起世界范围内的淡、海水鱼类及其它养殖动物发生弧菌病，常给水产养殖业造成巨大的经济损失。
它还可通过食物链感染人类，使人发生较严重的疾病。
因此对该病原进行深入的研究，寻找防止和减少该病爆发的方法，对于为人类提供高质量的水产品具有重要的意义。
卵黄抗体（egg yolk immunoglobulin,IgY）是从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体，是一种具有较强免疫功能的蛋白质，多为IgG。
禽类免疫后在其卵黄中产生的大量高纯度免疫球蛋白G（IgG），其对疫病具有明显治疗和紧急预防作用。
用于人、畜、禽类疫病防治方面的有很多成功的研究报道，且已有产品应用于生产中，如用于紧急预防和治疗传染性法氏囊病（IBD）、新城疫（ND）等疫病的IgY,效果很好。
在水产动物方面，只对鳖有少量研究，在对其他细菌病方面则未见研究报道。
本研究的目的是借鉴陆生畜禽相关研究的成功经验，以纯培养的鳗弧菌作为抗原,探讨鳗弧菌IgY的制备技术,并研究其抑菌效果，以期为鳗弧菌引起的疾病的生物防治工作奠定基础，创造社会、经济及生态效益。
二、研究的基本内容与拟解决的主要问题：本研究通过自制的抗鳗弧菌卵黄抗体进行体外抑菌试验和体内抑菌（即动物保护试验），研究其抑菌效果。
拟解决的主要问题：抑菌效果的研究方法。
三、研究的方法与技术路线：1．体外抑菌效果的研究：根据实验设计的浓度比，将卵黄抗体与鲜鳗弧菌菌悬液的混合，并在不同时间下培养后，涂布在培养基上培养。
然后进行菌落计数，对比、分析各组结果。
2．体内抑菌效果（即动物保护试验）①对将一定浓度的鳗弧菌菌悬液注射入克氏原螯虾体内进行攻毒，观察死亡情况。
②中和试验：将卵黄抗体与鳗弧菌等比例混合并中和一段时间后，注射入试验动物体内，观察试验动物的发病以及死亡情况。
抗生素替代品 卵黄抗体
——卵黄抗体
卵黄抗体的制备
卵黄抗体的作用机理
卵黄抗体的优缺点
卵黄抗体在养殖业中的应用 小结
抗生素替代品的概述
在传统的农业技术中，抗生素是保持动物 健康和提高饲料效率最具成本效益的方法。但 是抗生素的长期使用会导致其在畜产品中的残 留及细菌耐药性的产生（Torey et al.,2012）。所 以寻找既有效又有利于食品安全的新型抗生素 替代品成为当务之急。
（李燕荣等，2014）
卵黄抗体的作用机理
(wilmar et al.,2010)
卵黄抗体的优点
根据卵黄抗体的制备过程以及作用机理， 将卵黄抗体作为抗生素替代品添加到动物日粮 中是一个很好的选择。卵黄抗体不仅有利于预 防许多动物疫病的发生，提高动物的生产性能， 而且在疾病治疗和疾病诊断方面也发挥着很大 的作用。
卵黄抗体的优点
与抗生素相比，卵黄抗体是通过特异性粘附于 特定的病原菌而发挥作用，所以对肠道正常的 菌群无副作用，也可以 避免产生药物残留和耐 药性。
卵黄抗体的优点
从动物福利的方面考虑，从哺乳动物的血清中获得抗体 需要对动物进行长期的采血，这种做法对动物的伤害很 大。而卵黄抗体的收集是非侵入式的，只要每天收集鸡 蛋就可以。 从获得抗体的数量方面考虑，从哺乳动物的血清中获得
卵黄抗体的作用机理
特定病原菌的卵黄抗体能够直接黏附于病原菌的细胞壁上， 破坏病原菌细胞壁的完整性，从而直接抑制病原菌的生长 或者抑制其活性； 卵黄抗体也可以粘附于细菌的菌毛上，使其不能够粘附于 肠道黏膜的上皮细胞，最终使细菌不能增殖和分泌毒素； 有些卵黄抗体能够在肠道消化酶的作用下，降解为可结合 且易于被肠道吸收的片段，这些片段含有抗体的可变小肽 (Fab)部分，其进入血液后能与特定的病原菌粘附因子结合， 使病原菌不能够粘附易感细胞而失去致病性。
水产动物免疫及其主要功能1 . 水产动物免疫1)免疫(
伤所致的免疫功能降低或缺乏的系统综合症。
免疫：水产动物免疫的基本概念
2) 免疫稳定：机体免疫系统维持内环境相对稳定的一种生理功能。
正常：消除体内衰老的和被破坏的细胞 异常：（过高）自身免疫病 自身免疫病：自身抗体或自身致敏淋巴细胞攻击自身靶抗原细胞和
2. 抗原与抗体的概念
1) 抗原： 凡是能够刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，
并能与之结合引起特异性免疫反应的物质，称为抗原。
2) 抗体：机体免疫活性细胞受抗原刺激后，在体液中出
现的由浆细胞产生的一类能与相应抗原发生特异性结合 的球蛋白。 简单说，抗体是一种免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)
正常：免疫对机体有利，可产生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和稳定
的免疫保护反应；
异常：免疫可对机体造成伤害，如超敏反应、自身免疫疾病和肿瘤等。
2）水产动物免疫学（Immunology）：指研究水产养殖动物免疫
系统的组织结构与生理功能的一门新兴学科。
Chapter 2. 免疫学原理在疾病诊断和防治中的应用
起特异性免疫反应的物质。
2) 被动免疫：从母体获得抗体或因人工注射抗体而获得的免疫
免疫：水产动物免疫的基本概念
3) 自动免疫和被动免疫的区别：
a. 发生作用时间：
自动免疫：慢（1-4周）； 被动免疫：快（立即）
b. 效果：
自动免疫：可刺激机体持续产生抗体，再次接收抗原刺激
将表现出再次反应或反应增强
免疫：非特异性免疫
3.非特异性免疫细胞
1) 吞噬细胞：包括粒细胞、巨噬细胞和单核细胞 作用： 受病原和宿主产生的趋化因子作用接近并吞噬