饲料中粗蛋白的测定-凯氏定氮法
测定原理
凯氏法测定试样中含氮量，即在催 化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含 氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏 使氨逸出，用硼酸吸收后，在用标准浓 度的酸滴定，测出氮含量，将结果乘以 换算系数6.25，计算出粗蛋白质含量。
仪器设备及试剂
样品粉碎机 40目分析筛 分析天平 消化炉 消化管 凯氏蒸馏装置 滴定管
注意事项
每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值 作为结果。 本方法不能区别蛋白氮和非蛋白氮。 每次蒸馏结束后，应用蒸汽将蒸馏装置反应腔中 残液洗净。
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凯氏定氮仪测定步骤
1.试样的消化 称取0.5~1g试样，准确至0.0001g，无损地 放入消化管中，加入硫酸铜0.4g，硫酸钾6g， 与试样混合均匀，再加浓硫酸12ml，将消化管 放置在消化炉上加热（此装置需安装在通风 橱内），待样品焦化，泡沫消失，加大火力 至410℃ ，直至溶液呈透明的蓝绿色，此溶液 为试样分解液。 2.试样的蒸馏 将试样分解液消化管安装在凯氏定氮仪上， 在250ml锥形瓶中加入2滴溴甲酚绿-甲基红 混合指示剂。按仪器操作程序蒸馏。 3.滴定 同上。
蛋白氮 （真蛋白质提供氮源 ）
粗蛋白质
非蛋白氮（氨基酸、酰胺、铵盐 ）
测定意义
蛋白质是生命的基础，是细胞组成、酶、 激素免疫抗体等的主要成分，是组织更新、 修补的原料。 饲料中蛋白质的质和量直接关系到动物生 命生长、发育、繁殖和生产，因此，测定 饲料中粗蛋白质含量对动物生活和生产有 重要作用。 测定饲料原料和成品料中粗蛋白质的含量， 为科学配置饲料提供可靠依据。
测定步骤
2.试样的蒸馏 取2%硼酸溶液 20ml至锥形瓶中作为反应吸收液，并加混合指示剂 2滴， 将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入该液面下。准确移取试样分解液 10ml注入蒸馏装置的反应腔中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好玻 璃塞，并在入口处加水密封好。再在碱液入口缓慢加入10～20ml 40% 氢氧化钠溶液，亦使之流入反应腔中，并把碱液入口封存好。进行蒸 馏。以锥形瓶中溶液变蓝绿色开始计时3min，然后将冷凝管末端离开 锥形瓶液面，再蒸馏1min，用少量蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液亦流 入吸收液中。
饲料中粗蛋白质含量的测定
凯氏定氮法
动物科学学院
Contents
1. 适用范围
2. 测定意义 3. 测定原理
4. 仪器设备及试剂
5. 测定步骤
适用范围
饲料中含氮物质包括真蛋白质和氨化物 （非蛋白氮），两者总称为粗蛋白质。 本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一 饲料等粗蛋白质含量的测定。
适用范围
98%浓硫酸 硫酸钾 硫酸铜 硼酸溶液 标准盐酸溶液 混合指示剂 蔗糖
测定步骤
1.试样的消化 称取0.5~1g试样，准确至0.0001g，无损地放入消化管中， 加入硫酸铜0.4g，硫酸钾6g，与试样混合均匀， 再加浓硫酸12ml，将消化管放置在消化炉上加热（此装置 需安装在通风橱内），待样品焦化，泡沫消失，加大火力 至410℃ ，直至溶液呈透明的蓝绿色。将试样消化液冷却， 无损失地转移至100ml容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至 刻度. 滴定 用硼酸吸收氨后，立即用0.05mol/L的HCl标准溶液进行滴定，溶液 由蓝绿色变为灰红色为终点。 4. 空白测定 称取蔗糖0.01g，以代替试样，按上述测定步骤进行空白测定， 消耗0.05mol/L盐酸标准溶液的体积应不得超过0.3ml。 5.计算 (v1 v0 ) C 87.5 粗蛋白质（%）=
凯氏定氮操作规程
凯氏定氮操作规程1、主题内容与适用范围本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。
2、引用标准GB 601化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备。
3、原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。
4、试剂4.1硫酸（GB 625）：化学纯，含量为98％，无氮。
4.2催化剂：0.10g硫酸铜，5个结晶水（GB 665），2.50g硫酸钾（HG 3—920），均为化学纯。
4.3氢氧化钠（GB 629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。
4.4硼酸（GB 628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。
4.5混合指示剂：甲基红（HG 3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3—1220）0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。
4.6盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB 601制备。
4.6.1盐酸标准溶液：c（HCl）=0.1mol/L。
8.3mL盐酸（GB 622，分析纯），注入 1000mL蒸馏水中。
4.7蔗糖（HG 3—1001）：分析纯。
4.8硫酸铵（GB 1396）：分析纯，干燥。
5、仪器设备5.1实验室用样品粉碎机或研钵。
5.2分样筛：孔径0.45mm（40目）。
5.3分析天平：感量0.0001g。
5.4消煮炉或电炉。
5.5滴定管：酸式，5、10、25mL。
5.6凯氏烧瓶：250mL。
5.7凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式。
5.8锥形瓶：150、250mL。
5.9容量瓶：100mL。
5.10消煮管：250mL。
6、试样的选取和制备选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。
7、分析步骤7.1改良方法7.1.1试样的消煮称取试样0.5～1g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶（5.6）中，加入0.1gCuSO．·5H2O、2.5gK2SO、4.0ml浓 H2SO4和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶（5.6）置于电炉（5.4）上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360～410℃）直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少30min。
(完整版)实验二粗蛋白的测定
实验二饲料粗蛋白的测定一、实验目的通过饲料样品中粗蛋白质的测定，让学生了解了解凯氏定氮法测定的基本原理，掌握半微量凯氏定氮法测定饲料粗蛋白质的方法，掌握粗蛋白质含量的计算方法。
二、实验原理各种饲料的有机物质在还原性催化剂(如CuSO4，K2SO4或Na2SO4或Se粉)的帮助下，用浓硫酸进行消化作用，使蛋白质和其它有机态氮（在一定处理下也包括硝酸态氨）都转变成NH4+并与H2SO4化合成（NH4）2SO4，而非含氮物质，则以CO2 ↑，H2O↑，SO2↑状态逸出。
消化液在浓碱的作用下进行蒸馏，释放出的铵态氮，用硼酸溶液吸收之并与之结合成为四硼酸铵，然后以甲基红溴甲酚绿作指示剂，用HCl标准溶液（0.1mol/L）滴定，求出氮的含量，根据不同的饲料再乘以一定的系数（通常用6.25系数计算），即为粗蛋白质的含量。
其主要化学反应如下：1、2NH4（CH2）2COOH+13H2SO4→（NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2（丙氨酸）2、（NH4）2SO4 +2NaOH→2NH 3+3H2O+2Na2SO43、4H3BO3+ NH 3→NH4HB4O7+5H2O4、NH4HB4O7+HCl+5H2O→NH4C1+4H3BO3本法不能区别蛋白氮和非蛋白氮，只能部分回收硝酸盐和亚硝酸盐等含氮化合物。
在测定结果中除蛋白质外，还有氨基酸、酰胺，铵盐和部分硝酸盐、亚硝酸盐等，故以粗蛋白质表示之。
三、实验设备1、实验室用样品粉碎机或研钵；2、分析筛：孔径0.45mm(40目)；3、分析天平：感量0.0001g；4、消煮炉或电炉；5、滴定管：酸式，25或50ml；6、凯式烧瓶：100或500m1；7、凯氏蔗馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式；8、锥形瓶，150或250m1；9、容量瓶：100ml。
三、实验内容1、称取0.5～1g 试样（含氮量5～80mg ）准确至0.0002g ，无损失地放入凯氏烧瓶中，加入硫酸铜0.9g ，无水硫酸钾（或硫酸钠）15g ，与试样混合均匀，再加硫酸25ml 和2粒玻璃珠，在消煮炉士小心加热，待样品焦化，泡沫消失，再加强火力（360～410℃）直至溶液澄清后，再加热消化15min 。
饲料分析与检测实验：饲料中粗蛋白质的测定
实验三、饲料中粗蛋白质的测定【学习目标】掌握饲料中粗蛋白质的测定方法，并能用此方法测定饲料中粗蛋白质的含量。
一、原理饲料中纯蛋白质和非蛋白氮总称粗蛋白质。
凯氏法的基本原理是用浓H2SO4在催化剂(CuSO4、K2SO4、Na2SO4等)的催化作用下消化饲料样本，使其中的蛋白质和非蛋白氮都转变为 (NH4)2SO4，(NH4)2SO4在浓碱作用下放出NH3，通过蒸馏，氨气随水蒸汽沿冷凝管流入硼酸吸收液被硼酸吸收并与之结合成为四硼酸铵，然后以甲基红、溴甲酚绿作指示剂，用标准HCL溶液滴定，求出氮含量，根据氮含量再乘以系数(通常为 6.25)，即为粗蛋白质的含量。
上述原理的主要化学反应如下：催化剂1.2CH3CHNH2COOH+13H2SO (NH4)2SO4+6CO2↑+12SO2↑+16H2O加热2.(NH4)2SO4+2NaOH 2NH3↑+2H2O+Na2SO43.4H3BO3+NH3 NH4HB4O7+5H2O4.NH4HB4O7+5H2O+HCL NH4CL+4H3BO3系数6.25是根据饲料蛋白质平均含氮量为16.0%而来的，而实际上，各种样本的蛋白质种类不同，含氮量有差异，变动为14.7～19.5%之间，故一般饲料换算系数用6.25，已确定的最好用实际系数。
为方便使用，将已知几种饲料的系数介绍如下：肉类6.25，玉米6.00，小麦、燕麦、黑麦、大豆、箭舌豌豆、蚕豆5.70，牛奶及制品6.28，坚果及油饼类5.30。
二、仪器设备1.样品粉碎机 40目分样筛；2.分析天平感量0.0001g；3.电子天平感量0.0001g；4.工业天平感量0.01g；5.六联电炉 6×800-1000W；6.半微量凯氏定氮仪或改良式半微量凯氏定氮仪(图1、图2)；7.酸式滴定管 25.0ml或50.0ml；8.凯氏烧瓶 100.0ml；9.烧杯 250.0ml；10.三角瓶 150.0ml；11.容量瓶 100.0ml；12.移液管 10.0ml；13.量筒 10.0ml、25.0ml。
凯氏定氮仪测定饲料中粗蛋白的注意事项
龙源期刊网 凯氏定氮仪测定饲料中粗蛋白的注意事项作者：刘传辉来源：《环球市场信息导报》2012年第08期蛋白质是鉴定饲料质量时必测的常规营养指标。
以往饲料检测普遍采用的标准方法是半微量凯氏定氮法，但是由于粗蛋白质测定过程相对较复杂，所以现在我省已有多家质检中心购买了半自动的凯氏定氮仪，它具有消化时间短，操作简单，准确性高、价格较便宜等特性，备受使用者青睐。
但在使用中有些不容忽视的注意事项，在此跟大家分享。
饲料；粗蛋白；凯氏定氮仪制样：用粉碎机粉碎样品后，一定要全部清理干净作为备用样，如果清理不彻底，将影响检验结果。
称量：称量时，由于消化管较长，所以直接称量不太现实，可以用滤纸制成适宜的尺寸用来包裹样品，要注意滤纸一定要用定量滤纸，因为里面含氮量很低，可以忽略不计。
用滤纸包住样品放入试管口慢慢滑到试管底部。
称样量约0.3000g为宜。
加催化剂和硫酸。
催化剂可以用仪器公司配备的消化片，但由于价格相对比较昂贵，所以还是用国标中混合催化剂的方法比较合适，不影响检验结果。
催化剂要按照国标中规定的用量（6.4g），如果加入了过量的催化剂，在消化结束时常会发生凝固现象；加少了就会消化不完全，影响检验结果。
消化：专用的消化炉相对于传统的消化方法来说是一种良好的改进。
在称量样品的同时就可以将消化炉打开预热，温度设置为420℃。
由于所配备的消化管的冷热膨胀性能好，所以不必担心由于骤热而引起破裂。
消化时间设定为1小时即可，节省了大量的时间。
蒸馏：仪器中有好几种设定程序，你可以根据自己平时的需要设定不同的程序。
在蒸馏程序开始前要先进行空蒸，使去离子水沸腾，产生水蒸气，为蒸馏程序做准备。
加碱的量与消化时所加入的硫酸量的比应为4∶1，程序中的延时设定根据情况而定，如果消化液不凝固，可以设定的短些；如果发生凝固，应设置的长些，以利于在蒸馏开始前用水蒸气使消化液溶解。
蒸馏时间初步设定为3分40秒，具体时间依照硫酸铵的检测结果进行调试。
饲料中粗蛋白含量的测定方法_李晴媛
饲料及饲料添加剂中国畜牧兽医文摘 2013年 29卷 第2期粗蛋白含量是饲料产品质量检测的重要控制指标。
饲料样品中粗蛋白质含量的高低，是评定饲料营养价值的重要因素，决定着配合饲料及饲料原料的成本和价值。
近年来，我国饲料工业发展迅速，饲料产量也随之增长，市场上出售的饲料种类繁多，质量良莠不齐。
国标法测定饲料中的粗蛋白采用的是凯氏定氮法，由于操作的过程比较复杂，如果操作不当，往往会导致检测结果不准确。
1 样品制备一般的饲料样品都是经过一定的采集过程后送检的。
采集方法是否规范，是粗蛋白测定准确与否的基础。
采样方法随不同的物品而有所不同，一般来说，可根据物品均匀性质分为下列两种[1]。
1.1 均匀性质物品对于均匀性质的物品，每一小部分的成分与全部的成分相同，可以采取其任何一部分作为分析样本。
在通常情况下，粉末或研碎后的样品可用“四分法”来采样。
1.2 不均匀性质物品不均匀的物品，须采取多量样本，然后在取出的样本中重复取样多次，得出一连串逐渐减少的样本，叫做初级、次级、三级……样本。
分析用的样本可以在最末一级样本中制备，使样本能代表全部物品。
所采用的取样方法称为“几何法”。
经过采集的样品部分基本代表全部样品的成分，但是，由于饲料在生产过程中的工艺限制，样品颗粒并不均匀，所以在实验前要通过样品粉碎来实现称量样品的均匀性。
根据饲料工业标准标定，样品要求粉碎后全部通过40目（0.45 mm）分样筛，然后混合均匀放入密封容器[2]。
一般饲料样品颗粒较大，成分复杂，检测时称量样品量较少，如果细度不够，必然造成称样时样品不均匀，这是造成结果误差的重要原因。
2 称样用分析天平称取试样0.5～1 g（精确到0.000 1），标准要求做平行样以保证测量结果的准确性，所以需要称样2份。
称样时的称样量要合适，不能太少也不能太多。
一般粗蛋白含量在10%以上的饲料称样量为0.500 0 g即可；若饲料样品中粗蛋白含量较低，如含量为3%～5%的，称样量就应高于0.5000 g，一般称取1.000 g 样品，否则，测定结果的误差就会偏大。
饲料中粗蛋白测定方法
饲料中粗蛋白测定方法1、原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数 6.25，计算出粗蛋白含量。
2、试剂2.1 硫酸（GB 625）：化学纯，含量为98％，无氮。
2.2 混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水（GB 665），6g硫酸钾（HG 3—920）或硫酸钠（HG 3—908），均为化学纯，磨碎混匀。
2.3 氢氧化钠（GB 629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。
2.4 硼酸（GB 628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。
2.5 混合指示剂：甲基红（HG 3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3—1220）0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。
2.6 盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB 601制备。
2.6.1 盐酸标准溶液：c（HCl）=0.1mol/L。
8.3mL盐酸（GB 622，分析纯），注入 1 000mL蒸馏水中。
2.6.2 盐酸标准溶液：c（HCl）=0.02mol/L。
1.67mL盐酸（GB 622，分析纯），注入1 000mL蒸馏水中。
2.7 蔗糖（HG 3—1001）：分析纯。
2.8 硫酸铵（GB 1396）：分析纯，干燥。
2.9 硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1 000mL，加入0.1％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。
3、仪器设备3.1 实验室用样品粉碎机或研钵。
3.2 分样筛：孔径0.45mm（40目）。
3.3 分析天平：感量0.0001g。
3.4 消煮炉或电炉。
3.5 滴定管：酸式，10、25mL。
3.6 凯氏烧瓶：250mL。
3.7 凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。
3.8 锥形瓶：150、250mL。
3.9 容量瓶：100mL。
粗蛋白含量测定（凯氏定氮法）
粗蛋白含量测定（凯氏定氮法）粗蛋白含量测定（凯式定氮法）1 原理蛋白质是含氮的有机化合物。
食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。
2 试剂所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。
硫酸铜硫酸钾硫酸4或2%硼酸溶液混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合，也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合40%氢氧化钠溶液0.05N盐酸标准溶液3操作方法样品处理：精密称取0.2～2.0g固体样品或2～5g半固体样品或吸取10～20ml液体样品(约相当氮30～40mg)，移入干燥的100ml 或500ml定氮瓶中，加入0.5g硫酸铜，3g硫酸钾及10ml硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。
小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，5至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5h。
取下放冷，小心加20ml 水。
放冷后，移入100ml 容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。
取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。
装好定氮装置，于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
向接收瓶内加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示液1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室，并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻杯的棒状玻塞。
将10ml 40%氢氧化钠溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气。
夹紧螺旋夹，开始蒸馏。
粗蛋白质的测定
粗蛋白质测定最常用凯氏定氮法 凯氏定氮法， 粗蛋白质测定最常用凯氏定，至今仍广泛应用 ）首创， 于土壤，肥料，饲料，食品分析中。 于土壤，肥料，饲料，食品分析中。 我国现行的国家标准亦将此法列为饲料 粗蛋白质测定的法定方法。
原理 消化
在催化剂帮助下，用硫酸破坏有机物， 在催化剂帮助下，用硫酸破坏有机物， 使含氮物转化为硫酸铵。 使含氮物转化为硫酸铵。 2CH3CHNH2 COOH +13H2SO4
长期以来，人们用测定总氮量 总氮量的 长期以来，人们用测定总氮量的 方法，根据饲料中氮与蛋白质的比例 方法， 关系，推导出蛋白质的含量。 关系，推导出蛋白质的含量。 出蛋白质的含量
问题是，并非只是蛋白质才含氮， 问题是，并非只是蛋白质才含氮， 还有一些非蛋白质的化合物亦含氮（ 还有一些非蛋白质的化合物亦含氮（如核 酸、生物碱、氨基酸、酰胺、硝酸盐及铵 生物碱、氨基酸、酰胺、 盐等）。 盐等）。 所以，用测定总氮量反推出来的， 所以，用测定总氮量反推出来的， 包括了 实际上包括 纯蛋白质和 实际上包括了纯蛋白质和非蛋白质含氮物 氨化物）。 （氨化物）。
准确性检验
以硫酸铵代替试样进行测定， 以硫酸铵代替试样进行测定， 应测得其含氮量为21.19±0.2%. 应测得其含氮量为21.19± 21.19
操作注意事项
1. 以减量法准确称样： 以减量法准确称样：
将称量纸放在 天平上，然后回零 天平上，然后回零
于称量纸上称取适 量的样品，然后回零 量的样品，然后回零
消煮液呈现澄清蓝绿色后，继续加热至少 消煮液呈现澄清蓝绿色后， 现行国标要求至少2小时） 半小时 (现行国标要求至少2小时）
蒸馏和滴定的操作注意事项 待续） （待续）
消煮时样品颜色变化： 消煮时样品颜色变化
饲料中粗蛋白测定方法
饲料中粗蛋白测定方法1、原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数 6.25，计算出粗蛋白含量。
2、试剂2.1 硫酸（GB 625）：化学纯，含量为98％，无氮。
2.2 混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水（GB 665），6g硫酸钾（HG 3—920）或硫酸钠（HG 3—908），均为化学纯，磨碎混匀。
2.3 氢氧化钠（GB 629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。
2.4 硼酸（GB 628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。
2.5 混合指示剂：甲基红（HG 3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3—1220）0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。
2.6 盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB 601制备。
2.6.1 盐酸标准溶液：c（HCl）=0.1mol/L。
8.3mL盐酸（GB 622，分析纯），注入 1 000mL蒸馏水中。
2.6.2 盐酸标准溶液：c（HCl）=0.02mol/L。
1.67mL盐酸（GB 622，分析纯），注入1 000mL蒸馏水中。
2.7 蔗糖（HG 3—1001）：分析纯。
2.8 硫酸铵（GB 1396）：分析纯，干燥。
2.9 硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1 000mL，加入0.1％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。
3、仪器设备3.1 实验室用样品粉碎机或研钵。
3.2 分样筛：孔径0.45mm（40目）。
3.3 分析天平：感量0.0001g。
3.4 消煮炉或电炉。
3.5 滴定管：酸式，10、25mL。
3.6 凯氏烧瓶：250mL。
3.7 凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。
3.8 锥形瓶：150、250mL。
3.9 容量瓶：100mL。
凯氏定氮仪测定饲料中粗蛋白含量误差因素分析
凯氏定氮仪测定饲料中粗蛋白含量误差因素分析作者：丁立人来源：《农业与技术》2018年第21期摘; 要：利用全自动凯氏定氮仪的工作原理，通过对各实验操作步骤中有可能产生误差的来源作了详细的分析，从而达到减小实验误差，提高检测准确性的目的。
关键词：凯氏定氮仪;蛋白质含量;误差;准确度中图分类号：S-3; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; 文献标识码：A; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; DOI：10.11974/nyyjs.20181131006饲料中粗蛋白质含量是饲料质量的一个重要指标，目前常用的检测方法是凯氏定氮法，其通过测定样品中总氮量来计算样品蛋白质含量，适用于各类样品中蛋白质含量的测定，国内外应用较为普遍，迄今为止仍是饲料中蛋白质测定的国标规定方法。
全自动凯氏定氮仪同传统的半微量凯氏蒸馏装置相比，全自动凯氏定氮仪的定氮原理与之相同，并具有省时、省力、准确性高等优点，因而在饲料行业得到广泛应用。
但测定粗蛋白的步骤依然繁多，每个步骤、每个细节都有可能人为因素造成误差，从而表现为结果的偏低、偏高以及重复性不好等几种形式。
本文以FOSS; Kjeltec8400型全自动凯氏定氮仪为例，通过对其整个实验过程的整理，根据实验操作的先后顺序，对各步骤中误差产生的可能因素和来源进行分析，并提出相应的避免或降低误差的解决方法。
1; ; ;方法原理凯氏定氮法测定饲料中蛋白质的原理是各种饲料在催化剂（硫酸钾、硫酸铜）的作用下，用浓硫酸进行消化，使蛋白质和氨态氮都转变成氨气，并被浓硫酸吸收变为硫酸铵，而非含氮物质，则以二氧化碳、水、二氧化硫的气体状态逸出。
消化液在浓碱的作用下进行蒸馏，释放出的氨气随水蒸气蒸出并被硼酸液吸收生成硼酸胺，以甲基红-溴甲酚绿作混合指示剂，用盐酸标准液滴定，求出氮的含量，再乘以一定的换算系数（通常用6.25系数计算），得出样品中的粗蛋白质的含量。