揭秘化妆品安全性评价技术(四)
化妆品安全技术规范3篇
化妆品安全技术规范第一篇：化妆品安全技术规范的必要性化妆品是现代人日常生活中必不可少的产品之一，无论是男士还是女士，都需要使用化妆品来保持外表清洁美观。
然而，化妆品在制造过程中存在一定的安全隐患，如果制造不当或者成分超标，就会对人体健康造成危害。
因此，建立化妆品安全技术规范是非常必要的。
化妆品安全技术规范是指在化妆品的制造、检验、使用和销售等过程中，采取一系列科学严谨的技术措施来确保化妆品的安全性和质量稳定性。
化妆品安全技术规范的制定，对于保护消费者的健康权益，促进化妆品产业的可持续发展，具有至关重要的意义。
一、保障消费者健康化妆品安全技术规范的建立，旨在确保化妆品在使用过程中不会对消费者身体健康造成伤害。
针对化妆品生产加工中可能出现的问题，制定安全规范可以有效地控制化妆品的卫生安全、质量标准、环境保护等方面的问题。
二、促进产业可持续发展化妆品安全技术规范的制定，可以帮助化妆品行业建立统一的生产标准和质量检测体系，增强企业的创新能力和品牌竞争力，提高整个行业的生产效率和产品质量，促进化妆品产业的可持续发展。
三、加强行业自律化妆品安全技术规范的制定，可以让行业内的企业和从业者自觉地遵守生产和销售的规范，在行业自律方面起到积极的作用。
通过规范生产和销售行为，全面提高化妆品行业的整体形象和信用度，有效地保护消费者的利益和权益。
化妆品行业是一个不断发展的产业，保障化妆品的安全性、质量稳定性和消费者的健康和权益，是化妆品行业持续发展的前提条件。
化妆品安全技术规范的建立和完善，将对化妆品行业的进一步发展和升级起到至关重要的作用。
第二篇：化妆品安全技术规范的制定和内容化妆品安全技术规范的制定，是对化妆品行业质量管理方面的认知提高和发展的需要。
化妆品安全技术规范涉及化妆品产品的质量标准、生产、检验和销售等方面。
下面介绍化妆品安全技术规范的制定和内容。
一、制定过程化妆品安全技术规范的制定，需要经过多方面的工作，包括相关政府机构、行业协会以及企业的共同努力。
化妆品安全技术规范
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化妆品安全技术规范
国家食品药品监督管理总局发布的规范
目录
01 1、产品简述
03
3、化妆品安全通用 要求
02 2、术语和释义 04 4、特点
《化妆品安全技术规范》（简称《技术规范》）是原卫生部印发的《化妆品卫生规范》（2007年版，简称 《卫生规范》）的修订版。为了满足我国化妆品监管实际的需要，结合行业发展和科学认识的提高，国家食品药 品监督管理总局组织完成了对《卫生规范》的修订工作，编制了《技术规范》（2015年版）。2015年11月经化妆 品标准专家委员会全体会议审议通过，由国家食品药品监督管理总局批准颁布，自2016年12月1日起施行。
本规范规定了化妆品的安全技术要求，包括通用要求、禁限用组分要求、准用组分要求以及检验评价方法等。
本规范适用于中华人民共和国境内生产和经营的化妆品（仅供境外销售的产品除外）。
2、术语和释义
下列术语和释义适用于本规范。 2.1化妆品原料：化妆品配方中使用的成分。 2.2化妆品新原料：在国内首次使用于化妆品生产的天然或人工原料。 2.3禁用组分：不得作为化妆品原料使用的物质。 2.4限用组分：在限定条件下可作为化妆品原料使用的物质。 2.5防腐剂：以抑制微生物在化妆品中的生长为目的而在化妆品中加入的物质。 2.6防晒剂：利用光的吸收、反射或散射作用，以保护皮肤免受特定紫外线所带来的伤害或保护产品本身而 在化妆品中加入的物质。 2.7着色剂：利用吸收或反射可见光的原理，为使化妆品或其施用部位呈现颜色而在化 妆品中加入的物质，但不包括第三章表7中规定的染发剂。 2.8染发剂：为改变头发颜色而在化妆品中加入的物技术规范》（2015年版）经化妆品标准专家委员会全体会议审议通过，现予发布，自2016年12 月1日起实施。《技术规范》（2015年版）共分八章，第一章为概述，包括范围、术语和释义、化妆品安全通用 要求。第二章为化妆品禁限用组分要求，包括1388项化妆品禁用组分及47项限用组分要求。第三章为化妆品准用 组分要求，包括51项准用防腐剂、27项准用防晒剂、157项准用着色剂和75项准用染发剂的要求。第四章为理化 检验方法，收载了77个方法。第五章为微生物学检验方法，收载了5个方法。第六章为毒理学试验方法，收载了 16个方法。第七章为人体安全性检验方法，收载了2个方法。第八章为人体功效评价检验方法，收载了3个方法。
化妆品安全评估技术导则(2021年版)
附件化妆品安全评估技术导则（2021年版）—1 —目录1.适用范围 (5)2.基本原则与要求 (5)3.化妆品安全评估人员的要求 (6)4.风险评估程序 (6)5.毒理学研究 (13)6.原料的安全评估 (15)7.化妆品产品的安全评估 (23)8.安全评估报告 (26)9.说明 (25)10.术语和释义 (29)附录1化妆品原料的安全评估报告............错误!未定义书签。
附录2化妆品产品的安全评估报告............错误!未定义书签。
附录3化妆品安全评估报告示例（完整版） . (43)附录4化妆品安全评估报告示例（简化版）错误!未定义书签。
—2 —化妆品安全评估技术导则为保障化妆品使用安全，规范化妆品安全评估，指导开展相关工作，制定本导则。
1.适用范围本导则适用于化妆品原料和产品的安全评估。
2.基本原则与要求2.1 原料的安全性是化妆品产品安全的前提条件。
化妆品原料的风险评估包括原料本身及可能带入的风险物质；化妆品产品一般可认为是各种原料的组合，应基于所有原料和风险物质进行评估，如果确认某些原料之间存在化学和/或生物学等相互作用的，应评估其产生的风险物质和/或相互作用产生的潜在安全风险。
2.2 化妆品安全评估应遵循证据权重原则，以现有科学数据和相关信息为基础，遵循科学、公正、透明和个案分析的原则，在实施过程中应保证安全评估工作的独立性。
2.3 化妆品安全评估引用的参考资料应为全文形式公开发表的技术报告、通告、专业书籍或学术论文，以及国际权威机构发布的数据或风险评估资料等；应用未公开发表的研究结果时，需经数据所有权方同意，并分析结果的科学性、准确性、真实性和可靠性等。
2.4 化妆品的安全评估工作应由具有相应能力的安全评估人员按照本导则的要求进行评估，并出具评估报告。
—3 —2.5 化妆品注册人、备案人应自行或委托专业机构开展安全评估，形成安全评估报告，并对其真实性、科学性负责。
化妆品功效宣称评价试验技术导则
附3化妆品功效宣称评价试验技术导则为指导化妆品功效宣称评价试验的开展，特制定本技术指导原则。
一、总则化妆品功效宣称评价试验的方案设计应当符合本技术导则，并且与化妆品产品功效宣称评价相关联。
人体功效评价试验和消费者使用测试应当遵守伦理学原则要求，进行试验之前应当完成必要的产品安全性评价，确保在正常、可预见的情况下不得对受试者或消费者的人体健康产生危害，所有受试者或消费者应当签署知情同意书后方可开展试验。
人体功效评价试验和消费者使用测试期间，若发现测试产品存在安全性问题或者其他风险的，应当立即停止测试或试验，并保留相应的记录。
实验室试验应当符合实验室相关法规的管理要求。
动物试验应当符合动物福利要求及3R（替代、减少、优化）原则。
二、人体功效评价试验（一）试验依据方法参考的依据和来源。
（二）试验目的及原理应当与功效宣称评价内容相符。
（三）产品信息产品及对照品（根据方案要求选择）名称、产品性状、生产日期和保质期或生产批号和限期使用日期。
（四）试验前准备1.受试者列明入选和排除标准（包括基本要求和试验方案要求）。
2.受试人数设定根据试验目的和统计学原则设定。
方法未要求时，有效受试人数应当具有统计学意义。
3.试验方案确定（1）方案设计：根据产品的功效宣称情况，选择合适的评价方法和试验设计类型，确定试验周期。
阐述对照组的设定和选择等试验设计的基本原则；采取随机分组或盲法等减少或控制偏倚所采取的措施；明确评价指标，评价指标包含但不限于仪器参数、图像数据、皮肤观察评估、受试者自我评估等。
（2）环境条件：根据试验要求设定试验环境条件（如温度、相对湿度、照明等），受试者应在试验环境中适应15～30分钟以上。
（3）产品使用方法：包括使用量、使用频率、使用时间、使用部位、使用注意事项等。
结合产品的使用方法同时需考虑产品自身的功效宣称特点。
（五）试验方法1.试验流程：包括试验起始时间、地点、产品使用前及回访评价时间及次数、产品发放和回收（根据方案要求）、评价涉及参数内容等。
化妆品中可能存在的安全性风险物质分析
化妆品中可能存在的安全性风险物质风险评估指南随着人们生活水平的提高，越来越多的人们接触到了各种各样的化妆品。
近年来，化妆品安全性事件也是频发，化妆品安全性不符合要求直接导致许多消费者受害，从重金属超标到致癌物风险，从导致皮肤过敏到抗生素含量超标这一系列事件都要求要从化妆品的生产、审批的源头注意化妆品本身存在的潜在安全性问题。
下面就针对化妆品中可能存在的安全性风险物质评估做一简单介绍。
一、化妆品中可能存在的安全性风险物质的含义化妆品中可能存在的安全性风险物质是指由化妆品原料带入、生产过程中产生或带入的，可能对人体健康造成潜在危害的物质。
二、风险评估基本程序（一）危害识别：根据物质的理化特性、毒理学试验数据、临床研究、人群流行病学调查、定量构效关系等资料来确定该物质是否会对人体健康造成潜在的危害。
（二）危害特征描述（剂量反应关系评估）：分析评价该物质的毒性反应与暴露之间的关系。
对有阈值的化学物质，确定“未观察到有害作用的剂量水平（NOAEL）”或“观察到有害作用的最低剂量水平（LOAEL）”。
对于无阈值的致癌物，可根据试验数据用合适的剂量反应关系外推模型来确定该物质的实际安全剂量（VSD）。
（三）暴露评估：一般可通过申报化妆品的产品类型和使用方法，结合化妆品中可能存在的安全性风险物质的含量或检出量，在充分考虑可能的化妆品使用人群（包括特殊人群，如婴幼儿、孕妇等）的基础上，定性和定量评价化妆品中可能存在的安全性风险物质对人体可能的暴露剂量。
（四）风险特征描述：确定该物质对人体健康造成危害的概率及范围。
对具有阈值的物质，计算安全边际（MOS）。
对于没有阈值的物质（如无阈值的致癌物），应确定暴露量与实际安全剂量（VSD）之间的差异。
三、评估资料的提交形式申请人可按以下两种形式提交化妆品中可能存在的安全性风险物质评估资料：（一）申请人通过危害识别，判断产品中不含可能存在的安全性风险物质的，可以提交相应的承诺书。
NMPA (施行)《化妆品安全评估技术导则(2021年版)》正式版
附件化妆品安全评估技术导则（2021年版）—1 —目录1.适用范围 (5)2.基本原则与要求 (5)3.化妆品安全评估人员的要求 (6)4.风险评估程序 (6)5.毒理学研究 (13)6.原料的安全评估 (15)7.化妆品产品的安全评估 (23)8.安全评估报告 (26)9.说明 (25)10.术语和释义 (29)附录1化妆品原料的安全评估报告 (31)附录2化妆品产品的安全评估报告 (36)附录3化妆品安全评估报告示例（完整版） (43)附录4化妆品安全评估报告示例（简化版） (54)—2 —化妆品安全评估技术导则为保障化妆品使用安全，规范化妆品安全评估，指导开展相关工作，制定本导则。
1.适用范围本导则适用于化妆品原料和产品的安全评估。
2.基本原则与要求2.1 原料的安全性是化妆品产品安全的前提条件。
化妆品原料的风险评估包括原料本身及可能带入的风险物质；化妆品产品一般可认为是各种原料的组合，应基于所有原料和风险物质进行评估，如果确认某些原料之间存在化学和/或生物学等相互作用的，应评估其产生的风险物质和/或相互作用产生的潜在安全风险。
2.2 化妆品安全评估应遵循证据权重原则，以现有科学数据和相关信息为基础，遵循科学、公正、透明和个案分析的原则，在实施过程中应保证安全评估工作的独立性。
2.3 化妆品安全评估引用的参考资料应为全文形式公开发表的技术报告、通告、专业书籍或学术论文，以及国际权威机构发布的数据或风险评估资料等；应用未公开发表的研究结果时，需经数据所有权方同意，并分析结果的科学性、准确性、真实性和可靠性等。
2.4 化妆品的安全评估工作应由具有相应能力的安全评估人员按照本导则的要求进行评估，并出具评估报告。
—3 —2.5 化妆品注册人、备案人应自行或委托专业机构开展安全评估，形成安全评估报告，并对其真实性、科学性负责。
2.6 化妆品的安全评估资料应当根据需要及时更新，保存期限不少于最后一批上市产品保质期结束以后10年。
化妆品成分的毒理学与安全性评估
化妆品成分的毒理学与安全性评估随着化妆品的使用与普及，人们越来越关注化妆品成分的安全性问题。
毒理学与安全性评估成为化妆品研发与生产过程中的重要一环。
本文将探讨化妆品成分的毒理学与安全性评估，及其在化妆品领域的应用。
化妆品成分的毒理学评估化妆品成分的毒理学评估是对成分在特定条件下对生命体的毒性与安全性评估。
包括化学成分的毒性测试、安全性评估、致癌性评估、遗传毒性评估、生殖毒性评估、免疫毒性评估、神经毒性评估等多个方面。
化妆品成分的毒性测试包括急性毒性测试与慢性毒性测试。
急性毒性测试是对化学品在短时间内对生命体的毒性评估，慢性毒性测试是对长期接触产生的潜在毒性影响评估。
安全性评估是基于实验数据与临床研究结合评估化妆品成分对人体健康的潜在危害。
致癌性评估、遗传毒性评估、生殖毒性评估、免疫毒性评估、神经毒性评估等各类评估方面则是根据成分的功能、用途、途径、毒性等多方面进行综合评估。
化妆品成分的安全性评估化妆品成分的安全性评估包括人体安全性评估、环境安全性评估。
其中人体安全性评估包括表皮吸收性、皮肤刺激性、眼部刺激性、酸碱度及pH值、超敏感性等各个方面的评估。
皮肤刺激性评估是根据化学成分引起人体皮肤红肿、瘙痒、过敏等不适反应进行评价。
眼部刺激性评估则是评价化学成分对眼睛的刺激程度。
酸碱度及pH值评估则是根据各种环境因素的影响，如使用后对皮肤酸碱度的影响进行相关测试。
超敏感性则是根据儿童、孕妇、老年人、各种皮肤疾病人群等不同人群可能出现的过敏反应进行评估。
环境安全性评估则是根据成分接触土壤、水体等环境因素的影响进行评估。
包括生态毒理学、环境毒理学、分子毒理学等方面。
化妆品成分的应用化妆品成分的毒理学与安全性评估不仅仅是在生产过程中的必要环节，也是在营销与消费过程中的重要策略。
合理使用毒理学与安全性评估可以提高化妆品行业的生产技术水平，增强市场竞争力。
同时，在消费者需求日益增长的今天，化妆品成分的毒理学与安全性评估给人们提供了更加可信、安心的选择。
化妆品安全技术规范
化妆品安全技术规范近年来，随着人们对个人形象和美容的重视度不断提高，化妆品行业蓬勃发展。
然而，化妆品在使用过程中存在一定的安全隐患，对人体健康可能会产生一定的威胁。
为了保障公众的安全和健康，化妆品行业必须建立一系列的安全技术规范。
本文将从化妆品安全技术规范的制定、试验方法与评价、生产质量控制以及市场监督等方面进行阐述，以期提高化妆品的安全性，保护公众的权益。
一、化妆品安全技术规范的制定化妆品安全技术规范的制定是保障化妆品安全的重要手段。
第一步是建立一个完整的技术标准体系，包括化妆品原料的安全性评估体系、产品标准和检测分析方法的标准体系等。
其次，制定标准应当参照国际通行的规范和标准，同时结合国内行业特点和消费者需求进行修订，确保标准的科学性和实用性。
此外，在制定标准时还应加强与相关部门的合作，共同推进行业发展和安全技术规范的制定工作。
二、试验方法与评价针对化妆品的安全性评价，合理的试验方法至关重要。
对于化妆品原料和成品，应该建立全面的试验项目和方法，包括对致敏性、刺激性、皮肤渗透性、眼刺激性、光敏性、基因毒性等的评估。
试验方法应符合科学、准确、可重复的原则，并参照国际标准。
同时，为了提高评价的准确性，建议在试验评价中引入动物试验、人体感官评估和实际使用试验等多种手段，以全面了解化妆品的安全性。
三、生产质量控制为了确保化妆品的安全性，企业应对生产过程进行全面的质量控制。
首先，企业必须建立一套完善的原料供应商管理制度，确保原料来源的可靠性和质量的稳定性。
其次，企业应建立严格的生产工艺流程和控制措施，包括原料配比、生产环境卫生、操作规程等。
在生产过程中，企业还应不定期地进行化妆品的质量抽检，确保产品的合格率和安全性。
四、市场监督市场监督是保障化妆品安全的重要环节。
政府部门应加强化妆品行业的监管，定期检查和抽检市场上的化妆品产品。
对于违反安全技术规范的企业和产品，依法进行处罚，并及时公示，提醒消费者注意。
化妆品安全评估技术导则 (2021年版)
化妆品安全评估技术导则 (2021年版)化妆品安全评估技术导则是指对化妆品进行安全评估时所遵循的一系列技术指导原则。
化妆品安全评估是保障消费者健康与安全的重要环节，该导则旨在提供一套科学、可靠、规范的评估方法，以确保化妆品的安全性和合规性。
以下是2021年版的化妆品安全评估技术导则的主要内容。
一、安全性评估原则1.安全性评估应基于科学证据和可靠数据，遵循国家相关法律法规和国际公认的技术指南。
2.根据化妆品的用途和成分特点，确定评估的重点和侧重点，并制定相应的测试标准和方法。
3.关注消费者群体的特殊需求和敏感性，对于婴幼儿、孕妇、老年人等特殊群体，应进行更为严格的安全性评估。
4.评估过程应具有透明度，包括数据来源、评估方法和结论等应向相关部门和消费者提供。
二、评估内容与方法1.化学成分评估：对化妆品中的化学成分进行全面评估，包括成分的安全性、质量和含量等。
通过实验室分析和动物试验等手段，评估成分对人体的潜在风险。
2.毒理学评估：通过实验室动物试验和体外评估等方法，对成分的毒理学效应进行评估，包括皮肤刺激、眼刺激、皮肤吸收性、致敏性等。
3.致病菌评估：对产品表面和包装材料进行微生物测试，以评估其中是否存在致病菌和其他微生物污染。
4.重金属评估：通过实验室分析和化学测试等方法，评估产品中的重金属含量，确保其符合国家相关标准。
5.稳定性评估：对产品的稳定性和质量进行评估，包括pH值、氧化性等指标的测试，保证产品的安全性和有效性。
6.包装评估：对包装材料进行评估，包括塑料、玻璃、金属等材料的安全性和稳定性，以及包装和产品之间的相容性。
三、评估结果与标签要求1.安全性评估的结果应真实、客观、科学，并以易理解的方式向消费者传达。
相关结果和标签信息应充分明确地列出化妆品的功能、成分和使用注意事项等。
2.化妆品标签应符合国家和地区的相关标签要求，并包含必要的警示标志、成分列表、使用方法和注意事项等。
3.对于高风险或特殊用途的化妆品，应提供更为详尽的安全性评估报告和标签信息。
稳定性评价(化妆品)
将化妆品置于低温条件下进行长 期储存，以评估其在低温环境下 的稳定性。
挑战性试验
配方挑战性试验
通过调整化妆品的配方组成，观察其对产品稳定性的影响。
工艺挑战性试验
改变生产工艺参数或流程，评估化妆品在不同工艺条件下的稳定 性。
包装挑战性试验
采用不同的包装材料和包装形式，研究包装对化妆品稳定性的影 响。
通过化学分析方法，检 测面霜中关键成分在不 同时间点的含量变化， 以评估其成分的稳定性。
面霜使用安全性
通过皮肤刺激性试验和 过敏性试验，评估面霜 在使用过程中的安全性 和舒适性。
实例三：某品牌化妆水稳定性评价
1 2 3
化妆水色泽稳定性
观察化妆水在不同条件下的色泽变化，以评估其 颜色的稳定性。
化妆水香气稳定性
微生物稳定性
包括产品的外观、色泽、气味、pH值、粘 度等理化性质在储存和使用过程中的稳定 性。
评价产品对微生物的抵抗能力，以及在特 定条件下的微生物污染风险。
功效稳定性
包装材料相容性
针对具有特殊功效的化妆品，如美白、防 晒等，评价其功效成分在储存和使用过程 中的稳定性和有效性。
考察产品与包装材料的相容性，确保包装 材料不会对产品的稳定性产生不良影响。
02 优化配方中的酸碱度，避免过酸或过碱的环境导 致产品不稳定。
03 减少配方中的水分含量，以降低微生物污染的风 险。
改进生产工艺
采用先进的生产工艺和设备，确保生产过程中的 温度、压力、时间等参数得到精确控制。
加强生产过程中的卫生管理，避免微生物污染。
对生产设备进行定期清洗和消毒，确保生产环境 的洁净度。
提升产品质量
稳定性评价可以揭示化妆品在储存和使用过程中的质量变化有助于提升产品质量和竞争力。
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摘要：眼髂是最容易接触化按品及其成分的器官２一．眼莉激性评价是安全性评价技——化妆品眼束０
传统眼部觏激试验采用实验动物进ｔ动物极大的痛苦ｊ近年来．多种替１
—手广某些条件下，眼睛可能成为化妆品及其成分ｆ¨径．因而外源物质可能造成眼部的健康危害．
作用包括：眼及外周组织的局部刺激、损伤和炎症反应．过敏反应。眼深部的组织损伤，临床表现为眼部疼痛、刺痛、灼热、眼睑眨动、泪液增多．严重者引起不同程度的功能性损失，如角膜浑浊、水肿、甚至视力下降。正常情况下．眼睛很少直接接触外源物质、但在化妆品使用过程中．通常由于意外使化妆品以稀释的形式进入眼睛（例如香波），产生刺激作用。眼刺激性是指眼睛前表面直接接触受试物后引起的眼及其周围粘膜可逆性炎性变化眼腐蚀性是指眼睛前表面直接接触受试物后引起的眼及其周围粘膜不可逆性组织损伤。１
检测化学物的刺激性和腐蚀性的传统实验是由Ｄｒａｉｚｅ等提出的兔眼实验，目前仍是测定息性眼毒性的国际标准。近年来．在动物福利的压力下．一些优化的试验方法被提出。并陆续被验证和认可。除了经验证认可的替代方法外ＩＢＣＯＰ试验、ＩＣＥ试验、ＩＲＥ试验）．大多数化妆品公司将一些所４８谓“有效（ｖａｌｉｄ）”替代方法用于化妆品成品筛选。有效替代方法被定义为：还没有通过完整验证程序的技术．但存在足够多的丰斗学数据证明其相关性和可靠性。这些方法包括ＨＥＴ—ＣＡＭ测试、ＲＢＣ试验及ＮＲＵ试验。这些方法目前可作为危险识别的筛选工具，用于非风险评估过程。
ｉ．体—●曩■—量生■一体内眼刺激的发生机制表明．实验兔暴露受试物后最初几个小时（一般３小时）内。角膜的损伤程度可以预测眼睛损伤的持续时间和最终损伤程度。一般来说．轻度刺激物只影响表层角膜上皮．轻度和中度刺激物主要影响上皮和表层基质．严重刺激物能穿透更深的基质
瑟黧
万方数据发挥作用，甚至可能是基质全部。而且损伤的可逆性和最初的损伤程度相关。角膜损伤程度（细胞损伤）和大体观察两者之间的相关关系．对于开发和验证预测眼刺激性的体外，离体检测方法提供了机理性基础。在所有可能影口自角膜损伤的动力学因素中．受试物的自身细胞毒性潜力排在第一位。那些可溶解细胞膜或者是导致蛋白质凝集的物质可立即产生细胞毒性。如表面活化剂和一些有机溶剂是这类物质的代表。那些作用于细胞能量代谢的物质也可快速产生作用．但可能没有第一类物质迅速。化学物质还可以通过对大分子的烷化或者其他影响而产生作用．这类物质的作用可能表现为一种迟发性的细胞毒性（如迟发性坏死或者凋亡）。体内眼刺激实验中受试物局部接触角膜和结膜．而实际情况下暴露的持续时间并不确定．可能从几分钟到几小时不等。角膜细胞层的分．从而对生理反应做出分类。目前
在不同的法规中有多种不同的评分系统，评价范围有最大单次组织计分和全部三种组织平均加权总分计分几种。对于化妆品的安全评估．加权总分、最大平均分（ＭＡＳ）和改良最大平均分（ＭＭＡＳ．不包括接触受试物后１小时的结果）均在使用。这些年来．为了减轻动物遭受的痛苦和使受损组织更快恢复．已经提出一些优化意见。例如低眼容量实验（ＬＶＥＴ）。目前．减少和优化的方法已经包括在试验策略中．作为动物试验的补充．而体内兔眼试验仅需要在最后一步进行．也就是说当全部其他序列试验已经得出阴性评价结果．需要对轻度到中度的刺激性混台物进行评价时才考虑性体内试验。
三．体丹■■方毒１９９１至１９９７年间在欧盟机构主导下．共进行了６项眼刺激试验的评价研究．对９项体外替代方法进行了评估。当时的结论认为没有一璎研究可以完全替代Ｄｒａｉｚｅ实验，但其中的一些实验作为跟刺激物筛选的方法或组合试验的一音Ｂ分可用于眼刺激试验的替代方法。后来经过持续改进．部分替代方法通过了ＥＣＶＡＭ、ＩＣＣＶＡＭ等验证机构的验证．２００９年．ＢＣＯＰ、ＩＣＥ和ＩＲＥ方法被ＯＥＣＤ认可用于替代眼镕Ｉ激试验。１牛角膜浑浊和渗透性实验（ＢｏｖｉｎｅＣｏｒｈｅａｌＯｐａｃｉｔｙａｎｄ
Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ．ＢＣＯＰ）使用屠宰场获得的标本，将新鲜分离的角膜水平固定于支持架．然后放置于特殊改进的透光容器里。恒温条件下．封闭
蕊∞万方数据角膜将测试容器分为上下２个隔室．受试物添加于上隔室中，通过测量下室培养液的光密度｛ＯＤ）评估角膜的渗透性。测出的透光值和渗透值可用来进行体外分值计算。根据这评分系统可对受试物进行分类。ＢＣＯＰ可用于化妆品原料及成品的安全评怙．也可用于日用和工业用清洁产品、盥洗产品、杀虫剂等相关化学品和配方。８ＣＯＰ实验非常适合用于测试不同物理性状和溶解度范围较大的受试物，适用于鉴定中度、重度和极重度眼刺激性物质．但对区分轻度到极轻度的水平的刺激物似乎不太敏感，后者更适合用上皮样组织结构或者细胞毒性方法进行检测。欧盟ＥＣＶＡＭ和美国ｔＣＣＶＡＭ于２００７年通过对该方法的验证．２００９年成为ＯＥＣＤ正式试验指南（ＴＧ４３７ｌ。２离体免眼实验（ｉｓｏｌａｔｅｄｒａｂｂｉｔｅｙｅｔｅｓｔ．ＩＲＥ）．其原理是眼球接触刺激性物后，检测角膜透光值和角膜增厚（角膜肿胀Ｊ评价受试物的眼刺激性。从人道处死的实验免分离完整眼球，固定和直立维持于超渗容器中，滴八生理盐水使角膜保持湿润。试验时．将受试样品直接与眼球接触。暴露时间不定。例如鉴定严重刺激物接触１０秒．区分损伤程度较轻的受试物可接触１分钟或更长。去除受试物后．将眼球重新放入容器中．检查角膜透光值和角膜厚度。３０分钟和１、２、３、４小时后进一步评估。染毒３０分钟和４／Ｊｘ时分别检查荧光素渗透性。记录角膜透光值和荧光豪渗透性。根据获得的试验结果．通过不同观察指标的组合分析可对受试物的总体损伤做出评估。５０通常导致角膜水肿超过１５％的化学物可认为具有严重服刺激性。ＩＲＥ实验适合检测大多数类型的受试物．特别是用采筛选严重刺激性的物质（Ｒ４１）。ＩＲＥ实验主要用来预测角膜损伤，它不能提供受试物对结膜的作用或角膜损伤后的恢复。因此不能绝对认为ＩＲＥ实验中未观察损伤代表在体内也无作用。３离体鸡眼实验（ＩｓｏＩａｔｅｄＣｈｉｃｋｅｎＥｙｅ．ＩＣＥ）．ＩＣＥ是一种利
用离体鸡球短期培养进行眼刺激检测的体外方法．眼损伤通过角膜水肿、通透性和荧光素渗透进行评价。可用于评价腐蚀物和严重眼刺激物．或作为组合试验的一部分用于特定化学物质的法规分类的标识。其原理和具体操作过程类ｆ以于ＩＲＥ。角膜水肿、透光值和荧光素滞留的数值作为毒理学终点。平均最大分值用于对无刺激到严重刺激物进行分类，计算ＩＣＥ刺激指数．其范围从
万方数据圈．素■置舫蕾１鸡胚绒毛膜尿囊膜试验（Ｈｅｎ’Ｓｅｇｇｔｅｓｔｏｎｔｈｅｃｈｏｒｉｏ－ａｌｌａｎｔｏｉｃｍｅｍｂｒａｎｅ．ＨＥＴ－ＣＡＭＩ利用鸡胚绒毛膜尿囊膜结构与人结膜相似的特点，可用于眼刺激物或腐蚀物有鉴定。ＨＥＴ—ＣＡＭ试验系统主要测定３种反应．即出血、血管溶解和凝血Ｉ有时充血也可作为观寮指标）。受试物直接接触ＣＡＭ膜．于５分钟内评价上述三种指标的发生情况。使用最广泛的方法是反应时间法，测定３种反应终点每一种出现的时间。另一种方法是刺激闻值法，测定第一发观察到出现上述毒性终点的受试物浓度。第三种方法可用于不透明难溶解和固体受试物的检测．即将ＣＡＭ暴露于受试物一个固定时间（如３０秒或者５分钟Ｊ，ＪＪｗｂ冲洗除去受试样品后检查上述终点。大多数验证评估结论认为ＨＥＴ～ＣＡＭ实验和Ｏｒａｉｚｅ实验在评估原材料和化被品方面具有相关性。体外实验和体内实验在轻度和非刺激性受试物、表面活性剂和以表面活性剂为基础的配方等物质的测试中显
示较好相关性。但是，ＨＩ＝Ｔ－ＣＡＭ试验没有疆盖Ｏｒａｉｚｅ的最大平均分值（ＭＡＳ）的全部范围，对于固体、不溶性或粘稠物质的测试在实验结果的重复性方面鞍差，色素和染料可通过对ＣＡＭ染色而产生干扰。ＨＥＴ—ＣＡＭ实验可作为眼刺激性的筛选方法．用于配７５－／原料的安全评价中，确定可能的非刺激性或者轻度刺激物．有效的减少了动物试验。也可用于为管理目的进行的风险评估中和用于物质的标识和分类。ＨＥＴ—ＣＡＭ实验已被法国、德国、荷兰和英国的管理部门认可．用于严重刺激物的分类。２绒毛膜尿囊膜血管试验ｌＣｈｏｒｉｏａＩＩａｎｔｏｉｃｍｅｍｂｒａｎｅ
ｖａｓｃｕｌａｒａｓｓａｙ．ＣＡＭＶＡ）方法通过观察受试物对血管的作用评价潜在的眼刺激性．取１０天龄鸡胚．受试物直接接触ＣＡＭ的小片区域．暴露３０分钟后观察ＣＡＭ血管变化．例如出血或充血（毛细血管扩张）、血管消失（鬼影血管）．使５０％的受精卵出现这些损伤的受试物浓度被认为是毒性终点。ＣＡＭＶＡ］试验需要测定１０
；；ｉｌｌＯ万方数据ｐ个供试鸡胚出现５０％阳性反应所达到的剂量。水溶性和脂溶性物质都可用干检测。ＣＯＬＩＰＡ和美国ＣＴＦＡ等在内的多个机构组织的验证评估研究结果表明．ＣＡＭＶＡ方法和兔限刺激实验的最大平均分值（ＭＡＳ）值有很好的相关性．可正确将受试物分类为刺激物和非刺激物。ＣＯＬＩＰＡ的研究结论表明ＣＡＭＶＡ更遗台检测水醇类物质。总体上讲，适合作为化妆品和个人护理用品配方、醇类物质和表面活性剂的刺激程度的筛选方法。最适舍用于评价轻度到中度范围的刺激性物质．但不能用于严重刺激性物质的分类。３绒毛膜尿囊膜苔盼蓝染色试验（ｃｈｉｃｋｅｎｃｈｏｒｌｏａｌＩａｎｔｏＩｃｍｅｍｂｒａｎｅ—ｔｒｙｐａｎｂｌｕｅｓｔａｉｎｉｎｇ，ＣＡＭ—ＴＢ）是经过改进的ＨＥＴ—ＣＡＭ方法。ＣＡＭ—ＴＢ试验克服了ＨＥＴ—ＣＡＭ实验缺乏客观性和难量化的缺点，通过测定ＣＡＭ吸收台盼蓝的量来检测受试物损伤作用。结果表明该方法ｂｂＨＥＴ—ＣＡＭ实验方法变异性低，而且和最大平均分值（ＭＡＳ）有很好的相关性。局限性与ＨＥＴＣＡＭ类似．有色物质可能干扰终点的测定。Ｓ２４重组人角膜组织模型（ＨｕｍａｎｃｏｒｎｅａＩｅＰｉｔｈｅＩｉｕｍｍｏｄｅｌｓ）ＥｐｉＯｃｕｌａｒ模型由美国ＭａｔＴｅｋ公司生产．由来源干正常人的表皮角质细胞生长于特殊制备的嵌八式细胞培养板中以无血清培养基制备而成．细胞分化形成的多层结构与角膜上皮相似。ＥｐＩＯｃｕｌａｒ试验与多项细胞毒性和刺激试验联台使用．主要是ＭＴＴ检测．也包括ＩＬ—ｌａ、ＰＧＥ２、ＬＤＨ和钠荧光囊渗透性检测。通过ＭＴＴ试验得出ＥＴ５０的值（使组织活性降低５０％的有效暴露时间）并与动物体内试验数据比较．可用于检测中度到极轻度范围内的眼刺激物。通过非常短的ＥＴ５０的值，该模型也可用于区分高中度和严重刺激物。目前该方法已在化妆品、个人护理、日化和化工企业的研究实验室和企业使用．用于确定受试物的毒性限■（如测定轻微作用水平剂量），或用于ｌ轻到中度眼刺激性）产品配方的Ｉ临床前安全性试验．以及用于配方优化、表面活性剂及奠配方的安全评估等。ＳｋｉｎＥｔｈｉｃＴＭＨＣＥ模型是由法圈ＳｋｉｎＥｔｈｉｃ实验室开发．是将永生