血清脂类测定
血清脂类测定血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。
目前，对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程，均必须检测血浆（清）中的脂类，通过其含量的变化，对临床疾患提供协助诊断的依据。
有关医学科研工作，脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。
1．胆固醇测定血浆中胆固醇及其酯的含量检测，从方法学上可分为两大类：一类是化学法包括抽提法和直接测定法，这类方法目前仍在沿用；另一类是酶法测定，方法敏感特异快速，并能自动化分析，已常规应用。
化学测定法种类多，由于显色反应的特异性不同，其结果有一定的差异。
目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B反应)法。
另外，三氯化铁-硫酸反应法（Zak法）具有显色稳定法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法，胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点，缺点是特异性差，干扰因素比L-B法多，如冰醋酸中含有的乙醛酸，血清样品中的血红蛋白，胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性，Zak法更适合于科研使用。
酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用，国产试剂已能满足临床的需要。
胆固醇测定用的标准品，按美国国家标准局（NBS）出品纯度达99.8%,是国际公认的参考物，国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品，已供临床检测血清胆固醇使用。
2．甘油三酯测定血浆甘油三酯的测定，目前多以化学法和酶法定量。
化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性，水解成甘油，并以甘油为计算依据。
酶法是以特异酶水解甘油三酯，除去脂肪酸，再测定甘油，方法特异，准确而快速，临床广为应用。
目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据，然而血清样品中存在有游离甘油，如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油，多年来一直在研究讨论这一问题。
若不减去，其测定值将会高于血清样品中的真值，如果要减去，就必须先测出血清样品中的游离甘油，甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤，实际工作中难以做到。
有报道血清样品中的游离甘油实际量是0.07～0.13mmol/L，相当于甘油三酯的0.5～6.0mmol/L，为此建议，实测的甘油三酯量减去一个校正系数即：甘油三酯（mmol/L）=[0.98×总甘油（mmol/L）]-0.07（mmol/L）。
这一校正系数也仅适用于健康人，对临床病人并不一定适用。
据报道，血清样品的游离甘油一直是个未知数，无法测准。
为此，目前临床测定血清甘油三酯时，基本上未考虑游离甘油，因为其含量很少，暂且忽略不记。
甘油三酯测定的参考物，推荐三油酸甘油酯和三软脂酸甘油酯混合物（2：1，W/W），此参考物适用于化学法。
在酶法测定中，仍以高纯度的三油酸甘油酯为参考物。
3．磷脂测定血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神经磷脂、脑磷脂和其他少量磷脂。
如需要分别检测各种磷脂，可以通过薄层层析法、柱层析法和高压液相色谱法。
目前，临床仅测定血清磷脂总量。
血清磷脂总量的测定方法有化学方法和酶法两大类。
化学法是以磷脂中的磷为定量依据，因为每磷脂分子中都含有一个磷酸根，故将磷脂的磷称为脂性磷。
由于血清中磷脂大部分为卵磷脂，其分子量中磷约占4%，故将脂性磷换算成磷脂的系数，一般为25。
由于化学法均需要抽提，再测抽提液中的磷脂的磷，血清中的磷酸盐不可能混入抽提液中，因此血清中的磷酸盐对磷脂测定的干扰很少。
酶法是利用磷脂酶进行定量测定。
生物体中磷脂酶包括磷脂酶A1、A2、C和D四种。
磷脂酶D特异性差，均可水解卵磷脂、溶血卵磷脂和神经磷脂，三者约占血清总磷脂的95%，临床多用含磷脂酶d 的试剂进行磷脂的定量测定。
4．游离脂肪酸测定游离脂肪酸属于未酯化的一类脂肪酸，故又称为非酯化脂肪酸，其量很少，采用方法必须是灵敏的方法，还需要避免脂肪水解产生脂肪酸的干扰。
测定方法有：①滴定法需要微量滴定装置，因为要通过肉眼观察颜色，难免会有主观因素的影响，所以难以测定准确，很难用于常规；②光度法，以铜皂法常用；③酶法，主要采用特异性不强的脂肪酶D进行检测，方法特异，快速准确，已常规应用于临床。
第一节胆固醇测定血清中胆固醇包括CE和FC，酯型的CE占70%，FC占30%。
CE中的C3的-OH在LCAT作用下，可分别结合亚油酸（43%）、油酸（24%）、软脂酸（10%）、亚麻油酸（6%）、花生四烯酸（6%）、硬脂酸（3%）等脂肪酸结合而成。
血清中胆固醇在LDL中最多，其次是HDL和VLDL、CM最少。
血清总胆固醇测定方法分为化学法和酶法两大类。
1．化学法化学法一般包括：①抽提；②皂化；③毛地黄皂苷沉淀纯化；④显色比色四个阶段。
代表性的方法有Sperry-Webb法，通过①～④步骤操作过程。
常规操作中多采用省去了②、③。
或者用省去②、③步骤的Zak-Henly法及省去③步骤的Abell-Kendall法，现将此法作为标准参考方法予以引用。
2．酵法测定CE在胆固醇酯酶（cholesterolesterase）作用下水解成FC和NFFA，TC再经胆固醇氧化酶（cholesterol oxidase,COD）氧化成△4胆甾烯酮和H2O2。
再分别定量O2的消耗或者H2O2的生成量，或者△4胆甾烯酮生成量,以作为TC的定量依据。
该法是目前常规的应用方法，快速准确，标本用量少，便于自动生化分析仪作批量测定。
一、Abell-Kendall改良法1．原理血清加入醇溶性氢氧化钾，使胆固醇从脂蛋白中分离出来，同时使胆固醇酯加水分解成游离胆固醇，加石油醚振摇、抽提，使胆固醇移入石油醚层，分离并取一定量的石油醚层，蒸发至干，再进行Liebermann-Burchard 显色反应，620nm比色定量。
该法可用于基本功训练及组织细胞胆固醇的提取定量。
2．试剂组成*：在三角烧瓶内，加入无水醋酸，于冰水中冷至10℃以下，再慢慢加入浓硫酸，混合，静置10min，又加冰醋酸混匀，备用。
3．操作图15-1 血清胆固醇（Abell法）测定操作图按图15-1操作。
4．计算标准总胆固醇浓度=E SA/E ST×5.17(mmol/L)二、酶法（CEH、COD-POD法）首先将血清中胆固醇酯在胆固醇酯酶（CEH）水解为游离胆固醇和脂肪酸，胆固醇在胆固醇氧化酶（COD）作用下，生成△4-胆甾烯酮和H2O2，再H2O2经过氧化物酶（POD）作用在4-氨基安替比林（4-AA-P）及N-乙基-N-（3-磺基醋酸）-3甲氧基苯胺（N-ethyl-N-(3-sulfopropyl)-manisidine,ESPAS）参与下，生成红色醌亚胺色素。
H2O2+ESPAS+4-氨基安替比林→红色醌亚胺色素（一）手工测定法1．试剂组成*混匀，调pH至6.70±0.10(25℃)，或购买试剂盒。
酶以活性单位表示。
2．操作按图15-2操作。
3．计算标准总胆固醇浓度=E SA/E ST×5.17(mmol/L)（二）自动化分析仪测定以CL-7200型全自动生化分析仪检测为例。
1．试剂组成A液：CEH、POD、抗坏血酸氧化酶等。
B液：COD、4-氨基安替比林等。
图15-2 血清胆固醇测定（酶法）操作图2．上机参数3．操作过程4．计算以△A=A2-A1，根据同样处理之标准或质控物计算，打印结果。
5．注意事项（1）试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。
（2）试剂在有效内2～8℃避光食保存。
（3）胆固醇含量超过200mmol/L，需用生理盐水稀释再测。
第二节甘油三酯测定甘油三酯又称中性脂肪，由于其甘油骨架上分别结合了3分子脂肪酸、2分子脂肪酸或1分子脂肪酸，相应称为甘油三酯（TG）、甘油二酯（DG）和甘油一酯（MG）。
血清中90%～95%是TG，TG 中结合的脂肪酸分别为油酸（44%）、软脂酸（26%）、亚油酸（16%）和棕榈油酸（7%）。
血清TG测定方法一般分为物理化学法、化学法及酶法三大类。
血清中TG的化学组成并不单一，准确求其分子较为困难。
因标准不同，测定结果存在差异。
化学法多采用三棕榈精（软脂精）（分子量807.3）、三油精（分子量895.4）为标准，按摩尔浓度计算。
酶法测定以三油精为标准物进行换算。
1．化学法化学测定法包括：①TG的抽提分离；②皂化；③甘油糖的氧化；④氧化生成甲掌显色定量等四个阶段。
操作较为繁杂，影响测定因素太多，本法准确性差，一般很少用。
2．酶法测定酶法测定包括：①TG的抽提与皂化；②加水分解生成甘油糖定量等二个阶段。
目前常规检测应用的方法有甘油激酶（glycerolkinase,GK）法和甘油氧化酶（glycerol Oxidase,GOD）法。
操作简便，快速准确，并能在自动化生化分析仪上进行批量测定。
一、乙酰丙酮法1．原理血清中加入异丙醇抽提取甘油三酯，经KOH皂化使甘油三酯水解生成甘油及脂肪酸，甘油在过碘酸作用下氧化成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色的3，5二乙酰，1，4二氢甲基吡啶，其颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比，420nm测定定量。
该法可用于基本功训练及组织细胞TG的提取测定。
2．试剂组成3．操作按图15-3操作。
图15-3 血清甘油三酯（乙酯丙酮法）测定操作图4．计算血清TG浓度=E SA/E ST×1.13(mmol/L)二、酶法（GK-GPO-POD比色法）血清中甘油三酯经脂肪酶水解为甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶（GK）及ATP存在下，生成3-磷酸甘油，尔后，在磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化成磷酸二羟丙酮并生成H2O2，H2O2与底物4-氨基安替比林和ESPAS在过氧化物酶（POD）作用下，生成红色亚醌化合物（quinoneimine），比色（500nm），其颜色深浅与甘油三酯含量成正比。
（一）手工测定法1．试剂组成*：一般采用商品试剂盒图15-4 血清甘油三酯测定法（酶法）操作图2．操作按图15-4操作。
3．计算血清TG浓度=E SA/E ST×2.26(mmol/L)（二）生化分析仪检测全自动生化分析仪测定操作（以CL-7200型为例）。
1．试剂A液：GK，GPO，4-AA-P、抗坏血酸氧化酶等。
B液：POD，Lipase,ESPAS等。
标准液：甘油三油酸酯 200mg/dl(2.26mmol/L)。
2．上机参数3．操作过程4．计算以△A=A2-A1并根据同样之标准或质控物计算，自动打印结果。
5．注意事项①试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。
②试剂在有效期内2～8℃避光保存。
③样本中甘油三酯含量超过11mmol/L需用生理盐水稀释后再测。
第三节磷脂测定磷脂（PL）并非单一的化合物，其分子内含有磷酸基的多种脂质，磷脂是这一类物质的总称。
血中PL包括：①卵磷脂占60%和溶血卵磷脂占2%～10%；②磷脂酰乙醇胺等，占2%；③鞘磷脂，占20%。
大学精品课件：血脂检查
11
临床意义
北京积水潭医院 检验科
• HDL-胆固醇参与体内胆固醇逆转运（即从 末梢组织把胆固醇运送到肝内代谢），起 到抗动脉粥样硬化作用，所以是冠心病的 保护因子。HDL-胆固醇水平与AS性心、脑 血管疾病发病率成负相关。HDL-C:CHOL 能更好的预测心、脑动脉粥样硬化的危险 性。 • 肝损害和肾病综合征时，HDL-C降低Ⅱ型高脂 血症Ap来自-C肝VLDL
Ⅴ型高脂 血症 Ⅳ型高脂 血症
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Apo-E
肝
VLDL （主要） HDL
受体识别， HDL形成
5.载脂蛋白A1
北京积水潭医院 检验科
• Apo-A1是HDL的主要载脂蛋白成分（90%） • Apo-A1有清除组织内脂质和抗粥样动脉样 硬化作用 临床意义 • Apo-A1血清水平与冠心病发病率负相关
北京积水潭医院 检验科
血清脂类及脂蛋白 生物化学检测
北京积水潭医院 检验科 刘岩
1
概述
北京积水潭医院 检验科
• 血浆脂类包括游离胆固醇（FC）、胆固醇 酯(CE)、磷脂（PL）、甘油三酯（TG）、 糖脂和游离脂肪酸（FFA）等 • 血浆中最多的脂质为胆固醇、PL和TG，游 离胆固醇和胆固醇酯称为总胆固醇 • 血浆脂类以脂蛋白复合体的形式存在 • 血浆脂蛋白分类：CM、VLDL、IDL、LDL、 HDL和Lp(a)
乳糜 残粒
LDL
1.10 1.10 1.20 5 10 20 40 直径 (nm) 60 80 1000
血脂检测项目及临床意义
• 合适范围：<3.37mmol/L；边缘升高： 3.37~4.12mmol/L；升高：>4.14mmol/L
• 增高：见于高脂蛋白血症 冠心病、肾病综 合征、慢性肾功能衰竭 肝病和糖尿病等，
（3） 高血压、脑血管病、冠心病、糖尿 病、肥胖与高脂蛋白血症常有家庭性集聚 现象。
TG减低见重低下，极易引发脂肪肝等 症。
血浆脂蛋白LP
• LP是一种既有蛋白质又有胆固醇还有PL的复 合体，目前用于测量LP的方法有超速离心分 离纯化法、电泳分离法、血浆静置试验。
• 血清中90%~95%是TG，TG中结合的脂肪酸 分别为油酸44%，软脂酸26%，亚油酸16% 和棕榈油酸7%。
• 合适范围：<1.7mmol/L ； 边缘升高：1.7~ • 2.25mmol/L； 升高：>=2.26mmol/L
临床意义：
• 甘油三酯为心血管疾病的危险因素，与冠 心病死亡或心血管事件（心绞痛、心肌梗 塞）成正相关。
• 增高：常见于高胆固醇饮食、糖尿病 肾病综合症、甲状腺功能减退、肝外 阻塞性黄疸、脂肪肝和家族性高胆固 醇血症等。
降低：见于甲状腺功能亢进、重症贫 血、肝硬化、严重营养不良（如吸收 不良综合症）等
甘油三酯TG
• TG构成脂肪组织，参与TC、CE合成及血栓 形成。它存在三种形式甘油一脂MG、甘油 二脂DG、甘油三脂TG。
• 在正常生理情况下，食用高脂肪膳食 后，血浆脂类含量将大幅度上升，但 这是暂时的，通常在3~6小时后可逐渐 趋于正常。因此，检测血脂时，常在 饭后12~14小时采血，这样才能较为可 靠地反映血脂水平的真实情况。
EH患者检测血清脂类和内皮素与尿微量蛋白结果的临床分析
与血压正常组 比较 △ Ｐ＜００ ，＊Ｐ＜ ．１ ．５ Ｏ ０
３ 讨 论
力学 改变 ， 肾小 管 病变 则 是 由 于 肾缺血 所 致［ 。研 究发 现 ， 应用 竞争 性 ＲＡ技术 检测 患者尿 内微 量 Ｉ Ｉ ｎ — Ａ Ｂ ｐ． Ｇ、ｌＭ ＩＧ的含量 是诊 断 Ｅ Ｌ 、２Ｍ ａ— Ｇ、 ｇ Ｈ早 期 。 肾损
－－－－—
—
７ ８ ・— ６ － － － —
Ｃ ｉ ａ ａ ， ｖ ２ １ Ｖ １ Ｎ ． ｈｎ ＪＬ ｂ Ｄｉｔ Ｍａ ， ０ Ｏ， ４， ｏ ５ ｌ ｏ
文章 编号 ： ０ ４ ８（０００ — ７８— ２ １ ７— ２７ ２ １）５ ０６ ０ ０
Ｅ Ｈ患者 检测 血 清脂 类 和 内皮 素 与尿微 量 蛋 白结 果 的临床 分 析
岁， 均 ４． 平 ８ ６岁 ， 程 ５个 月 一５年 ， 病 平均 ２ ８年 。 ． Ｅ Ｈ诊断按 １９ 年 ＷＨ ／Ｓ ９９ Ｏ ＩＨ及 我 国 １９ ９９年 １ ０月颁
布标 准进行 。被 观察 患 者 常规 法检 测 尿蛋 白 、 糖 尿
和血 Ｂ Ｎ、 ｒ 果 均 为 阴性 和在 正 常 参 考 范 围 内。 Ｕ Ｃ结 并通 过辅助检 查排 除继发性 高血 压无肝 、 、 和 内 肾 心
能的早期损害。我们应用竞争性放射免疫技术测定 尿系列微 蛋 白（ｌ Ｌ 、２ＭＧ ａ． Ｇ、 Ｇ） ＩＡ Ｂ Ｊ． 、１Ｍ Ｉ 和血 清 内 ｌ — ３ ｇ
皮 素 （ｒ及 生化 自动分 析仪测定 血 清 Ｔ 、Ｇ Ｂ Ｎ、 Ｅ） ｒ Ｃ Ｔ 、Ｕ Ｃ 含量 ， ｒ 探讨 检澳 结 果 的变 化 对 Ｅ 肾病 早期 损 害 ０ Ｈ 的影响 和临床 意义 ， 现报 道如下 。
Ｅ Ｈ的存 在与缓 慢发展 ， 引起局 部 和全 身动 脉粥 样硬 化 ； 害着心脏 和 肾脏 ， 损 直接影 响着 肾 内血 流动
血脂化验单解读
血脂化验单解读1.甘油三酯:甘油三酯是测定脂类代谢的重要指标之一。
1.1偏高:生理性增高常见于高脂饮食、肥胖等，病理性增高见于原发性和继发性高脂蛋白血症、动脉粥样硬化、肾病综合征、糖尿病等。
血脂影响因素很多，偶尔一次检查发现甘油三酯增高，不一定有临床意义，如连续多次升高，应引起重视。
注意戒烟、禁酒，控制饮食中的热量摄入，加大运动量，定期复查。
1.2偏低:生理性降低常见于饥饿体检、吃的食物脂肪过低、吸收过少、胆汁分泌不足等，病理性降低见于甲亢、重症肝损坏、垂体机能减退、吸收不良等。
血脂影响因素很多，偶尔一次检查发现甘油三酯降低，不一定有临床意义，如连续多次降低，应引起重视。
建议结合临床进行综合评估。
2总胆固醇：总胆固醇是测定脂类代谢的重要指标之一。
2.1偏高:增高主要见于动脉粥样硬化症、糖尿病、肾病综合征、甲状腺功能减退和高脂血症，偶尔一次增高不一定有临床意义，建议合理膳食，低脂饮食，少食甜食、纯糖食品。
多食蔬菜、水果和含优质蛋白的食物（鸡蛋清、脱脂奶）等。
增加体力活动，坚持有氧运动锻炼（如步行、游泳、慢跑、骑车等），并定期复查，必要时口服降脂药治疗。
2.2偏低:降低有两种原因：一是继发性低胆固醇血症，见于甲亢，肝病如肝炎、肝硬化等；另一种是原发性低胆固醇血症，多为饮食不均衡，长期素食、偏食，胆固醇摄入不足。
3.高密度脂蛋白：高密度脂蛋白为血清蛋白之一，由于可输出胆固醇促进胆固醇的代谢，所以现在常作为动脉硬化预防因子而受到重视。
动脉造影证明高密度脂蛋白胆固醇含量与动脉管腔狭窄程度呈显著负相关，故高密度脂蛋白是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白。
3.1偏高:多由不良生活习惯所致，也与遗传、药物等因素有关；建议健康合理饮食，戒烟限酒、坚持运动，保持标准体重，定期复查血脂。
3.2偏低:多由不良生活习惯所致，也与遗传、药物等因素有关；建议健康合理饮食，戒烟限酒、坚持运动，保持标准体重，定期复查血脂。
4.低密度脂蛋白：密度脂蛋白（LDL）是测定脂类代谢的重要指标之一，其主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞，但主要运输到肝脏合成胆酸。
代谢疾病的实验诊断--血脂脂蛋白
代谢疾病的实验诊断—血脂脂蛋白血脂和脂蛋白异常血症脂类代谢紊乱的疾病可以由遗传因素引起，可因环境因素导致,也可继发于其他疾病。
目前对脂质代谢紊乱与疾病关系的研究已从脂质和脂蛋白水平进入载脂蛋白、脂蛋白受体、相关酶、基因等的研究。
多数血脂和脂蛋白异常与动脉粥样硬化有关，是动脉粥样硬化性心脑血管病的危险因子。
1、血脂测定与动脉粥样硬化血脂、脂蛋白、载脂蛋白等测定已广泛用于动脉粥样硬化引起的心血脑血管疾病的流行病学和临床医学领域，但是必须了解这些项目只能用于评估发生动脉粥样硬化和由其引起的心脑血管疾病的危险程度，而不能对这类疾病如CHD作出诊断；但是对于遗传性异常脂蛋白血症等类疾病，则必须用这些试验作为诊断指标。
⑴危险因素的概念：人体的某些生理特征对某些疾病的发生有一定程度的相关性，人们就称这些特征为某种疾病的危险因素。
现在都很重视血脂水平和发生动脉粥样硬化的关系，实际上血脂就是发生动脉粥样硬化的危险因素，但只能用于估计发生动脉粥样硬化的危险性，而不能用做特异性的诊断指标。
以冠心病（CHD）为例，CHD是一种多因素疾病，血脂异常只是CHD的发病因素之一，不是所有CHD患者血脂都增高，也不是所有血脂增高者都必然患CHD，所以它对CHD来说不能做为一个诊断指标，只能作为一个危险因素看待。
其它脂质和脂蛋白测定如HDL-C、LDL-C、apoA、ApoB等也都是属于危险因素而非诊断指标。
⑵血脂检查的临床应用血脂检测是临床常用的检验指标之一，血脂代谢异常与许多疾病的发生关系密切，临床血脂检测主要用于：①作为健康普查指标，预防和早期发现高脂蛋白血症，起监控作用；②协助判断动脉粥样硬化，进行病情观察和指导治疗；③评价冠心病，脑梗塞等动脉粥样硬化疾患的危险度；④对少见的遗传性脂蛋白异常性疾病进行诊断；⑤对继发性血脂异常的疾病进行监测和评估；⑥监测和评价饮食和药物治疗效果；⑦其他。
⑶血脂试验项目的选择：血清中主要的脂质有TG、TC，脂蛋白有HDL、LDL、VLDL、Lp(a)，临床上可以分别选择测定这几种脂蛋白。
[医学]临床血脂测定与应用
![[医学]临床血脂测定与应用](https://360docs-1393072327.cos.ap-beijing.myqcloud.com/25247a1a80eb6294dd886cfa.webp)
中国胆固醇教育计划（CCEP）系列讲座
分析前变异对血脂测定结果的影响
鄢盛恺执笔:关于临床血脂测定的建议 <中华检验医学杂志> 2003,26(3) 182-184
中国胆固醇教育计划（CCEP）列讲座
分析前变异的主要来源（1）
生物学因素
个体间、性别、年龄、种族
平均生物学变异：
中国胆固醇教育计划（CCEP）系列讲座
临床因素——药物诱导（1）
抗高血压药
• 如噻嗪类（利尿药）可使血清TC(12%)、LDL-
C(20%)、TG(7%)、apoB(20%)水平升高；而HDLC(16%)、apoAI(6%)水平降低。
• 心得安（ß受体阻滞剂）可使血清TG增高而HDL-C
降低。
雌激素
可以使TC、 LDL-C、apoB和TG降低，而饱和 脂 肪 酸 （ 主 要 是 棕 榈 酸 ） 可 使 TC、LDL-C 升 高。
• 水溶性纤维素（fiber）可降低TC。 • 严格素食者的LDL-C、Lp(a)分别比非素食者
低37％、35％，而HDL-C高12％。
中国胆固醇教育计划（CCEP）系列讲座
• 正常量运动对Lp(a)无影响，剧烈体育活动可
使Lp(a)上升10％~15％。
中国胆固醇教育计划（CCEP）系列讲座
分析前变异的主要来源（2）
临床因素
• 疾病继发
内分泌或代谢性疾病、肾脏疾病、肝胆疾病及其他
• 药物诱导
抗高血压药、免疫抑制剂及雌激素等
标本收集与处理
禁食状态、血液浓缩、抗凝剂防腐剂、 毛细血管与静脉血、标本贮存等。
TC HDL-C apoAI Lp(a)
6.1%~11%， 7%~12%， 7%~8%， 8.6%。
临床生化检验 第四章 脂蛋白的测定
评价：
➢优点：本法灵敏度高、准确度高、精密度好，线性范围宽。
➢主要缺点是：
①某些胆固醇酯酶对胆固醇酯的水解不完全，不能用纯胆固醇结晶以有机 溶剂配制的溶液作为TC分析的校准液，而应以准确定值的血清作为标准， 此校准液（品）相当于三级标准。 ②表面活性剂，如吐温-40可以干扰胆固醇酯酶的作用，而聚乙烯醇6000 可使结果提高1％～2％；
2.比色
加入物 血清上清液(ml) 标准液上清液(ml) 异丙醇(ml) 显色剂(ml)
空白管 － － 1.0 3.0
标准管 － 1.0 － 3.0
测定管 1.0 － － 3.0
充分混匀后继续60℃水浴15min，然后置室温冷却后530～ 550nm比色。
计算
血清
TG(mmol/L)＝
测定管吸光度 标准管吸光度
【临床意义】
TC除了作为高胆固醇血症的诊断指标之外，不能作为其它任何疾病的诊断 指标，对于动脉粥样硬化和冠心病而言，TC是一个明确的危险因子，与冠心 病的发病率呈正相关。
影响TC水平的因素
①年龄与性别； ②长期的高胆固醇、高饱和脂肪酸和高热量饮食可使TC增高； ③遗传因素； ④其它：如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使TC升高。
× 标准液浓度
参考值 犬：3.50-
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意义 。?
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评价
本法测定范围较宽，干扰因素多，准确测定有赖于 从标本中抽提、皂化、纯化过程，操作较繁，不适于 大批量标本分析及自动分析，一般很少用。
二、磷酸甘油氧化酶法（GPO-PAP法）
原理
试剂
1. 甘油三酯液体稳定酶试剂组成
GOODs缓冲液(pH7.2) 50mmol/L
一、高铁——硫酸显色法测TC （理解）
血清脂蛋白a(LPa)的生物学特性及临床应用分析
度均较高时，其相对危险陛可增至６倍，还有一前瞻
性研究指出，ＬＰ（ａ）高于４５０ｍｇ／Ｌ的人群中。心血管 病死亡多２．６倍，心血管病发作多４倍。 因而Ｌｐ（ａ）被认为是动脉粥样硬化的心肌梗塞 的独立危险因素。张丽霞等报道Ｌｐ（ａ）是一种急性
相反应产物（ａｃｕｔｅ
ｐｈａｓｅ
Ｂ一１００）和一分子Ａｐｏ ａ通过二硫键共价连接，具有 亲水性。Ａｐｏ ａ是Ｌｐ（ａ）的特征性糖蛋白成分，由单 体肽链组成，含有多个称作三环域（Ｋｒｉｎｇｌｅ）的区域， 该区域是蛋白折叠区，依靠三个二硫键稳定，其氨基 酸排列及其ｃＤＮＡ的核苷酸排列与ＰＬＧ有高度的同 源性和交叉反应。Ｋｒｉｎｇｌｅ不仅存在于Ａｐｏ ａ和ＰＬＧ 中，而且存在于凝血和纤溶系统的其他蛋白质中，包 括凝血酶原（因子ＩＩ）、组织纤溶酶原激活物（ｔｉｓｓｕｅ—
制。
２．２．２．３
Ｍａｈｍｏｕｄ等通过对ＯＸ—Ｌｐ（ａ）的特性和
功能活力的研究发现，ＯＸ—Ｌｐ（ａ）同ＯＸ—ＬＤＬ一 样，一是通过清道夫受体、二是通过诱导单核细胞黏 附于动脉内皮和刺激单核细胞分化为巨噬细胞，进 而被巨噬细胞摄取和降解导致细胞内胆固醇酯的蓄 积和泡沫细胞的形成，从而促进动脉硬化的发展。 ２．１．３在白细胞防御素作用下在血管内皮下定位 与保留Ｈｉｇａｚｉ等人发现白细胞防御素（又称杀菌素， 是一种富含Ａｒｇ的阳离子蛋白）与内皮细胞和平滑 肌细胞结合后，使Ｌｐ（ａ）与内皮细胞结合增强４倍， 与平滑肌细胞结合增强６倍，而且防御素还能使这 些细胞内吞Ｌｐ（ａ）的量明显增加，提示从活化的或 衰老的中性粒细胞释放出的防御素有助于Ｌｐ（ａ）在 血管内皮内的定位和保留，因而促进了动脉硬化的 发展。Ｌｐ（ａ）在血管中的聚集造成一种抗纤溶环境， 促进泡沫细胞的形成，脂肪斑块的生成和平滑肌细 胞增生，所有这些变化都有助于动脉粥样硬化的病 理变化。
血清甘油三脂
血清甘油三脂一,前言血清甘油三脂(TG)是血酯的成分之一。
在人体当中甘油三酯处于动态平衡。
血酯的含量可随膳食的改变而改变，而且变动范围很大。
另外其含量随年龄增长而上升，尤其是体重超过标准的中老年人往往偏高。
血清甘油三酯的正常值为多少呢？从理论上来说，其正常值为0．22—1．65mmo/L。
但事实上，甘油三酯波动范围较大，随年龄、性别、饮食结构和生活习惯等不同而有差异。
人体内的甘油三酯主要在肝脏和脂肪组织中合成，也可经小肠黏膜从食物中吸收合成。
血清中甘油三酯主要存在于极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒（CM）中，高甘油三酯血症是心血管疾病的危险因素之一。
临床检测血清甘油三酯浓度主要用于高脂血症、胰腺炎、肝肾疾病、动脉粥样硬化症和营养学评价。
血清甘油三酯是一项重要的临床血脂常规测定指标,特别是随着对动脉粥样硬化(AS)作用研究的深入,TG作为冠心病的一项独立的危险因素日益受到重视,但是目前血清TG测定及临床应用尚存在很多的问题,如生物学变异、游离甘油对测定的影响、测定的标准化系统不完善等等。
二,临床意义(1)高TG血症有原发性与继发性两类：前者多有遗传因素，其中包括家族性高TG血症与家族性混合型高脂(蛋白)血症等。
继发的见于糖尿病、糖原累积病、甲状腺功能衰退、。
肾病综合征、妊娠、口服避孕药、酗酒等，但往往不易分辨原发或继发。
高血压、脑血管病、冠心病、糖尿病、肥胖与高脂蛋白血症等往往有家族性集聚现象。
例如，糖尿病患者胰岛素与糖代谢异常，可继发TG(或同时有TG)升高，但也可能同时有糖尿病与高TG两种遗传因素。
冠心病患者TG偏高者比一般人群多见，但这种患者LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇)偏高与HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇)偏低也多见。
一般认为单独有高TG不是冠心病的独立危险因素，只有伴以高TC、高LDL-C、低HDL-C等情况时才有意义。
(2)通常将高脂蛋白血症分为：I、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ、Ⅳ、V等6型。
血浆脂蛋白概述、结构和作用
脂蛋白(α)Lp（ α ）
β－脂蛋白抗原成分 结构类似LDL，含Apo（ α ） 与纤溶酶原有高度同源性 促AS的独立危险因子 主由基因控制，不受性别、年龄、 体重、适度锻炼和降胆固醇药物的影响。
血脂测定项目
血清外观分析 总胆固醇（TC）测定 甘油三酯（TG）测定 血清脂蛋白（LP）分析 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-Ch）测定 低密度脂蛋白胆固醇（LDL-Ch）测定 血清载脂蛋白（Apo）测定
载脂蛋白的生理功能
(1)结构功能 (2)调节功能 (3)识别功能
Apo在调节血浆Lp代谢中的作用
组合并维持脂蛋白结构 血浆脂类的运输及其在组织\细胞间的
再分配 脂类临床意义
载脂蛋白 合成场所
Apo-A
肝、肠
分布
HDL
功能
AⅠ激活 LCAT
脂类+载脂蛋白
脂蛋白
脂蛋白结构及组成
Lipid(TG、PL、FC和CE） + Apo 亲水表层 + 疏水核心 （Apo+PL亲水基）（TG+CE+PL疏水基） 水溶性多聚分散体 假性微胶颗粒（血） 颗粒大小CM>VLDL>LDL>HDL
血浆脂蛋白的分类
1．电泳分类法
2．密度分类法
1．电泳分类法
其它:标本收集与处理,如禁食状态、血液浓 缩、抗凝剂与防腐剂、毛细血管与静脉血标 本储存等
血脂与血栓
血浆脂蛋白异常代谢
原发性 继发性
原发性高脂蛋白血症分型及特征
分型
Ⅰ型
Ⅱa型 Ⅱb型
Ⅲ型 (宽β病)
Ⅳ型
Lp 血脂
CM TG
Apo
B48
LDL TC LDL TC VLDL TG IDL TC