硫氢化钠对慢性脑缺血大鼠学习记忆及TH表达的影响

【关键词】硫氢化钠；慢性脑缺血；硫化氢；Morris水迷宫；酪氨酸羟化酶 【Abstract】 Objictive:To investigate Effects of sodium hydrosulfide on learning and memory abilities and the expression of TH in chronic cerebral ischemic rats. Methods:Sarti's 2VO was used to make the chronic cerebral ischemic rats．All rats were randomly divided into sham operation group,chronic cerebral ischemia group,low dose group,middle dose groupand high dose group.Morris water maze was used to evaluate the effects of sodium hydrosulfide on chronic cerebral ischemic rats in their learning and memory abilities; The SPSS16 0 Statistics software was used to analyze data of variance.Results:1 Water maze test results: The rats' learning and memory ability in chronic cerebral ischemia group significantly decreased，and which was lower than that in the sham group(P<0 05).The rats' learning and memory ability of the middle and high dose group of NaHS significantly increased，2 The content of H2S in brain in the chronic cerebral ischemia group was significantly lower than that in the sham group (P<0 05); The content high dose group of NaHS was significantly higher than that in the chronic cerebral ischemia group (P<0 05).3 The level of TH expression in rats brain in chronic cerebral ischemia and which was higher than that in the sham group(P<0 05)，The level of TH expression in middle and high dose group of sodium was higher than that in chronic cerebral ischemia (P<0 01).Conclusion:NaHS can significantly enhance the content of H2S in rat brain tissue in the chronic cerebral ischemia,suggesting that H2S may improve ability in rats with chronic ischemia,the mechanism may be related to increased the level of TH expression. 【Key words】sodium hydrosulfide,NaHS; chronic cerebral ischemia; hydrogen sulfide(H2S);Morris water maze;tyrosine hydroxylase(TH). 【中图分类号】R743 31 【文献标识码】B【文章编号】1674 8999(2013)12 0076 02 慢性脑供血不足是临床上常见的一组亚健康状态，主要由于大脑局部组织的供血不足，引发脑部慢性缺氧缺血而出现一系列脑功能下 降，随着我国生活水平的提高，而人口逐渐老龄化，慢性脑供血不足的病理机制及其治疗的研究日益受到重视，研究其病理生理机制可以 为临床上早期药物干预提供更多的选择。有研究表明硫化氢在中枢神经系统中通过调控离子通道KATP、提高神经细胞中cAMP水平实现对 脑血管和神经细胞功能的调节，提示硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)在神经系统的病理生理过程中具有重要的作用［1］。而硫化氢对慢性 脑缺血的影响报道较少，其机制尚不清楚。本研究采用Sarti等［2］的分次结扎双侧颈总动脉术制作慢性脑缺血大鼠模型，给予大鼠腹腔注 射硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)作为外源性硫化氢供体，通过Morris水迷宫、检测硫化氢含量，免疫组化检测酪氨酸羟化酶 （tyrosine hydroxylase，TH)，观察硫化氢对慢性脑缺血模型大鼠学习记忆的影响，探讨硫化氢可能的作用机制。 1材料与方法 1 1实验动物分组模型制备和给药: 选用华中科技大学同济医学院实验动物中心提供的健康成年雄性SD大鼠，体重200 250克，共120只，随机分为5组，每组24只，分 别为假手术组；慢性脑血组；NaHS低剂量组；NaHS中剂量组；NaHS高剂量组。NaHS低、中、高剂量组分别于大鼠慢性脑缺血后3h左 右腹腔注射0 7mg/kg、1 4mg/kg和2 8mg/kg的NaHS，以后每天一次，连续5天，假手术组和慢性脑缺血组大鼠注射等容量的生理盐 水。 采用Sarti等［2］改良的2VO，分次结扎大鼠双侧颈总动脉。大鼠术前12h禁食，4h禁水。10%水合氯醛(0 35ml/100g)腹腔注射麻醉 后，待大鼠进入麻醉状态后，将其仰卧位固定，依次于颈前术区去毛，碘伏消毒，手术侧颈部切开约1～2cm，钝性分离颈总动脉，采用0 号线依次结扎颈总动脉近心、远心端，确保结扎牢固后，用眼科剪将颈总动脉从两个结扎点中间剪断，以确保阻断颈总动脉血流，剪断 后，局部消毒，逐层缝合。手术过程保证体温及呼吸的稳定。手术后动物置于保温的单笼饲养。1周后采用同法结扎另一侧颈总动脉。术后 每日腹腔注射青霉素20万单位/kg，连续7天。假手术组手术方法及术后饲养方法同手术组，但仅分离暴露颈总动脉而不结扎。各组大鼠予 以相同环境、饲料、供水条件饲养8周。 1 2水迷宫测试: 实验条件与仪器参照Morris水迷宫法［3］，实验分为两个部分：定位航行实验和空间搜索实验。 定位航行实验：造模前3天对大鼠实施水迷宫训练，第一天让大鼠自由游泳30s以适应环境，从第2天开始，每天训练一次，训练时按东 北、西北、东南、西南4个象限依次将大鼠面向池壁放入水中，设定最长游动时间为120s，观察并记录大鼠寻找并爬上平台所需时间（逃避
硫氢化钠对慢性脑缺血大鼠学习记忆及TH表达的影响
发表时间：2014-03-21T10:53:49.903Z 来源：《中医学报》2013年12月第28卷供稿 作者： 郑永强刘南暖叶飞邓晓玲上官守琴王成谋
[导读] 慢性脑供血不足是临床上常见的一组亚健康状态，主要由于大脑局部组织的供血不足
郑永强刘南暖叶飞邓晓玲上官守琴王成谋 湖北医药学院附属十堰市人民医院神经ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ科湖北十堰432000 基金项目：十堰市科学技术研究与开发项目(NO:ZD2012022) 【摘要】 目的：探讨NaHS对慢性脑缺血大鼠学习记忆及TH表达的影响。方法采用Sarti等改良的分次结扎双侧颈总动脉术制作慢性脑缺血大鼠
模型，术后8周五组（假手术组，慢性脑缺血组，低剂量组，中剂量组，高剂量组）大鼠Morris水迷宫测试后断头取脑检测H2S的含量,免疫 组化检测TH的表达。结果：水迷宫实验结果：慢性脑缺血组学习记忆能力显著下降，与假手术组比较有显著性差异（P<0 05），NaHS 中、高剂量组学习记忆能力显著提高，与慢性脑缺血组比较有显著性差异（P<0 05），说明NaHS能有效改善大鼠的学习记忆功能。慢性 脑缺血组大鼠脑内H2S含量明显降低，与假手术组比较有显著性差异(P<0 05)；NaHS中、高剂量组H2S含量明显升高，与慢性脑缺血组 比较有显著性差异(P<0 05)。大鼠TH的表达水平慢性脑缺血组明显升高，与假手术组比较有显著性差异（P<0 05），硫氢化钠中剂量 组、高剂量组与慢性脑缺血组比较有显著性差异（P<0 01）。结论NaHS可明显增强慢性脑缺血大鼠脑组织H2S生成，提示H2S可能改善 慢性脑缺血大鼠学习记忆功能，其机制可能与上调TH的表达有关。