榆林市马铃薯茎尖脱毒培养探究
着 的培养 基 ， 短 较长 的根 系 ， 剪 去掉 太 多 的 叶 片 ，
然后用 多菌 灵溶 液 蘸 根 ， 刚 移栽 的试 管 苗 最 主 刚 要 的就是保 湿 、 光 。一般 下午 ４ 遮 —５点移 栽 ，— ７ １ ０ｄ可 以缓 苗 ， 周 后可 以去 掉 遮 阳 网及塑 料 膜 ， ２
植物 茎尖脱 毒培 养 的成 败不 仅 与培养 基 的组
分有 关 ， 且与 块茎 的选择 、 化 、 芽处 理 、 尖 而 钝 催 茎 剥离、 接种 也有 直接 关系 。 ３ １ 培 养基 的配置 ． 培养 基 的成份 有 ６大类 ， 包括无 机 养分 （ 大量
２ 可 行 性
首先 ， 榆林位 于 陕西省 最 北部 ， 地处 毛 乌素 沙
薯病毒 病最有效 的方法 就是培育 和推广脱 毒种薯 ，
就是通 过对马铃 薯块 茎进 行 病毒 钝 化 、 芽处 理 ， 催 通过茎 尖 剥 离 、 生 组 织 培养 而脱 去 Ｐ Ｓ Ｐ 分 Ｖ 、 ＶＹ、
Ｐ 、 Ｌ Ｖ 和 Ｐ Ｔ 等 病 毒 、 病 毒后 培 育 试 管 ＶＳ Ｐ Ｒ ＳＶ 类
附加 Ｃ Ｐ ０ １ ／） 明显提 高茎 尖脱 毒 Ｐ Ｕ（ ． —１ｍｇ １可
（ 下转 第 １ ０页 ） ０
收 稿 日期 ： ０ １ １ １ｌ ２ １ － ４
作 者 简 介 ： 成 文 （ ９ ５ ） 男 ， 西 横 山人 ， 学 本 科 学历 ， 师 。 汪 １ ７ 一， 陕 大 讲
陕
西
农
业
科
学
榆 林 市 马铃 薯 茎 尖 脱 毒 培 养 探 究
汪 成 文
（ 林农 业学校 ， 西 榆 林 榆 陕
７ ９０ １ ０ ０）
摘 要 ： 林 是 我 国马 铃 薯 五 大 优 生 区之 一 。 马 铃 薯 病 毒 可 直接 导 致 其 种 性 退 化 、 量 和 质 量 大 幅 度 降 低 。 榆 产 ．
经过钝 化 和催芽 处理 的块 茎 ， 幼芽 长至４ 待 — ５ｃ 时 ， 取 上 段 ２ｍ 进 行 消 毒 。先 用 ７ 乙 ｍ 剪 ｃ ０
品种 名称 、 处理代 号 和接种 日期 。最后 ， 格控 制 严
温度 （０ ５ 、 ２ —２ ℃） 湿度 （ ０ 的相对 湿 度 较 好 ， ７ 过
低会 使培养 基 丧失水 分 ， 高易 引发霉 菌 ， 过 造成 污
染 ） 光 照 （ 尖 培 养 适 宜 光 照 时 间 是 １ 一 ｌ 和 茎 ２ ６
开 发 前 号 Ｅ］ Ｊ．天 津 农 业 科 学 ，０ ９ １ （） ４ —９ ２ ０ ，５ ３ ：６４ ． ［］ 侯 彦 林 ．“ 态 平衡 施 肥 ” 理 论 基 础 和 技 术 体 系 ５ 生 的
［］ 生 态 学报 ，０ ０ ０ ４ ： ５—５ ． Ｊ． ２ ０ ，２ （ ） ６ ３６ ８
苗 、 毒 种 薯 。其 增 产 效 果 十分 显 著 。２０ 脱 ０ ８年 定
边县万亩鲜食 品 种“ 花 白” 紫 马铃 薯 示范 区平 均 产 量 达 ４８ ８ｋ ／ ６ ２其 中 ４ｈ 核心攻关 田平 均 ８ ｇ ６ ７ｍ ， ｍ 产 量达 ６７ ５ｋ ／ ６ 靖 边县 ７ ｍ２ 餐食 品 １ ｇ ６７ｍ ； ６ｈ 快 加 工 品 种 “ 尔 班 克 ” 均 单 产 达 到 ５ ０７ 布 平 ３ ｋ ／ ６ ， ５ ３ｈ “ ｇ ６ ７ｍ。 ８ ． ｍ２紫花 白” 均产量达到 ４２ ５ 平 ４ ｋ ／ ｍ２东坑 镇 ０ ２万 ｈ ｚ夏 马铃 薯 平 均产 量 达 ｇｈ ， ． ｍ 到３８ ０ｋ ／ ６ ， １ ｇ ６ ７ｍ 夏秋 马铃薯 均创全 国大面积单 产最高纪 录 ， 超过 世界 平 均单 产水 平 。此外 ， 铃 马 薯脱除病毒后 ， 种性 得 到恢 复 ， 品 和 品质 得到 提 产 高； 抗性增强 ； 并且 繁殖系数高 ， 于推广 。 易
及 发 展 ［Ｍ］．北 京 ：气 象 出版 社 ，１ ９ ： ９３
６３ —１５ ７．
［ ］ 徐 祝 龄 ， 德 姣 ，王砚 田 ， 干 旱 偏 旱 区农 田土 壤 水 ７ 于 半
分状 况 的 主 要 影 响 因子 分 析 ｌ ］ 干 旱 地 区 农 业 研 － ． Ｊ
速 度很快 。但 茎 尖 分 生组 织 中维 管 束 尚未 形 成 ， 病 毒颗 粒不 易 通 过 。分 生组 织 的不 断分 生 ， 病 使
毒距生 长点 保持 着 一 定 距离 ， 因此 可 以认 为 茎尖 分生组 织 是 “ 带 或 基本 不 带 病 毒 的” 不 。另 一 方
面 ， 旺 盛 生 长 的分生 细 胞 中 ， 在 代谢 很 活跃 ， 病毒
（ 接第 ９ 上 ０页 ）
培 养成 活率 。在配 置母 液 时 ， 一般 将 其配 成 １ 一 Ｏ ２ ０ ， 至 １０ ０倍 的 浓缩 储 备 液 ， 存 于 冰 箱 ０倍 甚 ０ 保 中， 使用 时 按 一 定 比例 稀 释 。调 ｐ 值 为 ５ ８ Ｈ ． —
６０ ． 。灭菌 后 的培养 基 在 常温 下 放 置 ３ｄ 若 没 有 ，
分 的“ ” 养 基 上 进 一 步 培 养 ， 到 长 出 ５ ８ ＭＳ 培 待 — 片小 叶后 ， 行病 毒检测 。 进
３ ４ 脱 毒 苗移栽 ． 选 取脱 毒 的试 管 苗 ， 组织 室 内打开瓶 盖 ， 在 炼 苗 ５ ， 后将 试管 苗用镊 子 取 出 ， —７ｄ 然 洗净 根 系附
Ｍ Ｓ ６ Ｂ — ２ｍｇ １ ＮＡＡ０ １ｍｇ ｌ 试 验 ， ＋ 一 Ａ１ ／＋ ． ／ 经
铃薯作 为 一种 无 性 繁 殖 作 物 ， 长 期 的种 植 过 程 在 中， 由于病毒侵染 、 累等 造成 产 量和 品 质急 剧下 积 降， 危害 十分严重 ， 每年 由于病 毒病 造 成 的损失 也 相 当大 。侵染马 铃薯 造成 其各 种退 化 现象 的各 种 病毒 和类病毒 ， 称 马铃薯 病 毒 。 目前 ， 统 防治 马铃
约 ３ｃ 的植 株 。此 时 ， 植株 转移 到不 带有 机成 ｍ 将
选 出适宜 我市 栽 培 的有 高 产 鲜食 品种 紫 花 白、 淀 粉加 工 品种 陇薯 ３号 、 熟外 销 品种 费 乌瑞它 、 早 快 餐食 品加 工 品种夏 波 蒂和布 尔 班克 等 四大类 型 ５
个 品种． 在繁 育脱 毒种薯 的马铃薯 品种 确定后 ， 挑 选若 干个 具 有 原 品 种 典 型 特 征 特 性 的 重 １ ０ ０ — ２ ０ｇ状 马铃 薯 ， ２ ６ ０ 在 — ｏ 连续 光 照下 钝 化 纺 Ｃ和
究 ，１ ９ ９ ５，１ （４ ：１ — ５ ３ ） ９２ ．
［］ 孟 海 波 ， 鲁 佳 ． 秆 物 料 的 特 性 及 其 加 工 利 用 研 ３ 韩 秸 究现 状 与 应 用前 景 ［］ 中 国农 业 大 学 学 报 ，０ ３ ８ Ｊ． ２ ０ ，
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陕
西
农
业
科
学
幅度 为 １ ． ～１ ． 。 ７７ ８５ 参 考 文 献：
Ｅ ｉ 马骥 中 国农 户 秸 秆 就 地 焚 烧 的 原 因 ：成 本 收 益 比 ｌ
较 与 约束 条 件 分析 一 以 河 南省 开 封 县 杜 良 乡为 例
（ ６）： — ． ３８ ４１
［ ］ 李 鹏 ， 文 杰．我 国农 业 废 弃 物 资 源 的 利 用 现 状 及 ４ 王
一
锤 型块茎 类病 毒 ６ ， ０ｄ 置于 ３ ． —３ ． ℃温箱 中 ６５ ７５
钝 化卷 叶病 毒 ３ ， 后在 温室 １ —１ ￣ 件下 ０ｄ 然 ３ ８Ｃ条
催芽。
３ ３ 茎 尖 剥 离 、 种 ． 接
般 使用 ３ ０目（ ０ 网眼 ０ ４ ． ． —０ ５ｍｍ） 网纱 ， 的 以
无 法复 制 ， 而且 在 生 长点 存 在着 高水 平 的 内 源生 长素 ， 抑制 病毒 的复 制 。正 是 由于 以上特点 ， 利用
马铃薯 茎尖 分 生组 织 进 行 离体 培 养 ， 合 病 毒 检 结
测 ， 可 以获得 “ 就 无病 毒” 的马铃 薯植 株 。
３ 茎 尖脱 毒 培 养 技 术 要 点
１ 理 论 依 据
马铃 薯病 毒在 植 物 体 内的分 布 是 不 均 匀 的 ， 越 靠近 生长 点即茎 尖分 生组织 ， 病毒 含量 越低 ； 这 是 由于病 毒体 内植 物 的运 转 有 两 种方 式 ， 是 通 一
过 胞 间连丝 运转 ， 速度很 慢 ， 以追 上茎 尖分 生组 难 织； 另一 种是 随着 营养物 质 流在维 管束 系统运 转 ，
马铃 薯 脱毒 主要 是 通 过 茎 尖 分 生组 织培 养脱 去 马铃 薯 Ｐ 、 ＶＹ、 ＶＳ Ｐ Ｒ 和 Ｐ Ｔ 等 病 毒 、 病 毒 。 茎 ＶＳ Ｐ Ｐ 、Ｌ Ｖ ＳＶ 类 尖 分 生 组 织 脱毒 培 养 的技 术要 点 有培 养基 的 配 置 、 茎 的选 择 、 化 和催 芽处 理 、 茎 尖 剥 离 、 种 ， 育 出脱 块 钝 ． 接 培 毒 马铃 薯 试 管 苗假 植 到 网 室 ， 苗 后 进 行 移 栽 用 于 大 田 生 产 。通 过 科 学 化 管 理 ， 生产 出脱 毒 种 署 用 于推 广 ， 缓 可 这 样 可 以提 高优 良品 种 特 性 ， 高种 薯 产 量 和 质 量 ， 效延 长 马铃 薯 品种 服 务 生产 的年 限 。 提 有 关 键 词 ： 论 依 据 ；可 行 性 ；茎尖 脱 毒 培 养 理
漠南缘 ， 于干旱半干旱 大陆性 季风气 候 。光 照充 属 足， 昼夜 温差大 ， 雨热 同季 。北 部风 沙 滩 区为沙 壤
马铃薯茎尖脱毒技术研究
马铃薯茎尖脱毒技术研究本试验以马铃薯茎尖分生组织为实验材料,应用单一试剂和组合试剂法对马铃薯茎尖进行消毒预处理,消毒试剂包括酒精、漂白粉、氯化汞、次氯酸钠、次氯酸钙和过氧化氢六种试剂。
通过分析植株染菌和成活等生长情况来判断消毒的效果。
在消毒时长与无菌水冲洗次数上进一步优化,采取酒精处理30s、60s和120s,无菌水冲洗2、4和6次,氯化汞处理2min、3.5min和5min构成三因素三水平正交实验,依据染菌和成活情况确定最优的灭菌组合,结果表明氯化汞处理 3.5min,酒精处理120s,无菌水冲洗6次,马铃薯的脱毒苗无菌成活率可达90%以上采用黄皮薯“中薯一号”、白皮薯“早大白”、紫皮薯“紫薯”,研究不同品种的茎尖分生组织经脱毒培养后的成活情况,结果表明中薯一号的成活率可达到70%,而紫薯的成活率为0%,表明不同品种的茎尖脱毒效果和效率存在显著的差异。
研究了“中薯1号”不同类型的外植体茎尖的脱毒培养情况,包括母薯上、自然环境下植株上的侧芽和培养箱中脱毒幼苗的侧芽茎尖三种。
结果表明母薯上茎尖脱毒培养出的苗染菌率较高,生长情况比较差的,成活率只有50%；培养箱中的是经过脱毒预处理且在无菌环境下生长的侧芽,虽没有自然环境下的苗长势旺盛,但成活率能达到80%,所以采用无菌苗的侧芽尖进行脱毒培养效果最好。
进行了培养基组分的优化,设计了在MS培养基中加入不同浓度的激素PIX以及不同果汁添加物的试验,结果表明激素PIX对促进马铃薯脱毒苗缩短节间,增加茎粗,抑制徒长,促进壮苗有着显著的效果。
当PIX浓度为0.5mg/1和1.Omg/l时,马铃薯的脱毒苗长得最壮,分枝最多,叶子最多,且颜色为绿色,有的是墨绿色。
不同浓度的果汁添加物对脱毒苗均有促进或抑制作用,它们能提供脱毒苗在生长过程中所需要一些微量营养成分、生理活性物质和生长物质等,其中低浓度的水萝卜汁最有助于马铃薯脱毒苗的生长。
榆林市脱毒马铃薯栽培现状及要点探析
榆林市脱毒马铃薯栽培现状及要点探析摘要：马铃薯是榆林市的拳头作物，在陕北种植历史悠久、面积广泛，是居民餐桌上天天见的食品，在榆林农业生产中占有举足轻重的地位。
多年来，由于马铃薯的病毒病严重影响，目前各地采用脱毒马铃薯来实现增产增收。
本文根据实践，分析探讨了榆林市脱毒马铃薯高产的可行性及栽培现状，并提出切合榆林实际的脱毒马铃薯高产栽培技术要点。
关键词：脱毒马铃薯；高产栽培；榆林市陕北丘陵区的榆林市是一个干旱及半干旱地区。
长期以来，农业生产主要依赖自然条件，一旦干旱少雨就会出现大部分作物歉收或绝收。
而马铃薯具有耐旱能力强、入种时间长的特点，在干旱少雨年份产量也有一定保证。
另外，种植马铃薯生产成本低，投入产出比高。
因此，当地群众自发种植马铃薯的积极性很高。
近年来榆林市将马铃薯作为四大主导产业之一大力发展，而陕北丘陵区又是马铃薯的重要种植区，因此，研究、探讨榆林丘陵区马铃薯的高产栽培技术，对发展当地马铃薯产业，帮助群众脱贫以至致富有着十分重要的现实意义。
1 榆林市马铃薯高产栽培的可行性分析榆林是我国马铃薯的主要产区之一，常年种植面积稳定在20万hm2以上，占陕西省马铃薯播种面积的52%，占全市粮食作物播种面积的30%，居各种作物之首。
而陕北丘陵区又是马铃薯的重要种植区，以米脂、绥德、佳县、吴堡、清涧、子洲六个典型县为例，常年种植面积稳定在5万hm2以上，且主要以山旱地种植为主。
因本地区旱灾频繁，土壤肥力低下，施肥水平不高，栽培技术相对落后等原因，产量低而不稳，平均单产徘徊在8000～12000kg/hm2之间，与全国平均水平15000 kg/hm2相比，相差较远。
据测算，榆林市南部六县马铃薯的平均气候生产潜力为38800kg/hm2；根据梅福生先生在假定作物光能利用率提高到2%时测算，米脂、佳县、清涧三县马铃薯平均光生产潜力达39997.5kg/hm2；据王立祥教授对榆林马铃薯生产潜势测算，其热量潜力为53700kg/hm2，降雨潜力为36525kg/hm2。
马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究
配 置 成 ５ ０ ｇ Ｌ的 溶 液 待 用 。 当两 个 品 种 的种 薯 芽 长 ０ ／ ｍ
到 ２ ３ｃ ～ ｍ时 ． 选 生 长 健 壮 的 芽 ， 清 水 冲 洗 芽 部 表 挑 用
面 污 物 ．在 无 菌 操 作 室 采用 ｌ 种 不 同 的方 法 进 行 表 面 ２ 消 毒 ， 最 近 制 作 的蒸 馏 水 冲洗 四 五 次 ， 表 面 消 毒 剂 用 将 彻 底 清 除 ， 同表 面消 毒 剂 处 理 时 间 见 表 １ 不 。
２１ ０２年第 １ ６期
马铃 薯茎 尖脱毒及组培快 繁技术研究
田 成 津
（ 海 大 通 县 农 业 生 态 环境 与 可再 生 能 源 工作 站 ， 海 大通 青 青 ８ ００ ） １ １０
摘 要 ： 以下寨 ６ ５和青薯 １８为实验 对 象， 用不同培养基 ， ６ 采 对马铃薯 两个 品种进 行脱毒及组培 ， 对培养 基及 关键技 术措 施进行 了分析 ， 结果表 明 ： 与青 薯 １ ８ 不 同培 养 中生长表现不 同， ６在 下寨 ６ ５茎尖组织在 Ｍ Ｓ中加入 Ｂ ２ Ａ ｍ／ ｇ Ｌ的培养基 中生长表现 突出， 而青薯 １８茎尖组织在 Ｍ ６ ｓ中加入 Ｂ ２ｍ ／ Ａ ｇ Ｌ的培养基 中成苗率较 高。 同等条件下 ， 在 加入 ＩＡ ．０ ｇＬ的培养基宜用于下寨 ６ 脱毒苗 的组织快繁 ，加入 ＩＡ０ ３ ｍ ／ Ａ ５ ｍ ／ ０ ５ Ａ ． ０ ｇ Ｌ的培 养基宜用于青薯 １８脱毒 ６
厂化生产提供帮助 。
１ 材 料 和 方 法
１ １ 供 试 材 料 ．
１２ １ 催 芽 于 １ 月 中 旬 左 右 ， 拣 表 皮 光 滑 、 常 ． ． １ 挑 正 薯 形 、 小 均 匀 、 病 害 和 无 损 伤 薯 块 ， 置 在有 供 暖 的 大 无 放 房 间 ， 内温 度 ２ 室 ４℃ 左 右进 行 催 芽 。 催 芽 前 薯 块 正 处 在 于 休 眠期 ， 用 ０ ０ ～ ０ １ ｇ Ｌ的 Ｇ ３ 处 理 薯 块 ， 采 ．５ ．０ ／ ｍ Ａ来 浸 没 于 Ｇ ３溶 液 中 １￣ ２ ｉ ， Ａ ０ ０ ｎ 以打 破 休 眠 ［。 ｍ ４ ］ １２ ２ 种 薯 处 理 ．． 采 用 Ｍ 培 养 基 ， 入不 同 配 比的 激 Ｓ 加 素 ， 备 Ｂ 、Ａ 、Ａ 、Ｂ 准 ＡＮ Ａ Ｇ 。ＩＡ和 ＩＡ 由 于 激 素 在 培 养 基 中 Ａ，
马铃薯茎尖脱毒培养技术研究
马 铃薯 茎 尖脱毒 就 是利用 该原 理 ，把茎 尖 剥离 接 种到 培 养基 上 ，进而培养马铃薯种薯或微型薯 。 ２ 操 作 方 法
剪取促芽后的马铃薯块茎上合适大小的芽若干个 ，冲洗干净 后放于烧杯内用纱布封 口，置于 自来水下反复冲洗 ４０分钟，吸干 表面水分放进超净工作台进行深层消毒；先用 ７５％酒精浸泡 ２０～ ４５ｓ，无菌水冲洗 ３次 ；再用 ｏ．１％的升汞浸泡 ８￣１０ｍｉｎ，无菌水冲洗 ５次 ，冲洗时轻轻晃动烧杯时消毒剂彻底被漂洗掉 ，之后置于无 菌 滤纸 待用 。
毒 效果 的 因素进 行 了详 细分析 ，进 一步 阐述 了对病毒 检 测的 常 用方 法。
关 键词 ：马铃 薯 ；茎 尖脱毒 ；病毒 检 测
中图分 类号 ：￥５３２
文 献标 识码 ：Ａ
文章编 号 ： １６７４—０４３２（２０１３）一１０—２３—２
马铃薯是我国重要的粮食作物 ，近年来 ，政府加大力度发展 现代 马 铃 薯 产业 ，促 进 了马 铃 薯 产业 的 快速 发 展 ，种植 面 积 和 鲜 薯产量均居世界首位 ，产业链条逐步拓展 ，经济效益稳步提升。但 是 ，马铃薯是通过块茎进行的无性繁殖 ，在连年种植过程 中土壤 和种薯本身携带的病害逐年严重 ，导致品种退化 ，严重降低了马 铃薯的产量和品质。１９５５年法国 Ｍｏｎｅｌ通过剥离马铃薯茎尖获 得 了不 带病 毒 的 马铃 薯 脱 毒苗 ，引起 了 科学 界 的广 泛 关 注 ，世 界 各地纷纷采用马铃薯茎尖脱毒快繁应用于大田生产 ，提高马铃薯 产量 ，改善其品质。 １马 铃薯 茎 尖脱 毒原 理
微型马铃薯优质种苗的茎尖脱毒培养
微型马铃薯优质种苗的茎尖脱毒培养李进进【摘要】为了保持马铃薯优良品种的遗传特性,以马铃薯茎尖为外植体,MS为基本培养基,添加不同浓度及其配比的外源激素,对马铃薯茎尖进行诱导、增殖、壮苗和微型薯生产研究.结果表明:MS+6-BA1.5mg/L(以下单位同)+NAA0.2 培养基配方适宜茎尖的诱导增殖.并且在合适的培养基配方前提下,分别在单节茎段、2节茎段、3节茎段中加入不同量的活性炭进行实验,得出加入0.2%的活性碳时,腋芽萌发率最高,平均芽长度最为理想,而且芽的长势最强.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2009(028)003【总页数】2页(P88-89)【关键词】微型马铃薯;茎尖脱毒;遗传种性;激素;活性炭【作者】李进进【作者单位】广东轻工职业技术学院,广州,510300【正文语种】中文【中图分类】S532马铃薯(Solanum tuberosum)原产于拉丁美洲，当被发现可以食用后，很快传到世界各地，成为栽培很广的一种作物。
其适应性广，营养价值高，耐贮藏运输，是重要的粮食作物之一，也是一种调节市场供应的重要蔬菜。
但是，从外地引种栽培1～2个周期后，明显发现其遗传种性降低，产量下降，品质变劣，并有卷叶和花叶等现象发生，这是由于病毒引起的遗传种性退化现象。
马铃薯易感染多种病毒，导致薯块变小、畸形、种薯退化等。
实验证明，利用茎尖组织培养结合病毒检测，进行马铃薯脱毒，进而生产脱毒种薯用于生产，可有效地防止种薯遗传种性退化，大幅度提高马铃薯产量。
因为植物病毒是通过植物的微管系统移动，茎尖部位细胞分裂速度快，暂时还没有形成微管系统;而且茎尖分生组织生长素含量很高，足以抑制病毒的增殖。
因此我们取马铃薯芽段2～3 cm，经过一系列消毒，在无菌条件下用解剖镜小心剥取约0.7 mm的茎尖进行培养，以获得无病毒苗。
1.1 材料将具有优良遗传种性的马铃薯沙藏，取其发芽后的芽段。
1.2 试验方法1.2.1 外植体消毒先将表面光滑无病虫害的马铃薯埋在湿润的沙质基质中催芽，待芽长至2～3 cm 时，切取芽段在自来水下冲洗15 min左右，于超净工作台上进行严格的消毒。
马铃薯茎尖脱毒培养关键因素研究
基金项 目： 乌 兰 察 布 职 业 学 院 科 研 项 目（ １ ２ ｗ ｚ ｋ ｙ Ｏ １ ３ ）
作者简介 ： 刘海英（ １ ９ ７ ５ 一 ） ， 女， 硕士 ， 讲师， 从 事 马 铃 薯 组 织 培 养 和 病 毒 检 测 教 学 与研 究 工 作 。Ｅ － ｍａ ｉ ｌ ： ｌ ｈ ｙ ８ ２ １ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｎ ｒ
经 验交 流２ ０ １ ３ ． ８
． 啦 业 蝴 挝地
马铃薯茎尖脱 毒培养关键 因素研究
刘 海英 陈 建保 康 俊 段伟 伟 张祚 恬 （ 内蒙古 乌兰 察布 职业 学 院马铃 薯工 程 系 乌兰察 布 ０ １ ２ ０ ０ ０ ）
摘要 ： 对 马铃 薯 茎尖脱 毒培 养 关键 因素进 行 了分 析 ， 阐述 了马铃 薯 茎 尖脱毒 培 养的 理论 基础 、 影 响 马铃 薯 茎 尖脱毒培 养 的 因素和 条件 ， 指 出 了茎尖培 养脱毒 中尚存在 的一 些 问题 以及相 应 对策 。
关键 词 ： 马铃 薯 ； 茎 尖脱毒 ； 组 织培 养
马铃薯是 粮 、 菜、 饲、 加工兼 用型作 物 ， 适 应 性 内 的许 多植 物 脱 除病 毒 的重 要 方法 ，分 生组 织 顶端
广、 营养丰富、 经济 效 益 高 ， 已成 为世 界 上继 水 稻 、 小 培养 法 已 发展 成 为适 用 于几 乎 所 有无 性 繁殖 作 物脱
左右 。
次 。植 物 分生 组织 中生 长 素 的含 量或 活 性 一般 远 远
具 有抑 制病 毒增 殖 的效果嘲 。 马 铃薯 产 业 对 我 国农 村 经济 发 展 、 国家粮 食 安 高 于其他 组织 ，
马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究
危害马铃薯的病毒有30种之多，如 X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A 病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒 等。由于马铃薯是无性繁殖作物， 病毒逐代积累，日益严重，引起严 重退化。马铃薯病毒可使块茎产量 减少50%~80%。
一、马铃薯脱毒技术:
马铃薯在营养繁殖时易受病毒的浸染， 当条件适合时，病毒就会在植株内增殖， 转运和积累，随着世代传递，病毒危害 逐年加重，一般可造成减产50％以上。 研究发现，有30多种病毒易感染马铃薯， 并引起品种退化，严重影响马铃薯的生 产。通过微茎尖组织培养技术能从马铃 薯体内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、 PVG、PVM、PSW等病毒。
因此，采用组织培养技术，通过一 定良种繁殖体系，生产优质种薯， 是保证马铃薯高产、稳产的一项有 效措施。
1．脱毒种薯生产程序
采用微茎尖组织培养的方法，诱导出苗， 采用联免疫吸附试验法或指示植物方法 鉴定马铃薯病毒和类病毒，经鉴定后， 无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱 毒试管基础苗。
试管基础苗在无菌条件下，采用固体、 液体培养基相结合的方法，进行扩繁基 础苗，在防虫网室栽植或封闭温室扦插， 生产出原原种（或称脱毒小薯）。用原 原种在一定隔离条件下产生原种1代， 以后逐级称为原种2代、良种1代、良种 2代。
培养条件：温度21~25℃、光量20003000 lx(勒克斯)、光照12h/d。 2-3周愈伤，4-5周绿点，3--6月长成2-3 厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。
（2） 继代和生根
培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒） 鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次） 鉴定后，采用固体、液体培养基相结合方法扩 繁。取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体 培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左 右发育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁 殖，此法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗 多节接种在液体培养基上，进行浅层静止液体 培养。
榆林市陇薯7 号马铃薯茎尖脱毒培养基筛选
陇薯7号是甘肃省农业科学院育成品种,晚熟,生育期120d 左右,株型直立,枝叶繁茂,茎、叶绿色,花冠白色,薯块长椭圆形,黄皮黄肉,芽眼较浅,表皮光滑,淀粉含量13.0%,干物质含量23.3%,还原糖含量0.25%,属于全粉加工及炸条型马铃薯[1],在榆林市引进生产试验特征特性表现突出,具有适应性强、产量高、抗性强等特点,推广应用前景较好。
但由于马铃薯的传统种植方式是用块茎作为营养体进行繁殖,导致病毒在母体内逐渐累积,引起种性退化,对生产造成很大危害[2]。
应用组织培养方法特别是茎尖组织培养来获取脱毒苗,已成为当前解决马铃薯品种退化的主要技术。
目前,榆林市未见有关陇薯7号茎尖脱毒快繁培养的研究报道,本试验通过不同激素浓度配比培养基来筛选适合其茎尖分化成苗的配方,进而获得脱毒种苗,恢复其优良种性,改善品质,提高产量,对加快其大面积推广应用具有很大的价值。
1材料与方法1.1试验材料试验在陕西省榆林市农业科学研究院马铃薯研究所组培中心进行,以田间长势良好、无病症表现的陇薯7号健康植株收获的薯块为材料。
试验时间在11月至翌年4月。
1.2试验方法1.2.1培养基设计。
本试验以齐恩芳等[3]、仲乃琴[4]、田长恩[5]等的研究结果为参考依据,以MS 为基础培养基,加入生长调节剂6-BA 、NAA ,共设计了7种不同浓度激素配比培养基处理,各处理激素浓度设计见表1。
1.2.2外植体的制备。
将薯块破休眠后,经检测将不带马铃薯纺锤块茎类病毒的块茎置于暗光中进行催芽。
10d 后待薯块长出约0.5cm 长的白色簇生芽时,将薯块置于自然散射光下继续萌芽,待芽长到2.0~3.0cm 时,即可取芽作外植体。
1.2.3外植体的处理。
用解剖剪小心取下薯块上的健壮芽,装入医用纱袋中,置于自来水龙头下流水冲洗30min ,将其拿到无菌操作台,先用75%的酒精浸泡30s ,无菌水冲洗2遍,再用10%的NaClO 4溶液浸泡6min ,无菌水冲洗3遍,用无菌吸水纸吸干待用。
马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究
马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究摘要：以下寨65和青薯168为实验对象，采用不同培养基，对马铃薯两个品种进行脱毒及组培，对培养基及关键技术措施进行了分析，结果表明：与青薯168在不同培养中生长表现不同，下寨65茎尖组织在MS中加入BA2 mg/L 的培养基中生长表现突出，而青薯168茎尖组织在MS中加入BA2 mg/L的培养基中成苗率较高。
在同等条件下，加入IAA 0.50 mg/L的培养基宜用于下寨65脱毒苗的组织快繁，加入IAA 0.30 mg/L的培养基宜用于青薯168脱毒苗的组织快繁。
关键词：马铃薯；茎尖脱毒；组织快繁我国是马铃薯生产第一大国，2008年种植面积达到573.33万hm2，鲜薯总产达8 800万t，平均单产约15.45t／hm2，总产位居世界第一[1]。
马铃薯是无性繁殖作物，体内病毒的积累可使品种种性退化、品质和产量降低，对其生产造成严重危害[2]。
因为大部分病毒不能感染马铃薯茎尖组织，通过茎尖脱毒，生产脱毒种薯用于生产是防止马铃薯退化的切实可行的措施[3]。
马铃薯脱毒及组培快繁中所用基质和培养条件等关键技术方面的报道较多，但对下寨65和青薯168报道较少，本文既通过对马铃薯下寨65和青薯168两个品种进行脱毒及组培试验研究，为西部高原地区当家品种脱毒种薯的工厂化生产提供帮助。
1材料和方法1.1供试材料采用当家品种下寨65和青薯168。
1.2试验方法1.2.1催芽于11月中旬左右，挑拣表皮光滑、正常薯形、大小均匀、无病害和无损伤薯块，放置在有供暖的房间，室内温度24 ℃左右进行催芽。
在催芽前薯块正处于休眠期，采用0.05～0.l0 mg/L的GA3来处理薯块，浸没于GA3溶液中10～20 min，以打破休眠[4]。
1.2.2种薯处理采用MS培养基，加入不同配比的激素，准备BA、NAA、GA3、IBA和IAA，由于激素在培养基中用量非常少，且不易溶于水，所以采用特殊的配置方法，配置成500 mg/L的溶液待用。
马铃薯茎尖组织培养脱毒技术要点
实践技能练习马铃薯茎尖组织培养脱毒技术要点1.马铃薯茎尖组织培养脱毒技术1.1脱毒方法1.1.1选择优质健康的材料所选的植株必须是表现典型品种特性的植株,符合脱毒品种的特征包括株型、叶形、花色等植物学性状及成熟期等农艺性状;植株生长健壮,无明显的病毒性、真菌性、细菌性病害症状;单株产量和大薯率高;适时早收,选择符合品种特性,无病斑、虫蛀和机械创伤的大薯块。
1.1.2选择培养基MS培养基适用于大多数双子叶植物,B5和N6适合大多数单子叶植物,马铃薯茎尖培养基以MS+GA3 0.05mg/l +6-BA0.5～0.1mg/l +NAA0.1～0.2mg/l+2%蔗糖+0.9%琼脂配方效果比较好。
1.1.3剥离和接种薯块休眠后进行室内催芽,待芽长至1～2cm还未展叶时,将芽剪下,然后放入烧杯,用纱布封口,在自来水下冲洗半个小时,取出放到操作台上进行消毒。
消毒方法是将芽在75%的酒精中过一遍(约20秒),然后用次氯酸钠溶液稀释为2%～3%,浸泡2分钟,然后用无菌水清洗3～5次。
将消毒过的芽放在垫有吸水纸的培养皿上,每次消毒的芽不要太多,以防放置时间过长,茎尖褐变(消毒过程中所用器具均已事先高温灭菌)。
在操作台使用前先打开紫外线消毒30分钟,然后关闭紫外线灯,打开风机。
实验前换专用服装,双手用75%酒精擦拭消毒,取消毒处理过的芽,以无菌镊子固定,在30～40倍解剖镜下进行茎尖分生组织剥离。
用解剖针小心地除去茎尖周围的叶片组织,暴露出顶端圆滑的生长点,用解剖针切取0.1～0.3mm,带有1～2个叶原基。
茎尖剥离时为防止解剖镜近距离灯光烤伤茎尖分生组织,解剖镜光源要用冷光源照明。
切取的茎尖分生组织随即接种到培养基上,切面接触琼脂,置于培养室进行离体培养。
1.1.4培养条件将已接种外植体的试管置温度23℃～25℃,光照3000lx、在光周期13～16小时/天的培养室中培养2～4周即可成苗。
2.茎尖培养的关键技术环节2.1剥取适当大小的茎尖通常培养茎尖越小,产生幼苗的无毒率越高,但成活率越低。