猪2型圆环病毒自家组织灭活苗的研制及其免疫效果观察
２０１１年第４期（总第１７１期）
猪２型圆环病毒自家组织灭活苗的研制及其免疫效果观察
梁俊昌①②许瑞利①② 朱瑞良①
（①山东农业大学动物科技学院泰安２７１０１８②山东省枣庄市市中区畜牧兽医局）
摘要本试验通过检测细胞组织培养Ｐｃｖ２灭活疫苗与自家细胞免疫后Ｐｃｖ２抗体水产，结果表明，自家组织灭活苗
是预防ＰＣＶ２行之有效的办法。
关键词ＰＣＶ２ 自家组织灭活茵免疫
中图分类号：￥８５２．５ ２ 文献标识码：Ａ 文章编号；１００７．１７３３（２０１１）０４．００１３．０２
猪２型圆环病毒（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ ２，ＰＣＶ２）病是
当今养猪业流行的传染病之一，在现代化规模养猪场
中，ＰＣＶ２往往与其他疫病混合感染…，发病率呈上升趋
势。该病的广泛流行和蔓延已给世界各国养猪业的发展
造成了严重威胁和经济损失［２】０本试验对自家组织苗在某
些猪场应用的效果进行了测定。
１材料和方法
１．１材料
灭活疫苗．蓝圆二联苗（某高等院校研究所中试产
品）；自家组织苗：选试验猪场ＰＣＶ２发病猪典型间质性肺
炎病料，严格按自家组织苗制作程序制作，经０．４％甲醛
灭活，恒温汽浴振荡培养箱３７￣Ｃ灭活３６ｈ，冷藏备用；圆
环病毒２型抗体检测试剂盒；美国伯乐公司６８０型全自动
酶标仪。
１．２方法与步骤
１．２．１ 分组和预试 ４２日龄健康猪４５头，随机分为Ａ、
Ｂ、Ｃ３组，每组１５头，分３栏饲养，每组按１～１５的顺序逐
头打耳缺编号，观察７ｄ，无异常，正式试验。
１．２．２试验前采血和初免试验猪４９日龄，３个组同时逐
头前腔静脉采血５ｍｌ，随即颈部肌肉注射相应疫苗或生理 （试验ＩＩ组）每头免疫试验用自家组织苗３ｍｌ；Ｃ组（对照组）
每头注射生理盐水３ｍｌ。所采血样常温析出血清，按分组
对应编号标记，．２０℃冷冻保存待检。
１．２＿３ 初免抗体检测采血和二免 试验猪７０日龄采血，
试验组逐头免疫相同种类和剂量的疫苗，对照组仍每头
注射生理盐水３ｍｌ。所采血样析出血清，编号保存。
１．２．４二免抗体检测采血试验猪９１日龄，全部试验猪
逐头前腔静脉采血５ｍｌ，所采血样依上述１．２．２和１．２－３析出
血清，编号保存。
１．２．５抗体检测和统计分析把所采血清，逐份ＥＬＩＳＡ检
测ＰＣＶ２抗体，血清抗体ＯＤ值依分组编号逐头登记。按统
计学方法比较各组方差及ＯＤ均值差异显著性。
１．２．６ 试验猪群观察 试验开始后，逐日观察各试验组
和对照组群体的生长、采食、发病情况及外观表现，以
判断不同疫苗对ＰＣＶ２的免疫效果。
２结果与分析
２．１ ＰＣＶ２抗体的检测结果和统计分析
试验各组不同阶段ＰＣＶ２抗体ＥＬＩＳＡ检测结果表１。为
从统计学上判断各组免疫前后抗体水平变化是否存在差
异，对各组不同阶段的抗体水平逐对作成对双样本均值
盐水：Ａ组（试验Ｉ组）每头免疫试验用蓝圆二联苗３ｍｌ；Ｂ组 分析ｔ检验，检验结果如表２。
表１ 各试验组与对照组免疫的不同阶段ＰＣＶ一２抗体检测结果
ｌ３ 山东畜牧兽医 ２０１１年第３２
表１、表２数据显示：试验Ｉ组经蓝圆二联灭活苗１次免
疫２１ｄ后，血清抗体阳性率从４０．ｏ０％上升至７９＿３１％，ＯＤ
均值上升，但与一免前差异不显著。２次免疫２１ｄ后，阳
性率从７９．３１％上升至１００％，ＯＤ均值进一步上升，且与二
免前差异极显著。试验ＩＩ组经自家组织苗１次免疫２１ｄ后，
阳性率从５６．６６％上升至１００％，ＯＤ均值上升，与１免前差
异极显著。２次免疫２１ｄ后，阳性率仍是１００％，ＯＤ均值继
续上升，且与２免前差异极显著。
表２ ＰＣＶ２血清抗体检测结果的统计学检验
组别 试验Ｉ组 试验ＩＩ组 对照组
数据系列１ ～免前二免前一免前二免前一免前二免前
数据系列２ 二免前二免２１ｄ二免前二免２１ｄ二免前二免２１ｄ
值１．９６３２ ９．３６３２ ３．７５０５ ８．４５４６ ０．８６１２ ３．９２７ ｔ （ ．０５）２．０４８４ ２．０４８４ ２．０４５２ ２．０４５２ ２．０４５２ ２．０４５２
ｔ∞（ ．０１）２．７６３３ ２．７６３３ ２．７５６４ ２．７５６４ ２．７５６４ ２．７５６４ 差异显著性水平ＩｔＩ ｏ２５ Ｉｔｌ＞ｔ０ ｏ０５ Ｉｔ１＞ｔｏ ０ｏ５ Ｉｔｌ＞ｔ０ ００ｓ ＩｔＩ ＿０２５ Ｉｔ【＞ｔ０ ００５ Ｐ（１ｔｌ＞ｔｏ￣）０．０７２９ ４．０３Ｘ１０‘ 。０．０００８ ２．５７Ｘ１０‘’０．３９６２ ０．００８４
差异显著性 不显著极显著极显著极显著不显著极显著
２个试验组分别经２次蓝圆二联苗和自家组织苗免疫
后，血清ＰＣＶ２抗体水平都能有效上升。虽然从统计学角
度，试验Ｉ组一免２１ｄ后与一免前血清抗体水平对比，差异
不显著，但其抗体阳性率及ＯＤ均值都有明显提高或上升
（ＯＤ均值由０．１５３上升至０．３０６２），且Ｐ（１ｔｌ＞ ）＝Ｏ．０７２９，已
经很接近Ｈｏ的拒绝域（０．０２５），尚不能据此否认该组一免
２１ｄ后血清抗体水平显著上升。要确知抗体是否显著上
升，仍需进一步试验数据。
对照组经１次注射生理盐水２１ｄ后，血清抗体阳性率
从７０％下降至５６．６７％，ＯＤ均值下降，但与１次注射生理盐
水前差异不显著。２次注射生理盐水２１ｄ后，抗体阳性率
进～步下降Ｎ５３．３３％，但ＯＤ均值却有所上升，且与２次
注射生理盐水前差异极显著。不能把这一抗体水平显著
上升归因于注射生理盐水。因ＯＤ均值上升的同时，抗体
阳性率却进一步下降，ＯＤ均值的上升，不是总体普遍上
升的结果，而是个别样本超常上升的影响。这种结果，
可能与个别试验样本ＰＣＶ２自然感染有关。
２．２免疫效果观察
试验ＩＩ组（自家组织苗免疫组）猪群从初次免疫开始，
到２Ｏ周龄，生长一直正常，与该场正常猪无异。试验Ｉ组
（蓝圆二联苗组）和对照组（生理盐水组）从ｌ２周龄开始，逐
渐表现出与该场未使用自家组织苗免疫以前猪群散发性
ＰＣＶ２流行期间完全相同的症状。直到１５周龄补注射自家
组织苗，ｌ７周龄加强免疫１次；并在每次注射苗前３ｄ开
ｌ４ 始，连续７ｄ饲料中添加抗生素协助预防和治疗，猪群才
开始逐步恢复正常。
３讨论
试验结果表明，在市场未有免疫效果确切的ＰＣＶ２疫
苗销售以前，采集自场病猪典型间质性肺炎病料制作自
家组织苗，仍是预防ＰＣＶ２行之有效的办法。猪群经细胞
培养ａｃｖ２￣作的灭活苗免疫后，ＰＣＶ２抗体显著上升，但
不能有效预防ＰＣＶ２发病。说明ＰＣＶ２的结构蛋白抗体，不
能有效预防ＰＣＶ２发病。自家组织苗中含有ＰＣＶ２与其他病
原或有机微粒融合体这～可能性外，还可能有以下２种原
因： （１）ＰＣＶ２寄生靶细胞问题。ＰＣＶ２与ＨＩＶ（爱滋病毒）
具有很大的相似性，都是在免疫细胞内寄生和复制。ＨＩＶ
疫苗之所以２Ｏ多年至今仍未研制成功，除了因为ＨＩＶ存在
频繁变异外，还因为它寄生在人体免疫细胞，其中和抗
体无法有效突破免疫细胞固有的免疫屏障，中和在细胞
内寄生的ＨＩＶ。传统疫苗通过激发免疫细胞的免疫方式，
对ＨＩＶ免疫没有任何效果 。（２）病毒。细胞系统分泌
蛋白对病毒的免疫作用：已有的研究证实，昆虫的杆状
病毒．昆虫细胞系统，可高水平表达外源蛋白～多角体蛋
白，这些蛋白覆盖并保护着核体内的病毒粒子。通过提
纯这种蛋白，可对动物产生一定的免疫源性。使用间质
性肺炎病料制作自家组织苗之所以能较好地预防ＰＣＶ２发
病，也可能因为ＰＣＶ２感染肺泡细胞后，刺激肺泡细胞产
生某种分泌蛋白，这种分泌蛋白对ＰＣＶ２具有某种保护作
用，或者促进其在机体内复制。机体经这种分泌蛋白免
疫后，能有效中和这种分泌蛋白 】，从而抑制Ｐｃｖ２在机
体内复制，或使ＰＣＶ２在机体内失去保护屏障，无法在细
胞内生存，使ＰＣＶ２不发病。
参考文献
【ｌ】孙艳明，赵德明．猪圆环病毒分子生物学研究进展 ．中国畜牧
兽医，２００６，３３（７）：６２—６４．
［２】陈艳红，郭鑫，赵荣茂，等．我国规模化猪场主要繁殖障碍性病毒病的
血清学调查［Ｊ］．中国兽医杂志，２００７，４３（６）：３３—３５．
【３］胡兰银，张骞，肖建锋等．引起猪发病死亡主要疫病的病原学调查
［Ｊ］．畜禽业，２００７，３２（１２）：１５—１７．
【４］邱艳红，吴峻华，叶玮等．福州市猪圆环病毒（ＰＣＶ－２）￣清学调查
．中国兽医杂志，２００５，４１（８）：２６－２７．
（收稿日期：２０１１ ３＿２３）
猪链球菌2型亚单位疫苗的免疫效果
猪链球菌2型亚单位疫苗的免疫效果
史同瑞
【期刊名称】《畜牧兽医科技信息》
【年(卷),期】2001(0)8
【摘 要】猪链球菌感染是一种造成养猪业重大经济损失的疾病。接种全菌疫苗只能对同源细菌产生免疫。Wisselink等应用亲和层析法提取猪2型链球菌4005菌株的细胞外因子(EF)和细胞壁释放蛋白(MRP),制备亚单位油乳剂疫苗,并测定了其免疫效果。试验猪在3和6周龄免疫两次,8周龄时静脉攻击同源或异源链球菌。结果表明。免疫MRP+EFF油乳剂疫苗的猪抗MRP和EF抗体效价较高,且免疫效果与全菌油苗相同。
【总页数】1页(P14-14)
【关键词】猪链球菌2型;亚单位疫苗;油乳剂疫苗;免疫效果;免疫猪;链球菌感染;亲和层析法;细胞外因子;重大经济损失;保护率
【作 者】史同瑞
【作者单位】
【正文语种】中 文
【中图分类】S852.5
【相关文献】
1.猪α干扰素对猪圆环病毒2型亚单位疫苗免疫效果的影响 [J], 曹瑞兵;周国栋;陈溥言 2.猪链球菌保护性抗原表位串联亚单位疫苗设计及小鼠免疫保护效力分析 [J], 孔里程;王兆飞;孙建和
3.猪链球菌2型灭活疫苗对小鼠的免疫效果评价 [J], 段倩倩; 毛天骄; 韩业芹; 韩雪姣; 魏建忠; 孙裴; 李郁
4.基于细菌表面展示技术的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗的小鼠保护效果评价 [J], 赵谦; 龚俊; 栾天; 徐盛奎; 李刚; 王春来
5.猪链球菌2型溶血素重组亚单位疫苗的研制 [J], 吉利伟;蔡伟刚;刘民星;杨秋实;孔建涛;范红结
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猪圆环病毒病的预防措施
保育期和育肥期的猪，咳嗽、流鼻汁、呼吸加快、精神沉郁、
食欲不振、生长缓慢。
除了上述几种临床表现外，在临床上还能见到与圆环
病毒Ⅱ型相关的中枢神经系统疾病、肠炎和关节炎等，这
些情况多见于蓝耳病阳性猪场的继发感染。实践证明，圆
环病毒病与蓝耳病同时流行的猪场，其哺乳仔猪和育肥猪
的死亡率明显高于单个感染猪场。 另外，由于猪圆环病毒的免疫抑制作用，使机体更容
易感染其它病原，这也是圆环病毒容易与多种疾病混合感 染的主要原因，目前最常见的感染有蓝耳病病毒、猪伪狂
犬病毒、细小病毒、肺炎支原体、多杀性巴氏杆菌、流行性
腹泻病毒和猪流感病毒等，有的呈二重或三种感染，从而
导致其病死率也大大提高。
猪圆环病毒病的预防措施
杨丽梅马力郭时金周春风王建军张颖山东省滨州畜牧兽医研究院
猪圆环病毒病目前尚无特效的防制方法，因此，预防
该病的发生是减少其损失的主要途径，目前对于该病的预
防主要从以下几方面做起。
一、提高猪群的整体免疫力
（一）提高猪群的免疫力
对于有圆环病毒病存在的猪场，一般要用中高档饲
料，并保证饲料中必需氨基酸、维生素和微量元素的含量。
在易发病曰龄，饲料中可加入免疫功能增强剂，如血浆蛋
白粉、甘露寡糖、复合维生素和维生素Ｅ等，对该病有一定 的预防效果。同时红细胞也参与机体的免疫，因此可将常
规的仔猪一次性补铁改为二次补铁，即在２—３日龄注射
１毫升铁制剂，１０～１５日龄再注射２毫升。实践证明二次
补铁的仔猪毛色好，血液中血红蛋白含量高，免疫功能增
强，发病率低。 （二）减少各种应激因素的影响
要尽量减少仔猪哺乳阶段的免疫次数。通过生产实践 发现，本病与应激因素有密切关系，在换料、转群、去势、寒
流侵袭、阴雨连绵、疫苗注射等应激因素的作用下，容易诱
发或使发病猪群病情加重，损失增大。因此，在转群时尽量 不换料，即使换料也要采取逐渐过渡法，或料中加入抗应
激的药物。在气候突变时，猪只受凉及免疫功能降低后，潜
养猪场5种常见疫苗不同组合的免疫效果研究
养猪场5种常见疫苗不同组合的免疫效果研究
熊忠良;温文生;史小娜;丁凡;程敏华;杨纯杰;王肆玖;吕长军
【摘 要】[目的]优化免疫接种程序,减少疫苗接种次数以及减轻猪场疫苗接种工作量.[方法]对猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病以及猪喘气病5种猪场常见猪病的疫苗按照不同组合采用混合注射、分点注射以及单苗注射等接种方式进行免疫试验.[结果]通过田间16轮次的重复试验和效果观察发现,3种不同免疫方式对猪群不同时期的抗体水平、日增重以及育成率等没有显著差异.[结论]5种疫苗不同组合混合接种在临床上具有可行性,为猪场因地制宜地制定免疫程序提供参考.
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2018(046)033
【总页数】5页(P61-64,70)
【关键词】疫苗;不同组合;免疫效果
【作 者】熊忠良;温文生;史小娜;丁凡;程敏华;杨纯杰;王肆玖;吕长军
【作者单位】武汉中博生物股份有限公司,湖北武汉430075;武汉中博生物股份有限公司,湖北武汉430075;武汉中博生物股份有限公司,湖北武汉430075;武汉中博生物股份有限公司,湖北武汉430075;武汉中博生物股份有限公司,湖北武汉430075;武汉中博生物股份有限公司,湖北武汉430075;武汉中博生物股份有限公司,湖北武汉430075;武汉中博生物股份有限公司,湖北武汉430075
【正文语种】中 文
【中图分类】S858.28
猪瘟(CSF)、蓝耳病(PRRS)、猪伪狂犬(PR)、猪圆环病毒病(PCVD)以及猪支原体肺炎(MPS，又称“喘气病”)是我国猪场临床最常见的5种传染性疾病。为了预防以上疾病，猪场通常采用疫苗免疫接种，但由于猪场猪病复杂繁多，需要接种的疫苗也很多，往往在制订免疫程序时发生时间上的冲突，另外在免疫接种时需要多次注射，这样不但会造成猪群的多次应激，不利于猪的生长，而且增加了防疫人员的工作量。为了减少免疫接种次数，又能达到同样的免疫效果，笔者在一普通规模化养猪场的商品猪群中将猪瘟等五种猪病疫苗按照不同组合进行免疫接种试验。
畜禽自家疫苗的制备与应用
综述
文摘畜禽自家疫苗的制备与应用
陆有飞1,2,高永锐1,2,吴远松2
(1.广西大学动物科技学院,南宁530005;2.广西生物制品厂,南宁530001)
中图分类号:S852.4 文献标识码:B 文章编号:1002-5235(2008)01-0058-03
近十年来,随着我国畜禽养殖业集约化发展,
疾病混合感染和各种免疫抑制性疾病引起的综合
症导致疫情的发生呈现复杂化的趋势,这种情况在
短时间内难以疫苗预防控制,药物治疗往往又得不到理想的效果,因此对畜禽养殖业造成了很大经济
损失。在临床上,多数兽医工作者都肯定自家疫苗
的制备与应用,在一定程度上可以达到控制疫情的目的。本文就这方面做一综述。
1 自家疫苗的定义
自家疫苗简称自家苗,又称现地疫苗,是采用畜禽病料组织(内脏器官)经加工或分离到的毒株
经体外增殖,灭活后加入适宜佐剂制成,仅供发病
养殖场(病料来源场)健康动物作预防使用。自家疫苗适用于混合感染、多血清群、多血清型、多变异
病原引起的疾病及发病机理和病原免疫原性尚不
清楚的疾病等。
2 自家疫苗的制备方法
2.1 组织灭活疫苗制备
选择经过临床诊断和实验室诊断的典型病例,然后无菌采集濒死畜禽内脏器官(根据不同疾病采
取肝、肾、肺、脾、淋巴结等),剪碎,加适量PBS液
于高速捣碎机中匀浆,加PBS液稀释成混悬液,冻
融3次,离心(取上清液)或过滤后,加入灭活剂灭活24～48h,期间振荡数次,灭活检验(包括无菌检
验和病毒的细胞感染检查)合格后加入佐剂混匀分
装,经安全试验和效力试验合格即得。2.2 分离株灭活疫苗制备
选择适宜培养基或实验动物→细菌(病毒)分
离与鉴定→制苗株的筛选→细菌(病毒)的增殖培
养和灭活(必要时浓缩)→灭活检验(包括无菌检验、病毒的细胞感染检查等)→加佐剂混匀分装,经
安全试验和效力试验合格即得。
3 自家疫苗的应用实例
3 大肠杆菌病与巴氏杆菌病目前国内外有批准的商品疫苗(活疫苗和灭活
疫苗)应用,由于大肠杆菌与巴氏杆菌都是多血清
猪圆环病毒病的防治
养殖与饲料2019年第09期
猪圆环病毒病发病率高，流行范围广，具有传染
性，是近年来猪场需要注意防范的一种高致病性猪
病。猪圆环病毒在自然界广泛存在，家猪和野猪是自
然宿主，猪科外其他动物对其不易感。猪圆环病毒感
染后会出现断奶仔猪多系统消耗综合征、猪皮炎肾病
综合征、繁殖障碍症等，严重影响了猪场的经济效益。
为避免猪圆环病毒病的发生，提前做好防治工作就显
得格外重要。因此，笔者就猪圆环病毒病的病原学、流
行情况、临床症状、病理变化、诊断措施、防治措施作
总结，以期增强养猪户对猪圆环病毒病的认识。
1病原
猪圆环病毒属圆环病毒科圆环病毒属，为环
状、单股DNA病毒，含有1767～1768个核苷
酸。猪圆环病毒在氯化铯溶液中的浮力密度为
1.37g/mL。猪圆环病毒可使部分动物红细胞凝集，
耐酸，在pH=3的环境下仍可存活，耐氯仿，70℃
环境中仍可存活15min。将猪圆环病毒与系列市
售消毒剂，如双氯苯双胍己烷、过氧化物、碘酒和
酒精在室温下作用10min，病毒的滴度会下降。
2流行病学
猪圆环病毒在自然界广泛存在，家猪和野猪是
自然宿主，猪科外其他动物对猪圆环病毒不易感。
口鼻接触是猪圆环病毒的主要自然传播途径。由于
感染猪在猪群中不规律地走动，这可以使疾病在猪群中水平传播，并且被污染的衣服和设备也有可能
成为传播病毒的载体。怀孕的母猪感染猪圆环病毒
也会经过胎盘垂直传播感染仔猪。通过PCR法可以
检测出断奶仔猪多系统消耗综合征（PMWS）感染或
非感染猪粪便、分泌物和血清中是否存在猪圆环病
毒。PMWS与猪圆环病毒有密切的关系，一般去势
后的公猪较母猪更易感染。
3病理变化
猪圆环病毒病的主要病理变化为肾脏灰白色、
水肿，脾脏轻度肿胀或萎缩，肝脏肿大、可出现中等
程度的黄疸，回肠和结肠段肠壁变薄，肺脏肿胀，质
度坚硬或似橡皮，其上散在有大小不等的紫褐色实
变区，全身淋巴结，特别是颌下、腹股沟、纵隔、肺门
和肠系膜淋巴结显著肿大，切面为灰黄色，有的可
见出血[1]。猪皮炎和肾病综合征（PDNS）猪只都表现
猪圆环病毒病的诊断与防控
临床兽医2019年9月下
摘 要：猪圆环病毒主要是刚断奶的仔猪出现多系统衰竭引发的综合征，是目前发现的最小的一类动物病毒，分成PCV1属于非致病性的病毒和PVC2致病性病毒，死亡率达到了10%到30%，比较严重的猪场，在出现这种病症时，死亡率可能达到了40%，会给养猪业带来巨大的经济损失，这种病症是能够造成猪的免疫障碍的重要传染病，对此，养殖场需要予以足够的重视，采取有效的诊断和预防手段，要将病症出现的可能性降到最低，从根本上保证猪场的安全。关键词：猪圆环病毒；诊断；防控
1 前言猪圆环病毒病主要出现在断奶之后的2周到44周时，出现的概率较大，哺乳阶段的猪仔很少出现这种疾病。通常是伴随着猪瘟和蓝耳病，混合感染的，病症的流行概率明显增加。病毒可以从呼吸道和胎盘等传染给仔猪，影响猪的免疫能力，进而给整个养猪场带来巨大的损失。2 猪圆环病毒病常见的病型第一是仔猪断奶多系统衰竭综合症，主要是5周到12周的猪群容易受到感染，主要的症状是病猪身形消瘦、呼吸困难、精神差、食欲不佳，甚至伴随着有腹泻的情况。第二是猪皮炎和肾病综合症，哺乳期或者是育肥期的猪群容易患有这类病症，主要的症状是，猪的皮肤出现了不同程度的疹块，食欲衰减、苍白、呼吸急促等。3 猪圆环病毒的诊断在对这类病症进行诊断时，需要将临床症状、病理变化以及病原等多方面的因素联系起来，通过病毒分离和鉴定的方式进行确认。3.1 病理学检查病猪有时候具有一定的诊断价值这就是病理学检查，因为淋巴组织中的淋巴细胞的数量在不断的减少，如果看到病猪有淋巴肿大、肺功能衰退的情况，基本上就可以判断病猪是感染上了这类病。3.2 血清学检查当猪感染疾病时，血清学检查就是最佳的诊断方法，包括了间接免疫荧光法和聚合酶链式反应法。间接免疫荧光法可以检测和分型猪圆环病毒，将其以盖玻片的形式在 PK-15 细胞中进行培养，固定使用丙酮，这样就很容易判断出检测的细胞中是否存在有猪圆环病毒。酶联免疫吸附试验较常用在PCV2抗体的检测中，其检测结果要比间接免疫荧光法更加精准，抗原是细胞培养的病毒，PCV2单克隆抗体是重要的竞争试剂，可以测定出血清中是否存在有病毒抗体。聚合酶链式反应法主要是利用扩增产物的限制酶图谱，从病猪的鼻腔分泌物和粪便中的PCV2做好基因的扩增工作，通过这种方式，确认病猪是否感染上了PCV的病毒，这种方式最为方便、快捷，而且诊断的结果准确性也能得到保证。核酸探针杂交及原位杂交试验更多的是用在临诊病料和病理分析中，这种方式检查PCV比较常见，能够准确的判断出病猪的哪些器官、哪些部位感染PCV，但是不能确认具体的类型，也就是说无法知晓是非致病性的病毒亦或是致病性病毒，如果要确认具体的类型，还需要辅之以其他的检测手法。4 猪圆环病毒的防控手段4.1 药物治疗从目前的发展来看，没有效果比较好的疫苗，抗乐清具有人工被动免疫的效用，所以除了平时对饲养管理工作加以重视之外，还可以考虑在喂养的猪饲料中加入泰乐菌素和强力霉素等具有抗菌性能的药物，从根本上提升猪的抵抗能力，减少细菌和病毒这类的并发症；出生的仔猪，也必须保证其有充足的初乳。注射克林霉素和磺胺类带有抗菌性能的药物，将并发感染的可能性降到最低，在治疗过程中需要联系病猪的肾脏排泄情况，增加缓解类的药物。在饲料中加入一些微量元素，用黄芪多糖注射液和维生素等进行混合注射，同时也可以采用氨基金维他混合水对饲料，提高猪群的免疫能力。采用干扰素和免疫球蛋白这类的新型抗病毒剂，在治疗过程中伴随着中草药进行混合制成药剂，达到良好的治疗效果。4.2 改善猪舍环境良好的猪舍环境也是极为重要的，要尽可能的为猪群的生长，提供干燥、舒适和卫生的环境，氨气浓度、湿度以及二氧化碳的含量都需要严格的控制。通常情况下，周龄仔猪的饲养温度控制在28℃，过一周将温度降低2℃，直到常温20～25℃即可，夏天需要做好降温工作，冬天需要做好保暖。4.3 加强营养猪群的种类不同、生长阶段不同以及不同的季节，选择的饲料都会存在有明显的差异，尽可能的选择优质新鲜的饲料混合营养剂进行配合，确保猪群的日常饮食能够营养均衡，将可能受到感染的概率降到最低。4.4 做好免疫保健要联系猪场的具体情况并结合当地容易感染的疾病，有针对性的开展免疫和保健工作，将猪圆环病毒感染的可能性降低。猪场较为常见的病症有猪瘟、猪蓝耳等基础免疫措施，为了减少猪肺炎支原体感染造成的猪圆环病毒，需要在仔猪21d的时间里注射1头份肺炎支原体灭活苗。此外，还可以加强药物保健，从各个方面着手保证猪群的健康，确保其正常生长，得以顺利出栏。猪圆环病毒存在有广泛性和混合感染的特点，在各类环境下，毒性会有着明显的提升，一旦疏忽就有可能给养猪业造成巨大的损失，对此，养殖户需要加以重视，要认识到猪圆环病毒的主要病症，分析并制定与之相对应的防控策略，将为这类病症造成的病猪和死猪的情况降到最低，从根本上保证养殖场的收益。参考文献[1] 周琳.猪圆环病毒病的流行趋势与防控对策[J].乡村科技，2016，（26）：18.[2] 张军令，王金苗，王永彬，等.猪圆环病毒病的特点与防控技术分析[J].中国畜牧兽医文摘，2015，31（07）：126.猪圆环病毒病的诊断与防控
猪圆环病毒症状及防治措施
猪圆环病毒症状及防治措施
猪圆环病毒（porcine circovirus，PCV）在分类学上属圆环病毒科圆环病毒属，为已知的最小的动物病毒之一。病毒粒子直径14－17nm，呈20面体对称结构，无囊膜，含有共价闭合的单股环状负链DNA，基因组大小约为1.76kb。PCV对外界理化因子的抵抗力相当强，即便在PH3的酸性环境及72℃的高温环境中也能存活一段时间，氯仿作用不失活，无血凝活性。现已知PCV有两个血清型，即PCV1和PCV2。PCV1为非致病性的病毒。PCV2为致病性的病毒。猪对PCV2具有较强的易感性，感染猪可自鼻液、粪便等废物中排出病毒，经口腔、呼吸道途径感染不同年龄的猪。
猪圆环病毒临床症状：
PMWS的临床症状
最常见的是猪只渐进性消瘦或生长迟缓，这也是诊断PMWS所必需的临床依据，其他症状有厌食、精神沉郁、行动迟缓、皮肤苍白、被毛蓬乱、呼吸困难，咳嗽为特征的呼吸障碍。较少发现的症状为腹泻和中枢神经系统紊乱。发病率一般很低而病死率都很高。体表浅淋巴结肿大，肿胀的淋巴结有时可被触摸到，特别是腹股沟浅淋巴结；贫血和可视黏膜黄疸。在一头猪可能见不到上述所有临床症状，但在发病猪群可见到所有的症状。胃溃疡、嗜睡、中枢神经系统障碍和突然死亡较为少见。绝大多数PCV2是亚临床感染。一般临床症状可能与继发感染有关，或者完全是由继发感染所引起的。在通风不良、过分拥挤、空气污浊、混养以及感染其他病原等因素时，病情明显加重，一般病死率为10%～30%。
先天性颤抖的症状
颤抖由轻微到严重不等，一窝猪中感染的数目也变化较大。严重颤抖的病仔猪常在出生后1周内因不能吮乳而饥饿致死。耐过1周的乳猪能存活，3周龄时康复。颤抖是两侧性的，乳猪躺卧或睡眠时颤抖停止。外部刺激如突然声响或寒冷等能引发或增强颤抖。有些猪一直不能完全康复，整个生长期和育肥期继续颤抖。发病窝猪常为新引入的年轻种猪所生，这表明这些血清学阴性种猪在怀孕的关键期接触了PCV。
猪圆环病毒病的防治技术
C:\iknow\docshare\data\cur_work\274058413.doc 8/5/2015 1 猪圆环病毒病的防治技术
张永雄 江西余干县畜牧兽医局
猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的猪的一种新的传染病,表现为严重的呼吸.消化系统疾病及繁殖障碍,同时导致猪群产生严重的免疫抑制，造成免疫失败。 各种年龄的猪均可感染，但仔猪感染后发病严重。胚胎期或生后早期感染的猪，往往在断奶后才可以发病，一般集中在5～18周龄，尤其在6～12周龄最为多见。怀孕母猪感染猪圆环病毒后，可经胎盘垂直传染给仔猪，并导致繁殖障碍。感染猪可自鼻液、粪便等废物中排除病毒，经消化道、呼吸道引起感染。
1 猪病症状 猪圆环病毒感染后潜伏期均较长，即使胚胎期或出生后早期感染，也多在断奶以后才陆续出现症状。PVC—2感染可以引起以下多种病症：
1.1 猪断奶后多系统衰竭综合症:通常发生于断奶仔猪，1997年首次报道，随后美洲、欧洲和亚洲各国相继报道了该病。现已证实PVC—2是猪断奶后多系统衰竭综合症的重要病原，繁殖与呼吸综合症病毒、细小病毒、伪狂犬病病毒等病原混合感染和免疫刺激可以加重该病的危害程度。
患猪表现为精神欠佳、食欲不振、体温略偏高、肌肉衰弱无力、下痢、呼吸困难、眼睑水肿、黄疸、贫血、消瘦、生长发育不良，与同龄猪体重相差甚大，皮肤湿疹，全身性的淋巴结病变，尤其以腹股沟、肠系膜、支气管以及纵膈淋巴结肿胀明显，发病率为5%～30%，C:\iknow\docshare\data\cur_work\274058413.doc 8/5/2015 2 死亡率为5%～40%不等，康复猪成为僵猪。
1.2 皮炎和肾病综合症:通常发生于8～18周龄的猪。在1993年首次报道于英国，随后在美国、欧洲和南非、亚洲均有报道。发病率为0.15%～2%，有的时候可高达7%。以会阴部和四肢皮肤出现红紫色隆起的不规则斑块为主要症状。患猪表现为皮下水肿，食欲丧失，有时体温上升。通常在3日内死亡，有时可以维持2～3周。
“猪圆环病毒疫苗”在哈尔滨兽研研制成功
２０ｌ０年第ｌ】期总第２７２期第３ｌ卷 国家种质基因库储存能力提升 牧草种质资源是生物资源的重要组成部分，蕴藏着 丰富的遗传基因，是天然的优良牧草基因库，具有潜在 的资源优势和广泛的利用前景。 为此，国家建立了保存牧草种质的长期库、中心库、 温带备份库、热带备份库。全国畜牧总站农业部全国草 业产品质量监督检验中心负责草种质资源保存利用中 心库日常管理维护工作，包括对入库前种子的净度、生 活力及种子含水量等指标进行检测；对已入库保存的草 种质材料活力进行监测；开展对牧草种子生命力有影响 的保存条件、种子含水量、干燥条件等的基础研究；从分 子水平开展草种质资源遗传多样性研究等。 中心库保存了大量国内外优良牧草品种。截至 ２０１０年８月，入库保存种质材料达１８ ０２５份，分属于８２ 科４７０属１ ２６３种。禾本科１００６９份，豆科５ ４８６份，其他科 ２４７０份，其中有古老的第三纪孑遗植物沙冬青和濒危植 物野大豆、黄芪、蒙古黄芪等，大量我国特有种如黑紫披 碱草、中华羊茅、冷地早熟禾、塔落岩黄芪、牛枝子及国 外引进的优良草种等。 依据《国家草种质资源中期库种质分发利用管理规 定（试行）》，中心库不断完善种质分发和利用工作。今 年已分发苜蓿属、黑麦草属、冰草属、无芒雀麦属、披碱 草属及豆科其他草种质材料共计３２０份。种质材料申请 者有北京林业大学、四川农业大学、扬州大学、吉林省农 科院、中国科学院东北地理与农业生态研究所及中国农 业科学院北京畜牧兽医研究所等单位，主要用于国家级 科研项目、自然科学基金等国家重大科研项目，集中在 遗传多样性研究、苜蓿统一评价体系建立、新品种选育、 抗性及适应性鉴定等研究领域。圈 （新闻来源：中国畜牧业信息网） “猪圆环病毒疫苗”在 哈尔滨兽研研制成功 从中国农科院哈尔滨兽医研究所获悉，由该所刘 长明研究员主持的“猪圆环病毒２型（ＰＣＶ２）灭活疫苗 （ＬＧ株）”，经过ｌＯ年的科技攻关，终获成功，疫苗免疫 攻毒保护率达９６％以上。该疫苗新兽药注册近日通过 农业部兽药评审中心评审，颁发二类新兽药证书。疫 苗毒种获得国家发明专利授权，拥有自主知识产权。 据悉，猪圆环病毒病是继猪蓝耳病之后国际上公 认的危害养猪业的重要疫病，感染猪主要引起一种被 称为断奶仔猪多系统衰竭综合征（ＰＭｗｓ）。该病可发 生于健康状况良好的猪场，以５～１２周龄的猪发病率 较高，急性暴发猪群的死亡率可达１０％，个别情况高达 ５０％。同时，ＰＣＶ２感染还可引起猪皮炎与肾炎综合征 （ＰＤＮＳ）、猪繁殖障碍和猪呼吸道疾病综合征（ＰＲＤＣ）等 ・行业动态・ 其他疾病，这些与ＰＣＶ２感染相关的疫病统称为猪圆环 病毒病。 疫苗预防接种是控制本病的有效手段，而我国对 ＰＣＶ２疫苗的研制遭遇了培养的病毒含量较低、动物感 染模型不易复制等难题。针对这些问题，哈尔滨兽医 研究所的科技人员攻克多项科技难关，掌握了病毒繁 殖规律，培育出高产疫苗种毒，为疫苗研制铺平了道路。 该疫苗具有如下特点：一是抗原含量高；二是免疫 原性强；三是安全性好；四是免疫效果确实：疫苗免疫 攻毒保护率达９６％以上；五是抗母源抗体干扰；六是应 用效果显著：临床试验表明，疫苗接种猪群与未接种对 照群对比，疫苗免疫猪发病率、死淘率、母猪所产仔猪 死胎率显著下降，饲料转换率、增重率、出栏率显著上 升；初生仔猪成活率、断奶时成活率明显提高 日前，该疫苗已经在哈尔滨维科生物技术开发公 司投入生产，在全国范围内推广应用，该疫苗的研制成 功为我国养猪业的健康发展带来了福音。圈 （新闻来源：中国畜牧业信息网） 农业部将开展全国生鲜乳收购站检查 农业部办公厅日前发布了《关于开展全国生鲜乳收购 站拉网式检查的通知》，称农业部将于近期组织开展全国 生鲜乳收购站拉网式检查，所有抽检的样品检测三聚氰胺。 １．检查生鲜乳收购站许可证、准运证以及生鲜乳交 接单持有情况；２．挤（收）奶厅、贮奶问、化验室、设备间、 更衣室、办公室等基础建设设施及污粪无害化处理设施 是否完备；３．冷却、冷藏、低温贮运等设备配套情况，贮奶 罐密封状况、内置搅拌装置的配备使用情况；４．化验、计 量、检测仪器设备配置、使用及留样情况；５．工作人员是 否有健康合格证明和体检记录，是否经过相关奶业法律 法规、生鲜乳生产收购、卫生安全等的培训：６．挤奶操作 等规范是否上墙，奶桶、奶杯消毒和清洗情况，贮奶灌内 温度保持情况；７．卫生管理、质量安全保障、工作规程、培 训教育、化学品管理等制度是否完善；８．生鲜乳收购、销 售、检测等记录是否记录清晰、存档；９．库房、检测室等场 所等是否有违禁物质，是否有掺杂使假的工具。 通知要求所有抽检的样品检测三聚氰胺，采用快速 法进行初步筛选，快速方法的检出限不高于０．３ ｍｇ／ｋｇ。 检测结果高于０．３ ｍｇ／ｋｇ的样品采用ＧＢ／Ｔ ２２３８８．２００８《原 料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》第二法或第三法进 行确证。确证结果大于２．５ｍｇ／ｋｇ判定为不合格，上报的 检测结果为具体检测值。 通知强调各省畜牧兽医（奶业）主管部门在检查中要 根据本省（区、市）实际情况，采取突击检查、异地抽查等 多种方式，确保检查取得实效。检查中要做好检查记录、 留档备查，坚决取缔无证经营的奶站。要组织质检机构 做好生鲜乳抽样和检测工作，要依据检查及检测结果， 依法严肃查处违法违规经营和违禁添加行为。圈 （新闻来源：中国畜牧兽医信息网） ・
猪圆环病毒2型灭活苗的免疫效果
禹篱 兽磊 ２０１１年（第３２卷）第１２期 猪圆环病毒２型灭活苗的免疫效果 肖锦红 ，李文涛。，库旭刚 ，彭峰’。王建举’。赖登明’。何启盖 （】．河南诸美种猪育种有限公司集团，河南正阳４６３６１２； ２．农业微生物学国家重点实验室） 摘 要：２０日龄的仔猪免疫猪圆环病毒２型灭活疫苗，使用ＯＲＦ２一ＥＬＩＳＡ方法监测免疫前后的抗体水平， 免疫前、免疫２周、免疫３周、免疫４周采集血清，检测结果可以看出，猪群的ＰＣＶ一２抗体阳性率提高，免疫后４ 周抗体滴度达到较高水平；免疫组日增重、存活率、净增重均比对照组提高，而且饲料利用率高，药物治疗费由 ５．６７元降低到４．９５元。 关键词：猪圆环病毒２型；灭活疫苗；免疫效果 中图分类号：￥８５２．４ 文献标识码：Ｂ 猪圆环病毒２型（ＰＣＶ一２）是最近几年新发现的一种 严重威胁养猪业的病毒．已经受到广泛关注［１－２１。它能造成 仔猪断奶后多系统衰竭综合征（ＰＭＷＳ），此外，与ＰＣＶ一２ 相关的疾病还有许多，例如猪皮炎与肾病综合征（ＰＤＮＳ）、 猪呼吸道综合征（ＰＲＤＣ）、先天性震颤（ＣＴ）、增生性坏死性 肺炎（ＰＮＰ）、渗出性皮炎、肉芽肿性肠炎、坏死性淋巴腺 炎、繁殖障碍等。 １材料与方法 １．１ 疫苗ＰＣＶ一２灭活疫苗 １．２ 实验动物 从河南规模化猪场随机挑选１２０头２０ 日龄仔猪 １．３主要试剂ＰＣＶ一２ ＥＬＩＳＡ抗体检测试剂盒 １．４流行病学调查２００９年６月．规模化猪场反映．有约 ４０％猪只发病，逐渐消瘦．且有８％猪只突然死亡。随后，发 病猪数量增加，约有２５％的死亡率。后经过对发病猪场进 行临床症状观察和现场剖检观察．怀疑是猪圆环病毒感 染。现场了解，猪场未使用猪圆环病毒２型疫苗进行免疫。 文章编号：１００４—５０９Ｏ（２０１１）１２－０００３—０２ 集病猪血清和病料．送华中农业大学实验室进行血清学和 病原学检测 进一步对这个场发病前近一年来保存的不同 阶段猪血清进行圆环病毒２型抗体检测 血清调查使用 ＰＣＶ一２ ＥＬＩＳＡ抗体检测试剂盒 １．５ ＰＣＶ一２的ＰＣＲ检测 对ＥＬＩＳＡ抗体阳性猪只．采 集组织样品，用ＰＣＲ方法进行病原学检验，进一步诊断。 １．６灭活苗的免疫预防作用 在规模化猪场挑选１２０头 仔猪，分为两组．一组免疫ＰＣＶ一２灭活苗．一组作为空白对 照。免疫组在２０日龄肌肉注射ＰＣＶ一２灭活苗。免疫剂量为 ２ｍｌ／头：空白组注射生理盐水２ｍｌ／头。ＰＣＶ一２灭活苗免疫 前、免疫后２周、免疫后３周、免疫后４周分别前腔静脉采 血。用ＥＬＩＳＡ法检测ＰＣＶ一２抗体水平。同时，观察和记录免 疫后猪群在保育期（２１～６３日龄）阶段的发病情况、成活率、 生长性能、饲料转化率、日增重等情况，比较两组的差异。 ２结果与分析 ２．１ 血清学调查结果 对猪场所采集的样品血清用 ＥＬＩＳＡ方法检测猪ＰＣＶ２抗体．测试结果见表１。 表１ ２００８—２００９年规模化猪场ＰＣＶ一２抗体监测结果