猪圆环病毒2型(PCV2)
DNA病原—圆环病毒2型PCR检测方法
1 猪圆环病毒2型PCR检测方法操作程序
廖荣斌，何启盖
（华中农业大学动物医学院）
一、原理
猪圆环病毒2型感染引发的仔猪断奶衰竭综合症、肾炎与皮炎、增生性肠炎以及母猪繁殖障碍。通过病原检测和病毒分离是确证本病的重要手段。猪圆环病毒分为2种，即圆环病毒1型和圆环病毒2型。前者不致病，后者可致病。猪圆环病毒2型（PCV2）的基因组大小为1768 bp或1767bp。其中，PCV2 ORF2基因与免疫保护和毒力等重要特性有关，同时，此基因与PCV1的同源性较低，通过合理设计引物，扩增ORF2，从而可检测并区分PCV2与PCV1。
PCR技术具有快速、敏感的优点，已经用于许多动物疾病病原的检测。本试验是利用我们设计的引物，通过反应条件的优化，以感染猪组织或血液为模板，扩增PCV2的ORF2基因，从而作出感染的结论。
二、材料准备
1、手术器械：采样用。根据样品数量来确定。
2、微量移液器（规格：2.5l，10l，100l，200l，1000l）
3、反应引物
上游引物：CAC GGA TAT TGT AGT CCT GGT；
下游引物：CGC ACC TTC GGA TAT ACT GTC
4、磁珠：用于吸附和分离DNA
4、PCR仪：东胜创新
5、电泳仪：北京六一电子设备
6、紫外检测仪：Bi0-RAD凝胶成像系统
7．相关溶液及配方：
1╳TAE buffer（电泳缓冲液）配方：（1）称量Tris：242g，Na2EDTA.2H2O：37.2g，置于1L的烧杯中；（2）向烧杯中加入约800ml去离子水，充分搅拌溶解；（3）加入57.1ml的醋酸，充分搅拌；（4）加去离子水将溶液定容至1L后，室
2 温保存；（5）使用时将室温保存的该溶液稀释50倍即可使用。
扩增产物的样品缓冲液：全式金生物6╳Loading buffer。
三．样品采集
感染猪或流产的胎儿的肺脏、淋巴结、脾脏和肾脏；发热期猪的抗凝血或血清；每个样品用单独的剪刀或刀片，避免交叉污染。
实验性生产的喷雾干燥血浆对猪感染圆环病毒2型(PCV2)的效力
栖息屏障和密度对肉鸡腿部健康、
恐惧和生产性能的影响
Ｖｅｎｔｕｒａ Ｂ Ａ，Ｓｉｅｗｅｒｄｔ Ｆ，Ｅｓｔｅｖｅｚ Ｉ
摘要：脚垫和飞节的恶化及增加的压力是高密度肉鸡
生产中重要的福利关注点。有人认为，强化环境可能有助于
解决这些问题。假设，通过密度范围的栖息屏障增加环境的
复杂性可改善脚垫和飞节的健康，减少腿部上下摇动的不对
称（ＦＡ），并在不影响肉鸡行为的情况下减轻肉鸡恐惧。本
试验将２０８日龄肉鸡随机分为４组，屏障和密度复合处理
组、简单障碍组、复杂障碍组、无障碍组（对照组）。第７
周，收集胫骨的平均宽度和长度、胫骨宽度的不对称性和胫
骨的长度、脚垫和飞节病变、强直不动性、饲料转化率、末
体重、死亡率数据。高密度肉鸡有较严重的脚垫（Ｐ＜０．０００１）
和飞节病变（Ｐ＜０．０００１）。其胫骨也较长（Ｐ＜０．０００１），对称性
较小（Ｐ＜０．０５）。与对照组相比，复杂障碍组的肉鸡胫骨长度
较对称（Ｐ＜０．０５）。尽管与对照组相比，简单障碍组能降低脚
垫病变的程度，但对飞节病变无影响（Ｐ＿０．０８９）。简单障碍
组肉鸡更容易接受强直不动性诱导作用（Ｐ＜０．０５）。末体重，
饲料转换率及死亡率既不受放养密度的影响，也不受障碍物
的影响。总之，本研究显示了高密度饲养对肉鸡脚垫健康和
腿部上下摇动的的负面影响。
关键词：肉鸡；福利；栖息屏障；富集物；脚垫皮炎
Ｐｏｕｌｔ Ｓｃｉ
２０ｌ０．８９：１ ５７４－１ ５８３．
山羊催乳素受体基因型对乳中
脂肪酸组成的多效性作用
Ｚｉｄｉ Ａ，Ｓｅｒｒａｄｉｌｌａ Ｊ Ｍ，Ｊｏｒｄａｎａ Ｊ，Ｃａｒｒｉｚｏｓａ Ｊ，
Ｕｒｒｕｔｉａ Ｂ．Ｐｏｌｖｉｌｌｏ Ｏ Ｇｏｎｚｄｌｅｚ－Ｒｅｄｏｎｄｏ Ｐ
Ｇａｌｌａｒｄｏ Ｄ，Ａｍｉｌｌｓ Ｍ，Ｆｅｒｎｄｎｄｅｚ—Ｃａｂａｎｄｓ Ｖ Ｍ
摘要：哺乳期的乳腺，催乳素（ＰＲＬ）￣４激乳糖合成以
及脂肪酸摄取、脂肪生成和甘油三酯的合成。牛催乳素受
211088013_猪圆环病毒-支原体二联疫苗（诗圆静）免疫攻毒试验
532023年40卷第3期 SWINE INDUSTRY SCIENCE 猪业科学主题策划FEATURE猪圆环病毒2型（PCV2）和猪肺炎支原体（M.hyo）是世界范围内影响猪群健康和给牧场带来严重经济损失的两种主要病原。PCV2是猪圆环病毒相关疾病（PCVD）的主要病原，感染可导致明显的临床症状如种猪繁殖障碍以及生长育肥猪生长迟缓、日增重降低、料重比升高，并发其他疾病，导致死亡率增加；也可能不表现症状，呈亚临床感染状态，导致猪群生长速度变慢，严重影响经济效益。M.hyo是猪慢性呼吸道疾病的主要病原，混合感染地方流行性的病毒或细菌又称地方流行性肺炎（EP）。单纯M.hyo感染虽然死亡率低，但发病率高，造成的呼吸道保护屏障破坏和免疫抑制加剧了多种病原的混合感染，损失巨大。其中以猪呼吸道疾病综合征（PRDC）广为人知。疫苗免疫是控制上述两种疾病最经济、高效的手段。其中一种病原的感染都会为另一种病原的继发感染创造条件，生产实践中呼吸道疾病的发生通常伴随两种病原甚至更多种病原的混合感染。鉴于两种病原的疫苗免疫时间接近、具有互助增效的作用，PCV2-M.hyo二联疫苗可以减少注射次数，降低生物猪圆环病毒-支原体二联疫苗（诗圆静）免疫攻毒试验牛中伟（法国诗华动物保健公司，北京 100102）
作者简介：牛中伟（1984—），男，硕士，国家执业兽医师，毕业于扬州大学预防兽医专业，现供职于法国诗华动物保健公司兽医服务部，E-mail：****************安全风险和免疫刺激，同时节省劳动力，为越来越多的猪场所采用。本试验为验证圆支二联疫苗的免疫效果，在严格的生物安全条件下对免疫的SPF猪只分别进行PCV2d和M.hyo强毒株的攻毒，通过跟踪PCV2肺组织病毒载量、血清病毒载量以及腹股沟、肠系膜和纵膈淋巴结的病毒载量评估圆支二联疫苗对流行毒株PCV2d的保护效力；并通过跟踪攻毒后免疫猪只的肺部病变严重程度评估圆支二联疫苗对M.hyo流行强毒的免疫保护。1 材料与方法1.1 试验动物及材料选择无猪蓝耳病毒（PRRSV）、PCV2、M.hyo、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）等特定病原体的3周龄健康、体重相近的SPF仔猪60头为试验动物，开展试验，由法国诗华匈牙利费拉西亚工厂提供。试验用疫苗为法国诗华猪圆环支原体二联疫苗（诗圆静®，2 mL/头份）；对照组为PBS空白对照。1.2 试验设计与分组将60头3周龄仔猪，随机分为4组，组1为3周龄免疫诗圆静®2 mL，5周龄PCV2d鼻腔攻毒仔猪10头；组2为3周龄免疫PBS液2 mL，5周龄PCV2d鼻腔攻毒对照仔猪10头；组3为3周龄免疫诗圆静®2 mL，6周龄M.hyo强毒攻毒组仔猪20头；组4为3周龄PBS液2 mL，6周龄M.hyo强毒攻毒对照仔猪20头。试验的具体分组情况见表1。1.3 评估指标1.3.1 观察、记录1）PCV2d攻毒后每周采血监测血清中PCV2d的病毒血症，并加以记录。汇总后计算AUC曲线下面积，评估对比试验组和对照组病毒载量差异。表1 试验分组及免疫程序分组疫苗免疫时间/周龄攻毒攻毒时间/周龄头数/头
PCV2病毒血症对猪的健康极为重要
一５０一 ⑨国 卜考扶学一薯考占禽●田
病誊皿症羽猪丑自ＩＢｍ赧为重蜃
潘志忠，白鸽译自｛Ｐｉｇ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ））Ｖｏ１．２６（２０１ ｆ）），Ｎｏ５：１０—１ １ 牛晶校
在猪圆环病毒２型（ＰｃＶ２）仔猪疫苗进入市场之前，利用定量ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）；６－＂￣对样ａｖｑ－￣ＰＣＶ２进行检测一直 受到质疑。因为ＰＣＶ２在明显健康和感染动物中都可检测到。这些ＰＣＶ２检测样本的检测结果实际能说明了什么呢？ 中图分类号：￥８５５．３ 文献标识码：Ｃ 文章编号：１００１－０７６９（２０１１）０３—００５（）一３
在仔猪用ＰＣＶ２疫苗进入市场时，首先在加拿大，
人们很快认识到ＰＣＶ２病毒血症水平可以降低，这一下
降对猪的健康和生产性能会产生巨大的影响。同时还越
来越清楚的是各种疫苗在降低ＰＣＶ２病毒血症水平上
差异很大。因此，目前的争论主要集中在ＰＣＶ２病毒血
症水平的重要性上，因为在实际生产条件下病毒血症在 注射疫苗后仍然存在。
２０１０年６月，这一争论将在这些仔猪用疫苗的价
值最早被证实的国家——加拿大中继续进行，因为加拿
大渥太华是一年举办两次的国际猪病兽医协会代表大 本文将分别对这两个重要的领域进行讨论，最终结
论将集中于它们之间的相互关系之上。不管怎样，控制
仔猪ＰＣＶ２病毒血症是优化其生产ｌ生能的关键所在，这
一事实已变得更加清楚了。
１母源抗体的影响
目前商用ＰＣＶ２疫苗的说明书都包含了母源抗体
对疫苗功效影响的相关信息，并且每个厂商的说明书对
这一情况的说明均有所不同。然而，独立研究人员的研
究结果如何呢？
会的主办城市。新的研究和生产资料将在这次国际会议 Ｍａｒｉａ Ｆｏｒｔ博士等报道，在过去的两年里，由英特威
上呈现给猪兽医师们。 ／先灵葆雅动物保健公司生产并销售的ＰＣＶ２疫苗Ｐｏｒ－
提交给大会学术委员的大多数摘要，主要内容毫无 ｃｉｌｉｓ ＰＣＶ可诱发动物产生高水平的病毒中和抗体，并且
猪圆环病毒pvc简介
猪圆环病毒病是指以2-型圆环病毒（PCV）为主要病原、单独或继发或混合感染其他致病微生物的一系列疾病的总称，是迄今发现的一种最小的动物病毒。现已知的PCV有两个血清型，即PCV1和PCV2，PCV1为非致病性的病毒，PCV2为致病性的病毒，它是断奶子猪多系统衰竭综合征的主要病原，一般于断奶后2～3天或1周开始发病，急性发病猪群中，病死率可达10%，耐过猪后期发育明显受阻，可是使用疫苗进行免疫，多种抗生素类药物都可治疗。
Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome PMWS 多系统衰竭综合征
猪圆环病毒病又叫仔猪多系统衰竭综合症（PMWS），以体质下降、消瘦、腹泻、呼吸困难、免疫抑制以及多病原继发感染为主要特征的一类病毒性传染病。
病猪主要表现为被毛粗糙，皮肤苍白，发育迟缓，体重减轻，进行性消瘦，呼吸过速或呼吸困难，嗜睡，腹泻，可视黏膜黄疸，咳嗽以及中枢神经系统紊乱，常突然死亡，体表淋巴结，特别是腹股沟淋巴结肿大。
猪圆环病毒(PCV)属圆环病毒科圆环病毒属成员，本病毒是动物病毒中最小的一种病毒，其粒子直径为14～25纳米，呈二十面体对称，无囊膜，基因组为单股环状DNA病毒。
猪圆环病毒(PCV)分为2个型，即PCV-1和PCV-2。PCV-1对猪无致病性，但能产生血清抗体，在猪群中较普遍存在，用其接种2日龄与9月龄的猪均不出现任何临床症状；PCV-2对猪有致病性，可引起猪只发病，在临床上主要表现为断奶后仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)和猪皮炎与肾炎综合征(PDNS)。
本病一年四季均可发生，断奶后仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)主要危害断奶后2～3周的仔猪，但在实行早期隔离断奶的猪场，10～14日龄的断奶猪也有该病的发生，病毒可随粪便和鼻腔分泌物排出体外，经消化道传播，也可能经胎盘垂直传染仔猪，发病率和死亡率不定，呈地方性流行时，发病率和死亡率均较低，但急性爆发时，发病率可达50%，病死率达20%～30%。如与猪细小病毒或猪繁殖与呼吸综合征病毒、链球菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌等混合感染时，死亡率会更高；耐过猪发育不良，成年猪一般为隐性感染，不表现任何症状和病变。
猪圆环病毒病的防治技术
C:\iknow\docshare\data\cur_work\274058413.doc 8/5/2015 1 猪圆环病毒病的防治技术
张永雄 江西余干县畜牧兽医局
猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的猪的一种新的传染病,表现为严重的呼吸.消化系统疾病及繁殖障碍,同时导致猪群产生严重的免疫抑制，造成免疫失败。 各种年龄的猪均可感染，但仔猪感染后发病严重。胚胎期或生后早期感染的猪，往往在断奶后才可以发病，一般集中在5～18周龄，尤其在6～12周龄最为多见。怀孕母猪感染猪圆环病毒后，可经胎盘垂直传染给仔猪，并导致繁殖障碍。感染猪可自鼻液、粪便等废物中排除病毒，经消化道、呼吸道引起感染。
1 猪病症状 猪圆环病毒感染后潜伏期均较长，即使胚胎期或出生后早期感染，也多在断奶以后才陆续出现症状。PVC—2感染可以引起以下多种病症：
1.1 猪断奶后多系统衰竭综合症:通常发生于断奶仔猪，1997年首次报道，随后美洲、欧洲和亚洲各国相继报道了该病。现已证实PVC—2是猪断奶后多系统衰竭综合症的重要病原，繁殖与呼吸综合症病毒、细小病毒、伪狂犬病病毒等病原混合感染和免疫刺激可以加重该病的危害程度。
患猪表现为精神欠佳、食欲不振、体温略偏高、肌肉衰弱无力、下痢、呼吸困难、眼睑水肿、黄疸、贫血、消瘦、生长发育不良，与同龄猪体重相差甚大，皮肤湿疹，全身性的淋巴结病变，尤其以腹股沟、肠系膜、支气管以及纵膈淋巴结肿胀明显，发病率为5%～30%，C:\iknow\docshare\data\cur_work\274058413.doc 8/5/2015 2 死亡率为5%～40%不等，康复猪成为僵猪。
1.2 皮炎和肾病综合症:通常发生于8～18周龄的猪。在1993年首次报道于英国，随后在美国、欧洲和南非、亚洲均有报道。发病率为0.15%～2%，有的时候可高达7%。以会阴部和四肢皮肤出现红紫色隆起的不规则斑块为主要症状。患猪表现为皮下水肿，食欲丧失，有时体温上升。通常在3日内死亡，有时可以维持2～3周。
猪圆环病毒2_型和3_型检测方法建立及初步应用
·研究论文·
摘 要：为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型（PCV2）和猪圆环病毒3型（PCV3）病毒。本文研究参考GenBank中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物，成功建立了一种双重TaqMan荧光定量检测方法。结果显示：该方法特异性好，可鉴别 PCV2、PCV3与其他猪病病毒；PCV2最低检测下限为1.00×101 copies/µL，PCV3最低检测下限为1.00×100 copies/µL；重复性
高，批内、批间的变异系数分别为0.01%～0.02%和0.02%～0.05%；本研究采用建立的方法与商品试剂盒同步检测猪只样品440份，PCV2样品符合率为97.47%，PCV3样品符合率为96.85%；测序结果显示，PCV2均为2d亚型，PCV3均为3c亚型。结果表明，建立的双重TaqMan荧光定量检测方法具有良好的特异性、敏感性且快速、准确，节约成本，可为PCV2和PCV3的监测与防控提供技术支撑。关键词：PCV2；PCV3；双重TaqMan qPCR方法建立；混合感染中图分类号：S852.651 文献标志码：A 文章编号：1674-6422（2024）02-0151-09
Establishment and preliminary application of detection methods for
PCV2 and PCV3
LI Tong, ZHAO Runze, LI Botian, LI Chunqi, WANG Yan, GUO Liwei, YANG Xiaolin, LIU Gouping
(Yangtze University, Jingzhou 434000, China)
收稿日期：2023-10-16基金项目：荆州市2022年度自然科学研究专项（202254-07CC）；石首市先行县“先进技术集成示范基地建设与定向攻关”揭榜项目（SS202311）；生猪健康养殖省部共建协同创新中心创新平台项目（2019H2209）作者简介：李桐，女，硕士研究生，预防兽医学专业通信作者：
猪2型圆环病毒及其危害
猪2型圆环病毒及其危害
琚春梅，陈焕春，吴斌，何启盖，曹胜波
圆环病毒是近年来兽医界广泛关注的新发现畜禽类病毒之一，具有重要的经济意义。在2000年悉尼国际猪病会议（IPVS）和1999年北京国际禽病会议（ICEVP）上均成为受到重视的热门话题。圆环病毒除引起畜禽机体发生原发感染甚至死亡之外，更重要的是使感染畜禽的免疫功能受到损害，结果导致机体抵抗力下降，易遭受其它病原的并发或继发感染，使病情加重，造成更大损失。这种可导致免疫抑制的病毒，由于常以亚临床感染的形式出现，常易为我们所忽视，因此更应给予特别的关注。
猪圆环病毒（Porcine Circovirus, PCV）是由Tischer等于1974年在PK-15细胞（ATCC CCL31）中发现，当时认为它是一种细胞污染物，后被证实为一种新的病毒。该病毒基因组为一环状、闭合单链DNA，病毒粒子无囊膜，呈二十面体对称[1]。1995年国际病毒分类委员会（ICTV）第6次病毒分类报告，将该病毒与鸡传染性贫血病毒（CAV）及鹦鹉喙羽病病毒（BFDV）定名为圆环病毒科（Circoviridae），最近，与BFDV DNA序列相似的鸽圆环病毒（PicV）亦被列入该病毒科作为一个暂定成员。目前认为PCV有两种血清型：PCV1和PCV2，其中PCV1是PK-15细胞（ATCC CCL31）的一种污染物，它不引起可见的CPE，感染猪也不出现临床症状。相反，PCV2与猪的多种疾病综合征有关，特别是断奶仔猪多系统衰竭综合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS）[2]。
1．PCV理化特性
PCV病毒粒子无囊膜、呈二十面体对称，大小17nm，PCV1在Cscl中的浮密度为1.37g/cm3(Tischer)或1.33-1.34g/ml(Allan et al),沉降系数57s。PCV1不能凝集动物红细胞 ，对酸（pH3）、氯仿有抵抗力。56℃或70℃不能将其灭活，并且一般的清洁剂和消毒剂对其无效[3]。
商品化猪圆环病毒2型疫苗：效果和临床应用
商品化猪圆环病毒2型疫苗：效果和临床应用
猪圆环病毒2型（Porcine Circovirus Type 2，PCV2）是一种对猪产生严重危害的病毒，对猪的健康和养殖业产生了极大的影响。PCV2感染可引发多种疾病，包括猪圆环病毒病（PCVD）、多系统性萎缩症（PMWS）、呼吸系统疾病、生殖系统疾病等，导致猪只生长缓慢，生产力下降，严重时可致死亡。猪圆环病毒2型疫苗的研发和应用对于控制和预防PCV2感染具有极其重要的意义。本文将对猪圆环病毒2型疫苗的效果和临床应用进行介绍。
一、疫苗的效果
1. 预防PCV2感染
猪圆环病毒2型疫苗能够有效预防PCV2感染，降低感染率和死亡率。疫苗通过激活宿主的免疫系统，增强抗体水平，提高机体对PCV2的免疫力，从而有效预防PCV2感染和相关疾病的发生。
2. 控制PCV2病毒传播
疫苗的使用能够有效控制PCV2病毒的传播，减少感染猪只之间的接触和传播，并且减少环境中病毒的存在，从而有效控制PCV2的传播。
3. 提高猪只的生产性能
研究表明，使用猪圆环病毒2型疫苗可以提高猪只的生产性能，包括生长速度、饲料转化率和繁殖性能等，减少因PCV2感染带来的经济损失。
4. 降低疾病的发生和死亡率
经过疫苗免疫的猪只能够在PCV2感染的环境中更好地生存和生长，降低PCV2相关疾病的发生率和死亡率，提高养殖效益。
二、疫苗的临床应用
猪圆环病毒2型疫苗已经在养殖业得到了广泛的应用，成为预防和控制PCV2感染的重要手段。
1. 饲料添加剂
猪圆环病毒2型疫苗可以作为饲料添加剂，混合在猪只的日常饲料中，通过口服途径为猪只接种免疫疫苗，方便、安全、易于推广。
2. 注射疫苗 猪圆环病毒2型疫苗也可以通过注射方式进行接种，一般通过肌肉注射或皮下注射，能够迅速激活宿主的免疫系统，提高机体对PCV2的抵抗力，保护猪只免受PCV2感染。
211088012_猪圆环支原体二联疫苗临床免疫效果的评估
50猪业科学 SWINE INDUSTRY SCIENCE 2023年40卷第3期主题策划FEATURE猪圆环病毒2型（Porcine Circovirus Type 2，PCV2）感染可导致种猪繁殖障碍以及生长育肥猪生长缓慢、日增重降低、料重比升高，并发其他疾病，导致死亡率增加等。猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae，M.hyo）遍布世界上绝大部分养猪国家，是猪呼吸道综合征（PRDC）的原发性病原之一，可造成养猪生产严重的经济损失。疫苗免疫是控制这两种疾病的最重要手段，PCV2与M.hyo两种疫苗免疫时间接近，免疫持续期要求类似（越长久越好）。圆支二联疫苗可以减少注射次数，节省劳力，降低猪的应激，有利于生物安全管理。本试验对猪圆环支原体二联疫苗免疫的猪群进行跟踪，综合生产数据、实验室检测以及屠宰场评分等评估其安全性和有效性。1 材料与方法1.1 试验动物及材料选择猪蓝耳病和猪伪狂犬病均为阴性的规模猪场中3周龄健康、体重相近的断奶仔猪240头为试验动物开展试验。试验用疫苗：A厂家圆环灭活疫苗，法国诗华猪圆环支原体二联疫苗（诗圆静®，2 mL/ 头份）。猪圆环支原体二联疫苗临床免疫效果的评估吴丽艳 1，全雪容 1，张冰洁 1，申世川 2，赵永旭 3，戴江河 2，齐小东 2，秦 云 2，张 军 2（1.佳和农牧股份有限公司，湖南 长沙 410016；2.法国诗华动物保健公司，北京 100102；3.诗华SSIU，浙江 杭州 310018）联合防控
作者简介：吴丽艳（1981—），女，佳和农牧股份有限公司，中级兽医师，硕士，主要从事养猪生产模式优化和生产操作以及丹系母猪饲养管理研究，E-mail：***************1.2 试验设计与分组将240头断奶仔猪，随机分为2个组，每组120头。对照组在3周龄肌注A疫苗1头份；试验组在3周龄肌注2 mL诗圆静®（圆支二联疫苗）。除此之外，其他的疫苗免疫程序及生产管理均按本场现有的程序进行。试验的具体分组情况见表1。1.3 评估指标1.3.1 观察、记录1）肛温测量：每组随机选择10头仔猪，在免疫当天、第2天和第3天连续进行肛温测量。2）记录初始日龄、终末日龄，称量每组猪只（10头/栏）的初始体重和终末体重，计算日增重。3）饲养过程中出现发烧猪只肌注氨基比林+鱼腥草治疗并记录，记录试验期间死亡猪只头数，计算死亡率。1.3.2 实验室检测1）抗体检测：试验猪只在免疫当天、免疫后4周、免疫后16周分别进行采血，每组随机选取10头猪只采血检测。检测PCV2与肺炎支原体抗体水平，分别采用Ingezim CIRCO IgG 11.PCV.K.1和ID.vet Mycoplasma hyopneumoniae Indirect ELISA试剂盒。2）病毒载量检测：免疫当天每组随机选取10头猪只进行采血，采用LSI生产的q PCR试剂盒定量检测PCV2 病毒载量，样品进行5混1检测，评估试验猪群PCV2早期感染压力。1.3.3 屠宰场肺部病变评分猪只饲养至出栏后，由诗华公司人员到屠宰场对猪只肺部照片进行拍照、评分并存档，评估猪头数为每组50头猪只，共100头。评分方式是按照诗华肺计划程序（Ceva Lung Program，CLP）对每头猪的左右肺的尖叶、心叶、膈叶，有无疤痕、肺炎、脓肿及胸膜炎等部位进行评分，记录（如图1，图2）。1.3.4 记录与数据处理记录各项指标数据，试验结束时使用SPSS 23.0进行分析，数据采用“平均数±标准差”标识。表1 试验分组及免疫程序分组疫苗免疫时间免疫方式剂量头数/头试验周期对照组A疫苗3周龄肌注按说明书120断奶-出栏试验组诗圆静®3周龄肌注2 mL/头份120断奶-出栏Copyright©博看网. All Rights Reserved. 512023年40卷第3期 SWINE INDUSTRY SCIENCE 猪业科学主题策划FEATURE2 结果2.1 肛温测量由表2可得，在免疫当天，试验组与对照组疫苗免疫后猪只体温差异不显著，在免疫第2天时试验组猪只体温高于对照组（P＜0.05），在免疫第3天试验组与对照组疫苗体温差异不显著。免疫猪群无明显应激反应。2.2 生产指标2.2.1 PCV2病毒载量及抗体检测从表3可得，对照组的成活率为95.83%，试验组的成活率为96.67%。相对于对照组，两组猪群成活率均较高，试验组的猪群成活率更高。从表4 可得，两组试验猪群初始重一致，对照组的日增重为600.60 g，试验组的日增重为607.82 g。试验组的日增重比对照组高7.22 g，差异不显著。2.3 实验室检测从表5 可得，试验猪群免疫当天PCV2核酸检测均为阴性，不存在早期感染，避免了因早期感染干扰试验结果。从图3、图4可得，试验组和对照组的PCV2 母源抗体S/P 值，超过90%样品小于0.9，说明此时免疫无PCV2母源抗体干扰。从表6可得，免疫后4周，试验组PCV2抗体阳性率100%，平均抗体滴度值605.5，离散度58.61%；对照组PCV2 抗体阳性率70%，平均抗体滴度191.2，离散度54.62%，试验组抗体阳性率和抗体滴度均高于对照组。说明免疫应答较好，试验组免疫效果优势更为明显。在免疫后16周，试验组抗体的阳性率和抗体滴度亦均高于对照组。图1 肺部病变评分图2 肺炎支原体感染的肺脏图3 采血送样检测 图4 免疫当天（3周龄）PCV2抗体检测结果表2 对照组和试验组的直肠温度组别免疫当天免疫第2天免疫第3天对照组/℃39.50±0.2639.48±0.3839.52±0.31试验组/℃39.64±0.3439.82±0.3139.70±0.19P值0.320.040.14表4 对照组和试验组的增重情况组别初始重/kg平均日增重/g对照组7.17±1.03600.60±23.31试验组6.95±0.50607.82±16.87P值0.410.55表3 对照组和试验组的死亡情况组别死亡头数/头成活率/（%）对照组595.83试验组496.67注：P＜0.05表示差异显著， P＜0.01表示差异极显著，P＞0.05表示差异不显著。下表同。表5 免疫当天（3周龄）对照组和试验组的PCV2核酸检测组别Ct值定量（拷贝/mL）结果判断PCV2通道内参通道试验组-1＞4036.80 N/A阴性有效试验组-2＞4035.47 N/A阴性有效对照组-1＞4035.27 N/A阴性有效对照组-2＞4034.66 N/A阴性有效 本刊与法国诗华动物保健公司联合策划