阪崎克罗诺杆菌耐热性和耐酸碱性的研究
克罗诺杆菌———婴儿配方乳粉中的A类致病菌
相关文献：[1]郑国方, 武荣, 张文杰, 等. 浅绿气球菌致新生儿呼吸机相 关肺炎二例[J]. 2011.
[2]周秀珍, 孙继梅. 浅绿气球菌致新生儿败血症一例[J]. 小 儿急救医学, 2001, 8(4): 200-201.
采集点：我们在前处理的加料间大厅、振动筛处的见粉处、干燥塔底 部（试镜）4楼地面、3楼地面、干燥塔底部、25kg下粉口、鞋、落地粉、 接粉台、传输带、罐装卷帘、鞋套、盒装人员手等地点的空气中分离到了 该菌。
对婴儿配方粉工厂不同季
诺杆菌对找不同到物结理果因数素：的1耐025，2014年8月节份的的空结气果环是境8、57表；面涂抹、
受性。
原辅料中的微生物进行生物
结被合引实际用，频不次同总S计T型：克1罗5232，2014年8月多份样性的的结研果究是。13671。
诺杆菌对不同消毒剂的耐受
蜡样芽胞杆菌的多位点序列
1 克罗诺杆菌遗传多样性的研究
质粒的分型
2 克罗诺杆菌环境耐受性的研究
天然提取产物耐受性
The inactivation of the Cronobcter sakazakii isolated from powdered infant formula by acidified tea polyphenols
2 克罗诺杆菌环境耐受性的研究
Recovery of C. sakazakii strains treated with acidified TP by HCl in PIF for 7h and unacidified TP in NS for 1h after incubation for 6h and 12h at 37℃ in LB broth and PIF.
阪崎克罗诺杆菌单克隆抗体的制备及特性分析
阪崎克罗诺杆菌单克隆抗体的制备及特性分析
张传印;蒋蔚;刘鹏选;王权;叶方钰;谢雨芮;韩先干;陈伟
【期刊名称】《塔里木大学学报》
【年(卷),期】2022(34)4
【摘要】本研究以灭活阪崎克罗诺杆菌(CS)为免疫原免疫BALB/c小鼠,5次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合。
利用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,制备抗CS特异性单克隆抗体。
对单克隆抗体进行效价及特异性测定,确定其抗体亚型及单克隆抗体之间的抗原竞争性。
结果表明:经4次亚克隆后得到2株稳定产生抗体的细胞株,分别命名为9D10、2H2,9D10抗体和2H2抗体效价较高,分别为2×10^(6)、6×10^(6);9D10抗体和2H2抗体与单增李斯特菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌等均不发生交叉反应,特异性良好;2株抗体重链均为IgG2a,轻链均为Kappa;2株抗体之间无抗原竞争性。
抗CS单克隆抗体的制备可为其快速检测方法的建立提供基础。
【总页数】8页(P11-18)
【作者】张传印;蒋蔚;刘鹏选;王权;叶方钰;谢雨芮;韩先干;陈伟
【作者单位】塔里木大学动物科学与技术学院;中国农业科学院上海兽医研究所【正文语种】中文
【中图分类】Q939.91
【相关文献】
1.阪崎克罗诺杆菌单克隆抗体的制备及其间接竞争-ELISA检测方法
2.三种方法检测奶粉中克罗诺杆菌(原阪崎肠杆菌)的比较分析
3.陕西市售婴幼儿食品中阪崎克罗诺杆菌流行状况及相关特性研究
4.婴幼儿奶粉中阪崎克罗诺杆菌隐性污染状况分析及针对性检测技术研究进展
5.食品中克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检测能力验证结果与分析
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克罗诺杆菌免疫学和分子生物学检测方法研究
克罗诺杆菌免疫学和分子生物学检测方法研究克罗诺杆菌是一种肠杆菌科的食源性致病菌,其感染能够导致脑膜炎,小肠结肠炎和败血症,致死率为50%-80%,侥幸存活者依然会遭受终生的神经系统后遗症。
克罗诺杆菌主要感染人群为各个年龄阶段的免疫力低下人群,尤其以低体重,出生不足月的新生儿为甚。
目前通过流行病学的研究,已经将新生儿感染与被污染的婴幼儿配方奶粉联系起来。
因此2004年FAO/WHO在日内瓦的一次会议中将克罗诺杆菌和沙门氏菌列为婴幼儿配方奶粉中存在的两种A类致病菌。
目前我国对于克罗诺杆菌的检测主要依赖于常规的生理生化检测方法,该方法步骤繁琐,耗费时间长,至少需要5天才能获得结果。
此外,这种检测方法主要是对克罗诺杆菌属的检测,而本属的菌株在自然界中的分布,致病性和毒力均存在着差异,阪崎克罗诺杆菌是分离出来的菌株中数量最多的,约占本属的2/3,并且阪崎克罗诺杆菌C. sakazakii ST4在欧洲大陆的爆发案例中扮演了重要角色。
因此有必要发展快速准确的克罗诺杆菌乃至阪崎克罗诺杆菌检测方法。
本论文中,主要从以下几个部分对克罗诺杆菌的快速检测方法进行了研究:(1)抗克罗诺杆菌单链抗体scFvH81的构建及表达提取实验室保存的杂交瘤细胞RNA,并反转录为cDNA,使用通用引物组扩增,并选择符合大小的序列测序。
通过IMGT/V-QUEST对这些序列进行分析,最终选择了符合开放阅读框的H81和L11序列作为构建单链抗体的重链和轻链基因。
通过SOE-PCR的方法将H81, L11和一个柔性Linker连接起来构建为单链抗体,并命名为scFvH81。
使用包涵体变性复性的方法制备单链抗体,其步骤简单,过程极短,仅仅需要5天即可制备出大量的单链抗体。
制备的单链抗体具有较好的特异性,其亲和力常数为2.39±0.06 × 106M-1。
(2)抗克罗诺杆菌单链抗体scFvH81生物信息学分析通过IMGT/V-QUEST分析序列,分析单链抗体scFvH81,分析其V(D)J重排机制,及其胚性基因来源,划分出单链抗体scFvH81可变区和骨架区。
婴幼儿乳粉加工环境中克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）监控方案的构建
食安管理婴幼儿乳粉加工环境中克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）监控方案的构建陶文靖1，赵婷婷2，许冉冉2，张君超1，吴 萍2，董 彬3*（1.北京美正生物科技有限公司，北京 102200；2.光明乳业股份有限公司华东中心工厂，上海 201111；3.北京光明健能乳业有限公司，北京 101300）摘 要：克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）作为婴幼儿配方乳粉中的A类致病菌备受关注。
该菌耐干燥，可长期存在于婴儿奶粉生产环境中。
婴儿配方奶粉加工、运输及销售等环节都有可能污染克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌），因此控制婴幼乳粉加工环境中克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）的污染尤为重要。
本文结合标准法规要求和婴幼儿配方乳粉企业环境监测的经验，构建出加工过程环境中克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）监控基础方案，包括区域划分、采样方案、检测方法、预防措施和纠正措施等，可帮助企业科学有效地控制克罗诺杆菌属的污染风险。
关键词：克罗诺杆菌属；婴幼儿奶粉；加工环境Construction of Monitoring Program for Cronobacter(Enterobacter sakazakii) in Infant Formula ProcessingEnvironmentTAO Wenjing1, ZHAO Tingting2, XU Ranran2, ZHANG Junchao1, WU Ping2, DONG Bin3*(1.Beijing Meizheng Bio-Tech Co., Ltd., Beijing 102200, China; 2.Bright Dairy Co., Ltd., East China Center Factory,Shanghai 201111, China; 3.Beijing Guangming Jianneng Dairy Co., Ltd., Beijing 101300, China) Abstract:Cronobacter (Enterobacter sakazakii) has attracted much attention as a group A pathogenic bacteria in infant formula milk powder. The bacterium is resistant to desiccation and can persist for a long time in the environment of infant milk powder production. Cronobacter (Enterobacter sakazakii) may be contaminated in the processing, transportation and sales of infant formula milk powder. Therefore, the contamination control of Cronobacter (Enterobacter sakazakii) in the processing environment of infant milk powder is particularly important. This paper combines the requirements of standards and regulations and the experience of environmental monitoring in infant formula milk powder enterprises to construct a basic monitoring plan for Cronobacter (Enterobacter sakazakii) in the processing environment, including area division, sampling plan, detection method, preventive measures and corrective measures, etc., can help enterprises to control the risk of Cronobacter more scientifically and effectively.Keywords:Cronobacter; infant formula; processing environment克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）（以下简称“克罗诺杆菌属”）是婴幼儿乳粉中备受关注的食源性致病菌之一，严重危害婴幼儿的健康。
阪崎肠杆菌检测标准
阪崎肠杆菌检测标准1. 引言阪崎肠杆菌〔Hafnia alvei〕是一种革兰氏阴性菌，属于肠杆菌科。
它在自然环境中广泛存在，也可以在人和动物的消化道内找到。
阪崎肠杆菌可以对人类和动物造成感染，引起各种疾病，如泌尿系统感染、呼吸道感染和胃肠道感染等。
为确保食品和饮用水的平安，阪崎肠杆菌的检测标准十分重要。
2. 检测方法2.1 阪崎肠杆菌的培养方法阪崎肠杆菌可以在一般细菌培养基上生长，常用的培养基包括MacConkey琼脂培养基和Eosin Methylene Blue〔EMB〕琼脂培养基。
培养时一般在37°C下孵育24-48小时。
2.2 阪崎肠杆菌的生化检测阪崎肠杆菌可以通过一系列的生化反响进行检测和鉴定。
常用的生化试验包括氧化/发酵葡萄糖试验〔O/F试验〕和酮糖酸盐〔Voges-Proskauer〕试验等。
2.3 阪崎肠杆菌的PCR检测PCR〔聚合酶链式反响〕是一种常用的分子生物学方法，可以快速、准确地检测阪崎肠杆菌。
通过特定的引物在PCR反响中扩增阪崎肠杆菌的DNA片段，然后通过凝胶电泳进行检测和鉴定。
3. 检测标准3.1 食品中阪崎肠杆菌的检测标准根据国家食品平安标准，食品中阪崎肠杆菌的检测标准如下： - 生肉制品：阪崎肠杆菌在每克样品中不得超过10 CFU； - 加工食品：阪崎肠杆菌在每克样品中不得超过100 CFU； - 饮用水：阪崎肠杆菌在每100毫升样品中不得检出。
3.2 环境中阪崎肠杆菌的检测标准根据环境保护标准，阪崎肠杆菌的检测标准如下： - 水质：阪崎肠杆菌在每升水样中不得超过100 CFU； - 空气：阪崎肠杆菌在每立方米空气中不得超过100 CFU； - 土壤：阪崎肠杆菌在每克土壤样品中不得超过1000 CFU。
4. 检测流程4.1 样品采集从食品、饮用水或环境样品中采集足够数量的样品。
使用无菌容器收集，并确保样品处于最正确的保存条件。
4.2 样品处理将采集的样品经过适当的处理，在无菌条件下进行前处理，如制备悬浮液或稀释样品。
食品克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验原始记录
食品克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）检验原始记录样品编号：检验开始时间：年月日样品名称：检验完成时间：年月日检测项目：克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）检测依据：GB 4789.40-2016 第一法 第二法一、克罗诺杆菌属定性检验无菌操作称（量）取样品100g或ml置于灭菌锥形中，加入900mL已预热至44℃的缓冲蛋白胨水，摇动充分溶解，36±1℃培养18±2h，移取1mL转种于10mLST-Vm肉汤，44±0.5℃培养24±2h。
轻轻混匀培养物，各取1环，分别划线于两个阪崎杆菌显色培养基平板，36±1℃培养24±2h。
挑取可疑菌落，划线于TSA平板，25±1℃培养48±4h。
观察，挑取可疑菌落进行生化鉴定。
二、克罗诺杆菌属平板计数法无菌操作称（量）取样品100g（ml）、10g（ml）、1g（ml）置于灭菌锥形中，加入900mL、90mL、9mL已预热至44℃的缓冲蛋白胨水，摇动充分溶解，36±1℃培养18±2h，移取1mL转种于10mLST-Vm肉汤，44±0.5℃培养24±2h。
轻轻混匀培养物，各取1环，分别划线于两个阪崎杆菌显色培养基平板，36±1℃培养24±2h。
挑取可疑菌落，划线于TSA平板，25±1℃培养48±4h。
挑取可疑菌落进行生化鉴定。
注：+生长或有可疑菌落；-未生长或无可疑菌落。
计算及结果：定性检验：得100g(mL) 计数法，查MPN检索表，得MPN/g,mL电子天平编号：使用状况试验前：试验后：培养箱编号：使用状况试验前：试验后：检测人：校核人：审核人：。
生活养生-阪崎肠杆菌
文章导读阪崎肠杆菌我们在平时应该了解的不是很多，它也是肠杆菌科里很常见的一种，肠杆菌科是很有很大危害的，有很大的几率会导致新生儿的脑膜炎，茵血症，小肠结肠炎，而且一旦患有这样的疾病死亡率都是很高的，高达50%甚至更高，大家在平时要能够及时的去预防着样的病菌。
阪崎肠杆菌是什么大家了解吗，它是目前最新生儿有很大危害的一种病菌了，一般的在有些不合格的奶粉里会有这样的病菌，特别是在最近几年，有很多的乳制品里都被检测出了阪崎肠杆菌。
阪崎肠杆菌(又称阪崎氏肠杆菌)是肠杆菌科的一种，1980年由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。
阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和茵血症，死亡率高达50%以上。
目前，微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源，但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。
阪崎肠杆菌是乳制品中近几年新发现的一种致病菌，阪崎肠杆茵的生物学性状及其对人群的健康危害受到人们的关注并被报告。
例如，味全配方奶粉2008年年10月份被检出含有致病菌阪崎肠杆菌。
菌落特征阪崎肠杆菌是奶粉(乳)制品中新发现的一种致病菌。
由其引发的婴儿、早产儿脑膜炎、败血症及坏死性结肠炎散发和暴发的病例已在全球相继出现。
多份研究报告表明婴儿配方奶粉是当前发现致婴儿、早产儿脑膜炎、败血症和坏死性结肠炎的主要感染渠道，在某些情况下，由阪崎肠杆菌引发疾病而导致的死亡率可达40%～80%。
阪崎肠杆菌已引起世界多国相关部门的重视。
喂养婴幼儿后剩余的调配食品应放置冰箱保存，并在食用前再加热。
中国应根据实际情况制定相应管理办法，加强对阪崎肠杆菌的检测技术及控制技术研究，进一步完善婴幼儿配方食品标准，以保证中国广大婴幼儿群体的健康与安全。
现在大家知道了阪崎肠杆菌在婴儿的奶粉里会很常见，因此我们对于婴儿平时喝放奶粉就应该特别的注意了，一般的婴儿喝奶粉的时候都会有剩余的，家长要放好，最好是放在冰箱里，如果下次食用的时候还要做加热，避免阪崎肠杆菌的出现。
阪崎肠杆菌
阪崎肠杆菌检验 GB 4789.40—2010
Donna吴
阪崎肠杆菌 样品介绍 操作流程第一法
操作流程第二法
阪 崎 肠 杆 菌
阪崎肠杆菌
阪崎肠杆 菌能引起 （又称阪崎 严重的新 氏肠杆菌） 生儿脑膜 是肠杆菌科 炎、小肠 的一种， 结肠炎和 1980年由黄 茵血症， 色阴沟肠杆 死亡率高 菌更名为阪 达50% 崎肠杆菌。 以上。
②分离
各取增菌培养物1 环，分 别划线接种于两个阪崎肠 杆菌显色培养基平板
挑取1 个～5 个可疑菌落，划 线接种于TSA 平板。 25 ℃±1 ℃培养48 h±4 h。
③鉴定
自TSA 平板上直接挑取黄色可疑菌落，进行生化鉴定。阪崎肠杆菌的主 要生化特征见表1。可选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统。
刚分离的阪崎肠杆菌在结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂上生长 形成两种不同的菌落：一种菌落呈干燥或粘液状，边缘不规 则，用接种环挑动，菌落具有明显的附着感并且有弹性；另 一种菌落则很光滑，很容易用接种环挑取，并发现该菌在肉 汤培养基中生长呈现团块或沉淀状，但目前还不清楚菌落特 征差别是否与毒性有关。
阪崎肠杆菌的生理生化特征
• ④结果与报告
• 综合菌落形态和生化特征，报告每100 g（mL）样品中检出 或未检出阪崎肠杆菌。
阪崎肠杆菌检验 GB/T 4789.40-2010
①样品的稀释
样品各三份
第二法 阪崎肠杆菌的计 数 ②分离 （同第一法） ③鉴定
100g
10g
1g
已预热到 44℃的蛋 白胨稀释 900ml 90ml 9ml 剂 置36 ℃±1 ℃培养18 h±2 h。
培养基和试剂
培养基和试剂
3、阪崎肠杆菌显色培养基DFI
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万方数据
万方数据
万方数据
阪崎克罗诺杆菌耐热性和耐酸碱性的研究
作者：柴云雷， 满朝新， 卢雁， 闫天文， 李然， 姜毓君， CHAI Yun-lei， MAN Chao-xin， LU Yan，YAN Tian-wen， LI Ran， JIANG Yu-jun
作者单位：柴云雷,闫天文,李然,CHAI Yun-lei,YAN Tian-wen,LI Ran(东北农业大学食品学院/乳品科学教育部重点实验室,哈尔滨,150030)， 满朝新,卢雁,MAN Chao-xin,LU Yan(东北农业大学/国家乳业工程技术研究中
心,哈尔滨,150028)， 姜毓君,JIANG Yu-jun(东北农业大学食品学院/乳品科学教育部重点实验室,哈尔
滨150030;东北农业大学/国家乳业工程技术研究中心,哈尔滨150028)
刊名：
中国食物与营养
英文刊名：Food and Nutrition in China
年，卷(期)：2014,20(5)
本文链接：/Periodical_zgswyyy201405008.aspx。