不同柱温模式毛细管柱气相色谱法测试VFA结果的比较
准确 量 取 乙酸 ３ ０Ｉ 、丙 酸 ４ ０ Ｌ和正 丁酸 ３ Ｌ ｘ ０
１０ Ｉ ６ Ｌ置 于 １０ｍＬ容 量 瓶 中 ，蒸 馏 水 定 容 至 刻 ｘ ０
度 ，即乙酸 浓度 为 ５ ．５ｍ Ｌ Ｌ （ ． ． 、丙 ７６ ｍｏ ・ ３ ６ｇ Ｌ ） ４ 酸浓 度 为 ５ ．３ｍ Ｌ Ｌ （ ． ・ 和 正丁 酸浓 度 ３ ｍｏ ・ ３９ ｇ Ｌ ） ６ ７
析 ，结 果见 图 １ ２ －。
不 同柱 温 模式 毛 细 管 柱 测试 ＶＦ Ａ效 果 比较
色 谱
＾
一
．
ｒ 丫一
／ Ｊ ＼ Ｌ ｎ
图 １ 程 序升 温 色 谱 图
八，
４４ 饲料博览 ２ １ 年第 ３ ０１ 期
∞ 们 如 如
加 ∞ ∞
０８ ．、０ ． 、０６ ． ０２ｍ ４和 ． Ｌ以 及 蒸 馏 水 ０ ．、０４ 、０２ ．、
０ ． ０ Ｌ，即配 制 成 ５ 不 同梯 度 的 Ｖ Ａ 准 ６和 ． ｍ ８ 个 Ｆ标
将 ５ ＶＦ 个 Ａ梯 度标 准 品 按 照样 品的方 法 处 理 ， 用 微量 进 样 器 取上 清 液 １ 注 入进 样 口，分别 采 ｍＬ
４ ０ｍＬ・ ｎ ，尾 吹 流 量 ４ ５ ｍｉ一 ５ｍＬ・ ｉ～ ａ ｒ ｎ ；进 样 口参
纯 氮 ９ ． ９ 、低温 高速 离心 机 、０ ２ｍ ９ ９ ％） ９ ． ｍ水 系滤 ２
膜 、１ Ｌ 量进 样器 。 ０ｍ 微
１３ 试 验 方 法 ． ，
１ ． 标 准品 制备 ．１ ３
｝ ｝ ＊ ： ｝ ｝ ｝ ：： ｝ ｝： ｝ ｝ ｝ ： ｝ ｝ ： ： ｝ ｝ ｝｝｝÷ ： ， 一 ｝ ｝ ｝ ：
饲 粮 中 添加 菊粉 对 仔 猪 肠 道 菌群 的 改 变
Ｊｎ ｉｅ ， ｏ ， ｏｓ Ｄ ｎ ｉ ＤＭ， ｉ ＧＬ ａ ｎｎ Ｐ Ｋ ｊＹ Ｒ ｓ Ｍ Ｗ， ｅ ｎｓ Ｘ ｎ Ｋ ｉ
２ １ 年第３ 饲料博览 ４５ ０１ 期
准 偏 差 是 不 同 的 ， 当试 样 浓 度 为 ００ ％～ ．％时 ， ． ５ ０５
‘ ＊÷ ： ： ： ：： ｝ ： ｝ ： ＂ ｝： ：： ： ｝｝ ＊｝ ｝＊ ：： ｝
［ ４］ 李浩春 ， 卢佩 章． 气相 色谱法【 ． Ｍ】北京 ： 学出版社，９ ８ 科 １９ ．
色谱
ｆ ’ ／
１０ ｜ ３０ ． ３５ ．
。
４０
ｆ ／ Ｉ ７ ． Ｉ Ａ
ｊ ｜ ｌ
图 ２ 恒 温 模 式 色 谱
由 图 １ 图 ２ 见 ，程 序 升 温模 式 测 试 一 个样 和 可 品需 要 ８ ９ｍｉ；而 恒 温模 式 下 乙酸 、丙 酸 和 丁酸 － ｎ
摘 要 ：此 前 我 们 发 现 ， 日粮 中 添 加 短 链 菊粉 （ ９ ） 长 链 菊 粉 （ ） ５ ：Ｏ的 混 合 菊粉 （ 同 １ 改 善 了机 体 内铁 的 状 Ｐ５ 、 ＨＰ 、 ０ ５ 协 ） 态 ，并且 改 变 了仔猪 体 内铁 稳 态 的表 达 和 体 内的 炎症 。然 而 ，３ 类 型 的 菊粉 对 肠道 菌群 的影 响还 未 可知 。 应 用 末 端 限制 性 片 种 段 长度 进 行 多 态 分 析 ，对 缺 铁 基 础 日粮 组 （ Ｄ） Ｂ 、添 加 ４ ％的 短 链 菊粉 组 （ ９ ） ５ ：０ 混 合 菊 粉 组 （ 同 １ 、 长 链 菊 粉 组 Ｐ５ 、 ０５ 的 协 ） （ ） ＨＰ ，猪 的 ６ 小肠 和 大肠 进 行 测 定 ，与 Ｂ 段 Ｄ组 相 比 ，３ 类 型 的 菊粉 增加 了双 歧 杆 菌和 乳 酸 菌的 有 益 微 生 物 菌 群 附 着在 猪 的 种
允许的标准偏差＜Ｏ ５ ％即 可 １ 因此 ，两 种 条 件 的 。 测定 结果 都是 准 确 的。
３ 结 论
色谱 峰 的保 留时 间为 ３４４ ． ７ ５９ ２ｍｎ ．１ 、４４ 和 ． ｉ，恒 ３ ７ 温模 式 测试单 个 样 品仅 需 ６ ６ ｉ。除上 述 ３ 时 － ．ｒ ｎ ‘ ５ａ 个
离 心 １ ｎ ５ｍｉ，再 取 上 清 液 １ ｍＬ于 １ ． ｍＬ的离 心 管 ５
中 ，加入 ２ ％偏磷 酸溶 液 ０２ｍＬ ５ ． ，用 涡旋振 荡器 混 合 均匀 ，１ ０ ｍ离心 １ ｉ，上清液用 ０２ ｍ ００ ０ｒ ｐ ５ｍ ｎ ．２ｍ
附表
将 标 准品分 别按 照恒温 和程序 升温模 式进 样分
液 ，用 于制 作标 准曲线 。
１３２ 样 品 处 理 ．．
用两种 色谱 条件 进行分 析 ，记 录峰 面积 ，以峰面积 （ 和标 品的浓度 （ 制作 标准 曲线 ，见 附表 。 Ｙ） ｘ）
２ ． 定性分析 ２
羊瘤 胃液 经 纱布 过 滤 ，取 ５ｍＬ 液 ３５ ０ｒｍ 滤 ０ ｐ
参 数 为温 度 ２０ ，载气 高 纯 氮气 ，分 流 比４ ： ， ３ ０ Ｉ
进样 量 １ 。 ｍＬ
２ 结果 与讨论 ２１ 标 准 曲线 的制备 ．
为 ｌ．５ｍ ｏ ・ １ ３ｇ Ｌ ） ７ ｍ Ｌ Ｌ （． ・ 的混合 标 准溶 液 。在 ４ ５ ５ １ 离 心 管 中分 别 加 入 混 合 标 准 溶 液 １ 、 个 ． ｍＬ ５ ． ０
司 ，偏 磷酸 为分析 纯 。
１２ 试 验 仪 器 ．
．
水 系滤 膜 过 滤 ，滤 液用 微 量 进样 器 取 １ｘ Ｌ上机 分 Ｉ
析 ，得 到 Ｖ Ａ样 品 色谱 图 ，采 用 外标 法 计 算 样 品 Ｆ
中 Ｖ Ａ的含 量 。 Ｆ
１ ． 色谱 参数 ．３ ３
日本 岛 津 Ｇ 一０ ０ 相 色 谱 仪 ，Ａ ．Ｆ Ｐ毛 Ｃ ２ １气 ＴＦ Ａ
细 管 柱 （０ｍ￣ ． ｍ￣ ． ｍ ｌ ，氢 火焰 离 子 化检 ３ ０３ ｍ ０５ ｉ） ２ １ 测 器 （Ｉ ） Ｆ Ｄ ，并 配 有 空 气压 缩 机 、氢 气 和 氮 气 （ 高
柱 温 箱采 用程 序升 温 ：初始 温度 为 １０℃ ，以 １ １ ０℃ ・ ｎ ｍｉ 的速 度 升 至 １０ 持 续 ５ｒｉ。检 测 器 ５ ｎ ａ 参 数为 温度 ２ ０ｃ ３ ｃ，Ｈ 流量 ４ Ｌ ｒｉ～ ０ｍ ・ ｎ ，空气流 量 ａ
性 脂肪 酸 （ Ｆ ｌ． 尔滨 建 筑 大学 学 报 ， ０ ０ ３ （ ）３ 一３ ． Ｖ Ａ）Ｊ 哈 】 ２ ０ ， ３６ ： ３ ｌ
本 试 验所 得 两 种 温 度 模 式 测 试 Ｖ Ａ得 出 的 乙 Ｆ
酸 、丙 酸和 正 丁 酸 的相 对 偏 差 都 为 ０５％～ ． ％。 ． ８ ２４ ９ 李 浩 春等认 为 ，一般 不 同浓度 样 品色 谱定 量允 许标
明，饲粮 中添加 菊粉能够改变肠道菌群数 ，这可能是铁 的生物利用率提 高，促进健康的原 因。
关 键 词 ： 菌粉 ；仔 猪 ；肠 道 菌群
摘 译 自 Ｊｕｎｌ ｆ ｕ ｉｏ ，０ ０ １０ １ ）２１８ ２１ １ ｏ ｒａ ｏ Ｎ ｔｔ ｎ ２ １， ４ （ ２ ： ５ — ６ ． ｒｉ
用 峰 面积 和浓度 做标 准 曲线 ，待 测样 品 的浓度 根据
所 测峰 面积 和标 准 曲线就 可计 算 出来 ，但 外标 法必 须 保证进 样 量 和色谱 条件 严格 固定 不 变 ，否则 容易
引起 误差 。
２４ 精 密度 ．
［ ］ 曹庆云， １ 周武艺， 贵钊， 气相色谱测定 羊瘤 胃液 中挥发性 朱 等． 脂肪 酸方法研 究Ⅲ． 中国饲料， ０ ６ ２ ）２ — ８ ２ ０ （４ ：６ ２ ． ［ ２】 丁学 智， 龙瑞军， 淡瑞芳， 瘤 胃发酵液挥发性 脂肪酸的气相 等． 色谱分析方法 ｌ１ Ｊ． 甘肃农业大学学报， ０ ６ ２ ： ４ ２ ． ２ ０ （ ）２ — ６ ［ ３】 刘艳玲， 任南琪， 刘敏， 气相色谱法分析厌氧反应器中的挥发 等．
但 程 序 升 温模 式 测 定 单 个 样 品 的 时 间 ８ ９ｒｎ － ｉ，而 ａ
恒 温 模 式 测 定 单 个 样 品 只 需 要 ６ ６５ｒｉ ，更 加 简 － ．ａ ｎ 便 快捷 。
【 参 考 文 献 】
外 标法 定 量分 析 的优点 是操 作 简单 。不像 内标 法那 样每 测一 个样 品都 需要 加入 内标 物 ，只需将标 准 品配 制成 不 同浓度 梯 度 ，上 机分 析 得 出峰 面积 ，
数 ：温 度 ２ ０℃，载 气高 纯氮 气 ，分流 比４ ： ，进 ０ ０１ 样 量 １ 。柱温 箱采 用恒 温模 式 ：柱 温 １ ０ｑ ｍＬ ５ Ｃ，检 测 器参数 为温 度 ２ ０℃，Ｈ： ４ 流量 ４ ・ ｉ ０ｍＬ ｍ ｎ ；空气
流量 ４ ０ｍ ・ ｉ～ ０ Ｌ ｒ ｎ ，尾 吹流量 ３ ・ ｉ～ ａ ０ｍＬ ｍ ｎ 。进 样 口
各段 肠道 的数 量。ＨＰ ５ ９ 组猪的空肠处发生 变化 ，末端回肠或 Ｈ 猪 的盲肠也 产生 了变化 。菊粉 对肠道 管腔 内的茵群 产生了影 Ｐ
响 ， 同 时 ，３ 类型 的 菊粉 抑 制 梭 状 芽孢 杆 菌 的 效 果不 理 想 ，并且 抑 制 了肠 道 各段 黏 膜 和 管 腔 内肠 杆 菌科 的数 量 。研 究 结果 表 种
间点 峰 面积为 所测 指标 外 ，其他 时问点 峰 面积均 为
试样 杂峰 。
２ ． 定 量 分 析 ３
色 谱 柱 的恒 温 和 程 序 升 温 模 式 在 测 试 瘤 胃液 ＶＦ Ａ结 果 时 均 能 很 好 的 分 离 出 瘤 胃液 中 的 乙 酸 、
丙 酸 和 丁酸 ，且 测 试 相 对 偏 差 均 为 ０５ ％～ ． ％， ． ８ ２４ ９
毛细管柱型号、分离能力、极性以及色谱柱的柱活性介绍
毛细管柱是我们平时做气相色谱分析必不可少的重要耗材，毛细管柱分离性能的好坏直接影响我们实验结果的合格率。
经常使用毛细管柱的实验小伙伴对于毛细管柱的型号应该都不陌生吧，例如一款色谱柱CD-5MS，30m*0.25mm*0.25um，从这些描述中我们可以获得色谱柱的固定相类型，长度，内径和膜厚。
今天小编给您分享毛细管柱的一些知识，希望对您的实验有所帮助。
01 我们常用的毛细管柱的型号有哪些呢？一般从色谱柱的极性由弱到强我们常用的色谱柱包括-1、-5、-35、-50、-624、-1701、-WAX，他们的固定相分别是100%甲基聚硅氧烷、5%苯基-95%甲基聚硅氧烷、35%苯基-65%甲基聚硅氧烷、50%苯基-50%甲基聚硅氧烷、6%氰丙基苯基-94%甲基聚硅氧烷、14%氰丙基苯基-86%甲基聚硅氧烷、聚乙二醇20M。
当然现在也有越来越多的专用柱被大家所熟知，例如脂肪酸甲酯专用柱广泛用来作为食品中脂肪酸的测试分析；血液中酒精检测专用柱用来作为人的血液酒精分析等。
另外还有-1MS、-5MS、-1HT、-5HT的色谱柱，这些后端有MS、HT 后缀的柱子，MS柱主要是流失更低适用于质谱分析，能够尽量降低离子源的污染，减少质谱维护工作、HT柱温度耐受更强，适用于检测例如棕榈酸等需要较高分离温度的化合物检测。
02 针对这么多的色谱柱种类，如何去判断和验证这些色谱柱的性质呢？那就需要了解色谱柱型性能评价的理论知识。
主要包括色谱柱的分离能力、极性以及色谱柱的柱活性。
一般从这三个方面入手就能对色谱柱有充分的了解了。
色谱柱的分离能力主要包括塔板数、总分离效能、分离数和涂渍效率。
塔板数大家都不陌生，是评价柱效的主要指标，有有效塔板数和理论塔板数之分。
总分离效能是指色谱柱在一定条件下对混合物的分离能力。
一般以分离度来判断。
分离数是指在相邻同系物峰之间可插入的组分峰的数目，也是指色谱柱的分离能力，是总分离效能的部分体现。
涂渍效率和生产工艺有关，是表征空柱柱效达到最理想化的程度，一般非极性柱可以到90%以上，极性柱只能在60%-70%左右。
毛细管柱选择与各种毛细管柱介绍
一、固定液使用固定相: AT SE-30,AT OV-1组成100%甲基聚硅氧烷极性非极性应用碳氢化合物同类型号DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1 使用温度50—300℃固定相: AT OV-101组成100%甲基聚硅氧烷（胶体）极性非极性应用氨基酸、基油同类型号HP-101、AC1 、SP-2100使用温度0—350℃固定相: AT SE-52AT SE-54组成5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷极性非极性应用多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇同类型号DB(HP)-5、AC5、SPB-5、DM-5、CPSiL8、Rtx-5 使用温度50—350℃固定相: AT OV-1701组成7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷极性非极性应用药物、醇、酯、硝基化合物同类型号DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701、CP-Sil 19CB 使用温度0—280℃固定相: AT XE-60组成25%氰乙基甲基聚硅氧烷极性中极性应用酯、硝基化合物同类型号DB (HP) -225、AC225使用温度0—280℃固定相: AT OV-17组成50%苯基甲基聚硅氧烷极性中极性应用药物、农药同类型号DB(HP)-17、AC10使用温度0—250℃固定相: AT FFAP组成聚乙二醇—TPA改性极性极性应用酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油同类型号DB (HP) –FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20使用温度50—250℃固定相: AT PEG-20M组成聚乙二醇—20M极性极性应用同类型号HP- Wax、DB-Wax、AC20使用温度50—200℃固定相: AT 农残Ⅰ号AT 农残Ⅱ号组成极性应用六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药同类型号SPB-608、HP-608使用温度25—300℃二、毛细管柱内径0.53mm 具有近似填充柱的负荷量，总柱效则远远超过填充柱。
气相色谱法测定苯系物毛细管色谱柱的选择
图 2 苯系物标样在 HP-INNOWAX 色谱柱分离后的谱图
吸气相色谱法来探讨毛细管色谱柱的选择。 1 实验部分 1.1 主要仪器和试剂
美国 Agilent7890B 气相色谱仪；自动进样器；非极性毛细管色谱柱 HP-5（30m×320μm×0.25μm）、极性毛细管色谱柱 HP-INNOWAX （30m×320μm×0.5μm）。
Lin Wenwei (Shishi Environmental Monitoring Station,Shishi Fujian 362700,China)
Abstract:This paper studied the selection of capillary column for determination of benzene series by gas chromatography. It compares non-polar or weakly polar capillary columns (such as HP-5) and polar capillary columns (such as HP-INNOWAX) to benzene. The separation effect of the compound. The two columns were linear and the results were good.
▲
97 HUANJINGYUFAZHAN
环境与发展
YINGYONGJISHU
保留时间 /min
苯 甲苯 乙苯 对二甲苯和 间二甲苯 邻二甲苯
2.542 3.752 5.560 5.741 6.292
苯 甲苯 乙苯 对二甲苯 间二甲苯 邻二甲苯
VFA测定步骤与方法
挥发性脂肪酸的测定一、GC（Gas chromatograph）工作条件仪器：GC-14B型气相色谱仪（日本岛津公司）毛细柱：NUKOLTM Capillary Column ( Supelco )；Column No.34292-07B30m×0.32mm×0.25μm film thickness气相色谱仪参数：色谱柱采用毛细吸管柱，柱温130℃，汽化温度180℃，采用氢离子火焰检测器，检测温度180℃，载气为氮气，压力为60 KPa，氢气压力为50 KPa，氧气压力50 KPa，灵敏度（档）为101，衰减 3.0二、样品制备1．试剂制备（1）配制25%w/v 的偏磷酸溶液，将25克偏磷酸溶在100mL双蒸水中（2）巴豆酸的配制，在100ml的偏磷酸溶液中加入0.6464g的巴豆酸，定容到100mL。
（3）标准样品，准确称取色谱标准级乙酸0.9100 g、丙酸0.3700 g、丁酸0.1765 g、异丁酸0.1765g、戊酸和异戊酸分别为0.1985g，分别溶于双蒸水中，再各自定容至100 mL。
2．样品制备(1) 发酵液取（或过滤瘤胃液）VFA测定1ml样品到离心管中，再加入0.2 ml的偏磷酸巴豆酸混合溶液，－20℃冰箱保存过夜，解冻后12000rpm离心10min，取上清液保存，测定前再12000rpm 离心10min(或少许通过0.22μm针式滤器，滤液直接进样用 1.0微升微量进样器瞬时注入色谱仪，进样量为0.2－1.0μL。
(2) 食糜及粪样VFA测定取1克置于离心管中，加入5－10倍的双蒸水，混合均匀。
取1mL上清夜，加偏磷酸巴豆酸0.2mL/mL。
其它步骤同上。
3．保留时间的确定与样品处理相同，在 1 ml标准样品中加入0.2mL偏磷酸与巴豆酸的混合样，上样测出乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸的保留时间。
4．有机酸浓度的计算通过标准样品和内标巴豆酸各自的（或浓度）和峰面积可以计算出乙酸、丙酸及丁酸等有机酸的相对校正因子，然后根据乙酸、丙酸及丁酸的重量（或浓度）与其峰面积成正比计算出各个样品中的乙酸、丙酸及丁酸浓度。
毛细管气相色谱分析法
主讲：郭方遒
2019/2/4 1
气相色谱是比较成熟的方法，气相色谱仪 使用极为普遍的仪器。1941年Martin和Synge 提出用气体代替液体作流动相的可能性，11年 之后James 和 Martin 发表了从理论到实践 比较完整的气液色谱方法Gas-Liquid Chromatography)，因而获得了1952年的诺贝 尔化学奖。在此基础上1957年高雷 (M.J.E .Golay) 开创了开管柱气相色谱法 (Open-Tubular Column Chromatography)。
2019/2/4 3
八十年代将固定液固定化。它大大提高了色谱 柱的稳定性, 延长了柱寿命, 并使液膜进一步增 厚, 提高了色谱性能 (如可在高温下使用)。 1983 年 惠普公司推出 大孔径毛细管柱，可直 接代替填充柱 20世纪90年代 Alltech 公司推出“集束毛细管 柱”，919只内径为40um的毛细管柱 20世纪90年代后期耐高温色谱柱、手性色谱柱
0.1~1 100~1500
0.8~2 50~300
10~106 <100 50~300 500~100 1000~4000 600~1200 0 0.5~2 0.1~2 0.2~2 低 高 高 低 中等分离一些硝基化合物的比较 （a）填充柱1.5m，涂QF-1，恒温； （b）毛细管柱，21m，涂OV-101
2019/2/4 31
目前100～300μm、口径大于
500μm的毛细管柱。目的是让色谱柱 能够与一些死体积大的检测器如TCD、 ECD、PID、Hall电导、MS与IR等匹配， 可以方便地采用柱上进样方法，还能 收集一些组分作进一步鉴定用，以代 替填充柱使用。
两种分析聚合级乙烯中烃类杂质的气相色谱方法对比
两种分析聚合级乙烯中烃类杂质的气相色谱方法对比刘建英两种分析聚合级乙烯中烃类杂质的气相色谱方法对比【摘要】通过对PLOT Al2O3“M”石英毛细管柱和填充柱分离方法的比较，采用优化的气相色谱条件，来分析聚合级乙烯中的烃类杂质。
结果表明用PLOT Al2O3“M”石英毛细管柱采用程序升温法分离，分流进样，用氢火焰离子化检测器检测，外标法定量，灵敏度高，对不同浓度的样品进行重复性测试的相对标准偏差为%，准确度及精密度均符合要求，并且操作简单，比原方法缩短了分析时间。
【关键词】气固色谱法氢火焰离子化检测器外标法聚合级乙烯1 前言随着信息时代的发展，我国的各行各业都在突飞猛进，化学工业更是飞速发展，齐鲁公司聚乙烯生产已突破60万吨/年，对于乙烯的质量要求更加严格。
乙烯作为塑料企业的主要生产原料，其质量直接影响到装置的稳定生产，其中痕量杂质，如乙炔对聚烯烃产品的线性度、重均分子量MW分布都会产生不利的影响。
全国实行ISO9002质量体系认证，为了达到这一质量要求，就必须对以前的分析方法进行更新，严格控制乙烯的纯度及烃类杂质，使我们生产的产品满足用户的质量要求。
过去分析聚合级乙烯中的烃类杂质采用两根填充柱（20%磷酸三丁酯柱，柱长9米；硅胶柱，柱长4米），两次进样分析来达到烷烃、烯烃、炔烃的分离。
以上方法存在操作繁琐，分离效果差，影响准确定量。
经过一系列分析对比采用PLOT Al2O3 “M”石英毛细管柱，分流进样系统后，进样量为1ml（原来为ml ），柱长比原来增大5~10倍，理论塔板数为26287块，完全符合Q/—2006《中国石化齐鲁股份有限公司塑料厂企业标准—聚合级乙烯》要求，烃类杂质能完全分离，检测限可达%, 分析速度快，准确度、精密度高。
2 设备和材料材料及试剂五组分混合标准气，组成见表1（大连气体开发公司生产）。
表1 标准样品及各组分浓度仪器惠普HP5890型气相色谱仪，氢火焰检测器，HP3396型数据处理机，六通阀进样，1ml定量管。
VFA测定步骤与方法-朱老师
挥发性脂肪酸的测定一、GC（Gas chromatograph）工作条件仪器： GC-14B型气相色谱仪（日本岛津公司）毛细柱：NUKOLTM Capillary Column ( Supelco )；Column No.34292-07B30m×0.32mm×0.25μm film thickness气相色谱仪参数：色谱柱采用毛细吸管柱，柱温130℃，汽化温度180℃，采用氢离子火焰检测器，检测温度180℃，载气为氮气，压力为60 KPa，氢气压力为50 KPa，氧气压力50 KPa，灵敏度（档）为101，衰减 3.0二、样品制备1．试剂制备（1）配制25%w/v 的偏磷酸溶液，将25克偏磷酸溶在100mL双蒸水中（2）巴豆酸的配制，在100ml的偏磷酸溶液中加入0.6464g的巴豆酸，定容到100mL。
（3）标准样品，准确称取色谱标准级乙酸0.9100 g、丙酸0.3700 g、丁酸0.1765 g、异丁酸0.1765g、戊酸和异戊酸分别为0.1985g，分别溶于双蒸水中，再各自定容至100 mL。
2．样品制备(1) 发酵液取（或过滤瘤胃液）VFA测定 1ml样品到离心管中，再加入0.2 ml的偏磷酸巴豆酸混合溶液，－20℃冰箱保存过夜，解冻后12000rpm离心10min，取上清液保存，测定前再12000rpm 离心10min(或少许通过0.22μm针式滤器，滤液直接进样用 1.0微升微量进样器瞬时注入色谱仪，进样量为0.2－1.0μL。
(2) 食糜及粪样VFA测定取1克置于离心管中，加入5－10倍的双蒸水，混合均匀。
取1mL上清夜，加偏磷酸巴豆酸0.2mL/mL。
其它步骤同上。
3．保留时间的确定与样品处理相同，在 1 ml标准样品中加入0.2mL偏磷酸与巴豆酸的混合样，上样测出乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸的保留时间。
4．有机酸浓度的计算通过标准样品和内标巴豆酸各自的（或浓度）和峰面积可以计算出乙酸、丙酸及丁酸等有机酸的相对校正因子，然后根据乙酸、丙酸及丁酸的重量（或浓度）与其峰面积成正比计算出各个样品中的乙酸、丙酸及丁酸浓度。
温度决定成败——浅谈气相色谱柱温对分离效果的影响
温度决定成败——浅谈气相色谱柱温对分离效果的影响色谱柱温度，不仅影响色谱过程的热力学因素，也影响传质过程的动力学因素。
柱温变化，不仅影响柱前端压力、载气流速等，更重要的是对物质的分离、分析结果带来影响。
一、气相色谱升温方式程序升温可分为线性程序升温和非线性程序升温，前者更普遍。
线性程序升温，即随时间线性变化的升温方式，可分为一阶线性程序升温和N阶线性程序升温。
对于每阶程序升温，都包含初温、程升速率、终温以及不同温度下的保持时间四个基本参数。
气相色谱恒温分析中，对化学性质相似的同类型的化合物，保留时间和沸点呈对数关系，随着保留时间增加，峰宽迅速增加，导致先流出峰相互叠加，后流出峰又因峰展宽，使检测灵敏度下降。
因此一般通过柱温程序升温来解决这个问题。
二、程序升温阶程确定那么，程序升温时，柱温N阶程序如何确定，是否N越大越好？程序升温时，在最佳分离条件下，保留时间与沸点近似成线性关系，即随着柱温的升高，峰底宽基本不变或增加很小。
程序升温中各组分均在最佳柱温下出峰，但并不是N越多越好。
气相色谱分析中，对于组分沸点范围窄、化学性质类似的样品，如同系物，可选用一阶升温；样品组分沸点范围宽、性质差异大的，应选择N阶程序升温。
N应根据化合物的多少、需要达到的分离效果、仪器的条件等各方面来选择。
三、基本分离参数优化每阶程序升温中，设置初温、程升速率和终温这三个基本参数优化分离条件，要从分离效果和分析速度两方面考虑。
对于初温，一般比样品中沸点最低的组分沸点要低，可参考低沸点组分恒温分析时的温度。
初温的选择，主要是依据低沸点组分，但要高于固定液的凝固温度。
升温速率的选择，在了解样品组分复杂程度的基础上，既要保证较小的保留时间，又要保证较大的分离度，一般在0-10℃/min之间。
终温的选择，主要根据固定相、样品组分的热稳定性和高沸点组分的沸点确定。
同样的样品组分，流出时的柱温，在毛细管柱上的温度比填充柱低，毛细管柱上的温度一般比样品的沸点约低50℃。
气相色谱法毛细管气相色谱法
• 氮－磷检测器（NPD）
• 火焰光度检测器（FPD）
• 电子捕获检测器（ECD）
缓冲柱
储液管 加压容器
充满涂渍液的毛细管柱一端，用封胶封 口，置于恒温箱中，开口端连接到真空 系统，减压除去溶剂，最后在毛细管内 壁留下一层均匀的固定相，液膜厚度df 按下式计算： df=rc/200
r－毛细管柱半径
c－涂渍液浓度（一般为0.5-2％w/v)
静态法优缺点
• 优点：重复性好，柱效高，表面张力大， 粘稠固定长度10～300m • 理论板数：2000～5000/m，总柱效最 高可达106。 • 材质：金属（铜，镍，不锈钢） 玻璃 石英
毛细管柱分类
涂壁开管型（WCOT） 开管型
壁处理柱（WTOT）
填充毛细管柱
填充型
微型填充柱
毛细管拉制
1.电炉（2000℃) 2.聚酰亚胺槽 3.管式电炉
固定化方法
加热自交联
偶氮物交联
过氧化物引发交联
臭氧交联
高能辐射交联
交联SE-54弹性石英柱
静态涂渍
引发
溶剂洗涤 老化
SE-54交联柱制备步骤
1. 静态涂渍 （涂渍液中过氧化物为固定相重量 的0.1～0.5%) 2. 引发过程 通低速氮气流，150℃及225℃恒 温1小时。 3. 溶剂洗涤 二氯甲烷－正己烷（1:1）洗涤柱 子（溶剂体积为柱内体积的3～5倍） 4. 老化 100℃开始，以2℃/min升温至 360℃，保持8h.
动态法的优缺点
• 优点：简便，快速 • 缺点：柱效和重复性比静态法差一些，
适用于粘度较低的固定液，而且液膜不
宜太厚。
交联毛细管柱
• 涂渍型WCOT、SCOT柱热稳定性、耐溶 剂性差。
水中氯仿测定两种方法的比对试验
关键词 ： 气相 色谱 ； 质谱 ； 氯仿 ； 试验
氯仿 是我 国总量控制 的指标之一 ， 美 国环境保 护局（ Ｅ Ｐ Ａ） 也将 其确定 为危 险有害物质之一 。有麻醉性 、 有致癌可能性 。【 １ ＿
１ 原 理
表 ３ 方 法 一 分 析 测 试 一检 出 限测 试 结 果
２ 试 剂
２ ． １方法一 。氯仿标液 ， 纯水 ， 甲醇 ， 氟代苯 。 ２ ． ２方 法二 。无水硫酸钠 ， 纯水 ， 甲醇 ， 氯仿标准使用液 。
实验试剂 ： 甲醇 ： 色谱纯 无水硫 酸钠 ： 优级纯 ３ 测 试 条 件 ３ ． １ 方法一：进样 口温度 ： ２ ０ ０ ＂ １ ２ 扫描模式 ： Ｓ Ｉ Ｍ 进样分 流比： １ ０ ： １ 进样 量 ： １ Ｌ 升温方式 ： 程序升温 ３ ５ ￣ Ｃ（ ４ ｍｉ ｎ ） － ÷ ５ ℃， ｍ ｉ ｎ ＿ ÷ ２ ０ ０ ℃一 １ ５ ℃， ｍ ｉ ｎ ＿ ÷ ２ ３ ０ ℃（ ２ ｍ ｉ ｎ ） 色谱柱 ： Ｄ Ｂ 一 ６ ２ ４ （ ６ ０ ｍ＊ ０ ． ３ ２ ａｍ＊ ｒ ０ ． ２ ５ ｍ） ．
致； （ ２ ） 方法一 的灵敏度更高 、 检 出限更 低； （ ３ ） 两种方法相 比较方
法二 的实验过程更简洁 、 实验用时更短。 参考文献
【 Ｕ ４ Ｌ ． ｖ － － － ｉ ￣ 典
【 ２ ］ 国家环境保护 总局， 水和废 水监 测分析 方法（ 第四版） 增补版【 Ｍ 】 ． 北 京： 中国 环 境科 学பைடு நூலகம்出版 社 ， ２ ０ ０ ２ ． 【 ３ 】 俄 罗斯 水 文 气 象和 环 境 监 测 中心 ， 文件号： ５ ２ 、 ４ ２ 、 ４ ８ ２ — ９ ５ ．