黑木耳液体菌种生产技术研究及应用

陕西农业科学　黑木耳液体菌种生产技术研究及应用　王玲，李含毅，党芳志。陈朝阳　（商洛市农业科学研究所，陕西商洛７２６０００）　提　要：对黑木耳液体茵种生产技术研究．并将液体茵种应用于生产中，结果表明黑木耳液体茵种具有一定的　优势。生产工艺条件是：ｌ　ｏｏｏ　ｍｌ三角摇瓶装液体量６００　ｍｌ，转速１５０　ｒ／ｒａｉｎ，培养周期９６　ｈ，经深层发酵罐培　养９６　ｈ，所获得的黑木耳液体菌种活力强、茵龄一致，将其应用接入栽培袋，茵丝萌发、吃料快。生长整齐。较固　体菌种增产１６．７　。　关键词：黑木耳；液体菌种；生产技术；栽培应用　黑木耳是我市的传统优势产业，是我市农民　增收的一个短、平、快项目。长期以来，我市食用　菌生产一直推广应用的是固体菌种，这种固体菌　种的制种与菌丝培养阶段要经受生产时间长、运　行成本高、劳动力投人多、化学用药多和经受的风　险高等弊端，严重制约黑木耳产业化的开发。为　了提升黑木耳产业，实现黑木耳菌种的一次革命，　特开展黑木耳液体菌种技术研究及应用试验，为　黑木耳液体菌种生产与应用提供依据。　１　材料与方法　１．１供试菌株及来源　黑木耳品种：８８８，引自陕西省食用菌菌种场。　ｉ．２培养基配方　１．２．１　液体菌种摇瓶培养基配方　土豆２Ｏ　、　麦麸３　、蛋白胨３‰、葡萄糖２　、磷酸二氢钾　２‰、硫酸镁１‰、维生素Ｂ　１片。　１．２．２　液体菌种发酵灌培养基配方　土豆　２０　、麦麸２％、蛋白胨３‰、葡萄糖２　、磷酸二　氢钾１‰、硫酸镁０．５％ｏ、石膏０．５‰、琼脂２—３ｇ、　酵母膏０．５‰、消泡剂１‰。　１．２．３栽培袋配方木屑７７％、麸皮１８　、红糖　收稿日期：２００９—０８—０６　作者简介：王玲（Ｉ９６４一），女，高级农艺师，主要从事食用菌试验研究。　１　、石膏１　９，６、生石灰１　，含水量６Ｏ　９／５。　１．３　液体菌种生产培养方法　１．３．１　摇瓶液体菌种生产培养方法　按照摇瓶　液体菌种培养基的配方，ｌ　０００　ｍｌ三角摇瓶装液　量６００　ｍｌ培养基。先称取１２０　ｇ麦麸，开水煮沸　２０　ｍｉｎ，捞出，再放人土豆蒸煮至土豆熟，双层纱　布过滤定容，加入其余的原料至溶解，冷却后放人　摇瓶中，将瓶口和胶皮管口用棉塞塞紧，放入高压　锅常规灭菌４０　ｒａｉｎ，待培养基冷却后接种。２００８　年７月６日在接种箱中接摇瓶种，常规消毒后在　液面上接６块０．５　ｃｍ。大小的菌种块，菌种块必　须漂浮在液面上，接种后放人恒温箱中在２６℃的　环境中培养，待接种块长到１　ｃｍ（单个）时停止培　养（７月９日），木耳菌种需７２　ｈ。然后开动电动　摇床，在摇床上放一个小不锈钢盆子，将摇瓶和温　度感应器放入其中，开动电磁摇床，设定温度２７　℃，转速１５０ｒ／ｒａｉｎ，以液体中有一分钱硬币大小　的漩涡为标准，摇４０　ｒａｉｎ，停ｉ０　ｍｉｎ，自动控制，　恒温培养７２　ｈ，至７月１２日培养好。检验标准　是：摇瓶摇动后有菌丝挂壁，培养液浑浊度达　９Ｏ　以上。　１．３．２发酵罐液体菌种的生产培养方法发酵　５　结论　（ｉ）红叶石楠在夏秋季扦插为最佳季节。　（２）扦插基质可根据当地实际选择细沙或珍　珠岩。　（３）春初和秋末用珍珠岩作为基质也可进行　扦插育苗生产。　（４）条件允许的情况下尽可能的在设施条件　扦插育苗。　参考文献：　［１］　周艳，陈宝玉，红叶石楠扦插繁殖技术［Ｊ］．．农家致　富．２００７，（１Ｏ）：３７．　Ｅ２３　陈贵斌，红叶石楠扦插繁育技术研究ＥＪ３．林业勘察　设计．２００８．（０２）：１９８—１９９．　Ｅ３３陈翕兰，毛丽．不同基质与ＡＢＴ生根剂组合对红叶　石楠扦插繁殖的影响［Ｊ］．安徽农业科学，２００５．　（３２）：ｌＯ３３９．

　陕西农业科学　罐使用前必须进行空灭，然后按照发酵罐液体菌种　培养基的配方称取原料，３Ｏ　ｌ发酵罐做２Ｏ　ｌ培养　基。７月１２日做发酵罐培养基，培养基的熬制同　摇瓶培养基的方法，熬好后加入发酵罐中，再加人　消泡剂消泡，开动气泵搅拌２—３　ｍｉｎ，上好盖子，开　始加热压力达０．０５　ｍｐａ时放掉冷气，在压力达　０．１２　ｍｐａ时维持４０　ｍｉｎ，之后用水冷却３　ｈ降温至　２８℃时接种。接种时在火焰上拔去摇瓶和发酵罐　接种口的棉塞进行接种，接完后关好阀门，打开气　泵搅拌，压力维持在０．Ｏ３一Ｏ．０４　Ｍｐａ之间，温度保　持２７℃培养７２　ｈ，接种培养４８　ｈ后进行菌种抽　检，检测菌种的质量。培养期间，气泵不能停止，压　力也不能超过０．０５　Ｍｐａ，培养好的液体菌种放置５　ｍｉｎ不分层，而且有一股淡淡的香味。　１．４　试验方法　（１）试验以固体菌种为对照，栽培袋采用１５　ｃｍ×３０　ｃｍ聚丙烯折角袋，对照生产成品袋５Ｏ　袋，液体菌种生产栽培袋１５０袋。　（２）栽培袋的生产、接种、培养：７月１４日生　产栽培袋，常规配方，袋型选用１５　ｃｍ×３０ｃｍ的　聚丙烯折角袋，常规拌料、装袋、灭菌至冷却。　７月１６日接种，对照固体菌种在接种箱中常　规接种，液体菌种用接种机接种，之后放培养室常　规培养。　（３）出菇管理：９月Ｉ１日地栽，每处理栽５０袋，每　袋划１２个“Ｖ”形Ｅｌ，每平方米摆２５袋，为防止浇　水时土溅到木耳上，地面铺用遮阳网，栽培方法同　常规地栽方法。　２结果与分析　２．１菌丝定植比较　对照固体菌种需１２０　ｈ菌种块变白吃料，而　液体菌种２４　ｈ菌丝定植，明显看到培养料变白。　２．２茵丝生长速度比较　８月６日各标记菌袋５袋，８月１５目测量菌　丝的日长速度见表１。　由表１可以看出，液体菌种平均日长速０．４６　ｃｍ，固体菌种平均日长速０．４　ＣｌＴＩ，液体菌种较对　照（固体菌种）平均日长速高０．０６　ｃｍ。　表１菌丝生长速度测定　（单位：ｃｍ）　２．３接种成活率比较　在相同条件下，生产固体菌种栽培袋６Ｏ袋，　成品袋５５袋，接种成活率９ｌ　；生产液体菌种栽　培袋１５０袋，接种成活率１００　，液体菌种较固体　菌种成活率明显提高。　２．４菌袋满袋时间比较　在相同条件下，对照固体菌种栽培袋５４　ｄ满　袋，液体菌种栽培袋４５　ｄ满袋，提前ｉ０　ｄ左右菌　丝长满袋，分析其原因接种方法需改进提高。　２．５耳基封口时间比较　在相同条件下，于９月Ｉ１　Ｅｌ划口地栽，液体　菌种栽培袋于９月２１日耳基封口，固体栽培袋于　９月２４日耳基封口，结果液体菌种栽培袋比对照　耳基早封口３　ｄ。　２．６　出耳产量比较　试验于２００８年９月１１日划口地栽，２００８年　ｌ０月２３日采收，去掉耳根，晾晒，各处理产量见　表２。　由表２可以看出，应用液体菌种比固体菌种　平均单袋产量高５　ｇ，增长ｌ６．７　。　表２各处理产量　３　结论　（１）黑木耳液体菌种具有一定的优势，菌丝生　长快、缩短生产周期、发酵所得的菌丝体菌龄一　致、接种成活率高、减少用工、降低成本、提高产量　等诸多优点，是用现代农业改造传统农业的有效　途径，是黑木耳菌种生产技术和应用的创新、突　破，可以实现黑木耳生产的集约化、规模化，达到　提升产业的目的。　（２）液体菌种的生产技术具有可行性和经济　价值，液体菌种栽培应用结果证实，液体菌种应用　于黑木耳栽培生产技术上是完全可行的，并表现　出明显的优势。　（３）本试验研究仅为一年，且生产工艺技术和栽　培生产技术尚为初试阶段，还待在规模生产工艺技　术和规模生产应用技术需进一步研究和应用，并制　定批量生产工艺技术，为生产应用提供科学依据。

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[课程]黑木耳菌丝液体发酵培养产黑色素培养条件优化

预实验：黑木耳液体发酵培养黑色素培养基优化

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 菌种：黑木耳

1.1.2 主要试剂

土豆 KH2PO4 MgSO4 葡萄糖蔗糖麦芽糖可溶性淀粉蛋白胨酵母膏硫酸铵尿素

盐酸

1.1.3 主要仪器

摇瓶培养箱分析天平 150r/min 摇床分光光度计离心机水浴锅真空冷冻机

1.2 培养基的制备

1.2.1 PDA培养基

土豆汁20%+葡萄糖2%+琼脂2%，pH值自然。

1.2.2 发酵液液体种子培养基 PDB

土豆汁20%+葡萄糖2%，pH值自然。

1.2.3 摇瓶发酵实验培养基

1）碳源筛选试验培养基：土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+蛋白胨0.15%+碳源

2）氮源筛选试验培养基：土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+葡萄糖2%+氮源2%

3）无机盐试验培养基：土豆汁20%+葡萄糖2%+蛋白胨0.15%+不同配比的微量元素

4） pH试验培养基：

土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+蛋白胨0.15%+葡萄糖2%+不同pH条件

5）转速：

土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+蛋白胨0.15%+葡萄糖2%+不同转速

6）正交试验培养基：设计采用四因素三水平正交表

1.3 实验方法

1.3.1 黑木耳菌丝发酵培养

1) 菌种培养（活化菌种）:从母种试管中取菌丝块接种于PDA平板中，于25℃培养7d

2) 液体种子培养（扩大并制备液体菌种）:将活化的菌种切割成黄豆大小的菌丝块，接种入

装有100mL液体培养的250mL三角瓶中， 30℃，150r/min培养7d，备用。

3) 发酵培养（单因素实验）:摇瓶中装入不同的摇瓶发酵实验培养基100mL，接种量为10%，

于30℃,150r/min培养4d。

木耳液体菌种制作规程讲解

液体菌种制作规程

工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种

一、摇瓶种的制作

1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。25度培养7天备用。

2、初级摇瓶制作 ①配方土豆200克葡萄糖20克

酵母膏 2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克

VB110毫克水1000毫升。（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。

②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。

初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。

③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电

源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。

④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。

黑木耳液体菌种培养基配方及培养条件优化

盛立柱;叶松梅;叶晓菊;何建芬;文冬华;孙孔兰;林火松

【期刊名称】《中国食用菌》

【年(卷),期】2022(41)3

【摘要】为探讨黑木耳液体菌种最佳培养基配方及最佳培养条件,以黑木耳品种“黑山”为材料开展研究。采用单因素和L_(9)(3^(4))正交试验方法,研究不同碳源、氮源、无机盐以及不同培养温度、培养天数和摇床转速对黑木耳液体菌种菌丝体生物量的影响。结果显示,黑木耳液体菌种最佳培养基配方为玉米粉2.5 g·L^(-1)、豆粕2 g·L^(-1)、磷酸二氢钾0.3 g·L^(-1)、硫酸镁0.2 g·L^(-1),摇瓶培养温度23℃~25℃,培养天数5 d~6 d,转速150 r·min^(-1)~160 r·min^(-1)。

【总页数】5页(P82-85)

【关键词】黑木耳;液体菌种;正交试验;菌丝生物量

【作者】盛立柱;叶松梅;叶晓菊;何建芬;文冬华;孙孔兰;林火松

【作者单位】龙泉市食药用菌产业办公室;浙江双益菇业有限公司

【正文语种】中文

【中图分类】S646.6

【相关文献】

1.羊肚菌液体菌种培养基配方优化研究2.黑木耳液体培养基配方优化3.杏鲍菇工厂化生产液体菌种培养基配方的优化4.黑木耳液体培养基及培养条件优化5.草菇液体菌种培养基配方及培养条件的优化因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买

黑木耳液体菌种配方优化试验

王庆武;李秀梅;兰玉菲;安秀荣

【摘要】采用单因素和复合因素正交试验方法,对黑木耳液体菌种培养所需碳源、氮源、无机盐及维生素进行优化,以菌丝体生物量为主要考察指标.结果表明,适宜黑木耳液体菌种培养的碳源为玉米粉、淀粉,氮源为酵母膏、麸皮,维生素B1添加量为0.015％;黑木耳液体菌种适宜配方为玉米粉3％,淀粉4％,酵母膏0.1％,麸皮0.2％,KH2PO40.3％,MgSO40.15％,CaSO40.05％,维生素B10.015％,花生油0.05％.

【期刊名称】《食用菌》

【年(卷),期】2018(040)006

【总页数】3页(P31-32,40)

【关键词】黑木耳;液体菌种;配方;菌丝体生物量

【作者】王庆武;李秀梅;兰玉菲;安秀荣

【作者单位】泰安市农业科学研究院,山东泰安271000;泰安市农业科学研究院,山东泰安271000;泰安市农业科学研究院,山东泰安271000;泰安市农业科学研究院,山东泰安271000

【正文语种】中文

黑木耳（Auricularia auricular）是我国传统食用菌[1]，目前栽培所用菌种大部分为固体菌种，液体菌种尚未广泛使用[2]。固体菌种生产周期长，菌龄不整齐[3]，接种用工多，成本高。与固体菌种相比，液体菌种菌丝生长快，生产周期短[4-5]，菌龄一致，接种快，成本低，解决了固体菌种扩大生产中难以同步性发育的问题[6]。因此，黑木耳液体菌种代替传统固体菌种愈来愈受到人们的关注。为培养出优质黑木耳液体菌种，笔者研究以同一培养时间菌丝体生物量为衡量指标，对黑木耳液体菌种培养所需的碳源、氮源、无机盐及维生素进行优化研究，以筛选出最佳配比，为黑木耳液体菌种的培养提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试黑木耳菌株：泰安市农科院保藏菌株TH02。

斜面培养基：马铃薯20%（去皮煮汁），麸皮4%（煮汁），葡萄糖2%，KH2PO40.2%，MgSO40.1%，琼脂2%，加水1 L。

从食用菌液体培养技术应用未来发展论文

从食用菌液体培养技术的应用探讨未来发展

【摘要】食用菌液体培养技术因其生产周期短、产量大、质量高、经济效益突出等优势而被广泛研究和应用。对食用菌液体培养技术的发展、食用菌液体菌种技术的优势以及液体培养技术在食品、医药等行业中的应用前景作了综述。

【关键词】食用菌液体培养;发展状况;优势;应用前景

1.典型品种

在山区森林中生长的木生菌种类和数量较多，如香菇、木耳、银耳、猴头、松口蘑、红菇和牛肝菌等。在田头、路边、草原和草堆上粪、草生菌，有草菇、口蘑等。南方生长较多的是高温结实性真菌；高山地区、北方寒冷地带生长较多的则是低温结实性真菌。

2.生长条件

食用菌以其白色或浅色的菌丝体在含有丰富有机质的场所生长。条件适宜时形成子实体，成为人类喜食的佳品。菌丝体和子实体是一般食用菌生长发育的两个主要阶段。各种食用菌是根据子实体的形态如：菇形、菇盖、菌褶或子实层体、孢子和菇柄的特征，再结合生态、生理等的差别来分类识别的（见层菌纲、木耳目、银耳目、伞菌目）。凭经验区别野生食用菌和毒菇时，也是以子实体的外形和颜色等为依据。有些食用菌生长在枯树干或木段上，如香菇、木耳、银耳、平菇、猴头、金针菇和滑菇；有些生长在草本植物的茎秆和畜、禽的粪上，如蘑菇、草菇等；还有的与植物根共同生长被称为菌根真菌（见菌根），如松口蘑、牛肝菌等。以上特性

也决定着各种野生食用菌在自然生态条件中的分布。食用菌在菌丝生长阶段并不严格要求潮湿条件，但在出菇或出耳时，环境中的相对湿度则需在85%以上，而且需要适合的温度、通风和光照。如蘑菇、香菇、金针菇、滑菇、松口蘑等适合在温度较低的春、秋季或在低温地带（15℃左右）出菇；草菇、木耳、凤尾菇等则适合在夏季或热带、亚热带地区的高温条件下结实。

3.食用菌液体培养技术发展状况

食用菌液体菌种培养技术的研究与应用

第２８卷第６期　２　０　１　１年１　２月　医学研究与教育　

Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ　、，０１．２８　ＮＯ．６　Ｄｅｃ．２０１１　

食用菌液体菌种培养技术的研究与应用　

王谦。刘敏，李天月　

（河北大学生命科学学院食药用真菌研究所，河北保定０７　１００２）　

摘要：对国内外食用菌液体菌种培养技术研究的历史发展、有关食用菌液体菌种培养技术的发展状况以及对食用菌液体　菌种培养技术的应用进行了概述，讨论了食用菌液体菌种培养的发展前景。　关键词：食用菌；液体菌种；培养　中图分类号：￥６４６　文献标志码：Ａ　文章编号：１６７４—４９０Ｘ（２０１　１）０６—００６２—０４　

食用菌是一种重要的生物资源，在我国的森林山区中生长的种类与数量较多。在世界上来说，我国　的食用菌资源极其丰富，也是最早开发利用食用菌资源的国家之一…。现在，随着社会的进步和人类生　

活水平的提高，人们对食用菌的需求和认识有了较大幅度的提高。但是，传统的小作坊栽培方法及生产　

方式已远远不能适应食用菌产业日益发展的趋势，大规模的机械化生产，已成为不可抵挡的发展趋势。　

在这种趋势的影响与压力下，食用菌液体培养技术已经取得了很大的进展和可喜的成果，该技术是现代　生物工程技术之一，具有生产周期短、效率高、成本低、便于工厂化大规模生产等优点，具有广阔的应　

用前景和较大的发展潜力　。现将重点介绍食用菌液体菌种培养技术的发展现状，并讨论其在食用菌　

生产中的发展潜力与应用前景。　

１　食用菌液体菌种培养技术的历史发展概况　

１．１　国外食用菌液体菌种培养技术的研究概况　液体菌种培养技术在食用菌方面的应用研究中，最早是１９４８年美国的Ｈｕｍｆｅｌｄ等人第１次用液体　

菌种培养技术来培养蕈菌的菌丝体，并对蘑菇进行了深层发酵研究。１９５３年Ｂｌｏｃｋ用废柑汁对野蘑菇　（　ｇ口　ｆｃ“　ｒｖｅ，ｚ　）成功地进行了液体培养。１９５８年Ｓｚｕｅｃｓ首次在生化反应器中培养得到了羊肚菌　

壳寡糖在黑木耳生产中的应用

北方园艺２０１０（３）：１７３～１７４　・食用菌・　

壳寡糖．在黑木耳生产中的应用　

袁建平　，高永闯　，刘小杰　，马立芝　

（１．廊坊师范学院，河北廊坊０６５０００；２．廊坊市农业科学院，河北廊坊０６５０００）　

摘要：Ｎ－究了壳寡糖对黑木耳生产的影响。结果表明：适当低浓度的壳寡糖对黑木耳的菌　

丝生长具有促进作用，可明显缩短茵丝萌发及满袋时间，同时可显著提高黑木耳菌丝生长过程中　

纤维素酶的活力。　

关键词：壳寡糖；黑木耳；纤维素酶；应用　，　

中图分类号：Ｓ　６４６．６文献标识码：Ｂ文章编号：１００１－－０００９（２０１Ｏ）Ｏ３—０１７３一Ｏ２　

壳寡糖也称几丁寡糖，其水溶性好、生物活性高，在　

诸多领域应用广泛　］。黑木耳是一种食药兼用、经济价　

值很高的食用菌＿３］。该研究将壳寡糖应用于黑木耳生产　

的多个环节，探讨壳寡糖对黑木耳菌丝生长的影响，为改　

良黑木耳生产工艺、提高经济效益提供理论依据。　

１材料与方法　

Ｌ　１试验材料　

壳寡糖：由廊坊师范学院生科院微生物实验室制备　提供；黑木耳母种“黑２９”菌种，购于黑龙江省科学院微　

生物研究所；培养基：①黑木耳液体菌种培养基ｌ４］：葡萄　

糖３　，麦麸汁８　，ＫＨ　ＰＯ４　０．１　，ＭｇＳＯ４・７Ｈ　Ｏ　

０．１５　，土豆汁２０　，Ｖｔ％０．０１　，ｐＨ５．０。②黑木耳固　

第一作者简介：袁建平（１９７１一），男，硕士，副教授，研究方向为微生　物育种与应用。　基金项目：河北省教育厅科学研究计划资助项目（２００８３２３）；廊坊　师范学院科研资助项目（Ｉ　ＺＺ２Ｏ０６０４）。　收稿日期：２Ｏ０９—１１－－０６　体栽培料　］：棉皮９２％，麦麸３　，石灰５％０，ＫＨ　ＰＱ　

０．２　，ＭｇＳ（￣０．２　。③ＰＤＡ培养基ｒ５】。　

１．２试验方法　

１．２．１黑木耳液体菌种的制备将黑木耳母种于ＰＤＡ　

斜面２８℃活化培养７　ｄ，后转接于黑木耳液体菌种培养　

基中，２８。Ｃ静置４８　ｈ后，于恒温振荡器中，２８℃，１８０　

黑木耳液体发酵产胞外多糖条件的研究

李慧;兰时乐

【摘要】[目的]研究黑木耳液体发酵产胞外多糖的条件.[方法]利用单因素试验,研究碳源、氮源、无机盐、培养温度、初始pH、接种量、发酵时间等对黑木耳液体发酵产胞外多糖产量的影响.[结果]适宜的发酵培养基为:葡萄糖4％、豆饼粉0.7％、KH2 PO4 0.4％、MgSO4·7H2O 0.5％、CaCO30.3％、棉籽壳粉1％；适宜的发酵条件为:培养基初始pH 6.0、温度28℃、接种量10％ (V/V)、装液量90

ml(250 ml三角瓶)、发酵时间6d,在此条件下胞外多糖产量可达4.835 g/L.[结论]该研究为黑木耳胞外多糖的工业化生产提供了必要的理论基础.

【期刊名称】《安徽农业科学》

【年(卷),期】2013(041)019

【总页数】3页(P8100-8102)

【关键词】黑木耳;液体发酵;胞外多糖

【作者】李慧;兰时乐

【作者单位】湖南省微生物研究所,湖南长沙410009;湖南农业大学生物科学技术学院,湖南长沙410128

【正文语种】中文

【中图分类】S646.6

我国是世界上主要的黑木耳生产国，年产量占世界总产量的90%以上［1］。黑木耳肉质细腻，脆嫩鲜美，不但含丰富的营养素，而且具有极高的药用价值。已有研究表明，黑木耳多糖具有延长血栓形成时间［2］、降低血糖浓度［3］、延缓衰老［4－5］、抗肿瘤［6］、提高免疫功能［7］等作用。关于利用黑木耳液体深层发酵生产胞外多糖的研究，唐青涛等［8］对黑木耳在液体条件下产多糖进行了初步的研究;肖彩霞等［9－10］研究了黑木耳发酵生产胞外多糖的营养条件并优化了液体发酵产胞外多糖培养基;吴静等［11］研究了不同pH对A.auricula

菌体生长、葡萄糖消耗和胞外多糖合成影响，在对pH影响黑木耳多糖发酵过程的动力学分析基础上，提出了黑木耳胞外多糖发酵的两阶段pH控制策略，并通过试验验证了pH控制策略的有效性。文中通过液体深层发酵，研究了黑木耳液体发酵产胞外多糖的培养基和发酵条件，以期为黑木耳胞外多糖的工业化生产提供必要的理论基础。

木耳液体菌种制作规程

液体菌种制作规程

工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种

一、摇瓶种的制作

2、初级摇瓶制作 ①配方土豆200克葡萄糖20克

酵母膏 2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克

VB110毫克水1000毫升。（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。

②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。

黑木耳液体菌种应用于生产应注意的几个问题

食用１－ｒ　ＥＤｍＬＥ　ＦＵＮＧＩ　

阿魏菇液体培养基的筛选试验　

朱妍梅崔小平　

（新疆农业职业技术学院，新疆昌吉８３１１００）　

文章编号１０００—８３５７（２００６）０５—００３４—０１　

阿魏菇生长在新疆高寒地区阿魏根上的一种木腐菌。其　

固体栽培一般需６～７个月，液体培养可缩短其生长周期，又　

可作为液体菌种。为此对不同的阿魏菇液体培养基进行培养　

试验，现将结果报道如下。　

１材料和方法　

１．１供试菌株阿魏菇，新疆农业职业技术学院提供。　

１．２培养基（１　０００　ｍＬ）Ａ．小麦粉培养基：小麦粉３％，蔗糖　

１％，酵母粉０．５％，ＫＩ－＇Ｉ２１：Ｏ４　０．３％，ＭｇＳＯ４　０．１％，ｐＨ５．６。Ｂ．　

玉米粉培养基：玉米粉３％，蔗糖１％，ＫＩ－＇Ｉ２１：Ｏ４　０．３％，ＭｇＳＯ４　

０．１５％，ＶＢ　１　ｍｇ，ｐＨ自然。Ｃ．马铃薯培养基：马铃薯２００　ｇ，　

蔗糖２％，ＫＨ２１＇Ｏ４　０．１％，ＭｇＳＯ，０．０５％，Ⅶｌ　２ｍｇ，ｐＨ自然。　

Ｄ．葡萄糖培养基：葡萄糖３％，蛋白胨０．２％，ＭｇＳＯ４　０．５％，　

ＦｅＳＯ４　０．０１％。ＫＨ２ＰＯ４　０．０１％。ｐＨ６．５。　

１．３培养方法试验前采用ＰＤＡ培养基将供试的阿魏菇菌　

种活化复壮，扩大培养，在生长１０　ｄ的ＰＤＡ培养基菌落上取　

块（直径５　ｌｎｌＴ１），接种到供试液体培养基中，每个处理３次重　

复，置于摇瓶机（往复式）振荡器上振荡培养，频率９０～　

儿０次／ｍｉｎ，振幅６　ｔｉｎ，在室内自然温度下培养（２０℃）。　

１．４茵丝球测定用放大镜观察计数大小；镜检菌丝锁状联　

合及分布；用干重法测菌丝的生长量，将菌丝球液抽滤，用蒸　

馏水冲洗２－－３次，置入４０℃的烘箱中烘干，用电子天平称重。　

２结果与分析　

２．１不同培养基中阿魏菇茵丝的生长状况对阿魏菇菌丝　

在４种液体培养基中的生长状况进行观察，观察结果见表１。　表１　４种液体培养基上阿魏菇菌丝生长状况　

从表１可见，在液体培养基Ａ中生长最快且菌香浓郁，均　

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