生理学实验报告-蛙心灌流
生理学实验报告-蛙心灌流-标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII实验名称：蛙类离体心脏灌流课程名称：生理学实验指导教师：龙天澄张碧鱼陈笑霞实验人：叶永锋 08344031学院：海洋学院实验时间： 2009年12月09日一、【目的要求】1、学习斯氏离体蛙心灌流法。
2、了解心肌的生理特性。
3、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh)等对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
血钾浓度过高时（高于7.9mmol/L），心脏兴奋性、自律性、传导性及收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。
血钙浓度升高时，心脏收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。
血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。
血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。
肾上腺素可使心率加快、传导加快及心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、纱布、棉线、橡皮泥、任氏液。
蛙心套管(斯氏套管或八木氏套管)、套管夹、0．65％NaCl、5％NaCI、2％CaCl2、1％KCl、1：5 000肾上腺素、1：10 000乙酰肌碱、300U／mL肝素。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时，结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。
稳定住套管后，轻轻提起备用线，将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧(不得漏液)，再将结线固定在套管的小玻璃钩上，然后剪断结扎线上方的血管。
轻轻提起套管和心脏，看清静脉窦的位置，于静脉窦下方剪断有牵连的组织，仅保留静脉窦与心脏的联系，使心脏离体(切勿损伤静脉窦)。
用任氏液反复冲洗心室内余血，使套管内灌流液不再有残留血液。
保持套管内液面高度一致(1.5～2 cm)，即可进行实验。
（2）将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不可夹得过多，以免因夹破心室而漏液)。
再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连（如右图）。
注意：勿使灌流液滴到传感器上。
调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中。
2、实验观察(1)记录正常心搏曲线(2)改用0．65％NaCI溶液灌流，并作好加药标记，观察心搏变化。
待曲线氏插管装置出现明显变化时，立即吸去套管中的灌流液，同时做好冲洗标记，并用新鲜任氏液清洗2—3次，待心搏恢复正常。
注意：换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线的基线，同时保持灌流液面一致(以下同)。
观察可得，NaCI溶液会阻遏心脏搏动。
(3)向套管内加2～6滴5％NaCI(较细的套管需少加)溶液，作好加药记号，观察心搏曲线的频率及振幅变化。
当曲线出现明显变化时，应立即吸去套管中的灌流液，并做好冲洗标※记，迅速用新鲜任氏液清洗2～3次，待心搏恢复正常。
(4)同法向套管内加入1～3滴2％CaCI：溶液，观察并记录心搏曲线的变化。
当出现明显变化时，立即更换任氏液，待心搏恢复正常(如果恢复迟缓，可多次冲洗)。
(5)向套管中加1—2滴1％KCl溶液，记录心搏曲线的变化。
当心搏曲线变化时，同法更换灌流液，待心搏恢复正常。
(6)同法记录套管中加入l～2滴的肾上腺素溶液(1：10 000)后心搏曲线的变化。
(7)同法记录套管中加入1—2滴乙酰胆碱溶液(1：10 000)后心搏曲线的变化。
3、实验结果与分析将记录到的各段心搏曲线附在实验报告中，计算给药前后曲线的频率、振幅和基线变化。
测量结果填入表中。
五、【实验结果】1、正常博击曲线图2、滴加0.65%NaCl溶液图分析：滴加0.65%NaCl溶液后，心跳减弱，这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时，由于灌注液中缺乏Ca2+，以致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少，细胞质Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱。
3、滴加5%NaCl溶液分析：由于细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。
因此上图的心率变化与图2滴加0.65%NaCl溶液里变化并不是很大，两个不同浓度的相同溶液作用机理是一样的，在此一不作过多相同分析。
但如果实验中滴加溶液顺序不一样，若先滴加5%NaCl.再滴加0.65%NaCl溶液，所得的心搏变化就不如图3那样明显了，收缩力仅出现很微弱的变化。
4、滴加2%CaCl溶液分析：细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。
[Ca2＋] 0增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2＋] 0增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速。
Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强。
[Ca2＋] 0降低时，所引起的变化与高钙时相反。
因此加入CaCl2后，心率减少、振幅减少，基线上移。
5、滴加1%KCl溶液分析：滴加1％KCl后的心搏曲线发现，曲线的频率逐渐减小，愈来愈疏，幅度逐渐下降，最后停止在基线处，即心脏停博于舒张状态。
因为当细胞K+浓度增高时，K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+抑制细胞膜对Ca2+的转运，使进入细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱，心肌收缩力降低。
所以心搏曲线振幅减小。
6、滴加1：10000肾上腺素溶液分析：滴加肾上腺素后，蛙心收缩增强，心脏舒张完全，描记的心搏曲线幅度明显增大。
其作用机理是，肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性，导致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌收缩增强。
另外，肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力，促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加，提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度，刺激Na+与Ca2+交换，使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速，这样，将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显增强。
7、滴加1：10000乙酰胆碱溶液分析：上图可示，蛙心收缩减弱，心率减慢，最后出现蛙心停止舒张阶段。
其机理为：乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合，一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性，促使K+外流，将引起：1）窦房强细胞复极时K+外流增多，最大复极电位绝对值增大；Ik衰减过程减弱，自动除极速度减慢。
这两方面因素导致窦房自律性降低，心率减慢。
2）复极过程中K+外流增加，动作电位2、3期缩短，Ca2+进入细胞内减少，使心肌收缩减弱；另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道，减少Ca2+内流，进而使心肌收缩减弱。
表一：各测量结果比较表 1改变灌流成分对蛙离体心脏活动的影响六、【注意事项】1. 制备蛙心标本时，勿伤及静脉窦。
2 .上述各实验项目，一旦出现作用应立即用正常任氏液换洗，以免心肌受损，而且必须待心搏恢复正常后方能进行下一步实验。
3. 复习心肌生物电的产生机制及各种离子对心脏活动的影响。
4. 尽量选用健壮、体大的雄性蟾蜍，手术过程中注意保护心脏，避免损伤。
5. 实验中及时用任氏液冲洗心脏，待曲线恢复平稳后再进行下一步操作。
6. 每次更换任氏液都必须保持灌流液液面高度恒定，以免因灌流量变化而影响结果。
7. 严格控制每次药品加入量，先加一滴，效果不明显再加一滴。
8. 滴加药品和换取正常任氏液，须及时标记，以便观察分析。
9. 吸滴瓶中的任氏液和吸蛙心套管内溶液的吸管应区分专用，不可混淆使用，以免影响实验结果。
【思考题】1. 离体蛙心制备好后，有时候馆内的液面上下移动很不明显，是何原因如何处理答：离体蛙心制备好后，蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动。
其实质是：在心室收缩时，心室容积减少，室内压升高，将心室内的液体压入插管内，管内液面上升；在心室舒张的时候，心室容积增大，心室内压减少，将插管内液体吸入心室，管内液面下降。
但是有时候蛙心插管内液面波动不明显，其主要原因是：⑴插管内尖端出现血凝块。
插管内液体不能顺畅的进出心室腔内。
解决方法为用长吸管将血凝块吸出，在吸出血凝块后，应立即用新鲜任氏液换洗插管内液体几次，直至蛙心颜色变淡，插管内无血液和小血块为止。
⑵插管尖端不在心室腔内，而是在心房或者脉间结缔组织等地方。
解决方法为将插管重新插入心室，确定无误后，再结扎固定。
⑶插管进入心室腔内过深，以致尖端抵住了心室壁。
解决方法为将插管稍稍外提，使插管口正好处于心室腔内，且开口正对着液体喷射的轴流方向。
⑷蛙心由于长期心肌失血，导致活力下降。
解决方法为向插管内滴加少许肾上腺素或者对其进行外加力使其起搏，使其活动增强。
⑸房室传导阻滞。
在插管的操作中，由于操作失误，对心脏造成的损害过大，最后导致房室传导阻滞。
由于这种伤害是不可逆转的，所以必须改换蛙心重做实验。
2. 实验过程中，为什么必须保持蛙心插管内液面高度的恒定液面过高或过低会产生怎样的影响答：在实验过程中，蛙心插管内液面高度发生变化，心脏收缩曲线会相应发生变化。
心肌缩短幅度和速度受到前负荷和后负荷的影响。
插管液面高度所产生的压力，在心室舒张期末期相当于心肌的前负荷，心室开始收缩的时候，此液体所产生的压力又成为心肌收缩时的后负荷。
故高度的改变，进而引起的前后负荷的改变将改变心肌收缩的幅度和频率。
当液面过高时。
心缩曲线幅度将降低。
因为过高的液面，将使心室前负荷超过了最适前负荷，将导致粗细肌丝过于疏远，而导致收缩的潜力减少，心肌收缩不再增加或下降。
而类似的，过高的后负荷，也使心肌收缩的幅度和速度大大下降。
蛙心灌流试验
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.观察心脏的解剖结构
（腹面）
（背面）
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.蛙心插管 1.1 在主A干下穿一线打一 松结；在左主A下再穿一 线结扎。
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.蛙心插管
1.2 在主动脉根部剪一
斜口，将插管插入动脉
圆锥， 在心室收缩时
将插管插入心室，结扎 固定。
实验步骤
二、连接仪器和装置
1.用试管夹将蛙心管固定 在铁支架上 2.把张力换能器固定铁支 架支台上，在心室舒张期 将与换能器相连的蛙心夹 夹在心尖上。
注意事项
1.蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，必 须用任氏液冲洗3次。 2.每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液 体吸出。 3.随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。 4.换能器头端应向下倾斜以免液体进人换能器。 5.各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果。
4期自动去极速度↑
自律性↑
心率↑
结果分析与讨论
5. 1:10000 Ach灌流 与心肌M受体结合 K+外流↑, Ca2+内流↓ [Ca2+]i↓ 自律性↓ E-C耦联↓ 心率↓ 最大复极电位↑ 4期K+外流↑
收缩力↓
结果分析与讨论
6. 2.5％NaHCO3 灌流 中和H+，Ca2+与肌钙蛋白结 合，心肌收缩力恢复。
兴奋-收缩耦联↑
收缩力↑
结果分析与讨论
3. 1%KCl灌流：
[K+ ]o↑
AP平台期缩短 Ca2+内流↓ 兴奋-收缩耦联↓ 收缩力↓
结果分析与讨论
4. 1:10000 E灌流 与心肌β1受体结合 cAMP Ca2+内流↑ 肌浆网释放Ca2+↑ 兴奋-收缩耦联↑ 收缩力↑
生理学实验报告-蛙心灌流3
蛙类离体心脏灌流之迟辟智美创作一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法.2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响.二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）坚持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够坚持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成份，观察其对心脏活动的作用.心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关.外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可发生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用.三、【实验仪器】青蛙、经常使用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机收集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝安慰电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液.套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸.四、【方法与步伐】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法流露心脏.仔细识别心脏周围的年夜血管(见右图).在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(植物个体小时，结扎位置可靠上些).再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用.左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口.选择年夜小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处拔出动脉圆锥(见右图).当套管尖端达到动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣拔出心室腔内(于心室收缩时拔出，但不成插得过深，以免心室壁堵住套管下口).此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，标明把持胜利(否则需退回偏重新拔出).用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液.稳定住套管后，轻轻提起备用线，将左、右主动脉连同拔出的套管用双结扎紧(不得漏液)，再将结线固定在套管的小玻璃钩上，然后剪断结扎线上方的血管.轻轻提起套管和心脏，看清静脉窦的位置，于静脉窦下方剪断有牵连的组织，仅保管静脉窦与心脏的联系，使心脏离体(切勿损伤静脉窦).用任氏液反复冲刷心室内余血，使套管内灌流液不再有残留血液.坚持套管内液面高度一致(1.5～2 cm)，即可进行实验.（2）将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不成夹得过多，以免因夹破心室而漏液).再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连（如右图）.注意：勿使灌流液滴到传感器上.调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中.2、实验观察(1)记录正常心搏曲线(2)改用0．65％NaCI溶液灌流，并作好加药标识表记标帜，观察心搏变动.待曲线氏插管装置呈现明显变动时，立即吸去套管中的灌流液，同时做好冲刷标识表记标帜，并用新鲜任氏液清洗2—3次，待心搏恢复正常.注意：换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线的基线，同时坚持灌流液面一致(以下同).观察可得，NaCI溶液会阻遏心脏搏动.(3)迅速用新鲜任氏液清洗2～3次，待心搏恢复正常.向套管内加入1～3滴2％CaCI：溶液，观察并记录心搏曲线的变动.当呈现明显变动时，立即更换任氏液，待心搏恢复正常(如果恢复缓慢，可屡次冲刷).(4)同法向套管中加1—2滴1％KCl溶液，记录心搏曲线的变动.把稳搏曲线变动时，同法更换灌流液，待心搏恢复正常.(5)同法记录套管中加入l～2滴的肾上腺素溶液(1：10 000)后心搏曲线的变动.(6)同法记录套管中加入1—2滴乙酰胆碱溶液(1：10 000)后心搏曲线的变动.（7）同法记录套管中加入l～2滴的3%乳酸后心搏曲线的变动.五、【实验结果与原因分析】曲线的幅度————收缩的水平曲线的密度————心率曲线的基线————舒张的水平1、正常收缩曲线图2、滴加0.65%NaCl溶液图分析：滴加0.65%NaCl溶液后，心跳减弱，这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时，由于灌注液中缺乏Ca2+（），以致心肌细胞举措电位2期内流Ca2+减少，细胞质Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱.3、滴加2%CaCl溶液分析：细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用.[Ca2＋] 0增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低.[Ca2＋] 0增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速.Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强.[Ca2＋] 0降低时，所引起的变动与高钙时相反.因此加入CaCl2后，心率减少、振幅减少，基线上移.4、滴加1%KCl溶液分析：滴加1％KCl后的心搏曲线发现，曲线的频率逐渐减小，愈来愈疏，幅度逐渐下降，最后停止在基线处，即心脏停博于舒张状态.因为当细胞K+浓度增高时，K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+抑制细胞膜对Ca2+的转运，使进入细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱，心肌收缩力降低.所以心搏曲线振幅减小.5、滴加1：10000肾上腺素溶液分析：滴加肾上腺素后，蛙心收缩增强，心脏舒张完全，描记的心搏曲线幅度明显增年夜.其作用机理是，肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性，招致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌收缩增强.另外，肾上腺素还有降低肌钙卵白与Ca2+亲和力，促使肌钙卵白对Ca2+的释放速率增加，提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度，安慰Na+与Ca2+交换，使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速，这样，将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显增强.6、滴加1：10000乙酰胆碱溶液分析：上图可示，蛙心收缩减弱，心率减慢，最后呈现蛙心停止舒张阶段.其机理为：乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合，一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性，促使K+外流，将引起：1）窦房强细胞复极时K+外流增多，最年夜复极电位绝对值增年夜；Ik衰减过程减弱，自动除极速度减慢.这两方面因素招致窦房自律性降低，心率减慢.2）复极过程中K+外流增加，举措电位2、3期缩短，Ca2+进入细胞内减少，使心肌收缩减弱；另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道，减少Ca2+内流，进而使心肌收缩减弱.7、滴加3%乳酸溶液分析：H+与Ca2+的竞争机制，招致心肌细胞举措电位2期内流Ca2+减少，细胞质Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱.六、【注意事项】1.制备蛙心标本时，勿伤及静脉窦.2.上述各实验项目，一旦呈现作用应立即用正常任氏液换洗，以免心肌受损，而且必需待心搏恢复正常后方能进行下一步实验.3.尽量选用健壮、体年夜的雄性蟾蜍，手术过程中注意呵护心脏，防止损伤.4.实验中及时用任氏液冲刷心脏，待曲线恢复平稳后再进行下一步把持.5.每次更换任氏液都必需坚持灌流液液面高度恒定，以免因灌流量变动而影响结果.6.严格控制每次药品加入量，先加一滴，效果不明显再加一滴.7.吸滴瓶中的任氏液和吸蛙心套管内溶液的吸管应区分专用，不成混淆使用，以免影响实验结果.七、【讨论】1. 离体蛙心制备好后，有时候馆内的液面上下移动很不明显，是何原因？如何处置？答：离体蛙心制备好后，蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动.其实质是：在心室收缩时，心室容积减少，室内压升高，将心室内的液体压入插管内，管内液面上升；在心室舒张的时候，心室容积增年夜，心室内压减少，将插管内液体吸入心室，管内液面下降.可是有时候蛙心插管内液面摆荡不明显，其主要原因是：⑴插管内尖端呈现血凝块.⑵插管尖端不在心室腔内，而是在心房或者脉间结缔组织等处所.⑶插管进入心室腔内过深，以致尖端抵住了心室壁.⑷蛙心由于长期心肌失血，招致活力下降.2. 实验过程中，为什么必需坚持蛙心插管内液面高度的恒定？液面过高或过低会发生怎样的影响？答：在实验过程中，蛙心插管内液面高度发生变动，心脏收缩曲线会相应发生变动.心肌缩短幅度和速度受到前负荷和后负荷的影响.插管液面高度所发生的压力，在心室舒张期末期相当于心肌的前负荷，心室开始收缩的时候，此液体所发生的压力又成为心肌收缩时的后负荷.故高度的改变，进而引起的前后负荷的改变将改变心肌收缩的幅度和频率.当液面过高时.心缩曲线幅度将降低.因为过高的液面，将使心室前负荷超越了最适前负荷，将招致粗细肌丝过于疏远，而招致收缩的潜力减少，心肌收缩不再增加或下降.而类似的，过高的后负荷，也使心肌收缩的幅度和速度年夜年夜下降.而当液面过低时，心室收缩的幅度也会减少.因为前负荷过小，将招致粗细肌丝过于接近，而招致收缩的潜力减少，实际上，此时由于前负荷的减少招致心室收缩的效力的减少比前负荷增加而招致的还有明显.类似的，后负荷相应的减少也会招致心室收缩的减弱.所以，在实验中坚持最适的液面高度.是取得较好实验结果的前提.3．各种离子成份改变蛙心收缩的原理是什么？答：由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关，因此，细胞外液中离子浓度升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性.（1）钾离子的影响K＋与静息电位的形成有关.细胞外液K ＋浓度[K＋]0变动对心肌生理特性的影响较为复杂.高钾：[K ＋]0轻度或中度增高时，膜内、外K＋浓度差减小，静息电位绝对值减小，与阈电位差距缩短，因此，兴奋性增高. [K ＋]0显著升高时，由于静息电位绝对值减小过多（膜内达-55mV左右），Na＋通道失活，因而兴奋性降低甚至消失.另外，还使0期去极化速度和幅度减小，传导性降低，招致兴奋传导减慢，甚至传导阻滞.另外，[K＋]0增高还可提高膜对K＋的通透性，加速K＋外流，举措电位平台期缩短，因此，不应期缩短.另外由于平台期缩短，减少了Ca2＋的内流，加上细胞外K＋与Ca2＋在膜上有竞争性抑制作用，招致心肌收缩功能减弱；（2）钙离子的影响细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用.[Ca2＋] 0增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低.[Ca2＋] 0增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速.Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强.[Ca2＋] 0降低时，所引起的变动与高钙时相反.（3）钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变动一般对心肌活动影响不明显.只有当[Na＋] 0明显增高时，膜内外钠的浓度差梯度增年夜，因此，快反应细胞Na＋内流加快，0期去极速度和幅度均增加，招致传导性和自律性增高.同时，Na＋内流的增多增进细胞内Ca2＋的外运使细胞内Ca2＋浓度降低，因此，心肌收缩能力减弱.反之，当[Na＋] 0降低，使心肌传导性和自律性降低，心肌收缩能力增强.2010级临床二系四班张娜2010221462张秋2010221463张雪蕊2010221465祝杰2010221484邹彬2010221485(本次书写)。
蛙心灌流实验报告分析报告
蛙心灌流实验报告分析报告蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将药物或溶液直接注入蛙心中，观察心脏功能的变化，从而研究生物体的生理功能和药理学效应。
本文将对蛙心灌流实验报告进行分析和讨论。
实验目的：本次实验旨在探究不同剂量的肾上腺素对蛙心的影响，进一步了解肾上腺素的药理效应。
实验步骤：1.使用手术刀将蛙麻醉；2.将蛙的心脏暴露出来，清理心包，并通过大血管灌注生理盐水；3.将蛙心环扎，插入导管，开始灌流生理盐水；4.记录生理盐水流量和心率，使其达到稳定状态；5.依次将不同浓度的肾上腺素注入灌流液中，观察生理参数的变化；6.实验结束后，对蛙进行安乐死处理。
实验结果：在实验过程中，测得了不同剂量肾上腺素注入后的心率和收缩力等指标，发现随着肾上腺素浓度的增加，心率逐渐加快，收缩力也明显增强。
实验分析：肾上腺素是一种能够刺激交感神经系统的激素，能够增强心肌收缩力，加速心率等，这种效应是可以被灌流实验所模拟的。
在本次实验中，通过注入不同剂量的肾上腺素，我们发现肾上腺素可以显著地增加心率和收缩力，这与我们的预期一致。
此外，实验结果还表明，肾上腺素的效应是具有剂量效应关系的，这也是符合理论的。
高剂量的肾上腺素会导致心脏超负荷，使心肌细胞的代谢和抗氧化能力降低，甚至导致心肌缺血和心肌梗死等严重后果。
因此，合理控制使用剂量非常重要。
总结：通过本次实验，我们深入理解了肾上腺素的药理效应和作用机制，并了解了其剂量效应关系，增强了我们的实验技能。
同时，我们也深刻认识到在使用药物进行实验时，应该严格控制使用剂量，以免造成不必要的损害。
离体蛙心实验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。
2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。
3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。
实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。
四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。
用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。
2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。
3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。
4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。
b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。
c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。
d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。
5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。
五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。
2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。
六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。
2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。
蛙心灌流报告
蛙心灌流报告生理学实验报告蛙类离体心脏灌流院系：生命科学学院实验人：张优13941202邓晓娟13941201（本次实验报告由张优撰稿）一、实验目的1、自学斯氏离体蛙心灌流法。
2、介绍心肌的生理特性。
3、观察na+,k+,ca2+及肾上腺素,乙酰胆碱对离体心脏活动的影响。
二、实验原理（一）两栖类动物无冠状循环两栖类动物无冠状循环，心肌直接从流经心腔的血流中获取营养。
即心室肌直接从心室腔中获得营养。
故用任氏液置换心室中的血液后，心室插管中的灌流液便成为心室肌的细胞外液。
（二）心肌对细胞外离子浓度和体液因数脆弱（三）钾、钙和钠离子对心肌特性的影响1.血钾浓度过低时（低于7.9mmol/l），心脏兴奋性、自律性、传导性及膨胀性都上升，整体表现为膨胀力弱化、心动过缓和传导阻滞，轻微时心脏Murviel搏于舒张期。
2.血钙浓度升高时，心脏收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。
血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。
3.钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不显著，只有出现显著变化时，才可以影响心肌的生理特性。
肾上腺素可以并使心率大力推进、传导大力推进及心肌膨胀力进一步增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的促进作用恰好相反。
三、实验材料青蛙、常用手术器械、蜡盘、蛙心缠、计算机收集系统、张力传感器、支架、双凹陷缠、滴管、大烧杯、纱布、棉线、任氏液、蛙心套管、套管夹、0．65％nacl、5％naci、2％cacl2、1％kcl、1：5000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、300u／ml肝素。
四、实验步骤（一）蛙心的解剖1.毁脑毁脊髓2.打开胸腔3.剪高兴包膜、曝露心脏（二）斯氏蛙心插管法1.绝育左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
2.插管左主动脉绝育处下方用眼科剪剪一小切口，将器皿任氏液＋少量肝素的蛙心插管1生理学实验报告由此口插入主动脉，至动脉圆锥时约“向后向下向前”试插，当心室收缩时容易经主动脉瓣插入心室腔内。
离体心脏灌流实验报告
一、实验目的1. 熟悉离体心脏灌流技术的基本操作。
2. 观察和分析不同生理、病理因素对离体心脏功能的影响。
3. 掌握记录和分析心脏功能指标的方法。
二、实验原理离体心脏灌流实验是生理学研究中常用的一种方法，通过将心脏从机体中取出，在体外模拟生理环境条件下进行灌流，观察和分析心脏功能的变化。
实验中，通过改变灌流液的成分、温度、pH值等条件，可以研究不同因素对心脏功能的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、玻璃管、量筒、秒表等。
2. 实验仪器：显微镜、电子天平、恒温器、恒温水浴箱、高压消毒锅等。
四、实验方法与步骤1. 实验准备（1）取一只青蛙，用蛙类手术器械进行解剖，暴露心脏。
（2）将心脏夹在蛙心夹上，用线固定在蛙板上。
（3）在心脏主动脉下方穿一线，结扎并留出一段备用。
（4）将心脏主动脉左支结扎，于动脉圆锥处剪一向心斜切口，插入灌流管。
2. 灌流实验（1）将灌流管一端插入恒温器中的任氏液中，另一端与心脏主动脉相连。
（2）调整恒温器，使任氏液温度保持恒定。
（3）开启灌流泵，使任氏液以恒定速度灌流心脏。
（4）观察心脏收缩情况，记录心率、收缩幅度等指标。
（5）依次改变灌流液的成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的变化。
3. 实验数据记录与分析（1）记录不同灌流条件下心脏的心率、收缩幅度等指标。
（2）分析不同生理、病理因素对离体心脏功能的影响。
（3）绘制心脏功能曲线，分析实验结果。
五、实验结果与分析1. 灌流液中加入肾上腺素后，离体心脏心率加快，收缩幅度增强。
2. 灌流液中加入乙酰胆碱后，离体心脏心率减慢，收缩幅度减弱。
3. 降低灌流液温度后，离体心脏心率减慢，收缩幅度减弱。
4. 提高灌流液pH值后，离体心脏心率加快，收缩幅度增强。
六、实验结论1. 肾上腺素和乙酰胆碱对离体心脏功能具有调节作用，肾上腺素使心脏兴奋，乙酰胆碱使心脏抑制。
2. 温度和pH值对离体心脏功能有显著影响，低温和碱性环境有利于心脏功能的维持。
生理学实验报告-蛙心灌流3
蛙类离体心脏灌流之马矢奏春创作一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法.2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响.二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）坚持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够坚持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成份,观察其对心脏活动的作用.心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关.外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可发生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用.三、【实验仪器】青蛙、经常使用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机收集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝安慰电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液.套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸.四、【方法与步伐】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法流露心脏.仔细识别心脏周围的年夜血管(见右图).在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(植物个体小时,结扎位置可靠上些).再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用.左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口.选择年夜小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2～3 cm 高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处拔出动脉圆锥(见右图).当套管尖端达到动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣拔出心室腔内(于心室收缩时拔出,但不成插得过深,以免心室壁堵住套管下口).此时可见套管中血液冲人套管,并使液面随心脏搏动而亡下移动,标明把持胜利(否则需退回偏重新拔出).用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液.稳定住套管后,轻轻提起备用线,将左、右主动脉连同拔出的套管用双结扎紧(不得漏液),再将结线固定在套管的小玻璃钩上,然后剪断结扎线上方的血管.轻轻提起套管和心脏,看清静脉窦的位置,于静脉窦下方剪断有牵连的组织,仅保管静脉窦与心脏的联系,使心脏离体(切勿损伤静脉窦).用任氏液反复冲刷心室内余血,使套管内灌流液不再有残留血液.坚持套管内液面高度一致(1.5～2 cm),即可进行实验.（2）将插好离体心脏的套管固定在支架上,用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉 (不成夹得过多,以免因夹破心室而漏液).再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连（如右图）.注意：勿使灌流液滴到传感器上.调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中.2、实验观察(1)记录正常心搏曲线(2)改用0．65％NaCI溶液灌流,并作好加药标识表记标帜,观察心搏变动.待曲线氏插管装置呈现明显变动时,立即吸去套管中的灌流液,同时做好冲刷标识表记标帜,并用新鲜任氏液清洗2—3次,待心搏恢复正常.注意：换液时切勿碰套管,以免影响描记曲线的基线,同时坚持灌流液面一致(以下同).观察可得,NaCI溶液会阻遏心脏搏动.(3)迅速用新鲜任氏液清洗2～3次,待心搏恢复正常.向套管内加入1～3滴2％CaCI：溶液,观察并记录心搏曲线的变动.当呈现明显变动时,立即更换任氏液,待心搏恢复正常(如果恢复缓慢,可屡次冲刷).(4)同法向套管中加1—2滴1％KCl溶液,记录心搏曲线的变动.把稳搏曲线变动时,同法更换灌流液,待心搏恢复正常.(5)同法记录套管中加入l～2滴的肾上腺素溶液(1：10 000)后心搏曲线的变动.(6)同法记录套管中加入1—2滴乙酰胆碱溶液(1：10 000)后心搏曲线的变动.（7）同法记录套管中加入l～2滴的3%乳酸后心搏曲线的变动.五、【实验结果与原因分析】曲线的幅度————收缩的水平曲线的密度————心率曲线的基线————舒张的水平1、正常收缩曲线图2、滴加0.65%NaCl溶液图分析：滴加0.65%NaCl溶液后,心跳减弱,这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时,由于灌注液中缺乏Ca2+（）,以致心肌细胞举措电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱.3、滴加2%CaCl溶液分析：细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用.[Ca2＋] 0增高时,Na＋内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低.[Ca2＋] 0增高使Ca2＋内流增多,因此慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性增高,而快反应细胞平台期缩短,有效不应期缩短,复极加速.Ca2＋内流增多,使心肌收缩能力增强.[Ca2＋] 0降低时,所引起的变动与高钙时相反.因此加入CaCl2后,心率减少、振幅减少,基线上移.4、滴加1%KCl溶液分析：滴加1％KCl后的心搏曲线发现,曲线的频率逐渐减小,愈来愈疏,幅度逐渐下降,最后停止在基线处,即心脏停博于舒张状态.因为当细胞K+浓度增高时,K+与Ca2+有竞争性拮抗作用,K+抑制细胞膜对Ca2+的转运,使进入细胞内Ca2+减少,心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱,心肌收缩力降低.所以心搏曲线振幅减小.5、滴加1：10000肾上腺素溶液分析：滴加肾上腺素后,蛙心收缩增强,心脏舒张完全,描记的心搏曲线幅度明显增年夜.其作用机理是,肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合,提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性,招致肌浆中Ca2+浓度增高,使心肌收缩增强.另外,肾上腺素还有降低肌钙卵白与Ca2+亲和力,促使肌钙卵白对Ca2+的释放速率增加,提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度,安慰Na+与Ca2+交换,使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速,这样,将使心肌舒张速度增快,整个舒张过程明显增强.6、滴加1：10000乙酰胆碱溶液分析：上图可示,蛙心收缩减弱,心率减慢,最后呈现蛙心停止舒张阶段.其机理为：乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合,一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性,促使K+外流,将引起：1）窦房强细胞复极时K+外流增多,最年夜复极电位绝对值增年夜；Ik衰减过程减弱,自动除极速度减慢.这两方面因素招致窦房自律性降低,心率减慢.2）复极过程中K+外流增加,举措电位2、3期缩短,Ca2+进入细胞内减少,使心肌收缩减弱；另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道,减少Ca2+内流,进而使心肌收缩减弱.7、滴加3%乳酸溶液分析：H+与Ca2+的竞争机制,招致心肌细胞举措电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱.六、【注意事项】1.制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦.2.上述各实验项目,一旦呈现作用应立即用正常任氏液换洗,以免心肌受损,而且必需待心搏恢复正常后方能进行下一步实验.3.尽量选用健壮、体年夜的雄性蟾蜍,手术过程中注意呵护心脏,防止损伤.4.实验中及时用任氏液冲刷心脏,待曲线恢复平稳后再进行下一步把持.5.每次更换任氏液都必需坚持灌流液液面高度恒定,以免因灌流量变动而影响结果.6.严格控制每次药品加入量,先加一滴,效果不明显再加一滴.7.吸滴瓶中的任氏液和吸蛙心套管内溶液的吸管应区分专用,不成混淆使用,以免影响实验结果.七、【讨论】1. 离体蛙心制备好后,有时候馆内的液面上下移动很不明显,是何原因？如何处置？答：离体蛙心制备好后,蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动.其实质是：在心室收缩时,心室容积减少,室内压升高,将心室内的液体压入插管内,管内液面上升；在心室舒张的时候,心室容积增年夜,心室内压减少,将插管内液体吸入心室,管内液面下降.可是有时候蛙心插管内液面摆荡不明显,其主要原因是：⑴插管内尖端呈现血凝块.⑵插管尖端不在心室腔内,而是在心房或者脉间结缔组织等处所.⑶插管进入心室腔内过深,以致尖端抵住了心室壁.⑷蛙心由于长期心肌失血,招致活力下降.2. 实验过程中,为什么必需坚持蛙心插管内液面高度的恒定？液面过高或过低会发生怎样的影响？答：在实验过程中,蛙心插管内液面高度发生变动,心脏收缩曲线会相应发生变动.心肌缩短幅度和速度受到前负荷和后负荷的影响.插管液面高度所发生的压力,在心室舒张期末期相当于心肌的前负荷,心室开始收缩的时候,此液体所发生的压力又成为心肌收缩时的后负荷.故高度的改变,进而引起的前后负荷的改变将改变心肌收缩的幅度和频率.当液面过高时.心缩曲线幅度将降低.因为过高的液面,将使心室前负荷超越了最适前负荷,将招致粗细肌丝过于疏远,而招致收缩的潜力减少,心肌收缩不再增加或下降.而类似的,过高的后负荷,也使心肌收缩的幅度和速度年夜年夜下降.而当液面过低时,心室收缩的幅度也会减少.因为前负荷过小,将招致粗细肌丝过于接近,而招致收缩的潜力减少,实际上,此时由于前负荷的减少招致心室收缩的效力的减少比前负荷增加而招致的还有明显.类似的,后负荷相应的减少也会招致心室收缩的减弱.所以,在实验中坚持最适的液面高度.是取得较好实验结果的前提.3．各种离子成份改变蛙心收缩的原理是什么？答：由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关,因此,细胞外液中离子浓度升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性.（1）钾离子的影响 K＋与静息电位的形成有关.细胞外液K＋浓度[K＋]0变动对心肌生理特性的影响较为复杂.高钾：[K＋]0轻度或中度增高时,膜内、外K＋浓度差减小,静息电位绝对值减小,与阈电位差距缩短,因此,兴奋性增高. [K＋]0显著升高时,由于静息电位绝对值减小过多（膜内达-55mV左右）,Na＋通道失活,因而兴奋性降低甚至消失.另外,还使0期去极化速度和幅度减小,传导性降低,招致兴奋传导减慢,甚至传导阻滞.另外, [K＋]0增高还可提高膜对K＋的通透性,加速K＋外流,举措电位平台期缩短,因此,不应期缩短.另外由于平台期缩短,减少了Ca2＋的内流,加上细胞外K＋与Ca2＋在膜上有竞争性抑制作用,招致心肌收缩功能减弱；（2）钙离子的影响细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用.[Ca2＋] 0增高时,Na＋内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低.[Ca2＋] 0增高使Ca2＋内流增多,因此慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性增高,而快反应细胞平台期缩短,有效不应期缩短,复极加速.Ca2＋内流增多,使心肌收缩能力增强.[Ca2＋] 0降低时,所引起的变动与高钙时相反.（3）钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变动一般对心肌活动影响不明显.只有当[Na＋] 0明显增高时,膜内外钠的浓度差梯度增年夜,因此,快反应细胞Na＋内流加快,0期去极速度和幅度均增加,招致传导性和自律性增高.同时,Na＋内流的增多增进细胞内Ca2＋的外运使细胞内Ca2＋浓度降低,因此,心肌收缩能力减弱.反之,当[Na＋] 0降低,使心肌传导性和自律性降低,心肌收缩能力增强.2010级临床二系四班张娜 2010221462张秋 2010221463张雪蕊 2010221465祝杰 2010221484邹彬 2010221485(本次书写)。
蛙心灌流实验实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技能，提高实验观察和分析能力。
二、实验原理蛙心灌流实验是研究心肌细胞生理特性的常用方法。
通过离体蛙心灌流，可以观察和比较不同理化因素对心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的影响。
实验中，利用任氏液作为灌流液，维持蛙心的正常生理活动。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心夹、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙板、蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹等。
四、实验步骤1. 制备蛙心标本：将蟾蜍放入装有冰块的容器中，使其昏迷。
在蟾蜍背部剪一小口，暴露心脏。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
将心脏与动脉分离，用任氏液冲洗，置于蛙心夹上。
2. 连接实验装置：将蛙心夹固定于支架上，连接张力传感器和计算机采集系统。
将任氏液滴入培养皿中，用滴管控制液面高度。
3. 观察正常蛙心活动：打开计算机采集系统，观察蛙心在任氏液中的正常收缩和舒张活动。
4. 改变灌流液成分，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化：a. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
b. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
c. 在灌流液中加入1%KCl溶液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
d. 在灌流液中加入1:10000肾上腺素，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
e. 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
f. 在灌流液中加入3%乳酸，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
5. 记录观察结果，分析实验现象。
五、实验结果与分析1. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液后，心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性稍微减小，表现为心跳频率和幅度降低。
蛙心灌流报告
蛙心灌流报告生理学实验报告蛙类离体心脏灌流院系：生命科学学院实验人：张优 13941202 邓晓娟 13941201 （本次实验报告由张优执笔）一、实验目的1、学习斯氏离体蛙心灌流法。
2、了解心肌的生理特性。
3、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素,乙酰胆碱对离体心脏活动的影响。
二、实验原理（一）两栖类动物无冠状循环两栖类动物无冠状循环，心肌直接从流经心腔的血流中获取营养。
即心室肌直接从心室腔中获得营养。
故用任氏液置换心室中的血液后，心室插管中的灌流液便成为心室肌的细胞外液。
（二）心肌对细胞外离子浓度和体液因数敏感（三）钾、钙和钠离子对心肌特性的影响 1.血钾浓度过高时（高于7.9mmol/L），心脏兴奋性、自律性、传导性及收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。
2.血钙浓度升高时，心脏收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。
血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。
3.钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。
肾上腺素可使心率加快、传导加快及心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。
三、实验材料青蛙、常用手术器械、蜡盘、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、滴管、小烧杯、纱布、棉线、任氏液、蛙心套管、套管夹、0．65％NaCl、5％NaCI、2％CaCl2、1％KCl、1：5 000肾上腺素、1：10 000乙酰肌碱、300U／mL肝素。
四、实验步骤（一）蛙心的解剖 1.毁脑毁脊髓 2.打开胸腔3.剪开心包膜、暴露心脏（二）斯氏蛙心插管法 1.结扎左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
2.插管左主动脉结扎处下方用眼科剪剪一小切口，将盛有任氏液＋少量肝素的蛙心插管1生理学实验报告由此口插入主动脉，至动脉圆锥时约“向后向下向前”试插，当心室收缩时容易经主动脉瓣插入心室腔内。
蛙心灌流实验报告
蛙心灌流实验报告本文介绍了一项名为“蛙心灌流”的科学实验，该实验旨在通过将新生的蛙卵浸泡于含有荷尔蒙物质的液体中，观察其对生物发育的影响。
这项实验引起了广泛关注和争议，因为其中存在一些伦理和动物保护方面的问题。
一、实验背景在过去的几十年里，生物学家们一直在探究荷尔蒙对动物发育的影响。
一些已知的实验表明，荷尔蒙可以通过影响基因表达和细胞分化等生物学过程，对生物的发育产生显著影响。
在这个领域里，蛙是一个非常热门的研究对象，因为蛙的生命周期短，易于繁殖，体型较小，且为脊椎动物，因此可以用作代表性模型生物进行研究。
近年来，有些科学家开始使用一种名为“蛙心灌流”的实验方法，以研究荷尔蒙对蛙卵的影响。
该实验的目的是将含有荷尔蒙物质的液体注入新生蛙卵的心脏中，使荷尔蒙得以渗透至整个胚胎体内，从而观察荷尔蒙对蛙卵的生长和发育产生的效果。
二、实验方法蛙心灌流实验的主要步骤如下：1. 采集新鲜的蛙卵，并将其分为实验组和对照组。
2. 制备含有荷尔蒙物质的溶液。
3. 采用微注射技术将荷尔蒙物质注入实验组蛙卵的心脏中，同时对照组蛙卵不接受注入。
4. 在一定的时间内观察两组蛙卵的生长和发育情况，并记录重要数据。
三、实验结果近些年来，已经有一些研究报道了蛙心灌流实验得到的一些显著结果。
例如，在进行蛙心灌流实验后，研究发现蛙卵的发育速度明显提高，并且对荷尔蒙刺激的反应也变得更为明显。
同时，这项实验还有助于揭示荷尔蒙与性别发育之间的关联，以及对脊椎动物生殖系统发育的影响。
然而，同时有一些研究也显示出蛙心灌流实验的潜在风险。
例如，实验组蛙卵可能会出现更高的胚胎死亡率，或者体型和神经系统的异常。
此外，这种实验还尚未得到足够的伦理和动物保护监管，因此有一定的不确定性和风险。
四、结论综上所述，“蛙心灌流”是一个有趣的科学实验，其结果可能有助于我们更深入了解荷尔蒙在脊椎动物发育中所扮演的角色。
然而，我们也必须正视这项实验存在的伦理和动物保护方面的问题，并探索更加安全和可持续的方法来探究生物学问题。