HPLC法测定不同外观形态的桂枝中肉桂酸的含量
高效液相色谱法同时测定大黄中没食子酸和肉桂酸的含量
高效液相色谱法同时测定大黄中没食子酸和肉桂酸的含量摘要】目的：采用高效液相色谱法对大黄中没食子酸、肉桂酸进行含量测定。
方法：建立HPLC法，色谱柱为Thermo SCIENTIFIC Hypersil GOLD Dim.(mm)(4.6mm×250mm，5μm)，以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱，检测波长为278 nm，流速1.0ml/min，柱温30℃，进样量为10ul。
结果：高效液相色谱法测定大黄中没食子酸、肉桂酸，分别在0.125～1.250 ug（R2=0.9998）、0.0382～0.3820ug（R2=0.9994）的线性范围内呈良好线性关系。
结论：建立高效液相色谱法测定大黄中没食子酸、肉桂酸的含量，该方法可为制定大黄及其中药的质量控制方法提供科学的依据。
【关键词】大黄；没食子酸；肉桂酸；高效液相色谱法【中图分类号】R284 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2020）09-0212-03大黄有唐古特大黄、正品大黄和药用大黄的根茎及干燥根[1]。
大黄适宜内服外用，能攻守、能止血、能通阻、能解毒[2]。
大黄在加热蒸炒炮制的过程中，成分含量变化很大，药效随之发生变化[3]。
中药炮制前后药性改变，其化学成分含量增减变化[4]。
目前大黄在临床上主要用于治疗急腹症等疾病，该方剂在辅助改善脑血管病人意识等方面也有很好的疗效[5]。
据研究表明，大黄具有止血作用的主要药效成分是鞣质中含的没食子酸和儿茶素[6]；研究者等以往的研究多数以对大黄及其大黄炮制品前后蒽醌类的成分含量差异指标居多[7]，而对鞣质类成分含量差异比较这方面的研究居少。
本研究采用HPLC法建立中药大黄没食子酸、肉桂酸成分的含量测定方法，为其质量评价标准研究提供试验依据。
1.仪器与试药1.1 仪器2695型高效液相色谱仪(美国沃特世公司）；1780型紫外分光光度计(岛津仪器（苏州）有限公司)；电子分析天平(赛多利斯科学仪器（北京)有限公司)。
高效液相色谱法测定不同产地桂枝中原儿茶酸的含量
高效液相色谱法测定不同产地桂枝中原儿茶酸的含量
杨松;张会丽
【期刊名称】《中国中药杂志》
【年(卷),期】2005(30)4
【总页数】3页(P301-303)
【关键词】桂枝;原儿茶酸;不同产地;高效液相色谱法;含量;《神农本草经》;经脉;嫩枝;樟科植物;肉桂
【作者】杨松;张会丽
【作者单位】沈阳军区联勤部药品仪器检验所;辽宁大学
【正文语种】中文
【中图分类】R284;R286.0
【相关文献】
1.不同产地与采收季节虎耳草中原儿茶酸的含量测定 [J], 张秋海;丁家欣;张玲
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3.不同产地狗脊中原儿茶酸和原儿茶醛的含量测定 [J], 罗锐;何智建
4.HPLC法测定不同产地鸡血藤中原儿茶酸的含量 [J], 黄灿辉
5.反相高效液相色谱法同时测定不同产地夏天无药材中原阿片碱和延胡索乙素的含量 [J], 陈再兴;孟舒;姜泓;李丽红;孟繁浩
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反相高效液相色谱法测定中华神威胶囊中肉桂酸的含量
［ ｂｔａｔ Ｏ ｊｃｉ Ｔ ｅ ｒ ｉｅｔ ｏｔｎｓ ｆ ｉｎｍ ｃａｉ ｉ Ｚ ｏｇｕ ｈｎ ｅ ｃｐｕｅ Ａ ｓ ｃ］ ｂｅｔ ｅ ｏｄｔ ｍｎ ｅｃｎｅｔ ｏ ｎａ ｉ ｃ ｈｎｈ ａＳｅ ｗ ｉ ａｓｌ．Ｍｅ ｏ ｓ Ｒ ｒ ｖ ｅ ｈ ｃ ｄｎ ｔ ｄ Ｐ—Ｈ Ｌ ａ ｈ Ｐ Ｃｗ ｓ
［ 关键词 ］ 高效液相 色谱 法； 肉桂酸； 中华神威胶囊 ［ 中图分类号 ］ Ｒ ４ ． ９４ ９ ［ 文献标识码 ］ Ａ
Ｄｅｅ ｍｉ ａｉｎ ｏ ｉｎ ｍｉ ｃｄ ｉ ｏ ｇ ｕ ｈ ｎ ｉ ａ ｓ ｌ ｙ ＲＰ —ＨＰＬＣ ｔｒ ｎ ｔ ｆｃｎ ａ ｃａ ｉ ｎ Ｚｈ ｎ ｈ ａ Ｓ ｅ ｗｅ ｐ ｕｅｂ ｏ ｃ
量控制 。
线 性范 围 ：１６—５ ｍ ｍ ， １． ８ ｓ ｌ胶囊 内容物超声 提取 ３ ｍｉ ／ ０ ｎ后测 定 肉桂 酸含 量最 高 ， ７ ． ５ ｓ １０ ， 为 ３ ３ ｍ ０ ｇ ／ 该方法样 品处理简便 ， 结果 可靠 ， 重现性好 ， 可供 本品质
Ｒ Ｄ为 １３ ％ ， Ｓ ．８ 回收率为 ９ ．５ ， Ｓ ８ ７ ％ Ｒ Ｄ＝１６ ％ 。结论 ．７
ａ ｇａｈ ｏ ｍ ： ｉ ｏ ｓ Ｄ ｏｕ ｎ（ ５ ｍ ４ ６ ｍ， ｍ ； ｏ ｉ ｈ ｓ： ｅ ａｏ — ａ ｒ ｏｔ ｎ ｇ１Ｏ ａｅ ｃａｉ ５ ｔ ｒｐ ｉ ｃｌ ｎ ｄａ ｎｉＯ Ｓｃｌｍ ２ ０ ｍ＇ ｍ ５ ｍ） ｍ ｂｌ ｐ ａｅ ｍ ｔ ｎｌ ｗ ｔ ｎ ｉｉ ． ％ ｃｔ ｃｄ（５ ｏ ｃ ｕ ｍ ｌ ． ｅ ｈ ｅｃ ａ ｎ ｉ ：５ ； ｏ ｒｔ： ． ｌｍｉ； ｏ ｍｎｔ ｅａ ｒ ： ０Ｃ；ｄｔ ｔ ｎｗ ｖｌ ｇ ７ ｍ．Ｒ ｓｌ Ｔ ｅｃｐｕ ｓｗ ｒ ｕ ｎｉｔｅｙ ４ ） ｆ ｗ— ａ ０ ８ｍｆ ｎ ｃｌ ｍｐｒｔ ｅ ３ ￣ ｅ ｃ ｏ ａｅｅ ｔ ２ ８ａ ｌ ｅ ｕ ｅ ｕ ｅｉ ｎｈ ｅｕｔ ｈ ａｓｌ ｅｅｑ ａｔａ ｖｌ ｓ ｅ ｔｉ
RP-HPLC法测定咽炎片中哈巴俄苷和肉桂酸的含量
哈巴俄苷进样量在 ４ ． ～６９ ２ｔ 范 围 内呈 现 良好线 性关 系 （ ：０ ９９９ ， １２ ５ ． ｇ ｘ ｒ ． ９ ） 平均 回收率 （ ｎ＝６ 为 １３ ０ ， Ｓ ） ０ ． ％ Ｒ Ｄ为
２Ｏ ； ．％ 肉桂酸进样量在 １ ． １６ ８ ２ ３～ ９ ． ｇ范围内呈现 良好线 性关 系（ ＝ ． ９ ） 平均 回收率 （ ｒ ０ ９９９ ， ｎ＝６ 为 ９ ． ％ ， Ｓ ） ９ ０ Ｒ Ｄ为
色 谱 柱 Ｄａ ｏ ｓ 柱 （ ５ × ｉｍ ｎｉ Ｃ ｌ ２ ０ｍｍ
阴降火 、 毒散结 的功效 ， 解 用于热 人 营血 、 温毒 发斑 、 热 ４ ６ｍ ５ ｍ） 以乙腈 为 流动相 Ａ， １ ． ｍ， ， 以 ％冰醋 酸为流 病 伤 阴、 绛烦 渴 、 舌 津伤 便 秘 、 蒸 劳嗽 等 症 … 。为 更 动相 Ｂ 按表 １ 行梯 度 洗脱 ； 骨 ， 进 检测 波 长为 ２ ８ｎ ７ ｍ；
好地 控制本 品质量 ， 采用 高效液 相色谱 法 ， 测定 玄参 中 流速 为 １ｍ／ ｉ； 温 ４ ｌｍｎ柱 ０℃ 。理论 板数按 哈 巴俄 苷峰
哈 巴俄苷 和 肉桂 酸含量 ， 以加强 对咽炎 片 的质 量控制 。
计算 不低 于 ５０ ０ ０ 。
表 １ 梯 度洗脱表
１ 仪器 与试 药 岛 津 高 效 液 相 色 谱 仪 Ｌ 一２ １Ａ Ｔ（ 作 站 Ｃ ００ Ｈ 工
（ 津 市 大 港 区 药 品检 验 所 ， 津 天 天
摘
要 目的 ： 建立高效液 相色谱 法测定 咽炎片 中哈 巴俄 苷和 肉桂酸 的含量 。方 法 ： 采用 Ｄａ ｎｉ （ ｉ ｍｏｓ 钻石 ）Ｃ Ｌ 柱
（５ ２ ０ｍｍ× ． ｍ， ｍ） 采用梯度洗脱 ， ４ ６ｍ ５ ； 以乙腈为流动相 Ａ， １ 以 ％冰醋酸溶液为流动相 Ｂ， 检测 波长为 ２ ８ａ ７ ｍ。结果 ：
HPLC 法测定柴胡桂枝颗粒中桂皮醛和桂皮酸的含量
HPLC 法测定柴胡桂枝颗粒中桂皮醛和桂皮酸的含量范广建;张坚【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2015(000)010【摘要】目的：为准确测定柴胡桂枝颗粒中桂皮酸和桂皮醛两种成分的含量，采用HPLC 法建立桂皮酸和桂皮醛含量测定的简便方法。
方法采用高效液相色谱法，色谱柱为 Agilent ZORBAX SB-phenyl（4．6 mm ×250 mm，5μm），流动相为乙腈－1．0％冰醋酸（30∶70），流速：1 ml／min，柱温：35℃。
结果桂皮酸和桂皮醛的线性范围分别是2．024～12．144μg／ml 和8．480～50．880μg／ml，平均回收率为99．73％，RSD ＝1．83％（n ＝6）和100．09％，RSD＝1．39％（n ＝6）。
结论本方法具有样品处理方法简便、结果准确、色谱分离度和重复性好的特点，可用于柴胡桂枝颗粒的质量控制。
【总页数】3页(P1575-1577)【作者】范广建;张坚【作者单位】830001 乌鲁木齐市，新疆维吾尔自治区人民医院药学部;830001 乌鲁木齐市，新疆维吾尔自治区人民医院药学部【正文语种】中文【中图分类】R932【相关文献】1.RP-HPLC法测定桂枝及桂枝茯苓胶囊中桂皮醛和桂皮酸含量 [J], 杨松;靳宝峰;张治国;毕开顺2.HPLC测定桂枝汤不同配伍中桂皮酸和桂皮醛的含量 [J], 杨林;胡华明3.HPLC法测定桂枝茯苓丸中桂皮酸、桂皮醛及丹皮酚的含量 [J], 冯传平4.HPLC法测定桂枝中桂皮醛和桂皮酸的含量 [J], 朱晓薇;蔡刚;潘桂湘;郭俊华;胡静5.HPLC同时测定桂枝颗粒中桂皮酸、芍药苷、甘草酸含量 [J], 蒋晔;郝福;李艳荣;任淑萌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定肉桂和肾泰贴膏中的桂皮醛
HPLC法测定肉桂和肾泰贴膏中的桂皮醛
刘建芳;毕开顺
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2001(023)010
【摘要】目的:建立肉桂及肾泰贴膏中桂皮醛含量测定的方法.方法:反相高效液相色谱法.采用Hypersil-C18柱,以甲醇-乙腈-水-四氢呋喃(25:15:55:5)为流动相,流速为0.8mL·min,紫外检测器测定波长为285nm.结果:桂皮醛在32～320ng范围内与峰面积之间线性关系良好(r=0 9995);桂皮醛在肉桂和肾泰贴膏中的回收率分别为97.8%和92.2%,RSD分别为3.0%和2.9%.结论:本法简便、快速、准确,可用于肾泰贴膏的质量评价和生产工艺的监控.
【总页数】4页(P719-722)
【作者】刘建芳;毕开顺
【作者单位】白求恩国际和平医院,河北,石家庄,050082;沈阳药科大学,辽宁,沈阳,110015
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
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1.HPLC法测定桂枝中桂皮醛和肉桂酸的含量 [J], 王连芝;蒋维谦
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3.HPLC法测定八味肉桂胶囊中桂皮醛的含量 [J], 董媛;明全忠
4.HPLC法测定肉桂油巴布剂中桂皮醛的含量 [J], 高鹏飞;赖小平
5.RP-HPLC法测定肉桂超微饮片中桂皮醛的含量 [J], 王实强;杨瑛;舒建斌;蔡光先因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
八种樟属肉桂组药用植物中肉桂酸、肉桂醛含量的测定
八种樟属肉桂组药用植物中肉桂酸、肉桂醛含量的测定施宇;杨杰;王强【期刊名称】《中国野生植物资源》【年(卷),期】2008(27)3【摘要】目的建立反相高效液相色谱法测定8种樟属肉桂组药用植物中肉桂酸和肉桂醛的含量.方法采用Liehrospher-C18(4.6mm × 150 mm,5μm)色谱柱,以流动相乙腈和水在0～10 min内由35:65至38:62线性梯度洗脱,在10～15 min内由38:62至50:50线性梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长290 nm,柱温30℃.结果在8种药用植物中肉桂酸、肉桂醛的色谱峰与共存组分完全达到基线分离,线性范围分别为0.208～4.16 μg(r=0.999 6)和0.013 6～0.34μg(r=0.9999).结论肉桂和清化桂可以作为肉桂药用,其它6种不能作为肉桂代用.【总页数】4页(P54-57)【作者】施宇;杨杰;王强【作者单位】中国药科大学中药分析实验室,江苏南京,210038;中国药科大学中药分析实验室,江苏南京,210038;中国药科大学中药分析实验室,江苏南京,210038【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.反相高效液相色谱法同时测定桂油生物催化反应中肉桂醇、苯甲醛、苯乙酮、肉桂酸和肉桂醛 [J], 韦一萍;张戈2.HPLC法测定混合型饲料添加剂牛至香酚+肉桂醛中肉桂醛含量的方法研究 [J], 霍韶瑜3.反相高效液相色谱法测定对羟基肉桂酸口服液中对羟基肉桂酸的含量 [J], 周德刚;何诚;孙志文;李应超4.多阶导数紫外光谱法快速测定生物转化液中的肉桂醇、肉桂醛和肉桂酸 [J], 江艳艳;粟桂娇;马丽;黄秋容;于唱;李丽丽5.高效液相色谱法测定肉桂不同部位中肉桂酸的含量 [J], 方琴;徐吉银;丁平;徐鸿华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC测定舒脉通胶囊中肉桂酸含量及其不确定度评定
HPLC测定舒脉通胶囊中肉桂酸含量及其不确定度评定常惠礼【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2014(11)21【摘要】目的：建立舒脉通胶囊中肉桂酸含量测定方法，并对所建立的方法进行不确定度评定。
方法采用HPLC法测定舒脉通胶囊中肉桂酸的含量，同时采用方法学中获取的验证数据对结果不确定度进行计算。
结果经计算该方法建立的舒脉通胶囊中肉桂酸的扩展不确定度为3.28%。
结论采用HPLC方法建立的肉桂酸含量测定方法，结果准确，重复性好，可用于舒脉通胶囊的质量控制；所建立的不确定度方法适用于HPLC法测定中药有效成分的不确定度评定。
%Objective To establish and evaluate the uncertainty of the measurement for determination of the cinnamic acid in the Shumaitong Capsule. Methods The determination method of cinnamic acid was adopted by HPLC and the data of validation method was used to evaluate the uncertainty of the result. Results The expanded uncertainty of the measurement for determination of the cinnamic acid in the Shumaitong Capsule was 3.28%. Conclusion The method for determination of the cinnamic acid in the Shumaitong Capsule by HPLC is accurate and repeatable, which can be used for the quality control of Shumaitong Capsule and the method for evaluating the uncertainty of the measurement can be applied to the analysis of efficacious ingredient in TCM by HPLC.【总页数】4页(P95-98)【作者】常惠礼【作者单位】广东省清远市人民医院暨南大学附属第五医院，广东清远 511515【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.HPLC法测定丹脉通胶囊中丹参素钠的含量 [J], 赵蕾2.RP-HPLC法测定脉通胶囊中黄芩苷的含量 [J], 周红艳3.肠舒胶囊中阿魏酸含量的HPLC法测定 [J], 程新萍;李新生;于兰;傅强;李映丽4.HPLC宝胶法测定心舒宝囊中芍药苷的含量 [J], 李双喜5.高效液相色谱法测定桂龙咳喘宁胶囊中肉桂酸含量 [J], 解希田因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
RP-HPLC法测定桂枝及桂枝茯苓胶囊中桂皮醛和桂皮酸含量
RP-HPLC法测定桂枝及桂枝茯苓胶囊中桂皮醛和桂皮酸含量杨松;靳宝峰;张治国;毕开顺【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2002(024)006【摘要】目的:测定桂枝及桂枝茯苓胶囊中桂皮醛和桂皮酸的含量.方法:用RP-HPLC法,Zobax ODS柱为固定相,乙腈:0.1%磷酸溶液(34:76)为流动相,检测波长285nm.结果:桂皮醛在3.34～53.4μg·mL-1,桂皮酸在0.804～12.9μg·mL-1呈现良好的线形关系,相关系数分别为0.9996、0.9999.加样回收率桂枝中桂皮醛为98.6%,RSD为1.35%(n=6),桂皮酸为99.2%(n=6)RSD为0.97%.桂枝茯苓胶囊中桂皮醛为97.4%,RSD为1.62%(n=6),桂皮酸为100.1%,RSD为0.73%(n=6).结论:本方法简便、准确、重现性好.适用于桂枝和它的复方测定.【总页数】3页(P421-423)【作者】杨松;靳宝峰;张治国;毕开顺【作者单位】沈阳军区联勤部药品检验所,辽宁,沈阳,110026;沈阳军区联勤部药品检验所,辽宁,沈阳,110026;沈阳军区联勤部药品检验所,辽宁,沈阳,110026;沈阳药科大学,辽宁,沈阳,110016【正文语种】中文【中图分类】R927.11【相关文献】1.HPLC法测定桂枝茯苓胶囊中肉桂酸、桂皮醛和丹皮酚的含量 [J], 华剑;武超2.HPLC 法测定柴胡桂枝颗粒中桂皮醛和桂皮酸的含量 [J], 范广建;张坚3.高效液相色谱法同时测定吴茱萸-桂枝药对水煎液中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、桂皮醛、桂皮酸含量 [J], 兰莹;薛莹;江阳4.HPLC法测定桂枝茯苓丸中桂皮酸、桂皮醛及丹皮酚的含量 [J], 冯传平5.HPLC法测定桂枝中桂皮醛和桂皮酸的含量 [J], 朱晓薇;蔡刚;潘桂湘;郭俊华;胡静因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
肉桂酸的制备及含量的测定
附件1广东省高校第三届化学化工实验技能大赛肉桂酸的制备及含量的测定一、肉桂酸的制备1. 实验目的1. 通过肉桂酸的制备考察选手掌握珀金（Perkin ）反应及其基本操作的程度。
2. 考察选手对回流、水蒸气蒸馏、重结晶、过滤、常压蒸馏等技术的基本操作熟练程度及其综合运用能力。
2. 实验原理芳香醛和酸酐在碱性催化剂作用下，可以发生类似羟醛缩合反应，再脱水生成α,β不饱和芳香酸的反应称为Perkin 反应。
催化剂通常是相应酸酐的羧酸钾或钠盐，有时也可以是碳酸钾或叔胺等碱性试剂代替。
用碳酸钾代替通常使用的乙酸钠来合成肉桂酸，操作方便，反应时间缩短，产率也有所提高。
其催化的机理尚不完全清楚，并不能肯定就是碳酸钾直接催化反应，因为反应开始时总有微量水存在，可能会有少量酸酐水解，进而与碳酸钾生成羧酸钾并催化该反应。
反应方程式如下：Perkin 反应主要得到反式肉桂酸（熔点133℃），顺式异构体（熔点68℃）不稳定，在加热条件下很容易转变为热力学更稳定的反式异构体。
3. 实验仪器与试剂仪器：圆底烧瓶、烧杯、直形冷凝管、空气冷凝管、蒸馏头、干燥管、接液管、锥形瓶、布氏漏斗、长颈三角漏斗、抽滤瓶、玻璃棒、量筒、滤纸、滴管、表面皿、电炉等。
试剂：无水碳酸钾、苯甲醛（新蒸）、乙酸酐（新蒸）、浓盐酸、10 % NaOH 、无水+ (CH 3CO)2O -CHO K 2CO 3150～170℃ -CH=CH-COOH + CH 3COOH氯化钙、活性炭、pH试纸。
4. 实验操作（约3～3.5 h）在干燥的100 mL圆底烧瓶中依次加入4.4 g（0.032 mol）研细的无水碳酸钾、8 mL （0.084 mol）新蒸馏的乙酸酐和3 mL（0.030 mol）新蒸馏的苯甲醛，振荡使其混合均匀。
装上带有氯化钙干燥管的空气冷凝管，在石棉网上进行加热，回流40 min。
由于有二氧化碳逸出，最初反应会出现泡沫。
待反应物稍冷却后，向其中加入30 mL水，用玻棒轻轻捣碎瓶中的固体。
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HPLC法测定不同外观形态的桂枝中肉桂酸的含量杨羽君;鄂秀辉【摘要】目的:建立高效液相色谱法测定桂枝饮片中肉桂酸的含量,并考查多批次桂枝饮片外观形态与桂枝中肉桂酸含量的关系,旨在建立有效的桂枝饮片质量把控方法.方法:高效液相色谱法,采用Agilent ZORBAX Eclipse C 18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1％乙酸水(B)为流动相梯度洗脱(0～12 min,40％～43％A;12～20 min,43％A);流速1.0 ml/min;检测波长276 nm;柱温30℃.结果:肉桂酸在0.40～9.98μg/ml(r=0.9998)范围内线性关系良好,平均加样回收率为98.18％,RSD为1.13％(n=9).横截面直径在3～5 mm之内且枝条较细的桂枝饮片肉桂酸含量较高.结论:所建立的高效液相色谱分析方法操作简便,灵敏度高.同时,通过多批次桂枝饮片的含量测定,基本可以得到通过观察外观形态辨别饮片质量优劣的方法,为评价桂枝饮片质量标准提供可靠依据.【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2019(031)001【总页数】5页(P4-8)【关键词】桂枝;肉桂酸;高效液相色谱法【作者】杨羽君;鄂秀辉【作者单位】天津市天士力控股集团有限公司研究院,天津 300410;天津市天士力控股集团有限公司研究院,天津 300410【正文语种】中文【中图分类】R927.2桂枝为樟科植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的干燥嫩枝，具有发汗解肌、温通经脉、助阳化气、平冲降气之功效[1]。
自汉代张仲景《伤寒论》以来，为历代医家所常用。
据统计，桂枝在经方中的使用频率仅次于甘草，是常用的解表药，主要产地为广东、广西、云南等省区[2]。
临床上多用于风寒感冒、脘腹冷痛、血寒经闭、关节痹痛、痰饮、水肿、心悸、奔豚等病症[3]。
桂枝中含有的主要成分为桂皮醛(Cin-namaldehyde)和肉桂酸(Cinnamic acid)。
药理研究表明：肉桂酸具有抗菌、消炎作用[4]。
《中国药典》2015年版(一部) 桂枝含量测定项下仅对桂皮醛做了相关规定，未对肉桂酸做出规定。
又由于目前药材市场的桂枝商品外观形态不同，为更加客观、全面地评价桂枝质量，本文建立了测定桂枝中肉桂酸含量的方法，并分析市售多批桂枝，发现其外观形态与成分含量、价格之间的关系，为不同形态的桂枝饮片提供质量控制的依据。
1 仪器与试药1.1 仪器高效液相色谱(Waters HPLC e2695-2998，PDA 检测器)；电子分析天平(XS205，瑞士METTLER TOLEDO 公司)；离心机(ST16R，美国Thermo公司)；超纯水系统(Millipore-Q，Millipore公司)；超声波清洗器(KQ-500DV，昆山市超声仪器有限公司)。
1.2 试药肉桂酸对照品(批号110786-200503，中国食品药品检定研究院)。
甲醇(色谱纯，德国Merck公司)；乙腈(色谱纯，德国Merck公司)；超纯水(Millipore-Q制备)；冰乙酸(天津市致远化学试剂有限公司)。
12批不同产地的桂枝饮片(批号S1～S12，购于安国药材市场)，由天士力研究院现代中药开发中心人员鉴定为樟科植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的干燥嫩枝炮制而成的饮片。
2 方法与结果2.1 色谱条件采用Agilent ZORBAX Eclipse C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，以乙腈(A)-0.1%乙酸水(B)为流动相，梯度洗脱，0～12 min，40%～43% A；12～20 min，43% A；检测波长：276 nm；流速：1.0 ml/min；柱温：30 ℃；进样量：10 μl；理论板数按肉桂酸峰计算应不低于3 000。
2.2 溶液制备2.2.1 对照品溶液的制备取肉桂酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含10 μg的溶液，即得。
2.2.2 供试品溶液的制备取桂枝粉末(过四号筛)约200.0 mg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25.0 ml，称定重量，超声处理(功率250 W，频率40 kHz)30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，4 900 r/min离心10 min，精密量取上清液1.0 ml，置5 ml量瓶中，即得。
2.3 系统适用性试验取对照品溶液和供试品溶液务10 μl，按“2.1”项下色谱条件进样测定，结果肉桂酸色谱峰峰形较好，且与杂质峰较好分离。
见图1。
1.肉桂酸图1 对照品(A)供试品(B)HPLC色谱图2.4 线性关系的考查取肉桂酸对照品5.0 至50 ml量瓶中，精密称定，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液10.0 ml置100 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，即得对照品溶液A。
精密吸取对照品溶液A3.0 ml于5 ml 量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，即得对照品溶液A1；精密吸取对照品溶液A 2.0 ml于5 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，即得对照品溶液A2；精密吸取对照品溶液A 3.0 ml于10 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，即得对照品溶液A3；精密吸取对照品溶液1.0 ml于5 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，即得对照品溶液A4；精密吸取对照品溶液A 1.0 ml于10 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，即得对照品溶液A5；精密吸取对照品溶液A 1.0 ml于25 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，即得对照品溶液A6。
按照“2.1”项下色谱条件，分别精密吸取对照品A～A6溶液，注入液相色谱仪，记录色谱峰面积，以峰面积为纵坐标(Y)，质量浓度(μg/ ml)为横坐标(X)绘制标准曲线，得回归方程：Y= 85 642 X +4 440.8(r=0.999 8)，结果表明，肉桂酸在0.40～9.98 μg/ml范围内线性关系良好。
2.5 精密度试验取对照品溶液，按照“2.1”项下的色谱条件测定，连续进样6次，记录峰面积，计算肉桂酸峰面积的RSD值为0.39%。
结果表明，方法的日内精密度好。
2.6 重复性试验精密称取同一批桂枝粉末(过四号筛)200.0 mg 6份。
按照“2.2.2”项下的方法制备供试品溶液，按照“2.1”项下的色谱条件进行测定，记录峰面积，计算肉桂酸含量的RSD值为0.79%。
结果表明，方法重复性好。
2.7 稳定性试验取供试品溶液，分别于配制后第0、1、4、15、18、24和48 h进样，按照“2.1”项下的色谱条件进行测定，记录峰面积，计算肉桂酸含量的RSD值为0.96%。
结果表明，供试品溶液在48 h内稳定性好。
2.8 加样回收率试验平行称取同一批桂枝粉末(过四号筛)100.0 mg 9份，精密称定，分为高、中、低三个水平，每个水平各3份，分别加入一定量对照品，按照“2.2.2”项下的方法制备供试品溶液，按照“2.1”项下的色谱条件进行测定，记录峰面积，计算回收率，结果平均回收率为98.18%，RSD为1.13%。
见表1。
表1 肉桂酸加样回收率试验结果称样量(mg)样品中的量(μg)加入量(μg)测得值(μg)回收率(%)99.80169.76199.50365.6598.19100.04170.17199.50366.4598.39100.0417 0.17199.50363.5196.91100.01170.12159.60329.5499.8999.81169.78159.603 27.4198.77100.11170.29159.60327.3498.4099.84169.83119.70285.6896.789 9.47169.20119.70285.2496.94100.06170.20119.70289.1199.342.9 样品含量测定取12批桂枝粉末(过四号筛)每批各2份，每份200.0 mg，精密称定，按照“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按照“2.1”项下的色谱条件进行测定，记录色谱图和峰面积，运用外标法计算含量，结果见表2。
本试验测定桂枝12批，肉桂酸含量分布在0.112 2%～0.232 3% 之间。
表2 12批桂枝中肉桂酸含量测定结果(n=2)批号含量均值(%)批号含量均值(%)批号含量均值(%)S10.125 3S20.170 4S30.232 3S40.116 2S50.160 5S60.2158S70.112 2S80.162 8S90.145 0S100.172 4S110.191 9S120.134 83 讨论3.1 色谱条件的考查3.1.1 检测波长的确定取肉桂酸对照品及供试品分别进行210～400 nm全波长紫外扫描，采用二极管阵列检测器(PDA)，获得在不同波长下的数据。
检测到肉桂酸最大吸收波长为276 nm，故选择276 nm作为肉桂酸的检测波长。
3.1.2 流动相的确定本试验先后考查了乙腈-水、乙腈-0.1%磷酸水、乙腈-0.1%乙酸水和乙腈-1%乙酸水体系，结果显示肉桂酸在加酸条件下出峰效果更好。
乙腈-水体系基线稳定，未将色谱峰分离，理论塔板数过低；乙腈-0.1%磷酸水体系基线稳定，系统压力较高；乙腈-1%乙酸水体系基线稳定，系统压力小，但流动相pH 过低，长期使用影响色谱柱及仪器；乙腈-0.1%乙酸水体系基线稳定，系统压力小，峰型好。
故选择乙腈-0.1%乙酸水作为流动相，进行梯度洗脱。
3.1.3 柱温的确定本试验分别在柱温25、30和35 ℃进样，考查色谱参数优势。
结果表明，柱温为30 ℃时对称因子、理论板数和分离度最优，所以柱温选择30 ℃，结果见表3。
表3 肉桂酸含量测定中不同柱温考查结果序号柱温(℃)灵敏度对称因子理论板数分离度1259 693.591.2210 658.0712.8523011 006.851.2110 485.1615.2033510 697.071.2110 226.3312.273.2 提取条件的考查3.2.1 提取时间的确定取同一批桂枝粉末(过四号筛)200.0 mg 4份，精密称定，分别置具塞锥形瓶中。
分别精密加入甲醇50.0 ml，称定重量。
分别超声处理(功率250 W，频率40 kHz)20、30、40和50 min，放冷，再按照“2.2.2”项下方法配制，即得4份供试品溶液。
按照“2.1”项下的色谱条件测定。
发现超声20 min含量明显偏低，说明提取未完全；超声40和50 min时含量较超声30 min 含量仅有微量的波动，但在1.5%左右，故判断为系统误差。
本着操作简便、节约等原则确定提取时间为30 min。