三种常用检测种子生活力方法比较(1)
种子生活力测定原理及方法PPT课件

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• 2、AOSA活力测定方法(《活力测定手册》, • 广泛应用的方法,将种子活力测定分为3种类型: • 逆境测定(加速老化试验、低温试验、冷发芽试验); • 幼苗生长和评定试验(幼苗活力分级、幼苗生长速率测定); • 生化测定(四唑法、电导率法)。
• 三、活力、生活力和发芽力的区别与联系 衡量种子生理质量有发芽力、生活力和活力三个指标,三
者有密切的关系,却有完全不同的含义: • 1、种子生活力:是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。 • 通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分率。
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2、种子发芽力:是指种子在适宜条件下(实验室控制条件下)长成 • 正常植株的能力。通常用供检样品中长成正常幼苗数占样品总
品种进行。如玉米:65232、齐319作母本的较高:DH11、 LD981等。 • ②种子发芽速率受到原始水分的影响,测定前
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应将过湿或过干的种子平衡至相近的含水量。 • 3、幼苗评定试验 • 适用于大粒豆类种子。这些种子不能用幼苗长度表示活力。 • 因其细弱苗可达相当的长度。此法是采用标准发芽方法,幼苗
快速, • 有时可用来替代来不及发芽的发芽率,但最后的结果还是用发
芽率作为正式的依据。2012/03/10来自11第11页/共49页
• 3、种子活力就是指高发芽率种子批间在田间表现的差异。 • 种子活力是比发芽率更敏感的指标,在高发芽率的种子批中, • 仍然表现出活力的差异(高低)。通常发芽率高的种子具有较
4.5、5.5等 N:正常幼苗总数。
实验六 植物种子生命力的快速测定

2)取完好小麦种子,将种胚轻稳地向下插入BTB琼脂胶中。
7. 思考题
TTC法和红墨水法测定种子生活力的理论依据 有何不同?
2)取30粒完好的小麦种子,种胚向下略斜插入胶(不软 不硬)。
3)将培养皿置于35 ℃下培养 1 h,对光观察,如果种胚 附近呈现较深黄色晕圈是活种子,否则是死种子。
实验步骤
TTC/红墨水法:
1)将种子用温水(约30℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。 2)随机取小麦种子30粒,沿种胚中央准确切开,每切1粒确认各半种子皆 含胚后,分别放置两只培养皿中。 3)在上述一只培养皿中加入TTC溶液(至其中种子全部浸入为止),恒 温箱(30~35℃)中保温至少30 min。从TTC溶液中取出种子,直接观 察种胚颜色变化。
种子活力检测评估方法:
(1) 还原力:呼吸→NADH → 还原TTC,胚呈红色。
(2) 原生质着色:活种子不易着色,原生质膜具有选择透性。
(3) 呼吸释放CO2,pH下降,酸碱指示剂显色。
(4) 细胞中的荧光物质:紫外照射发蓝、蓝紫色荧光。
(5) 外观目测法:用肉眼观察玉米种胚形状和色泽。凡种胚凸
周围环境酸度增加,用BTB来反映酸度的改变。
BTB变色范围为pH6.0~7.6,酸性呈黄色,碱性呈蓝色, 中间经过绿色(变色点为pH7.1)。 本实验观察种胚周围的黄色晕圈。
3. 材料、仪器设备与试剂
材料:小麦种子 仪器设备:小烧杯;刀片;镊子;温箱
试剂:
0.12%~0.5%TTC溶液(TTC可直接溶于水,溶于水后,呈 中性,pH7±0.5,不宜久藏,应随用随配)。 0.02%~0.2%靛红溶液或5%红墨水(酸性大红G)。
出或皱缩、显黑暗无光泽的,则种子新鲜,生活力强,可
测定种子生活力方法的比较与改进

C mp r o n rv me to he id f o ai na di o e n ft rekn so s mp meh d od tr n edva it to st eemiese ibly i
t ym o l e m e ho h lb u t d
氯 化三 苯 基 四 氮 唑 ( TTC 法 、 墨 水 法 、 麝 香 ) 红 溴
T C 还 原 为 红 色 的 三 苯 基 甲 脂 ( TF 种 子 生 活 力 和发 芽 率 是 高校 , B ) 特 别 是专科 学校 植物 生理 学实验 教学 中常用 的基础 性 实 验, 测定 结果准 确 , 法 简单 , 方 不需 要 大 量人 力 、 力 、 物 仪器 和试 剂 , 以被编 人 很 多 实验 教 材 。更 明显 的优 所
色 , 种子胚 乳部 位 和死 种胚 因没 有 活 细胞 则 无 红 色 而
反应 。这 3种方法 在实 验教 学 中测 定种 子生 活力效果 不错 , 也有 不尽 完善 之处 , 但 根据 近年来 实验 教学 的实
践 , 了 以下 改 进 。 做
点是 可 以不考 虑种子 是否 处于休 眠期 。休 眠期 的种子
Ke ywor s:de e m i ng s e ibiiy;2, 5,t i e lt t a olu hlrdem e ho d t r ni e d va lt 3, 一rph ny e r z i m c o i t d;r d i k m e h e n t od;Br m o— o
测定种子生活力方法的比较与改进

种子生存能力就像农业和保护生物学的VIP通行证。
这是保证农作物生长,生态系统繁荣的关键,也是种子库保持储备的关键。
有很多很
酷的方法来检查种子是否可以吸食,比如发芽测试,四zo测试,甚至电导测试。
每种方法都有自己的超能力和弱点,但我们需要撕裂和
改进它们这样我们就可以永远得到直药种子生存能力。
毕竟,我们
希望我们的种子像爱奇艺书里的超级英雄一样可靠!
老年化测试是用来检查种子是否还用得上,因为它们模仿种子在自然
界将面临的条件。
但是,它们需要一段时间,你需要确保环境是正确的,有足够的水和正确的温度。
另四zo试验很快,不会破坏种子——它们只是将种子的活部分染成红色。
但是要注意化学物质,它们对于各种种子都不安全。
电传导性测试测量受损种子漏出多少物质,它
们是一个快速检查种子是否还好的方法。
但是它们可能并不像发芽试
验那样完美,并可能受到温度和湿度等物质的影响。
为了提高种子可行性测试的精度和有效性,研究人员正在积极探索图
像分析和分子方法等创新技术。
图像分析有助于通过采集和分析数字
种子图像,快速和无损地评价种子可行性。
这种方法有可能提供关于
种子生存能力的客观和定量数据。
分子方法,包括DNA和RNA分析,是一种独特的方法,通过确定与种子发芽和振动有关的遗传标记来评
估种子的可行性。
通过将这些新颖技术与传统方法相协调和整合,研
究人员可以制定更可靠和更全面的方法来确定种子的可行性。
大小麦种子生活力和发芽率快速测试方法

大小麦种子生活力和发芽率快速测试方法夏收期间,有些地区会遭受了梅雨、暴雨和特大暴雨袭击,这给夏熟大小麦选留种带来极大困难。
因此及时做好麦种速测,做到心中有数,尤为重要。
麦种发芽需经过一段休眠期,特别是大麦种子,休眠期长达三个月左右。
这主要是种子内脱落酸含量较高,只有当脱落酸含量降低时,麦种才能解除休眠。
一、红墨水快速测定法:
1、常用红墨水稀释1:500倍液,将需测定的大麦种子用刀片纵切,取带有种胚的一半漫于红墨水液中,浸泡半小时左右,用清水冲洗后逐粒检查,凡是有生活力的种胚处无红色反应,仍呈白色,其它部分都染成红色,而无生活力的种子无论胚或胚乳部分都被染红,依据种胚的着色与否判断麦种有无生活力。
2、在采用红墨水测定的过程中,将麦种预先用清水浸泡12小时,再纵切染色,可提高测定效果,浸泡染色时间仅需10分钟。
同时由于经过了预先浸泡,经红墨水染色测定后,该半粒种子可继续留下保湿培养,观察其发芽情况,3-4天后就可得出发芽率结果;而且这一方法测定发芽率还不易受霉菌污染。
二、赤霉素快速测定法:
用赤霉素打破种子休眠期,直接速测其发芽率。
将市售小包装赤霉素配成20ppm 的溶液(即20毫克赤霉素加水1000 毫升),将备好的大小麦种子浸人药液内,并置于冰箱,在5°C条件下浸泡24小时后,取出按常规发芽方法,每个培养皿放麦种10粒并保湿,在25°C室温下经1-2天后胚根、胚芽萌动,3-4天内就能迅速确定麦种的发芽率。
种子活力的快速测定(实验五)

八、作业
1、比较TTC法与红墨水法两种测定方法的优缺 点。 2、列表格比较两种方法测定的玉米与小麦的新 种与陈种的测定结果。
二、实验原理(红墨水法)
凡生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物 质的能力,而死的种胚细胞原生质膜丧失 这种能力, 于是染料便能进入死细胞而染色。
二、实验原理(TTC法)
有活力种胚中的脱氢酶可以将2,3,5—氯化三苯基
四氮唑 (TTC)还原成不溶性的红色三苯基甲月替 (TTF),如果种胚死亡或种胚生活力衰退,则不 能染色或染色较浅,因此,可以根据种胚染色的部 位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力。
三、器材与试剂
恒温箱,培养皿,刀片,烧杯,镊子, 5%红墨水,0.5%TTC。
四、实验材料
玉米、小麦等种子
五、方法与步骤
1.浸种 将待测种子在30~35℃ 温水中浸种(大麦、小 麦6 h,玉米5 h小时左 右),以增强种胚的呼 吸作用。
2.染色观察
①
已洗胀的种子
沿胚中线切割成两半 ②
③
5%或0.5%TTC红墨水染色30~60 min
了解几种快速测定种子活力的方法,掌握红 墨水染色法和TTC法。
种子活力
种子活力是指种子的健壮度,包括迅速、整齐萌发 的发芽潜力、生长潜力。 种子活力的大小取决于遗传基础和发育状态,当种 子成熟时,活力水平达到高峰,随后在采收、加工、 贮藏过程中,种子会发生不同程度的劣变,引起活 力的衰退,进而在播种时,直接影响农作物的产量。 快速测定种子活力可以及时的鉴定种子的健壮度, 对是否还具有发芽的潜力及其使用价值作出尽可能 切合实际的判断。
实验三种子生活力测定

进行实验操作
种子处理
对种子进行适当的处理,如消毒、催芽等,以准备进行生活力测定。
实验操作
按照实验要求,对种子进行染色、培养等操作,观察种子的萌发情况。
记录实验数据
数据记录
详细记录每个种子样本的萌发情况, 包括萌发时间、萌发率等。
数据整理
对实验数据进行整理和分析,得出种 子生活力的结论。
04
实验结果与分析
实验收获与体会
实验收获
通过实验三,我们学会了使用染色法测定种子的生活力,掌握了种子萌发的原理和影响因素,了解了种子质量对 农业生产的重要性。
实验体会
实验过程中,我们深刻体会到了科学研究的严谨性和细致性,明白了种子生活力测定的实际意义和应用价值,增 强了我们对农业科学研究的兴趣和信心。
对实验的改进建议
掌握测定种子生活力的方法
01
常用的测定方法有:染 色法、发芽试验法和电 导率法等。
02
染色法是通过染色剂对 种子进行染色,根据染 色结果判断种子是否具 有生活力。
03
发芽试验法是将种子置 于适宜的发芽条件下, 观察其发芽情况,计算 子的电导率来间接反映 种子的生活力。
实验结论总结
实验结论
根据实验结果和分析,得出种子生活力的测定结论,包括发芽率、 发芽速度、幼苗生长状况等方面的评价。
实验意义
阐述实验对于农业生产的重要意义,如指导种子选择、提高种植效 益等。
实验不足与展望
指出实验存在的不足之处,并提出改进和进一步研究的方向,为后 续研究提供参考和借鉴。
05
实验总结与展望
实验三种子生活力测 定
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 实验总结与展望
实验 植物种子生活力快速测定 (1)

实验十一植物种子生活力快速测定一、实验目的掌握植物种子生活力检测的基本原理及快速鉴定植物种子生活力的方法。
二、实验原理种子活力是决定种子在发芽和出苗期间的活性强度和种子特性的综合表现(指田间条件下的出苗能力及与此有关的其他特征和指标),种子生活力是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力(通常指一批种子中具有生命力种子数占种子总数的百分率)。
种子贮藏过程中必须维持种子是有活力的,因此定期进行生活力和活力的检测是非常重要的。
测定种子生活力方法常用发芽率测定法,该法是指在最适宜的条件下,在规定天数内发芽的种子占供试种子的百分数。
它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据,与播种时的用种量直接有关。
但是常规方法(直接发芽)测定种子发芽率所需的时间较长,对于处于深休眠状态的种子,几乎难于应用。
特别是有时为了应急需要,没有足够的时间来测定种子发芽率,所以有必要根据种子的生理特性建立起一套快速测定种子生活力的方法。
红墨水染色法凡是生活的活细胞的原生质膜都具有选择吸收能力,它对某些染料不让透过,因此用这类染料(如红墨水、酸性靛蓝等)不能使种胚染色。
而死种子的胚细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,于是染料进入死细胞,将胚完全染色。
因此,可根据种胚或子叶对染料的着色情况判断种子的发芽率。
三、实验材料小麦种子、大麦种子、籼稻种子、玉米种子、粳稻种子、蚕豆种子、大豆种子。
四、设备与试剂恒温箱,培养皿,烧杯,镊子,刀片,紫外荧光灯,滤纸(无荧光),琼脂,沸水。
5%红墨水:市售红墨水5 mL加95 mL自来水。
五、实验步骤1.红墨水染色法将待测种子在30~35℃温水中浸种(小麦、大麦、籼稻种子6~8h;玉米种子5 h 左右;粳稻种子2 h),以增加种胚的呼吸速率,使显色迅速;取吸胀的种子200 粒,沿种子胚的中心线纵切为二半,将其中的一半置于红墨水培养皿中5~10 min;用红墨水染色后,倒去废液,用水冲洗多次,至冲洗液无色为止,并检查种子死活。
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植物生理学小论文三种常用检测种子生活力方法的比较班级:09级生物技术2班学号: 20091052258系别: 化学与生命科学系姓名: 孙雪婷日期:2012年5月15日浅谈三种常用检测种子生活力的方法孙雪婷(楚雄师范学院化学与生命科学系楚雄675000)[摘要] 种子活力是种子最重要的生理及生产指标之一,近年来,无论在育种选种方面还是植物生理实验方面都得到广泛关注。
本文基于对种子活力的概念、影响种子活力的因素和种子活力快速测定的最新研究进展为基准, 对TTC法、BTB法及红墨水染色法三种常见种子活力快速检测方法进行了简要综述。
结论:四氮唑染色法是蔓荆子种子生活力测定的最佳方法,生活力与发芽率呈显著的正相关。
关键词:种子活力;TTC法;BTB法;红墨水染色法;研究进展The discussion on three kinds of methods todetect seed vigorSUN-xueting(Chuxiong normal university,chuxiong,yunnan675000,China)Abstracts: The seed vigor is the most important physiological and seed production indexes. In recent years,No matter in selecting seeds breeding or in plant physiology experiments. The seed vigor is widely mentioned This paper based on the concept of the seed vigor influence factors of the seed vigor and the seed vigor rapid determination of the latest research progress Comparition of three kinds of methods to determine seed vigor.Keywords: seed vigor ;Triphenyl Tetrazolium Chloride method;Bromo—thymol blue method; red ink method;research progress种子生活力是检测种子质量最重要的指标之一,它对于种子的发育,萌发,成熟以及成长为植株的潜在能力具有十分紧密的联系。
对于科学选种,快速预测种子的利用价值也具有重要的意义。
快速检测种子生活力的方法很多,但生产实验及植物生理实验中常用的主要有氯化三苯基四氮唑(TTC)法、溴麝香草酚蓝(BTB)法和红墨水染色法。
这三种方法都能快速测定种子的正常生理代谢功能是否受到损害,胚是否存活,以了解种子是否还具有发芽的潜力。
种子生活力(seed viability)是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力,通常是指一批种子中具有生命力(即活的)种子数占种子总数的百分率。
早在1876年种子学的创始人Nobbe(德国)[1]就指出在同一批种子内存在个体间发芽和幼苗生长速度的差异,并且不同种子批的平均值通常也不同。
他将这种现象称为生长力(triebkraft),意为推动力(driving force)。
1950年在国际种子协会(ISTA)[1] [2]的年会上首次讨论了种子活力测定这一概念。
此次会议对发芽试验和幼苗活力的测定方法取得了一致意见:发芽试验一般应在无机发芽床上、适宜的条件下进行;而某些特殊试验,如土壤试验、砖砾试验则称为活力测定(Franck,1950)。
[2]尽管如此,长期以来对种子活力的定义仍不统一,因为种子活力不像发芽率那样是一个单一的质量指标,而是描述若干特性的概念,不同学者对于种子活力的定义仍然有分歧。
通过长达1/4世纪的争论,直到1977年,才在国际种子检验协会(ISTA)的代表大会上通过了种子活力的定义(Perry,1978)[2],即“种子活力是决定种子或种子批在发芽和出苗期间的活性水平和行为的那些种子特性的综合表现。
种子表现良好的为高活力种子”[2]。
高活力种子具有生产优越性。
对于农业生产而言种子的好坏是其根本,保证种子的优良性的前提下才可能高产高收。
高活力的种子其出苗率更高,及时迅速的测得种子活力有利于选种,为提高产量打下前提。
高活力的种子其生命力更加顽强,抵御不良环境的能力也更强。
如遇到干旱,高活力种子适当深播,便可吸收足够的水分而萌动发芽,由于其储备了更丰富的营养物质,所以植株成活的可能性更大,而低活力种子则在深播情况下无力顶出土面更无足够的养分支撑其呼吸作用等新陈代谢活动。
又如在多雨或土壤私重的地区,土壤容易板结,高活力种子同样有足够力量顶出土面,而低活力种子则不能抵抗不良条件很难发芽。
高活力的种子对病虫害的抵御能力更强,具有更高的竞争力。
高活力的种子抗寒力更强,如一些需要早播的作物,高活力种子储备了更丰富的供其自身生长萌发的营养物质,故对早春低温条件具有抵抗能力,可适当提早播种。
早播对于提高产量增加收入有很重要的帮助。
在果蔬供应锐减的冬季或者早春,如果提前上市,明显可以大大增加收益。
增加作物产量高活力种子不仅可以全苗壮苗,且可提早和增加分靡及分枝,增加有效穗数和果枝,因而可以明显增产。
据美国对大豆、玉米、大麦、小麦、燕麦、葛芭、萝卜、黄瓜、南瓜、青椒、番茄、芦笋、蚕豆等 14 种作物的统计资料,高活力种子可以增产20%-40%。
[3]对于叶菜类和根菜类等蔬菜作物及牧草作物,因为不必收获它们的种子,高活力种子长出幼苗及营养器官均较快速,增产作用则更为明显。
[7]1 材料与方法1.1 材料玉米种子(Zea maysL.)1.2 试验方法1.2.1TTC法将随机购买的种子分四组编号后,在室温下浸泡4小时前处理,沿果实顶端约纵轴长度1/5处横切,使露出果实的四室,然后沿与纵轴成30°角斜切种子以暴露出种胚,放入盛有四氮唑溶液的培养皿中。
在20℃-30℃下染色,四氮唑的浓度分别为0.1%、1%两个水平(用磷酸缓冲液配制2,3,5-氯化三苯基四氮唑溶液,pH 6.5-7.5),染色时间为15min。
染色后根据胚着色程度和部位鉴定种子的生活力,计算有生活力种子的百分率。
每个处理设1组重复,每次重复用50粒。
1.2.2红墨水染色法将随机购买的种子分四组编号后,每批随机分为两组,一组用沸水煮10min,作为空白对照(死种子),一组直接染色。
红墨水浓度为5%(1ml的红墨水加19ml 的蒸馏水),染色时间分别为30min。
染色完毕后,用自来水冲洗5次,根据胚着色程度部位和空白对照来鉴定种子的生活力,计算有生活力种子的百分率。
每个处理设4次重复,每次重复用50粒。
1.2.3BTB法随机购买的种子分四组编号后,每批随机分为两组,一组用沸水煮10min 至灭活,作为空白对照,一组浸泡于蒸馏水中12h。
然后分别把种子整齐的包埋于备好的0.1%的BTB琼脂凝胶中,在30℃恒温条件下,2h后观察种子周围出现的黄色晕圈情况,出现晕圈表明有活力。
每个浓度水平设1次重复,每次重复用50粒。
2 结果与分析2.1生活力的测定结果表明,生活力测定最佳条件为TTC浓度为1%,染色的最佳温度为30℃,时间为30min。
红墨水法最佳的染色条件为:30℃,染色0.5小时.采用BTB法得到的黄色晕圈比较明显,但死种子和活种子间没有显著性差异。
分别测得玉米种子的生活力见表2。
表1 同一生活力测定四次重复间的最大容许差距Table 1 life with activity assay four times the maximum allowed gap between repeated平均生活力最大容许差距5O%以上50%以下99 2 598 3 697 4 796 3 895 6 993~94 7~8 1091—92 9~10 1189—90 11~12 1287~88 13~14 1384— 86 15~17 1489~90 18~2O 1578~80 21— 3 1673—77 24一 8 1767~72 29~34 1856--66 35~45 1951~55 46~50 20表2 四种检测玉米种子生活力的实验结果(%)Table 2 four detection of corn seed life force of the experimental results (%)TTC法BTB法红墨水生活力方法第一组96 90 100第二组96 92 100第三组96 91 98第四组96 91 98平均值96 91 992.2 结果表明:同一批种子所测得的种子生活力测定方法中以红墨水法高于TTC法。
3.结论与讨论通过对种子活力的概念、影响种子活力的因素和种子活力快速测定的相关文献的查阅及了解, 快速测定其活力的的三种方法即TTC法、BTB法及红墨水染色法原理及相关步骤的介绍和对比,可以看出三种方法对于种子活力的测定中实验材料的选择都具有一定局限性,如TTC 法一般适用于收获后需马上播种的种子、具有深休眠的种子、发芽缓慢的种子等[10],BTB法则更适用于个头较大的种子[11],红墨水染色法和TTC法选种的要求一样[9]TTC法与其他法比较,测定结果准确率比较高,并且能分辨出种子生活力的强弱。
但是价格昂贵,进口分装的TIC每l0 g一般要100—200元不等;TTC法除夏季不需要保温箱外,温度低于25℃时要放在温箱里保温一段时间。
[12]BTB法对于琼脂凝胶层软硬厚薄要求较高、琼脂浓度也要适当,否则测定结果偏低。
琼脂浓度过大过小都不适宜[13],浓度过大则琼脂凝胶层较硬,种子插进去时凝胶层容易出现裂缝,呼吸放出的C02气体容易跑掉,这样会延长试验的时间;浓度过小则造成凝胶层稀软,不容易支撑起个头较大的种子,从而影响试验效果。
红墨水法:此方法不需要设备和特殊药品,此方法由于该染料市场上容易买到,价格便宜,且具有对种子的毒性小、染色速度快、染色后的废液对环境污染小等优点,所以是一种既经济环保,又简便易行的测定方法。
但是,由于红墨水法的原理是染料能进人种子的死细胞而使其着色,因此,若在试验中不小心划伤种子的表面,也会使其被染上色,使其值偏高。
从结果中可以看出,红墨水中染色的是没有生活力的胚分成有生活力和无生活力两类。
注意有些种子在种胚或种子,而TTC则与红墨水完全相反,染色的是有生活力的胚乳上呈现未着色斑色,表明是一些坏死的组织,判断这种子。
所以对每种种子的最终的种子生活力的测定则可以样的种子有无生活力的主要标准是看坏死组织的部位和以TTC中各种子的染色率为准。