花生分离蛋白复合酶水解工艺优化研究
花生蛋白水解条件的优化研究
ｏ ｐｔ ｉ ｍｉ ｚ ｅ ｄ．
ａ ｎｄ ｔ ｈｅ ｈｙ ｄｒ ｏ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｃ ｏｎｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏｆ ｐ ｅ ａ ｎ ｕｔ ｐｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｉ ｓ ｍｏ ｓ ｔ ｌ ｙ
白的 最佳 水解条件 是 ： 温度 为 ５ ４ ． ７℃ ， 底物浓度 为 ４ ， 酶用量 为 ０ ． ９ ４ ３ ， 水解 时间为 １ ６ ７ ｍｉ ｎ ， 在 此条件 下三 氯 乙酸沉淀后 可溶 性 氮的得 率 为 ８ ７ ． ８ ６ ， 花 生蛋 白的水解条 件得 到较好 的优化 结 果 。 关键词 ： 花 生肽 ；酶解 ；可溶 性 氮得 率 中图分 类号 ： Ｔ ￥ ２ ０ １ ． ２ １ 文献标 识码 ： Ｂ 文章编 号 ： １ ６ ７ ２ —５ ０ ２ ６ （ ２ ０ １ ３ ） ０ １ —０ ０ ２ ８ —０ ５
ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｅ ｍｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｕｒ ｅ，ｓ ｕ ｂｓ ｔ ｒ ａ ｔ ｅ ｃ ｏｎ ｃ ｅ ｎｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ，ｅ ｎｚ ｙ ｍｅ ｄ ｏｓ ａ ｇ ｅ ａ ｎｄ ｈｙ ｄ ｒ ｏ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｔ ｉ ｍｅ ｗｅ ｒ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ Ｏ ｃ ａ ｒ ｒ ｙ
Ｏｐ ｔ ｉ ｍａ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ｏ ｎ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｃ ｏ ｎ ｄｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｐ ｅ ａ ｎｕ ｔ ｐｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ
Ｐ ｅ ｉ Ｊ ｉ ａ ｎ ｈ ｕ ｉ ，Ｐ ｅ ｉ Ｙｕ ｎ ｓ ｈ ｅ ｎ ｇ ，Ｍａ Ｂｏ ，Ｌ ｉ Ｄｅ ｍｉ ｎ ｇ
水酶法提取花生蛋白质的研究
水酶法提取花生蛋白质的研究芮 闯,侯彩云,刘 莹,安 瑜(中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083)摘 要:利用水酶法提取花生中的蛋白质,对酶种类、固液比、酶用量、pH值、酶解温度、时间等影响因素进行了系统的研究。
确定了优化的提取工艺条件:酶制剂为Alcalase碱性蛋白酶,固液比为1∶6,酶添加量(E/S)为6%,碱提pH值8.5,酶解温度为65℃,酶解时间为150min。
在此提取条件下,8种不同品种花生的蛋白得率存在着差异,以白沙最高,花育16最低。
关键词:花生;水酶法;不同品种;蛋白得率中图分类号:TS201.2+1 文献标识码:A 文章编号:1007-7561(2009)04-0022-04Study on extracting protein from peanut by aqueous enzymatic extractionRUI Chuang,H OU Cai2yun,LI U Y ing,AN Y u(C ollege of F ood Science and Nutrition Engineering,China Agricultural University,Beijing 100083)Abstract:Protein was extracted from peanut.The influencing factors such as varieties of enzymes,s olid-liq2 uid ratio,the am ount of enzyme,pH value,tem perature and time were studied.The optimum process condi2 tions were as follows:Alcalase as enzyme preparation,s olid-liquid ratio1∶6,the am ount of enzyme6%(E/ S),alkaline extraction of pH8.5,tem perature65℃,enzyme reaction time150min.Under these conditions, the protein yield of8different variety of peanut were different,that was bai sha the highest and hua yu16the lowest.K ey w ords:peanut;aqueous enzymatic extraction;different variety;protein yield 花生是世界上主要的植物油料之一,约占世界油料年产量的14%[1]。
酶法改性花生分离蛋白的研究
酶法改性花生分离蛋白的研究张兆丽【期刊名称】《潍坊工程职业学院学报》【年(卷),期】2015(000)002【摘要】以氮溶解指数（ NSI）为指标，研究酶法改性对花生分离蛋白功能特性的影响。
结果表明，碱性蛋白酶改性的最佳条件为酶添加量0．50％、底物浓度5％、酶解时间120min，NSI值为79．6％。
改性后，花生分离蛋白的吸水性、乳化性得到不同程度的提高。
%The effects of enzymatic modification on functionality of peanut protein isolate ( PPI ) in nitrogen solubility index ( NSI) as index was studied.The results showed that the optimum condition of hydrolysis with alka-li proteinase was adding amount of enzyme 0.50%, substrate concentration 5%, duration time 120 Minutes, NSI value79.6%.The water absorption and emulsifying capacity of PPI were all improved to different extent after enzy-matic modification.【总页数】3页(P84-86)【作者】张兆丽【作者单位】潍坊工程职业学院，山东青州 262500【正文语种】中文【中图分类】TS201.2【相关文献】1.酶法改性大豆分离蛋白最新研究进展 [J], 程云龙;管军军;李世豪2.白木通籽分离蛋白酶法改性及功能性质研究 [J], 史卿;杜研学;熊华;赵强;胡居吾;钟红兰;阮霞3.酶法改性大豆分离蛋白成膜条件的研究 [J], 王昊;张东杰4.酶法改性花生分离蛋白的研究 [J], 张兆丽;5.大豆分离蛋白酶法改性研究进展 [J], 臧学丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
复合酶法水解花生粕制备抗氧化肽的工艺优化
复合酶法水解花生粕制备抗氧化肽的工艺优化
刘红梅;师广波;李向东;孙中涛
【期刊名称】《北京工商大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2014(032)003
【摘要】以DPPH自由基清除率和收率为响应值,采用响应面法对复合酶法水解花生粕生产抗氧化性肽工艺条件进行了优化.研究结果表明,碱性蛋白酶和中性蛋白酶对花生粕具有较强的水解能力,二者以2∶1的比例对花生粕水解时,较优水解条件是50℃,pH值8.54,底物质量分数8.34％.在此条件下酶解16h,花生肽收率为65.80％,在花生肽质量浓度为0.55 mg/mL时,对DPPH自由基清除率为25.77％,与优化前相比,复合酶比碱性蛋白酶单酶水解时收率和DPPH自由基清除率分别提高了7.48％和7.66％,比中性蛋白酶单酶水解时分别提高了10.29％和22.53％.【总页数】6页(P59-64)
【作者】刘红梅;师广波;李向东;孙中涛
【作者单位】山东农业大学生命科学学院,山东泰安271018;山东农业大学生命科学学院,山东泰安271018;山东农业大学农学院,山东泰安271018;山东农业大学生命科学学院,山东泰安271018
【正文语种】中文
【中图分类】TS229
【相关文献】
1.复合酶水解乳清蛋白制备抗氧化肽的工艺优化 [J], 张萍;陈合;廖娜
2.超声波-复合酶耦合法制备花生粕抗氧化肽研究 [J], 马利华;宋慧;陈学红;陈铎
3.复合酶法水解花生粕制备抗氧化肽的工艺优化 [J], 刘红梅;师广波;李向东;孙中涛;
4.酶法水解花生粕制备蛋白饮料和蛋白粉 [J], 莫琪
5.复合酶酶解乳清制备抗氧化肽的工艺优化及应用 [J], 沈荷玉;蒋莹;唐婉婷;姜荣杰;周可强;李辰凤;李诚
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响应面优化超声波辅助水酶法提取花生蛋白工艺
响应面优化超声波辅助水酶法提取花生蛋白工艺引言：花生蛋白是一种重要的植物蛋白质，具有广泛的应用价值。
传统的花生蛋白提取工艺通常采用机械破碎和化学法，在花生蛋白品质和环境保护方面存在诸多不足。
近年来，超声波辅助水酶法逐渐成为一种快速、高效、环保的花生蛋白提取方法。
本文旨在通过响应面优化方法，研究超声波辅助水酶法提取花生蛋白的最优工艺。
材料与方法：材料：生花生，酶（蛋白酶），超声波处理设备。
方法：1. 花生研磨：将生花生去壳、破碎，并用50%乙醇提取去除油脂。
2. 酶解条件优化：采用中心复合设计法，探究酶解温度、时间、液料比对花生蛋白提取率的影响。
3. 超声波处理工艺优化：根据酶解条件优化结果，选取影响最显著的三个因素，即酶解温度、酶解时间和液料比，通过响应面优化方法，得到超声波处理条件下的最优参数组合。
4. 蛋白质含量和氨基酸组成分析：测定花生蛋白提取液中蛋白质含量和氨基酸组成，评价超声波辅助水酶法的提取效果。
结果与讨论：1. 酶解条件优化：酶解温度为50℃，酶解时间为3.5h，液料比为1:15，花生蛋白提取率最高，为84.23%。
2. 超声波处理工艺优化：响应面分析结果表明，酶解温度、酶解时间和液料比对花生蛋白提取率的影响均达到显著水平，且三者之间有交互作用。
在响应面优化得到的最优参数组合下，花生蛋白提取率达到89.37%。
3. 蛋白质含量和氨基酸组成分析：超声波辅助水酶法得到的花生蛋白质含量为79.61%，氨基酸组成分析结果表明，花生蛋白中含有丰富的必需氨基酸和大量的谷氨酸。
结论：本研究通过响应面优化法，成功优化了超声波辅助水酶法提取花生蛋白的最优工艺，使得花生蛋白提取率显著提高，提取效果得到了有效改善。
同时，花生蛋白中的蛋白质含量和氨基酸组成也得到了充分保证，为花生蛋白的广泛应用提供了理论和实践基础。
Viscozyme L预处理花生粕提取花生浓缩蛋白的研究
Viscozyme L预处理花生粕提取花生浓缩蛋白的研究于丽娜;齐宏涛;彭娅萍;杨伟强;孙杰;张初署;毕洁;王明清【摘要】为了优化复合植物水解酶(Viscozyme L)预处理花生粕结合乙醇洗涤法制备花生浓缩蛋白的工艺条件,以花生粕为原料,采用单因素实验和响应面实验设计方法,研究花生浓缩蛋白制备工艺条件对蛋白质量百分含量和提取率的影响.结果表明,Viscozyme L预处理花生粕结合乙醇洗涤法制备花生浓缩蛋白的最优工艺参数为:酶添加量6.1 FBG/g、pH值4.2、酶解温度43℃、酶解时间4.5 h,在最佳工艺条件下,蛋白的质量百分含量和提取率验证实验值分别为73.21％±0.59％和85.23％±0.67％,两者与模型预测值的差异均小于1％.为进一步开发利用花生粕提供了一种新途径.【期刊名称】《粮油食品科技》【年(卷),期】2019(027)001【总页数】7页(P34-40)【关键词】Viscozyme L;预处理;花生粕;乙醇洗涤;花生浓缩蛋白【作者】于丽娜;齐宏涛;彭娅萍;杨伟强;孙杰;张初署;毕洁;王明清【作者单位】山东省花生研究所,山东青岛266100;青岛大学生命科学学院,山东青岛266071;山东省花生研究所,山东青岛266100;山东省花生研究所,山东青岛266100;山东省花生研究所,山东青岛266100;山东省花生研究所,山东青岛266100;山东省花生研究所,山东青岛266100;山东省花生研究所,山东青岛266100【正文语种】中文【中图分类】TS229花生是一年生草本植物，榨油后的花生粕含有约50%的蛋白质[1]，是一种优质的植物蛋白资源，可直接应用到肉制品、面制品的生产中，但其附加值较低。
通过一些提取、分离和改性技术，从花生粕中获得花生浓缩蛋白[2]、分离蛋白[3]、功能性蛋白肽[4]、磷酸化改性花生蛋白[5]等高附加值的蛋白产品，进而拓宽花生粕的应用领域。
花生分离蛋白提取工艺优化研究
碱液浸提花生蛋白粉过程中控制体系的温度 40℃、 料液比 1:10(g/mL)、浸提时间 90min，设置不同 pH 值的 碱液。实验前测得实验用花生蛋白粉溶于水显酸性，蛋 白粉溶于 pH 值小于 10.5 的碱液时，显弱碱性或中性， 不会使蛋白变性。碱液 pH 值对花生分离蛋白制备的影 响结果见图 2。花生蛋白主要成分是花生球蛋白和伴花 生球蛋白，还有 10% 左右的清蛋白。全部的球蛋白和 清蛋白都可溶于稀碱溶液中，蛋白质溶解度随 pH 值升 高而增大，蛋白质溶出增多。从图 2 可知，随着碱液 pH 值增加，蛋白纯度及提取率都呈增加的趋势，其中 pH10 时蛋白提取率最高，而蛋白含量在 pH9 时趋于稳 定。综合考虑两评价指标的最佳 pH 值，选取 pH9、9.5、 10 继续做响应面分析以确定最佳的碱液 pH 值。
摘 要：采用碱提酸沉方法从脱脂花生蛋白粉中提取花生分离蛋白，在单因素试验的基础上，应用响应面法优化 花生分离蛋白的提取条件。结果表明：浸提时间和碱液 pH 值对提取的花生分离蛋白纯度都有显著影响，且呈非 线性关系，最佳提取工艺参数为浸提时间 131min、浸提温度 50℃、碱液 pH10、料液比 1:12(g/mL)。在此条件 下，花生分离蛋白的纯度为 95.05%、提取率 71%。响应面法对花生分离蛋白提取条件的优化是可行的。 关键词：花生蛋白粉；花生分离蛋白；碱提酸沉；响应面法
(1. College of Chemistry and Chemical Engineering, Shihezi University, Shihezi 832003, China； 2. Shandong Peanut Research Institute, Qingdao 266100, China；3. Committee on Agriculture of Linyi, Linyi 276000, China；
复合酶解蛋白质工艺在食品工业中的应用及研究进展分析
复合酶解蛋白质工艺在食品工业中的应用及研究进展分析作者：姚玉芳徐凌云来源：《中国食品》2021年第19期复合酶水解技术普遍用于对蛋白质、多糖以及食物中各种纤维素等物质的水解过程，作为一种比较先进、高效的蛋白质水解技术，复合酶解蛋白质工艺在食品工业中的应用非常广泛，比如食品的生产与研发，特别是针对食品中各种蛋白质的加工以及资源利用等。
复合酶解蛋白质工艺简单高效，可以生产出相对分子质量很小的活性肽，具有抗氧化、降血压、抗肿瘤等功效，对人体健康极为有益，是食品领域非常热门的一项研究技术。
通过复合酶解蛋白质工艺，可以更加深入地丰富功能性活性物质种类库，对传统落后的工艺实施相应的改良，从而不断提升食品工业的生产效率以及生产质量，并且可以实现资源的回收利用，减少浪费，节约成本。
本文主要分析复合酶解蛋白质工艺在动物、植物以及藻类等不同性质的蛋白质物体当中的研究现状，并对该项技术在食品工业中的应用以及未来的发展方向等进行探讨。
一、复合酶解蛋白质工艺在动物来源蛋白质中的应用1.畜牧类。
羊骨中含有非常多的胶原蛋白，对于人体有着养颜美容之功效。
传统加工方式所提取的胶原蛋白份量是非常少的，因为胶原蛋白水解率比较低，这就产生了很大的资源浪费。
应用复合酶解蛋白质工艺，酶水解羊骨粉，水解度比较大，多肽得率也就比较高，因此非常适用于对羊骨粉的深加工生产。
王钰慧等将羊骨粉作为食品原料，利用复合蛋白酶技术和风味蛋白酶技术实施双酶水解，同时针对同步水解以及顺序水解所产生的功效进行了比较，结果表明，同步水解的多肽生成量以及短肽得率比单酶水解、顺序水解的多肽生成量要高得多，最高可以达到87.13mg/g和57.24%。
除此之外，对动物的脑组织实施水解而得到的脑蛋白水解物，对于人体的系统发育、生理发育以及神经损伤的恢复都有着非常良好的效果。
2.海洋动物类。
海洋中的物种丰富多样，这些动物资源也给人类提供了非常多的功能活性物质。
研究人员采用复合酶水解技术，对海洋生物的蛋白质实施水解工艺，提取到了非常丰富的生物活性物质。
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试剂． １ ． ２ 主 要 仪 器 与 设 备
蛋 白酶 具 有 底 物 专 一 性 ， 为 了 得 到 较 好 的 水 解
Ｖ０ １ ．３１ Ｎｏ． ３ Ｍａ ｖ ２０１ ３ １ ７
引用格式 ： 许均 华 ， 李 高 阳．花 生 分 离 蛋 白复 合 酶 水 解 工 艺 优 化研 究 ．食 品科 学 技 术 学 报 ， ２ ０ １ ３ ， ３ １ （ ３ ） ： １ ７— ２ ４ ．
ＸＵ Ｊ ｕ ｎ— ｈ ｕ ａ，ＬＩ Ｇａ ｏ － ｙ ａ ｎｇ ． Ｏｐｔ ｉ ｍｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｐ ｅ ａ ｎｕ ｔ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｔ ｅ ｃ ｈｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｂ ｙ ｍｕ ｌ ｔ ｉ — ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ ．Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎａ ｌ ｏ ｆ Ｆ ｏ ｏ ｄ
１ ． ３ 实 验 方 法
１ ． ３ ． １ 水 解 度 的 测 定
目前 ， 蛋 白功 能 肽 的 开 发 已 成 为 一 个 研 究 热
点 ， 但花 生分 离 蛋 白肽 研 究 很 少 ．本 研 究 探 讨
不 同蛋 白酶其 最适 酶 解 条 件 下 的 水解 能力 ， 比较 其
清除 Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ 自由基 能 力和水 解 度 （ Ｄ Ｈ） 的相关性 ， 确 定 复合 酶 的组成 ．根据 酶水 解原 理 和 响应 面 统计 法
Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ，２ ０ １ ３， ３ １ （ ３ ）： １ ７—２ ４ ．
花 生 分 离 蛋 白复 合 酶水 解 工 艺优 化 研 究
许 均 华 ， 李高 阳 ，
（ １ ．中南 大 学 隆 平分 院 ， 湖南 长沙
研 究花 生 分离蛋 白酶 水 解 制备 抗 氧化 肽 ， 为花 生 分
离 蛋 白开发 利用 提供 参考 ．
１ 材 料 与 仪 器
１ ． １ 材 料 花 生 分离 蛋 白 ， 实验 室 自制．碱 性 蛋 白酶 Ａ ｌ ｃ ａ 一
水解 度 （ ｄ ｅ ｇ ｒ ｅ ｅ ｏ ｆ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ， Ｄ Ｈ） 测 定方 法 同参
湖南 长沙 ４ １ ０ １ ２ ５ ； ２ 湖 南 省 农 产 品 加 工研 究 所 ， ４ １ ０ １ ２ ５ ）
摘 要 ：探讨 了超 声 波辅 助前 处理 对花 生分 离蛋 白复合酶 解 的影响 ， 比较 了碱 性 蛋 白酶 、 木瓜蛋白 酶、 胰 蛋 白酶 、 胃蛋 白酶 、 中性 蛋 白酶 、 风味 蛋 白酶 等 六种 蛋 白酶 解物 清除 Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ 自由基 的 效果 ， 确 定碱性 蛋 白酶 和胰 蛋 白酶较 佳 的复合 比例 为 ８ ： ２ ．在 此基 础 上 ， 开展 响应 面优 化 试 验 ， 以Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ自 由基 清除 率和 水解度 为指 标 ， 探 讨 复合 酶 与风味 蛋 白酶 酶解 的较佳 工 艺参数 ， 并 分析 Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ 清 除率 和 水 解度相 关性 ．实 验 结 果 表 明 ， 复合 蛋 白 酶 制 备 花 生 分 离蛋 白抗 氧 化 肽 的 较 佳 酶 解 工 艺 为
ｌ ａ ｓ ｅ 、 固体 木 瓜 蛋 白酶 Ｐ ａ ｐ ａ ｉ ｎ （ Ｓ ）、 中性 蛋 白酶 Ｎ ｅ ｕ —
ｔ ｒ ａ ｓ ｅ 、 风 味蛋 白酶 Ｆ ｌ ａ ｖ ｏ ｒ ｚ ｙ ｍｅ 、 胃蛋 白酶 、 胰 蛋 白 酶
均 为 基 苦 基 苯
效果 ， 采 用 复 合 酶 进 行 水 解 在 实 际 生 产 中具 有 现 实意义．
Ｈ Ｈ一 ￥ ２ ６型恒 温水 浴锅 ， 北京 科伟 永兴 仪器 有 限 公司； Ａ ｖ ａ ｎ ｔ ｉ Ｊ 一 ２ ６ Ｘ Ｐ型冷冻 离 心 机 ，美 国贝 克 曼有
限公 司 ； ７ ７ ５ ０ ０ ３ １ Ｆ ｒ ｅ ｅ Ｚ ｏ ｎ ｅ型 ４ ． ５ Ｌ冷冻 干 燥 机 ， 美 国 Ｌ ａ ｂ ｃ ｏ ｎ ｃ ｏ有 限公 司 ； Ｕ Ｖ 一 １ ７ ０ ０型紫 外 可见 分 光 光 度计 ， １ ３本 岛津 分 析 仪器 厂 ；Ｄ ｅ ｌ ｔ ａ ３ ２ ０型 ｐ Ｈ酸 度 计 ， 瑞 士梅特 勒 一 托利 多集 团 ．
用 花 生 分 离 蛋 白制 备 抗 氧 化 活 性 肽 的 方 法
很多 ， 制备途径 主要有酸碱 水解 法 、 生物 合成法 、 微生物发 酵法 、 酶 解 法 ¨。 ．因 为 酶 解 法 价 格 低 廉， 易进行 、 易控 制 、 易分 离 ， 安 全 性 高 而 受 到 广 泛 关 注 ．由于 花 生 分 离 蛋 白分 子 结 构 致 密 ， 且
第３ １ 卷 第 ３期
２ ０ １ ３年 ５月 文章编号 ： ２ ０ ９ ５ — ６ ０ ０ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ － ０ ０ １ ７ — ０ ８
食 品 科 学 技 术 学 报
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｆ ｏ ｏ ｄ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ
ｐ Ｈ ８ ． ５ ， 温度 ４ ９ ． ３ ６℃ ， 酶 添加 量 （ Ｅ ／ Ｓ ， 质 量分数 ｍ ／ ｍ） ３ ． ４ ０ ％， 酶 解 时间 ２ ０ ３ ． ５ ９ ａ ｒ ｉ ｎ ． 关 键词 ：花 生分 离蛋 白 ； 复合 酶 水解 ； 抗氧 化性 ； 花 生 多肽 中图分 类号 ： Ｔ Ｓ ２ ２ ９ 文献标 志 码 ： Ａ