鸡蛋中胆固醇
长期吃鸡蛋对身体好吗

长期吃鸡蛋对身体好吗
大家都知道鸡蛋是人们常吃的早餐之一,早上一个鸡蛋,基本能补充一天的必须元素。
所有人们在早餐的选择上都会搭配一个鸡蛋。
但是大家也知道鸡蛋的胆固醇比较高,吃多了以后会造成身体的胆固醇增多,但身体又消化不完,给身体造成了很大的负担。
所有很多人一次不会吃很多鸡蛋。
那么长期吃鸡蛋对身体好吗?
首先,鸡蛋中含有大量胆固醇,吃鸡蛋过多,会使胆固醇的摄入量大大增加,造成血胆固醇含量过高,引起动脉粥样硬化和心、脑血管疾病的发生。
以产妇为例,一个鸡蛋约含胆固醇250毫克,10个鸡蛋约含2500毫克胆固醇。
这个量,是正常摄入量的近10倍。
加之,鸡蛋中富含的脂肪属饱和脂肪酸,摄入过多,必然会使血清胆固醇急剧上升,并能促使动脉粥样硬化和心脑血管病的发生。
其次,多吃鸡蛋容易造成营养过剩、导致肥胖。
妇女产后在哺乳期间,每天热能的需要量一般为2800~3000千卡左右,蛋白质需要量为90克,如每天吃10个鸡蛋,等于摄入70克蛋白质,60克脂肪,约820千卡热量,加之乳母还要吃一定量的主食、鸡、鱼、肉、豆制品、蔬菜及水果等,每天热能摄入量可以达到3500~3800千卡,蛋白质和脂肪的摄入量都可达到120~140克。
这就远远超过了她们每天的实际营养需要,致使营养过剩,会使多余脂肪在体内堆积而形成肥胖。
多吃鸡蛋还会造成体内营养素的不平衡,从而影响健康。
我们的日常膳食是由多种食物组成的,合理的平衡膳食,要求含有人体所需要的各种营养素,并要求各种营养素在膳食中都应有适当的比例。
因为,各种营养素在体内是互相协调、互相制约而发挥作用的。
这样,身体才能正常发育和保持健康。
鸡蛋黄中的“胆固醇”可怕吗?

鸡蛋黄中的“胆固醇”可怕吗?
其实说到这个话题,属于老生常谈,但前几天一位考取了营养师证的学员咨询:上初三的女儿,身体各项指标一切正常,但用脑过多,问我在营养上应该做哪些补充。
我告诉她:“在营养均衡的基础上,每天应吃一个鸡蛋、20~30克坚果(核桃、芝麻、花生等)、每周吃2~3次鱼(150~200克)、豆制品、蔬菜中的黄花菜和金针菇等等对健脑和增强记忆力都有良好的保健作用。
”那位学员对于以上其他食物都没有异议,唯独对鸡蛋表示了她的担忧:“蛋黄中的胆固醇不是高吗?我女儿每天吃一个能行吗?”
我想,一个学习了营养知识的人还有这样的疑问,那么这个问题还是值得具体的说明一下。
1、鸡蛋黄中的胆固醇含量:每100克鸡蛋黄中约含有胆固醇1500毫克,每个鸡蛋的蛋黄约为15~20克,含有胆固醇约225~300毫克。
2、根据美国心脏病协会推荐的标准,每天摄入的胆固醇宜少于300毫克。
4、美国营养学家发现:鸡蛋蛋黄中的卵磷脂化合物是一种强有力的乳化剂,当它被吸收进人体血液后,能促使血中的胆固醇和脂肪颗粒变得极细小,并使之悬浮于血液中,可顺利地通过血管壁而被细胞充分利用,阻止胆固醇和脂肪颗粒
在血管壁的沉积,因而会使血液中的胆固醇减少,有助于防止动脉粥样硬化。
鸡蛋的营养价值很高,生物利用率也很高(94),是最经济的食物来源之一。
它所含有的卵磷脂又可以减少血中的胆固醇,这样看来只要不超过每天胆固醇的推荐摄入量,对胆固醇不高的人来说,每天一个鸡蛋并不会使人的血胆固醇水平升高。
吃过量的鸡蛋会导致胆固醇含量过高吗?一天食用几个鸡蛋最佳

吃过量的鸡蛋会导致胆固醇含量过高吗?一天食用几个鸡蛋最佳
吃过量的鸡蛋会导致胆固醇含量过高吗?一天食用几个鸡蛋最佳
在食用鸡蛋的时候,很多知道养生的人群都知道,食用过量的鸡蛋对身体有一定的损害,具有什么损害并不是很清楚。
事实上,鸡蛋中含有的丰富的动物蛋白质以及能量,食用以后,对身体还是有一定的滋补作用的。
那么吃过量的鸡蛋会导致胆固醇含量过高吗?一天食用几个鸡蛋最佳?
吃过量的鸡蛋会导致胆固醇含量过高吗
鸡蛋中含有的营养成分可以被身体大部分吸收利用,其中蛋黄中含有丰富的胆固醇,食用以后,也会被身体所吸收,如果身体的代谢功能比较正常,是不会引起身体内胆固醇含量升高的。
如果食用过量,再加上身体代谢器官出现了代谢异常,很容易就会导致身体内的胆固醇含量升高。
一天食用几个鸡蛋最佳
一般情况下,最好一天食用一个鸡蛋为最佳,具体的情况要结合身体的健康情况,适量食用。
如果身体的运动量比较大,代谢比较多,可以适量的增加一个鸡蛋,如果身体比较虚弱、代谢功能比较弱,最好不要食用过量的额鸡蛋,反而不利于身体的健康。
体内的胆固醇含量过高和吃鸡蛋有关系吗
体内的胆固醇含量过高和很多因素有关系,比如说饮食习惯、胆囊代谢异常等因素都有关系,食用过量含有胆固醇高的食物都会引起身体内胆固醇含量升高,身体内胆囊代谢异常一会导致身体内胆固醇无法正常的代谢,进而也回引起胆固醇升高的症状。
所以说体内的胆固醇含量过高和吃鸡蛋只是有一定的关系,身体内胆固醇含量很高并不一定是因为吃鸡蛋引起的,而吃少量的鸡蛋也不一定引起胆固醇含量升高。
减少胆固醇,鸡蛋怎么吃

减少胆固醇,鸡蛋怎么吃作者:范志红来源:《祝您健康·文摘版》2022年第11期最近有个吸引眼球的科技新闻又来“打扰”我们了:从52万人的调查数据中证实,鸡蛋中的胆固醇不利健康,会增加心血管疾病风险、全因死亡率和癌症死亡率。
到底还能不能吃鸡蛋啊?其实除吃鸡蛋的数量有差异之外,其他很多生活因素也可能有差異,未必能把心血管风险增加都归因到鸡蛋头上。
该研究表明,鸡蛋引起麻烦的大部分原因来自其中的胆固醇。
胆固醇在菌群失调的肠道中,会被某些微生物转化为氧化三甲胺,从而增加心血管疾病风险,这是鸡蛋与疾病产生关联的主要理论基础。
如果该研究的信息是正确的,那么我们也可以由此得出健康吃鸡蛋的方法。
一方面,可以通过增加植物固醇和膳食纤维来降低胆固醇的吸收利用率;另一方面,可以通过摄入膳食纤维、低聚糖和其他植物化学物来改善肠道菌群,减少胆固醇代谢风险。
按这个思路,这里就给大家推荐几个健康吃鸡蛋的方案。
方法1:鸡蛋和豆腐一起炒鸡蛋和豆腐是天然绝配。
鸡蛋中的胆固醇较多,但炒着吃味道很香,并含有维生素A和维生素D,B族维生素也丰富。
豆腐不含胆固醇,B族维生素含量低,没有维生素A和维生素D,却含有抑制胆固醇吸收利用的植物固醇,还有膳食纤维和大豆异黄酮,都有利于降低心血管疾病风险。
把豆腐和鸡蛋一起炒,口感协调、味道更好,营养健康方面完美互补。
烹调方法:鸡蛋打匀,加盐和胡椒粉。
卤水豆腐切碎(越碎越好)。
鸡蛋和豆腐相同重量即可。
先加油,放葱花煸炒(也可以加入花椒粉、小茴香粉来增味),然后加入切碎的豆腐翻炒,到豆腐表面没有多余水分的时候,加入已经调味的鸡蛋液,一起搅匀,使豆腐和鸡蛋融为一体,即可出锅。
方法2:鸡蛋和嫩豆一起烹调鸡蛋适合和嫩豌豆(速冻甜豌豆)、嫩蚕豆、嫩毛豆等一起炒菜或做汤。
这些嫩豆中不仅有植物蛋白、植物固醇,还有丰富的膳食纤维,也有低聚糖成分,有利于调节肠道菌群,减少胆固醇进入肠道被发酵成氧化三甲胺的风险。
烹调方法:把嫩豆类先用微波炉加热到快要成熟,或蒸、烫到半熟,再加入等量鸡蛋液一起烹炒,就可以了。
鸡蛋的胆固醇高吗

鸡蛋的胆固醇高吗
鸡蛋的胆固醇高吗1、蛋黄里胆固醇其实并不高
专家给出的答案是否定的。
蛋黄里面的脂肪是以单不饱和脂肪酸为主的,里面富含油酸,有助于预防心脏病。
而胆固醇方面,对于高脂血症患者来说,每天摄入的胆固醇应控制在每日300毫克以内。
而一个鸡蛋黄里面就含有200毫克,吃一个鸡蛋蛋黄,其中的胆固醇依旧是我们每天所必需的营养成份。
而且从目前的研究数据来看,吃鸡蛋并不会引起血清胆固醇升高,即使少部分人升高,其低密度脂蛋白也不会升高,不会增加心血管疾病的风险。
2、蛋黄含有丰富的卵磷脂
因为怕胆固醇过高,很多人在吃鸡蛋的时候就把蛋黄给扔了。
可是要知道,这蛋黄里除了胆固醇以外,还有很多有营养的物质。
鸡蛋黄里有卵磷脂,这种物质被称为血管的”清道夫 ,具有乳化、分解油脂的作用,如果长期吃鸡蛋只吃蛋白不吃蛋黄,很有可能就错过了蛋黄里的优质营养物质。
3、蛋黄蛋白一起吃营养才够好
如果体内胆固醇正常,每天吃一个鸡蛋,蛋白和蛋黄一起吃,并不会出现什么严重的问题,就算是年纪比较大的人,也不会出现过量的情况。
如果本来胆固醇过高,可以适当少吃一些蛋黄,不过也不能一点都不吃。
过多肉类的摄入也会造成胆固醇过高,所以千万别把胆固醇高的元凶都归结到蛋黄上,体内胆固醇过高,第一步要做的是调整自己的膳食结构。
胆固醇高的人可以吃鸡蛋吗首先,鸡蛋黄中含有丰富的磷脂。
在膳食中磷脂可以将胆固醇乳化成微粒状态,一方面可以使之漂浮血液中,不会沉。
你吃鸡蛋的所有顾虑,让我一次性扫清!

你吃鸡蛋的所有顾虑,让我一次性扫清! 鸡蛋是一种风险和获益并存的食物~ 我爱死鸡蛋了。连粽子、月饼,甚至雪糕都吃蛋黄的。 鸡蛋不仅美味,且营养丰富,堪称人类的完美食物。 当然,如果胆固醇含量没那么高的话。 说到胆固醇,鸡蛋总是首先被拎出来挨打的那个。一个鸡蛋大约含有186 mg胆固醇,每天吃两个,胆固醇摄入就超过了300 mg,让人望而却步,望“蛋”兴叹啊。
然而关于鸡蛋或膳食胆固醇与心血管疾病之间的关系,近期发表的多项研究结果却并不一致。 有坏消息,比如今年3月份《JAMA》上美国一项近3万人追踪17年的研究,结果显示每天每多吃半个鸡蛋,全因死亡风险就阶梯式增长8%!一片哗然!比较新的好消息,今年5月份,芬兰一项研究发现,每天吃一个鸡蛋,不会增加中风风险。而去年中国一项超50万人研究也表明,每天一个鸡蛋,心血管死亡风险反而降低18%! 这就很让人摸不着头脑了,敢情这是个“薛定谔的蛋”啊,在吃进肚之前,你都不知道它救命还是害命。 本着探索求知的精神,哀家在网上冲了会浪,感慨颇多。鸡蛋,真的不是一个没有故事的“杀手”。 “胆固醇有害论”是阴谋吗?从一场闹剧说起 长期以来,“高胆固醇=心血管疾病”的观念一直深入人心。 然而,2017年的新版《美国居民膳食指南》却删除了对胆固醇摄入的限制,此前的指南认为每日胆固醇摄入量应低于300 mg。不少人将其解读为“无论摄入多少胆固醇都是无害的”。这就引起了社会舆论对“胆固醇有害论”的广泛质疑,出现了很多为胆固醇“平反”的声音。 祸不单行,去年9月,一篇名为《低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)不会引起心血管疾病:对当前文献的全面综述》的文章发表在《ExpertReview of Clinical Pharmacology》杂志上,认为高胆固醇引起心血管疾病的证据不足,引爆了各路专家和媒体对胆固醇是否有害的广泛讨论,而这篇综述的作者包括了多个国家心血管领域的顶尖学者。 图.《ExpertReview of Clinical Pharmacology》杂志上发表的文章 文章作者之一的法国心脏病专家Michel de Lorgeril博士甚至参与拍摄了一部名为《胆固醇骗很大》的纪录片,揭示“胆固醇有害论”背后可能存在的巨大利益链条,且提出关于他汀作用的研究数据可能缺乏严谨。
富硒姐姐鸡蛋羹告诉你,高胆固醇患者,真的一点鸡蛋都不能吃吗?

6 富硒姐姐鸡蛋羹告诉你,高胆固醇人群,真的一点鸡蛋都不能吃吗?
鸡蛋是我们生活中相当的食物了,鸡蛋对人体特别多的好处,富硒姐姐鸡蛋羹今天就和你们讲一讲。
首先,到底什么是胆固醇?
胆固醇是人体不可或缺的物质,水分、不同功能的细胞和各种各样的营养元素,脂肪也是身体不可缺少的物质中的一类。
胆固醇就是一种脂肪,在人体内更是有着很重要的作用。
它不仅仅参与细胞膜的形成,维持着我们人体的完整性,还是合成维生素D,胆汁酸以及甾体激素的原料,这些东西都是我们人体中不可或缺的。
人体中每千克体重就含有2克胆固醇,而且每天还合成1-1.2克的胆固醇
对于大多数人来说,只要提到胆固醇,最先想到的就是心血管疾病,对于胆固醇高的患者来说更是“谈虎色变”,同时也很讨厌含胆固醇很高的食物,非常努力地要和胆固醇划清界限,以至于对胆固醇产生很多误会。
例如:胆固醇高绝对不能吃鸡蛋;不吃蛋黄怕胆固醇高;
真实情况真的是这样吗?
鸡蛋中所含有的胆固醇含量的确相对较高。
如果是胆固醇较高的人群,是不建议食用过多的鸡蛋的,食用过多的鸡蛋会导致胆固醇进一步升高。
如果胆固醇过高,可能会导致人体患冠状动脉粥样硬化,高血压以及高血脂症等疾病的几率大大增加,对人体健康造成很大的影响。
如果胆固醇出现偏高的情况,必须积极进行治疗,同时可以适当进行体育锻炼,促进身体的血液循环以及新陈代谢,对于胆固醇的降低也有一定的效果。
HPLC-ELSD测定鸡蛋中胆固醇的含量

HPLC-ELSD测定鸡蛋中胆固醇的含量王术玲;郑夏生;黄敏娜;黄孟秋;冯燕兰;梁亮【摘要】应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)对不同种类鸡蛋中胆固醇的含量进行测定.采用C18色谱柱为固定相,以甲醇为流动相,流速为1 mL·min-1,柱温为25℃;蒸发光散射检测器的氮气流速为2 L·min-1,漂移管温度为85℃.结果表明,胆固醇进样量在4.008~40.080 μg范围内,其对数与峰面积的对数呈良好的线性关系,相关系数R=0.9991,低、中、高三个浓度回收率为95.4%~99.1%.该方法操作简便、快速,精密度好,结果准确可靠.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2009(026)003【总页数】3页(P76-78)【关键词】高效液相色谱-蒸发光散射检测器;鸡蛋;胆固醇;含量测定【作者】王术玲;郑夏生;黄敏娜;黄孟秋;冯燕兰;梁亮【作者单位】广州中医药大学,广东,广州,510006;广州中医药大学,广东,广州,510006;广州中医药大学,广东,广州,510006;广州中医药大学,广东,广州,510006;广州中医药大学,广东,广州,510006;广州中医药大学,广东,广州,510006【正文语种】中文【中图分类】O657.72胆固醇是环戊烷骈多氢菲的衍生物,亦称“胆甾醇”,是动物体内维持正常生理活动所必需的最重要的固醇,通常以游离状态或酯化状态存在于动物组织中[1]。
但是人体内过多的胆固醇将引起高血脂,进而引发动脉粥样硬化、高血压、冠心病等一系列心血管疾病[2],因此控制饮食中胆固醇摄入量非常必要。
鸡蛋中含有大量的胆固醇,是人体摄入胆固醇的重要途径。
对于鸡蛋中胆固醇含量的测定,文献报道多以在208 nm波长处紫外检测为主,对流动相的要求高,且样品中高紫外吸收物质的干扰大,易造成基线不稳,如果梯度洗脱则会引起基线漂移,使得胆固醇定量难度较大[3]。
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目录摘要 (1)前言 (2)1实验器材 (2)1.1实验材料 (2)1.2主要仪器设备与试剂 (2)2实验方法 (3)2.1色谱条件 (3)2.2标准溶液的配置 (3)2.3样品的预处理 (3)2.4进样后的分离 (3)3结果与讨论 (4)3.1流动相的选择 (4)3.2波长的选择 (4)3.3样品皂化液的选择 (4)3.4样品萃取的选择 (4)3.5标准回归方程 (4)3.6精密度实验 (5)3.7准确度实验 (6)3.8对结果的讨论 (7)4鸡蛋的营养价值的研究 (7)4.1鸡蛋—全面天然的营养品 (7)4.2卵磷脂—胆固醇的重要抑制剂 (10)4.3高密度脂蛋白—防止动脉硬化的好胆固醇 (11)4.4维生素—血管的扩张和抗凝血剂 (12)4.5微量元素—代谢调控的总调度师 (14)参考文献 (15)致谢 (16)摘要柱(4.6mm×150mm,5µm)为固定相,以甲醇为流本文采用高效液相色谱法,以C18动相,流速为1.0mL/min;检测波长205nm,测定鸡蛋蛋黄中胆固醇的含量,检测结果表示鸡蛋蛋黄的胆固醇含量为1107mg/100g,表明鸡蛋蛋黄中胆固醇含量较高。
现在的社会一般讲究低胆固醇的食物,这也许会使人们对鸡蛋含有高胆固醇造成偏见而不愿去食用鸡蛋,通过营养学对鸡蛋营养的研究让人们更好的认识鸡蛋的营养价值。
关键词胆固醇高效液相色谱法蛋黄营养营养价值AbstractIn this paper, high performance liquid chromatography with C18 column (4.6mm ×150mm, 5μm) as the stationary p hase with methanol as the mobile phase, flow rate 1.0mL/min; detection wavelength of 205nm, determination of cholesterol in egg yolk, test results that egg yolk cholesterol content 1107mg/100g, showed a higher cholesterol content in egg yolk. Now the general attention to low cholesterol food, which may make people with high cholesterol on the eggs do not want to cause prejudice to eat eggs on egg nutrition through nutrition research give a better understanding of the nutritional value of eggs.Key words cholesterol high performance liquid chromatography egg yolk nutrition nutritional value前言胆固醇又称胆甾醇,一种环戊烷多氢菲的衍生物。
早在十八世纪人们已从胆石中发现胆固醇,1816年化学家本歇尔将这种具有脂类性质的物质命名为胆固醇。
胆固醇广泛地存在于动物体内,尤以脑和神经组织最为丰富,在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高。
其溶解性与脂类相似,不溶于水,易溶于乙醚、氯仿等有机溶剂。
胆固醇是动物组织细胞不可缺少的重要物质,它不仅参与细胞膜的组成,而且还参与合成胆汁酸、维生素D以及甾体激素的原料。
它分为高密度胆固醇和低密度胆固醇两种,前者对心血管有保护作用,通常称之为“好胆固醇”,后者偏高则冠心病的危险就会增加,通常称之为“坏胆固醇”血液中的胆固醇含量在每单位140~199mg之间是正常的胆固醇水平。
饲料和环境因素可能影响鸡蛋中胆固醇的含量,使鸡蛋蛋黄中的胆固醇含量因地域或饲养方法不同而产生差别异[1]。
测定不同产地和不同品种鸡蛋的胆固醇含量参考值,有助于对当地居民的生活进行指导,达到合理健康饮食的效果。
目前对食品中胆固醇的检测方法主要有比色法[2]~[5],和高效液相色谱法[6]~[8],由于蛋黄中共存脂质较多,因此在测定样过程中样品的预处理步骤较多,耗时较长。
因为比色法在测定的精确度方面的不足,本文采用高效液相色谱法对鸡蛋蛋黄中的胆固醇的测定,结果令人满意。
鸡蛋中含有较高的胆固醇,但没有可靠的证据可以说明蛋类的胆固醇会增加人体血液中的胆固醇水平。
其中富含许多可以抑制胆固醇水平升高的成分,如卵磷脂、胆碱、维生素、微量元素等。
鸡蛋中既含有可导致动脉硬化的“坏胆固醇”—低密度脂蛋白,也含有可以防止动脉硬化的“好胆固醇”—高密度脂蛋白。
1 实验器材1.1 实验材料鸡蛋蛋黄1.2 主要仪器设备与试剂仪器设备:高效液相色谱仪(具有紫外检测器或相当的检测器,日本岛津LC-20A),反相色谱柱(4.6mm×150mm,5µm),恒温水浴锅(上海博讯实业有限公司医疗设备厂),C18旋转蒸发仪(RE-52AA上海亚荣生化仪器厂),皂化装置;SHZ-III型循环水真空泵(上海亚荣生化仪器厂);电子天平(感量0.0001g);试剂:甲醇(色谱纯,美国迪马);无水乙醇(郑州派尼化学试剂厂);石油醚(沸程30-60℃,天津光复精细化工研究所);无水乙醚(天津光复化工研究所);无水硫酸钠(郑州派尼化学试剂厂);氢氧化钾(天津市化学试剂三厂);胆固醇(纯度大于99%,中国计量科学研究院)2 实验方法2.1 色谱条件反相色谱柱(4.6mm×150mm,5µm)色谱柱:C18柱温:38℃流动相:甲醇流速:1.0mL/min测定波长:205nm进样量:10µL2.2 标准溶液的配置标准储备液的配置:称取胆固醇标准物质0.05g(精确至0.1mg),用无水乙醇定容至50mL的容量瓶中,此溶液每毫升相当于1mg胆固醇。
标准工作液的配置:分别吸1mL、2mL、3mL、5mL用无水乙醇定容至10mL,工作液分别相当于0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.5mg/mL。
标准曲线的绘制:分别吸10µL的标准工作液,注入高效液相色谱仪,在上述的色谱条件下测定标准溶液的响应值,以浓度为横坐标峰面积为纵坐标绘制标准曲线。
2.3 样品的预处理皂化:称取混合均匀的去除蛋清的蛋黄样品2g(精确至0.1mg)于250mL圆底烧瓶中,加人30mL无水乙醇,10mL60%的氢氧化钾溶液(加时注意不要把氢氧化钾溶液粘到烧瓶的磨口),混匀将试样在100℃恒温水浴锅中回流1h,不时震荡防止式样粘附在瓶壁上,皂化结束用5mL无水乙醇自冷凝管顶端洗其内壁,取下圆底烧瓶,冷却至室温。
提取:定量转移全部皂化液于250mL分液漏斗,用30mL水分2-3次冲洗圆底烧瓶,洗液并入分液漏斗,再用40mL石油醚和乙醚(1+1体积比)分2-3次冲洗圆底烧瓶,把洗液并入分液漏斗中,震摇分液漏斗2min静置、分层。
转移水相于第二个分液漏斗中,再用30mL石油醚和乙醚的混合液(1+1体积比)重复提取两次,弃水相,合并三次有机相,用超纯水100mL洗涤提取液至中性,初次洗时轻轻旋摇,防止乳化,提取液通过10g 无水硫酸钠,转移至干净的圆底烧瓶中。
浓缩:将上述圆底烧瓶中提取液在真空条件下蒸发至近干,用无水乙醇溶解定容至10mL的容量瓶中,溶液通过0.45µm的滤膜用真空泵进行抽滤,收集虑出液于进样瓶中待色谱仪测定。
2.4 进样后的分离用进样针准确吸取抽滤后的样品10µL,进高效液相色谱仪,其分离情况如下图所示。
图2-4 胆固醇进样分离色谱图从图(2-4)可以看出进样后样品可以稳定的分离,并且在5.453min出峰,峰型较好,没有太多的杂峰。
3 结果与讨论3.1流动相的选择据文献报道据文献报道,测定胆固醇采用的流动相有乙腈/ 异丙醇(4/1,V/V)或(2/1,V/V),也有人采用甲醇/水(95/5,V/V)。
本文以100%甲醇作流动相,避免了有机相与无机相混合对仪器稳定及样品测定结果的影响。
从理论上讲与使用乙腈相比,使用甲醇对操作者来说,挥发性与毒性小一些的,更利于健康与安全。
3.2 波长的选择对新到的24对胆固醇标准溶液进行扫描后确定在205nm处有最大吸收峰,故选择205nm 为测定波长。
有些文献报道考虑甲醇的截止波长为205nm,而选择208nm为测定波长时会造成了峰值的降低。
通过对大量样品的测定结果表明,选择205nm并没有很大影响。
3.3 样品皂化液的选择试样如果含有较高的脂肪,则加入的氢氧化钾溶液的浓度要较高,加入无水乙醇的量也要适当增加。
这样能够保证样品被完全皂化,而且不会出现乳化的现象。
实验对氢氧化钾的用量进行了研究,当氢氧化钾的用量为10mL和15mL能保证完全皂化,对结果无明显影响。
最后确定采用60%的氢氧化钾溶液的用量为10mL。
3.4样品萃取的选择使用前通常采用的萃取剂有乙醚、石油醚、正己烷等。
考虑到成本问题,采用乙醚、石油醚较为便宜。
但由于乙醚挥发性太大,且乙醚、石油醚萃取效果区别大,因此采用乙醚/石油醚(1/1,V/V)。
3.5标准回归方程用胆固醇标准储备液配成0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.5mg/mL系列使用液,分别取10 µL行色谱测定,以胆固醇浓度作为纵坐标y,峰面积x为横坐标,绘制标准曲线,回归方程为y=0.00000026x-0.01693817,相关系数R2= 0.9951,说明呈线性回归见(图3-5),可以用于定量分析。
图3-5 胆固醇标准曲线3.6 精密度实验精密度系指用该法测定同一匀质样品的一组测量值彼此符合的程度。
它们越接近就越精密。
常用标准(偏)差(standard deviation,SD或S);相对标准(偏)差(relative standard deviation,RSD),也称变异系数(coefficient of variation,CV)。
分析时,常用RSD表示精密度。
对于组成不十分清楚的试样,常采用加入回收法。
在试样中加入已知量的被测组分与等量的另一份相同的试样平行进行分析, 求得加入的被测组分的回收率, 由回收率检查系统误差的大小。
提高试验精密度和采用回收试验,都是为了尽可能减少实验误差,使得试验更准确。
表3-6 样品精密度试验序号称样量定容上机浓度(g/mL)标准浓度(mg/mL)标准面积校正因子样峰面积含量(mg/100g)A12.1318 5 0.43 1.00 3631818 0.00000028 5007773 323.403A22.1318 5 0.43 1.00 3631818 0.00000028 4784954 309.013A32.1318 5 0.43 1.00 3631818 0.00000028 5052521 318.744A42.1318 5 0.43 1.00 3631818 0.00000028 4935635 324.638A52.1318 5 0.43 1.00 3631818 0.00000028 5026899 338.426B12.0838 5 0.42 1.00 3631818 0.00000028 5122409 338.426B22.0838 5 0.42 1.00 3631818 0.00000028 5117897 338.128B32.0838 5 0.42 1.00 3631818 0.00000028 5167927 341.434B42.0838 5 0.42 1.00 3631818 0.00000028 5242591 346.366B52.0838 5 0.42 1.00 3631818 0.00000028 5181001 342.297C12.0461 5 0.41 1.00 3631818 0.00000028 5111345 343.917C22.0461 5 0.41 1.00 3631818 0.00000028 5129708 345.153C32.0461 5 0.41 1.00 3631818 0.00000028 5196036 349.616C42.0461 5 0.41 1.00 3631818 0.00000028 5153501 346.754C52.0461 5 0.41 1.00 3631818 0.00000028 5297510 356.471胆固醇S=13.240 RSD(%)= 3.932 抽取的样品,各称取3份,按本方法进行测定,每份重复测定5次,结果见(表3-6),RSD<5%,说明方法有较高的精密度。