几种天然植物提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用
第２４卷第３期 ２０１３年５月 化学 ＣＨＥＭＩＣＡＬ 研究 ＲＥＳＥＡＲＣＨ 中国科技核心期刊 ｈｘｙｊ＠ｈｅｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
几种天然植物提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用
曹伟伟 ，朱晓娜 ，李明静
（１．河南大学化学化工学院，河南开封４７５００４； ２．河南大学河南省天然药物与免疫工程重点实验室，河南开封４７５００４）
摘要：选择合适的溶剂体系，用维生素Ｃ（Ｖｃ）作为阳性对照物，采用分光光度法测定了不同浓度的茶多酚、丹 皮酚及金银花叶子总黄酮提取物（乙酸乙酯相）对酪氨酸酶活性的抑制作用．结果表明：采用１ 丙三醇和１ 吐温一８０（体积比１：１）混合液作溶剂可显著增加丹皮酚和金银花叶子总黄酮提取物在水中的溶解度；茶多酚、丹 皮酚、金银花叶子总黄酮提取物对酪氨酸酶的活性都有一定的抑制作用，其抑制作用从强到弱依次为Ｖｃ、Ｖｃ： 丹皮酚一１：２（质量比）、Ｖｃ：丹皮酚一１：１（质量比）、茶多酚、茶多酚：丹皮酚一２：１（质量比）、丹皮酚、金银花 叶子总黄酮提取物． 关键词：茶多酚；丹皮酚；金银花叶子；酪氨酸酶；活性；抑制作用 中图分类号：Ｒ ２８２．７１；Ｑ ９４６．９１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００８—１０１１（２０１３）０３—０２８８—０５
Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ ｂｙ ｓｅｖｅｒａｌ ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ
ＣＡＯ Ｗｅｉ—ｗｅｉ ，ＺＨＵ Ｘｉａｏ—ｎａ ，ＬＩ Ｍｉｎｇ—ｊｉｎｇ ＇。 （１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈｅｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋａｉｆｅｎｇ ４７５００４，Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｎａｔｕｒａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈｅｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋａｉｆｅｎｇ ４７５００４，Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｅｖｅｒａｌ ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ，ｐａｅｏｎｏｌ ａｎｄ ｔｏｔａｌ ｆｌａ—
ｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｌｏｎｉｃｅｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ ｌｅａｖｅｓ（ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ），ｏｎ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｂｙ ｍｅａｎｓ ｏｆ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ｗｈｉｌｅ ｖｉｔａｍｉｎ Ｃ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ ａｓ ａ ｐｏｓｉｔｉｖｅ
ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ ｓｏｌｖｅｎｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍｉｘｔｕｒｅ ｏｆ １ （ｖｏｌｕｍｅ ｒａｔｉｏ）ｇｌｙｃｅｒｏｌ
ａｎｄ １ （ｖｏｌｕｍｅ ｒａｔｉｏ）Ｔｗｅｅｎ一８Ｏ ａｓ ｔｈｅ ｓｏｌｖｅｎｔ ｈｅｌｐｓ ｔｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｐａｅｏｎｏｌ ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｌｏｎｉｃｅｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ ｌｅａｖｅｓ．Ａｌｌ ｔｈｅ ｔｅｓｔｅｄ ｐｌａｎｔ
ｅｘｔｒａｃｔｓ ａｒｅ ａｂｌｅ ｔｏ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ ｔｏ ｓｏｍｅ ｅｘｔｅｎｔ；ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｃａｐａ—
ｂｉｌｉｔｙ ｉｓ ｒａｎｋｅｄ ａｓ Ｖｃ＞Ｖｃ／ｐａｅｏｎｏ１ ｗｉｔｈ ｍａｓｓ ｒａｔｉｏ ｏｆ １：２＞Ｖｃ／ｐａｅｏｎｏｌ ｗｉｔｈ ｍａｓｓ ｒａｔｉｏ ｏｆ １：１＞ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ＞ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ／ｐａｅｏｎｏ１ ｗｉｔｈ ｍａｓｓ ｒａｔｉｏ ｏｆ ２：１＞ｐａｅｏｎｏｌ＞ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｌｏｎｉｃｅｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ ｌｅａｖｅｓ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ；ｐａｅｏｎｏｌ；ｈｏｎｅｙｓｕｃｋｌｅ ｌｅａｖｅｓ；ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ；ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
酪氨酸酶（ＴＹＲ）又称多酚氧化酶，儿茶酚氧化酶，广泛存在于植物、动物和微生物中ｌｌ１］．酪氨酸酶是生 物合成黑色素细胞的主要限速酶，抑制酪氨酸酶的活性，可改善皮肤色素细胞中酪氨酸酶的代谢，阻止色素 沉着，达到美白效果＿２］．已应用于美白化妆品中的化学合成美白剂如氢醌则因具有较大的细胞毒性目前已
较少采用．天然植物提取物具有无毒、安全等特点，因此，天然植物类化妆品的开发研究越来越受到国内外
广大消费者的青睐，同时具有很大的市场潜力．茶多酚的主要成分是儿茶素 ，具有清除人体自由基、祛斑、 防晒等作用Ⅲ．金银花叶子中主要有木犀草素、木犀草苷、忍冬苷等黄酮类化合物 ，这些黄酮类物质是一
收稿日期：２０１２—１０—０８． 作者简介：曹伟伟（１９８７一），女，硕士生，研究方向为天然产物化学． 通讯联系人，Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｍｊｈｅｌｌｅｎ６＠１６３．ｃｏｒｎ．
第３期 曹伟伟等：几种天然植物提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用 ２８９
种天然的抗氧化剂，具有清除人体中超氧离子自由基及抗衰老等作用，其中木犀草素还具有抗菌、抑酶等作
用．丹皮酚又称牡丹酚，研究证实 丹皮酚具有抗炎、抗菌、抑制皮肤色素合成、消瘀化斑等作用．鉴于茶多 酚、丹皮酚及木犀草素都具有抑制黑色素形成的特点，本文作者研究其抑制酪氨酸酶活性，为开发天然植物 提取物在美白化妆品领域的应用开辟新的途径．
大多黄酮类化合物在水中较难溶解，据文献报道ｌ７ 常用甲醇、乙醇、ＤＭＳＯ等溶剂溶解黄酮类化合物，
但我们通过实验发现甲醇、乙醇、ＤＭＳＯ对酪氨酸酶均有很强的抑制作用．本文通过大量实验筛选出了既可
以增大金银花叶子总黄酮及丹皮酚在水中的溶解度同时对酪氨酸酶活性又不产生影响的新溶剂体系，即 １ 丙三醇和１ 吐温一８０（体积比１：１）混合溶液作为溶剂体系，并分别研究了茶多酚、丹皮酚、金银花叶子
总黄酮提取物等对酪氨酸酶活性的抑制作用．
１ 实验部分
１．１材料与试剂 酪氨酸酶（９６５ Ｕ／ｍｇ），Ｌ一多巴胺（Ｌ—ＤＯＰＡ），购于上海宝曼生物科技有限公司；茶多酚，实验室自制（从 信阳毛尖中提取，纯度８５ ）；金银花叶子乙酸乙酯提取物，实验室自制（以芦丁做标准品测得总黄酮含量为
８６ ）；丹皮酚，实验室自制（从牡丹皮中提取，纯度９９ ）；Ｖｃ，丙三醇，吐温一８０，Ｋ ＨＰＯ ・３Ｈ。Ｏ，ＫＨ。ＰＯ 等
试剂均为国产分析纯；二次蒸馏水． １．２仪器
紫外可见分光光度计，北京莱伯泰科仪器有限公司；ＤＦ一１０１Ｓ集热式恒温加热磁力搅拌器，河南省豫华 仪器有限公司． １．３实验方法 １．３．１ 测定溶液的配制 二次蒸馏水作溶剂，配制０．０１０ ｍｏｌ／Ｌ的多巴胺溶液，５０ Ｕ／ｍＬ的酪氨酸酶溶液．
１ 的丙三醇和１ 吐温一８０（体积比１：１）混合液做溶剂，分别配制质量浓度为０．２５ ｇ／Ｌ的Ｖｃ溶液、
４．００ ｇ／Ｌ的金银花叶子总黄酮提取物溶液、１．２０ ｇ／Ｌ的茶多酚溶液、１．０６ ｇ／Ｌ的丹皮酚溶液． １．３．２提取物对酪氨酸酶活性的抑制率计算。。 ０］
按照如下公式计算Ｖｃ、茶多酚、丹皮酚、金银花叶子总黄酮提取物及复配物对酪氨酸酶活性的抑制率
酪氨酸酶抑制率一 二 二 垒＿二 ×１００％ ｎ１—— ２ 式中，Ａ 是加酪氨酸酶，不加提取液，只加多巴胺溶液时的吸光度；Ａ。是加酪氨酸酶，不加提取液，不加多巴 胺溶液时的吸光度；Ａ。是加酪氨酸酶，加提取液，加多巴胺溶液时的吸光度；Ａ 是加酪氨酸酶，加提取液，不
加多巴胺溶液时的吸光度．
２结果与讨论
２．１溶剂的选择 据文献报道 ］，提取黄酮类、多酚类物质常用甲醇、乙醇、ＤＭＳＯ等做溶剂．但我们通过实验发现甲醇、
乙醇、ＤＭＳＯ对酪氨酸酶均有很强的抑制作用．丹皮酚和金银花叶子提取物在水中溶解度较小，有文献报
道Ｉ１ 表面活性剂对难溶化合物具有一定的增溶作用，本实验通过加入表面活性剂显著增大了丹皮酚和金银
花叶子提取物在水中的溶解度．通过实验选择了既可以增大黄酮类化合物在水中的溶解度，同时对酪氨酸 酶活性又不产生影响的溶剂体系，实验分别选取１ 丙三醇、１ 吐温一８０、０．５ 丙三醇和０．５ 吐温一８０（体 积比１：１）、１ 丙三醇和１ 吐温一８０（体积比１：１）、二次水、甲醇、乙醇、ＤＭＳＯ等溶剂体系． 以多巴胺为底物，３５℃恒温条件下，向１０ ｍＬ比色管中加入５０ Ｕ／ｍＬ的酪氨酸酶溶液２．０ ｍＬ，３．５
ｍＬ的磷酸盐缓冲液（ｐＨ一６．５），再加入浓度为０．０１０ ｍｏｌ／Ｌ多巴胺溶液２．０ ｍＬ，分别用１ ９／５丙三醇、１％吐
温一８０、０．５ 丙三醇和０．５ 吐温一８０（体积比１：１）、１ 丙三醇和１％吐温一８０（体积比１：１）、二次水、甲醇、 乙醇、ＤＭＳＯ定容，摇匀，同时开始计时，在４７５ ｎｍ处测定吸光度Ａ，开始６ ｍｉｎ每分钟测一次，以后每隔２
ｍｉｎ测一次，至１２ ｍｉ
ｎ．结果如图１所示．实验结果表明除甲醇、乙醇、ＤＭＳＯ以外的上述其他溶剂体系对酪 ２９Ｏ 化学研究
氨酸酶活性均没有影响，并且其中１ 丙三醇和１ 吐温－８０（体积比１：１）溶剂体系可显著增大丹皮酚和金 银花叶子提取物在水中的溶解度，故选择１ 丙三醇和１ 吐温一８Ｏ（体积比１：１）混合液作为溶剂体系．
２．２不同植物提取物对酪氨酸酶的抑制作用 ２．２．１ Ｖｃ对酪氨酸酶的抑制
３５℃恒温条件下，向１Ｏ ｍＬ比色管中加入２．０ ｍＬ酪氨酸酶溶液，３．５ ｍＬ磷酸盐缓冲液，再分别加入
０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１ ｍＬ ０．２５ ｇ／Ｌ Ｖｃ溶液，最后加入２．０ ｍＬ多巴胺溶液，定 容，恒温２ ｍｉｎ，在４７５ ｎｍ处测定吸光度，按照１．２．２的方法计算抑制率．不同浓度的Ｖｃ对酪氨酸酶活性的
抑制作用如图２所示，实验结果表明随着Ｖｃ浓度的增大，对酪氨酸酶的抑制作用增强，抑制率达到５０ 的 Ｖｃ质量浓度（ＩＣ 。）为１４．５１ ｍｇ／Ｌ．Ｖｃ能够显著地抑制细胞黑色素形成，也是公认的祛斑美白剂．
１．１ 丙三醇２．１ 吐温一８Ｏ ３．０．５ 丙三醇和０．５ 吐温一８Ｏ ４．１ 丙三醇和１ 吐温一８０ ５．二次水６．甲醇７．乙醇８．ＤＭＳ０ 图１ 不同溶剂对酪氨酸酶活性的影响 Ｆｉｇ．１ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｌｖｅｎｔｓ ｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ 图２ Ｖｃ对酪氨酸酶的抑制作用 Ｆｉｇ．２ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｖｃ ｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ
２．２．２ 茶多酚对酪氨酸酶的抑制 ３５℃恒温条件下，向１０ｍＬ比色管中加入２．０ ｍＬ酪氨酸酶溶液，３．５ ｍＬ磷酸盐缓冲液，再分别加入
０．１、０．３、０．５、０．７、０．９、１．１、１．３、１．５、１．７ ｍＬ １．２０ ｇ／Ｌ的茶多酚溶液，最后加入２．０ ｍＬ多巴胺溶液，定容， 恒温２ ｍｉｎ，在４７５ ｎｍ处测定吸光度，按照１．２．２的方法计算抑制率．不同浓度的茶多酚对酪氨酸酶活性的
制何首乌提取物及主要单体成分体外对酪氨酸酶活性的影响
制何首乌提取物及主要单体成分体外对酪氨酸酶活性的影响
石璐缘;李登科;崔宝弟;付莹;冯光远;赵晨;孙震晓
【摘 要】采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法,体外评价制何首乌水提取物、乙醇提取物各分离组分及大黄素,大黄素甲醚,大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷,2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷等制何首乌主要单体成分对体外酪氨酸酶活性的影响.结果未在制何首乌中发现能够体外有效激活酪氨酸酶活性的成分,制何首乌水提物,制何首乌乙醇提取物的50％乙醇洗脱物及95％乙醇洗脱物,2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷皆有浓度依赖的酪氨酸酶抑制活性,其中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在48μg/mL的浓度下即可达到46.72％的抑制率,具有美白产品研发价值.
【期刊名称】《天然产物研究与开发》
【年(卷),期】2014(026)005
【总页数】5页(P761-765)
【关键词】酪氨酸酶活性;制何首乌提取物;大黄素;大黄素甲醚;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷;2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷
【作 者】石璐缘;李登科;崔宝弟;付莹;冯光远;赵晨;孙震晓
【作者单位】北京中医药大学中药学院生物制药系,北京100102;北京中医药大学中药学院生物制药系,北京100102;北京中医药大学中药学院生物制药系,北京100102;北京中医药大学中药学院生物制药系,北京100102;北京中医药大学中药学院生物制药系,北京100102;北京中医药大学中药学院生物制药系,北京100102;北京中医药大学中药学院生物制药系,北京100102 【正文语种】中 文
【中图分类】R285.5
何首乌始载于《开宝本草》，为蓼科植物何首乌(Polygonum multiflorum
Thunb.)的干燥块根，根据炮制与否其功效大有不同，生用可解毒、消痈、润肠通便，制何首乌则具有补肝肾、益精血、乌须发等功效［1］。制何首乌作为一种传统的乌发良品广为人知，《本草纲目》赞其“养血益肝，固精益肾，健筋骨，乌髭发，为滋补良药”，且在八宝丹、神仙乌云丹等乌发古方中均有收录。然而制何首乌功善乌发的作用机制目前尚不明确。
天然源酪氨酸酶抑制剂研究进展
第２８卷第１期 ２ ０ ０ ８年２月 郑州牧业工程高等专科学校学报 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｈ ｕｓｂａｎｄｒｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ＶｏＩ．２８ Ｎｏ．１ Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２００８
天然源酪氨酸酶抑制剂研究进展
杨新玲 ，李 纲 （１．郑州大学化学系，河南郑州４５０００８；２．郑州牧业工程高等专科学校，河南郑州４５００１１）
中围分类号：０６５６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８—３ｌ１１（２００８）０１—００２１一Ｏ３ 褐变是果蔬及其加工产品主要的劣变形式之 一。按照机制，褐变可分为非酶和酶促褐变两类，而 又以后者更为常见。据统计，加工过程中超过５Ｏ
Ｎ
Ａ’Ｈ Ｎ Ｎ—ｉｉｌ（Ｉ） 的损失是酶促褐变引起的。褐变反应过程如图１所 示。
Ａ’Ｈ Ｎ （ＩＩ） Ｎ ‘＼＾
Ｒ 一／ ＋ｏ： Ｏｒｆ＂
图１褐变反应过程 上述酶促反应常导致水果、蔬菜的褐变及部分 种类水产品的黑变，造成感观质量和营养成分的损 失；此外，黑色素的不正常积聚也会引起人体皮肤黑 斑的产生。而催化这一反应的关键酶是酪氨酸酶。 酪氨酸酶广泛存在于微生物、植物和动物中，在 酶促反应起传递氧的作用。因此有关酪氨酸抑制剂 的研究一直是多年来的热点。本文试图对近年来国 内外有关不同活性基团与抑制机理的关系以及影响 抑制活性的因素的报道做一总结，希望能加深对抑 收稿日期；２００７—０９—１２ 作者简介；扬新玲（１９６３一），女，河南济源人，副教授。 制机理的理解，以便进一步设计安全高效的新型抑 制剂。 １ 国内外天然源酪氮酸酶抑制剂的研究进展 １．１ 植物源酪氨酸酶抑制剂 刘德育等用Ｌ— ＤＯＰＡ作底物，研究了蛇葡萄素和杨梅黄索对酪氨 酸酶的抑制作用，结果显示，前者抑制存在浓度效 应，但抑制率与抑制剂浓度不呈线性关系，５Ｏ 抑制
Ｒ 维普资讯 郑州牧业工程高等专科学校学报 第２８卷 的浓度（ＩＣｓ。）为０．２０８ ｍｍｏｌ／Ｌ。双倒数作图及 Ｄｉｘｏｎ作图可知，该抑制属于竞争性抑制，并且抑制 常数（Ｋｉ）为０．０８５ ｍｍｏｌ／Ｌ。后者ＩＣ５。为０．０８２ ｍｍｏｌ／Ｌ。动力学分析知，该抑制为混合型抑制。 何冰芳等用Ｌ一酪氨酸作底物，研究了大黄蒽 醌衍生物对酪氨酸酶的抑制作用，结果显示，大黄 素对酪氨酸酶有显著的抑制作用，抑制存在浓度效 应，５Ｏ 抑制的药物质量浓度为３６．６ ｇ／ｍＬ，动力学 作图表明，大黄素对酪氨酸酶有显著竞争性抑制作 用，Ｋｉ值为１．５１×１０＿。ｍｏｌ／Ｌ。 宫霞等以Ｌ一酪氨酸为底物，测定了银杏叶提 取物对酪氨酸酶的非竞争性抑制作用，Ｋｉ为３４ｍｇ／ Ｌ，质量浓度为０．１６ｍｇ／ｍＬ时达最大抑制率 ５２．８３ 。银杏叶提取物主要成分为银杏黄酮和银 杏内酯，其分子结构含有多个还原性羟基。 王建华等研究了２Ｏ种中药抑制酪氨酸酶的作 用。结果显示，芦荟、熟地黄、玉竹、桔梗有较强的抑 制作用，抑制机理有待进一步研究。Ｚｈｕａｎ Ｍｉａｏ等 研究了２８种中药提取物对酪氨酸酶的抑制作用。 结果显示，野桐、黄芩、贝母属及红花属提取物有较 强的抑制作用，抑制机理也有待研究。 美国Ｋｕｂｏ等以Ｌ—ＤＯＰＡ为底物，研究了从 枯茗中提取的对异丙基苯醛和对异丙基苯甲酸对酪 氨酸酶的抑制作用。结果显示，两者的抑制都存在 浓度效应，ＩＣ５ｏ分别为０．０５ ｍｍｏｌ／Ｌ和０．２６ ｍｍｏｌ／ Ｌ，动力学分析知两者都为非竞争性抑制。他们还 研究了八角中含有的茴香酸（对甲氧基苯甲酸Ｐ— ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ）对酪氨酸酶的非竞争性抑制 作用，Ｋｉ值为０．６０３ ｍｍｏｌ／Ｌ。若以Ｌ一酪氨酸为 底物，茴香酸则会延长酪氨酸酶单酚活性的延迟期 （１ａｇ ｐｈａｓｅ），缩短酶反应平衡态（ｓｔｅａｄｙ—ｓｔａｔｅ ａｃ— ｔｉｖｉｔｙ）的时间。韩国Ｈａ，Ｔａｅ Ｊｏｕｎｇ等以酪氨酸为 底物，研究了羊耳菊的花中芹菜素（Ａｐｉｇｅｎｉｎ）—— ５，７，４ 一三羟基黄酮对酪氨酸酶的竞争性抑制作用 （Ｋｉ一２．５×１０＿。。ｍｏｌ／Ｌ）。ＩＣ５ｏ为４．５６ｇ／ｍＬ。 Ｌｅｅ，Ｊｏｏ Ｓａｎｇ等以酪氨酸酶活性抑制实验为 跟踪手段，从甘草中分离得到八种有抑制活性的物 质，分别是甘草素（１ｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ）、异甘草素 （ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｇｅｎｉｎ）、甘草苷（１ｉｑｕｉｒｉｔｉｎ）、异甘草苷 （ｉｓｏｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎ）、芒柄花苷（ｏｎｏｎｉｎ）、甘草香豆素 （Ｇｌｙｃｙｃｏｕｍａｒｉｎ）和甘草醇（ｇｌｙｃｙｒｏ１），其中以异甘 草素一２ 一甲氧基醚抑制活性最高（ＩＣ。。，４７ ｍｏｌ／ Ｌ）。 Ｊｅｏｎｇ，Ｃｈａｎｇ Ｈｏ等以Ｌ酪氨酸为底物，研究 了花椒叶中提取到的槲皮素对酪氨酸酶的竞争性抑 制作用（Ｋｉ一１０ ０．２０ Ｍ）。 Ｋｉｍ，Ｄｏｎｇ Ｈｙｕｎ从百合科植物尖被菊芦（Ｖｅ— ｒａｔｒｕｍ ｐａｔｕｌｕｍ）提取到白藜芦醇，并研究了它对酪 氨酸酶的抑制作用，发现糖基化能提高自藜芦醇的 抑制活性。 西班牙Ｇａｎｄｉａ—Ｈｅｒｒｅｒｏ，Ｆｅｒｎａｎｄｏ等发现黄 瓜中一种主要的挥发性成分反、顺一２，６壬二烯醛 （ｔｒａｎｓ，ｃｉｓ一２，６～ｎｏｎａｄｉｅｎａ１），在以（４一ｔｅｒｔ—ｂｕ－ ｔｙｌｃａｔｅｃｈｏ１）为底物时，对酪氨酸酶有非竞争性抑制 作用（Ｋｉ一３．４ ｍｍｏｌ／Ｌ）。研究表明黄瓜中也含有 酪氨酸酶，只是由于上述物质的存在，不能表现出活 性。 日本Ｍｉｙａｚａｗａ，Ｍｉｔｓｕｏ等研究发现，从黑米糠 提取到的原儿茶酸甲酯（ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ ａｃｉｄ Ｍｅ ｅｓ－ ｔｅｒ）在浓度为０．５０ ｍｏｌ／ｍＬ时，对酪氨酸酶的抑制 率是７５．４ ，ＩＣ５ｏ为０．２８ ｍｏｌ／ｍＬ。 １．２动物源酪氨酸酶抑制剂Ｌｉｕ，Ｘｉａｏ—ｄａｎ（中 国）等从蛤中提取得到分子量为１８．４ ｋＤａ的多肽， 研究表明，它是酪氨酸酶的混合性抑制剂，ＩＣ 。为 １．５０ ｍｇ／ｍＬ。Ｙｏｒｕｋ，Ｒ等经过缓冲液提取、透析 等步骤，从家蝇的蛹中得到一种能抑制酪氨酸酶的 物质，该物质抑制活性受ｐＨ值变化的影响较大，最 佳ｐＨ值在５左右。１００℃热处理１小时或反复冷 冻和融化抑制活性没有明显变化。Ｍａｎｉｃｋａｍ Ｓｕｇ— ｕｍａｒａｎ从烟草天蛾幼虫表皮中发现一分子量为 ３８ＯＫＤａ的糖蛋白能抑制酪氨酸酶。 １．３ 微生物源酪氨酸酶抑制剂 Ｋｉｍ，Ｊｏｎｇ— ｐｙｕｎｇ等从青霉菌的培养基和菌丝体中提取到一种 异腈类化合物Ｍｅｌａｎｏｃｉｎ，其ＩＣ５ｏ值为９．０ｍ ｍｏｌ／Ｌ。 研究结果表明，氰基是主要的活性基团。 除了抑制剂因素，实验所用底物、测定方法、酶 的来源等的不同也会引起抑制动力学模式及动力学 参数的变化。随着对酪氨酸酶高级结构及酶的抑制 机理研究的进一步加深，将为以后人工控制该酶活 性及酶抑制剂的分子设计铺平道路，对医药、化妆 品及生物保鲜等都具有重要意义。 ２酪氨酸酶抑制剂构效关系研究 ２．１ 不同活性基团与抑制机理的关系 对比不同 类型抑制剂的作用机理和抑制率，可以发现某些结 构与其抑制效果之间的关系。具有抑制活性的基团 主要是苯环上取代的羟基、水杨醛基、羧基和甲氧 基，此外还有硫醚等。单羟基及邻双羟基由于具有 底物相似的结构，能和底物竞争性地与酶活性中心 结合，故表现为竞争性抑制；羧基和甲氧基能与酶活 性中心铜离子络合降低酶的活性，从而表现为非竞
河南天然白芸豆提取物用途
河南天然白芸豆提取物用途
河南天然白芸豆提取物是从河南地区特有的白芸豆中提取而来的一种天然植物提取物。白芸豆，又名白扁豆、白鹤豆，是豆科植物，其种子是我们常见的扁豆。白芸豆提取物富含多种营养物质和活性成分，具有广泛的应用价值。
首先，河南天然白芸豆提取物具有抗氧化的效果。它含有丰富的多酚类化合物和维生素C等抗氧化物质，可以中和自由基，减少细胞的氧化损伤，延缓衰老。因此，它可以广泛应用于抗衰老领域，如抗衰老化妆品、保健品等。
其次，白芸豆提取物还具有抗炎作用。白芸豆提取物中含有丰富的异黄酮类化合物和多酚类物质，这些物质具有显著的抗炎作用。它可以抑制炎症相关的细胞因子的产生，减轻炎症反应，缓解病症的症状。因此，它可以应用于抗炎领域，如抗炎药物、消炎化妆品等。
此外，白芸豆提取物还具有美白祛斑的效果。白芸豆提取物中富含的异黄酮类化合物能够抑制黑色素的形成，减少黑斑的出现。同时，它还能够降低酪氨酸酶的活性，阻断黑色素的合成，使皮肤变得更加白皙。因此，它可以广泛应用于美白祛斑领域，如美白护肤品、祛斑产品等。
此外，白芸豆提取物还具有降血脂、抗菌、抗肿瘤和调节血糖等作用。白芸豆提取物中含有丰富的膳食纤维和多种植物化学成分，可以降低血脂，预防心血管疾病的发生。同时，它还具有一定的抗菌作用，可以有效抑制细菌和真菌的生长。此外，白芸豆提取物中的某些有效成分还具有抗肿瘤作用，可以对抗某些癌细胞的增殖。同时，它还能够调节血糖，有助于控制糖尿病的发展。
在应用方面，河南天然白芸豆提取物可以作为天然药物、保健品和化妆品的原料。在天然药物领域，它可以用于制备抗氧化剂、抗炎药物、降血脂药物和抗肿瘤药物等。在保健品领域，它可以制备成保健食品、保健药品和保健茶等。在化妆品领域，它可以作为抗衰老化妆品、美白护肤品、祛斑产品和抗痘产品等的原料。此外，由于白芸豆提取物具有广泛的应用价值，目前还有很多研究机构在研发新的应用领域和产品。
桔梗的药理学研究进展
桔梗的药理学研究进展
桔梗在药理方面的作用有镇咳、祛痰、抗炎、保肝、抗癌等药理活性。桔梗作为一种药食两用的植物，具有广阔的开发应用前景。本研究通过查阅近些年关于桔梗研究的文献，对桔梗药理活性的新进展进行了系统的总结，为桔梗在药理方面的研究和开发利用提供科学依据。
标签： 桔梗；药理学
桔梗[Platycodon grandiflorum（Jacq.）A.DC.]为桔梗科（Campanulaceae）桔梗属多年生草本植物根。收载于《中国药典）2010年版（一部）[1]。桔梗含有桔梗皂苷A、C、D、远志皂苷D1、D2等16种单体皂苷，其中桔梗皂苷D是主要苷。桔梗还含有黄酮、甾醇、多糖、酚类、聚炔、脂肪油、脂肪酸，桔梗用酸水溶解后测出14种氨基酸（苏、丛、谷、甘、丙、蛋、异亮、赖氨酸等），总含量为1.22%；还含有微量元素如锌、铁、镁、钠、钙等；挥发油聚缺类等成分[2-4]。现代药理学研究表明桔梗具有抗肿瘤、祛痰镇咳、降血糖、免疫调节等多种药理活性[5-6]。本资料就目前桔梗药理学最新研究进展进行了综述。
1?祛痰镇咳作用
桔梗是肺经的引药[7]，能促进支气管黏膜分泌从而有祛痰的作用。武博等[8]对桔梗的祛痰作用进行的体外实验中，桔梗皂苷PD和PD3的浓度为200 mg/L时大鼠气管上皮细胞黏蛋白的分泌分别增加至252.7%和370.2%，大于阳性药；对金黄仓鼠气管上皮细胞实验的结果类似，并呈剂量相关。
金在久[9]运用了小鼠酚红法，测出气管洗出液的酚红浓度显著大于对照组及氯化铵组；郑繁慧等[10]采用小鼠酚红祛痰法比较了桔梗总皂苷及桔梗总次皂苷的祛痰作用。试验结果表明：桔梗总皂苷及黑曲霉转化的桔梗总次皂苷均能增加小鼠呼吸道酚红排泌量。梁仲远[11]通过氨水引咳，观察小鼠咳嗽潜伏期和咳嗽次数。再通过测定小鼠气管酚红排泌量来评定小鼠气管黏液分泌量。与模型组比较，桔梗水提液高、中剂量组
咳嗽潜伏期显著延长，咳嗽次数显著减少。与空白对照组比较，桔梗水提液高、中剂量组小鼠气管酚红排泌量显著增加。综上所述，桔梗的祛痰镇咳作用显著，尤其是镇咳方面。
风流果提取物的功效与用法
风流果提取物的功效与用法
风流果提取物是一种天然植物提取物，具有多种功效和用途。以下是风流果提取物的一些常见功效和用法：
1. 抗氧化作用：风流果提取物富含天然抗氧化剂，可以帮助中和自由基，减少细胞氧化损伤，保护皮肤免受环境污染和紫外线辐射的伤害。
2. 皮肤护理：风流果提取物具有舒缓和滋润皮肤的功效，可以减轻皮肤炎症和刺激，增强皮肤保湿能力，改善皮肤干燥和粗糙问题。
3. 美白作用：风流果提取物中的活性成分可以抑制过度产生黑色素，减少色素沉着，均匀肤色，提亮肤色，达到美白效果。
4. 抗菌和抗炎作用：风流果提取物具有抗菌和抗炎特性，可以有效抑制细菌生长和炎症反应，适用于处理面部痘痘、疹子等皮肤问题。
5. 消炎镇静：风流果提取物有镇静和镇痛作用，可用于舒缓皮肤炎症、过敏反应和烧伤等不适症状。
6. 抑制酪氨酸酶：风流果提取物中的活性成分可以抑制酪氨酸酶的活性，阻断色斑的形成，改善黑眼圈和雀斑问题。
风流果提取物常被添加到护肤品、美容霜、面膜、洗面奶等化妆品中，也可以作为原料用于家庭护肤DIY，比如制作面膜等。一般情况下，可以根据个人需求将风流果提取物按照规定的用量加入到化妆品中，均匀涂抹于皮肤上，按摩至吸收即可。使用风流果提取物时，应遵循适量使用的原则，避免过度使用导致不适。
光果甘草乙酸乙酯相对酪氨酸酶的抑制作用
光果甘草乙酸乙酯相对酪氨酸酶的抑制作用
刘雨萌;李影影;李明静
【摘 要】酪氨酸酶是生物体合成黑色素的关键酶,实验以光果甘草为原料,研究其提取物乙酸乙酯相对酪氨酸酶活性的抑制作用及机理.采用L-多巴速率氧化法体外测定光果甘草提取物乙酸乙酯相对酪氨酸酶的抑制活性,并绘制了Lineweaver-Burk双倒数曲线以此判断其抑制类型.结果表明光果甘草提取物乙酸乙酯相半抑制浓度(IC60)为(266.5±1.4) mg/L.对酪氨酸酶抑制机理测定分析的结果表明,光果甘草提取物乙酸乙酯相对酪氨酸酶活性的抑制作用表现为可逆抑制,对酪氨酸酶活性的抑制类型是混合型抑制,抑制常数KI为(182.86±1.43)mg/L,α值为(15.49±0.68)
mg/L.可见甘草提取物乙酸乙酯相对酪氨酸酶有较强抑制作用.
【期刊名称】《化学研究》
【年(卷),期】2015(026)003
【总页数】5页(P270-274)
【关键词】光果甘草;酪氨酸酶;抑制动力学
【作 者】刘雨萌;李影影;李明静
【作者单位】河南大学化学化工学院,河南开封475004;河南大学化学化工学院,河南开封475004;河南大学化学化工学院,河南开封475004;河南大学河南省天然药物与免疫工程重点实验室,河南开封475004
【正文语种】中 文
【中图分类】TS202.3 甘草中主要活性成分有三萜类化合物、黄酮类化合物和多糖类化合物[1-3].甘草酸和光甘草定是光果甘草中的两种主要活性成分.目前发现,光甘草定是存在于光果甘草中异黄酮类成分,可清除自由基和抑制酪氨酸酶,阻止黑色素的形成.有实验表明,光甘草定能较强地抑制酪氨酸酶的活性同时具有体外抗氧化的作用[4].
目前,美白化妆品主要是以抑制酪氨酸酶的活性而发挥美白作用[5].此前这种功效成分不能兼具功能性与安全性,例如一些含汞化合物、对苯二酚等被禁止在化妆品中使用[6-7].近年来,人们新发现了许多抑制酪氨酸酶的活性成分,例如熊果苷、果酸、曲酸、VC衍生物及一些中药提取物等[8-11].这些活性成分功能性好、副作用较小,已经成为大家关注与研究的焦点.美白抑制剂不仅被应用在化妆品行业,还被研究治疗色素沉着过度引起的皮肤病等.
北沙参的药理作用分析
北沙参的药理作用分析
[摘 要]北沙参为常用中药，2005版《中华人民共和国药典》收载为伞形科植物珊瑚菜glehnia littoralis fr. schmidt ex miq.的干燥根。本品味甘微苦，性微寒，归肺、胃经。有养阴清肺、益胃生津之功效，主要用于肺热，燥咳，劳嗽痰血，热病津伤口渴。北沙参的化学成分丰富，类型复杂，而且其显著的抗肿瘤、抗氧化作用，不仅是现代专家学者关注的焦点，也为中医常将其用于抗衰老和癌症后恢复体质的中药方剂中提供了很好的理论依据。
[关键词]北沙参 药理作用
中图分类号：r282.7文献标识码：a文章编号：1009-914x（2013）17-0263-01
北沙参为常用中药，2005版《中华人民共和国药典》收载为伞形科植物珊瑚菜glehnia littoralis fr.schmidt ex miq.的干燥根。本品味甘微苦，性微寒，归肺、胃经。有养阴清肺、益胃生津之功效，主要用于肺热，燥咳，劳嗽痰血，热病津伤口渴。
1 镇咳祛痰作用
北沙参对氨水致咳小鼠有明显的镇咳作用，对潜伏期有明显延长作用；小鼠呼吸道酚红法祛痰实验表明北沙参也有较好的祛痰作用。
2 免疫抑制作用
北沙参饮片多糖和北沙参粗多糖对正常小鼠均有增强巨噬细饱吞噬功能的作用[14]。谭氏等[15]研究发现，100%北沙参水煎剂对正常小鼠巨噬细胞吞噬功能、血清溶菌酶水平和迟发超酶反应（dth）有非常显著的提高作用；对血清抗体有增强作用，但不显著；对lps诱导的b细胞增殖有显著促进作用，对cona诱导的t细胞有显著的抑制作用。刘氏等[16]研究发现，北沙参粗多糖可使阴虚小鼠体重明显增加；亦能显著增加阴虚小鼠脾脏抗体生成细胞（afc）的数量，增强dth反应，而对腹腔mφ的吞噬百分率和吞噬指数无明显影响。
3 抗促癌、抗突变及抗肿瘤作用
促癌物佛波酯（12-o-tetradecanoylphorbol-13-acetate）能够引起放射性无机磷（32pi）渗入hela细胞的磷脂中，这一磷脂代谢的改变，是促癌阶段的早期现象之一。北沙参的正己烷、乙醚和乙酸乙酯提取物，均能够抑制佛波酯引起的32pi渗入hela细胞的磷脂中，并且证明，在体内具有抗癌作用。对活性部位的进一步研究发现，主要活性成分为呋喃香豆素，其中欧前胡素和异欧前胡素（浓度为50μg/ml）抑制活性最强。
桑白皮提取物对酪氨酸酶活性抑制作用研究
桑白皮提取物对酪氨酸酶活性抑制作用研究
刘兆明;李超;王萌;张方可;孙珊珊;张春燕;王慧云
【摘 要】目的 以左旋多巴为底物考察桑白皮乙醇提取液对马铃薯酪氨酸酶的抑制作用.方法 采用不同极性溶剂对桑白皮有效成分进行提取,比较各种提取液对马铃薯酷氨酸酶的抑制效果;将提取液稀释后考察提取液浓度与抑制作用间的关系,并计算半数抑制浓度IC50值;采用高效液色谱法分析提取液的主要成分,并对具有不同保留时间成分的抑制活性进行考察.结果 甲醇和乙醇两种溶剂提取液的抑制效果最好;桑白皮提取物的抑制作用与其浓度呈现良好相关性,IC50为0.6225 mg/ml;高效液相色谱实验中抑制活性较强成分保留时间主要集中在10～15 min.结论 本研究对从桑白皮中分离纯化一些具有潜在实际应用价值的酪氨酸酶抑制成分提供了有用的参考.
【期刊名称】《济宁医学院学报》
【年(卷),期】2017(040)004
【总页数】4页(P264-267)
【关键词】桑白皮;酪氨酸酶;分光光度法;抑制作用;高效液相色谱
【作 者】刘兆明;李超;王萌;张方可;孙珊珊;张春燕;王慧云
【作者单位】济宁医学院药学院,日照 276826;济宁医学院药学院,日照 276826;济宁医学院药学院,日照 276826;济宁医学院药学院,日照 276826;济宁医学院药学院,日照 276826;济宁医学院药学院,日照 276826;济宁医学院药学院,日照 276826
【正文语种】中 文 【中图分类】R965.1
酪氨酸酶是一种含铜的多酚氧化酶，广泛存在于人体及动植物、微生物[1]，作为人体黑色素合成的关键代谢酶，与人的皮肤衰老、色素沉着性疾病的发生发展有着密切联系；此外，该酶也影响昆虫伤口愈合以及蔬菜水果的褐变[2]。
天然来源酪氨酸酶抑制剂具有安全、毒副作用低、来源广泛、效果独特等优点。从天然产物中寻找酪氨酸酶抑制成分已成为该领域当前的研究热点[3-5]。桑科植物桑白皮作为一种中医临床常用中药，主要用于治疗伏火郁肺，症见咳嗽痰多，色黄黏稠，咯吐不爽等。近年来，有研究发现其提取物具有良好的清除超氧阴离子自由基能力以及抑制酪氨酸酶能力，提示其在皮肤美白和果蔬保鲜等方面具有潜在的应用价值[6-9]。
种中药抑制酪氨酸酶活性的实验研究
6种中药抑制酪氨酸酶活性的实验研究
摘要! 目的! 研究 &种中药对酪氨酸酶活性的抑制作用1 方法! 分别用50%乙醇水溶液回流提取中药白芷、 白附子、 当归、 云苓、白蒺藜、 银杏叶- 然后浓缩提取液至膏状1用水将 $ #45膏状稀释为 $45 6 47 - 测定各自对酪氨酸酶活性的抑制率1结果! &种中药
白芷3 白附子3 当归3 云苓、白蒺藜、银杏叶都对酪氨酸酶活性的抑制率分别为 35%、55%、60%、22%、55%、40%。 结论：白附子对酪氨酸酶活性抑制作用最强
关键词! 黄褐斑； 中药； 祛斑； 美白； 酪氨酸酶 据统计- 约有,70%的被调查者认为美容的最大障碍之一是面部雀斑、黄褐斑、老年斑的
形成，它们属于常见色素沉着的皮肤病， 影响容貌， 给患者造成严重的心理压力，有报道
美白祛斑类化妆品的市场份额始终处于增长趋势。1994年日本的美白类化妆品销售额约为 1980年的二十倍。中国与日本属同一肤色人种- 巨大的市场潜力不容忽视1近年来- 对从传统药物和天然资源中寻找新药物- 已越来越受到许多发达国家和发展中国家的医药科研工
作者的重视，我国是中药的发源地- 中药3 天然药物资源丰富- 而且几千年的临床实践-给
开发和利用祛斑的天然植物提供宽广的空间1 本文在研究黄褐斑的形成机理和中药治疗黄
褐斑的基础上， 对6种常用中药进行了抑制酪氨酸酶活性的试验- 发现白附子、 白蒺藜的
提取液有较强的抑制酪氨酸酶活性的作用。 黄褐斑形成的机理及病因
由于黄褐斑患者皮损部位黑色素细胞活性增强- 黑素和黑素小体均增加- 进而表现出
色斑- 影响美容 病理状态下- 真皮内巨噬细胞可吞噬滴落入真皮的黑色素体- 或沉着于真
皮上层- 或在细胞内降解- 一部分经淋巴转移< / = 1色素的产生与排泄失去平衡- 并过剩地聚集在表皮细胞内的部分- 就形成色素沉着< & = 1黑色素的排泄有两条途径! 一是从肾内
排泄- 另一是经皮肤排出- 即黑色素被转移到角质蛋白中- 随表皮生长移行到角质层，最后
天然植物美白成分作用机理及应用详解
天然植物美白成分作用机理及应用详解
人体皮肤颜色受遗传基因、紫外线、光照时间长短及海拔等因素影响，这些因素造就了人种间的肤色差异，以中国女性为代表的黄种人大多崇尚“以白为美”“一白遮百丑”。自古以来，中国女性就有肤如凝脂、吹弹可破的美白追求，对色素沉着、雀斑等皮肤问题不断重视使得美白成为人们生活中不可或缺的一部分。传统的美白剂如氢醌、铅粉等细胞毒性大，副作用较强，已经无法满足现代人追求美白所要求的安全、滋润、温和等条件，同时“致癌”事件屡发也让人们对美白化妆品安全性的担忧日益增加。随着化妆品行业的发展，植物提取物的护肤性能日益突显，其活性成分在应用中少有负面影响，安全、高效的特性更是使得“植物护肤”理念深入人心。如今，研发更多天然植物原料已是化妆品领域研究的热点之一。大多数化妆品运用不同的植物单体成分复配组合作用于皮肤，所起到美白作用的机理有所不同。以下从美白机理出发，针对黑色素合成的不同途径，对天然植物美白成分的不同作用进行综述，并对植物美白的未来发展进行探讨和展望，以期为后续研究开发提供参考。
一、皮肤美白与黑色素形成的关系
1、影响肤色的原因
人体肤色差异通常取决于表皮层黑色素、类胡萝卜素以及真皮层血红素等的含量与分布，其中黑色素为主要影响因素。皮肤暗沉黝黑主要受黑色素合成累积数量、活性氧自由基增多、角质层变薄、皮肤血液循环阻塞、外源性紫外线辐射等因素影响，炎症及皮肤屏障受损也会诱发色斑。
2、黑色素的形成机理 皮肤白皙与否主要取决于黑色素细胞合成黑色素的能力，位于表皮基底层的黑色素细胞通过调节黑色素合成和分布来形成肤色差异。黑色素细胞中的L-酪氨酸在酪氨酸酶（Tyrosinase，TYR）作用下氧化形成多巴醌（Dopaminequinone，DQ），在酪氨酸酶相关蛋白1（Tyrosinase-relatedprotein1，TRP-1）与酪氨酸酶相关蛋白2（Tyrosinase-relatedprotein2，TRP-2）的参与下DQ进一步自氧化形成5,6-二羟基吲哚羧酸（5,6-Dihydroxyindole-2-carboxylicacid，DHICA）与5,6-二羟基吲哚（5,6-Dihydroxyindole，DHI），二者又经过一系列催化聚合最终合成黑色素（见图1）。表皮层细胞的树突结构运输合成的黑色素至角质形成细胞中重新分布，随细胞分化迁移至角质层中脱落或造成肉眼可见的色素沉着和斑点。黑色素合成越多，肤色越黑，反之则肤色越白皙。此外，当紫外线照射角质形成细胞，细胞内会产生大量活性氧自由基，迁移至黑素细胞后打破原有氧化还原稳态，刺激TRP-1和TRP-2的表达，进而导致黑色素合成量增加。