竹叶黄酮的提取、纯化及抗氧化性能研究
竹叶黄酮的提取、纯化及抗氧化性能研究作者：龙旭高静张光辉来源：《当代化工》2019年第02期摘 ;;;;;要：对竹叶中的黄酮类化合物进行提取、纯化及抗氧化性能研究。
考察了大孔树脂对竹叶黄酮的吸附、解吸工艺参数，当黄酮上样量流速为1.0 mL/min，pH为5.0时，黄酮吸附率最高为80.13%。
当洗脱剂乙醇流速为1.5 mL/min，乙醇浓度为60%时，黄酮解吸率最佳为90.6%。
竹叶黄酮在光照、强酸、强碱条件下，自由基清除率下降明显。
关 ;键 ;词：竹叶;黄酮;抗氧化中图分类号：R 284 ;;;;;;文献标识码： A ;;;;;;文章编号： 1671-0460（2019）02-0299-04Abstract： The extraction， purification and antioxidation of the flavonoids from bamboo leaves were studied. The best conditions for adsorption and desorption of the flavonoids by macroporous resin were investigated. When the samples flow velocity was 1.0 mL/min and pH was 5.0， the highest adsorption amount of flavonoids was 80.13%. Meanwhile， the highest desorption amount was 90.6% when ethanol flow velocity was 1.5 mL/min and ethanol concentration was 60%. The test results of antioxidant activities showed that illumination， strong acid and alkali conditions made free radical scavenging rate of flavonoids markedly decrease.Key words： Bamboo leaves; Flavonoids; Antioxidant竹子是禾本科、竹亚科的多年生常绿植物，其种类较多，全世界约有70多属，约1 200余种，总种植面积达2 100万公顷[1]。
竹叶在中国具有悠久的药食使用历史，竹叶黄酮是竹叶的主要功能物质，具有显著的降血脂、抗炎、抗突变、抗溃疡、抗菌、抗癌活性、降血清胆固醇、抗氧化、抗病毒、抗衰老及抗疲劳等生理活性，是一种优质的天然活性产物[2-6]。
因此，以竹叶作为原料提取黄酮类有效成分对我国竹资源的充分利用具有深远的现实意义。
竹叶黄酮具有抗氧化生物活性，本研究为了获得有效利用竹叶中黄酮类物质的途径，拟通过热回流提取、大孔树脂纯化后再考察竹叶黄酮体外抗氧化性能，為竹叶的开发利用提供理论依据。
1 ;实验部分1.1 ;实验试剂与仪器1.1.1 ;实验试剂竹叶（学校采摘），无水乙醇（AR，天津天力化学试剂有限公司），石油醚（AR，天津天力化学试剂有限公司），硝酸铝（AR，重庆茂业化学试剂有限公司），亚硝酸钠（AR，重庆茂业化学试剂有限公司），氢氧化钠（AR，重庆茂业化学试剂有限公司），芦丁标准品（HPLC 98%，北京万佳首化生物科技有限公司），1， 1-二苯基-2-苦肼基（DPPH，分析纯，Sigma-Aldrich公司）。
1.1.2 ;实验仪器恒温磁力搅拌器（HJ-3A），紫外-可见分光光度计（UV1102，日本岛津），循环水多用真空泵（SHB-III），电热鼓风干燥箱（上海一恒），粉碎机（HX-200），电子分析天平，旋转蒸发仪（Buchi R-210），恒温振荡器（THZ-82A）。
1.2 ;实验步骤及表征1.2.1 ;竹叶黄酮热回流提取新鲜竹叶用清水清洗干净后在鼓风干燥箱中于50 ℃干燥24 h，再用粉碎机粉碎过40目筛子备用。
称取竹叶细分20 g加入至回流瓶中，加200 mL 80%的无水乙醇，在80 ℃回流3 h，获得竹叶提取液。
抽滤获得滤液，再对残渣重复提取2次后合并滤液，将总滤液于80 ℃旋转蒸发，去除多余溶剂获得浓缩液。
为了去除浓缩液中的脂类成分，采用石油醚萃取3～5次，直至上层液呈现无色或近似无色为止。
1.2.2 ;芦丁标准曲线的绘制精确称取芦丁标准品0.002 5 g置于小烧杯中，加40%乙醇溶解并定容于25 mL容量瓶中，即得0.1 mg/mL的芦丁标准品溶液。
移取芦丁标准品溶液1.50 mL，置于10 mL容量瓶中，再加入5%的亚硝酸钠溶液0.30 mL，摇匀，放置6 min;随后加入10%硝酸铝溶液0.30 mL，摇匀，放置6 min;加入1.0 mol/L的氢氧化钠溶液4.00 mL，用40%乙醇溶液定容，摇匀，放置15 min备用。
以不加芦丁标准品溶液作为空白样。
将含不同浓度芦丁标准品的溶液置于紫外—分光光度计（波长范围：400～600 nm）内进行测定。
量取芦丁标准品溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL，分别置于10 mL容量瓶中，加5%亚硝酸钠溶液0.30 mL，摇匀，放置6 min;加10%硝酸铝溶液0.30 mL，摇匀，放置6 min。
加1.0 mol/L氢氧化钠溶液4.00 mL，用40%的乙醇溶液进行定容，摇匀，放置15 min。
以不加芦丁标准品溶液作为空白样。
采用紫外—分光光度法在510 nm波长处测定吸光度，以芦丁浓度（mg/mL）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制标准曲线。
1.2.3 ;大孔树脂预处理以AB-8型大孔树脂对竹叶黄酮进行分离纯化。
用95%的乙醇溶液浸泡24 h使其充分溶胀，然后将树脂装入填充柱，用4 BV（柱床体积）浓度为4%的盐酸溶液过柱，蒸馏水洗至中性，再用4 BV浓度为4%的氢氧化钠过柱，蒸馏水洗至中性，处理后的AB-8型树脂即可用于后续实验。
1.2.4 ;大孔树脂对竹叶黄酮的动态吸附及解吸实验（1）上样流速对树脂吸附性能的影响将树脂装入层析柱后连接恒流泵及样品自动收集器，在298 K时，让竹叶黄酮样品按照不同的速率上样，考察大孔树脂的吸附性能，每间隔5 mL收集流分，用紫外-可见分光光度计检测黄酮含量。
（2）进料pH对树脂吸附性能的影响考察竹叶黄酮溶液pH值的改变对大孔树脂吸附性能的影响。
通过在298 K时，控制进料浓度为1.0 mg/mL，流速为1 mL/min，进行动态吸附。
（3）洗脱剂洗脱速率对树脂解吸性能的影响在298 K时，控制进料浓度为1.0 mg/mL，流速为1 mL/min，对大孔树脂进行上样。
用100 mL的蒸馏水洗涤后，用浓度为60%的乙醇分别按照0.5，1.0，1.5 mL/min的洗脱速率对吸附在大孔树脂上的黄酮样品进行洗脱，每间隔5 mL收集流分，用紫外-可见分光光度计检测黄酮含量。
（4）洗脱剂浓度对树脂解吸性能的影响在298 K时，控制进料浓度为1.0 mg/mL，流速为1 mL/min，对大孔树脂进行上样。
用100 mL的蒸馏水洗涤后，用不同浓度的乙醇溶液按照1.0 mL/min的速率进行洗脱，每间隔5 mL收集流分，用紫外-可见分光光度计检测黄酮含量。
1.2.5 ;抗氧化研究测定竹叶黄酮清除DPPH自由基的能力，考察其抗氧化活性。
测定时，将竹叶黄酮试样配置成系列不同浓度的溶液，测定不同浓度的竹叶黄酮试样对DPPH自由基的清除率[7，8]。
以浓度作为横坐标，DPPH自由基清除率作为纵坐标作图，得到竹叶黄酮浓度与自由基清除率的关系图谱。
在517 nm波长下，通过测定竹叶黄酮在不同光强度和pH等条件下吸光度值的变化，对竹叶黄酮抗氧化活性的稳定性进行研究。
2 ;实验结果与分析2.1 ;芦丁标准曲线按照上述实验方法分析获得芦丁的标准曲线，结果如图1所示。
以浓度作为横坐标，吸光度作为纵坐标，通过线性回归得到标准曲线方程为：A = 0.001 81+9.414 07C，R = 0.999 98。
2.2 ;上样流速对竹叶黄酮吸附性能的影响上样流速对大孔树脂的吸附效率及目标成分的吸附量均存在一定的影响。
通过调控上样液的流速分别为1.0，2.0，3.0，4.0和5.0 mL/min，考察对大孔树脂吸附效果的影響，结果如图2所示。
从图中可以明显看出，随着上样流速的逐渐增加，吸附量急速降低，这是由于流速过快时，竹叶黄酮中的大分子化合物与AB-8树脂的接触时间较短，导致目标成分还来不及扩散并吸附到树脂内表面就随着上样液流出。
但是，当上样液流动速度较慢时，竹叶黄酮中的有效成分与大孔树脂有相对充分的时间进行吸附，所以当上样吸附速率为1.0 mL/min吸附率最高。
2.3 ;进料pH对树脂吸附性能的影响本研究考察了黄酮原液pH分别为3.0，4.0，5.0，6.0，7.0和8.0时，树脂吸附性能的变化情况。
从图3可以看出，当原液pH为5.0时树脂的吸附量最大，但逐渐增大原液pH值或减小pH值时，树脂的吸附率均有所下降。
这是由于原液酸度过大时，黄酮与酸会生成烊盐并以离子的状态存在不利于吸附。
当原液碱度过大时，则质子易被强碱俘获，使酚羟基上的氢解离形成酸根离子，而AB-8树脂只对分子态物质有吸附，对离子态的物质无吸附，导致黄酮与树脂的结合减弱使吸附量降低。
2.4 ;洗脱剂洗脱速率对树脂解吸性能的影响洗脱剂流速对树脂解吸性能的影响结果如图4所示。
从图4中可以看出，当洗脱液流速不同时，对应的洗脱峰位置和洗脱峰形状也会略有所差异。
对比三种洗脱峰可知，洗脱剂流速为1.5 mL/min时，对应的洗脱峰峰形较窄、对称性好且基本无拖尾。
但是，随着洗脱剂流速逐渐降低，峰形越来越宽且拖尾明显[9]。
2.5 ;洗脱剂浓度对树脂解吸性能的影响改变洗脱剂乙醇的浓度对黄酮的解吸率的影响如图5所示，从图中可以看出随着乙醇浓度的增大解吸率逐渐升高，当乙醇浓度为60%时，解吸率达到90.6%。
但是再增加乙醇浓度，解吸率缓慢降低。
2.6 ;光强度对竹叶黄酮抗氧化性能的影响光对竹叶黄酮抗氧化性能的影响结果如图6所示。
从图6中可以看出，光照对DPPH自由基的清除率影响较大。
在避光情况下，竹叶黄酮对自由基的清除率随时间的增长虽然有所下降但是变化不是很明显。
在光照的条件下，自由基的清除率随时间增长急剧减小，这是由于竹叶黄酮类化合物中含有酚羟基，而在光照的条件下酚羟基易于被氧化[10]，因此，竹叶黄酮的抗氧化性能下降明显。
2.7 ;pH对竹叶黄酮抗氧化性能的影响改变溶液的pH值会影响竹叶黄酮在溶液中的存在形态，从而导致其抗氧化性能发生改变（如图7）。
竹叶抗氧化物使用办法
竹叶抗氧化物是一种具有本土资源特色及安全高效经济、自主知识产权的天然食品抗氧化剂。
具有高效的抗脂质氧化性能外，还兼具抗菌、抑菌、除臭、增香的作用。
那么竹叶抗氧化物如何使用呢?
一、竹叶抗氧化物使用用量：
竹叶抗氧化物允许的使用范围：食用油脂、肉制品、水产品和膨化食品，而使用最大量为0.5g/kg。
二、竹叶抗氧化物功效
作为多功能的食品添加剂，竹叶抗氧化物已被证明具有多种功效作用。
张英等研究表明，竹叶提取物具有较强的清除活性氧自由基的作用，且呈显著的量效关系。
此外，竹叶黄酮还具有降低动物及人体的血清甘油三酯含量、升高高密度脂蛋白胆固醇含量的作用;药理研究表明，竹叶黄酮能增加冠脉流量、增加心肌收缩力、改善心肌缺血、抑制凝血和血栓形成，对脑缺血有一定的保护作用。
三、竹叶抗氧化物化学成分分析
竹叶抗氧化物含有大量的竹叶黄酮糖苷、植物酚酸、葱醌类、萜类、内酯类化合物，总黄酮含量≥30%。
其中黄酮类化合物主要是黄酮碳苷，包括莼草苷、
异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷等,这些化合物可通过高压液相色谱法和二极管阵列紫外检测器检测得到。
ZhangYu等用上述研究方法分别检测了高温灭菌奶、葵花籽油和膨化雪米饼中的黄酮碳苷含量，结果表明，3种食物中黄酮碳苷含量分别为12.56、881.08、1420.83ug/100g，以干基计，相对标准偏差小于2.2%。
酚酸类化台物主要是肉桂酸的衍生物，包括绿原酸、咖啡酸、对香豆酸和阿魏酸等，它们均属芳香族酯肪酸类化合物，带酚羟基，具有重要的生理和药理活性。
以上就是有关竹叶抗氧化物的一些相关介绍，希望对您进一步的认识了解有所帮助。
黄酮类化合物的提取纯化方法
黄酮类化合物的提取、药用价值和产品开发应用前景任红丽2009090141摘要：对黄酮类化合物的药用价值、提取工艺、分离方法等方面进行综述。
在药用价值方面,讨论了其抗抑郁作用、抗氧化与自由基消除活性作用、对化学性肝损伤的保护作用、抗肿瘤作用、抗骨质疏松作用、抗心肌缺血作用;在提取工艺方面,讨论了溶剂提取法、超声提取法、酶法、微波法等;及其开发应用，为今后黄酮类化合物的深入研究提供理论基础。
关键词：黄酮类化合物提取工艺药用价值黄酮类物质是一类低分子天然植物成分，是自然界中存在的酚类物质[14]，又称生物黄酮或植物黄酮，属植物次级代谢产物，广泛存在于各种植物的各个部位，尤其是花、叶，主要存在于芸香科、唇形科、豆科、伞形科、银杏科与菊科中。
迄今，已有数百种不同类型的黄酮类化合物在植物中被发现，人工合成的黄酮类化合物也不断问世。
最初这类物质仅用于染料方面，自20世纪20年代，槲皮素、芦丁等黄酮类物质用于临床后，才开始引起人们的关注，研究发现其中相当一部分具有显著的生理及药理活性，例如抗氧化、抗病毒、抗炎、调节血管渗透性，改善记忆，抗抑郁、抗焦虑、中枢抑制、神经保护等功能[2,12]诸多生理和药理特性使其广泛应用于食品、医药等领域。
1.提取纯化方法1．1 传统提取方法1．1．1 热水提取法水是最廉价的提取溶剂，是地球最丰富的物质，无色无味无毒，对人体和环境无害，挥发性不大，具有真正的绿色环保意义。
但用水作为提取溶剂时，从中药材中提取的黄酮类化合物中杂质含量较多，往往因泡沫或粘液很多，给进一步分离带来许多麻烦，而且浓缩也会很困难。
此外，水提取物容易发霉发酵[22]。
1．1．2 碱性水、碱性稀醇浸提法中草药中黄酮类成分多为多酚类化合物，因其结构中具有酚羟基[7]，故可用碱性水或碱性稀醇液来提取中草药中的黄酮类化合物。
黄酮母核的多样性主要是由黄酮本身骨架、环系的变化、氧化程度和数量而定，当碱的浓度过高，加热时便破坏黄酮类化合物的母核。
淡竹叶的水提工艺研究
淡竹 叶别名竹 叶门冬青（ 《 分类 草药性 》 ） 、 山鸡 米（ 《 华 南经济 禾 参 数 。 草植物》 ） 、 金竹叶（ 《 广西 中兽医药植》 ） 、 野麦冬 （ 《 广 西中药志》 ） 、 土麦 ３含 量 测 定 方 法 冬（ 《 闽东本草》 ） 等。淡竹叶具有清 热除烦 ， 利尿通淋 的功效 。淡竹叶 ３ ． １ 供试品溶液的制备：取淡竹叶提取液 ２毫升，加 ３ ０ ％乙醇 ４ 常用 于 口舌生疮 、 牙龈肿痛 、 肺热 咳嗽 、 胃热 呕哕等。《 现代实用 中 毫升， 超声处理溶解 ， 放冷 ， 转移至 １ Ｏ毫升容量瓶 内 ３ ０ ％乙醇定 容 ， 滤过 ， 取续滤液 ， 既得 。 药》 记载： ” 清凉解热 ， 利尿。治 热病 口渴 ， 小便 涩痛 ， 烦热不寐 ， 牙龈 摇 匀 ， 肿痛 ， 口 腔炎 。“ 竹叶具有抗 自由基 、 抗衰老 、 抗氧化 、 降血脂 和血胆 ３ ． ２ 对照 品溶液 的制 备：精 密称取 干燥 至恒重 的芦 丁对 照 品 固醇 的作用【 １ － Ｓ ｌ 。竹叶 中含有酚酸类 化合 物 、 萜类 内酯 、 黄酮糖苷 、 葸 １ ０ ｍ ｇ 于一百毫升量瓶中， 加３ ０ ％乙醇 五十毫升 ， 超声使 溶解 ， 放冷， 用 醌类化合物 、 香 豆素类 内酯 、 特种氨基酸和活性肤 、 锰、 锌、 硒等微量 ３ ０ ％乙醇稀释至刻度 ， 摇匀 ， 既得 。 元 素。本文对淡竹 叶提取工艺进行研究。 ３ ． ３波长 的选择 ： 取样 品液适量 ，置于 ２ ５ ｍ Ｌ量瓶 中， 先加 ５ ％亚 １ 实 验 部 分 硝酸钠溶液一毫升， 摇匀 ， 放置六分钟； 加１ ０ ％硝酸铝一毫升， 摇匀， 放 试 剂与仪器 ： 置六分钟； 再加 ４ ％氢 氧化钠 十毫升， 用３ ０ ％乙醇稀释 至刻度， 放置十 硝 酸铝（ 济南运 嘉化 工有 限责任公 司） 、 氢氧化钠 （ 青州市鑫隆化 五分钟，以试剂 为空 白参 比液在 ４ ２ ０ ～ ７ ０ ０ ｎ ｍ波长范围测定络合物 工 有限公 司 ） 、 亚硝 酸钠 （ 上海 臣明化工有 限公 司 ） 、 硫 酸铵（ 济 南运 的吸光度， 络合物 于 ５ ０ ０ ｎ ｍ波长处有最大 吸收， 故测定时选用此 波 嘉 化工有 限责 任公 司） 、 无水 乙醇 （ 上海 臣 明化工有 限公 司 ） 、 乙醇 长 。 ３ ． ４标 准 曲线 的制 备：精密 吸取对 照品溶液 ０ ｍ Ｌ 、 ０ ． ５ ｍ Ｌ 、 １ ． ０ （ 青州市鑫隆化工有限公 司 ） 。 Ｔ Ｕ 一 １ ９ ０ １ ／ Ｔ Ｕ紫外可见分光光度计 （ 北 京普析 通用仪器有限责任公 司） ； Ｈ ｉ ｓ ｔ ｏ ｏ ｎ Ｌ ａ ｂ １ － ０ ５ 实验 室超 斛 尔 ｍ Ｌ 、 ２ ． ０ ｍ Ｌ 、 ３ ． ０ ｍＬ 、 ４ ． ０ ｍ Ｌ 、 ５ ． ０ ｍ Ｌ 、 ６ ． ０ ｍＬ 、 ７ ． ０ ｍＬ ，分 别 置 于 顿（ 中国） 有限公司）； ｖ ｅ ｒ ｔ ｅ ｘ等度高效液相色谱仪（ 上海禾 工科学仪 ２ ５ ｍ Ｌ量 瓶中， 加分别 加入 ８ ｍＬ 、 ７ ． ５ ｍ Ｌ 、 ７ ｍＬ 、 ６ ｍＬ 、 ５ ｍ Ｌ 、 ４ ｍ Ｌ 、 器 有 限公 司 ） ； Ｆ Ａ ２ ０ ０ ４电子 分析 天平 （ 济南 普纳仪 器设 备有 限公 ３ ｍ Ｌ 、 ２ ｍ Ｌ 、 ｌ ｍ Ｌ ３ ０ ％乙醇， 摇匀， 先加 ５ ％亚 硝酸钠溶液 一毫升， 摇 司） ； 梅特勒 一托利多 Ｓ Ｇ ２ 一 Ｅ Ｌ Ｋ便携式精 密酸度计（ 北京联合 科仪 匀， 放 置六 分钟； 加 １ ０ ％ 硝 酸铝 一毫升， 摇 匀， 放 置六分钟 ； 再加 ４ ％氢 科技有 限公 司 ） ； Ｓ Ｃ Ｑ 一 ５ ２ ０ １ 超声波清洗器 （ 上海声彦超声仪 器有限 氧化钠十毫升， 用甲醇稀 释至刻度 ， 放置 １ ５ 分钟 ， 用第一管作空 白对 公 司）。 照， 在５ ０ ０ Ｅ ｔ ｍ处测吸光度， 以吸光度㈧ 为横坐标 、 浓度 （ ｃ ） 为纵坐标， ２实验 绘制标准曲线 。线性 范围为 ０ ． ５ ～ ７ ｍｇ 。 ４ 结论 ２ ． １ 提取次数对总黄酮收率的影 响 称 取淡竹 叶 １ 公斤， 加 入 ８倍量蒸馏水 ， 先 浸泡 ４小 时后煎煮 淡竹 叶总黄酮最佳提取工艺 为分别提取 ２次 ，第一次加 入 ｌ ２ 提取 ４次 ， 每次 ６ ０ 分钟 ， 分别对每次提取液进行含量测定 。实验结 倍量蒸馏 水 ， 浸泡 ６小时后煎煮 ８ ０分钟 ， 第二次加入 ｌ ０倍 量蒸馏 果表明样 品的第 三次 和第 四次提取液总黄酮含量非常低 ， 第二次 的 水煎煮 ６ Ｏ分钟。本工艺稳定 、 可行 、 收率高 。 提取液虽然低 于第一 次提取液但含量还很高 ， 所 以采用提取两次。 参考 文献 ２ ． ２提取时间对黄酮收率的影响 【 １ 】 高志强， 江相 兰， 宋仲容． 竹 叶中黄酮类化合物 的研 究进展评 迷【 Ｊ 】 ． 分 别称取样 品 １ 公斤 ， 分别提取 ２次 ， 分别 采用第一 次 ８倍量 西南民族大学学报（ 自然科学版） ， ２ ｏ ｏ ５ （ ｏ １ ） ． 蒸馏水 ， 浸泡 ４小 时后 煎煮 ６ ０分钟 ， 第 二次 ８倍量蒸 馏水煎 煮 ６ Ｏ 【 ２ 】 李映红， 刘红梅 ， 严银钫 ， 罗德 生， 郑 红花， 王梅娟 ， 姚旌 旗． 竹 叶提 取 分钟 ； 第一 次 ８ 倍量蒸 馏水 ， 浸泡 ４小时后煎 煮 ８ Ｏ 分钟， 第 二次 ８ 液对 小鼠移植性肿 瘤生长的抑制作 用 ［ Ｊ ］ ．湖北 中医学院学报， ２ ０ ０ ２ 倍 量蒸馏水 煎煮 ８ ０ 分钟 ； 第一次 ８ 倍量蒸馏水 ， 浸泡 ４ 小时后煎煮 Ｄ ４ ） ． １ ０ ０分钟 ， 第二 次 ８ 倍量蒸 馏水煎煮 １ ０ ０分钟 ， 测定 每次提取 液总 ［ ３ 】 陈泉， 吴立 军， 阮丽军． 中药淡竹叶的化学成分研 究（ Ｉ Ｉ ） ［ Ｊ 】 ． 沈 阳药科 黄酮含 量。实验结果表 明第一 次提 取 ８ ０分钟和提取 １ ０ ０分钟总黄 大学学报， ２ ｏ ０ ２ （ ０ ４ ） ． 酮含量无 明显差别 ，提取 ８ ０分钟总黄酮含量明显高于 ６ Ｏ 分钟 ， 所 ［ ４ 】 刘明， 吴启 南， 宋秋烨， 邬云 霞． 淡竹叶清热作 用药效植 物基 础研 究 以采用第一 次提取 ８ Ｏ分钟为提取 时间。第 二次提取 ６ ０分钟 、 ８ Ｏ分 【 Ｊ 】 ． 时珍 国 医国药２ｏ ｏ ９ （ ｏ ８ ） ． 钟、 １ ０ ０ 分钟 总黄酮 含量无明显差别 ， 所 以选择提取 ６ ０ 分钟为第 二 【 ５ 】 薛月芹， 宋杰， 叶素萍， 袁珂 ． 淡竹叶 中黄 酮苷 的分 离鉴定及其抑 菌
竹叶黄酮用途
竹叶黄酮用途竹叶黄酮是一种自然产生的植物化合物，主要存在于一些竹属植物中，如毛竹、青龙竹、翡翠竹等。
它是一种多酚类化合物，具有极强的抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性。
竹叶黄酮的主要用途之一是抗氧化。
它具有很强的自由基清除能力，可以有效抑制细胞的氧化损伤。
自由基是导致许多疾病发生的主要原因之一，如心血管疾病、癌症、糖尿病等。
竹叶黄酮的抗氧化作用可以减少自由基对细胞的伤害，保护细胞的完整性，有助于预防和治疗相关疾病。
此外，竹叶黄酮还具有抗炎作用。
炎症是许多疾病的共同特征，如关节炎、肠炎、哮喘等。
竹叶黄酮可以抑制炎症反应的发生和发展，减少炎症损伤。
它能够抑制炎症相关的酶活性，减少炎症介质的释放，从而缓解炎症症状，促进组织的修复和康复。
此外，竹叶黄酮还具有抗菌作用。
它对多种细菌、真菌和病毒均具有较强的抑制作用，能够抑制它们的生长和繁殖。
竹叶黄酮可以破坏细菌细胞壁，使其死亡；抑制病毒的复制，并阻断它们进一步感染细胞；破坏真菌的菌丝和孢子，从而减少真菌感染。
因此，竹叶黄酮被广泛应用于食品工业、医药领域和农业领域中。
竹叶黄酮还被发现具有抗肿瘤作用。
它能够抑制肿瘤细胞的增殖和生长，诱导肿瘤细胞的凋亡。
竹叶黄酮可以阻断肿瘤细胞的血管生成，从而抑制肿瘤的生长和扩散。
它还可以增强免疫系统的功能，提高机体对肿瘤的抵抗力。
因此，竹叶黄酮在肿瘤治疗中具有潜在的应用前景。
此外，竹叶黄酮还具有降血糖、降血脂、促进骨骼健康、改善睡眠质量等作用。
现代研究表明，竹叶黄酮可以提高胰岛素的敏感性，促进葡萄糖的利用，从而降低血糖水平。
它还可以降低胆固醇和三酸甘油脂的含量，预防心血管疾病的发生。
此外，竹叶黄酮中的活性物质对骨细胞有直接刺激作用，可以促进骨骼的新陈代谢和增生。
此外，竹叶黄酮还具有镇静安眠的效果，能够改善睡眠质量。
综上所述，竹叶黄酮具有多种重要的生物活性，具有广泛的应用前景。
它不仅可以用于食品工业、医药领域和农业领域，还可以作为保健品和药物的原料，用于疾病的预防和治疗。
淡竹叶中总黄酮的提取与含量测定
工艺流程过程和分光光度法从淡竹叶中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证。结果 测得样品中总黄酮的含量浓度ｃ＝１．３８５，平均回收率为１００．６％，ＲＳＤ为１．９９％，其纯度和产率均较 高。结论该方法采用全物理过程，无任何化学变化及污染，是提取淡竹叶中总黄酮类物质的有效 途径。 【关键词】淡竹叶；总黄酮；含量测定
世界中西医结合杂志２００９年第４卷第３期Ｗｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ
Ｔｒａｄｉｆｉｏｎａｌ ａｎｄ
Ｗｅｓｔｅｒｎ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
２００９，Ｖ０１．４，Ｎｏ．３
・１７７・
・药物研究・
淡竹叶中总黄酮的提取与含量测定
岳秀梅
【摘要】 目的探讨淡竹叶中总黄酮的提取方法及其含量测定的方法。方法采用纯物理的
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】
Ｌｏｐｈａｔｈｅｒｉ
ｖｏｎｅｓ
Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ
ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ
ｃｏｎｔｅｎｔ
ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｉｎ
ｗｅｒｅ
Ｇｒａｃｉｌｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
Ｐｕｒｅ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｌｏｗ ａｎｄ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ Ｒｅｓｕｌｔｓ １１ｌｅ
ｆｌａｖｏｎｅｓ ｆｒｏｍ Ｌｏｐｈａｔｈｅｒｉ Ｇｒａｃｉｌｉｓ．
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｌｏｐｈａｔｈｅｒｉ
Ｇｒａｃｉｌｉｓ；Ｆｌａｖｏｎｅｓ；Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
淡竹叶首载于明代《本草纲目》，李时珍日：“处 处原野有之，春生苗，高数寸，细茎绿叶，俨如竹米， 落地所生细竹之茎，其根一窠数十须，须上结子，与 门冬一样，但坚硬尔，随时采之，八九月抽茎结小花 穗。”该药味甘、淡、寒，归心、胃、小肠经，具有清热 除烦、利尿的功效，多用于热病烦渴、口舌生疮、小 便赤色、淋痛等症…。淡竹叶中含有的黄酮类化合 物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖等多种生理活 性旧Ｊ，因而有效地开发和利用淡竹叶中黄酮类化学 成分具有重要意义。为了充分利用，笔者对竹叶中 黄酮类成分进行提取与鉴别。 实验材料 新鲜淡竹叶、９５％乙醇、甲醇、三氯化铝、盐酸、 正丁醇、芦丁标准品均为中国药品生物制品检定所 药品。ＵＶ２７５５Ｂ紫外可见光分光光度计为上海分 析仪器总厂产品，ＤＺＦ２１５０小型真空恒温干燥箱由 郑州长城科工贸易有限公司生产，８０２２离心沉淀器 为上海分析器械厂产品，ＺＦ２１型三用紫外线分析仪 为上海顾村电光仪器厂产品。
长节箬竹叶总黄酮提取工艺
容 重可 以作 为判 别 基 质 物理 性 质 的简 单 而 直 观
［］ ２ 傅更生 ， 叶小春 ， 春林 ， 容器苗 不同时 期造林 效果研究 初报 吴 等．
［ ］ 江西林业科技 ，９６ ２ ：７ ２ ． Ｊ． １９ （ ） ２ — ８
［］ ３ 冯爱民 ， 进 生 ， 申 李健军 ． 石灰岩地 区侧柏容 器育苗造林 技术 ［ ］ Ｊ．
技
ｉபைடு நூலகம்ｔ发 ＝
３ 结
论
牛粪 可 以降低基 质 的 容 重 ， 改善 基 质 的物 理性 质 ， 从 而 更有 利 于油松 容器 苗 的生长 ， 油松 容器 苗生 长较好 的基质 容重 在 ０８ｇｃ 右 ， 当地 的普 通 育 苗 基 ． ／ｍ 左 比
苗高 、 地径 、 根长 、 数 、 侧根 生物量 是评 价苗木 生长 状 况的基本 而直观 的指 标 ， 芽 干质 量 是苗 木 的一 个 顶 重要质量指标 ， 其是油松容器 苗质 量 的决 定性 指标 ， 尤
顶芽不成 熟 或 被破 坏 ， 阻 碍 高 生 长 达数 年 之 久 。 会 Ｊ
质（ 田园土 ） 降低２ ％ 一 ８ ； ０ ２ ％ 同时， 低容重基质可以 大 大 降低 容 器苗造 林 的运输 成本 。
参 考 文 献
［ ］ 连忠 ， 传佳 ． 木 容 器育 苗 研 究综 述 ［ ］ 林 业 科 技 开发 ， １戚 汪 林 Ｊ．
竹叶黄酮的作用及其在养殖业中的应用
养殖与饲料2021年第03期竹叶黄酮的作用及其在养殖业中的应用杨仕群阳刚邓茗月宜宾职业技术学院，四川宜宾644003摘要竹叶含有丰富的黄酮类化合物，竹叶黄酮是一种具有多重生理功效的新型天然活性物质，具有高开发应用价值。
科学界对竹叶黄酮作了大量研究，本文综述了竹叶黄酮的作用（抗氧化、清除自由基，阻断亚硝化反应、抗癌，抑菌、抗炎，调节血脂、降血清胆固醇，抗心脑血管疾病）及其在养猪、养鸡、养牛业中的应用。
关键词竹叶黄酮；作用；养殖业；应用收稿日期：2020-10-11基金项目：竹叶黄酮体外抑菌研究（ybzysc17-23）杨仕群，女，1976年生，硕士，副教授。
竹叶黄酮，又名竹叶抗氧化剂，简称AOB ，开发于20世纪90年代，最初以淡竹叶为原料进行植物萃取提取的一种植物类有机物质，其功效广泛，对机体保健、抗病、抗衰老等具有重要价值。
目前的研究表明该物质具有清除自由基、抗氧化、抗菌、抗微生物及保护心脑血管等多种医疗功效。
目前竹叶黄酮与其他植物提取物一样具有较强的抗氧化作用，将其逐步应用在养殖业中有利于提高养殖效益，增强动物机体体质和抗病力等。
1竹叶黄酮的主要作用1.1抗氧化、清除自由基有研究报道类黄酮里的PN3抗氧化活性最强[1]。
我国卫生部于2007年批准了竹叶抗氧化剂（AOB ）作为天然食品添加剂，AOB 可以用作食品中的抗氧化剂、防腐剂、调味品。
有研究表明AOB 对丙烯酰胺可形成抑制作用，可有效减少加工食物中丙烯酰胺的形成[2]。
氧化应激是由自由基与抗氧化活性之间的失衡导致，生物分子的氧化损伤与自由基有关，诱导多种氧化产物产生细胞损伤[3]。
前人研究报道植物体内的天然抗氧化剂在防止氧化应激和减少活性氧（ROS ）方面起着至关重要的作用，已被用于抑制或减轻氧化损伤和相关疾病，一些富含活性化合物的植物提取物可减轻细胞损伤，维持细胞正常生理功能[4]。
罗宇倩等[5]发现竹叶黄酮的抗氧化能力比Vc 强，在抗氧化方面具有重要的应用价值。
提取黄酮苷的提取方法
提取黄酮苷的提取方法黄酮苷是一类具有广泛生物活性的天然化合物，广泛存在于植物中，具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，黄酮苷的提取方法成为研究的重要一环。
黄酮苷的提取方法常用的有以下几种：传统提取方法、超声波提取、微波辅助提取、超临界流体萃取等。
传统提取方法是一种经典的提取方法。
常用的溶剂有乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。
该方法步骤相对简单，一般可以分为以下几个步骤：取适量的植物材料，加入适量的溶剂，进行浸泡提取，常温振荡提取一定时间，过滤提取液，浓缩提取液，得到黄酮苷。
超声波提取是一种物理辅助提取方法。
超声波通过产生空化效应、颤动效应和微流动效应等，可以增强溶剂对植物材料的穿透性和扩散性，从而达到提取黄酮苷的效果。
该方法主要步骤为：取适量的植物材料和适量溶剂，放入超声波提取仪中，设置好提取条件（如温度、时间、频率等），开启超声波提取仪，进行提取，得到黄酮苷。
微波辅助提取是利用微波的热效应和非热效应来实现快速、高效的提取。
该方法步骤较简单，可以分为以下几步：取适量的植物材料和适量溶剂，放入微波辅助提取设备中，设置好提取条件（如功率、温度、时间等），开启微波辅助提取设备，进行提取，得到黄酮苷。
超临界流体萃取是利用超临界流体的特性，在高压条件下实现物质的提取。
超临界流体是介于气体和液体之间的状态，具有低粘度、高扩散性和良好的渗透性等特点。
超临界流体萃取主要步骤如下：将植物材料和超临界流体（如二氧化碳）放入超临界流体提取装置中，加热、加压，使其达到超临界状态，进行提取，经过减压、冷却等步骤，得到黄酮苷。
除了以上几种常用提取方法外，还有其他一些新兴的提取方法，如离子液体萃取、反相微乳液萃取等。
这些方法在黄酮苷提取方面也取得了一定的成果。
综上所述，黄酮苷的提取方法多种多样，根据不同的研究目的和实际需求选择合适的方法进行提取是非常重要的。
不同的提取方法在提取效率、操作简便性和环境友好性等方面存在差异，研究人员可以根据自己的需求选择最适合的提取方法。
提取和纯化植物中的黄酮类化合物
提取和纯化植物中的黄酮类化合物黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的重要天然产物，具有多种生理活性和药理活性。
在植物学、药学以及医药领域中，提取和纯化植物中的黄酮类化合物是一项重要的研究工作。
本文将介绍提取和纯化植物中的黄酮类化合物的方法和技术。
一、提取植物中的黄酮类化合物植物中的黄酮类化合物一般存在于根、茎、叶、花等不同部位，因此，提取黄酮类化合物的方法也有所不同。
下面介绍几种常用的提取方法：1. 浸提法浸提法是最常用的提取方法之一。
将研究对象的植物材料与适量的溶剂（如乙醇、乙醚、水等）一起浸泡一段时间，使溶剂渗入植物材料中，溶解黄酮类化合物的同时将其提取出来。
2. 超声波辅助提取法超声波提取法利用超声波的作用加速提取过程。
将植物材料与溶剂置于超声波浴中，超声波的压缩与膨胀引起溶剂中形成微小气泡，气泡破裂时带动溶剂迅速进入植物细胞内，加快提取过程。
3. 水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法是一种温和的提取方法。
将植物材料与水一起在蒸馏器中加热，水蒸气通过植物细胞，带走黄酮类化合物，随后凝结回成液体，得到提取物。
二、纯化植物中的黄酮类化合物提取后的植物提取物中往往还有其他杂质和成分，需要通过纯化技术进一步分离和纯化黄酮类化合物。
下面介绍几种常用的纯化方法：1. 柱层析法柱层析法是最常用的分离和纯化技术之一。
将提取物溶解在适量的溶剂中，然后通过填充了固定相的柱子进行分离。
黄酮类化合物根据其在固相上的亲水性和疏水性的差异而被分离。
2. 高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是目前最常用的分离和纯化方法之一。
利用高压泵将样品通过填充了固定相的柱子进行分离。
通过调整流动相的组成和流速，可以实现黄酮类化合物的分离和纯化。
3. 冻干法冻干法是一种将溶液中的水分通过减压冻结脱水的方法。
将提取物溶解于适量的溶剂中，然后经过冷冻和真空干燥过程，将溶剂中的水分蒸发掉，得到纯化后的黄酮类化合物。
三、应用植物中的黄酮类化合物黄酮类化合物具有多种生理活性和药理活性，广泛应用于食品、医药等领域。
黄酮提取方法
黄酮提取方法黄酮是一类重要的天然产物，具有多种生物活性，包括抗氧化、抗炎、抗癌等功效，因此受到广泛关注。
黄酮化合物存在于许多植物中，如水果、蔬菜、茶叶等，但含量较低，因此需要进行提取和纯化。
下面将介绍几种常见的黄酮提取方法。
1. 溶剂提取法。
溶剂提取法是最常见的黄酮提取方法之一。
首先将待提取物粉碎成粉末状，然后使用有机溶剂（如乙醇、丙酮等）与样品进行浸提，使黄酮溶解于有机相中，再通过蒸发或萃取的方式得到黄酮提取物。
这种方法简单易行，但存在有机溶剂残留和环境污染的问题。
2. 超临界流体萃取法。
超临界流体萃取法是一种绿色环保的提取方法，常用的超临界流体包括二氧化碳、乙烷等。
在高压、高温条件下，超临界流体具有较高的溶解能力，可以高效地提取黄酮化合物。
此外，超临界流体萃取还具有溶剂残留少、操作简便、产品质量好等优点。
3. 超声波辅助提取法。
超声波辅助提取法是近年来发展起来的一种新型提取技术。
通过超声波的作用，可以破碎细胞壁，增加溶剂与样品的接触面积，加速物质的迁移和扩散，从而提高提取效率。
与传统的浸提方法相比，超声波辅助提取具有提取时间短、温度低、对活性成分影响小等优点。
4. 微波辅助提取法。
微波辅助提取法是利用微波加热的原理，将样品与溶剂一同置于微波场中，通过分子的摩擦和碰撞产生热量，加速提取物的溶解和扩散。
微波辅助提取具有提取速度快、能耗低、对环境无污染等特点，适用于大批量样品的提取工作。
总结。
以上介绍了几种常见的黄酮提取方法，每种方法都有其特点和适用范围。
在实际应用中，可以根据实验要求和条件选择合适的提取方法，以获得高纯度、高效率的黄酮提取物。
随着科学技术的不断发展，相信会有更多高效、环保的提取方法出现，为黄酮提取工作带来新的突破和进步。