普通细菌培养
医院常规细菌培养(1)
医院常规细菌培养(1)医院常规细菌培养是临床微生物学中不可或缺的一个环节，是诊断疾病和制订治疗方案的重要依据。
下面从常规细菌培养的方法、过程和意义三个方面进行阐述。
一、方法医院常规细菌培养是指采用一系列技术方法将病原微生物分离培养出来、明确其种类和数量的过程。
具体方法如下：1.取样。
体液如血、尿、脑脊液等通过无菌技术采样。
2.标本前处理。
主要包括清洁、消毒等步骤，以防止空气和表面微生物污染。
3.分离微生物。
采用无菌棉签或接种环将标本转移到培养基上，进行器械对每种菌株的分离。
4.接种培养基。
将制备好的培养基表面进行接种。
5.培养。
菌落在培养基上生长并繁殖，在一定时间内可通过肉眼或显微镜观察到。
6.鉴定。
通过菌落形态、色素、生长速度等方面的鉴定，对分离和培养出的微生物进行明确种类的鉴定。
二、过程医院常规细菌培养的过程是一个漫长而复杂的过程。
通常情况下，细菌培养会分为初步鉴定和决定鉴定两个阶段：初步鉴定通过菌落的大小、形态、产生气味等特征判断目标微生物的种类；而决定鉴定则是通过进一步的生化试验和特殊的染色技术等手段确认细菌的种类，为后续的治疗提供准确的依据。
三、意义医院常规细菌培养的意义在于：1.确定病原菌种类。
通过对分离出的病原菌进行鉴定，医生才能按照正确的药物敏感性数据和治疗建议进行个性化治疗。
2.预测病情变化。
通过观察菌落数量和菌群的变化，预测病情的发展趋势和变化，制定合理的治疗方案。
3.判断治疗效果。
随着治疗方案的调整，医院常规细菌培养也可以对治疗效果进行“实时监测”；4.预防疾病扩散。
通过对病原微生物的细菌培养，防止疾病的扩散和传播，保护公共健康。
总之，医院常规细菌培养作为临床诊断的重要环节，对于人们的健康和生命有着重要的作用。
因此，在临床实践中，应加强细菌培养技术的应用和熟练度提高，以提高临床诊断和个性化治疗水平。
细菌培养方法
细菌培养方法
细菌培养是微生物学中的一项重要技术，它可以用于研究细菌的生长特性、代谢活动、耐受性等。
在实验室中，我们常常需要进行细菌培养来获取大量的细菌菌落，以便进行后续的实验操作。
下面将介绍几种常用的细菌培养方法。
首先，我们需要准备好培养基。
培养基的选择要根据所研究的细菌种类和研究目的来确定，常见的培养基有富养基和简易培养基两种。
富养基适用于大多数细菌的培养，而简易培养基则适用于特定细菌的培养，比如兰氏培养基适用于肠道菌的培养。
在制备培养基的过程中，需要严格按照配方比例进行配制，并进行高压蒸汽灭菌，以确保培养基的无菌。
其次，我们需要进行细菌的接种。
接种是将细菌菌种转移到培养基上的过程，常用的方法有平板法、液体培养法和深层培养法。
平板法是将细菌菌种均匀涂布在富养基琼脂平板上，使细菌在琼脂表面形成菌落；液体培养法是将细菌菌种接种在含有培养基的试管或烧瓶中，进行液体培养；深层培养法则是将细菌菌种均匀混合到含有琼脂的试管中，使细菌在琼脂内部形成菌落。
接种后，需要将培养皿或试管放入恒温培养箱中进行培养。
最后，我们需要进行培养条件的控制。
细菌的生长需要适宜的温度、湿度和氧气气氛。
一般来说，细菌的培养温度在25-37摄氏度之间，不同的细菌对氧气的需求也不同。
在培养过程中，需要定期观察细菌的生长情况，及时调整培养条件，以促进细菌的生长和繁殖。
细菌培养是微生物学研究中的重要技术之一，掌握好细菌培养方法对于科研工作者来说至关重要。
通过本文介绍的几种常用的细菌培养方法，相信大家对细菌培养有了更深入的了解，希望能对大家的科研工作有所帮助。
细菌培养实验步骤
细菌培养实验步骤细菌培养实验是生物学和微生物学中常见的实验之一。
通过培养细菌，我们可以了解它们的生长规律、形态特征、代谢能力等方面的信息。
在进行细菌培养实验时，需要严格遵守一定的实验步骤和注意事项。
本文将介绍细菌培养实验的一般步骤，以供参考。
1.准备培养基和试剂在进行细菌培养实验前，首先需要准备培养基和相应的试剂。
常见的培养基有琼脂培养基和液态培养基。
琼脂培养基通常由琼脂、蛋白胨、胨提取物等组成。
液态培养基通常由蛋白胨、胨提取物、葡萄糖等组成。
此外，还需准备相应的试剂，如抗生素、酶解液等。
2.消毒操作在进行实验前，需要进行严格的消毒操作。
可以使用消毒柜或高温高压消毒器进行物品的消毒，如试管、培养皿、移液器和培养棒等。
同时，需要在实验室环境中保持洁净。
3.准备细菌菌种细菌菌种可以通过冷冻保存的方式获得，也可以从其他实验室或相关机构索取。
在开始实验前，需要将细菌菌种提取出来进行预培养。
提取菌种的方法有刷子擦取法、酒精灯燃烧法、涂布法等。
提取后需要将菌种接种到培养基上。
4.培养细菌将接种了菌种的培养基放入培养箱中，通常在37摄氏度下进行培养。
培养箱应保持恒温恒湿的状态，确保细菌的正常生长。
培养时间视细菌种类和需求而定，通常需要24-48小时。
5.观察细菌生长定时观察细菌的生长状态，包括细菌的形态特征、颜色、菌落大小和形状等。
可以使用显微镜观察细菌的细胞结构。
此外，也可以进行细菌数量的计数。
6.鉴定细菌细菌鉴定是确定细菌种类的过程。
可以使用生理生化试验、血清学试验、酶活性检测等方法来鉴定细菌。
常见的鉴定方法有青霉素抗性试验、氧需氧试验、甲状腺试验等。
7.防止细菌污染在进行细菌培养实验时，需要注意防止细菌污染。
避免在空气中停留时间过长、操作手法避免直接接触培养物、务必要良好的实验室操作规范管理。
8.培养细菌的保存完成细菌培养后，可以将培养物冷冻保存或保存在琼脂平板上。
冷冻保存需要将培养物在低温下保存，如-80摄氏度的冰箱中。
一般细菌培养及鉴定 yi
一般细菌培养及鉴定 yi一般细菌培养及鉴定引言：细菌是一类微小的生物体，广泛存在于自然界中的各种环境中，包括水体、土壤、空气等。
它们的数量庞大，种类繁多，对人类和环境有着重要的影响。
了解、培养和鉴定细菌，在微生物学研究和应用中具有重要的意义。
一、细菌培养细菌培养是指将细菌分离于自然环境或患者样品中，通过合适的培养基和环境条件，培养细菌使其生长繁殖。
常用的培养基有固体培养基和液体培养基两种。
一、固体培养基固体培养基是以琼脂作为凝胶剂制成，通常为糖和蛋白质组成的基础培养基，如普通营养琼脂培养基、肉膏蛋白琼脂培养基等。
它们透明或半透明，适合于分离单个细菌菌落并鉴定。
制备固体培养基时，需要先将琼脂与所需的营养物加入适量的水中，经加热至溶解，然后热纯化，最后倒入培养皿中，等待凝胶化。
在接种菌落时，可用支架将细菌接种环插入琼脂中，在清洁环境条件下进行。
二、液体培养基液体培养基是指无琼脂的培养基，通常为糖和蛋白质组成的溶液，如普通液体培养基、牛肉膏培养基等。
液体培养基适合于大量培养，为细菌提供了较好的营养环境。
制备液体培养基时，需要将所需的营养物加入适量的水中，按照一定的比例加入各种营养物质，然后进行煮沸和杀菌，最后配制成适合细菌生长的pH值。
二、细菌鉴定细菌鉴定是指通过一系列检测和实验手段，确定从样品中分离出的细菌的种类和特性。
细菌鉴定主要包括形态学特征、生理生化特性、免疫学性质和分子特征等几个方面。
一、形态学特征形态学特征是指通过显微镜观察细菌的形态结构、形态特点以及细菌间的排列方式进行鉴定。
包括细菌的形状、大小、胞内结构等。
常用的显微镜观察方法有普通显微镜观察和电子显微镜观察。
二、生理生化特性生理生化特性是指通过生物化学实验，了解细菌的生长特性、代谢能力和对不同物质的反应性。
常用的生理生化鉴定实验有氧气需氧性实验、产酸性实验、芳香化合物降解实验等。
三、免疫学性质免疫学性质是指通过免疫学实验，检测细菌对特定抗原的反应和免疫学特性进行鉴定。
细菌培养方法
细菌培养方法细菌培养是微生物学实验中非常重要的一环，通过细菌培养可以获得大量的细菌菌落，为后续的实验提供充足的菌种。
正确的细菌培养方法可以保证实验结果的准确性和可重复性。
下面将介绍一些常用的细菌培养方法及其注意事项。
1. 瓶培养法。
瓶培养法是最常见的细菌培养方法之一。
首先，准备好含有适当培养基的试管或烧瓶，然后在无菌条件下将培养基装入试管或烧瓶中，再加入适量的细菌菌种。
接着，将试管或烧瓶盖好，放入恒温培养箱中进行培养。
在培养的过程中，要注意保持培养基的湿润和无菌，避免细菌的污染。
2. 平板培养法。
平板培养法常用于观察细菌的形态和进行单菌种的分离。
首先，将含有固体培养基的平板培养皿加热至液态状态，然后倒入适量的培养基，待培养基凝固后，用无菌的吸管或棉签沾取细菌菌种涂抹在培养基表面。
接着将培养皿盖好，放入恒温培养箱中进行培养。
在培养的过程中，要注意避免培养皿的翻倒和细菌的交叉污染。
3. 液体培养法。
液体培养法常用于大规模培养细菌。
首先，在含有适当培养基的培养瓶中加入适量的细菌菌种，然后盖好培养瓶，放入恒温摇床中进行培养。
在培养的过程中，要注意调节培养瓶中的通气量和培养温度，以促进细菌的生长和繁殖。
4. 培养条件的控制。
在进行细菌培养时，要严格控制培养条件，包括温度、湿度、通气量等。
不同种类的细菌对培养条件的要求有所不同，因此在进行培养前要对细菌的生长条件有所了解，以保证培养的成功。
5. 培养基的选择。
不同种类的细菌对培养基的要求也有所不同，因此在进行细菌培养时要选择适合的培养基。
常用的培养基包括营养琼脂、大肠杆菌选择性琼脂、葡萄糖琼脂等，根据实验的需要选择合适的培养基进行培养。
总之，正确的细菌培养方法对于微生物学实验的准确性和可重复性至关重要。
在进行细菌培养时，要严格遵守无菌操作规范，控制好培养条件和选择合适的培养基，以保证实验结果的可靠性。
希望本文介绍的细菌培养方法能够对您有所帮助。
普通细菌培养鉴定操作规程
普通细菌培养鉴定操作规程1检验目的做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导临床治疗及预后和流行病学的调查。
2原理人体很多部位与外界相通，存在栖息菌群，但不致病，当菌群失调或分离到致病菌则具有临床意义；另外机体某些部位是无菌的，如检出细菌则视为致病菌。
并排除采样及操作污染。
3标本要求(1)标本类型：血液，骨髓，脑脊液，胸水，腹水，尿液，等体液；痰液，前列腺液，脓液，组织分泌物或穿刺液等。
(2)标本采集：见标本采集手册(3)标本储存和运输：室温放置，室温运输并立即送检。
人泌尿生殖道标本如白带前列腺液等需临床标本接种于巧克力平板或特殊的运送培养基并置保温设备中送检。
(4)标本拒收状态：非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。
4容器和添加剂类型均使用灭菌器InI盛放标本5试剂(1)试剂名称：革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、麦康凯平板、相关生化试剂等(2)试剂生产厂家：XX生物技术有限公司6仪器设备：(1)接种针、接种环、酒精灯、(2)BACTTST黑马微生物鉴定系统。
(3)显微镜、GNP-P270隔水式恒温培养箱、SWYJTF超净工作台、MCoT5A三洋牌二氧化碳培养箱、0414-1台式离心机、FA1004电子天平7校准程序(送XX市计量质量检测研究所校准)8操作步骤(1)血液、骨髓、脑脊液等标本按照培养目的增菌培养12T8小时后盲目接种或待自动分析仪报警后接种。
(2)接种：以上增菌标本及其他临床标本用接种环取标本接种环划线血平板及其他选择性培养基上,35℃培养过夜，观察结果。
(3)涂片：肉眼见细菌生长，取生长物涂片做革兰氏染色；(4)纯培养：根据需要接种血平板、巧克力、中国蓝/麦康凯或厌氧平板过夜培养以获得纯培养。
(5)鉴定：按照鉴定仪要求调配菌液浓度，细菌的鉴定见BACTTST黑马微生物鉴定系统10质量控制：参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动11生物参考区间血液，骨髓，脑脊液等无菌部位采取的标本未见细菌生长；其他标本如大便，痰液为正常菌群或未见致病菌。
细菌培养方法
细菌培养
细菌培养是一种将细菌放置在适当的培养基上，以便它们能够繁殖和生长的方法。
在细菌培养的过程中，细菌会利用培养基中的营养物质、水和氧气等物质进行代谢活动，从而生长和繁殖。
下面是细菌培养的一些基本步骤：
选择适当的培养基：不同的细菌需要不同的培养基，选择适当的培养基可以促进细菌的生长和繁殖。
准备培养基：将适当的培养基配制好，并将其倒入培养皿中。
接种细菌：将需要培养的细菌接种在培养基上，可以用匀菌器在培养基表面均匀涂抹，也可以用注射器在培养基中注入细菌。
培养：将培养皿放入恒温培养箱中，控制好温度、湿度和氧气等条件，让细菌在培养基上生长和繁殖。
观察：观察细菌的生长情况，可以通过肉眼、显微镜等方法观察细菌的数量、形态、颜色等特征。
存储：将培养好的细菌进行存储，可以用冷冻保存或冷藏保存等方法，以备后续实验或使用。
需要注意的是，在进行细菌培养的过程中需要严格遵守无菌操作规范，避免细菌污染。
这包括使用无菌器材、消毒培养器具、穿戴无菌手套等。
同时，也需要注意控制好培养条件，比如温度、湿度、氧气等，以避免影响细菌的生长和繁殖。
细菌培养是微生物学和生物技术领域中非常重要的实验技术，它可以用于研究细菌的生理代谢、毒力、抗药性等方面，也可以用于生产抗生素、发酵食品、制备生物材料等方面。
因此，掌握细菌培养技
术对于相关领域的研究和应用具有重要意义。
一般细菌培养及鉴定 仪器法
一般细菌培养及鉴定仪器法《一般细菌培养及鉴定仪器法》细菌培养及鉴定是微生物学研究中非常重要的一部分，通过对细菌进行培养和鉴定，可以了解其形态、生长特性、代谢途径等，从而为疾病诊断、药物研发以及环境监测等方面提供支持。
在传统的细菌培养与鉴定方法中，一些基础实验仍然采用手工操作，但随着科技的进步，仪器法在细菌培养和鉴定中的应用也越来越广泛。
一般细菌培养仪器法主要包括自动化培养设备、自动化鉴定系统以及基因测序技术等。
自动化培养设备可以帮助研究人员自动进行菌种的筛选、分离和培养。
这些设备可以在一定条件下模拟出合适的培养环境，从而提高培养的效率和成功率，缩短培养时间。
自动化鉴定系统则能够通过检测细菌的生理特征、代谢产物以及遗传物质等，来鉴定细菌的种属和特性。
这些系统可以根据事先设定的鉴定标准，快速准确地完成对细菌的鉴定工作，并且可以进行数据的自动处理和记录，大大提高了鉴定的精确性和效率。
基因测序技术则是一种新兴的细菌鉴定方法，通过对细菌的基因组进行测序和分析，可以准确地确定细菌的种属、亚种、基因型以及与其他细菌的关系等。
这种方法不仅可以提供更为详细的细菌鉴定信息，还可以帮助研究人员深入了解细菌的遗传特征和进化关系。
细菌培养及鉴定仪器法的应用在许多领域都得到了广泛的推广和应用。
在临床医学中，自动化培养设备和自动化鉴定系统可以帮助医院快速准确地鉴定出导致感染或疾病的致病菌，从而指导临床治疗。
在食品与农业领域，细菌培养及鉴定仪器法可以用于食品卫生监测和农产品质量检测，以保障食品安全和农产品的质量。
此外，细菌培养及鉴定仪器法还可以用于环境监测、生物兵器防御、药物研发等领域。
总之，细菌培养及鉴定仪器法在微生物学研究和实际应用中起着重要的作用。
随着科学技术的不断进步，人们对细菌培养及鉴定仪器法的需求也在不断增加，相信在未来的发展中，细菌培养及鉴定仪器法会变得更加高效、准确和智能化。
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红霉素
阳性球菌
倪语星，王金良.抗微生物药物敏感性试验规范.上海：上海科学技术出版社，2002，7-
代表药物在药敏试验中的作用 ——代表性
代表性药物在药敏试验中的作用不仅仅局限于该药物本 身, 还代表与其相关的抗菌药物
类似药物，药敏结果可用于解释相关药物
头孢孟多、头孢尼西和头孢呋辛
亚胺培南和美洛培南
的尿液标本可选择呋喃妥因，中枢神经系统感染的脑脊液可 选氯霉素、头孢呋辛等（能通过血脑屏障）
代表药物在药敏试验 中的作用——代表性
代表性药物在药敏试验中的作用不仅仅局限于该药物本 身, 还代表与其相关的抗菌药物 代表药物 头孢噻吩 四环素 菌种 肠杆菌科 所有 所代表药物 头孢噻吩、头孢匹林、头孢拉定、 头孢氨苄、头孢克罗和头孢羟氨苄 四环素类如强力霉素、二甲胺四环 素、多西环素（仅可预测敏感）、 米诺环素（仅可预测敏感） 阿齐霉素、克拉霉素和地红霉素
葡萄球菌属 葡萄球菌属 非产β －内酰胺酶的 肠球菌 链球菌属
肠杆菌科细菌 肠杆菌科细菌
任何二代或三代头孢菌 素耐药 任何脲基青霉素耐药
细菌耐药概念
多重耐药（MDR）: 指细菌同时对三种以上结构
不同（作用机制不同）抗菌药物耐药，如头孢菌
素、喹诺酮类、氨基糖苷类
泛耐药（ PDR）:细菌对本身敏感的所有药物耐
环丙沙星和左氧氟沙星 洛美沙星、诺氟沙星和氧氟沙星 头孢噻肟和头孢曲松 青霉素G和氨苄西林 阿奇霉素、克拉霉素和红霉素 万古霉素、替考拉宁
代表药物在药敏试验中的作用 ——预报性
如金葡菌对苯唑西林耐药提示对所有β-内酰胺类耐药 革兰阳性球菌耐庆大霉素提示对氨基糖苷类耐药
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
肺炎链球菌选择苯唑西林提示青霉素耐药性
特别说明
细菌室的方法：药敏试验采用全自动微生物分析仪，
为MIC法，有固定的药敏组合。
多为有氧培养：普通细菌培养、真菌培养、支原体培 养、 L型培养。 厌氧培养：特别申请
说 明
药敏试验是参照CLSI推荐的标准制定的。 细菌全自动分析仪的药敏组合是固定的。 某些细菌对某类抗生素天然耐药，则不需要做药 敏试验。 试验的药物代表一类药，而不是一种药。
说 明
对葡萄球菌一代比三代头孢治疗效果好。
有些药物不适用于单独使用，仅用于联合用药，
如利福平。
因为是体外药敏试验，有些药体外试验敏感，可
能临床治疗无效。
细菌的耐药性
细菌耐药性：是细菌抵抗抗菌药物杀菌、抑菌作
用的一种防御能力，一种生物学的表型。
天然耐药（固有耐药）
获得性耐药：需要做药敏试验
如大肠和克雷伯菌药敏中选三代头孢（头孢他啶、头 孢噻肟）或氨曲南可提示细菌是否产ESBLs 在肠球菌药敏中选高浓度庆大霉素或链霉素可提示能 否采用联合用药方案。
代表药物在药敏试验中的作用 ——预报性
菌属和菌种 葡萄球菌属 葡萄球菌属 代表性药物结果 青霉素敏感 青霉素耐药而 苯唑西林敏感 苯唑西林耐药 红霉素耐药 青霉素敏感 青霉素敏感 推测其他药物结果 其他青霉素类、头孢类和碳青霉烯类敏感 对青霉素酶不稳定的青霉素类耐药，但对其它青霉素酶稳定的青霉素类、 β －内酰胺/β －内酰胺酶抑制剂复合物、相关的头孢类和碳青霉烯类敏 感 对所有的β -内酰胺类包括所有青霉素类、头孢类、β 内酰胺酶抑制剂复 合物、碳青酶烯类均耐药 可能诱导克林霉素耐药，避免或小心使用 氨苄西林、阿莫西林、氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林、 哌拉西林/他唑巴坦敏感 氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢克洛、 头孢地尼、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢唑肟、头孢曲松、头孢呋辛、头孢 泊肟、亚胺培南、氯碳头孢、美罗培南敏感 可能产β -内酰胺酶，避免使用任何一代或二代头孢菌素 可能产青霉素酶，避免使用氨基和羧基青霉素
微生物培养药敏报告解读
十 堰 市 太 和 医 院 湖北医药学院附属医院
2013年11月
杨宏伟
药敏试验的目的
使用体外试验的方法检测细菌的耐药
性，预测抗菌药物的临床治疗效果，并为
临床医生针对某一特定的临床感染问题选 用药物提供依据----实施个体化治疗。 结果：可告诉医生什么抗生素不能用 ，而不是推荐用什么抗生素！
药
细菌耐药概念
超级细菌:并非科学概念，一般指PDR与部分 MDR，没有确切定义，以下细菌属于此列：
MRSA/VRSA; VRE; MDR-PA,PDR-AB; ESBL(+)+AmpC(+) 肠杆菌 CRE （产KPC酶、包括产NDM-1细菌）
MRSA：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 VRSA： 耐万古霉素金黄色葡萄球菌 VRE： 耐万古霉素肠球菌 ESBLs： 超广谱β-内酰胺酶 KPC酶： 产碳青霉稀酶的一种KPC型 NDM-1：Ⅰ型新德里金属β-内酰胺酶
--B组：首选抗生素，在下列情况下选择使用
细菌对A组抗生素耐药 病人对A组抗生素过敏
可根据被检测菌的MIC，选择联合用药
药敏试验可以提供哪些信息
药物种类的选择（天然耐药的抗菌药物不做药敏
药敏试验） 检测耐药机制，根据耐药机制提示对其他抗菌药 物的敏感性 检测标志性药物，提示对其他抗菌药物的敏感性 检测试验抗菌药物的敏感性
药敏试验结果的报告
选择性药敏结果选择性报告 --A组：首选，常规试验和报告
泛耐药铜绿假单胞菌/不动杆菌
对抗假单胞青霉素（替卡西林、哌拉西林），抗假单胞氨基 糖苷（吉他霉素、妥布霉素），抗假单胞三代头孢（头孢哌
酮、头孢他啶）和亚胺培南、环丙沙星、氨曲南等均耐药
可能有效的药物 多粘菌素B（E） 米诺环素，多西环素 替加环素（铜绿假单胞菌耐药）
大剂量舒巴坦
常见细菌的天然耐药情况
马越,李景云,金少鸿.细菌耐药性监测分析中应注意的问题.中国抗生素杂志 ,2005，30(12):763
药敏试验药物选择原则
代表性：所选药物应具有代表性及对同类药物有提示作用
，同类药物通常只选择一种或几种代表品种
预报性：选择药物可对抗菌药物使用或耐药机制有提示作
用
特殊性：选择感染部位有较高浓度的抗菌药。如尿路感染