色谱柱活化和保养
• • • •
4
新柱测柱效
•
建议新色谱柱按COA 报告测试柱效 例如：C18 测试柱效方法：
测试液的配制方法：邻-二甲苯（600ul）溶于 100 ml 流动相中. 萘 50 mg，溶于100 ml流动相 流动相：60/40 乙腈/水 流速：1.25 mL/min 检测波长：254 nm 进样体积：3.0 uL
可能原因
样品体积过大； 色谱柱过载
溶解样品的溶剂选用不当
解决办法
减少进样体积； 稀释样品； 将样品在流动相中溶解；如果不行， 尽可能将进样体积降低（如1微升） 更换色谱柱； 使用较温和的分离条件 更换色谱柱的滤网； 使用柱前过滤装置； 过滤样品 彻底清洗进样器； 更换进样器转子
色谱柱有“塌陷”、短流或断流
13
色谱常见故障排除
基线漂移
锯齿状基线 流动池中有气泡 灯接近使用寿命 小波基线 流动池中有气泡 温度波动 漂移 梯度洗脱 平衡时间不够长 色谱柱键合相或硅胶溶解 温度缓慢变化
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色谱常见故障排除
压力高 压力高
预柱堵塞 柱头堵塞 更换预柱 更换柱头的滤网；反向冲洗柱子； 更换色谱柱 更换管路
可能原因
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色谱常见故障排除
负峰
解决办法
可能原因
流动相中有比分析物 更强紫外吸收或折光 指数的物质
调整检测波长，改变流动相组成
流动相与样品溶剂折 光指数有很大差别
用流动相溶解样品
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正相色谱常见故障排除
解决方案 峰型变型 重现性差 调整进样溶剂极性，相同于流动相 对于硅胶柱，加入预用水平衡的流动相或0.1%-0.5%甲醇 用键合性硅胶柱（NH2,CN, Diol）
2
内容
• • • • 新色谱柱活化 色谱柱日常使用保养 色谱柱日常保存 色谱柱清洗和再生
3
新色谱柱活化
•
使用新的C18色谱柱时,用甲醇或乙腈冲洗20-30个柱体积，然后用甲醇/ 乙腈：水（50：50）冲洗10个柱体积，然后再用流动相平衡10-30柱体 积 使用新的正相色谱柱时，用流动相平衡20-30个柱体积。 Thermo 部分品牌的氨基柱和氰基柱是保存在正相流动相中，用于反相 色谱时，请先用异丙醇或乙醇冲洗色谱柱50-100个柱体积 当用HILIC 模式时，新柱用50倍柱体积50/50 乙腈/水活化和平衡，然后 再用流动相平衡20个柱体积 离子色谱柱（SAX,SCX):新柱先用100%甲醇/或乙腈冲洗20个柱体积， 然后转换到流动相平衡
色谱柱滤网堵塞
进样器没有彻底清洗
20
色谱常见故障排除
保留时间不稳定
可能原因
流速变化
解决办法
检查系统是否有漏； 更换泵的密封圈； 排净气泡； 保持流动相pH值在2-7.5 范围内 检查泵；检查滤网； 防止流动相的挥发或降解
键合相流失
流动相的组成有变化
温度变化
使用色谱柱恒温箱
色谱柱未完全平衡
平衡好色谱柱
色谱柱活化和保养
Thermo Fisher Scientific 金琦芸
1
Thermo CCS 部门介绍
• ThermoHypersil-Keystone的前身是成立于1976年,并且是世界知名的液相 色谱柱和液相色谱填料的专业公司Hypersil公司,所生产的创新型分离材料 在国际市场得到了广泛的应用。 • 随着时间的推移，Hypersil成为了Thermo Electron公司的一部分,并在2000 年顺利地收购了Keystone 公司现在正式的成为了ThermoHypersilKeysone公司。产品包括液相色谱柱，气相色谱柱，样品瓶和固相萃取小 柱等等。
出现“鬼峰”
样品中未知的组分 色谱柱被污染
溶剂中有杂质 流动相和溶解样品的溶剂不互溶
三氟乙酸被氧化
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色谱常见故障排除
出现肩峰或 前延柱头“塌陷”造成死体积
解决办法
更换预柱 更换色谱柱
溶解样品的溶剂选择错误
用流动相溶解样品，如果不可以，应将 进样体积降至很低（如1微升）
柱外效应的影响
检查毛细管连接
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色谱常见故障排除
可能原因
峰形展宽
色谱柱“过载”或进样体积过大 溶解样品的溶剂选用不当 缓冲溶液的浓度太稀
解决办法
减少进样体积；稀释样品
用流动相溶解样品 使用浓度稍高的缓冲溶液或者 换用其它的缓冲溶液 检查毛细管连接 检查是否有漏；使用小的检测池
柱外效应的影响 色谱柱和检测器之间有漏； 检测器的检测池过大 色谱柱温度太低； 流动相的黏度太高 连接用的毛细管太长； 柱外死体积太大 色谱柱柱效下降
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色谱常见故障排除原则
•避免问题
•确定问题所在！
•一次仅改变一种因素! • 将处理问题的时间降到最低 •确保同样的问题发生过至少两次! • 预测可能出现的问题 •对故障排除工作作好记录!
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25
解决办法
管路堵塞
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色谱常见故障排除
可能原因
上一针样品中没有完全流出的物质
解决办法
待样品中的组分尽可能完全流出后才进下一个样品； 每运行完一个样品后用强极性的溶剂冲洗色谱柱； 改进样品的预处理；组分复杂的样品尽可能使用 梯度方法 改进样品的预处理 每运行完一个样品后用强极性的溶剂冲洗色谱柱； 改进样品的预处理 使用色谱纯的溶剂 尽可能用流动相溶解样品 流动相尽量每天新配；使用三氟乙酸时，应 使用抗氧剂
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溶剂
溶剂中的杂质会导致出现“鬼峰”，特别是梯度方法 溶剂纯度的影响
8
溶剂
溶剂混合产生的问题 流动相中所使用的不同溶剂必须互溶
流动相中溶剂不互溶会导致: 1. 基线漂移， 2. 保留时间的重现性差， 3. 出现肩峰和“鬼峰”的问题.
注意： 过高浓度的磷酸盐缓冲溶液可能会在有机溶剂中析 出
9
色谱柱的日常保存
• 再生： 用100%水，甲醇，三氯甲烷，甲醇， 100%水分别冲洗20个柱体积，在第 一次用100%水 时，进样5次200ul二甲亚砜DMSO。
11
正相色谱柱的清洗和再生
• 再生： 用四氢呋喃，甲醇，四氢呋喃,二氯甲烷，正己烷， 分别冲洗20个柱体积，
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离子色谱柱的清洗和再生
• 每天冲洗保存： 用 100% 水冲洗30个柱体积去除盐，，然后用100% 甲醇/或乙腈冲洗20 个柱体积后保存在50% 甲醇/或乙腈中 • 再生方法： • 建议：先用高浓度盐的缓冲液清洗（浓度可以是5-10倍，不超过1M）， 然后再用100%水洗，100%乙腈（或甲醇）清洗，再用50%乙腈或甲醇 保存。
切忌用缓冲盐保存色谱柱 反相柱：100%甲醇或乙腈 正相柱：异丙醇或正已烷 离子交换柱： 100%甲醇，或大于40%的有机相
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C18色谱柱清洗和再生
• 每天柱子使用完后,立刻冲洗，如果使用缓冲液，必须先用相同比例的有 机相/水冲洗20个柱体积，然后再转换到100%有机相，冲洗20个柱体积
5
色谱柱日常使用保养
•避免问题的 使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相 /离子性流动相中有一定的溶解度） “秘诀” •大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2 - 8.0 •避免流动相组成及极性的剧烈变化 •使用HPLC级试剂，流动相使用前必须经脱气和过滤处理
•如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕将柱子冲洗干净， 并保存在乙腈中
•压力升高是需要更换预柱的信号 •确认流动相中缓冲盐的溶解性 •确认样品在流动相中的溶解性 •避免压力的突变
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溶剂
使用不脱气或脱气不完全的流动相会导致形成气泡、泵性能不稳定、检测器噪 音高以及其它检测器故障 流动相脱气
120 100 80 60 40 20 0
Heating Helium Vacuum Ultrasonic
干扰峰；杂质
使用流动相改性剂（如三乙胺）； 硅胶表面未完全键合的硅羟基的影响提高缓冲溶液或盐溶液的浓度（离子对色谱） 降低流动相的pH值； 使用碱性去活的色谱柱
色谱柱的滤网堵塞
更换滤网；使用柱前过滤系统； 将样品过滤
色谱柱有“塌陷”
更换色谱柱； 使用性质较温和的分离条件
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色谱常见故障排除
出现双重峰或 分叉峰
提高色谱柱温度 使用内径较细的较短的毛细管连 接； 检查柱外死体积 使用较小粒径填料的色谱柱； 更换色谱柱
18
色谱常见故障排除
可能原因 解决办法
减少样品体积； 增大色谱柱内径； 使用高容量的固定相 改进样品预处理； 调节流动相的组成； 使用测试样品混合物检查色谱柱； 使用色谱纯溶剂
出现脱尾峰
色谱柱过载
液相色谱柱的保存 液相色谱维护和修理保养
液相色谱柱的保存液相色谱维护和修理保养1.反相色谱柱每天试验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，试验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。
注意：不能用纯水冲洗柱子，应当在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
2.长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必需存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度好是室温。
液相色谱柱的使用和维护在液相色谱操作过程中，我们需要下面的问题，便利维护液相色谱柱。
A柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。
必需防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。
B.假如仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。
C.避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的蓦地变化或者使液相色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形；柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料，因此在调整流速时应当缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。
D.应渐渐更改溶剂的构成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂更改为全部是水，反之亦然。
E.如使用柱温掌控装置时，应注意在通人流动相后才能升温。
F.一般说来液相色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会快速降低柱效。
G.选择使用适合的流动相，以避开固定相被破坏。
有时可以在进样器前面连接一个预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避开分析柱中的硅胶基质被溶解。
H.避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。
保护柱一般是填有相像固定相的短柱。
保护柱可以而且应当常常更换。
色谱柱的维护与保养
色谱柱的维护与保养一、C8及C18反相色谱柱（新的色谱柱）应该在自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。
使用前应该用小流速的和色谱柱内部相同的溶剂冲洗一定的时间。
具体步骤如下：（1）准备新鲜超纯水及色谱级乙腈或甲醇，冲洗色谱仪器系统，保证仪器系统管路干净。
（新柱老化前，此步决不可忽略）（2）将色谱柱反向连接，不接检测器。
用水-有机相（90：10～95:5），以0.3～0.6ml/min流速冲洗20～30min。
（目的是冲洗出柱入口端无机杂物与筛板孔杂物，使筛板正常）（3）再将色谱柱正向连接，不接检测器。
用水-有机相（90：10～95:5），以0.3～0.6ml/min流速冲洗20～30min。
（目的是冲洗出柱出口端无机杂物与筛板孔杂物，使筛板正常）（4）连接检测器，开启柱温达30℃～40℃，用水-有机相（90：10～95:5），以0.3～0.6ml/min流速冲洗4h以上。
（目的是充饱和色谱柱，去除柱内空气）（5）用水-有机相（10：90～5:95），以0.3～0.6ml/min流速冲洗2h以上[或在120min内以水-有机相（95:5→0:100）梯度变化，以0.3～0.6ml/min流速冲洗]→再用100%有机溶剂，以0.3～0.6ml/min流速冲洗1h以上→最后用100%有机溶剂，以1ml/min流速冲洗1h以上。
（目的是老化色谱柱）（6）在平衡前根据水相-有机相的比例，首先调整水-有机相的比例接近流动相水相-有机相的比例，以1ml/min流速冲洗30左右（目的是相平衡过渡）。
如果流动相中含有缓冲盐，决不可在柱老化后立即用流动相平衡，必需先用90%以上水进行预平衡30min以上，否则，会导致缓冲盐在柱内析出结晶，严重时会将新柱永久不可逆地损坏。
（7）然后更换成新制并经0.45um滤膜过滤，超声脱气后的流动相，按检测方法平衡至少1h，待基线稳定后，开始进样检测。
色谱柱的维护保养
优化后
• 峰宽 – 峰3: 0.057 min – 峰4: 0.076 min – 峰5: 0.099 min
• 分辨率 3/4 = 2.73 • 分辨率 4/5 = 2.35
优化前
DAD1 B, Sig=254,8 Ref=off (F:\PROJECTS\0217_M~1\IN-PRO~1\INSTRU~1\CONFIG07.D) mAU
色谱柱的维护保养
第5页
收到新色谱柱
• 核实色谱柱信息 – 是你订购色谱柱吗? – 规格是否正确? – 固定相是否正确?
• 检验物理性损坏 • 用标准测试样品在标准条件下测试柱子，以验证柱效 • 每支菲罗门色谱柱都经过单独检测
色谱柱的维护保养
第6页
管路和接头
• 色谱性能取决于整个系统，而不但仅是色谱柱 • 管路和接头会造成系统死体积 • 系统死体积会造成:
Nitroaromatics
4
3
4
3
1
2
7 56
5
6
7
1
2
2.0 Time (min)
Kinetex™ 2.6 µm C18 100 x 4.6 mm
36
色谱柱的维护保养
3.0
3.0
1. HMX 2. RDX 3. 1,3,5-Trinitrobenzene 4. 1,3-Dinitrobenzene 5. Nitrobenzene 6. 2,4,6-Trinitrotoluene 7. 2,4-Dinitrotoluene
23 1
1.0 Time (min)
Kinetex™ 2.6 µm C18 50 x 2.1 mm
液相色谱柱的使用和维护保养
液相色谱柱的使用和维护保养液相色谱柱是一种广泛使用的分离技术，可用于分离和测定复杂混合物中的组分。
由于液相色谱柱具有精确分离、操作简便、分离效率高等特点，因此，越来越多的实验室都开始使用该技术。
在使用液相色谱柱时，正确的维护保养非常关键。
本文将介绍液相色谱柱的使用方法和维护保养技巧，以便确保您的分离实验能够得到最佳的结果。
一、液相色谱柱的使用1. 准备工作使用液相色谱柱之前，必须先进行预备工作。
这包括：清洗和准备液相色谱柱以免携带有污染物。
准备需要分离和测定的样品。
准备适当的流动相。
流动相必须符合样品的性质。
液相色谱柱的流动相应该是无色的，纯净的水或相应的缓冲液，并具有必要的缓冲能力。
根据柱的尺寸来选择适当的样品注射量。
2. 柱的装配通常情况下，液相色谱的柱是由管状的柱壳、填充柱节、柱端固定件和柱段之间的密封件组成。
在对柱进行装配的时候，对组件应该加强检查以保证每一个元件的质量。
柱被放置在可控压力的色谱装置中，直到达到设定的温度，流动相通过柱床高度。
在样品通过柱床的过程中，要确保流动相的速度恰好足够将所有的组分都分开并在规定的时间内溶出。
3. 分析过程准备工作完成后，可以开始进行样品的分离实验。
在整个过程中，以下措施应予以注意：在样品从样品室进入色谱柱之前，流动相必须在柱中流动。
否则，在注入样品时，将有空气囤积在柱床中，会在透射检测器处产生噪音。
更换液相色谱柱的流动相时需要小心，因为对于一些化学品来说，即使是微量的杂质也会对结果产生影响。
如果发现柱床粘住或困住，不应使用力量来拉动柱子，而应该使用相反方向的流动相，以使样品回到某一个位置，并反向流动一会，这样可以避免样品损坏柱子床。
二、液相色谱柱的维护保养液相色谱分析的成功与否，除了预备工作和分析过程外，还与样品的制备、取样位置以及样品进入液相色谱柱中的流动相的条件等因素有关。
因此，经常做好液相色谱柱的保养工作，可以有效防止柱子损坏，延长其寿命并保证实验结果的准确。
液相色谱柱的维护保养及维护和修理保养
液相色谱柱的维护保养及维护和修理保养液相色谱（HPLC）是20世纪60时代后期进展起来的分别分析技术，是现代分别测定的紧要手段。
问世以来，因其具有分别效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。
而液相色谱zui紧要的就是它的色谱柱。
液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。
正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合—CN,—NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料紧要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。
另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等。
在日常分别分析工作中，色谱柱的正确使用和维护特别紧要，色谱柱使用是否得当，直接影响色谱柱的寿命，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。
（1）在装卸、更换色谱柱时，动作要轻，接头拧紧要适度。
必需防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。
假如仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。
避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形；柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料，因此在调整流速时应当缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。
（2）常常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。
在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50—75mL。
色谱柱使用过程中，假如压力上升，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进人柱内，使柱头被污染；假如柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头显现塌陷，死体积增大。
在完成分别分析工作之后，不应立刻停机，需适时对色谱分析系统进行冲洗，一般0.5h以上，以除去色谱柱内的杂质。
色谱柱保养与存储技巧
色谱柱保养与存储技巧色谱柱是科学研究和实验室分析中常见的工具，但是它的保养和存储对于保证实验结果的准确性和稳定性至关重要。
在本文中，我将分享一些色谱柱的保养和存储技巧，帮助读者更好地使用和维护色谱柱。
第一部分：保养技巧1. 清洗：每次使用完色谱柱后，都需要对其进行清洗。
由于样品残留和杂质等因素可能会影响下一次的实验结果，因此彻底清洗是必要的。
使用纯净溶剂（如甲醇或乙醇）进行反流清洗，直到洗液流出无色为止。
2. pH范围：注意样品的pH值，避免使用超出色谱柱pH稳定范围的溶液。
如果溶液过酸或过碱，可能导致色谱柱的损坏或降解，影响分离效果和柱寿命。
3. 避免高温：避免色谱柱暴露在高温环境下，尤其是在存储和操作过程中。
高温可能导致柱内压力升高，造成泄漏或损坏。
4. 防止柱堵塞：色谱柱堵塞是常见的问题，可以通过使用样品前进行过滤或退火的方式来预防。
此外，定期更换柱前过滤器也是必要的，以确保样品的纯净度和色谱柱的正常工作。
第二部分：存储技巧1. 保持干燥：色谱柱在存储时应保持干燥，避免潮湿环境。
潮湿可能导致柱内压力升高、背压异常等问题，影响柱的使用寿命和分离效果。
2. 避免阳光直射：色谱柱在存储过程中应避免阳光直射。
阳光中的紫外光可能会破坏柱内填充物，导致柱效率下降。
3. 适当密封：在长时间存储色谱柱时，应将柱头和柱底进行适当密封，以防止空气和灰尘等杂质进入柱内。
可以使用橡胶塞或塑料薄膜进行密封。
4. 温度控制：存储色谱柱的温度也需要注意。
最好将色谱柱存放在稳定的室温环境中，避免温度的快速变化或过高过低，以免对柱内填充物产生不利影响。
总结：色谱柱的保养和存储对于实验结果的准确性和稳定性至关重要。
通过彻底清洗、控制pH范围、防止高温等保养技巧，可以延长色谱柱的使用寿命并保证分离效果。
同时，通过保持干燥、避免阳光直射、适当密封、温度控制等存储技巧，可以有效防止柱内填充物的损坏和污染。
希望这些技巧能够帮助读者更好地使用和维护色谱柱，提高实验效果。
液相色谱柱清洗活化再生
1.色谱柱的活化30个柱体积，然后用甲醇/乙腈：水（50:50）冲洗10个柱体积，然后再用流动相平衡30柱体积。
=9：1冲洗30倍柱体积，再流动相平衡30个柱体积。
100%甲醇或乙腈冲洗30个柱体积，然后转换到流动相平衡。
用于反相色谱时，先用异丙醇或乙醇冲洗色谱柱50-100个柱体积，然后用甲醇/乙腈：水（50:50）冲洗10个柱体积，然后再用流动相平衡30柱体积。
50倍柱体积50/50乙腈/水活化平衡，然后再用流动相平衡30柱体积。
2.色谱柱的清洗保存和再生清洗：如使用缓冲盐，先用高比例水相冲洗30个柱体积，然后再转换到80%有机相冲洗30个柱体积。
再生：用95%水，甲醇，异丙醇，甲醇，95%水分别冲洗30个柱体积，在第一次用95%水时，进样10次100 μL DMSO。
清洗：100%乙醇0.3ml/min 3h，再用正己烷：异丙醇=9：1冲洗30倍柱体积并保存。
再生：根据不同类型正相柱选择。
[常规正己烷/异丙醇的柱子，乙醇（0.1%三氟乙酸）0.3ml/min 3h，乙醇0.3ml/min 3h，乙醇（0.1%二乙胺）0.3ml/min 3h，乙醇0.3ml/min 3h，正己烷：异丙醇=9：1冲洗30倍柱体积]清洗：用100%水冲洗30个柱体积去除盐，然后用100%甲醇或乙腈冲洗30个柱体积后保存在50%甲醇或乙腈中。
再生：先用高浓度盐的缓冲液清洗（浓度可以是5-10倍，不超过1M），然后再用100%水洗，50%乙腈或甲醇保存。
清洗：反相使用时同反相C18色谱柱，如短期不用，可用95%甲醇或乙腈保存;长期不用时需用异丙醇置换，最后用正己烷保存。
再生: NH2柱用于反相条件时，NH2键会水解，先用含1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗30个柱体积，乙腈-水(50:50)冲洗30个柱体积，95%水/5%乙腈冲洗30个柱体积，异丙醇冲洗30个柱体积，95%乙腈/5%水冲洗30个柱体积并保存。
如何保护色谱柱柱效 色谱柱维护和修理保养
如何保护色谱柱柱效色谱柱维护和修理保养1.色谱柱断裂熔融石英色谱柱的聚酰亚胺涂层如有少许分裂它就会断裂。
聚酰亚胺涂层可保护易碎的熔融石英管线。
柱温箱持续的加热或冷却、柱温箱风扇的震动以及把色谱柱绕在圆形柱架上均会对管线造成压力。
zui后在薄弱处发生断裂。
通过轻划或磨损聚酰亚胺涂层会造成显现薄弱处。
通常锋利的尖或边划管线时会造成划痕。
色谱柱挂钩和标签、GC柱温箱的金属边、色谱柱切割器以及试验室试验台上的各种物品都带有锋利的尖或边。
色谱柱自身断裂的情况很少。
色谱柱制造业试图找出全部有缺陷的管线并避开在已制好的色谱柱中使用这些管线。
直径较大的色谱柱更简单断裂。
也就是说在处理0.45—0.53mm 内径的管线时要比处理0.18—0.32mm内径的管线更加谨慎以防断裂。
已断裂的色谱柱并非不能用。
假如已断裂的色谱柱保持在高温下连续运行或运行多个温度程序，则将特别简单损坏。
已断裂色谱柱的后半段暴露在高温的氧中会快速损坏固定相。
而色谱柱的前半段因有载气通过仍会保持完好。
假如已断裂的色谱柱未经加热而是仅在高温或含氧的环境下暴露很短时间，则后半段将不会受到任何严重损坏。
可以通过安装接头来接上已断裂的色谱柱。
任何合适的接头都可重新连接色谱柱。
一支色谱柱上不能装入超过2—3个接头。
多个接头会造成死体积（拖尾峰）问题。
2.热损坏超杰出谱柱的温度上限会造成固定相和管表面的加速损坏。
这样会造成色谱柱的过分流失，活性组分形成拖尾，以及/或降低柱效（分别度）。
幸好热损坏是一个很慢的过程，因此，在色谱柱严重损坏之前还有一段很长的时间可在高于温度极限的条件下使用。
当有氧存在时会大大加速热损坏。
对有泄漏或载气中氧含量较高的色谱柱进行过度加热可快速并*地损坏该柱。
将GC的柱温箱zui高温度设定为色谱柱温度极限或稍高于该温度极限是防止热损坏的zui 佳方法。
这样可避开色谱柱意外的过热。
即使色谱柱受到热损坏，仍旧可使用。
把色谱柱从检测器上卸下来。
【色谱柱】色谱柱的维护方法 色谱柱维护和修理保养
【色谱柱】色谱柱的维护方法色谱柱维护和修理保养色谱柱的使用寿命，除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外，最紧要的是与日常的维护紧密相关。
色谱柱的使用寿命紧要是柱效和柱压两个指标来衡量，假如一支色谱柱柱效太低或柱压太高，通常被认为该色谱柱已经结束。
因此，延长色谱柱使用寿命的关键是，除去引起柱效下降和柱压上升的因素。
以下是色谱柱的维护方法：一、流动相的PH应在使用的范围内流动相超过其PH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂，使柱效下降，使用寿命变短。
由于流动相的PH掌控不当而对色谱柱造成的损害，通常很难是色谱柱恢复，因此必需认真对待，严格掌控流动相的PH值。
二、去除样品和流动相中的固体颗粒样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板，筛板被堵住不仅会引起柱压的上升，而且也会引起柱效下降，由于筛板的堵塞会引起液流不均，导致色谱峰型拖尾、变宽，从而使柱效下降。
因此，建议使用超纯水和色谱纯试剂，在分析样品前对样品进行针筒过滤，流动相过0、45μm滤膜。
三、使用保护柱或在线过滤器样品和流动相经过滤后并不能完全除去固体颗粒物质，由于泵的磨损、密封圈和管路的老化也会产生固体颗粒物质，这些固体颗粒被流动相带入色谱柱，堵塞筛板，导致柱压上升、柱效下降。
保护柱和在线过滤器上都有筛板，其孔径与色谱柱孔径相同，因此可以阻拦固体颗粒物质到达色谱柱，有效防止色谱柱筛板的堵塞。
由于柱压上升在分析故障中占很大比例，因此，除对样品和流动相进行过滤外，建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。
假如色谱柱柱压上升是由于进样端筛板被堵引起的，可选择以下方式进行补救：1、先在色谱柱前加上保护柱或在线过滤器，然后用甲醇、水=20/80ml/min反向冲色谱柱180min、2、先在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器，然后反向使用。
四、正确使用缓冲盐缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂，因此缓冲盐使用不当会使其析出，堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙，使填料板结，柱压上升；同时阻拦了基质上键合的碳链自由伸展，使色谱柱的保留本领下降，柱效降低。
如何活化新色谱柱？
如何活化新色谱柱？液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。
正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。
另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等。
色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。
在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。
但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。
所以在实验室最好建立自己的色谱柱台账，对每根色谱柱进行编号入库、并追踪其使用过程，实现全生命周期化管理。
每个时间节点记录其柱压、峰型、进样针数等信息。
一、液相色谱柱活化方法、新液相色谱柱活化多久？新液相色谱柱使用前还要活化么？新买的液相色谱柱需要活化，活化的方法因柱子而异，普通反相C18柱的话我是这样活化的：0.5ml/min流速的甲醇冲洗2小时以上。
液相的新色谱柱都是保存在一定的保存液中的，所谓的活化就是替换掉其中的保存液，冲洗掉柱中可能残留的其他杂质，以免影响后续分析工作。
不同的色谱柱活化的方法不尽相同，要根据柱子的种类来选择活化方法。
另外，要提醒的是，柱子活化时不要接检测器，避免不必要的污染。
二、液相色谱柱活化到底起到一个什么样的作用？（一）排除有机相挥发所产生的起泡。
（二）柱子一般是键合了c18的，用甲醇冲柱子就是使得这些集团达到更好的排列，有利于我们做样。
就像刚买的电池。
柱的维护分为：色谱柱的平衡、色谱柱的再生、最后才是色谱柱的维护。
1、色谱柱的平衡反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。
新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。
请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。
每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得最大的“补偿”，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!操作步骤：1) 平衡开始时将流速缓慢地提高，用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低，则需要较长的时间来平衡)2) 如果使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡；分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。