牛卵丘卵母细胞体外成熟的研究进展
牛体外发育卵母细胞成熟的评估方法研究

期l 2 ] 。卵母 细胞核成 熟 ( 其 特征 是生发 泡破裂 、 P B 1 排 出) 的 同时 , 卵丘 细胞会 发生 扩展 。卵 丘扩展 程度 对卵母细胞成 熟及 其体外 受 精和胚 胎发 育有 非 常重
摘要 :为探 讨 不 同评 估方 法对 牛卵母 细胞体 外成 熟的判 定效 果 , 以牛 卵丘 卵母 细胞复 合体 ( C O C s ) 为试 验材料 , 采 用 比较 卵丘 扩展 、 形 态学观察 第一极 体排 出和 固定 染色观察 第一极 体 3种 方 法评 估 牛 卵母 细胞成 熟率 的差异 。结果表 明 , 牛 卵母 细胞 经体 外 2 4 h成 熟培 养后 , 卵丘 扩展 分级 的成 熟 率为 7 6 . 8 , 形 态学观 察第一极 体 排 出率 为 7 1 . 2 , 固定 染 色观 察 第一 极 体核 成 熟 率 为 7 7 . 1 %, 3种判 定方 法评估 成 熟率无 显著 差 异 ( P> 0 . 0 5 ) 。 因此 , 3种 方 法 均 可 用 于 卵母 细 胞 的体 外成 熟
Oo c y t e Ma t u r a t i o n Cul t ur e d i n Vi t r o
LI Xi a o — x i a。 CAO Pi ng — hu a。 YU Xu e — l i
( Co l l e g e o f An i ma l Sc i e n c e a n d Te c h no l o gy, He n a n Un i v e r s i t y o f c i S e n c e a n d T e c hn o l og y, Lu o y a n g 47 1 0 0 3, Chi n a )
Ke y wo r d s:b ov i n e; o o c y t e s;i n v i t r o m a t ur a t i on; c um ul u s e x pa n s i on; t he f i r s t po l a r bo d y
《牛卵丘—卵母细胞复合体凋亡发生和调控与其发育潜能关系研究》范文

《牛卵丘—卵母细胞复合体凋亡发生和调控与其发育潜能关系研究》篇一一、引言在畜牧业和生物医学领域,牛卵丘—卵母细胞复合体(Cumulus-Oocyte Complexes, COC)的研究具有极其重要的意义。
该复合体不仅在生殖生物学中扮演着关键角色,还与卵母细胞的发育潜能密切相关。
本文将重点探讨牛卵丘—卵母细胞复合体凋亡的发生和调控机制,以及其与卵母细胞发育潜能的关系。
二、牛卵丘—卵母细胞复合体的结构与功能牛卵丘—卵母细胞复合体主要由卵母细胞和围绕其的卵丘细胞组成。
卵丘细胞为卵母细胞提供营养支持和保护,同时参与调控卵母细胞的发育过程。
复合体的正常结构和功能对于维持卵母细胞的发育潜能至关重要。
三、凋亡发生与调控机制1. 凋亡发生:在牛卵丘—卵母细胞复合体中,凋亡是一种重要的生物学过程,涉及细胞的程序性死亡。
当复合体受到内外环境变化或损伤时,凋亡机制被激活,导致部分卵丘细胞死亡。
2. 调控机制:凋亡的调控涉及多种信号通路和分子机制。
例如,某些生长因子、细胞因子和转录因子等可调节凋亡过程,从而影响牛卵丘—卵母细胞复合体的发育潜能。
此外,氧化应激、钙离子浓度等也参与凋亡的调控。
四、凋亡与发育潜能的关系牛卵丘—卵母细胞复合体的凋亡过程与其发育潜能密切相关。
凋亡的发生会影响卵丘细胞的数目和功能,进而影响卵母细胞的发育潜能。
研究表明,适当的凋亡水平有助于维持卵母细胞的发育能力,而过度或不足的凋亡则可能导致卵母细胞发育受阻。
因此,了解凋亡的调控机制对于提高牛卵母细胞的发育潜能具有重要意义。
五、研究方法与结果本研究采用显微操作技术获取牛卵丘—卵母细胞复合体,通过观察其在体外培养过程中的凋亡情况,分析其与发育潜能的关系。
结果表明,适当的凋亡水平有助于提高牛卵母细胞的发育潜能。
进一步的研究发现,某些生长因子和细胞因子可通过调控凋亡过程,从而提高牛卵母细胞的发育潜能。
六、讨论与展望本研究揭示了牛卵丘—卵母细胞复合体凋亡发生和调控与其发育潜能的关系。
屠宰牛卵母细胞体外成熟和体外受精研究

屠宰牛卵母细胞体外成熟和体外受精研究
严光文;殷红梅;刘长松
【期刊名称】《中国奶牛》
【年(卷),期】2008(000)001
【摘要】对采集到的卵巢采取抽吸法、割破法回收卵母细胞,割破法得到的A级卵母细胞显著高于抽吸法.把有黄体和无黄体的卵巢卵母细胞进行培养比较,无黄体的卵巢卵母细胞的成熟率为84.33%.显著高于有黄体卵巢卵母细胞的74.32%.本试验中卵泡卵母细胞和深层卵母细胞体外成熟率均能达到75%以上.卵巢表面卵泡卵母细胞的卵裂率为54.76%,高于深层卵母细胞的卵裂率,但二者无显著差异.IVM时添加卵丘细胞、IVC时添加输卵管上皮细胞是比较理想的培养系统.
【总页数】5页(P28-32)
【作者】严光文;殷红梅;刘长松
【作者单位】塔里木大学动物科技学院,阿拉尔843300;四川农业大学动物科技学院,雅安,625014;四川农业大学动物科技学院.雅安,625014;四川农业大学动物科技学院.雅安,625014
【正文语种】中文
【中图分类】S823.4
【相关文献】
1.山羊卵母细胞体外成熟和体外受精过程中细胞核迁移的研究进展 [J], 王雪红;董雅娟;柏学进;岳福杰
2.兔卵母细胞体外成熟、体外受精及受精卵体外培养条件的研究 [J], 王辉田;罗光彬;王忠彬;孙超;陈思;吴宏平;王娇娇
3.犬卵母细胞体外成熟及其体外受精研究进展 [J], 王中伟;岳顺利;周佳勃
4.屠体羊卵巢保存时间对卵母细胞体外成熟和体外受精的影响 [J], 郎洪彦;刘晓辉;张鹏举;王伟霞;刘海燕;谭成成;李信涛
5.牛卵母细胞体外成熟、体外受精及胚胎培养的研究 [J], 刘赫;沙伟;殷志明;马红;郭镇华;李忠秋;吴赛辉;刘娣
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试论牛卵母细胞体外受精技术

试论牛卵母细胞体外受精技术牛卵母细胞体外受精是指在脱离母体的情况下,人为创造母牛体内繁殖条件,在牛体外完成精卵结合,培育出受精卵并在体外培养至桑椹胚或是囊胚阶段,将胚胎移植到母牛体内孕育胎儿。
体外受精是繁育犊牛的重要技术,在牛繁殖领域应用普遍,涉及到的技术有牛卵母细胞的采集、成熟培养与判断,牛精子的筛选、获能,以及具体的受精操作等。
针对技术应用关键节点及技术参数、操作细节的分析研究,最终达到获取高质量胚胎的目的,助力于养牛业的高质量发展。
1 牛卵母细胞体外采集与培养技术1.1 牛卵母细胞体外采集技术1.1.1 采集方式常用的动物卵母细胞采集方式如下:(1)直接采集成熟的卵母细胞,采用超排技术从动物的输卵管采集,但不适用于牛这种大型动物;(2)活体采卵,选择繁殖性能优秀的母牛,借助腹腔镜直接采集,对采集母牛的繁殖性能影响较小;(3)从屠宰场获取,宰杀母牛后直接采集牛卵巢。
该采集方式简单、直接、成本低,可大批量采集。
1.1.2 采集技术在从屠宰场获取牛卵巢后,将其放入保温瓶中,瓶中事先装入用生理盐水稀释的硫酸庆大霉素,温度大约是30 ℃,用于保持牛卵巢的新鲜度。
在1 h 内完成卵泡的收集,在实验室环境下,使用生理盐水清洗干净牛卵巢,然后使用注射器直接吸取卵泡,获取卵泡液,准备进行体外成熟培养。
1.2 体外成熟培养使用体视显微镜筛选质量好的卵母细胞用于体外成熟培养,将筛选出的卵母细胞放入培养液中,培养液中含有17-E2 的中央记忆型T 细胞1.5 μg/mL;胎牛血清10%,促黄体生成素20%;卵泡刺激素20 μg/mL。
将培养液放入经过温度校正后的培养箱中,温度调整至38~39 ℃,气象条件为5%的CO2,培养时间22~24 h,需根据牛卵母细胞采集时的成熟情况,适当延长1~2 h,但不可超过26 h,一旦超过牛卵母细胞将进入老化期。
1.3 体外成熟判定在培养24 h 后进行牛卵母细胞的成熟检查,当其进入第二次减数分裂中期则判定为成熟。
牛卵泡卵母细胞的体外成熟培养

要 大 量 的 去 核 卵母 细 胞 作 为 核 受 体 , 因此 , 卵母 细 胞
的体外 成熟就 是动 物克 隆研究 中 的一个重要 环节 。 对 牛 的卵 母 细 胞 体 外 成 熟 简 化 操 作 的探 索 是 简 化 动 物 克 隆 操 作 程 序 的 组 成 部 分 。本 研 究 对 牛 的 卵母 细 胞 体 外 成 熟 采 用 简 化 的 培 养 方 案 , 行 了 大 量 的 研 进
[ 摘
要 ] 1 9 — 2 2 0— 8共 进 行 了 9 9 71 ~ 0 10 7批 牛 卵 母 细 胞 体 外 成 熟 试 验 , 成 熟 率 为 7 . 5 ( 6 / 3 ) 总 O 7 % 35 1 50 3 。
其 中 培 养 液 为 TC 1 9 0 1 / 丙 酮 酸 钠 + 1 M 9 + . 2g L 0mmo/ lI He e + 体 积 分 数 8 NC ps S+ 1 / F H + 1 / 0mg I S 0mg I L + 1mg L E ( 养 液 1组 ) 进 行 5 H / 培 组 0批 试 验 , 熟 率 为 6 . 5 ( 4 5 2 5 ) 培 养 液 1组 有 5批 次 未 添 加 He — 成 5 7 1 1 / 1 2 。 p e 盐 , 成 熟 率 为 7. 1 (8 17 ; 4 s 其 5 2 8 / 1 ) 另 5批 次 添 加 He e p s盐 , 熟 率 为 6 . 1 ( 1 2 / 0 5 。 培 养 液 为 成 5 2 3 72 3 ) TC 1 9 体 积 分 数 8 发 情 牛 血 清 + 0 1 / M 9+ . 2 g I 酮 酸 ( 养 液 2组 ) 进 行 4 丙 培 组 7批 次 试 验 , 熟 率 为 7 . 9 成 4 4 ( 4 / 8 ) 2 1 6 28 1 。培 养 液 2组 中 有 9批 次 添 加 了 4 / 的 庆 大 霉 素 , 成 熟 率 为 7 . 5 ( 4 / 7 ) 另 3 0mg I 其 2 1 % 3 2 4 4 ; 8批 次 未 添 加 庆 大 霉 素 , 成 熟 率 为 7 . 5 ( 0 / 0 ) 试 验 同 时 表 明 , 素 来 源 对 卵 母 细 胞 成 熟 率 无 显 著 影 响 。 其 4 9 18 4 24 7 。 激 [ 键 词 ] 牛 ; 母 细 胞 ; 外 成 熟 关 卵 体 [ 图 分 类 号 ] ¥ 2 . 6 中 8 33 [ 献标 识码 ] A 文 [ 章 编 号 ] 0 02 8 ( 0 2 0 — 0 5 0 文 1 0 — 7 2 2 0 ) 40 9 — 3
牛卵母细胞体外成熟的培养体系及影响因素研究

较广‘ , 泛 缓冲系 以 H ps ee 或碳 酸氢盐为好 , 酸盐缓 冲系较 磷
差。
4 血 清对体外成熟的影响 . 2
血 清成 分较为复杂 . 不同J清 缸
其 成 分 也 有 明显 区别 进 而 导致 不同 的 培 养 效 果 。 清 内含 有 血
挥 巨大作用。 本文将 就现阶段牛 卵母细胞体外成熟培养体系 及影响因素的研 究情况加 以综述 。
草 食 动 物
牛 巧 母 细 胞 体 夕 成 熟 酌 = 养 体 p 卜 l :
系及 影响 素酌 研
曹 亮l _ 3,聂 旭
10 3 ) 5  ̄ 0 6
牛 卵母 细胞 培养 常用 的基 础 培养 液有
( . 阳农业 大 学畜牧 兽 医学 院 ,沈 阳 1 0 6 ;.黑龙 江省 家 畜繁 育指导 站 。哈尔 滨 1 0 6 ; 1沈 1 12 1 5 0 9 3黑龙 江省 农 垦总局 动 物卫 生监 督所 。 尔滨 . 哈
牛 体 外 生 产 O P中 , 应 用 3 ~3 ℃ 。 V) 多 8 9 2 体 外 培 养 气 相 卵 母 细 胞 成 熟 培 养 现 多 用 两 种 气 相 : 一 种是含 5 %的 C O 、相对 湿 度 10 0 %的 空 气 ,另 一 种 是 含 5 %
43 生殖激素 对体 外成熟 的影 响 .
目前牛 卵母细胞 体外成 熟培 养 (V J I M 技术 体系 已经建
立 起 来 , 在 不 断 的探 索 与 完善 当 中 。 国 内外 的 研 究 热 点 主 并
41 基础 培 养液 .
T M19 H m’ 1 , a s F 2和 C l ,其 中 T M19应 用 C 9 , a s 0 H m’ 1 Ra a C 9
牛卵丘细胞对卵母细胞体外成熟与孤雌发育的影响

繁 疆 生 理 ・ e rd cina dP y il y R po ut n hsoo o g
20 年 第 4 卷 第 7 08 4 期
牛 卵丘细 胞对 卵母 细胞体 外成熟 与孤雌发 育 的影 响
张 锐, 章孝 荣 , 陶 勇 , 张运 海 , 美玲 章
对 机械裸 卵 和 C C 进行体 外成熟 和孤 雌激 活 , Os 经体 外 培养 而探 讨卵 丘 细胞存 在 和不 同形 态卵 丘细 胞对 卵母 细胞体外成 熟与孤雌发 育能力 的影 响 。
1 材料 与方 法
胎 干细胞 等技 术 的研 究 和应用 都需要 大量 的成 熟 卵
母 细胞作 为试 验材料 ,因此 卵母 细胞 的质 量直 接影
层 (S ) COG 为 c 组 , 究 卵丘 细 胞 层 包 裹程 度 对 卵 母 细胞 的 体 外 核 成 熟 和 孤 雌 激 活 后 胚 胎 发 育 能 力 的 影 FP 的 s 研
响 。结果表 明 : 卵丘细胞 的存在 更有利 于卵母 细胞体 外成熟和孤 雌胚胎发 育 ; COG s中卵丘 细胞 包裹层数 对 卵母
细胞体 外核 成熟率没有显 著影响 , 包裹卵丘细胞层数 多且 附带 F P的卵母细胞 , P E 的囊胚 率显著 高于包 但 S 其 As
裹 卵丘 细 胞 少 的 卵母 细 胞 P E 。 A s
关键 词 : 卵丘细胞 ; 卵丘 一卵母 细胞 复合体 ; 体外成 熟 ; 孤雌发 育 ; 牛 中图分 类号 :S 2 . 833 文献 标识 码 :A 文章 编号 : 2 8 7 3 ( 0 8)7 0 1 — 4 0 5 — 0 3 20 0 — 0 2 0
2组 , A组 C C 经 机械 吹 打脱 除卵 丘 细胞 成为 机 械 Os 裸 卵 ( O ) ( 1A) B组 为 包 裹 卵 丘 细胞 5层 以 D s组 图 ; 上 的且包 裹 紧密 的 C C 组 ( 1 。 Os 图 B) 试验 2 ,根据 包 裹 卵母 细胞 的卵 丘 细胞 层 数 和
tPAPAI1系统在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟进程中的表达

学校代码 10129 学 号 2009201050
tPA-PAI-1 系统在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟进程中的表达 Expression of Tissue-Type Plasminogen Activator-Plasminogen
Activator Inhibitor-1 System in Bovine Cumulus-Oocytes during in vitro Maturation
2. 在添加不同浓度 FSH (0、0.01、0.1 和 1 IU/mL)体外成熟 16 h 的各处理组, 卵丘细胞中 tPA mRNA 相对表达量随 FSH 添加浓度的升高而升高,当 FSH 添加浓度 1 IU/mL,卵丘细胞之间的缝隙连接较为松散且发暗。卵丘细胞中的 PAI-1 mRNA 相对 表达量在 0.01 IU/mLFSH 时高于其他各处理组;同时卵丘细胞 PLG mRNA 表达水平在 0.01 IU/mL FSH 时达到最低,于 0.1 IU/mL 和 1 IU/mL 时显著升高 (P <0.05)。卵 母细胞 tPA 表达变化显示出与第一极体排出率相似的趋势,即 0.01 IU/mL FSH 处理 组的 tPA mRNA 水平和第一极体排出率显著高于其他处理组(P <0.05)。卵母细胞中 PAI-1 mRNA 相对表达量在 0.01 IU/mL FSH 时最高,显著高于其他各 FSH 添加组(P <0.05)。
综合以上研究结果,本研究认为:牛卵丘细胞中 tPA 与 PAI-1 基因的表达受 FSH 正向调节,而 PLG 基因表达却受到 FSH 的抑制;进而推测,tPA-PAI-1 系统对卵丘 细胞在体外成熟过程中的扩散并不起促进作用;在卵丘卵母细胞复合体体外成熟过
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牛卵丘卵母细胞体外成熟的研究进展
简介
近年来,由于各种原因,如药物治疗、癌症治疗、辅助生殖技术等,许多女性遭受生殖系统损害,导致正常卵子的数量和质量下降,难以自然受孕。
为了解决这一问题,科学家们开始探索卵母细胞的体外成熟技术,其中就包括牛卵丘卵母细胞的体外成熟。
牛卵丘卵母细胞的发育过程
1.卵母细胞初生阶段:卵泡形成和发育
牛卵丘卵母细胞的成熟过程始于卵母细胞初生阶段,即在胚胎发育的早期,卵泡与生俱来,随着胚胎的发育逐渐成熟。
2.卵母细胞发育阶段:初级卵母细胞和次级卵母细胞
初级卵母细胞是卵泡中最早发现的生殖细胞,此时卵母细胞仍在休止状态,没有正确配对的染色体。
当初级卵母细胞准备参加减数分裂时,它们进入休眠期。
接着,细胞再次进入细胞周期,并分化成为次级卵母细胞。
3.卵子成熟阶段:大中带、成熟卵母细胞和卵子
在继续成长和分裂之后,次级卵母细胞形成另外两类亚型细胞:大中带和成熟卵母细胞。
大中带中包含了正常的染色体数量,而成熟卵母细胞则完全分裂成为卵子。
牛卵丘卵母细胞体外成熟的意义
牛卵丘卵母细胞在体外成熟的过程中,可以提高卵子的数量和质量,有助于卵子的筛选、人工授精和试管婴儿等辅助生殖技术的成功率。
此外,对于女性患者的治疗方案,帮助她们恢复生育能力是一项重要的医学工作。
牛卵丘卵母细胞体外成熟的技术路线
牛卵丘卵母细胞体外成熟的技术路线主要包括卵泡培养、卵母细胞运输和卵母细胞体外成熟分选三个方面。
1.卵泡培养
卵泡培养技术是指将卵母细胞置于富含特定营养物质和生长因子的培养基中,以模拟体内的成熟环境并促进卵母细胞的成熟。
通过卵泡培养实验,科学家最终找到了最优的培养基成分和最适合的剂量。
2.卵母细胞运输
卵母细胞在培养基中生长发育,但在进入下一个阶段之前,需要被运输到另一
个实验室或生殖中心。
目前,该过程主要通过低温保存和运输实现,以确保卵母细胞的最佳状态和健康状况。
3.卵母细胞体外成熟分选
在卵泡培养和卵母细胞运输之后,科学家需要进行卵母细胞体外成熟分选。
该
过程中,科学家使用多种技术手段(如孵化器、显微镜等),以确保只有成熟的卵母细胞筛选出来。
这些细胞可以直接用于人工授精或试管婴儿。
研究进展和发现
自从1991年科学家们首次从具有成熟卵母细胞的牛卵巢中获取卵子以来,牛
卵丘卵母细胞体外成熟技术一直是一个备受关注的研究领域。
在近30年的研究中,科学家们取得了重要的成果和发现。
1.成功对牛卵母细胞进行体外成熟并获得卵子
近年来,研究人员已经成功地将牛卵母细胞体外培育,并且成功获得了健康的卵子。
2.研究草酸酯酶HOXA10在牛卵母细胞体外成熟中的作用
近年来的研究表明,草酸酯酶HOXA10在未成熟的牛卵母细胞和成熟的牛卵母细胞中发挥不同的作用。
HOXA10高表达时,有助于卵母细胞成熟,同时对其自我保护也至关重要。
因此,HOXA10有望成为未来牛卵母细胞体外成熟研究的重点。
3.使用脂体过滤法提高卵母细胞体外成熟的成功率
在卵母细胞体外成熟的实验中,不同的筛选方法会对卵子的品质和数量产生不同的影响。
最近的研究表明,使用脂体过滤法对卵母细胞进行筛选可以提高体外成熟的成功率。
结论
随着科学技术的不断进步,牛卵丘卵母细胞体外成熟研究的进展将为患有生殖
系统疾病女性提供更多的治疗选择。
在未来,科学家们将继续不断努力,探索更加高效的卵子体外成熟技术,让更多的女性实现生育梦想。