CMV_PP65抗原检测及临床意义
CMVpp65基因修饰的树突状细胞刺激自身T细胞活化

文章编号(A rticle I D):1009-2137(2008)02-0397-04 论著 C MV pp65基因修饰的树突状细胞刺激自身T细胞活化高广勋,陈协群,张劲翼1,朱华锋,董宝侠,顾宏涛,高瑛,潘耀柱第四军医大学西京医院血液科,陕西西安,710032,1多伦多大学西奈山医院Sa m uel Leunenfe l d研究所,加拿大摘要 巨细胞病毒(CM V)感染易发生于慢性移植物抗宿主病(c GV HD)患者,其特异性免疫依赖于T细胞活性。
本研究探讨CM V pp65基因修饰的树突状细胞(D C)对自身T细胞的活化作用。
采用具有高效转染非分裂细胞的慢病毒系统将CM V全长pp65基因导入鼠源性D C;采用CpG D NA诱导D C细胞成熟;采用流式细胞术及免疫荧光方法测定T淋巴细胞抗原及IFN 表达。
结果表明:慢病毒感染D C的感染复数(m ultipli c ity o f i nfecti on, M O I)为50,最佳感染效率可达30%-40%;表达pp65基因的成熟DC能刺激自身na i ve T细胞表达CD69;表达PP65蛋白的成熟D C能够刺激自身CD4+或CD8+T细胞分泌IFN 。
结论:pp65基因修饰、C p G DNA诱导成熟的D C能体外激活C M V特异性T淋巴细胞。
关键词 巨细胞病毒;PP65蛋白;T淋巴细胞;树突状细胞;C p G DNA中图分类号 Q813;R392文献标识码 AC M V pp65G eneM odified Dendritic C ells Activate Autol ogous T C ells GAO G uang X un,CHE N Xie Q un,ZHANG Jin Y i1,ZHU Hua Feng,DONG Bao X ia,GU H ong T ao,GAO Ying,PAN Yao ZhuD epart m en t o fH e m atology,Xiji n g Ho s p it a l,The Fourth M ili tary M ed ical Un iversity,X i an710032,Shanxi Provi nce,Ch i na;1Th e Sa m uel Lun enfel d Res ea rch Insti tute,M oun t S i na iHo s p it a l,U niversity of Toron to,Toron t o,On t a ri o,CanadaAbstract Cy tom eg a l ov irus(CM V)i nfecti on is a dange rous com pli cati o n i n pa ti ents w it h chro nic g ra ft ve rs us ho std isea se(cGVHD).CM V s pec ific i m m un it y depends on the acti v it y of T ce lls.T his st udy w as a i m ed to i nv estiga te thee ffect of CM V pp65g ene m o dif i ed dendritic ce lls(D C s)on ac tiva ti on of aut o l o gous T ce lls.L en ti v irus sy ste m w as utilized to i ntroduce t he CM V full leng th pp65genei nto m o us e D C s;CpG D NA w as used to i nduce m ature D C s;fl ow cy tom e try and i m m uno fl uo re scence w ere used to de t e r m i ne t he ex pre ssi on o f anti g en and IFN in T l ym pho cy te s.T he re s u lts s how ed tha t t he D C s w ere i nfected w ith lentiv irus at a m ulti p lic ity o f i nfec tion(M O I)o f50w it h o pti m a l i n fectious eff i c i ency o f30%-40%;m ature D C s ex pre ssi ng pp65g ene cou l d sti m ulate auto logo us na ive T ce lls to express CD69specif i ca lly;m ature D C s expressi ng PP65co uld sti m ulate auto logo us CD4+or CD8+T ce lls to pro duce IFN .It is conc l uded tha t CM V pp65 m od ified and CpG D NA induced m ature DC s can acti v ate CM V s pec ific T lym phocy tes i n vitro.K ey w ords cy tom ega lov irus;PP65pro te i n;T l ym pho cy te;dendr itic ce l;l C p G DNAJ Exp H e m a to l2008;16(2):397-400巨细胞病毒(C M V)感染易发生于慢性移植物抗宿主病(c GVHD)等免疫功能低下患者,而C M V 免疫依赖于T细胞活性,因此恢复CMV特异性T 淋巴细胞功能对于防治C M V感染就尤为重要。
人巨细胞病毒pp65抗原检测

I gM
症状 1
症状 2
抗原血症 1
抗原血症 2
移植后时间 首 次 pp65 抗 原 血 症 出 现 于 移 植 后 59 天 , 2 天 后 出 现 喘 憋 、 低 氧 血 症 ,经 更 昔 洛 韦 治 疗 13 天 后 症 状 消 失 , 抗 原 血 症 转 阴 , 此 时 I gM才 开 始 出 现 弱 阳 性 , 此 后 I gM持 续 阳 性 。移 植 后 6 个 月 ,再 次 出 现 喘 憋 、低 氧 血 症 ,查 pp65 抗 原 血 症 转 阳 , 经更昔洛韦治疗 7 天后症状消失、抗原血症转阴。
阳性细胞数多少可以帮助判断和预测CMV症状性感染 CMV特异性IgM的阳性检出率非常低,
人巨细胞病毒pp65抗原检测
CMV感染的危险因素 CMV感染组DRI评分大多>20 合并细菌或感染 病程长、未正规治疗的狼疮
人巨细胞病毒pp65抗原检测
三 PP65检测在监测血液肿瘤化疗后和 再障病人中CMV感染中的应用
A 骨髓数量重建 B 配型完全符合者T细胞功能重建 C 配型不完全符合者T细胞功能重建
人巨细胞病毒pp65抗原检测
PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用 2 - 骨髓移植后CMV感染的危险因素
CD34+细胞分选
GVHD(FK506)
TBI
合并其他病原体感染
人巨细胞病毒pp65抗原检测
PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用3 --治疗时间
人巨细胞病毒pp65抗原检测
研究目的
了解HCMVpp65抗原检测在免疫功能低下者临床
HCMV疾病预测或早期诊断中的价值。 了解HCMVpp65抗原检测在监测疾病活动性和指
导CMV““亚临床感染抗病毒”治疗中的价值。
最新版-婴儿肝炎综合征

概述
1982年全国小儿病毒性肝炎防治会议上提出:凡1岁内婴 儿(包括新生儿)因各种病因引起的以肝脏炎症、肝功能 损害和肝脾肿大为主要表现的临床症候群命名为婴儿肝炎 综合征。明确病因者不宜用此名称。
病因
(一)感染 (1)病毒感染 最多见,包括甲型肝炎病毒、乙型肝炎
病毒、丙型肝炎病毒、巨细胞病毒、风疹病毒、埃可病毒、 腺病毒、水痘病毒和EB病毒等。 国内在 8 0年代报道病因以乙型肝炎病毒 ( HBV) 为主, CMV感染占第 2位。 自从全国推广新生儿乙肝疫苗接种以 来。 阻断乙肝病毒母婴传播取得成效 , 在婴儿中乙肝的 发病率已经大幅下降,IHS的病原体已转变为以CMV为主, 阳性率达43.9%-78.3% 。
婴儿CMV 感染最常累及肝脏, 引起CMV 肝 炎,也常累及肺脏、血液、消化道等多个脏器和系统。
CMV还有免疫抑制作用, 主要是被病毒感染的大单核细胞 和CD8细胞的功能异常所致,可降低机体抵抗力,增加机会 菌感染的可能性,并且受损肝脏合成凝血因子能力下降,常 可出现继发性出血。
巨细胞病毒性肝炎病理改变
小儿CMV肝炎,有3个主要病变,即肝细胞病变和坏死、 肝细胞凋亡和胆管病变。
光镜下显示:CMV肝炎主要为肝细胞变性及坏死 ,且大 部伴有胆栓形成,这与其临床症状及诊断较相符合。其 中 伴有胆道闭锁的患儿尚可见到汇管区扩大,多核肝细胞, 肝巨细胞形成和胆小管增生,胆栓更严重。说明C MV肝 炎易发生胆汁的淤积,胆道闭锁者更甚,使其发展为胆汁 性肝硬化的机会更多。
(2)细菌感染 全身性细菌严重感染常可累及肝脏 ,引 起肝炎样表现。主要 见于 出生时 或 出生后 各 种 细菌 感染 导致 的败血 症 或毒 血症 使肝 细 胞 受损而引起 婴 肝 的发 生 。其 中 金 黄色葡 萄球 菌、 肺 炎 链球 菌 、 致病 性 大 肠杆菌感染导致的败血症最常见 ,分别 为 85 %,6 .1 %,3.7%,其次为表 皮葡 萄 球 菌、 鼠伤 寒 沙
中国肾移植受者巨细胞病毒感染临床诊疗指南(2023_版)

· 指南与共识·中国肾移植受者巨细胞病毒感染临床诊疗指南(2023版)中华医学会器官移植学分会 中国医师协会器官移植医师分会 中国医疗保健国际交流促进会肾脏移植学分会 【摘要】 近几年在实体器官移植(SOT )受者巨细胞病毒(CMV )感染诊疗领域,无论是诊断方法还是新型抗CMV 药物都有了一些新的进展,对CMV 感染的诊治产生了积极的影响。
为了进一步规范中国肾移植术后CMV 感染的管理,中华医学会器官移植学分会组织了国内多个学科相关领域专家,参考《中国实体器官移植受者巨细胞病毒感染诊疗指南(2016版)》和国内外已发表的最新文献和指南,制定了《中国肾移植受者巨细胞病毒感染诊疗指南(2023版)》,新版指南更新了CMV 流行病学,CMV 感染的危险因素和普遍性预防的研究进展,新增CMV 感染定义,细化CMV 血症和CMV 病的诊断标准,并对新型抗CMV 药物进行了介绍。
【关键词】 肾移植;实体器官移植;巨细胞病毒;感染;病毒血症;巨细胞病毒病;普遍性预防;抢先治疗【中图分类号】 R617, R373 【文献标志码】 A 【文章编号】 1674-7445(2024)03-0001-20Clinical diagnosis and treatment guidelines for cytomegalovirus infection in kidney transplant recipients in China (2023edition) Branch of Organ Transplantation of Chinese Medical Association, Branch of Organ Transplantation Physician of Chinese Medical Doctor Association, Branch of Kidney Transplantation of China International Exchange and Promotive Association for Medical and Health Care. *The First Affiliated Hospital of Xi 'an Jiaotong University , Xi 'an 710061, China Correspondingauthors:DingXiaoming,Email:***************.cnXueWujun,Email:******************.cn【Abstract 】 In recent years, there have been significant advances in the diagnosis and treatment of cytomegalovirus (CMV) infection in solid organ transplant (SOT) recipients, including diagnostic method and anti-CMV drugs. These advancements have had a positive impact on the management of CMV infection in SOT recipients. To further standardize the management of CMV infection after kidney transplantation in China, Branch of Organ Transplantation of Chinese Medical Association organized a multidisciplinary group of experts in relevant fields. They referred to the ‘Diagnosis and Treatment Guidelines for Cytomegalovirus Infection in Solid Organ Transplant Recipients in China (2016 edition)’ and the latest published literature and guidelines, resulting in the development of the ‘Clinical Diagnosis and Treatment Guidelines for Cytomegalovirus Infection in Kidney Transplant Recipients in China (2023 edition)’. The updated guideline includes CMV epidemiology, research progress on the risk factors and universal prevention of CMV infection, the definition for CMV infection, detailed diagnostic criteria for CMV viremia and CMV disease, as well as an introduction to new anti-CMV drugs.【Key words 】 Kidney transplantation; Solid organ transplantation; Cytomegalovirus; Infection; Viremia;Cytomegalovirus disease; Universal prevention; Preemptive therapyDOI: 10.3969/j.issn.1674-7445.2024096基金项目:国家自然科学基金(82370802、82170766、82270789、81970646);陕西省卫生健康肾脏移植科研创新平台(2023PT-06)执笔作者单位: 710061 西安,西安交通大学第一附属医院(丁小明);首都医科大学附属北京友谊医院(林俊);首都医科大学附属北京朝阳医院(胡小鹏);复旦大学附属中山医院(戎瑞明);西安交通大学第一附属医院(郑瑾)通信作者:丁小明,Email :***************.cn ;薛武军,Email :******************.cn第 15 卷 第 3 期器官移植Vol. 15 No.3 2024 年 5 月Organ Transplantation May 2024 巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)是一种全球传播广泛的β-疱疹病毒,原发感染之后在体内会呈潜伏状态,当人体的免疫功能下降时病毒会被再激活。
儿童巨细胞病毒性疾病诊断和防治

传 水平传播:主要通过密切接触和医源性传播
播 如输入带病毒血制品和移植带病毒器官或骨
途 髓。
径
因婴幼儿期存在高感染率和高排病毒率,故
易发生托幼机构内传播。
3、人群易感性和流行状况
人群普遍易感
发达国家,社会经济水准较高人群HCMV抗体阳 性率为40%~60%,社会经济水准较低人群则达80
%以上。 发展中国家,80%在3岁以前感染,成人感染
病后可作出诊断。 2.确定诊断:从活检病变组织或特殊体液如脑脊液、肺
泡灌洗液分离到病毒或检出病毒复制标志物是确诊证据
在诊断HCMV疾病时,要考虑到HCMV致病力弱,人 群中感染普遍、无症状性排病毒率高(原发感染者 可排毒数年)以及可与其它病原混合染或与其 他疾病伴随存在等情况,注意排除现症疾病 的其他常见病因;当病情严重程度不能完全 用HCMV疾病解释时尤应注意寻找其基础疾病或 伴随疾病。
功能异常。后者又称亚临床型感染。 绝大多数儿童HCMV感染表现为无症状性或亚临 床型感染。
四、儿童HCMV性疾病的诊断
一、诊断依据
疾病高发人群
①母亲孕期有原发感染或再发感染的新生儿
②一岁以下婴儿
③HIV患儿 ④接受骨髓、干细胞或实体器官移植者 ⑤大剂量或长期免疫抑制剂或糖皮质激素治疗者
根据临床征象分类
症状性感染:出现HCMV感染性疾病并排除其他 病因。病变累及2个或2个以上器官系统时称全
身性感染,多见于先天感染和免疫缺陷者;若病
变主要集中于某一器官或系统,如肝脏或肺脏
时,则称HCMV性肝炎或HCMV性肺炎。 无症状性感染
可有2种情况:患儿有HCMV感染证据但无症状和
体征;或虽无症状,却有病变脏器体征和/或
实验室检查
新生儿人巨细胞病毒感染的实验室诊断研究进展

新生儿人巨细胞病毒感染的实验室诊断研究进展作者:王帅来源:《中国当代医药》2012年第29期[摘要] 新生儿巨细胞病毒性疾病是一种新生儿常见疾病,因其发病隐匿,故临床上以实验室检测为诊断疾病的关键。
本文综述了实验室常用的检测方法,比较了各种检测方法的利弊及临床的应用状况和前景,为医生合理地诊断新生儿巨细胞病毒性疾病提供参考。
[关键词] 巨细胞病毒感染;新生儿;pp65抗原血症;研究进展[中图分类号] R446 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2012)10(b)-0017-02新生儿巨细胞病毒性疾病是由人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染所引起的一种疾病,新生儿因免疫系统尚未发育完全,机体抵抗HCMV的入侵能力极弱,很容易形成HCMV活动性感染。
2004年的统计学研究报道,新生儿的HCMV平均感染率接近10%,病死率接近20%;其余感染患儿可出现中枢神经系统损害、颅骨发育畸形、发育迟缓等症状[1-3]。
因HCMV感染无特异的临床症状和体征,而且患儿多因免疫系统发育不完全而表现为隐性感染,故如何准确、快速、特异性地检测到早期HCMV活动性感染成为临床治疗的关键。
1 病毒分离病毒分离法一直被认为是诊断HCMV活动性感可靠性和特异性最强的方法。
利用免疫标技术检测病毒抗原可缩短病毒检测时间至24~48 h。
常采用尿样本,也可取体液和组织样本[4-5]。
该方法将尿、脐血等检测标本与人胚成纤维(HF)细胞共同孵育,在培养1~3周后,观察HF细胞有无出现致细胞病变效应。
但由于HCMV在体外生长速度缓慢,检测时间长,不能快速确诊以满足临床需要,故该法主要应用于科研[3]。
2 血清特异性抗体检测新生儿HCMV感染后可刺激人体产生体液免疫反应,因此,通过ELISA法检测血清中特异性HCMV-IgM、HCMV-IgG抗体可间接证实体内是否有HCMV感染。
其中,血清IgM抗体因发生于感染早期,故IgM抗体阳性被认为是HCMV活动性感染的指标;而血清IgG抗体阳性则表明患儿曾有HCMV感染史[6],若HCMV-IgG滴度升高4倍以上则提示有HCMV活动性感染。
PP65抗原检测在预防肾移植术后巨细胞病毒感染中的价值

[1] SZC ZE PU R A A , W E STM O R E LA N D D , V IN O G R A D O V A Y , et al. E valuation of m olecular techniques in prediction and diagnosis of cytom egalovirus disease in im m unocom prom ised patients [J]. H ealth Technology A ssessm ent, 2006, 10(10): 6-7.
11/37) C M V - PP65 抗原阳性, 均给予更昔洛韦抗病毒治疗, 11 例患者中 3 例( 8.1% , 3/37) 发 展 成 巨 细 胞 病 毒
病 , 均 发 生 于 停 用 或 未 采 用 更 昔 洛 韦 时 ; 另 外 26 例 患 者( 70.3% , 26/37) PP65 抗 原 始 终 阴 性 , 随 访 3 个 月 无 巨
Hospital, Central South University, Changsha, Hunan 410011, P.R.China)
Abstr act: 【Objective】 To study the value of cytomegalovirus PP65 antigen detection in the prophylaxis and treatment of cytomegalovirus disease after renal transplantation. 【Methods】A study was conducted in 37 cases of renal allograft recipients. Patients received CMV- PP65 antigen detection regularly. 【Results】 Eleven patients (29.7%, 11/37) were CMV- PP65 antigen positive and had to receive anti- virus treatment with ganciclovir. Three pa- tients developed to CMV disease and all the 3 cases happened when ganciclovir were withdrawed. Other 26 patients (70.3%, 26/37) were CMV- PP65 antigen negative anytime and no CMV disease happened during 3 months′follow- up. 【Conclusion】Cytomegalovirus PP65 antigen detection in renal allograft recipients played an important role in the diagnosis, treatment and especially the prophylaxis of CMV disease.
CMVPP65抗原检测及临床意义

• 通过动态监测CMVpp65抗原的表达水平,可以评 估病情的进展和治疗效果,指导临床治疗方案的 调整。
流行病学调查
• CMVpp65抗原检测可以用于流行病学调 查,了解CMV的感染率和流行趋势,为预 防和控制感染提供依据。
03 CMVpp65抗原检测的临 床意义
诊断CMV感染
诊断准确性
CMVpp65抗原检测能够准确快速地 检测出CMV感染,尤其在病毒血症期, 其阳性率较高,有助于早期诊断。
区分病原体
CMVpp65抗原检测可以与其他病毒 引起的疾病相区分,如EB病毒、巨细 胞病毒等。
监测治疗效果
评估抗病毒治疗
通过监测CMVpp65抗原水平,可以 评估抗病毒治疗的效果,指导临床调 整治疗方案。
监测复发
对于已经接受治疗的患者,定期监测 CMVpp65抗原有助于发现病毒复发, 及时采取干预措施。
CMVpp65抗原检测及临床意义
目 录
• 引言 • CMVpp65抗原检测方法 • CMVpp65抗原检测方法 • CMVpp65抗原检测的临床意义 • CMVpp65抗原检测的局限性 • 展望
01 引言
目的和背景
CMVpp65抗原检测在临床上的应用价值
探讨CMVpp65抗原检测在临床上的应用价值,包括其在诊断、治疗和预防CMV感染方 面的作用。
1 2
疫苗研发
研究更有效的CMV疫苗,降低感染风险和疾病 负担。
抗病毒药物
开发新的抗病毒药物,提高治疗效果和降低副作 用。
3
个体化治疗
根据患者的具体情况制定个体化的预防和治疗方 案,提高治疗效果和患者生活质量。
提高公众对CMV感染的认识和预防意识
01
02
03
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• 分离白细胞(EDTA-K3抗凝的静脉血2-5ml) • 细胞计数即浓度调整,3.0106/ml • 细胞离心涂片及固定。 • 染色,IIF法,第一抗体是抗CMVpp65单抗,
第二抗体是羊抗鼠免疫球蛋白荧光抗体。 • 读片及结果判断
CMV_PP65抗原检测及临床意义
CMV感染的最重要的形式
• CMV先天性感染。 • 在免疫抑制患者的感染,包括艾滋病、
肿瘤化疗患者(尤其是白血病和淋巴瘤)以 及器官移植受者。
巨细胞病毒抗原血症(Cpment, The Netherlands)
• 时间:周1或周4送标本(检验科病毒室, 新楼3段2层)。
CMVPP65阳性
CMV PP65阳性意义
• CMV活动性感染,并可在出现临床症状 前检测到。
• 做为疗效观察的指标。
CMV PP65阳性治疗
• 更昔洛韦,ganciclovir
标本的采集
• EDTA-K3抗凝的静脉血2-5ml(白细胞过 低患者,如 200个/mm3,需要采集5- 10ml抗凝的静脉血。