牛结核病疫苗研究进展
492019年第36卷第4期牛结核病疫苗研究进展张喜悦（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）摘 要：目前处于临床试验阶段的医用结核病疫苗共计15种，其中临床I期6种、Ⅱ期6种、Ⅱb期2种、Ⅲ期1种。医用疫苗的进步为牛结核病疫苗应用提供了更多的选择。20世纪90年代起，英国、新西兰、西班牙等国陆续开展了野生动物的牛结核病免疫田间试验。现在全球虽然仍禁止使用疫苗免疫牛，但很多学者仍然进行了大量的牛结核病疫苗研究。英国动植物健康署（APHA）通过试验证实，卡介苗（BCG）-病毒载体疫苗联合免疫可强化BCG免疫效果。欧盟开展了结核病阶梯项目（TBSTEP），研究根除牛结核病的策略，其中包括疫苗和诊断试剂研发。此外，为扩大试验范围，欧盟食品安全局还要求开展牛结核病疫苗田间试验。关键词：医用结核病疫苗；牛结核病疫苗；免疫策略中图分类号：S852.61 文献标识码：A 文章编号：1005-944X（2019）04-0049-04DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2019.04.013
Research Progress on Bovine Tuberculosis VaccinesZhang Xiyue（China Animal Health and Epidemiology Center，Qingdao，Shandong 266032，China）Abstract：Presently，a total of 15 kinds of medical tuberculosis vaccines are at the stage of clinical trials，including
6 kinds of vaccines at clinical stage I，6 kinds at stage II，2 kinds at stage II b，and 1 kind at stage III. With the development of medical vaccines，the bovine tuberculosis vaccines would be applied in a large range. Since the 1990s，the field trials for immunization against bovine tuberculosis in wild animals have been carried out in the United Kingdom，New Zealand，Spain and other countries. Although it is still prohibited to use vaccines in cattle in the world，a large number of related vaccine researches were carried out by many scholars. The immune effects of bacillus calmette-guerin（BCG）could be strengthened by combined immunization of BCG-viral vector vaccine as tested and confirmed by British Animal and Plant Health Administration（APHA）. The Tuberculosis Staging Project（TBSTEP）
was performed by European Union to study strategies for eradicating bovine tuberculosis，including the development of vaccines and diagnostic reagents. In addition，the field trials for bovine tuberculosis vaccines were also required to carry out by European Union Food Safety Authority so as to enlarge the scope of trials.Key words：medical tuberculosis vaccine；bovine tuberculosis vaccine；immunization strategy
1 医用结核病疫苗研究现状全球范围内，结核病是导致人类死亡的十大原因之一，每年有数百万人患上结核病。据世界卫生组织（WHO）估计，2017年全球约有
1 000万人新感染结核，我国估计有88.9万人新感染结核[1]。然而，在过去的100年里，唯一
实际应用的疫苗仍然是卡介苗（Bacille calmette guerin，BCG）。近年来，随着基因技术的进步，
学者们尝试从多种途径研发新型疫苗。常用的研发途径有3种：一是对卡介苗进行改进，包括收稿日期：2019-02-25 修回日期：2019-03-02
基金项目：国家重点研发计划项目（2017YFC1200503）50
重组卡介苗，或者对野毒株进行改进，开发出新的疫苗；二是使用病毒载体或结核免疫原性蛋白质，加上必要的佐剂；三是开发治疗性疫苗，以减少结核病治疗的持续时间。目前，进入临床试验的新型疫苗共有15种[1]，另外还有2种临床
试验终止疫苗（表1）。2 牛结核病疫苗研究现状2.1 野生动物疫苗世界很多发达国家均较好地实施了牛结核病根除计划。这些根除计划是基于检疫扑杀策略实施的。但该策略存在着很多问题，如野生动物宿主的存在严重影响牛结核病防控。英国和爱尔兰的獾、新西兰的刷尾负鼠、西班牙的野猪等均为牛结核病易感动物宿主，且这些宿主持续向家畜传播牛结核病，使得这些地区牛结核病的根除变得极为困难。因此，必须考虑对这些野生动物应用疫苗，以控制牛结核病。用BCG免疫野生动物，会导致野生动物向家
畜传播BCG并存在干扰结核菌素试验（PPD）的可能性，但这种情况尚未被证实。BCG可在某些种类的野生动物（白尾鹿）体内，存活达9个月，并可传播至其同群动物。因此，在野生动物免疫BCG的情况下，应该考虑在该地区的牛中，也使
用疫苗进行免疫，以防止疫苗株由野生动物向牛传播。目前，新西兰、英国和西班牙等地均已开展了野生动物免疫试验[5-6]。
新西兰刷尾负鼠：1995—2002年，攻毒试验证实口服、注射和黏膜（如喷气装置）免疫有显著效果；2009年，田间试验证实BCG免疫有69%~95%的效果。口服试验中，将BCG包裹于脂质体中，可防止胃液失活疫苗活性。同时在诱饵上使用防水措施，并将诱饵挂于刷尾负鼠栖息地的树上，这样可有效提高免疫率。英国獾：1998年至今，攻毒试验证实口服、注射和黏膜（如喷气装置）免疫有显著效果。2011年，田间试验证实BCG免疫可使血清学阳性率降
表1 临床和临床终止阶段的结核病新型疫苗研究状况[2-4]阶段疫苗名称疫苗性质
临床I期AdAg85A 重组复制缺陷腺病毒载体疫苗。可表达结核抗原Ag85A MTBVAC 减毒菌株疫苗。从免疫力强的结核病人分离株中删除了phoP和fadD26致病基因
ID93 + GLA-SE 疫苗由4种Mtb重组蛋白（Rv2608、Rv3619、Rv3620、Rv1813）和脂质佐剂乳液（GLA-SE）构成
DAR 901 热灭活的Mtb obuense菌株
CrucellAd35/MVA85A 可表达3种Mtb抗原（Ag85A、Ag85B和TB10.4）的腺病毒疫苗
TB/FLU-04L 流感病毒株A/puetro Rico/8/34 H1N1和MTb抗原Ag85A和ESAT6重组而成
临床Ⅱ期VPM 1002 重组BCG菌株。该疫苗是将编码李斯特菌溶胞素（Hly）的基因整合到BCG基因组中而制成的
H1 + IC31 蛋白质佐剂疫苗。ESAT6混合Ag85B，加上IC31（一种佐剂）制成
RUTI 灭活的、去毒性的，Mtb片段包装于脂质体中的免疫治疗疫苗
H56:IC31 结核抗原Rv2660c和IC31佐剂混合而研发的疫苗
H4:IC31 结核抗原Ag85B、TB10.4融合蛋白混合IC31佐剂而研发的疫苗
Crucell Ad35/AERAS-402 腺病毒35表达Ag85A、Ag85B 和TB10.4 3个结核抗原而制成的疫苗
临床Ⅱb期MVA85A 病毒载体疫苗，可表达结核抗原Ag85AM72 + AS01 结核抗原32A、39A融合蛋白混合AS01E佐剂制备而成
临床Ⅲ期M. Vaccae 热灭活的治疗性疫苗
临床试验终止
rBCG30表达Ag85B的重组BCG。该疫苗中存在抗生素抗性基因，因此受到了抗生素监管部门的限制，终
止了研究
AERAS-422由BCG重组而成，可过表达Ag85A、Ag85B和RV3407，由于安全问题，I期临床试验已经终止2019年第36卷第4期51低73.8%[5]。西班牙野猪：2009年至今，试验证实BCG可提供有效保护。2011年至今，证实灭活的牛分枝杆菌可提供类似于BCG的保护作用。2.2 牛疫苗由于牛结核病疫苗会对PPD形成干扰，造成假阳性，现在全球都禁止使用疫苗免疫牛。WHO也不赞同使用疫苗免疫牛，但很多学者仍然进行了大量的牛结核病疫苗研究。在过去的20年中，牛结核病疫苗研究取得了一些重要进展，主要集中在减毒分枝杆菌菌株、DNA疫苗、亚单位疫苗（如培养滤液蛋白、MPB70）研发和免疫策略研究上。对于DNA和亚
单位疫苗中不同免疫调节剂（如脂肽、CpG、菌落刺激因子等）的应用，也进行了广泛研究。某些DNA、亚单位疫苗可明显增强BCG的免疫效果，
但单独使用时其效果均弱于BCG。因此，当前可以进行田间应用的免疫策略是单独使用BCG，或者使用BCG初免、新型疫苗加强免疫的免疫策略。试验已经证实，腺病毒载体Ag85A疫苗，在攻毒试验中可以保护大部分牛免于形成结核病变[7-9]。
由于检疫扑杀策略未能防止牛结核病流行，英国开展了大量的牛结核病疫苗研发工作，如开展了免疫保护试验[8]，以验证疫苗对牛的保护力。从
2005年开始，APHA即开始进行试验。试验对象为80头免疫牛、64头对照牛。攻毒试验中，80头免疫牛中的29头牛没有病变，而64头对照牛中，仅有2头牛没有病变。免疫牛中的无病变牛，细菌培养也呈阴性，表明BCG甚至在重度攻毒试验中，仍能提供有效保护。免疫后25 d可建立免疫反应，基于可见病变减少的程度，表明疫苗的保护率为76%（50%~100%）。同其他动物一样，BCG对牛可以提供不同程度的保护，对部分牛只不产生保护。当BCG接种于新生牛和犊牛时，其产生的保护作用要高于接种于成年牛；BCG Pasteur株和BCG Danish 株可以诱导相等的保护力，黏膜免疫
奶牛结核病的诊断与防控
2023年第06期D O I:10.3969/J.I SSN.1671-6027.2023.06.035牛结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性消耗性人畜共患传染病,结核分枝杆菌主要有三种类型,分别为牛型、人型和禽型。
牛型主要感染牛,尤其奶牛最易感染,其次是黄牛、水牛,猪、人也可以感染发病。
禽型主要侵害家禽,也可以引起猪发病,偶尔也可以感染人。
人型主要侵害人,牛、猪极少感染。
结核病的分布范围广,世界各国都有发生,随着净化措施的加强,一些发达国家结核病的感染率逐渐降低,牛结核杆菌的宿主较多,几乎能够感染所有的脊椎动物。
随着耐药性结核杆菌的出现,导致结核病感染率逐年提升,不仅影响畜牧业的健康发展,而且还对人类的健康产生严重威胁,因此,结核病再次引起世界各国的关注,我国将其列为二类动物疫病。
1病史与危害结核病在我国的流行历史悠久,早在第4世纪末《崔氏别录》(崔知拂氏著)书中就记载了淋巴结核的发生情况。
隋朝的《诸病源侯总论》(巢元方著)书中也记载了结核病有三尸虫的说法,并推测引起结核病传播的是一种有生命的传染性病原体。
牛结核病也很早被发现,并且可以传染人,曾经引起很多人死亡,将该病称为“痨病”。
家畜结核和人结核的发生呈平行关系,特别是20世纪40年代,我国从国外引进大量的奶牛,导致牛结核病感染率上升,使得畜间结核病的流行范围更广。
20世纪50年代,我国的牛结核病呈缓慢上升趋势,疫情涉及浙江、北京、辽宁、安徽、山东、新疆、内蒙古等7个省市自治区,其中浙江的阳性率最高,高达41.30%;到了20世纪60年代,牛结核病呈现蔓延趋势,发病牛比50年代提高190.03%,死亡牛数量提高了91.02%。
其中1966年疫情严重,该年疫情在新疆、四川、北京、河北、内蒙古、辽宁、吉林、黑龙江、山东、湖北、宁夏等11个省、市、自治区都有发生,尤其新疆疫情严重;20世纪70年代随着奶牛养殖业的发展,结核病的发病率也达到了历史高峰其中1978年为发病高峰,阳性率高达0.83%,尤其新疆、四川、西藏疫情比较严重;20世纪80~90年代,牛结核病的发生率逐渐降低,但是近年来,随着家畜的流动和交易活动的增加,以及人间艾滋病病毒与结核菌的双重感染,结核杆菌多重耐药菌株的出现,导致结核病的发生率又有回升,对畜牧业的发展和人类的产生了严重威胁。
牛结核病的诊断与防制
关键词 ： 结核病 ； 牛 结核 结 节 ； 疫 ； 制 检 防
结核 病是 一种 慢 性 的 人 兽 共 患 传 染 病 ， 特 点 其
是渐 进性 消瘦 、 多种器 官 组织 形 成 结 核 结节 ， 而 在 继
必 须强 制报 告 。有 报 道 称 ，０ ２年 度 结 核病 是 引起 ２０ 我 国公 民死 亡最 多 的 ５ 传 染病 之一 。 种
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动 物 医 学 进 展 ． ０ ６ ２ （ Ｏ ： ｌ— １ ２ ０ ，７ １ ） ｌ ６１ ７
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牛 结 核 病 的诊 断 与 防 制
又很 多 ， 以应 采 取综 合 措 施 避免 该 病 的发 生 与传 所
播。
６ 讨 论 ６ １ 附红细胞 体 病是 多 因素 性疾 病 ， 病能 力 弱 、 ． 抗
维普资讯
白春 黎 ： 牛结 核 病 的 诊 断 与 防 制
１７ １
乳汁 和阴道 分泌 物排 菌 和污 染周 围环境 。该 病 主要
生， 牛是 家畜 中最 易 感 的 动 物 ， 别 是 奶 牛 ， 次 是 特 其
收 稿 日期 ： ０ ６０ － ５ ２ ０ － ６０
作者简介 ： 白春 黎 （ ９ ３ ， ， 西 榆 林 人 ， 师 ， 要 从 事 教 学及 临床 实践 指 导 工 作 。 １ ６ 一） 女 陕 讲 主
４ ３ 动 物 回 归试 验 ． 取病 鸡 血液 ， 肉接种 １ 肌 ０只未经 过 相关 免疫 的 青 年鸡 ， 接种 剂量 为 ０ ５ｍＬ 只 ， 相 继发病 ， ． ／ ５ｄ后 翅 下 静脉采 血 ， 均检 出 了附红 细 胞体 。
牛流行热检测方法及疫苗研究现状
牛流行热检测方法及疫苗研究现状牛流行热（bovine ephemeral fever，BEF）又称三日热、暂时热，是一种由节肢动物传播的病毒性疾病[1-2]。
BEF的主要症状表现为突发高热（41~42 ℃）、食欲不振、关节肿胀、跛行。
该病的特点是发病快，病程仅持续1~3 d，恢复迅速。
1867年，BEF首次在南非被报道，随后传入中东、澳大利亚、日本、中国等国家及地区[3]。
BEF病死率低，发病率高，主要导致泌乳牛产奶量突然下降、肉牛状况不良、役用牛瘫痪，造成养殖业经济损失惨重。
近年来，BEF的发病率和病死率不断升高。
2002年，河南省BEF流行病学报告病死率达到17%~18%；2012年，土耳其一牧场BEF病死率高达20%；2015年，西藏和甘肃天祝地区牦牛BEFV抗体阳性率为23.8%~45.09%[4-7]。
因此，检测和防控BEF已成为畜牧业的首要任务。
牛流行热病毒（bovine ephemeral fever virus，BEFV）属于弹状病毒科暂时热病毒属，由负义单链RNA基因组组成。
BEFV共编码5种结构蛋白，包括核蛋白（N）、磷蛋白（P）、基质蛋白（M）、糖蛋白（G）、RNA依赖RNA聚合酶大蛋白（L）[8]。
G蛋白是一类跨膜糖蛋白，负责病毒细胞黏附、进入和致病性，表面有4个抗原中和位点（G1~G4），能够诱导抗体分泌和保护性体液免疫[9-10]。
研究发现，G1位点仅与BEFV的血清发生反应，而G2、G3、G4抗原位点与同科其他病毒会产生血清学交叉反应[11]。
G蛋白作为中和抗体的靶标，广泛应用于BEFV检测方法建立和新型BEF疫苗开发。
本文对BEF的检测方法以及疫苗开发的研究近况进行梳理总结，以期为BEF的防控提供一定参考。
1 BEF检测方法的研究近况1.1 病原学检测方法临床上常将采集的患病牛抗凝血白细胞接种于1~3日龄的乳鼠脑中，经鼠脑传代分离得到病毒后，进行病毒中和试验鉴定；或将负染分离的白细胞置于电镜下，观察病毒颗粒的形态。
牛传染病防治技术：牛副结核
2 3
临床症状观察
观察牛是否出现食欲不振、消瘦、呼吸困难等 症状，以及是否有咳嗽、气喘、腹部疼痛等情 况。
体征检查
检查牛的体温、心率、呼吸频率等生理指标， 以及是否有异常的腹部隆起或凹陷等情况。
实验室诊断
病原学检查
采集病牛的分泌物或组织样本进行培养或显微镜检查，查找副 结核菌。
血清学检测
采集病牛的血液样本，检测血清中是否存在副结核菌抗体。
中药治疗及验方分享
01
1. 用新鲜仙人掌捣烂后拌入饲 料中饲喂，每日1次，连用 7~10天。
02
2. 用新鲜艾叶或艾绒煎汤灌服 ，每日1次，连用3~5天。
03
3. 用新鲜南瓜藤捣烂后拌入饲 料中饲喂，每日1次，连用5~7 天。
05
案例分析和经验分享
典型病例介绍
病例一
某养殖场发现部分牛只出现腹泻、消瘦、产奶量下降等症状，经诊断为牛副结核。通过采取隔离、治疗措施， 有效控制了病情。
如牛白血病、牛瘟等，需要通过临床症状、 病理变化和实验室检测进行鉴别诊断。
03
牛副结核病的预防和控制
预防措施
保持牛舍卫生
严格控制牛舍的卫生条件 ，定期清理和消毒，减少 病菌的滋生。
饲养管理
提供均衡的营养，增强牛 的免疫力，减少疾病的发 生。
检疫和隔离
对疑似感染的牛进行隔离 和检疫，防止疫情扩散。
分子生物学检测
采用PCR、基因测序等技术检测病牛样本中的副结核菌基因序 列。
鉴别诊断
与其他呼吸道疾病的鉴别
如牛肺疫、牛流行性感冒等，需要通过临床 症状、病理变化和实验室检测进行鉴别诊断 。
与其他消化系统疾病的鉴别
如牛病毒性腹泻、牛肠毒血症等，需要通过临床症 状、病理变化和实验室检测进行鉴别诊断。
牛结核病的临床诊断及关键防治措施分析
牛结核病的临床诊断及关键防治措施分析牛结核病是一种慢性传染病，由分枝杆菌（Mycobacterium bovis）引起，可对牛的健康和肉质质量造成较大影响，同时也会威胁到人类的健康。
因此，该病的临床诊断和防治措施具有重要意义。
临床诊断1.症状表现：牛结核病的症状主要表现为消瘦、食欲减退、毛发干燥、上睑下垂、乳房肿大等。
严重病例还会伴随咳嗽、呼吸困难等呼吸系统症状。
2.体征检查：结核病变部位常常有肿胀、硬结、发热和分泌物等表现。
此外，结核病变还可能引起牛的关节炎和泌尿系统病变等症状。
3.实验室检测：结核病的确诊需要通过实验室检测。
主要包括TB原始液/纯化蛋白结核菌病原学检测、结核试验和结核菌分离检验等。
关键防治措施1.加强管理：牛结核病的防治需要加强兽舍卫生，定期消毒以杀灭细菌。
同时，还要加强饲养管理，确保牛的营养充足，增强身体健康，提高其免疫力。
2.加大疫苗接种力度：结核病疫苗是预防结核病的有效手段之一。
因此，在养牛过程中，应该定期对牛进行结核病疫苗接种。
3.及时隔离治疗：对有结核病症状的牛，应及时进行隔离治疗，以避免疾病的传播。
同时，在治疗期间要使用抗生素进行治疗，以减少病情恶化。
4.加强监测：为了及时发现结核病，要加强对牛体状况的监测。
定期进行结核试验，检测结核病原体的存在，以及对已经感染的牛进行隔离治疗。
结语牛结核病是一种常见疾病，对牛的生长发育和肉质质量造成较大影响，对人类健康也会造成威胁。
因此，及时发现和防治牛结核病非常重要。
通过加强管理、疫苗接种、隔离治疗和监测等措施可以有效降低结核病的发病率，保证养牛业的健康发展。
牛结核病的症状表现与治疗措施
牛结核病的症状表现与治疗措施牛结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，在世界各国都有广泛分布。
这种疾病可能会对牛的生产和健康造成严重影响，甚至会对人类产生潜在的危害。
本文将介绍牛结核病的症状表现和治疗措施。
症状表现：1.体重下降牛结核病初期的症状之一是体重下降，这与牛的食欲减退和代谢水平降低有关。
牛体重下降的程度可以根据疾病的严重程度而不同，严重的病例可能导致体重下降20%以上。
2.咳嗽和呼吸急促牛结核病还会引起呼吸系统症状，如咳嗽、呼吸困难和呼吸急促。
这些症状可能是由疾病导致的肺部炎症和堵塞引起的。
3.结节和脓肿牛结核病也会导致结节和脓肿的形成。
这些结节和脓肿通常发生在肺部和淋巴结周围，但也可能在其他部位出现。
这些结节和脓肿可能会向周围组织扩散，影响到由此处血供的组织。
4.消瘦和体质衰弱长期患有牛结核病的牛可能会出现消瘦和体质衰弱。
这些症状通常与营养代谢障碍、慢性感染和疾病引起的免疫反应有关。
治疗措施：1.检测和诊断牛结核病的早期检测和诊断是保障牛健康和人类健康的关键。
免疫学检测和细菌学检测都是牛结核病的常用检测方法。
如果检测表明牛患有结核病，建议对其进行隔离和治疗。
2.抗结核疗法针对牛结核病的治疗方法包括抗结核疗法、手术切除和免疫疗法等。
抗结核疗法是目前最有效的治疗方法之一，通常使用对结核分枝杆菌敏感的药物。
然而，这种治疗方法可能需要长时间持续使用，并且也存在细菌耐药性的问题。
3.手术切除对于病情严重的牛，手术切除可能是一种有效的治疗方法，特别是对于局部发病的牛。
手术切除也可以减轻牛的疼痛和不适。
4.免疫疗法新的免疫治疗方法正在研究中，包括使用病毒载体进行免疫接种以增强牛的免疫系统。
这种疗法可能会提供更长期的保护并减少牛的感染率。
总体来说，牛结核病是一种严重的传染病，需要进行早期检测和治疗。
充分理解牛结核病的症状表现和治疗措施，有助于预防和控制这种疾病的传播，维护牛的健康和人类的安全。
牛结核病的检疫技术及防控
健康养殖·防控畜牧业环境 2021.0662摘 要：牛结核病是慢性消耗性疾病，是国家规定必须上报的疾病类型。
在我国属于第2类动物感染病，会对养牛业的发展、食品安全与人身健康造成重大的危害。
本文简述了该病的检疫技术及防控措施。
关键词：牛结核病；检疫；防控1 前言据目前的数据表明，每年世界大约有7 000万头牛感染结核病，造成了经济损失多达50多亿美元。
许多发达国家对此也做出了不懈努力，花费了近20年的时间并投入了巨大的资金。
在牛结核病检疫中最重要的是新型的诊断方法。
现如今野生动物结合免疫防范工作与家养牛结核免疫防范工作都受到了世界各界的关注，所以中国也必须重视牛结核病的控制与净化，需要在政策法律国家财力等方面做出相应的努力。
从目前来看，中国缺乏全国性的牛结核控制与净化的明确目标。
2 牛结核病与人结核病的关系在巴氏消毒出现之前，人感染牛结核病的比例为40%。
而在巴氏消毒出现以后，人感染牛结核病的比例下降到1%以下。
在目前多数发达国家中，有较高的人群结核是由于牛结核病引起的，约占9%。
牛分枝杆菌对常用的人结合疾病治疗的药物有天然的抗药性，也给临床的治疗带来了困难。
所以根据世界卫生组织的相关规定，在某些牛结核病盛行的国家必须要采用扑灭的手段消灭牛结核病，避免人类由于结核病的控制不当而受到伤害。
针对某些结核病的防控，除了要在公共卫生意义方面做出努力，也要对养牛行业尤其是奶牛产业重点关注。
在牛感染了牛分枝杆菌初期，其表现并不明显，甚至很难发现牛的精神不佳。
牛的健康状况会随着发病的程度而逐渐恶化，临床的表现为：牛会出现日渐消瘦、咳嗽、呼吸困难、乳房肿块，母牛甚至会出现乳腺萎缩的情况，但是无热无痛的。
肠结核病会导致生物出现腹泻便秘的症状。
开放性结核病流会通过生殖器官的分泌物、乳汁等，将结核病菌带出体外，使周围的空气与环境遭到污染。
这些病菌会通过呼吸道与消化道感染更多的牛、人或者其他生物，所以要重视牛结核病的防控，才能够保障养牛产业的持续性发展。
γ-干扰素释放法检测奶牛结核病的比较试验
64牛结核病（bovine tuberculosis）是由牛型分枝杆菌等所引起的一种人兽共患的慢性消耗性传染病，被世界动物卫生组织（OIE）列为需通报的动物疫病。
目前，我国主要采用牛型提纯结核菌素（PPD）进行单纯颈部皮试变态反应（SCT）来进行牛结核病的检疫，对于阳性牛应进行隔离或扑杀，但是许多被扑杀的牛并没有区分检疫方法可能造成的假阳性，这对牛结核病的检疫，奶牛业的发展造成了巨大的阻力。
掌握我市奶牛结核病现状、检测淘汰感染奶牛意义重大，因此采用灵敏度更高、特异性更好的检测方法具有广泛应用价值。
为此，本研究旨在γ—干扰素释放试验（IGRA）的应用优势，通过比对单纯颈部皮试变态反应（SCT）、比较皮试变态反应（CCT）和γ—干扰素释放试验（IGRA）之间的效果，为临床实际应用提供依据。
1 材料与方法1.1 PPD与试剂盒皮肤试验用牛型PPD和禽型γ—干扰素释放法检测奶牛结核病的比较试验倪谷音1，毛爱民2，范 锋2（1.无锡市动物园管理处，江苏无锡 214000；2.无锡市动物疫病预防控制中心，江苏无锡 214021）摘要：目的评价γ—干扰素释放试验（IGRA）牛结核病检疫过程中的效果。
方法在牛结核病检疫过程中对皮试初筛为结核病和疑似结核病的89（74/15）头奶牛同时进行r干扰素试验、单纯颈部皮试变态反应（SCT）和比较皮试变态反应（CCT）检测，结果单纯颈部皮试变态反应二次检疫中89头牛均判为阳性，单纯颈部皮试变态反应与比较皮试变态反应的阳性符合数为67头。
阳性符合率为75.3％；γ—干扰素释放试验和单纯颈部皮试变态反应检测两者的阳性符合数为64头，阳性符合率为71.9％；γ—干扰素释放试验与比较皮试变态反应的阳性符合数为58头，阳性符合率为79.5 ％。
阴性符合数为16头，阴性符合率为48.4 ％；结论γ—干扰素释放试验在保持较高灵敏度的同时，具有比变态反应更好的特异性。
关键词：牛结核；γ—干扰素试验；单纯颈部皮试变态反应；比较皮试变态反应中图分类号：S852.618；S855.2 文献标识码：B 文章编号：1005-944X（2014）01-0064-03A Comparative Study of γ—Interferon Release Assay in Bovine TuberculosisNi Guyin1，Mao Aimin2，Fan Feng2（1.Wuxi Zoo Management Offi ce， Wuxi， Jiangsu 214000；2. Wuxi Center for Animal Disease Prevention And Control， Wuxi， Jiangsu 214021）Abstract：Objective To evaluate the effect of γ—interferon release assay （IGRA） in bovine tuberculosis detection.Method 89（74 positive/15 suspicious） dairy cows preliminarily screened with skin test were tested byγ—inerfer-on release assay （IGRA）， simple cervical allergy skin test （SCT） and comparative allergy cervical test （CCT）.Result 89 cows were considered as bovine tuberculosis positive in SCT， and 67 of them were considered as posi-tive in CCT with the positive coincidence of 75.3%. 64 cows were considered as positive both in IGRA and SCT with the positive coincidence of 71.9%. 58 cows were considered as positive both in IGRA and CCT， with the positive coin-cidence of 79.5%. 16 cows were considered as negative， with the negative coincidence of 48.4%. Conclusion The γ—interferon release was of higher sensitivity and better specifi city than the other two allergy tests.Key words：bovine tuberculosis；γ—interferon release assay； simple cervical allergy skin test； comparative aller-gy skin test基金项目：江苏省2012农业三新工程《奶牛布病，结核病防治集成技术的推广应用》项目资助，SXGC[2012]0322014年第31卷第1期PPD购自中国兽医监察所；IGRA试剂盒购自瑞士Prionics公司。
ESAT-6家族在结核病方面的研究进展
结核病与胸部肿瘤 ２０ 年第４ ０８ 期
诱 发Ｔ 胞 反应 。在 人类 ，Ｅ Ａ 细 ｓ Ｔ一６ 可激 发 不 同 种 族 的 Ｐ Ｄ阳性 的Ｔ Ｐ Ｂ患 者 广 泛 和 显 著 的Ｔ
细 胞免疫 应 答 。Ｃ Ｐ ０ Ｓ Ｔ ６ Ｆ １ 与Ｅ Ａ 一的免 疫学
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活性 相似 ，在不 同物 种 问可 引起 强 烈的Ｔ 细胞 识 别 ，并 释 放 较 高 水 平 的 ＩＮ— ｙ Ｆ 。尽 管 亚 家族 中的 蛋 白具 有 很 高 的 同源 性 ，但 能
１ｅａ－ 家族 ｓｔ ６
Ｅ ＡＴ一６ 族 存在 于 结核 杆 菌 液培 养 基 Ｓ 家 的 早 期 滤液 中 ，分 离 的一 组 低 相 对分 子 质量 （ ） 蛋 白质 ，存 在 于 人 型 和 牛 型 结 核 杆 Ｍｒ
菌 中 ，从 培 养 的 第４ 开 始 出现 ，第 １ 天 达 天 ４ 到 高 峰 。包括 Ｅ ＡＴ ６ Ｆ １ ￣ Ｔ ．三种 Ｓ 一 、Ｃ Ｐ ０ Ｉ Ｂ１ ４ Ｊ ０
随 着结 核 分 枝 杆 菌全 基 因组 序 列 测 定 的
蛋白成分。Ｍｒ （ ～１ ）×１３ 为 ６ ２ ０， 等电点（Ｉ Ｐ）
为 ４ ．， ～４５主要 分 布 于人 型 和牛 型结 核 杆 菌 的 细 胞 质 和 细 胞 壁 中 … 。ｅａ一蛋 白Ｍｒ ６ ｓｔ ６ 为 × １ ０，肽 链 长 度 为９ 个 氨 基 酸 ，含 有 １ —３ ５ ４２ 个 较小 的开 放读 码 框 （ Ｆ ） ，其编 码 的蛋 白 ＯＲ ｓ 约在 １ ０ＫＤａ 右 ，属低 分 子 蛋 白量 。ｅａ一 Ｄｅ ０ ８，Ｎｏ４ ｂｅ ｏｒＴｕ ｒ ｃ２ ０ ．
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综述 ・
Ｅ Ａ ＿家族在结核病方面 的研 究进 展 Ｓ Ｔ６
牛结核病的诊断与防治
牛结核病是牛感染结核分枝杆菌导致的一种慢性人畜共患传染病，主要表现为渐进性消瘦，引发多器官出现结核结节、干酪样坏死、空洞或钙化，对牛健康生长及养牛业的发展造成巨大影响，因此，必须要重视牛结核病的防治工作。
1病原结核分枝杆菌是引发牛结核病的主要病原，其形态为中等大小，比较纤细，没有芽孢与荚膜和鞭毛。
人型结核分枝杆菌有分枝且细长，牛型结核分枝杆菌比较短粗，禽型结核分枝杆菌小而短具有多形性。
革兰氏染色阳性，具有抗酸性染色特点。
具有抵抗干燥与消毒能力，可利用石炭酸或3%的甲醛消毒。
2流行特点结核病呈隐性传染，流行过程较慢，不仅感染动物，同时还会传播人类，病畜或病人是主要的传染源。
污染的空气、饮水及各种用具、饲料等都可传染牛结核病，消化道和呼吸道是主要的传播途径，还可经交配传播。
3发病症状结核病的潜伏期长短不一，通常为10~15d，有的可超过数月以上。
发病具有隐蔽性，特别是健康状况和精神状况不佳时发病严重，表现渐进性消瘦。
牛感染结核病常常表现为肺部症状，食欲明显下降，同时伴有咳嗽、呼吸困难，被毛失去粗乱无光泽，乳房发生结核后，泌乳明显减少，并有肿块形成，严重者导致乳腺萎缩或肿大变硬，没有发热和疼痛。
肠结核有的表现为腹泻，有的为便秘，食欲下降，明显消化不良，消瘦。
淋巴发生结核时肿胀明显，生殖器官结核会出现明显的性机能紊乱，或减退或亢进，母牛不易受孕，公牛睾丸明显肿大，阴茎结节溃烂。
脑结核有明显的癫痫症状，运动失调，粟粒性结核会遍布全身，检查直肠可以发现腹膜结核。
另外还有皮肤结核和骨结核等。
4剖检结核结节是主要的病变特征，大小不一，有的为针头大，有的为鸡蛋大，颜色有的为黄色，有的为白色，将结核结节切开，内有干酪样坏死物，有的还出现钙化。
增生性结节，黄色或白色干酪样坏死分布于中间部位，有钙化，肉芽组织将其外部包绕。
渗出性的结核结节，渗出浸润组织呈纤维素性，表现为干酪样坏死，斑纹呈灰白色或灰红色分布于切面上。
肺部结核病灶具有干酪样变性，或引发肺内空洞，其中有脓样和干酪样内容物，具有心包炎以及胸膜炎。