实验五、蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定
卵磷脂的提取及其乳化特性实验
卵磷脂的提取及其乳化特性实验一、实验目的学习卵磷脂的提取方法。
了解卵磷脂的乳化特性性质。
二、实验原理在卵黄中约含有10%的卵磷脂。
纯卵磷脂是白色块状物，不溶于水，易溶于乙醇、氯仿、乙醚和二硫化碳中，不溶于丙酮，利用这一性质可以与中性脂肪分离。
卵磷脂的胆碱基是亲脂基团，具有能使互不相溶的两相(油相和水相)中的一相分散在另一相中的作用，使之成稳定的乳浊液，因此，卵磷脂是一种天然的乳化剂。
冰淇淋是一种常见的W/O型乳液，要使其形成，必须得表面活性剂的存在，卵磷脂作为一种天然乳化剂，可以用在冰淇淋制作中促进乳液的生成。
三、实验材料与仪器鸡蛋6个，白砂糖，淡奶油250mL、高纯度白酒60mL、食用油、平底锅或电饭煲，碗四、实验步骤(1)卵磷脂的提取选新鲜鸡蛋一个，轻轻在鸡蛋小头击破一个小孔，让蛋清从小孔中流出，取出蛋黄置白瓷碗中，搅碎。
在搅拌下加入50°C白酒60mL，保温提取3-5min，冷却过滤，将滤液置于铁盆中，水浴蒸干，残留物为卵磷脂。
对提取的卵磷脂进行感官评价，记录色泽、气味并拍照保存。
(2)乳化试验取两个小玻璃杯，分别加入约10毫升水，一杯中加入卵磷脂，并使之均匀分散在水中，再加入5滴食用油;另一杯中仅滴入5滴食用油，强烈摇动两个玻璃杯，静置后观察比较两玻璃杯内容物的乳化状态，记录结果。
(3)蛋黄冰淇淋的制作取白砂糖50g、淡奶油250毫升、鸡蛋黄5个。
首先白砂糖磨碎变细砂糖，和鸡蛋黄-起搅拌均匀小火加热至白砂糖融化(不粘锅)，鸡蛋黄变发。
倒出，不断沿同一方向搅拌，直至打发。
淡奶油打发，将打发好的鸡蛋黄慢慢加入打发好的淡奶油中，边加边搅拌，最后倒入容器中装好，冰箱中冷冻5小时。
对制作好的蛋黄冰淇淋进行感官评价并记录。
五、实验结果记录与分析（1）卵磷脂的提取（2）乳化实验附上照片刚开始加入少量乳化的卵磷脂时，四周会产生一些小小的气泡，慢慢变得浑浊；随着加入乳化的卵磷脂的量增加变得更加浑浊（3）蛋黄冰淇淋制作。
论蛋黄卵磷脂的纯化及含量的测定
摘要：采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。
结果表明，从蛋黄提取的卵磷脂粗品经柱层析纯化，精制卵磷脂的纯度达99.6。
用消化定磷法可以准确测定卵磷脂的含量，有较高的准确度。
关键词：卵磷脂；纯化；含量；测定1引言卵磷脂又称为磷脂酰胆碱，是磷脂酸的衍生物，由甘油与脂肪酸和磷酸胆碱结合而成。
卵磷脂广泛分布于动物、植物和酵母中。
卵磷脂是构成细胞等生物膜、脑组织和神经组织的重要组成成分[1]，对酶的活性也起重要的作用，而且也是乙酰胆碱的重要供给源[2]。
卵磷脂因为其乳化特性和安全性，可用于生产人工血浆、脂乳剂。
临床上可用于治疗动脉粥样硬化、脂肪肝、神经衰弱、营养不良、胆固醇结石的防治药物及静脉注射脂肪乳的乳化剂。
在食品、化妆品和医药领域有着广泛的用途。
目前，卵磷脂的来源主要是从鸡蛋黄、大豆和猪脑中提取。
传统提取卵磷脂的几种方法，如用二甲醚从生蛋黄中提取卵磷脂、用乙醇和酸类从生蛋黄中提取卵磷脂、用丙酮提取卵磷脂和冷冻蛋黄，用乙醇和己烷将卵磷脂与中性脂进行分离，提取卵磷脂等方法，这些方法提取的卵磷脂达不到食品和医用的高纯度[3]，因此，必须对粗产品或市售的卵磷脂进行纯化。
在本工作中，作者采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯（自提）；化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。
2实验部分2.1试剂和仪器蛋黄卵磷脂（卵PC）中性三氧化二铝（200-300目）；硅胶G；氯仿（AR）；甲醇（AR）；乙醚（AR）；浓硫酸（AR）；钼酸铵（AR）；30过氧化氢（AR）；磷酸二氢钾（AR）；层析柱（Ф15cm，L40cm）；紫外检测仪（自制）；台式平衡记录仪（上海大华仪表厂）；分光光度计（日本岛津）；EYELASB-20xx 旋转蒸发仪（上海EYELA有限公司）。
2.2实验方法和结果2.2.1蛋黄卵磷脂的提取取12克蛋黄置于150mL的锥型瓶中，加入35mL乙醚，搅拌10min，放置20min，过滤，于45oC的条件下，用旋转蒸发仪蒸干乙醚，再放入真空干燥器减压干燥20min，彻底除尽乙醚，粗提取物离心10min，取出下层的卵磷脂，约为2克。
蛋黄中卵磷脂的提取项目报告
序言卵磷脂是过去五十年间既蛋白质、维生素被发现的最重要的营养素。
它没有副作用，却在抗击疾病和促进健康方面有着稳定、长远、整体的效果。
越来越多的营养学家、药物学家和医学家投身到对卵磷脂的研究中去。
越来越多的国际权威研究组织为卵磷脂对人类健康的神奇作用都给予高度的评价！1996年9月在布鲁塞尔召开的卵磷脂国际会议上，赢得了世界营养专家、药物学家和医学家的普遍认同；1997年第七届卵磷脂国际会议曾作出结论：“总结这些研究成果，建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂，这对于幼儿的智力发育是很重要的。
”1998被联合国粮农组织(FAO)列为世界五大营养食品之一的高度认可1999在美国食品与药物管理委员会（FDA）的批准下，所有的婴儿食谱中都要适量补充卵磷脂。
2001年被美国时代杂志上评选为“二十一世纪最伟大的健康食品”卵磷脂集中存在于脑及神经系统，血液循环系统、免疫系统及心、肝、肺、肾等重要器官。
是构成神经组织的重要成分，属于高级神经营养素。
卵磷脂在人体中占体重的1%左右，但在大脑中却占到脑重量的30%；神经系统机能低下带来的疾病，如焦躁不安，食欲不振，耳鸣，性无能力，神经性下痢，习常性便秘，以及神经传达物质缺乏所带来的痴呆症，内存力减退，每天充分地补充卵磷脂，会收到很好的疗效。
——麻省综合医院的J. H.克劳顿博士啮齿动物口服由大豆卵磷脂合成的磷脂醚丝氨酸能够改善大脑功能，预防老年性痴呆症——日本东京“Yakult Central Institute for Microbiological Research”的研究人员称大豆卵磷脂为天然营养食品，几乎没有什么副作用，每天吃多一点也没有危险。
——世界卫生组织（WHO）用卵磷脂饲育怀孕的大鼠，其后代在智力测验（迷宫测试）中，记忆力显著优于未饲育卵磷脂的大鼠的后代。
——美国北卡罗来纳州DUKE大学心理学教授药学博士沃伦来克“总结有关卵磷脂的所有研究成果，我们应当特别建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂，这对于她们的婴儿的智力发育是很重要的。
卵磷脂实验报告答案
一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法。
2. 学会使用光谱分析法鉴定卵磷脂的纯度。
3. 了解卵磷脂的生物学功能及其在食品和医药领域的应用。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质，属于磷脂类，由磷酸、脂肪酸、甘油和胆碱等成分组成。
卵磷脂具有降低血液中胆固醇、改善脑功能、增强免疫力等生物学功能。
本实验采用乙醇提取法从蛋黄中提取卵磷脂，并通过光谱分析法鉴定其纯度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蛋黄、乙醇、正己烷、蒸馏水、硫酸、碘化钾、淀粉、硅胶、层析板、紫外灯、旋转蒸发仪、分光光度计等。
2. 实验试剂：无水乙醇、正己烷、碘化钾、淀粉、硅胶、硫酸等。
四、实验步骤1. 卵磷脂提取（1）取一定量的蛋黄，加入适量的无水乙醇，充分搅拌，使蛋黄中的卵磷脂溶解。
（2）将溶液转移至分液漏斗中，加入适量的正己烷，振荡，静置分层。
（3）取下层正己烷层，通过旋转蒸发仪去除溶剂，得到卵磷脂粗品。
2. 卵磷脂鉴定（1）取少量卵磷脂粗品，加入适量的硫酸，充分溶解。
（2）使用分光光度计测定溶液在特定波长下的吸光度值。
（3）以硫酸溶液为空白对照，计算卵磷脂的纯度。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂提取实验中，通过乙醇提取法成功从蛋黄中提取了卵磷脂。
提取过程中，蛋黄中的中性脂肪和卵磷脂在乙醇中溶解，通过正己烷的萃取，实现了卵磷脂的分离。
2. 卵磷脂鉴定实验结果显示，卵磷脂在特定波长下的吸光度值与纯度呈正相关。
通过计算，得到卵磷脂的纯度为95.6%，说明实验提取的卵磷脂纯度较高。
六、实验讨论1. 实验中，卵磷脂的提取效果与乙醇的浓度、蛋黄的量、搅拌时间等因素有关。
本实验中，采用适量的乙醇、适量的蛋黄和充分的搅拌，提高了卵磷脂的提取效率。
2. 卵磷脂的鉴定方法采用光谱分析法，具有快速、简便、准确等优点。
通过测定特定波长下的吸光度值，可以较为准确地判断卵磷脂的纯度。
七、实验结论1. 本实验成功从蛋黄中提取了卵磷脂，并采用光谱分析法对其纯度进行了鉴定。
14.实验十四 从蛋黄中提取卵磷脂
一、实验目的
1. 掌握抽滤等基本操作 2.了解从蛋黄中提取卵磷脂的实验方 法
二、实验原理
结构
卵磷脂是磷脂酸的衍生物、别名为磷脂酰胆碱。它 由磷酸、甘油、高级脂肪酸和胆碱组成，其结构式 为：
二、实验原理
性质
1、卵磷脂分子中同时具有亲水基团和亲油基 团、具有良好的乳化性能。
5、加热时，会促使胆碱分解，产生三甲胺的臭味。
6、加硝酸酸化，脂肪酸析出，溶液变浑浊，加酸铅 有脂肪酸铅盐生成，浑浊进一步增强。
7、生成的氢氧化铜沉淀，因水解液中的甘油与之反 应，生成甘油配合物，沉淀溶解。
思考题
1、蛋黄中分离卵磷根据什么原理？ 2、卵磷脂可以化，从结构上分析应做何 解释？
注解和实验指导
1、第一次减压过滤，因刚析出的醇中不溶物很细以 及有少许水分，滤出物浑浊，放置后继续有沉淀析出， 需合并液后，以原布氏漏斗（不换滤纸）反复滤清。
2、蒸去乙醇时，可能最后有少许水分，需搅动加速 蒸发。
3、黄色油状物蒸干后，蒸发皿上的油状物一定要使 其溶于氯仿中，否则会带入杂质。
4、搅动时，析出的卵磷脂可附于玻璃棒上，成团状。
2、可溶于乙醇、乙醚、氯仿，不溶于丙酮。
3、卵磷脂在碱性溶液中加热水解：甘油、脂 肪酸盐、磷酸盐、胆碱
二、实验原理
提取流程
蛋 乙醇提取
残渣
黄
（蛋白、脑磷脂等）
（
含 蛋 白 、
提取液 去乙醇 油状物 （脂肪、卵磷脂等）
脂 肪
氯仿
氯仿-丙酮溶液
、 卵 磷
氯仿溶液 丙酮（脂肪）Fra bibliotek脂 、
沉淀
脑 磷
（卵磷脂）
四、实验步骤
蛋黄卵磷脂的提取
六、注意事项
提高提取温度有利于提高产率，但是也 不宜过高。 使用丙酮、乙醚，室内应严格避免明火 且有良好的通风条件。
蛋黄卵磷脂的提取
一、实验目的
学习蛋黄卵磷脂的提取方法 学习搅拌器的使用
二、实验原理
卵磷脂是自然界中广泛分布的和所有细胞中存 在的甘油磷脂和神经鞘脂类的统称。 蛋黄的组成是51%水分，14.8%蛋白质； 34.6%的卵磷脂 使用溶剂提取卵磷脂时要注意，蛋黄是一种相 当稳定的乳状液，其中乳化剂是磷脂与蛋白质 结合的脂蛋白复合物。要充分把磷脂提取出 来，所用溶剂必须能破坏这种复合。
三、实验装置
四、试剂与仪器
试剂：氯仿，乙醇，乙醚，氯化钠溶液 （10％），无水硫酸钠，丙酮，鸡蛋 仪器：三口烧瓶，烧杯，分液漏斗，机 械搅拌器，水减压蒸馏装置。
五、实验操作
新鲜鸡蛋一个，煮熟完整取出蛋黄，置于装 有搅拌器、回流冷凝管、温度计的100ml三口 烧瓶中。加入20ml混合溶剂（氯仿：乙醇 =1:3),控制温度为35～40℃，搅拌30min。 抽滤，滤饼在同样条件下再提取一次。滤液 转入分液漏斗，以5ml氯仿淌洗抽滤瓶后一并 倒入分液漏斗，加入40ml10％氯化钠溶液洗 涤，分出氯仿层，用无水硫酸钠干燥。
干燥后氯仿层用水减压蒸馏近干（水浴加热， 温度小于40℃）。加入10ml丙酮，搅拌，冰水 冷却后分离沉淀物。倾去上层丙酮层（尽量倒 净）。用尽可能少的乙醚溶解沉淀，转入烧 杯，另用1ml乙醚淌洗圆底烧瓶后也转入烧 杯。 搅拌下缓缓加入10ml丙酮，冰水冷却后倾去丙 酮层，在真空干燥箱中使固体产物挥发掉残留 溶剂后称量，得到白色或蛋黄色蜡状卵磷脂产 品。
实验九卵磷脂的提取和鉴定
实验九卵磷脂的提取和鉴定实验目的：熟悉卵磷脂的提取方法和常见的鉴定方法。
实验原理：卵磷脂是存在于组织和细胞膜中的一类复杂的生物分子，其主要成分包括磷酸甘油酯、磷酸肌酸、磷酸胆碱等物质。
卵磷脂在生物体内扮演着极为重要的生理功能，在维持生物体的正常生理代谢过程中发挥着重要作用。
卵磷脂的提取方法：材料：鸡蛋黄、乙醇、正己烷、醋酸乙酯。
1.取足够多的鸡蛋黄，用纯净水洗净后晾干备用。
2.将洗净干燥的鸡蛋黄取出，剥去蛋壳并取出蛋黄，用刀将其压成泥状。
3.将压成泥状的鸡蛋黄放入烧杯中，加入适量的乙醇，不断搅拌，使其混合均匀。
4.待混合好的鸡蛋黄和乙醇彻底混合均匀后，将其倒入滤布中，将滤液与滤涤液分离开来。
5.将滤液中酒精分离鸡蛋黄接着加入等量的正己烷，用250ml分液漏斗进行振荡后，取出下层酒精分离液。
6.将酒精中的卵磷脂析出，将析出卵磷脂加入等量的醋酸乙酯中溶解，即可得到卵磷脂。
卵磷脂的鉴定：1.磷钼酸法：将标本加入一定量的磷钼酸试剂，加热至磷钼酸中磷酸结晶完全溶解，此时磷酸含量的多少即为卵磷脂的质量。
其原理是卵磷脂中的磷酸和磷钼酸反应，生成黄色的磷钼酸沉淀。
2.碱水解法：将标本与氢氧化钠混合，使卵磷脂水解产生酰基胆碱。
然后加入硫酸和琼脂，沉淀下来的物质即为卵磷脂。
3.利用质谱法进行鉴定：该方法是根据卵磷脂分子中所含的质子数、化学成分以及分子量等特征，通过对样品中分子的荷电性和分子量的测定，进行卵磷脂的鉴定。
实验步骤：1.取少量卵磷脂样品溶于水中。
2.将卵磷脂样品反复洗涤至清洁，然后加入磷钼酸试剂。
3.待磷钼酸在样品中完全溶解后，使用分光光度计测定溶液中吸收光谱，从而得出样品中卵磷脂的质量。
实验结论：通过卵磷脂的提取方法和鉴定方法，我们可以成功地得到卵磷脂，并确定了样品中卵磷脂的数量和质量。
这为我们进一步研究卵磷脂的生理功能以及用途奠定了基础。
食品化学综合的设计性实验汇报[1]卵磷脂的提取鉴定与应用
食品化学综合的设计性实验汇报[1]-卵磷脂的提取，鉴定与应用食品化学综合的设计性实验汇报——卵磷脂的提取，鉴定与应用一、引言卵磷脂是一种天然存在于动植物体内的物质，具有多种生理功能，如改善记忆、降低胆固醇等。
近年来，卵磷脂在食品工业中的应用越来越广泛，被用作添加剂、乳化剂、营养补充剂等。
本实验旨在探究卵磷脂的提取、鉴定方法及其在食品中的应用，以期为卵磷脂的开发利用提供理论支持。
二、实验材料与方法1.实验材料（1）原料：鸡蛋、大豆油（2）试剂：乙醇、硫酸、正己烷、甲醇、氯化钠、磷酸、酚酞指示剂、碘化钾淀粉试纸（3）设备：分液漏斗、旋转蒸发仪、真空干燥箱、电子天平、色谱柱2.实验方法（1）卵磷脂的提取将鸡蛋黄或大豆油用乙醇溶解后，加入正己烷进行萃取。
通过旋转蒸发仪将萃取液浓缩至半，得到卵磷脂粗品。
将粗品置于真空干燥箱中干燥，得到卵磷脂产品。
（2）卵磷脂的鉴定① 颜色反应：取少量卵磷脂产品，分别加入甲醇和酚酞指示剂，观察颜色变化。
② 红外光谱分析：将卵磷脂产品进行红外光谱扫描，与标准谱图对比。
③ 薄层色谱法：将卵磷脂产品点样于硅胶G板上，以石油醚-乙酸乙酯为展开剂进行展开。
观察斑点位置与颜色。
（3）卵磷脂的应用实验① 乳化性实验：将卵磷脂产品加入大豆油中，搅拌均匀。
取一滴混合液滴于水面，观察乳化现象。
② 抗氧化性实验：将卵磷脂产品加入到油脂中，测定油脂的氧化稳定性。
三、实验结果与讨论1.实验结果（1）卵磷脂的提取结果如下表：（2）卵磷脂的鉴定结果如下：① 颜色反应：卵磷脂产品在甲醇中溶解后呈红色，在酚酞指示剂中呈蓝色。
② 红外光谱分析：卵磷脂产品的红外光谱图与标准谱图基本一致，证实其为卵磷脂。
③ 薄层色谱法：斑点位置与颜色均与标准品一致，说明卵磷脂产品的纯度较高。
（3）卵磷脂的应用实验结果如下：① 乳化性实验：混合液滴于水面后，形成一层稳定的乳化层，说明卵磷脂具有较好的乳化性能。
② 抗氧化性实验：在油脂中添加卵磷脂后，油脂的氧化稳定性明显提高。
卵磷脂的提取鉴定
卵磷脂的提取及鉴定作者：未知来源：郑州轻工业学院时间：2006-9-23一、实验目的1.加深了解磷脂类物质的结构和性质。
2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。
二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；此外，卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。
这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
三、仪器和试剂仪器小烧杯、试管。
试剂1. 鸡蛋黄2. 红色石蕊试纸3. 95%乙醇4. 10%氢氧化钠溶液5. 钼酸铵试剂将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水中，加入5mL 浓氨水，另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中，两者混合静置一天后再用。
6. 丙酮7. 乙醚8. 3%溴的四氯化碳溶液9. 硫酸氢钾四、操作步骤(一)卵磷脂的提取称取约10g 蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷却后过滤。
如滤液仍然混浊，可重新过滤直至完全透明。
将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中蒸干，所得干物即为卵磷脂。
(二)卵磷脂的溶解性取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入5mL 乙醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，观察实验现象。
(三)卵磷脂的鉴定1.三甲胺的检验取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氢氧化钠溶液，放入水浴中加热15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。
将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。
卵磷脂的提取鉴定
卵磷脂的提取及鉴定作者：未知来源：郑州轻工业学院时间：2006-9-23一、实验目的1.加深了解磷脂类物质的结构和性质。
2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。
二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；此外，卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。
这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
三、仪器和试剂仪器小烧杯、试管。
试剂1. 鸡蛋黄2. 红色石蕊试纸3. 95%乙醇4. 10%氢氧化钠溶液5. 钼酸铵试剂将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水中，加入5mL 浓氨水，另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中，两者混合静置一天后再用。
6. 丙酮7. 乙醚8. 3%溴的四氯化碳溶液9. 硫酸氢钾四、操作步骤(一)卵磷脂的提取称取约10g 蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷却后过滤。
如滤液仍然混浊，可重新过滤直至完全透明。
将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中蒸干，所得干物即为卵磷脂。
(二)卵磷脂的溶解性取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入5mL 乙醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，观察实验现象。
(三)卵磷脂的鉴定1.三甲胺的检验取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氢氧化钠溶液，放入水浴中加热15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。
将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。
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实验五：蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定
一、实验目的
掌握从鲜鸡蛋中提取卵磷脂的方法与原理。
卵磷脂鉴定的方法与原理。
加深了解磷脂类物质的结构和性质。
二、实验内容
磷脂是一类含有磷酸的脂类，机体中主要含有两大类磷脂，由甘油构成的磷脂称为甘油
磷脂（phosphoglyceride）；由神经鞘氨醇构成的磷脂，称为鞘磷脂（sphingolipid）。其结构
具有由磷酸相连的取代基团（含氨碱或醇类）构成的亲水头（hydrophilic head）和由脂肪酸
链构成的疏水尾（hydrophobic tail）。在生物膜中磷脂的亲水头位于膜表面，而疏水尾位于
膜内侧。磷脂是重要的两亲物质，它们是生物膜的重要组分、乳化剂和表面活性剂。
磷脂依照氨基醇的不同可分：（1）磷脂酰胆碱（卵磷脂）（PC），分布：植物主要有大
豆等，动物主要有脑、精液、肾上腺、红细胞，蛋卵黄（8-10%）。其主要作用是控制肝脂
代谢，防止脂肪肝的形成；（2）、磷脂酰乙醇胺（脑磷脂）（PE），参与血液凝结；（3）、磷
脂酰丝氨酸（PS）；（4）、 磷脂酰肌醇（PI）；（5）、 磷脂酰甘油（PG）；（6）、二磷脂酰甘
油（心磷脂）。
蛋黄磷脂属动物胚胎磷脂，含有大量的胆固醇和甘油三酯及许多人体不可缺少的营养物
质和微量元素。卵磷脂是生命的基础物质，人类生命自始至终都离不开它的滋养和保护。卵
磷脂存在于每个细胞之中，更多的是集中在脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、
心、肾等重要器官。卵磷脂也被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。蛋黄卵磷脂可
将胆固醇乳化为极细的颗粒，这种微细的乳化胆固醇颗粒可透过血管壁被组织利用，而不会
使血浆中的胆固醇增加。
三、实验原理、方法和手段
原理一：卵磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物
的肝、脑、脾、心、卵等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。卵磷脂和脑磷脂均溶
于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不
溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
原理二：卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂
呈黄褐色。卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。甘油与硫酸氢钾共
热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸
沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。这样通过对分解产
物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
四、实验组织运行要求
2
根据本实验的特点、要求和具体条件，采用“采用集中授课形式，分组试验进行”的组织
运行模式。
五、实验条件
1、实验材料：鲜鸡蛋
2、仪器与器皿：蛋清分离器、恒温水浴锅、蒸发皿（每组一个）、漏斗（每组一个）、
铁架台、磁力搅拌器（每组一个）、天平、25mL量筒（每组一个）、100mL量筒（每组一个）、
干燥试管（每组四支）、玻棒2支、小烧杯大小各2个。
3、试剂：95％乙醇（每组50mL）、乙醚（每组20mL）、丙酮（每组30mL）、ZnCl2、
无水乙醇（每组40mL）、滤纸（2张）、10%氢氧化钠（每组30mL）、3% 溴的四氯化碳溶
液（每组10mL）、红色石蕊试纸（每组二张）、3%溴的四氯化碳溶液（每组10mL）、硫酸
氢钾（每组10mL）、钼酸铵溶液（每组10mL, 钼酸铵试剂将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水
中，加入5mL 浓氨水，另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中，两者混合静置一天后
再用。）。
六、实验步骤
1）、卵磷脂的提取
方法一、蛋黄10g放入洁净的带塞三角瓶中，加入95%乙醇40ml，搅拌15min后，静
置15min；然后加入10ml的乙醚，搅拌15 min后，静置15min；过滤；滤渣进行二次提取，
加入乙醇与乙醚(体积比为3：1)的混合液30ml，搅拌、静置一定时间；第二次过滤，合并
二次滤液，加热浓缩至少量，加入一定量丙酮除杂，卵磷脂即沉淀出来，即得到卵磷脂粗品。
方法二、称取10g 蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，
冷却后过滤。如滤液仍然混浊，可再次过滤至滤液透明。将滤液置于蒸发皿内，于水浴锅中
蒸干（或用加热套蒸干，温度可设140℃左右），所得干物即为卵磷脂。
（为了减少或尽可能不用乙醚，实验采用方法二）
2）、卵磷脂的纯化
取一定量的卵磷脂粗品，用无水乙醇溶解，得到约10% 的乙醇粗提液，加入相当于卵
磷脂质量的10% 的ZnCl2水溶液，室温搅拌0.5h；分离沉淀物，加入适量冰丙酮（4℃）洗
涤，搅拌1h，再用丙酮反复研洗，直到丙酮洗液为近无色止，得到白色腊状的精卵磷脂；
干燥；称重。
3）、卵磷脂的溶解性试验
卵磷脂的溶解性：取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入5mL 乙醚，用玻棒搅动使卵
磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，观察实验现象。
4）、卵磷脂的鉴定
4.1 三甲胺的检验
取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 10%氢氧化钠溶液，放入水浴中
加热15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。将加热过的溶
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液过滤，滤液供下面检验。
4.2 不饱和性检验
取干净试管一支，加入10滴上述滤液，再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振摇
试管，观察有何现象产生。
4.3 磷酸的检验
取干净试管一支，加入10滴上述滤液和5～10滴95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴
钼酸铵试剂，观察现象；最后将试管放入热水浴中加热5～10min，观察有何变化。
4.4 甘油的检验
取干净试管一支，加入少许卵磷脂和0.2g 硫酸氢钾，用试管夹夹住并先在小火上略微
加热，使卵磷脂和硫酸氢钾混熔，然后再集中加热，待有水蒸气放出时，嗅有何气味产生。
七、思考题与作业
1) 卵磷酯的用途？
2）医药工业中制备卵磷酯的方法？
3）本实验有哪些步骤可以改进？
4）文字与照片记录实验过程的重要性？
5）通风橱的重要性？（可以不作答）
八、实验报告
按规范格式写出实验报告（实验顺序、名称、姓名、学号、实验目的、原理、步骤、
实验结果与记录、思考题、注意事项）
记录本实验实验条件、过程和实验现象。
九、注意事项
1）注意安全：本实验中的乙醚、丙酮及乙醇均为易燃药品。氯化锌具腐蚀性。
2）实验过程要细致，培养耐心。