高效液相色谱法测定果汁中的防腐剂和甜味剂的含量
液态食品中三种甜味剂和两种防腐剂的离子色谱测定法
液态食品中三种甜味剂和两种防腐剂的离子色谱测定法
摘要：为实现5种食品添加剂的同时测定，使用IonPac AS14中高疏水性阴离子交换色谱柱，在碳酸盐淋洗液中加入乙腈作为有机改性剂，电导方法检测，建立了山梨酸钾、苯甲酸钠、甜蜜素、安赛蜜和糖精钠的同时分析方法。五种添加剂在 0.2 mg/l到10.0 mg/l线性范围内标准曲线相关系数在99.4 %~99.9 %之间，标准溶液5次进样峰面积RSD在1.15 % ~2.17 %之间，检出限在0.026-0.108 mg/l之间，加标回收率在94%~104%之间。该方法分析速度快，灵敏度高，线性范围宽，结果准确可靠，适用于白酒、可乐中上述甜味剂和防腐剂的测定。
关键词：色谱法；离子交换；甜味剂；防腐剂
随着现代食品工业的迅速发展，各种食品添加剂的应用日益广泛，添加剂种类不断增多，
使食品质量监督的工作量增大，迫切需要灵敏准确的多种添加剂同时测定的方法[1]。
研究的三种甜味剂为甜蜜素、安赛蜜、糖精钠，两种防腐剂为山梨酸钾和苯甲酸钠。有文献报道使用高效液相色谱方法可以对上述几种物质同时进行测定，因甜蜜素的紫外检测信号较弱[2]，虽然可采用柱前衍生的方法以增强紫外信号的强度，但是增加了前处理步骤[3]，也不能再同时测定其它甜味剂。
由于这五种物质在碱性条件下都呈阴离子状态，并具有较高的电导响应[4]，也可以用离子色谱分析方法。目前采用的离子色谱同时分析方法多采用梯度淋洗，以获得较大的分离度[4-6]，仪器成本相对较高。采用在碳酸盐淋洗液中加入有机改性剂的方法，通过等度淋洗实现了五种添加剂的同时测定。
1、材料与方法
1.1仪器与试剂
ICS-1500型离子色谱仪（Dionex公司）
甜蜜素（99.5%），安赛蜜（99.5%），糖精钠（99.0%），山梨酸钾（99.0%），苯甲酸钠（分析纯），氢氧化钠，甲醇，乙腈，碳酸钠（优级纯），碳酸氢钠（优级纯），前处理柱，0.22μm尼龙滤膜，市售白酒、可乐。
高效液相色谱法同时测定榨菜中的1O种食品添加剂
２０ 化学分析计量 ２０１１年，第２Ｏ卷，第５期
高效液相色谱法同时测定榨菜中的１ Ｏ种食品添加剂木
黄海龙庄莉崔群
（桐乡市产品质量监督检验所，桐乡３１４５００） 孙伟强
（桐乡市计量检定测试所，桐乡３１４５００）
摘要建立了高效液相色谱法直接测定榨菜中的防腐剂、甜味剂、合成着色剂的方法。采用Ｃ。 柱以甲醇一乙
酸铵（０．０２ ｍｏｌ／Ｌ）为流动相，紫外检测波长为２３０、２５４ ｎｍ，可在２５ ｍｉｎ内将苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、对羟基苯甲 酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、糖精钠、乙酰磺胺酸钾（安赛蜜）、天门冬酰苯丙胺酸甲酯（阿斯巴甜）、柠檬黄、日落黄完
全分离，测定结果的相对标准偏差为１．１％～３．３％（ｎ＝３），回收率为９６．６％～９９．４％。
关键词 高效液相色谱榨菜食品添加剂
高效液相色谱（ＨＰＬＣ）是２０世纪６０年代末７０
年代初发展起来的一种新型分析分离技术，它是在
经典液相色谱法的基础上，引人了气相色谱的理论，
采用高压输送流动相和高灵敏度检测器，发展而成
的现代液相色谱分析方法，具有分离效率高、选择
性好、分析速度快、检测灵敏度高、操作自动化高和
应用范围广等特点 。
近年来，由于消费者对食品的安全性日益关注，
食品中的各种添加剂越来越受到人们的重视。食品
添加剂是指为了改善食品品质和色、香、味，以及为
防腐和加工工艺的需要而加入食品中的化学合成或
天然物质。在目前所使用的添加剂中，绝大多数为
化学合成添加剂，它们是通过氧化、还原、缩合等一
系列化学合成反应所得，有的具有一定毒性，有的在
食品中起变态反应或转化成其它有毒物质。通过动
物实验证明，有些物质有致癌、致畸形等作用，如果
不加以限制使用，将对人体健康产生危害。
高效液相色谱具备分离效果好、灵敏度高和重
现性好等优点，因此是目前食品添加剂定性、定量分
析的首选方法 Ｊ。笔者采用甲醇一乙酸铵（０．０２
ｔｏｏｌ／Ｌ）为流动相经梯度淋洗，能在２５ ｍｉｎ内将榨菜
高效液相色谱测定乳制品饮料中的5种食品添加剂
第５期（总第２８０期） ２０１２年５月 农产品加工・学刊 Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｅｒｉｏｄｉｃａｌ ｏｆ Ｆａｒｍ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ｎｏ．５ Ｍａｖ
文章编号：１６７１—９６４６（２０１２）０５－０１ １７—０３
高效液相色谱测定乳制品饮料中的５种食品添加剂
郝家勇，唐宗贵，王远，鲁立良
（新疆农垦科学院分析测试中心，新疆石河子８３２０００）
摘要：建立了高效液相色谱法同时测定乳制品饮料中的山梨酸、苯甲酸、糖精钠、甲基香兰素和乙基香兰素的方法， 通过加入适量的沉淀剂除去样品中的蛋白质，采用Ｃ 色谱柱分离，以甲醇＋乙酸铵溶液（０．０２ ｍｏｌ／Ｌ） （２０＋８０）为
流动相，用紫外检测器在２３０ ｎｍ波长处检测５种添加剂。５种添加剂的回收率为７９．４％～１０１．３％，相对标准偏差为 ０．２％一４．２％，糖精钠、苯甲酸、山梨酸、甲基香兰素的检出限为０．０４ Ｉ￣ｇ／ｇ，乙基香兰素的检出限为０．０８ Ｉｘｇ／ｇ，该方
法适用于乳制品饮料中这５种添加剂的同时测定。
关键词：高效液相色谱；乳制品饮料；添加剂 中图分类号：ＴＳ２５７．４ 文献标志码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊｉｓｓｎ．１６７１—９６４６（Ｘ）．２０１２．０５．０３７
ＨＰＬＣ Ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ Ｆｉｖｅ Ｋｉｎｄｓ ０ｆ Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ ｉｎ Ｍｉｌｋ ａｎｄ Ｄａｉｒｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ
ＨＡＯ Ｊｉａ－ｙｏｎｇ， ＩＩＡＮＧ Ｚｏｎｇ－ｇｕｉ，ＷＡＮＧ Ｙｕａｎ，ＬＵ ＩＡ－ｌｌａｎｇ （Ｔｅｓｔｉｎｇ ａｎｄ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｈｉｈｅｚｉ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ ８３２０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｒｂｉｃ ａｃｉｄ．ｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ，ｓａｃｃｈａｒｉｎ，ｍｅｔｈｙｌ ｖａｎｉｌｌｉｎ，ｅｔｈｙｌ ｖａｎｉＨｉｎ ｉｎ ｍｉｌｋ ａｎｄ ｄａｉｒｙ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｕｓｉｎｇ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ｉｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ．，ｒｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｍｉｌｋ ａｎｄ ｄａｉｒｙ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ａｒｅ ｅｌｉｍｉｎａｔｅｄ ｂｙ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｎｔ．Ｔｈｅ ｆｉｖｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ａｄｄｉｔｉｖｅｓ ａｒｅ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｏｎ Ｃｌ８ ｃｏｌｕｍｉｌ ｗｉｔｈ‘ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ＋ａｍｍｏｎｉｕｍ ａｃｅｔａｔｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（０．０２ ｍｏｌ几）（２０＋８０）．Ｗｉｔｈ ＵＶ ｄｅｔｅｃｔｏｒ，ＳＯｒｂｉｃ ａｃｉｄ，ｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ，ｓａｃｃｈａｒｉｎ，
高效液相色谱法同时测定食醋和酱油中的6种防腐剂和甜味剂
第４３卷第９期 ２０１８年９月 中国调味品 Ｃｈｉｎａ Ｃｏｎｄｉｍｅｎｔ 分析检测
高效液相色谱法同时测定食醋和酱油中
的６种防腐剂和甜味剂
张小芳，付大友
（四ＪＩｌ理工学院，四ＪｉＩ自贡６４３０００）
摘要：建立了高效液相色谱法同时测定酱油和食醋中６种常见的防腐剂和甜味剂的方法。样品采用
４Ｏ 的甲醇水溶液提取沉淀，过滤后进入高效液相色谱仪分析。色谱柱为Ｗｅｌｃｈ Ｘｔｉｍａｔｅ Ｃ ８色谱柱 （２５０ ｍｍＸ４．６ ｍｍ，粒径为５ ｍ），以甲醇一０．０２ ｍｏｌ／Ｌ乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱，检测波长为 ２３０ ｎｍ，检测的线性范围为ｉ０－－－１００￣ｇ／ｍＬ，相关系数≥０．９９９４，加标回收率为９７．２４ ＂－－１０３．５０ ，相 对标准偏差（ＲＳＤ）为１．４５ ～２．８９ （ｎ＝６），该方法简单、快速、灵敏度高，适用于酱油和食醋中常见 添加剂的检测。 关键词：高效液相色谱；防腐剂；甜味剂；酱油；食醋
中图分类号：ＴＳ２０２．３ 文献标志码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－９９７３．２０１８．０９．０３２ 文章编号：１０００－９９７３（２０１８）０９－０１４７－０４
Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉｘ ＰｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅＳ ａｎｄ Ｓｗｅｅｔｅｎｅｒｓ
ｉｎ Ｖｉｎｅｇａｒ ａｎｄ Ｓｏｙ Ｓａｕｃｅ ｂｙ ＨＰＬＣ
ＺＨＡＮＧ Ｘｉａｏ—ｆａｎｇ．ＦＵ Ｄａ－ｙｏｕ
（Ｓｉｃｈｕａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｚｉｇｏｎｇ ６４３０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍＡｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｉｘ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ ａｎｄ ｓｗｅｅｔｅｎｅｒｓ
ｉｎ ｖｉｎｅｇａｒ ａｎｄ ｓｏｙ ｓａｕｃｅ ｂｙ ＨＰＬＣ．Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ａｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ａｎｄ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｄ ｂｙ ４０％ｍｅｔｈａｎｏｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ，
高效液相色谱法快速测定果味饮料中8种添加剂
２０１０年第２２卷第７期 ２０１０，ＶｏＩ．２２ Ｎｏ．７ 上海预防医学杂志 Ｓｈａｎｇｈａｉ ＪｏｕｍａＪ ｏｆ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
文章编号：１００４—９２３１（２０１０）０７—０３８３—０２
高效液相色谱法快速测定果味饮料中８种添加剂
陈祝军（江苏省张家港市疾病预防控制中心，江苏张家港２１５６００）
食品添加剂是用于改善食品品质、延长食品保存期、
便于食品加工和增加食品营养成分的一类化学合成或天
然物质。目前，我国有２０多类近１ ０００种食品添加剂。
在我国食品添加剂使用卫生标准“ 中，对其使用范围和
最大使用限量均有规定，但对其添加剂总含量并没有提
出限量标准。在饮料生产加工中，苯甲酸、山梨酸、糖精
钠作为常用的防腐剂和甜味剂，常常和柠檬黄、苋菜红、
胭脂红、１３落黄、亮蓝等５种常用色素一起被混合使用。
国标方法 中苯甲酸、山梨酸、糖精钠以及５种合成色素
由于采用不同的前处理和分析条件，需要分开检测。因
此建立一种灵敏高效、简便快速的方法同时测定这８种
添加剂在实际工作中有很强的实用性。
笔者采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ），利用ＰＡＤ检测
器多波长功能，对不同物质选取了相应最大吸收波长，提
高了检测的灵敏度。同时选取适宜的ｐＨ值，最佳的梯度
洗脱条件，操作简便、快速准确，是同时测定饮料中该８
种添加剂的一种较为理想的分析方法。
１材料与方法
１．１仪器与试剂 高效液相色谱仪：Ｗａｔｅｒｓ ２６９５高效液相色谱仪，光电
二极管阵列检测器，Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ ３２工作站；超声波脱气
机；甲醇（ＨＰＬＣ级）；水（超纯水）；乙酸铵（ＡＲ）。８种添
加剂的液体或固体标准物质全部来自国家标准物质中
心，且均在有效期内使用。
１．２高效液相色谱务件
色谱柱：ＸＴｅｒｒａ￣Ｃ１８，３．９ ｎｍ×１５０ ｍｍ，５ ｔｘｍ不锈
钢柱；流动相Ａ：甲醇，流动相Ｂ：０．００２ ｍｏｌ／Ｌ乙酸铵溶
高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠
Jan. 2019 CHINA FOOD SAFETY 123分析与检测
食品添加剂被誉为现代食品工业的灵魂，具有调节酸度、抗氧化、漂白、着色、防腐等多项功能，其中苯甲酸和山梨酸属于防腐剂，能够抑制霉菌等微生物的繁殖，防止食物腐败变质，延长保质期；糖精钠属于甜味剂，能够增加食品甜度，使食品口感更佳，而且不含热量，这些防腐剂和甜味剂被广泛应用于各种食品的加工中，但如果长期大量食用，会对人体健康造成严重危害，其中苯甲酸过量会对神经系统和肝肾功能造成损害，山梨酸过量会导致过敏及肠胃消化功能异常，糖精钠过量可能引发癌变。因此，苯甲酸、山梨酸和糖精钠是食品安全检测中较为常规的检测项目。2014年，国家卫生部颁布了《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》，对食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠等添加剂的最大使用量作了明确规定。本研究在参考先人相关研究文献的基础上，结合笔者工作实际，采用高效液相色谱法同时检测食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠 的含量。1 材料与方法1.1 实验材料实验用苯甲酸、山梨酸、糖精钠均来自中国计量科学研究院，浓度为1.0 mg/mL。实验仪器有岛津LC-2030C 3D高效液相色谱仪、梅特勒电子天平、自动进样器、紫外检测器、KQ2200DE型数控超声波清洗器、酸度计、MILLLIQ型超纯水仪等[1]。1.2 实验方法1.2.1 配制混合标准溶液精密称取苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准物质各4.0 mL于20 mL容量瓶中，用水配制成200 μg/mL的标准混合储备液，再用水稀释成100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、12.5 μg/mL、2.5 μg/mL、0.5 μg/mL、0.2 μg/mL的系列标准工作液，由低浓度到高浓度依次进样。1.2.2 样品处理称取2.0 g果酱样品于50 mL比色管中，加30 mL水和0.5 mol/L的氢氧化钠溶液1.0 mL，摇匀后置于超声清洗器中提取15～20 min，直至被测组分完全溶解。然后再添加0.42 mol/L的硫酸锌溶液和0.5 mol/L的氢氧化铵溶液各1.5 mL，加水定容到50 mL后摇匀，静置，然后用双层滤纸过滤上层清液，将最初过滤的5 mL液体丢弃，并采用0.45 μm的滤膜对滤液再次过滤，进样5 μL开展色谱分析。如果液体样品不包含蛋白质，则不需要蛋白质沉淀过程，直接取样后用水定容，超声提取后过滤进样即可；如果是固体样品，则需要将固体样品研磨粉碎，然后进行样品处理[2]。1.2.3 检测精确称取处理液和混合标准溶液各20 μL放置于高效液相色谱仪中进行分离，以标准溶液的固定峰值为依据，根据峰面积计算样液中的被测物质含量，计算公式为：，其中X表示样品中待测组分的含量，单位为g/kg；C表示由标准曲线得出的样液中待测物质的量浓度，单位为mg/mL，V表示样品定容的体积，单位mL；m表示样品的质量，单位为g。2 结果与分析2.1 检测波长的选择将上述标准样品溶液于200～400 nm检测波长处进行扫描，苯甲酸的最大吸收波长为222 nm，山梨酸的最大吸收波长为252 nm，糖精钠的最大吸收波长为201nm，与国家标准设定的3种物质的检测波长230 nm较为一致，因此选择230 nm作为同时检测3种物质的检测波长。2.2 流动相比例的选择甲醇与乙酸铵的比例直接影响出峰时间。针对本实验中所用仪器型号和色谱柱类型，在流动相流速为1 mL/min的情况下，当甲醇与0.02 mol/L乙酸铵溶液的体积比为10：90时，样品各组分分离度和理论搭板数均符合要求，出峰效果最佳，顺序依次为苯甲酸、山梨酸和糖精钠，因此选择10：90作为甲醇与0.02mol/L乙酸铵溶液的体积比。2.3 柱温的选择国家标准中对苯甲酸、山梨酸和糖精钠的检测所采用的柱温为30℃，本实验中实验室温度同样设定为30 ℃恒温，对混合标准溶液进行分离和含量测定。2.4 标准曲线及检出限将上述混合标准溶液进行测定，根据待测物质峰面积和浓度关系绘图，得到标准曲线回归方程。苯甲酸、山梨酸和糖精钠在0.2～200 mg/L范围内线性关系良好，苯甲酸在0.25 mg/L时，线性方式y=31 991.7x，相关系数r=0.999 7，检出限为0.006 g/kg；山梨酸在0.20 mg/L时，线性方式y=60 861.2x，相关系数r=0.999 8，检出限为0.005 g/kg；糖精钠在0.50 mg/L时，线性方式y=21521.4x，相关系数r=0.999 7，检出限为0.012 5 g/kg。 （下转132页）高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、 山梨酸和糖精钠□ 李莉楠 河北省张家口市疾病预防控制中心摘 要：随着现代食品加工业的快速发展，各种甜味剂、防腐剂等食品添加剂被广泛应用到食品加工过程中，但过量的食品添加剂会对人体健康造成严重危害。因此，为了确保食品安全，检测食品中各种添加剂的含量非常重要。本文选用高效液相色谱法同时检测食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量，实验结果表明：3种添加剂能够完全分离，回归方程线性关系良好，加标回收率89.4%～102.7%，相对标准偏差0.02%～0.10%；实验室环境、仪器设备与该检测方法相适应，值得在实际工作中广泛推广。关键词：高效液相色谱；食品；苯甲酸；山梨酸；糖精钠
高效液相色谱法测定食品中的甜蜜素
第４０卷第７期
２０１２年４月 广州化工
Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｖｏ１．４０ Ｎｏ．７
Ａｐｒｉｌ．２０１２
高效液相色谱法测定食品中的甜蜜素
段淑娥，张常虎，屈颖娟，王静
（西安文理学院化学与化工系，陕西 西安７１００６５）
摘 要：建立了快速测定饮料中甜蜜素的高效液相色谱方法。甜蜜素（环己基氨基磺酸钠）在强酸性环境中与次氯酸钠反应，
生成Ｎ，Ｎ一二氯环己胺，后者在紫外区具有较大吸收，用正己烷进行萃取后经过高效液相色谱分离，３１４ ｎｍ检测定量。结果表明：
Ｓｈｉｍ—ｐａｃｋ ＶＰ—ＯＤＳ（４．６ ｍｍ Ｘ １５０ ｍｍ）；流动相为乙腈：超纯水９７：３；流速１．０ ｍＩ／ｍｉｎ；柱温３０℃；检测波长３１４ ｎｍ；进样量
２０ Ｌ，食品中的安赛蜜、苯甲酸钠、山梨酸等不影响测定。甜蜜素含量在２—６００ ｍＬ之间时，呈现良好的线性关系，相关系数为
０．９９７９，加标回收率为９７．２４％～１０４．０９％。
关键词：甜蜜素（环己基氨基磺酸钠）；高效液相色谱；食品
中图分类号：ＴＳ２６４．９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—９６７７（２０１２）０７—０１３６—０３
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｏｄｉｎｕｍ Ｃｙｃｌａｍａｔｅ ｉｎ Ｆｏｏｄｓ ｂｙ ＨＰＬＣ
ＤＵＡＮ Ｓｈｕ—ｅ，ＺＨＡＮＧ Ｃｈａｎｇ—ｈｕ，ＱＵ ｎｇ—ｊｕａｎ，ＷＡＮＧ Ｊｉｎｇ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｘｉ’ａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｏｆ Ａｒｔｓ ａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｈａａｎｘｉ Ｘｉ’ａｎ ７１００６５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｒａｐｉｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｃｙｃｌａｍａｔｅ ｉｎ ｆｏｏｄｓ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
检测乳性饮料中防腐剂、甜味剂—高效液相色谱法
第２２卷第２期 ・４４・２００２年４月 农韭与技术 ｒｉｃｕＩｔｕｒｅ＆Ｔｅ￣ｈｎｏＩｏｉｌｙ Ｖｏｌ ２２ Ｈｏ．２ ＾口ｒ ２００２
检测乳性饮料中防腐剂、甜味剂
——高效液相色谱法
中圈分类号：ＴＳ２０２．３ 程春芝０ 杨旭 尹少宇
（黑龙江省农垦科学院测试化验中心）
文献标识码；Ｂ
乳性饮料是指含一定量乳的饮料，如巧克力奶、果味奶、乳酸饮料等。因其营养丰
富，易于微生物繁殖，导致酸败变质，不能饮用。为了保证质量，生产厂家在饮料中添
加防腐剂：苯甲酸、山梨酸。而绿色食品不提倡使用防腐剂，山梨酸安全性较高，允许
低于０．２克／千克添加，苯甲酸不允许添加。糖精钠是国家禁止使用的甜味剂。防腐剂、
甜味剂已成为申报绿色食品必检项目。
笔者对乳性饮料的检溯方法介绍如下：
１ 实验部分
１，１仪器与试剂液相色谱仪为Ｗａｔｅｒｓ公司产品。包括５１０泵２台，４８１型紫外检测器，
ＣＩ８径向加压柱，ｕ 进样阀，７４０型积分仪。甲醇为色谱纯、乙酸铵、乙酸铅、草酸钾、
磷酸氢二钠均为分析纯，水为２次蒸馏水．标样苯甲酸、山梨酸、糖精钠均为国家标准
中心购进。
１．２样品预处理 称取样品５０．００克（准确至０．０１克），放入１００毫升容量瓶中．加４
毫升乙酸铅（２０％）和４毫升草酸钾一磷酸氢二钠（质量古量分别为３％和７％）溶液。
每次加入试剂时都要徐徐加入，并摇动容量瓶，用水稀释至刻度，静止ｌ０分钟。用干
燥滤纸过滤。弃去最初２５毫升滤液，取滤液经０．４５微米膜过滤，之后，直接上机分析。
１．３色谱条件
流动相 甲醇：乙酸铵（０．０２摩尔，升）＝２：９８
流速 １．０毫升，分钟
分析柱 ＣＩ８柱或等效柱，分析柱柱前面接Ｇｒｕａｒｄ－－ｐａｋ ＣＩＢ预柱
检测波长 ２３０纳米 △ＵＦＳ＝０．１
０程眷芝 女．３５岁．工程师．
期从事食品开发与绿色食品检测工作．１５４００７ 维普资讯 第２期 程舂芝等检测乳性饮料中舫腐剂、甜昧荆——高效液相色谱法 ・４５・
分析甜味剂和防腐剂液相色谱多组分同时检测
龙源期刊网
分析甜味剂和防腐剂液相色谱多组分同时检测
作者：赵艳萍 陈平
来源：《中外食品工业》2013年第11期
摘要：随着我国食品工业的快速发展，食品中防腐剂与甜味剂混用的问题愈加突出，甜味剂、防腐剂超标的问题也时有发生，严重危害着人群的身体健康。基于此，采用新方法，加强对食品中防腐剂、甜味剂等的检测，加强食品的质量监督，对于确保食品质量，促进我国食品工业持续发展意义重大。本文以反相高效液相色谱法为主要手段，针对食品中的苯甲酸与阿斯巴甜等防腐剂与甜味剂，运用梯度洗脱的方式对多种食品添加剂进行同时测定，分析其回收率与结果检出限，并阐述了防腐剂的主要危害。
关键词：梯度洗脱 液相色谱 防腐剂
中图分类号：TS264.9 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2013）22-0008-02
1 实验材料以及方法
1.1 实验材料
（1）实验仪器；在对食品中防腐剂、甜味剂等食品添加剂多组分同时检测的实验过程中，主要运用的实验仪器包括：LG10-2.4A高速离心机（利用高速运转产生的离心力加速分离不同物料）、LC-20A高效液相色谱仪（将多组分的样品溶液经过重复多次的吸附-解吸分配，分离成单组份）。
（2）实验试剂；在该实验中，主要运用的化学试剂主要包括：色谱分析标准试剂：色谱纯，如甲醇以及乙腈等、纯度与主成分含量高的乙醇（优级纯）、干扰杂质低，纯度较高的乙醚（分析纯）、山梨酸与苯甲酸标准溶液（1.0mg/mL）以及纯度均超过98%的阿斯巴甜、糖精钠、安赛蜜等。
1.2 实验方法
（1）样品前处理；首先，调味品，如醋、酱油等样品前处理时，在离心管（50mL）中放入样品（10g），之后再将1mL的盐酸溶液加入到装有样品的离心管之中对样品实施酸化与混合处理，确保离心管内的盐酸溶液与样品混匀之后，再运用乙醚（10mL）对混合溶液进行提取，提取次数为2次，在每一次的提取过程中，都应轻轻振摇离心管，离心参数为：4000r/min，离心时间为1分钟。提取完成后对乙醚层实施合并处理，并利用乙醚在容量瓶（25mL）中定容，并将其混合均匀。之后在试管（5mL）中滴入乙醚提取液，滴入的提取液龙源期刊网
高效液相色谱法检测葡萄酒中人工色素、防腐剂和甜味剂方法的研究
试验与检测
杨硕 张曼丽 辽源市产品质量检验所吉林辽源１ ３６２００ 摘要：目前，在葡萄酒添加剂的检测中，多从饮料或配制酒的检测方法中“取经”。然而葡萄酒化学成分较为复杂，采用高效液相色谱法检测方法 具有一定的局限性。本文针对高效液相色谱法检测方法在葡萄酒中人工色素、防腐剂和甜味剂检测中不足，提出了优化方法。 关键词：高效液相色谱法检测葡萄酒人工色素防腐剂甜味剂
上接第２４６页 必要。 ２、 工色素 ２．１ 中人 色素 方法优化 通过比较样品不同前处理方法分离效果 和优选高效液相色谱条件，从而使波长高效 液相色谱法检测人工色素优化方法。采用聚 酰胺吸附的方法对葡萄酒样品进行前处理， 其分离效果表现最佳［４］。在此过程中，要对色 谱条件进行控制， Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸＳＢ—Ｃ１８（４．６×２５０ｍｍ ５ ｕ ｍ）反相色 谱柱，用０．０２５ｍｏＵＬ的甲醇作为流动相Ａ 液，０．０２５ ｍｏＶＬ的醋酸铵水溶液作为流动相 Ｂ液，流动相Ａ液和流动相Ｂ液的流速控制 在每分钟１．５ ｍＬ，流动相Ａ液在２分钟以内， 其洗脱梯度要从２０％上升到６５％，在２分钟 至２．２分钟之间其洗脱滴度要从６５％上升到 ９３％，在２．２分钟至５分钟之间，其洗脱梯度 控制在９３％。变波长检测葡萄酒样品人工色 素中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄的检 测波长在２．５分钟以内为４２０ ｒｉｍ，检测波长 在２．５分钟至４分钟之间为２４０ ａｍ，在４分 钟至５分钟之间，其波长为４９０ ａｍ，在４分 钟至５分钟之间，其波长为４９０ ａｍ，检测时 间控制在５分钟左右，柱温度控制在３５℃， 进样量为２５ ｕ Ｌ，葡萄酒的样品通过精密度 及加标试验，实验表明，葡萄酒中的柠檬黄、 日落黄、胭脂红和苋菜红相对标准差为Ｏ．７２％ 至１．５０％之间，回收率在８８．８０％至ｌＯ６．４５％ 之间。 ２．２确定葡萄酒中防腐剂、甜味剂高效液 相色谱法检测方法 确定葡萄酒中防腐剂、甜味剂高效液相 色谱法检测方法主要是在参照先行国家标准 配制酒中苯甲酸、山梨酸和糖精钠高效液相 色谱法基础上，通过对葡萄酒样品不同前处 理方法的分离效果比较，并优化高校液相色 谱条件，从而实现对确定葡萄酒中防腐剂、 甜味剂高效液相色谱法检测方法的优化ｆｓｌ。采 用加二次萃取对葡萄酒样品进行前处理， Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸＳＢ—Ｃ１８（４．６Ｘ２５０ｍｍ ５ ｌａⅡＩ１ 表３茶叶国家标准物质ｕｇ／ｋｇ 反相色谱柱，用０．０２５ｍｏｌ／Ｌ的甲醇作为流动 相Ａ液，Ｏ．０２５ ｍｏｌ／Ｌ的醋酸铵水溶液作为流 动相Ｂ液，流动相Ａ液和流动相Ｂ液按照 比例为３：７等度洗脱，流速控制在每分钟１．５ ｍＬ，检测波长控制在２３５ ｎｍ，柱温度控制在 ３５℃，进样量为１５ １．ｔ Ｌ。葡萄酒的样品通过精 密度及加标试验，实验表明，葡萄酒中的苯 甲酸、山梨酸和糖精钠相对标准差为０．８５％至 １．３６％之间，回收率在９１．５０％至１０２．４８％之 间。此外，通过改变葡萄酒的ＰＨ和添加二氧 化硫的方式，能使含汁量较低通过勾兑生产 的葡萄酒快速鉴定出来，并可通过使用福林一 肖卡和４５０ ｍ Ｌ没食子酸标准溶液显色，能 将添加色蠢的伪劣葡萄酒快速鉴定出来。 ３、结语 目前，我国葡萄酒市场上人工色素、防 腐剂和甜昧剂超标现象较为严重，通过对波 长高效液相色谱法检测人工色素方法优化以 及确定葡萄酒中防腐剂、甜味剂高效液相色 谱法检测方法的优化，能快速检测出葡萄酒 中人工色素、防腐剂和甜味剂，为葡萄酒安 全提供了重要保障。 参考文献： ［１］张予林，马静远．王华．变波长高效液相色 谱法同时检测葡萄酒中４种合成色素的研究 ［Ｊ］．西北农林科技大学学报（自然科学版）． ２０１ ｌ（０１）：１ １９—１ ２０． ［２］李颖．高效液相色谱法测定调味品和饮料 中常见１ ７种食品添加剂［Ｊ］．中国卫生检验杂 志．２０１０（１ １）：３３１－３３２． ［３］王浩．固相萃取一ＨＰＬＣ法同时测定葡萄酒中 ８种人工合成色素［Ｊ］．中国食品添加剂． ２０１０（０４）：１３３－ｌ３５． ［４］何风云．余辉，殷婷婷，朱子丰．快速程序升 温气相色谱法同时测定食醋中六种常见防腐 剂［Ｊ］．中国调味品．２０１Ｏ（Ｏ６）：ｌ３６－１３７． ［５］刘艳琴，王浩，杨红梅．郭启雷．石海良。阎龙 宝．固相萃取一ＨＰＬＣ法同时测定糕点中８种人 工合成色素［Ｊ］．食品研究与开发． ２Ｏ１０（０２）：１ ２５－１ ２６．