狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒的效果评价
国际检验医学杂志２０１６年１２月第３７卷第２３期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ．２０１６，Ｖｏ１．３７，Ｎｏ．２３
・临床研究・
狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒的效果评价 ・ ３３３ｌ ・
于鹏程 ，闰江泓 ，吴未辰 ，由淑贞 ，陶晓燕 ，朱武洋 ，纪 军 △
（１．中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，北京１０２２０６；
２．北京博雅晟康医学科技有限公司 １００８７２）
摘 要：目的 应用快速荧光灶抑制试验（ＲＦＦＩＴ）对狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒的检测效果进行评价。方法 用ＲＦ—
ＦＩＴ和狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒分别对ｌ３５份人血清和１６４份动物血清进行狂犬病病毒中和抗体（ＲＶＮＡ）效价检测，应
用ｓＰＳＳ２２．０分析两种检测方法所得结果的相关性和一致性。结果 两种方法所得结果的阳性检出符合率为９９．３３ （２９７／
２９９）；两种方法对动物血清和人血清的检测结果之间有较好的直线相关关系，相关系数分别为０．８９７和０．９４１；同一份标本的重
复性检验显示，试剂盒检测方法具有较好的稳定性。结论狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒可以用于人和动物血清狂犬病病毒
中和抗体的检测。 关键词：狂犬病病毒； 中和抗体； 快速荧光灶抑制试验
Ｄ０Ｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３０．２０１６．２３．０３５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３—４１３０（２０１６）２３—３３３１－０２
狂犬病是由狂犬病病毒引起的一种人兽共患传染病，病死
率几乎１００ 。中国是狂犬病的高发区，目前每年仍有近千人
死于狂犬病。疫苗免疫接种是预防该病发生的唯一途径，按世
界卫生组织（ＷＨＯ）及国际兽疫局（ＯＩＥ）的要求，人或动物接
种狂犬病疫苗后，需测定其血清内的抗狂犬病病毒中和抗体效
价，不低于０．５ ＩＵ／ｍＬ时，方可认为达到有效保护，否则应予
加强免疫，直至达到保护水平＿１ ］。快速荧光灶抑制试验（ＲＦ—
ＦＩＴ）是ＷＨＯ推荐的检测狂犬病病毒中和抗体的标准方法，
也是２０１５年版《中华人民共和国药典》第四部规定的检测人免
疫球蛋白效价的标准方法。北京博雅晟康医学科技有限公司
研制的狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒以ＲＦＦＩＴ为基础，以
自主制备的ＦＩＴＣ标记的抗狂犬病病毒核蛋白荧光抗体为亮
点，可应用于人和动物血清狂犬病病毒中和抗体效价的检测。
商品化试剂盒可解决ＲＦＦＩＴ操作中荧光抗体、ＣＶＳ毒株及所
用ＢＳＲ细胞株的标准化问题，有利于ＲＦＦＩＴ的推广使用，但
其检测效能需要进一步评价。鉴于此，本研究分别以人和动物
临床血清标本为检测对象，运用本科室所建立的标准ＲＦＦＩＴ
对该狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒的检测效果进行评价。
１资料与方法
１．１材料来源动物血清为鼠血清，共１６４份，为狂犬病疫苗
免疫前或免疫后采集的试验标本，由本实验室保存并提供。人
血清１３５份，为狂犬病疫苗免疫前或免疫后采集的标本，由本
实验室保存并提供。
１．２仪器与试剂 ＲＦＦＩＴ所用试剂：ＤＭＥＭ高糖培养液、胰
酶、双抗、胎牛血清均购自Ｇｉｂｉｃｏ公司；抗狂犬病病毒核蛋白
荧光抗体，购自美国ＦＤＩ Ｆｕｊｉｒｅｂｉｏ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ公司；倒置显微
镜为日本奥林巴斯ＣＸＸ４１型；荧光显微镜为日本奥林巴斯
ＩＸ５１型。狂犬病毒ＣＶＳ一１１标准攻击毒株，由本实验室（中国
疾病预防控制中心病毒病预防控制所狂犬病室）保存；ＢＳＲ细
胞，为仓鼠肾细胞ＢＨＫ一２１的克隆，由本实验室保存。ＷＨＯ 标准品效价为３０ ＩＵ／ｍＬ，购自英国国立生物制品和控制标准
品研究所。狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒由北京博雅晟康
医学科技有限公司提供。
１．３方法 ＲＦＦＩＴ方法操作程序：将待测血清于５６℃灭活
３０ ｍｉｎ，用含１Ｏ 胎牛血清的ＤＭＥＭ培养液于９６孔板做３倍
系列稀释；标准血清、强阳性血清、弱阳性血清和阴性血清用同
样方法进行系列稀释；病毒对照孔做连续的倍比稀释；除病毒
对照孔外，其他各孔均加入５Ｏ Ｌ最适攻击量病毒，于３７℃
５ ＣＯ 孵箱孵育１ ｈ进行中和后，每￣Ｌ／ＪＵ人５Ｏ Ｌ浓度为１ Ｘ
１０。ｃｅｌｌｓ／ｍＬ的细胞悬液；于３７℃５Ｖｏｏ ＣＯ２孵箱孵育２４ ｈ。
将９６孔板从孵箱内取出，于Ｐ２实验室安全柜内，丢弃培养上
清液，磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）液洗１遍；用８Ｏ 冷丙酮４℃固定
３０ ｍｉｎ；将丙酮弃去，加入５Ｏ Ｌ抗狂犬病毒核蛋白荧光抗体
染色液，３７℃孵育３０ ｍｉｎ后用ＰＢＳ液洗３遍；加入６Ｏ 甘油，
在荧光显微镜下进行荧光灶读数。以应用软件Ｍｉｃｒｏｓｏ｛ｔ Ｅｘ—
ｃｅｌ为基础，根据操作程序中确定的稀释梯度，结合Ｒｅｅｄ＆
Ｍｕｅｎｃｈ法公式，以血清标准品滴度为参照系数，被测标本
５Ｏ％感染孔前后稀释倍数为变量的中和抗体滴度计算公式计
算中和抗体滴度。应用狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒进行
平行检测时严格遵守试剂盒的操作规程。
１．４统计学处理 采用统一的Ｅｘｃｅｌ记录标本的检测信息，
采用ＳＰＳＳ２２．０软件进行检测结果的统计学分析，包括两种检
测方法所得检测结果的阳性检出符合率的比较、相关性分析以
及重复性分析。以Ｐ＜Ｏ．０５为差异有统计学意义。
２ 结 果
２．１ 阳性检出符合率分析 按照达到或超过０．５ ＩＵ／ｍＬ者
为阳性结果，低于０．５ ＩＵ／ｍＬ者为阴性结果进行统计和计算。
全部２９９份标本中，两种检测方法的阳性检出符合率为
＊ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（３１５００１５２）；国家科技支撑计划资助项目（２０１４ＢＡＩ１３ＢＯ４）；艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防 治科技重大专项资助项目（２０１４ＺＸ１０００４—００２）。
通讯作者，Ｅ—ｍａｉｌ：ｂｏｙａｓｋ＠ｂｉ—ｂｏｙａｓｋ．ｃｏｍ。
国际检验医学杂志２０１６年１２月第３７卷第２３期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ．２０１６，Ｖ０１．３７，Ｎｏ．２３
９９．３３ （２９７／２９９）。
２．２检测结果相关性分析 对１６４份动物血清和１３５份人血
清分别采用两种检测方法进行检测，并对检测结果进行回归分
析。针对动物血清标本，两种方法的检测结果差异有统计学意
义（Ｒ一０．８９７，Ｐ＜０．０１），但二者直线相关关系良好（Ｒ 一
０．８０４）（图Ｉ）。针对人血清标本，两种方法的检测结果具有更
好的直线相关关系（Ｒ。＝０．８８６）（图２）。
ＲＦＦｒｒ
图１ 动物血清检测结果的相关性分析
耋 邪ＦＩＴ 图２ 人血清检测结果相关性分析
ｌ
图３ －￣１－－ 瘫惰毒中和 抗体梭测试剂盒
３ Ｓ ７ ９ ｌｌ 检测次数
两种方法检测结果的重复性比较
２．３检测试剂盒稳定性分析对同一血清标本分别采用ＲＦ—
ＦＩＴ方法和狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒两种方法进行检
测１２次。ＲＦＦＩＴ的检测值在１．３２～２．０６ ＩＵ／ｍＬ，最大差值
０．７４ ＩＵ／ｍＬ，ＧＭＴ＝１．５８ ＩＵ／ｍＬ，ＳＤ一０．２０；狂犬病中和抗 体检测试剂盒的检测值在１．３２～２．０９ ＩＵ／ｍＬ，最大差值０．７７
ＩＵ／ｍＬ，ＧＭＴ一１．５７ ＩＵ／ｍＬ，ＳＤ一０．２５（图３）。该结果显示，
中和抗体检测试剂盒具有良好的稳定性。
３讨 论
目前，ＷＨＯ和０ＩＥ推荐的应用于狂犬病病毒中和抗体
检测的方法主要有小鼠中和试验（ＭＮＴ）、ＲＦＦＩＴ和狂犬病病
毒荧光抗体中和试验（ＦＡＶＮ）；２０１６版《狂犬病预防控制技术
指南》、２０１４版《狂犬病监测方案》及２００９版《狂犬病暴露预防
处置工作规范》明确指出，如需检测狂犬病酶中和抗体水平，应
当采取中和实验进行检测，主要包括ＲＦＦＩＴ及ＭＮＴ两种方
法。本实验室于２００９年建立ＲＦＦＩＴ方法至今，已检测上万份
人或动物血清标本，以往实验结果证明，本实验室的ＲＦＦＩＴ方
法具有良好的稳定性、敏感性及重复性 ］。但由于ＲＦＦＩＴ需
要使用狂犬病固定毒株ＣＶ １１，以及价格昂贵的ＦＩＴＣ标记
的抗狂犬病病毒核蛋白荧光抗体，因此即便每年的《狂犬病监
测与检测培训班》均会对该方法进行培训与推广，但仅有少数
几家省级疾控中心能建成该实验方法并进行应用。为此，国内
外部分机构和企业研制了狂犬病中和抗体或抗体酶联免疫吸
附试验（ＥＬＩＳＡ）检测试剂盒、胶体金检测试剂盒等 ］。但这
些方法所包被的抗原多为狂犬痛全病毒、狂犬病病毒糖蛋白、
核蛋白或者其他抗原成分，测定的抗体不只是狂犬病中和抗
体，因此只能用于中和抗体的定性检测。
狂犬病中和抗体检测试剂盒在ＲＦＦＩＴ原理上建立，自主
制备ＦＩＴＣ标记的抗狂犬病病毒核蛋白荧光抗体的狂犬病中
和抗体检测试剂盒。应用ＲＦＦＩＴ和狂犬病中和抗体试剂盒同
时检测人和动物血清标本２９９份，对检测结果进行统计学分析
发现，该试剂盒具有良好的重复性和稳定性，能够用于人和动
物血清标本狂犬病中和抗体的检测。
参考文献
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科技出版社，２００９．
Ｅ２３ ＷＨＯ．ＷＨＯ Ｅｘｐｅｒｔ Ｃｏｎｓｕｌｔａｔｉｏｎ ｏｎ Ｒａｂｉｅｓ，ｓｅｃｏｎｄ ｒｅ—
ｐｏｒｔ［Ｒ］．Ｇｅｎｅｖａ：２０１３．
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ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｒａｐｉｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｆｏｃｕｓ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｔｅｓｔ（ＲＦ—
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国际检验医学杂志，２０１１，３２（６）：６４ｏ－６４１．
［５］范晓娟，李刚，邱文英，等．胶体金免疫层析检测犬、猫抗
狂犬病病毒ＩｇＧ抗体的研究［Ｊ］．中国人兽共患病学报，
２Ｏ１ｏ，２６（８）：７５３－７５７．
（收稿日期：２０１６－０６—１３修回日期：２０１６—０９一Ｏ３）
枷蕞辑曩稼堆撼 岳据 嫩
狂犬病病毒实验室检测方法
可编辑
精品 狂犬病病毒实验室检测方法
摘要：狂犬病（Rabies）是一种重要的人兽共患传染病，由狂犬病病毒（Rabies
virus，RV）感染温血动物和人后引起，近年来又有感染上升的趋势。一种准确、灵敏、快速的实验室检测诊断方法就显得极为重要。现就酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光抗体方法（FAT）、快速荧光抑制灶技术（RFFIT）、反转录－聚合酶链反应（RT-PCR）、荧光定量 RT-PCR，基因芯片技术和恒温扩增技术等狂犬病病毒实验室诊断方法做一综述。
关键词：狂犬病 狂犬病病毒 检测方法
狂犬病（Rabies）是一种重要的人兽共患传染病，由狂犬病病毒（Rabies
virus，RV）感染温血动物和人后引起，以恐水、畏光、吞咽困难、狂躁、急性致死性脑脊髓炎，进行性麻痹和最终死亡为主要临床特征。RV可感染多种温血动物引起死亡，表现为高度嗜神经性。脑组织感染RV后遭到破坏，使得狂犬病感染的病死率几乎 100%。
据WHO数据显示狂犬病在全世界150个国家和地区出现过狂犬病病例。尽管狂犬病可以通过疫苗免疫进行预防，全世界每年仍有超过5.5 万人死于该病，主要集中在亚、非、拉等发展中国家[1]。中国狂犬病疫情较严重，居世界第2位[2~3]，近年来，狂犬病疫情呈现回升的趋势[4]。检测狂犬病抗原抗体、分析狂犬病的流行特点，并建立高效、快速、可靠的实验室检测方法可以有效控制此病的流行。下面主要针对RV的形态特征和分子结构及主要的检测技术进行概述。
1、狂犬病病毒形态特征
RV属于弹状病毒科（Rhabdoviridae）狂犬病病毒属（Lyssavirus）血清/基因 1 型，单股负链RNA病毒。电镜下观察病毒粒子直径为70～80nm，长160～240nm，一端钝圆，另一端平凹，整体呈子弹状[5]。病毒有双层脂质外膜，其外面镶嵌有1072-1900个8-10nm长的纤突(spike)，为糖蛋白，每个糖蛋白呈同源三聚体形式，电镜还显示了糖蛋白具有“头”和“茎”结构。病毒双层脂质包膜的内侧主要是膜蛋白可编辑
二种狂犬病抗体检测方法的应用比较
福建畜牧兽医第33卷第5期2011年
二种狂犬病抗体检测方法的应用比较
金颜辉1夏晓红2杨佳2吴波平1许先明1林芬1黄雁1渊1.福建省动物疫病预防控制中心福州350003曰2.长春西诺生物科技有限公司吉林长春130102冤
文献标识码院A文章编号院1003-4331渊2011冤05-0023-02
狂犬病又称野疯狗病冶袁早在公元前四世纪即有记载袁狂犬病在我国大部分地区也曾发生和流行过袁造成很大的经济损失遥狂犬病病毒属于弹状病毒科渊Rhabdoviridae冤狂犬病病毒属渊Lyssavirus冤袁形态呈
子弹状袁长l80nm袁直径75nm袁其头部为半球形袁末端常为平端袁病毒颗粒由外壳和核心两部分组成遥在自然界中袁犬科尧猫科动物和翼手类动物渊如蝙蝠冤等是狂犬病病毒的主要宿主袁其他野生动物如某些啮齿类动物袁野鼠尧松鼠尧鼬鼠等也可感染狂犬病病毒并成为自然界重要的传染源遥我国不少省份流行该病袁福建省个别县亦有极少数犬发病的记录遥人对狂犬病病毒易感袁而接触发病的犬尧猫是人感染狂犬病病毒的最重要感染途径遥狂犬病主要有恐水尧畏光尧吞咽困难尧狂燥等临床表现袁可在几乎所有哺乳动物中传播袁是高致死率的人畜共患传染病[1]遥
用ELISA和胶体金方法袁对来自福建省2009年抽样送检的宠物犬和农村散养犬共1075份犬血清进行狂犬病抗体检测袁比较检测效果遥1材料与方法1.1血清无菌采集来自福建省9个地市宠物医院和农村散养户的1075份犬血袁按常规方法无菌采血分离血清遥1.2主要试剂狂犬病IgG抗体检测试剂盒购自北京世纪元亨公司曰犬狂犬病胶体金试纸条由长春西诺生物科技有限公司提供遥1.3ELISA检测按试剂盒说明书进行袁具体操作如下院渊1冤试剂盒放置室温平衡20~30min袁取出浓缩洗涤用去离子水作10倍稀释备用遥渊2冤稀释样品院将己分离好的犬血清或血浆用样品稀释液作1:10稀释袁即取50uL血清或血浆加入到0.5mL样品稀释液中袁并充分混匀遥渊3冤加样院在预包被的微孔板依次加入稀释好的样品100uL/孔袁然后将阳性尧阴性对照各加1孔袁临界对照加3孔袁100uL/孔袁另留1孔不加样品作空白对照孔袁在记录纸上记录各样品和参考品的次序位置遥渊4冤孵肓院加样完后袁微孔板用封板膜覆盖袁置37益恒温箱中孵肓30min遥渊5冤洗板院用洗板机洗板袁设定每孔加洗涤液280~300uL袁洗板5次袁拍干遥渊6冤加酶院除空白对照外袁其余各孔加酶标记物50uL袁置37益恒温箱中孵肓30min遥渊7冤洗板院用洗板机洗板袁设定每孔加洗涤液280~300uL袁洗板5次袁拍干遥渊8冤显色院每孔渊含空白孔冤
重庆狂犬抗体检测-狂犬病被动免疫制剂的种类分析
狂犬病被动免疫制剂的种类分析
泓域健康（MacroAreas Health）致力于健康管理模式的集成与创新，专注于“狂犬病中和抗体检测”、“HPV中和抗体检测”等疫苗接种后效果评价的管理与运营，利用“医疗服务+互联网、健康服务+大数据”平台，应用于各级公立医院及医疗机构，打造智慧健康管理服务产品体系，以传统医疗机构为基础，撬动医疗服务资源向健康管理服务延伸。
一、狂犬病被动免疫制剂的种类
目前国际上狂犬病被动免疫制剂可分为马源免疫球蛋白（ERIG）、马源纯化F（ab'）2片段制品和人源免疫球蛋白（HRIG）三种，前两种在国内习惯上沿用马抗狂犬病血清的名称（ERA）。我国被批准上市的为马源纯化F（ab'）2片段制品和HRIG。依据现行《中国药典》标准，HRIG产品效价标准为不低于100IU/ml，而ERIG产品效价标准为不低于200IU/ml。
HRIG是采集经人用狂犬病疫苗免疫的人的血浆，采用低温乙醇蛋白分离或其他经批准的分离制造工艺获得的抗狂犬病免疫球蛋白（IgG）。马源纯化F（ab'）2片段制品为采用不含人源成分的狂犬病病毒抗原免疫马匹后采集血浆，采用硫酸铵盐析方法获得ERIG，在
ERIG基础上经胃蛋白酶水解切除Fc段保留完整的F（ab'）2并高度纯化所得。ERIG因其来源相对方便和经济，国内早期暴露后的被动免疫制剂以此产品为主。目前的马源制品均为胃蛋白酶水解制备的F（ab'）2片段，并改进了纯化方法，以尽量提高制剂的比活性。国内外马抗狂犬病血清的总蛋白含量标准均为≤17g/100ml，国内产品的纯度往往在10g/100ml左右，其中F（ab'）2片段含量不低于60%，完整IgG的含量不高于5%。国内ERA制品的总蛋白含量绝对值仍须进一步降低，以减少或减轻人体使用后可能引起的异源蛋白所致的不良反应（如血清病，过敏性休克等）；其另一个缺点是由于在人体内半衰期较短，因此所需注射剂量比HRIG高，增加了不良反应的风险。与此相对，HRIG由于无异源蛋白反应风险，故不良反应率较低，但其缺点是需要不断从加强免疫的健康人群中获得，来源相对困难，价格昂贵。
重庆狂犬抗体检测：狂犬病疫苗罕见不良反应分析
狂犬病疫苗罕见不良反应分析
泓域健康（MacroAreas Health）聚焦创新性医疗与健康技术服务，作为行业领先的“互联网+大健康”解决方案供应商，截至2021年底，泓域健康与国内外80余家医疗服务机构建立了战略合作，并在北京、重庆、广州、杭州、南京、武汉、青岛、大连、成都等全国13个地区设立分支机构，系统开展包括“狂犬病中和抗体检测”、“HPV中和抗体检测”等疫苗接种后效果评价在内的多项病理诊断、医学检验、公卫筛查等专业服务。
一、狂犬病疫苗罕见不良反应
1、中度以上发热反应：可先采用物理降温方法，必要时可以使用解热镇痛剂。
2、过敏性皮疹：接种疫苗后72小时内出现荨麻疹，出现反应时，应及时就诊，给予抗过敏治疗。分析
二、常用细胞培养狂犬病疫苗比较
我国已上市的狂犬疫苗产品根据使用细胞基质不同可分为：二倍体细胞、Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）、地鼠肾细胞及鸡胚细胞，其中Vero细胞是目前应用最为广泛的动物细胞基质，Vero细胞更容易生产和储存，狂犬病毒表达滴度高，因此，Vero细胞狂犬疫苗具有生产
控制水平高、产量大、生产成本较低的优势。但Vero细胞属于传代细胞，高浓度的Vero细胞DNA存在致肿瘤风险。此外，市场上的Vero细胞狂犬病疫苗均使用动物来源的血清和胰酶，产品存在外源病毒因子污染风险。
人二倍体细胞疫苗是第三代狂犬病疫苗，与动物细胞相比，人二倍体细胞狂犬病疫苗具备天然的安全性优势，无致肿瘤风险，杂质去除要求低，被世界卫生组织称为预防狂犬病的黄金标准疫苗，是目前国内传统狂犬病疫苗的有力补充，尤其适用于过敏体质者、老人及儿童等免疫力偏低的人群。但人二倍体细胞存在培养难度高，狂犬病毒表达滴度低等问题，因此人二倍体细胞狂犬病疫苗产量较低、生产成本高。
目前，我国获批签发上市的人用狂犬病疫苗企业共有8家。2018-2020年，我国利用Vero细胞基质培养的人用狂犬疫苗批签发数量占比最大，保持在90%左右；人二倍体细胞狂犬疫苗整体呈现出逐年上升的趋势。
狂犬病被动免疫制剂注射分析-重庆狂犬中和抗体检测
狂犬病被动免疫制剂注射分析
一、狂犬病被动免疫制剂注射
狂犬病被动免疫制剂的作用机理是在主动免疫诱导的保护力空白区，通过在暴露部位即刻提供所需的中和抗体，中和伤口处理时残留在伤口内部的病毒，发挥快速保护效果。所有首次暴露的III级暴露者，以及患有严重免疫缺陷、长期大量使用免疫抑制剂、头面部暴露的II级暴露者均应使用狂犬病被动免疫制剂。被动免疫制剂应尽早使用，最好在伤口清洗完成后立刻开始。如未能及时注射，在第一剂狂犬病疫苗接种后的7天内均可使用。7天后疫苗引起的主动免疫应答反应已经出现，此时再使用被动免疫制剂意义不大。
狂犬病被动免疫制剂应严格按照体重计算剂量，一次性足量使用。HRIG按照每公斤体重20IU/kg，ERA按照每公斤体重40IU/kg计算。如所用总剂量不足以浸润注射全部伤口，可用生理盐水适当稀释。ERA注射前必须严格按照产品说明书进行过敏试验。
如果解剖结构允许（但应避免因注射引起骨筋膜室综合征），应当按照计算剂量，仔细地将狂犬病被动免疫制剂全部浸润注射到伤口周围，所有伤口无论大小均应进行浸润注射，当全部伤口进行浸润注射后尚有剩余时，应将其注射到远离疫苗注射部位的肌肉（建议腰部以上注射到伤口同侧的后背肌群，腰部以下注射到伤口同侧的大腿中
段外侧肌群）。不得把狂犬病被动免疫制剂和狂犬病疫苗注射在同一部位；禁止用同一注射器注射狂犬病疫苗和狂犬病被动免疫制剂。
对于粘膜暴露者，可将狂犬病被动免疫制剂滴/涂在粘膜上。如果解剖学结构允许，也可进行局部浸润注射。剩余狂犬病被动免疫制剂参照前述方法进行肌肉注射。分析
二、狂犬疫苗行业前景展望
由于人二倍体疫苗产量低、大体积生物反应器培养人二倍体细胞难度较大等因素，二代狂犬疫苗仍为国内使用的主流狂犬疫苗。不过，康华生物正在进行产能扩建，随着三代狂犬疫苗获批企业数量的增加以及产能的不断释放，三代疫苗将逐步替代二代疫苗。
中国疾病预防控制中心报告显示，我国狂犬病疫情主要分布在人口稠密的华中、华南、西南、华东地区。人群分布上呈三多特征：农村地区病例较多、15岁以下儿童和50岁以上人群发病较多。中国的犬数超过1亿只，其中大部分在农村散养。消除狂犬病必须免疫动物，而与欧洲等发达国家的动物普遍免疫不同，中国接种疫苗的动物比例较少。因此，人用狂犬病疫苗属于刚性需求。
重庆狂犬抗体检测：狂犬病加强免疫
狂犬病加强免疫
泓域健康（MacroAreas Health）致力于健康管理模式的集成与创新，专注于“狂犬病中和抗体检测”、“HPV中和抗体检测”等疫苗接种后效果评价的管理与运营，利用“医疗服务+互联网、健康服务+大数据”平台，应用于各级公立医院及医疗机构，打造智慧健康管理服务产品体系，以传统医疗机构为基础，撬动医疗服务资源向健康管理服务延伸。
一、狂犬病加强免疫
如出于暴露前预防的目的，则已接受全程基础免疫者无需定期进行加强免疫。定期加强免疫仅推荐用于因职业原因存在持续、频繁或较高的狂犬病病毒暴露风险者（如接触狂犬病病毒的实验室工作人员和兽医）。
免疫程序：接触狂犬病病毒的实验室人员每6个月监测一次血清中和抗体水平；兽医、动物疫控部门等每2年监测一次血清中和抗体水平。当血清中和抗体水平<0．5IU/ml时需加强接种1剂。
接种途径、部位和剂量：肌内注射。2岁及以上儿童和成人于上臂三角肌注射；2岁以下儿童可在大腿前外侧肌注射。每剂0．5ml或1．0ml（具体参照产品规格或产品说明书）。
二、狂犬疫苗研发动态：企业积极研发狂犬病疫苗，辽宁成大两开花
冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）和冻干人用狂犬病疫苗（人二倍体细胞）是企业目前主要的研发方向。
冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）方面，广州瑞贝斯和亚泰生物进入I期临床试验，智飞生物的子公司安徽智飞龙科马生物制药有限公司、辽宁成大、卓谊生物和大连雅立峰进入Ⅲ期临床试验。
冻干人用狂犬病疫苗（人二倍体细胞）方面，目前来看，人二倍体细胞狂苗的发展潜力较大，符合消费升级趋势，而国内仅有成都康华一家生产。正在研发的企业中，仅有辽宁成大一家，并且已经进入Ⅲ期临床试验。
三、中国RABV的动物系统发育与进化分析
科研人员从177个阳性脑组织样本中总共扩增到了108个完整的N基因。在这些样本中，科研人员分析并选择了代表不同年份，动物种类，疫情程度和地点的78种，连同来自中国以及邻国和其他国家的222种参考序列进行系统发育特征分析。结果发现，中国动物RABV分布在4个主要的进化枝中：亚洲（Asian），世界性（Cosmospolitan），北极相关（Arctic-related）和印度次大陆（IndianSubcontinent），以及这些进化分枝中不同的子分枝。其中，
规模猪场伪狂犬病gB与gE抗体检测综合对比分析
国畜禽种业
中
2021.1基金项目院广西柳州市鹿寨县科技成果转化与应用计划项目野鹿寨县规模猪场伪狂犬病的监测及综合防制技术应用冶渊2017005冤遥作者简介院吴双燕渊1987-冤袁女袁广西柳州市人袁兽医师袁研究方向院动物疫病预防与控制遥规模猪场伪狂犬病gB与gE抗体检测综合对比分析吴双燕1韦玉庆1韦玉姣1苏益琼1余波1秦雪培2施佳露3经孝红4(1袁广西鹿寨县动物疫病预防控制中心545600曰2袁广西鹿寨县农业执法大队545600曰3袁广西鹿寨县寨沙镇水产畜牧兽医站545603曰4袁广西鹿寨县畜牧工作站545600)摘要院为了解鹿寨县规模猪场猪伪狂犬病病毒渊PRV冤免疫抗体水平及野毒感染情况袁有效控制规模猪场的伪狂犬病袁通过使用猪伪狂犬病病毒gE-ELISA抗体检测试剂盒及猪伪狂犬病gB抗体检测试剂盒对鹿寨县规模猪场所采集的992份血清样品按照不同地区猪场尧不同规模尧不同生长阶段3个方面进行gB与gE抗体检测综合对比分析遥结果显示院猪伪狂犬病病毒在鹿寨县南北地区的不同猪场都有所流行袁在北部地区平山镇流行范围广袁流行率高袁平山镇有伪狂犬野毒感染的猪场共计6家袁占采样比的75%渊6/8冤遥大型猪场gB抗体阳性率最高为86.46%袁gE抗体阳性率最袁低为3.13%曰而小型猪场gB抗体阳性率最低为36%袁gE抗体阳性率最袁高为14.84%曰PRVgB抗体阳性率与PRVgE抗体阳性率呈负相关遥在不同生长阶段袁母猪群的gB抗体阳性率为96.2%尧gE抗体阳性率韦24.57%袁其两种抗体阳性率都明显高于育肥猪和仔猪曰育肥猪尧仔猪PRVgB尧PRVgE抗体阳性率的相关性与不同规模猪场PRVgB尧PRVgE抗体阳性率的相关性相似遥表明院鹿寨县平山镇规模猪场猪伪狂犬病野毒感染形势严峻遥而母猪群及后备猪群的野毒清除情况是决定规模猪场PR净化的首要关键点曰母猪群的伪狂犬病免疫工作也是整个猪场伪狂犬病免疫的重中之重遥在今后工作中应加强猪场生物安全管理尧科学饲养管理尧合理制定种猪高效免疫计划袁强化定期监测防控意识袁果断淘汰病猪袁净化猪群袁做好综合防治工作遥关键词院猪伪狂犬病曰gE曰gB曰抗体曰ELISA曰检测分析曰鹿寨县有添加剂时袁其饲料残留物容易留在胃肠道里袁不符合人们的食用标准遥检查后的合格部位相关检疫人员将为其贴上标签袁对于含有相应有害物质的猪肠袁相关人员要及时对其进行清理遥清理完成后对其再进行检查袁符合标准后可以将其售卖袁不合格的要进行相关处理袁避免有害物质传染到其他猪肉上袁做好相关防护工作[2]遥在此基础上袁相关检疫人员可以通过显微镜检查腹部肠道袁检查猪的腹部是否存在旋毛虫袁防治引起人类食品安全问题遥因此袁在猪屠宰后要注重检查其肠道胃部是否存有点状虫体袁生猪屠宰后有较多的检疫流程袁每完成一道检疫工作袁合格的要贴上相应标签袁提高猪肉质量安全遥2.4生猪的脏器组织检查生猪脏器组织检查也是尤为关键的一个环节遥首先袁要检查猪的肾脏袁查看肾脏内部是否有出血现象袁如果猪的肾脏内部出血表明猪存在疾病袁视为不合格猪肉袁将其封闭式储存袁避免传染到其他猪肉袁然后进行统一处理袁同时袁还要检查其外表是否存在异常现象遥其次袁要检查猪的脾脏袁查看脾脏是否有出血尧颜色加深的现象袁还要检查脾脏内部是否存有猪瘟尧猪疾病的潜在症状袁查看脾脏形状是否出现肿胀等袁一系列检查后全部合格方可通过遥最后袁要检查猪的肺脏袁检查其肺脏形状尧颜色是否改变袁同时再查看肺脏内部是否存在相关疾病遥检查猪的血管是否存有寄生虫遥并且还要检查猪的心脏袁如果猪的心脏颜色为淡红色袁则表明该猪在其生长过程中患有相关传染性疾病袁对其要进行有效排除遥3结语总而言之袁随着我国对生猪检疫制度的不断完善袁应加强相关管理遥同时袁相关部门应提高生猪检疫标准袁按照规定流程进行检疫袁不能忽略任何一个环节袁通过检疫流程完成每一步检查袁加强检疫人员的工作效率袁提高猪肉质量袁保障人们的食用安全遥参考文献:[1]丁玲,赵艳波.生猪屠宰检疫流程和检疫要点[J].中国畜禽种业,2020,16(6):46.[2]孙可印.生猪屠宰检疫流程和检疫要点[J].养殖与饲料,2020(4):103-104.猪伪狂犬病渊Porcinepseudorabies,PPR冤是由伪狂犬病病毒渊PseudorabiesVirus,PRV冤引起的一种急性传染病[1]袁我国将其列为二类动物传染性疾病遥猪感染该病后临床症状因感染日龄不同而表现各异院妊娠母猪表现为流产袁产死胎尧木乃伊胎曰初生仔猪具有明显的神经症状袁并呈现急性致死性经过曰育肥猪出现呼吸道症状袁生长不良袁并长期带毒和排毒曰公猪精液质量下降[2]袁本病给养殖业造成严重的经济损失遥为了了解鹿寨县规模猪场猪伪狂犬病病毒渊PRV冤免疫抗试验研究
抗狂犬病毒中和抗体研究进展
生物技术进展２０２０年 第１０卷 第４期 ３３９~３４４ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ＩＳＳＮ２０９５￣２３４１
进展评述Ｒｅｖｉｅｗｓ
收稿日期:２０１９￣１０￣１０ꎻ接受日期:２０２０￣０４￣２２ 基金项目:国家自然科学基金项目(８１７０２０７２)ꎮ 联系方式:卞论Ｅ￣ｍａｉｌ:１２６１７２５６９２＠ｑｑ.ｃｏｍꎻ∗通信作者吴英松Ｅ￣ｍａｉｌ:ｙｉｎｇｓｏｎｇｗｕ＠ｈｏｔｍａｉｌ.ｃｏｍ抗狂犬病毒中和抗体研究进展
卞论ꎬ 林冠峰ꎬ 吴英松∗
南方医科大学检验与生物技术学院ꎬ广州５１０５１５
摘 要:狂犬病是一种人兽共患传染病ꎬ人和动物一旦发病后死亡率几乎百分之百ꎬ而有效的暴露后预防措施可以将死
亡风险降至零ꎮ根据ＷＨＯ推荐的狂犬病暴露后预防方案ꎬ一般狂犬病暴露者需要进行疫苗注射ꎬ严重者则需在进行疫
苗注射的同时注射抗狂犬病毒中和抗体ꎮ常用的中和抗体有马抗狂犬病毒免疫球蛋白和人抗狂犬病毒免疫球蛋白ꎬ然
而两者都存在引起过敏反应或血液疾病的风险ꎮ人源抗狂犬病毒中和抗体则因为具有安全性高、成本低、可量产等优点
有望代替免疫球蛋白用于暴露后预防ꎮ基因工程抗体技术的发展加速了抗体人源化的进程ꎮ就抗狂犬病毒中和抗体的
发展历程ꎬ不同类型中和抗体的优缺点以及中和抗体的未来研究方向作了综述及展望ꎬ以期为新一代狂犬疫苗的研发提
供参考ꎮ
关键词:狂犬病毒ꎻ暴露后预防ꎻ中和抗体
ＤＯＩ:１０.１９５８６/ｊ.２０９５￣２３４１.２０１９.００９９
ＡｄｖａｎｃｅｓｏｎＡｎｔｉ￣ｒａｂｉｅｓＶｉｒｕｓＮｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ
ＢＩＡＮＬｕｎꎬＬＩＮＧｕａｎｆｅｎｇꎬＷＵＹｉｎｇｓｏｎｇ∗
ＳｃｈｏｏｌｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＳｏｕｔｈｅｒｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕ５１０５１５ꎬＣｈｉｎａ
重庆狂犬抗体检测_狂犬病被动免疫制剂不良反应监测分析
狂犬病被动免疫制剂不良反应监测分析
泓域健康（MacroAreas Health）通过创新型管理系统和医疗垂直领域管理平台服务医疗机构和医生的同时，不断加大“互联网+大数据”运营服务，持续完善包括“狂犬病中和抗体检测”、“HPV中和抗体检测”等疫苗接种后效果评价在内的多项病理诊断、医学检验、公卫筛查等专业服务，并在用户端给提供多种形式的医疗健康服务和高质量的医疗健康产品。
一、狂犬病被动免疫制剂不良反应监测
建议接种单位应做好狂犬病被动免疫制剂的不良反应报告工作，当获知或者发现可能与之相关的不良反应，应当通过国家药品不良反应监测信息网络报告；不具备在线报告条件的，应当通过纸质报表报所在地药品不良反应监测机构，由所在地药品不良反应监测机构代为在线报告。接种单位若发现或者获知新的、严重的药品不良反应，应当在15日内报告，其中死亡病例须立即报告；其他药品不良反应应在30日内报告。有随访信息的，建议及时报告。建议报告内容应当确保真实、完整、准确，同时建立并保存不良反应报告和监测档案。
其中，新的药品不良反应是指药品说明书中未载明的不良反应。说明书中已有描述，但不良反应发生的性质、程度、后果或者频率与
说明书描述不一致或者更严重的，按照新的药品不良反应处理。严重药品不良反应包括以下6种情形：导致死亡；危及生命；致癌、致畸、致出生缺陷；导致显著的或者永久的人体伤残或者器官功能的损伤；导致住院或者住院时间延长；导致其他重要医学事件，如不进行治疗可能出现所列情况的。分析
二、狂犬病疫苗批签发量呈现平稳波动的态势
由于狂犬病患病高死亡率，狂犬病疫苗使用接种尤为刚性，人用狂犬病疫苗是我国常年批签发量较大的疫苗品种之一。近年来，国内狂犬疫苗每年的批签发总量维持在6000-8000万支，即1200-1600万人份（4-5针/人份），2020年我国全年批签发各类狂犬疫苗大约8238万剂，较2019年同期增长40．04%。2021年第一季度，狂犬病疫苗批签发量为1439万支，同比增长30．19%。
人用狂犬病疫苗作为狂犬病毒抗原检测阳性对照的意义
人用狂犬病疫苗作为狂犬病毒抗原检测阳性对照的意义
王文玉;余光开;陈晓燕
【期刊名称】《中国人兽共患病学报》
【年(卷),期】2007(23)12
【摘 要】目的 探讨人用狂犬病疫苗能否作为目前应用的快速诊断狂犬病毒抗原的ELISA试剂盒的阳性对照.方法 在对四川省犬只唾液和脑组织进行狂犬病带毒情况的流行病学调查时,同时加用人用狂犬病疫苗作阳性对照,比较试剂盒中标准阳性对照与抗原阳性对照的差异.结果 ①人用狂犬病疫苗作为阳性对照的灵敏度、特异度高,为100%,诊断粗符合率和调整一致性也均为100%.②标准阳性对照和抗原阳性对照的阳性率间没有差异.结论 人用狂犬病疫苗稳定性较好,可用作ELISA抗原检测试剂盒中的阳性对照.
【总页数】2页(P1247-1248)
【作 者】王文玉;余光开;陈晓燕
【作者单位】泸州医学院附属医院感染科,泸州,646000;泸州医学院附属医院感染科,泸州,646000;泸州医学院附属医院感染科,泸州,646000
【正文语种】中 文
【中图分类】R373
【相关文献】
1.人 MicroRNA-335阳性对照质粒真核表达载体的构建及意义 [J], 温志红;代艳;何爽 2.暴露人群接种狂犬病疫苗后血清狂犬病毒抗体检测结果分析 [J], 杨云
3.HBsAg阳性人群乙肝病毒前S1抗原检测的临床意义 [J], 何思春;谢元宏;邹立新;王利君;焦鑫
4.外周血白细胞人巨细胞病毒抗原检测及其临床意义 [J], 张明;董永绥
5.HBVM阳性人群PreS1抗原检测临床意义探讨 [J], 江涛;张华萍
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