2017-18学年高中生物第五章植物的组织培养技术第一节植物快速繁殖技术学案
第一节 植物快速繁殖技术 1．了解植物组织培养的基本原理。 2．掌握植物组织培养的基本技术，进行月季或其他植物的组织培养。
一、植物组织培养 1．基本原理与概念 高度分化的植物细胞所具有的全能性，使我们能够将植株上的小块组织（如一段茎节、一个小芽），在适宜条件下培养成一株完整的植株，这就是植物的组织培养。 2．选材 不同植物的组织，培养的难易程度差别很大。一般说来，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养，如草莓、葡萄、猕猴桃、菊花、秋海棠等。 思考：是否可以选择花粉进行上述植物的快速繁殖？ 提示：利用花粉培养出的植株为单倍体植株，有矮小、高度不育等特点 3．意义 可以在较短时间内利用一株植物繁殖出几十万至几百万株幼苗。对濒危植物的保护、名贵花木的大规模生产有积极的意义，如所需空间小，繁殖速度快，条件可控制，不受季节限制，可以进行连续生产。 二、植物组织培养的基本过程 1．获得外植体 在植物组织培养过程中，用于离体培养的植物器官或组织片段称为外植体。从一株植物上可取下大量的外植体进行组织培养，并在短期内大量繁殖植物种苗，实现植物的快速繁殖。 2．脱分化 外植体在培养基中培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。其细胞是一种高度液泡化的薄壁细胞，呈无定形状态，排列疏松而无规则，具有很强的分生能力。由高度分化的细胞重新回复到未分化的状态，这一过程称为脱分化。 3．再分化 脱分化形成的愈伤组织，在适当的人工培养基上继续进行培养又可以重新分化成芽、根等器官，进而发育成一棵完整的植株。这一过程称为植物细胞的再分化。 三、植物组织培养的培养基 1．培养基中的激素 培养基中添加的生长素和细胞分裂素，在启动细胞分裂、脱分化和再分化过程中起着重要作用。当同时使用这两类激素时，两者用量的比例会影响植物细胞的发育方向。当该比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；当该比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长，诱导根芽分化。 2．外植体在不同的发育阶段对培养基要求不同，在进行植物快速繁殖时，需要配制“脱分化培养基”“生芽培养基”“生根培养基”。 3．无菌条件对组织培养的成功至关重要。在组织培养过程中，培养基的灭菌要彻底、外植体的消毒要充分、接种时的无菌操作要严格。 此外，pH、温度、光照等外界条件对植物组织培养也很重要。 四、月季的快速繁殖过程 1．配制培养基 配制三种培养基：脱分化培养基——在MS培养基中加入质量浓度为0.1 mg·L－1的6BA和IAA。生芽培养基——去掉脱分化培养基中的IAA，其余成分不变。生根培养基——无机盐浓度为MS的1/2，其他成分不变，另外添加质量浓度均为0.1 mg·L－1的NAA和IAA。 具体步骤为先将琼脂和蔗糖溶化，再加入其他成分，并用蒸馏水定容，随后调节pH，最后分装、封瓶，高压蒸汽灭菌。 2．外植体消毒 将月季嫩茎用清水洗净，再用体积分数为70%的酒精浸泡5 s，随后放入质量分数为2%的次氯酸钠溶液中浸泡，再在无菌水中清洗3次，漂净消毒液，用无菌滤纸吸干。 3．接种 将已消毒的月季嫩茎切成小段，接种到“脱分化培养基”上。插入时应注意方向，使嫩茎的形态学下端接触培养基，不要倒插。 4．培养 温度控制在18～22 ℃，20天左右就可在茎段基部形成愈伤组织。将其接种到“生芽培养基”上，每天日光灯光照12小时，10天左右可见愈伤组织上长出小芽，继续生长成枝条。长到3 cm左右时，将其切下后插在“生根培养基”上诱导生根，培养7～10天。 5．驯化试管苗 当小苗基部形成根原基时，即可进行驯化移栽。试管苗是在无菌、充分营养供给、适合的光照和温度以及100%相对湿度环境中生长的。刚出瓶的试管苗对外界环境不太适应，要逐步驯化适应，以提高成活率。 将试管苗培养瓶的瓶口敞开一半，在20～25 ℃的遮阴环境中，适应7～14天。若试管苗不萎蔫、有新生长趋势，便可将试管苗取出，小心洗净黏在根上的培养基，植入盛有培养土的花盆中，浇足水分，罩上带孔的塑料薄膜，将花盆放置在20～25 ℃的阴凉处3～5天。 6．移栽 待幼苗长出新叶时，揭去塑料薄膜，再过7～10天，幼苗即可移栽。
1．愈伤组织 愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，是高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。它容易与根尖、茎尖的分生组织发生混淆。可以通过下表比较根尖分生组织和愈伤组织的异同。
组织类型 细胞来源 细胞形态 细胞结构 细胞排列 细胞去向 根尖 分生组织 受精卵 正方形 无液泡 紧密 分化成多种细胞组织
愈伤组织 高度分 化细胞 无定形 高度液泡化 疏松 再分化成新个体 相同点 都通过有丝分裂进行细胞增殖 2．MS培养基的主要成分及其作用 离体的植物组织和细胞，对营养、环境条件要求相对特殊，需要配制适宜的培养基。植物的组织培养常用的一种培养基是MS培养基，其主要成分包括以下几个： （1）无机营养 ①大量元素：除碳（C）、氢（H）、氧（O）外，还有氮（N）、磷（P）、硫（S）、钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）等元素。氮常用的是硝态氮（如硝酸钾等）和铵态氮（如硫酸铵等）。在含硝态氮的培养基上生长良好的植物材料，加铵态氮后生长效果更好。在胡萝卜胚状体的分化中，若培养基中仅含硝酸盐则不能分化，只有与铵盐同时存在时才会产生胚状体的分化。 ②微量元素：包括铁（Fe）、铜（Cu）、钼（Mo）、锌（Zn）、锰（Mn）、钴（Co）、硼（B）和碘（I）等。在植物组织培养中需用量极微，多了就会引起植物细胞的酶系失活、代谢障碍、蛋白质变性以及组织死亡等毒害现象。培养基中添加10－7～10－5 mmol·L－1就可满足需要。 （2）有机营养 ①维生素类：植物组织培养中经常使用维生素C、维生素B1（盐酸硫胺素）、维生素B6
（盐酸吡哆素）、维生素H（生物素）、叶酸和烟酸等，一般使用浓度为0.1～10 mg·L－1 。
有的外植体、愈伤组织会合成维生素，可以不添加，但生长早期往往会缺乏。 ②氨基酸：有甘氨酸、丝氨酸、酪氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、水解酪蛋白（CH）和水 解乳蛋白（LH）等，是重要的有机氮源。 ③有机添加物：是一些成分比较复杂，大多含氨基酸、激素、酶等的复杂化合物，它们对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用。 ④琼脂：是一种从海藻中提取出来的凝胶性物质，作为凝固剂，一般使用浓度为0.6%～1% 。琼脂在植物组织培养中除固化作为培养材料的支持物外，还具有吸附能力，对组织培养是有利的，它能像活性炭一样除去细胞代谢废物。 ⑤活性炭：加入活性炭的目的是除去琼脂中的毒物或培养物产生的芳香族的代谢废物。活性炭可防止组织变褐，并刺激胚的生长。 （3）植物生长调节物质 植物生长调节物质是培养基中的关键物质，对植物组织培养起着重要、明显的调节作用。 植物生长调节物质包括生长素、细胞分裂素及赤霉素等。 通常认为生长素和细胞分裂素的比值大时有利于根的形成；比值小时则促进芽的形成。低浓度2,4－D有利于胚状体的分化，但妨碍胚状体进一步发育。萘乙酸有利于单子叶植物的分化。吲哚丁酸诱导生根效果最好。故应根据植物的种类和培养部位，选择适宜的生长调节物质的种类和浓度，才能有效地控制器官的分化。常用的生长抑制剂有矮壮素（CCC,2－氯乙基三甲基氯化铵）、B9（N－二甲琥珀酰胺酸）、多效唑（PP333）等，用于种质保存和块茎的诱导。 （4）能源和渗透压 通常植物本身能进行光合作用，产生糖类，不需要从外部供给糖，但在植物组织培养进行异养的状况下，大多不能进行光合作用来合成糖类，因此必须在培养基中添加糖，作为碳素来源和能源物质，同时糖对保持培养基的渗透压（一般需在1.5×105～4.1×105 Pa）也有重要作用。 糖的使用浓度大多在2%～3%，花药培养和胚培养则采用3%～15%的高浓度。使用最普遍的是蔗糖，此外还有葡萄糖和果糖。
题型一 细胞的全能性 【例题1】下列实例中能体现细胞全能性的是（ ）。 ①用培养基培养的胡萝卜单个细胞培养成了可育的植株 ②植物用种子进行繁殖 ③用烟草组织培养的单个组织培育出了可育的完整植株 A．①② B．①③ C．②③ D．①②③ 解析：①和③都属已分化的细胞经过培养形成可育的植株，体现了细胞的全能性。植物用种子繁殖后代，实际上是由一个受精卵，通过细胞的增殖和分化发育成新个体，是由未经分化的细胞（受精卵）发育成新个体的过程，因此不能体现细胞的全能性。 答案：B 题型二 植物细胞表达全能性的条件 【例题2】植物细胞表现出全能性的必要条件是（ ）。 A．给予适宜的营养和外界条件 B．导入其他植物细胞的基因 C．脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件 D．将成熟筛管的细胞核移植到去核卵细胞中 解析：在生物体内，细胞没有表现出全能性， 而是分化成为不同的组织、器官，这是基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。当植物细胞脱离母体后，在一定的营养物质、激素和其他适宜的外界条件的作用下， 植物细胞就可以表现出全能性。 答案：C 反思领悟：反思领悟：植物细胞表达全能性的条件：一是离体给予适宜的营养和外界条件；二是有完整的细胞核；三是植物激素。 题型三 植物组织培养的过程及影响因素 【例题3】下列关于植物组织培养的说法，错误的是（ ）。 A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
《植物组织培养技术的应用》 讲义
《植物组织培养技术的应用》讲义一、植物组织培养技术的简介植物组织培养技术是一种在无菌条件下，将植物的离体器官、组织、细胞或原生质体等外植体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其生长、分化并发育成完整植株的技术。
这项技术具有高效、快速、可重复性强等优点，为植物的繁殖、改良和应用提供了广阔的前景。
二、植物组织培养技术的应用领域（一）快速繁殖优良品种植物组织培养技术在快速繁殖优良品种方面具有显著的优势。
对于一些繁殖系数低、种子结实率低或难以通过种子繁殖的植物，如兰花、草莓、香蕉等，组织培养可以在短时间内大量繁殖出与母株遗传性状一致的种苗。
通过选取优良母株的茎尖、腋芽等作为外植体，在适宜的培养基和培养条件下，诱导形成不定芽或丛生芽，经过继代培养和生根培养，最终获得完整的植株。
这种方法不仅能够快速满足市场对优良种苗的需求，还能有效地保持品种的优良性状，防止品种退化。
（二）脱毒苗的培育许多植物在长期的无性繁殖过程中容易感染病毒，导致产量降低、品质下降。
植物组织培养技术为脱毒苗的培育提供了有效的途径。
通常选取植物茎尖等分生组织作为外植体，因为这些部位的病毒含量较低甚至无病毒。
在无菌条件下培养茎尖，诱导形成新的植株，经过病毒检测，筛选出无病毒的种苗。
脱毒苗的培育对于提高农作物、果树、花卉等的产量和品质具有重要意义，如马铃薯、草莓、菊花等。
（三）植物新品种的培育1、单倍体育种通过花药或花粉培养，可以获得单倍体植株，然后经过人工诱导染色体加倍，获得纯合二倍体植株。
这种方法可以大大缩短育种周期，提高育种效率，快速获得优良的纯系品种。
2、体细胞杂交将不同种或属的植物体细胞经过诱导融合，形成杂种细胞，再通过培养和筛选，获得杂种植株。
体细胞杂交可以克服有性杂交的不亲和性，创造新的物种或优良品种。
3、基因工程育种利用基因工程技术将外源基因导入植物细胞，通过组织培养获得转基因植株。
这为定向改良植物的性状，如抗病虫害、抗逆性等提供了可能。
高中生物 专题3 植物的组织培养技术 课题1 菊花的组织
专题3课题1菊花的组织培养（预）【学习目标】1.植物组织培养的基本原理。
2.植物组织培养的基本技术。
3.进行菊花或其他植物的组织培养。
【知识梳理】一、基础知识(一)植物的组织培养的基本过程1.植物组织培养的原理（1）细胞分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
根本原因：在特定的时间和空间条件下，基因的选择性表达。
（2）细胞全能性：生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。
植物细胞表现全能性条件：离体、营养物质、激素和其他外界条件。
2.植物组织培养的基本过程 离体的植物细胞、组织、器官―――→脱分化愈伤组织―――→再分化试管苗――→移栽植物体 外植体：离体的植物器官或组织片段。
脱分化（去分化）：高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。
愈伤组织：通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。
再分化：愈伤组织继续进行培养重新分化成根或芽等器官的过程。
（二）影响植物组织培养的因素1.外植体的选取 ① 不同植物的组织培养难度 一般选择植物的幼嫩部分（生命力旺盛，分裂分化能力强；含有的病毒少），比如茎尖、根尖、幼嫩的叶片等；保存时间越短，材料生命力越旺盛；保存时间越长，越容易受到污染。
例如：菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
2.培养基的配制(MS培养基)MS培养基主要成分大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S ；微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、C；有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等；植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等。
3.不同植物激素浓度、使用顺序和使用量用量比例与根、芽的分化生长素和细胞分裂素比值结果比值高时促进根的分化，抑制芽的形成比值低时促进芽的分化，抑制根的形成比值适中促进愈伤组织的形成4. 环境条件pH、温度、光照等条件也很重要。
例如菊花组织培养的条件：pH=5.8 、温度、控制在18—22℃、每日光照12h。
人教版高中生物选修一专题3《植物的组织培养技术》ppt专题整合课件
• 【例1】 (2010·浙江理综，40)将无根的非洲菊幼苗
转入无植物激素的培养基中，在适宜的温度和光照等 条件下培养一段时间后，应出现的现象是
( )。
•解析 无根幼苗可自身产生植物激素，诱导分化出根部。 不可能脱分化形成愈伤组织，也不会在下部分化出芽。 •答案 B
• 【例2】 (2010·全国新课标，40)请回答：
• (2)组织培养中的细胞，从分化状态转变为未分化 状态的过程称为______。
• (3)在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素a和 植物激素b。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓 度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示。据图指 出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的 关系：
•①当植物激素a与植物激素b的浓度比等于1时，
•(5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其 光合作用能力，应______(降低，增加)培养基中蔗糖浓度， 以便提高试管的自养能力。
•解析 (1)植物组织培养属于无性繁殖，后代能够保持 亲本的遗传特性。植物微型繁殖技术能够实现快速繁殖。 植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，即已经分 化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。(2)植物组 织培养接种和试管苗转接过程中都需要无菌操作，以避 免微生物(杂菌)污染。(3)微型繁殖培养基中使用的生长 素与细胞分裂素比例不同，可以分别诱导根、芽的形成。 使用高浓度的植物生长素类似物(如2,4D)可以抑制试管 苗的生长。
•(4)若植物激素b是生长素，在植物组织培养中其主要作 用是_________________________________________，
•则植物激素a的名称是______。
•(5)生产上用试管苗保留植物的优良性状 ，其原因是 __________
高中生物 第五章 植物的组织培养技术 第二节 植物种苗脱毒技术学案 中图版选修1
第二节植物种苗脱毒技术掌握植物种苗脱毒的基本过程。
一、种苗脱毒把茎尖分生组织从感染病毒的植株上剥离,在离体条件下进行组织培养,从而获得不含病毒的脱毒苗,这一过程称为种苗脱毒。
二、脱毒苗的培养实例1．马铃薯脱毒苗的培养（1）取材和消毒将欲脱毒的马铃薯块茎催芽,剪芽并剥去外叶，用自来水冲洗10 min，在无菌室内用质量分数为5％的漂白粉溶液消毒后，用无菌水冲洗2～3次。
(2)剥离和接种取马铃薯芽的尖端1～2 cm，在解剖镜下，用解剖刀小心地除去茎尖周围的叶片组织，露出顶端圆滑的分生区,用解剖针细心剥取所需的茎尖（约0。
1～0.5 cm）,接种于MS培养基上，切面接触培养基。
(3）培养于25 ℃、1 500～3 000 lx光照下培养，当长成3～4片叶的小植株时，即可移栽.2．草莓脱毒苗的培养3．探究切取茎尖的最佳长度在进行种苗脱毒时，切取的茎尖越小，脱毒效果就越好，但组织培养的速度就越慢，越不容易成活;如果切取的茎尖大一些，组织培养虽容易成功,但脱毒效果却很差.污染的预防污染就是指在组织培养过程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育,从而导致培养失败的现象。
植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。
由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高,对无菌操作的要求非常严格。
污染有两种类型：(1）细菌污染：菌斑呈黏液状，界限比较明显,一般接种后1～2天即能发现。
主要是大肠杆菌和链球菌。
一般是由接种人员造成的.（2）真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子,接种后3～10天才能发现.主要是霉菌污染，可能是植物材料灭菌不当造成的。
可以通过以下措施做好预防。
(1）防止外植体带菌。
①选择好外植体采集时期和采集部位。
外植体采集以春秋为宜，优先选择地上部分作为外植体，阴雨天勿采，晴天下午采，采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋.②在室内或无菌条件下进行预培养。
植物组织培养技术
植物组织培养技术第一章绪论第二章植物组织培养实验室组成、仪器设备及无菌操作技术第三章植物组织培养基本原理第四章器官培养技术第五章植物胚胎培养第六章花粉及花药培养第七章细胞及原生质体培养第八章组培培养技术在中药学上的应用第一章绪论一、植物组织培养的概念1. 概念植物组织培养（Plant tissue culture）广义上是指无菌条件下，在特定的培养基上对离体的植物器官、组织、细胞和原生质体甚至包括完整植株进行培养的技术。
2.主要特征（1）在培养容器中进行；（2）无菌培养环境，排除了微生物如真菌、细菌以及害虫等的侵入；（3）各种环境因子如营养因子、激素因子以及光照、温度等物理因子处于人工控制之下，并可达到最适条件。
（4）通常打破了正常的植物发育过程和格局；（5）随着单细胞和原生质体培养技术的发展，对植物显微结构进行操作成为可能。
二、植物组织培养类型：根据不同分类的依据可以分为不同类型。
1、根据培养材料不同分为：（1）完整植株培养（Plant Culture）：对幼苗和较大植株等的培养。
（2）胚胎培养（Embryo Culture）：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。
（3）器官培养（Organ Culture）：包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。
（4）组织培养（Tissue Culture）：如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。
（5）细胞培养（Cell Culture）：指对单细胞或较小的细胞团进行培养。
（6）原生质体培养（Protoplast Culture）：指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。
2、根据再生途径分为：（1）器官发生途径（Organogenesis）：直接器官发生途径：植物器官可以直接由外植体上诱导。
如茎尖培养。
间接器官发生途径：成熟细胞经过脱分化（dedifferentiation）及再分化（redifferentiation）过程而形成新的组织和器官的过程。
人教版高二生物选修一学案专题3_课题1_菊花的组织培养
专题3 植物组织培养技术课题1 菊花的组织培养【学习目标】1.熟记植物组织培养的基本原理。
2.小组合作学习植物组织培养的基本技术。
3.激情投入，全力以赴，进行菊花或其他植物的组织培养。
【重点难点】重点: 植物组织培养过程中使用的无菌技术。
难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。
【预习案】任务一.植物组织培养的相关概念和基本过程1.植物组织培养的相关概念（1）细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在__________、__________和__________上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。
细胞分化是基因__________的结果。
（2）细胞的全能性： __________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。
细胞全能性是组织培养的基本原理。
（3）愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过__________过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种__________的呈无定形状态的__________。
（4）脱分化：由__________的植物组织或细胞产生__________的过程，称为脱分化，又叫去分化。
（5）再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成__________，这个过程叫做再分化。
（6）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。
2.植物组织培养的基本过程移植——→试管苗———→完整的植物体任务二．影响植物组织培养的因素1.内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。
同种植物材料，__________，__________等也会影响实验结果。
菊花的组织培养，一般选择__________的茎上部新萌生的侧枝。
2.外部因素：（1）营养条件常用的是__________ 培养基，其主要成分包括：__________，如_______________________；__________ ，如_________________________ ；_________ 等。
2017-2018学年高中生物一(检测)：3课题1菊花的组织培养含答案
课题1菊花的组织培养基础巩固1下列有关植物组织培养的叙述,错误的是( ）A。
植物组织培养的原理是细胞的全能性B.主要包括脱分化和再分化两个阶段C。
外植体形成愈伤组织的过程不需要生长素和细胞分裂素D.植物组织培养的过程中要求无菌操作解析:植物组织培养是指离体的植物细胞、组织或器官在无菌操作下经脱分化和再分化形成完整植物体的过程，其原理是植物细胞的全能性.在脱分化形成愈伤组织的过程中，需要生长素和细胞分裂素，生长素和细胞分裂素比例适中时，促进愈伤组织的形成。
答案：C2下列属于植物组织培养的是( )A.兰花的茎尖组织培育成兰花幼苗B。
水稻种子萌发并长成新个体C。
扦插的葡萄枝长成新个体D。
柳树芽发育成枝条解析：植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。
水稻种子萌发并长成新个体、柳树芽发育成枝条均属于个体发育部分；扦插的葡萄枝长成新个体属于无性生殖中的营养生殖。
答案：A3下列关于植物组织培养中无菌操作的叙述,错误的是（）A。
外植体可以用酒精消毒B。
镊子等器械需酒精灭菌C.操作前手需酒精消毒D。
培养基需高压蒸汽灭菌解析:植物组织培养需要严格的无菌操作。
培养基需要高压蒸汽灭菌；操作前手需用酒精消毒,外植体应在酒精中消毒；整个操作过程在酒精灯火焰旁进行,同时对镊子等器械进行灼烧灭菌。
答案:B4下列有关制备MS固体培养基的操作,有误的是（)A。
配制母液时，无机物中大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍B。
激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1 mg/mL 质量浓度单独配成母液C。
制备1 L MS培养基时,先将母液加入800 mL蒸馏水中加热灭菌，再加入琼脂D。
分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌解析:制备1 L MS培养基时，先将琼脂加入800 mL 蒸馏水内熔化,再加营养液、蒸馏水定容至1 000 mL，最后一步是灭菌。
【金版学案】高中生物 专题三 课题1 菊花的组织培养名师优质课件 新人教版选修1
2．污染原因与处理
污染种 类
细菌污染
真菌污染
可能是由操作人员造
污染原 因
成接消的种毒，时或如说器未话械戴、灭口手菌罩未不、 可能消是毒由不植当物引材起料的
栏 目 链 接
彻底等
处理措 施
将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进 行高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进 行清洗
例2 在制备MS固体培养基的过程中，不正确的是 ()
接 种 操 作 都 必 须 在 ________ 旁 进 行 。 将 菊 花 茎 段
插入________时应注意酒方精向灯，不要________。
培养基
倒插
4．培养
最 好 在无__菌__箱______ 中 培 养 。 培 养 期 间消应毒定 期
________ 。 培1养8～温22度℃控 制 在 __日__光__灯__ ， 且 每 日 用
(2)无菌技术包括对培养基、器械和植物材料(外植 体)的消毒。对培养材料进行表面消毒时，一方面要考 虑药剂的效果，另一方面要考虑植物材料的耐受性。
(3)妥善处理被污染的培养物：一旦发现培养材料被 污染，特别是真菌污染，一定要先灭菌然后再打开清洗。
(4)有毒物质用后要妥善处理，以免造成环境污染。 栏
育成为完整个体所遗必传需物的质全部________。
栏 目
链
(2)细胞分化：植物的__个__体__发__育_______过程中，细 接
胞在形__态__、__结__构__和__生__理__功__能_____________稳上定出性现差异 ____________的过程。
2．过程
_离__体_____的植物组织或细胞 ―→_脱__分__化___―→愈_伤__组__织_____―→再_分__化_____―→根、芽 ―→完整植株。
植物组织培养技术：3-任务三 植物组培快繁技术
已离体培养植株 （试管苗）
❖ 多数情况下，应尽量使用温室或人工气候室控制 培养的植物材料作为外植体来源，减少培养过程 中的微生物感染概率。同时，生长在控制条件下 的植物可以保持培养料间的一致性，提高实验的 可重复性，也便于培养技术的规范。
❖ 某些多年生植物或特殊材料，必须取自自然生长 的植物，就需要尽可能避免使用那些生长过于潮 湿和不洁净环境中的植物。对于培养过程中可能 出现内生菌污染的材料，应尽量取生长旺盛期的 生长点部位作为起始培养的材料。
任务四、植物脱毒技术
植物病毒对园艺植物的危害；脱毒技术； 脱毒苗鉴定；脱毒苗的保存和繁殖。
任务五、常见园艺植物的脱 毒与快速繁殖
马铃薯、苹果、草莓、兰花的脱毒快繁。
主要内容
1. 外植体选择与处理 2. 外植体培养 3. 试管苗驯化移栽 4. 快繁过程中出现的问题及解决办法
回顾知识点： ❖ 什么是外植体？
因此，外植体的采集尽量选用植物体最幼态的组织。
2、材料取材
(4)外植体的大小： 外植体越大，污染率越高，但也不能过小，越小成活率越 低。在通常情况下，叶片、花瓣等的面积约为5mm²，茎段 为0.5cm²，除非是用于去除病毒，否则不宜将外植体切得
过小。
一、外植体选择与处理
（二）外植体处理
1、外植体预处理 首先，将采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干 净，如用刷子刷洗。 把材料切割成适当大小，以能放入灭菌容器为宜。 置于自来水下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁轻度 为宜。细小的材料，可装入纱布袋内冲洗。洗时可加入洗衣粉清洗， 然后用自来水清洗洗衣粉水。目的是去除轻度附着在植物表面的污 物，除去脂质性的物质，便于灭菌液的直接接触。最理想的清洗物 质是表面活性物质——吐温。
植物组织培养技术
植物组织培养技术植物组织培养是70年代快速发展并趋成熟的现代生物技术，是在含有营养物质及植物生长调节物质的培养基中离体培养植物组织(器官或细胞)的技术。
它的理论依据是植物细胞的全能性，即植物体的每一个细胞都有分化成一个完整植株的潜在能力。
该技术在品种选育、名特优品种的快速繁殖、自然资源的保护、品种质量的提高、濒危植物种质保存等诸方面都表现出巨大的应用前景，取得了明显的经济效益。
组织培养前景广阔植物组织培养技术一诞生就表现了强大的生命力和美好的前景。
它在细胞学、遗传学、农学、生理学、生物化学等学科的基础理论研究中，成了一种常用的生物学技术;在实际应用中也发挥了巨大作用，取得了显著的经济效益和社会效益。
育种：通过组织培养技术，结合诱变育种技术，成功地培育出许多优良品种。
如抗黄化叶病的大麦品种;培育出脱病毒的马铃薯、甘蔗品种，使马铃薯产量增加十多倍;选育出早熟(比母本提早15天)、优质(含糖量9.5%)、高产(单果平均重106克)的京早三号桃(中科院植物所培育)等等，这些例子不胜枚举。
快速繁殖：应用组织培养技术可使某一个优良品种得到快速繁殖，可在一年内从一个芽或一张叶片，培养与繁殖成几十万或上百万株小苗，使得该优良品种很快得以推广。
如浙江省金华婺东葡萄良品场，1990年将日本引进的葡萄品种栽培成功后，我们通过快速繁殖，使每月的增殖系数达到6～9，可使一个芽在一年之内产生100万个芽。
快繁技术在花卉、果树等经济植物的优良品种繁育中，取得了良好的经济效益。
名、特、优、稀植物品种的保存与繁殖：许多名贵植物(如兰花)由于繁殖慢或困难，数量不多;而众多的野生植物(如花卉、药材)由于人们过度的采伐，变成濒危植物。
这些品种的保存与繁殖越来越显得重要与紧迫。
应用组织培养技术，不仅可以在实验室条件下保存种质，还可以进行工业化生产，大量繁殖来满足人类生活的需求。
无土栽培：现代正在快速推广的无土栽培技术，就是建立在组织培养的基础理论之上的，特别是无土栽培中的营养液成分，与组织培养的培养基配制基本相似。