【CN109705184A】一种连续化从鱼油残液中提取高纯度胆固醇的方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日
(21)申请号 201910160333.3
(22)申请日 2019.03.04
(71)申请人 河南省科学院高新技术研究中心地址 450002 河南省郑州市金水区红专路56号
(72)发明人 刘小培 李中贤 余学军 王俊伟 董学亮 杨旭光
(74)专利代理机构 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104代理人 时立新
(51)Int.Cl.C07J 9/00(2006.01)
(54)发明名称一种连续化从鱼油残液中提取高纯度胆固醇的方法(57)摘要本发明公开了一种连续化从鱼油残液中提取高纯度胆固醇的方法，属于化学工程技术领域。其包括以下步骤：（1）用氢氧化钾（或氢氧化钠）水溶液将鱼油残液皂化得到皂化液；（2）在多级串联离心萃取机中用正庚烷、乙酸乙酯混合溶剂逆流萃取皂化液得到萃取液；(3)在多级串联离心萃取机用水、甲醇和乙酸的混合溶剂逆流洗涤萃取液；（4）将经过洗涤的萃取液蒸馏回收溶剂，剩余物用乙醇重结晶得到高纯度胆固醇。本发明采用多级串联离心萃取机连续提取鱼油残液制备高纯度胆固醇，分离效果好，产品纯度高，制备量大，适合工业化生产，
应用开发前景良好。
权利要求书1页 说明书3页 附图1页CN 109705184 A2019.05.03
CN 109705184
A1.一种连续化从鱼油残液中提取胆固醇的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：
（A）用氢氧化钾或氢氧化钠水溶液皂化鱼油提取残液得到皂化液，所述氢氧化钾或氢
氧化钠的用量根据鱼油提取残液的皂化值确定；
（B）采用多级串联连续离心萃取体系，该体系由1~m级离心萃取机串联的萃取段和m+1~m+n级离心萃取机串联的洗涤段组成，萃取段和洗涤段之间串联，上一级萃取离心机的轻相
出口与下一级萃取离心机的轻相进口相连，下一级萃取离心机的重相出口与上一级萃取离
心机的重相进口相连；
皂化液从萃取段m级离心萃取机的重相进口进入，并依次通过m-1、m-2至第1级离心萃
取机，萃取剂从萃取段第1级离心萃取机的轻相进口进入，并依次通过2至m级离心萃取机，
逆流萃取皂化液；获得的萃取液直接进入洗涤段m+1级离心萃取机的轻相进口并依次通过m
+2至m+n级离心萃取机，洗涤剂从洗涤段第m+n级离心萃取机的重相进口进入并依次通过m+
n-1、m+n-2至m+1级离心萃取机，逆流洗涤萃取液；萃取液从洗涤段m+n级离心萃取机轻相出
口流出后获得胆固醇提取液；所述萃取剂选用正庚烷、乙酸乙酯体积比为1: 1.0-1.2的混
合液；所述洗涤剂选用水和甲醇体积比为3-4: 1，用乙酸调节pH值为3.7-4.5的溶液；
（C）将得到的胆固醇提取液蒸馏回收溶剂，剩余物用乙醇重结晶。
2.根据权利要求1所述的连续化从鱼油提取残液中提取胆固醇的方法，其特征在于，步
骤（B）所述的多级串联连续离心萃取体系中，萃取段离心萃取机数量m为3-5，洗涤段离心萃
取机数量n为2-5。
3.根据权利要求1所述的连续化从鱼油提取残液中提取胆固醇的方法，其特征在于，步
骤（B）所述的多级串联连续离心萃取机转速为2100-2800转/分钟。
4.根据权利要求1所述的连续化从鱼油提取残液中提取胆固醇的方法，其特征在于，步
骤（B）所述的多级串联连续离心萃取机中皂化液、萃取剂和洗涤剂的流速比为1-2：1：0.5-
1。权 利 要 求 书1/1页
2CN 109705184 A
【CN109906979A】一种斑马鱼高胆固醇模型建立的方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910309965.1(22)申请日 2019.04.17(71)申请人 上海大学地址 200444 上海市宝山区上大路99号(72)发明人 陈忠 武琳 崔倩 余翠 傅志伟 杨明 (74)专利代理机构 北京易捷胜知识产权代理事务所(普通合伙) 11613代理人 齐胜杰(51)Int.Cl.A01K 61/10(2017.01)
(54)发明名称一种斑马鱼高胆固醇模型建立的方法(57)摘要本发明涉及一种斑马鱼高胆固醇模型的构建方法，其包括如下步骤：S1、斑马雌雄成鱼以1:2～2:3的比例置于交配盒，交配后收卵，将健康的卵在28℃恒温培养，5天后显微镜下挑选健康斑马鱼幼鱼；S2、在蛋黄粉中添加胆固醇制作高胆固醇饲料，将不添加胆固醇的蛋黄粉作为普通饲料，用于饲养所述健康斑马鱼幼鱼；S3、将斑马鱼幼鱼用高胆固醇饲料连续培养后，同时用普通饲料喂养的斑马鱼幼鱼作为对照组，斑马鱼血管胆固醇积累量显著性高于对照组时，斑马鱼高胆固醇模型建成。本发明构建的斑马鱼高胆固醇模型的方法具有经济、简便、稳定、可靠等优点，斑马鱼高胆固醇模型可用于高血脂及其并发症的药物筛选、
毒性评估和机制研究等方向。
权利要求书1页 说明书5页 附图4页CN 109906979 A2019.06.21
CN 109906979
A1.一种斑马鱼高胆固醇模型建立的方法，其特征在于，其包括如下步骤：S1、斑马雌雄成鱼以1:2～2:3的比例置于交配盒，交配后收卵，健康的卵在28℃恒温培养，之后显微镜下挑选健康斑马鱼幼鱼；S2、在蛋黄粉中添加胆固醇制作高胆固醇饲料，将不添加胆固醇的蛋黄粉作为普通饲料，用于饲养所述健康斑马鱼幼鱼；S3、将斑马鱼幼鱼用高胆固醇饲料连续培养后，同时用普通饲料喂养的斑马鱼幼鱼作为对照组，斑马鱼血管胆固醇积累量显著性高于对照组时，斑马鱼高胆固醇模型建成。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述交配的时间为1.5h后收卵，所述培养的时间为5天。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述高胆固醇饲料中胆固醇在蛋黄粉中的添加量为质量百分比5％～12.5％。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述高胆固醇饲料的每天的喂养量为1.4mg/尾～3.2mg/尾。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述高胆固醇饲料中胆固醇在蛋黄粉中的添加量为质量百分比为5％，所述高胆固醇饲料的每天的喂养量为2mg/尾。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述高胆固醇饲料中还添加胆固醇示踪剂荧光胆固醇酯类似物，添加量为10μg/g。7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，在步骤S3中，所述胆固醇示踪剂荧光胆固醇酯类似物为CHOLESTERYL BODIPY 524/563 C11，采用乙醚作为有机助溶剂。8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S3中，所述连续培养为在28℃恒温培养8～10天。9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S3中采用只喂养添加有10μg/g的胆固醇示踪剂荧光胆固醇酯类似物的蛋黄粉为对照组，培养后共聚焦或体视荧光显微镜实时观察。10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述蛋黄粉为将新鲜鸡蛋煮熟，取出蛋黄，
酶解法提取大黄鱼内脏鱼油的工艺研究
酶解法提取大黄鱼内脏鱼油的工艺研究
张喆;梁鹏;许艳萍;孙雨晖
【摘 要】以大黄鱼内脏为原料，研究了碱性蛋白酶酶解法提取大黄鱼内脏中鱼油的效果。以大黄鱼内脏鱼油提取率为指标，考察了料夜比、酶添加量、pH值、酶解温度和酶解时间对鱼油提取率的影响，并采用正交试验化了酶解工艺条件。结果表明：最佳酶解提取鱼油的条件为：料液比1∶8（g/mL）、酶添加量1250 U/g、pH值为8.5、酶解温度50℃、酶解时间2 h，在上述条件下，大黄鱼内脏鱼油的提取率高达72.45%，而且所提取得到的鱼油符合国家二级精制鱼油的标准。%The fish oil was extracted from the viscera of large yellow croaker by
alkaline protease enzymatic hy-drolysis method.As the extraction rate of
fish oil as the experimental index to analyzed the effects of materials/water
ratio, amounts of enzyme,pH value, enzymolysis temperature and
enzymolysis time. The enzymatic ex-traction of fish oil was optimized by
orthogonal experiments. The results showed that the optimal extraction
con-ditions were as follows:amount of enzyme was 1 250 U/g at pH 8.5,
the materials/water ratio was 1∶8(g/mL) and lasted for 2 hours at 50℃.
羊毛醇中胆固醇提取工艺的研究
第52卷第12期 辽 宁 化 工 Vol.52，No.12 2023年12月 Liaoning Chemical Industry December，2023
基金项目：淮北市科技计划重大专项（项目编号：Z2020014）；安徽省三重一创重大专项（项目编号：HB-2017-ZX2）。 收稿日期：2022-12-05。 作者简介：郭庆（1980-），男，安徽省淮北市人，副研究员，高级兽医师，农学硕士，研究方向：天然药物的提取与纯化研发。 通信作者：徐宾朋（1974-），男，正高级工程师，研究方向：动物脏器精深加工。 羊毛醇中胆固醇提取工艺的研究
郭庆，赵露，李凯，徐宾朋﹡，赵厚发
（安徽科宝生物工程有限公司，安徽 淮北 235000）
摘 要：以羊毛醇为原料，通过皂化、萃取、浓缩结晶及重结晶等工序，建立了胆固醇的产业化工艺路线，研究了各工艺条件的影响。确定最佳工艺条件为：乙醇用量为羊毛醇质量的2倍，10%碱液用量为羊毛醇质量的1倍，时间为7 h；萃取剂为环己烷，用量为皂化液总质量的5倍，时间为60 min，重复萃取2次；结晶试剂为乙酸乙酯，用量为浓缩物质量的8倍，加热回流时间为1 h；重结晶试剂为无水乙醇，用量为胆固醇质量的8倍，pH值为10.5，回流时间为2 h，结晶温度为5~10 ℃。在上述工艺条件下，所得胆固醇产品的收率≥90%，含量（质量分数）≥95%，熔点≥147 ℃。 关 键 词：羊毛醇；胆固醇；皂化；萃取；重结晶 中图分类号：TQ041 文献标识码： A 文章编号： 1004-0935（2023）12-1768-04
羊毛脂是由羊皮脂腺分泌的酯类物质的多组分混合物, 主要是由脂肪酸与大致等量的脂肪醇、甾醇、三甲基甾醇等所形成的酯[1]。羊毛脂中含有10%～20%的胆固醇, 胆固醇是构成动物细胞膜的重要组成部分，也是合成胆汁酸、VD3、甾醇类激素等物质的前体，具有广泛的市场需求，同时也是化妆品、液晶等的主要原料[2]。我国羊毛脂资源非常丰富，每年约有2～3万t，但是利用率只有10%左右，其余被排放，造成巨大资源浪费[3]。 羊毛脂中胆固醇提取的关键是先将羊毛醇与羊毛酸分离，再从羊毛醇中提取胆固醇。从羊毛醇中提取胆固醇方法主要有：分子蒸馏法、柱层析法、微生物发酵法、配合法和溶剂选择结晶法等[4-6]。分子蒸馏法因对设备及操作条件有较高要求, 分出的胆固醇含量较低, 蒸馏残渣多；柱层析法因固有性质阻碍了大规模的应用；微生物发酵法，菌株的筛选很困难，在工业上很难实施；配合法和溶解选择结晶法的关键在于羊毛脂的皂化是否彻底。 本文以粗羊毛脂经预处理[7]得到的羊毛醇为原料, 采用溶剂选择结晶法，通过皂化、萃取、浓缩、结晶及重结晶等工序，优化工艺条件，建立了胆固醇的产业化工艺路线。
【CN109705094A】一种吡啶喹唑啉的制备方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日
(21)申请号 201910115651.8
(22)申请日 2019.02.15
(71)申请人 湖南速博生物技术有限公司地址 410000 湖南省长沙市高新区麓天路28号五矿麓谷科技产业园B4栋601
(72)发明人 刘鹏 王宇 胡志彬 杨彬
(51)Int.Cl.C07D 401/12(2006.01)
(54)发明名称一种吡啶喹唑啉的制备方法(57)摘要本发明公开了一种吡啶喹唑啉的制备方法，以2-甲基-4-(全氟丙烷-2-基)苯基氨基甲酸酯为原料，经乙酰化、氯化、水合肼成环，最后与3-卤甲基吡啶反应得到含量97.5%～98.5%的吡啶喹唑啉，总收率为59.0～63.0%(以2-甲基-4-(全氟丙烷-2-基)苯基氨基甲酸酯计)。本发明避免了催化氢化等危险工艺，缩短了反应步骤，提供了一种成本低及工艺操作简单安全的吡啶喹唑
啉的制备方法。
权利要求书2页 说明书5页CN 109705094 A2019.05.03
CN 109705094
A1.一种吡啶喹唑啉的制备方法，其特征在于：以2-甲基-4-(全氟丙烷-2-基)苯基氨基
甲酸酯为原料，经乙酰化反应、氯化反应、水合肼成环反应，最后与3-卤甲基吡啶缩合四步
反应得到含量97.5%～98.5%的吡啶喹唑啉，总收率为59.0～63.0%，反应式如下。
2.根据权利要求1所述的吡啶喹唑啉的制备方法，其特征在于所述的乙酰化反应中乙
酸酐为乙酰化试剂，2-甲基-4-(全氟丙烷-2-基)苯基氨基甲酸酯：乙酸酐：甲醇钠摩尔比为
1:1.2:1.2，溶剂甲苯用量为2-甲基-4-(全氟丙烷-2-基)苯基氨基甲酸酯质量的5～8倍，滴
加乙酸酐时间30分钟，再回流反应4小时，反应液用饱和碳酸钠水溶液洗涤两次，有机物减
压蒸馏回收溶剂后得到甲基乙酰基(2-甲基-4-(全氟丙烷-2-基)-苯基)氨基甲酸酯。
【CN109912471A】一种连续快速水解2羟基4甲硫基丁腈合成蛋氨酸羟基类似物的方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日
(21)申请号 201910262242.0
(22)申请日 2019.04.02
(71)申请人 禄丰天宝磷化工有限公司地址 675000 云南省楚雄彝族自治州禄丰县勤丰镇沙龙村
(72)发明人 周荣超 廖常福 彭启明
(74)专利代理机构 云南派特律师事务所 53110代理人 董建国
(51)Int.Cl.C07C 319/20(2006.01)C07C 323/52(2006.01)
(54)发明名称一种连续快速水解2-羟基-4-甲硫基丁腈合成蛋氨酸羟基类似物的方法(57)摘要本发明提供一种连续快速水解2-羟基-4-甲硫基丁腈合成蛋氨酸羟基类似物的方法，将酸与2-羟基-4-甲硫基丁腈通入负载了一种固体催化剂的微通道反应器内进行反应，控制反应温度为80～130℃，压力为0.1～0.5MPa，反应物在微通道内的停留时间为1～10min，从微通道反应器流出的混合液体加水后继续水解20～60min，反应温度为100～140℃，反应压力为0.1～0.6MPa，得到蛋氨酸羟基类似物，副产少量硫酸铵。本发明实现了快速连续的蛋氨酸羟基类似物制备，避免了传统间歇塔釜装置，减少了50%无机酸的使用，无需氨水中和，不使用有机溶剂，清洁环保可持续；且大大缩短了2-羟基-4-甲硫基丁腈的酸解时间，减少原料热解聚合及其副产物生成，提高
了产品质量和收率。
权利要求书1页 说明书5页CN 109912471 A2019.06.21
CN 109912471
A1.一种连续快速水解2-羟基-4-甲硫基丁腈合成蛋氨酸羟基类似物的方法，其特征在
于，其方法为：将酸与2-羟基-4-甲硫基丁腈加入负载了一种固体催化剂的微通道反应器进
行反应，控制反应温度为80～130℃，压力为0.1～0.5MPa，反应物在微通道内的停留时间为
1～10min，从微通道反应器流出的混合液体加水后继续水解20～30min，反应温度为100～
【CN109705184A】一种连续化从鱼油残液中提取高纯度胆固醇的方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日
(21)申请号 201910160333.3
(22)申请日 2019.03.04
(71)申请人 河南省科学院高新技术研究中心地址 450002 河南省郑州市金水区红专路56号
(72)发明人 刘小培 李中贤 余学军 王俊伟 董学亮 杨旭光
(74)专利代理机构 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104代理人 时立新
(51)Int.Cl.C07J 9/00(2006.01)
(54)发明名称一种连续化从鱼油残液中提取高纯度胆固醇的方法(57)摘要本发明公开了一种连续化从鱼油残液中提取高纯度胆固醇的方法，属于化学工程技术领域。其包括以下步骤：（1）用氢氧化钾（或氢氧化钠）水溶液将鱼油残液皂化得到皂化液；（2）在多级串联离心萃取机中用正庚烷、乙酸乙酯混合溶剂逆流萃取皂化液得到萃取液；(3)在多级串联离心萃取机用水、甲醇和乙酸的混合溶剂逆流洗涤萃取液；（4）将经过洗涤的萃取液蒸馏回收溶剂，剩余物用乙醇重结晶得到高纯度胆固醇。本发明采用多级串联离心萃取机连续提取鱼油残液制备高纯度胆固醇，分离效果好，产品纯度高，制备量大，适合工业化生产，
应用开发前景良好。
权利要求书1页 说明书3页 附图1页CN 109705184 A2019.05.03
CN 109705184
A1.一种连续化从鱼油残液中提取胆固醇的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：
（A）用氢氧化钾或氢氧化钠水溶液皂化鱼油提取残液得到皂化液，所述氢氧化钾或氢
氧化钠的用量根据鱼油提取残液的皂化值确定；
（B）采用多级串联连续离心萃取体系，该体系由1~m级离心萃取机串联的萃取段和m+1~m+n级离心萃取机串联的洗涤段组成，萃取段和洗涤段之间串联，上一级萃取离心机的轻相
出口与下一级萃取离心机的轻相进口相连，下一级萃取离心机的重相出口与上一级萃取离
心机的重相进口相连；
皂化液从萃取段m级离心萃取机的重相进口进入，并依次通过m-1、m-2至第1级离心萃
【CN109796328A】一种高纯度香榧籽油金松酸的分离方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日
(21)申请号 201910194545.3
(22)申请日 2019.03.14
(71)申请人 浙江工业大学地址 310014 浙江省杭州市下城区潮王路18号
(72)发明人 孟祥河 肖丹 杨奇波 宋丽丽 吴家胜 叶沁
(74)专利代理机构 杭州千克知识产权代理有限公司 33246代理人 冷红梅
(51)Int.Cl.C07C 51/42(2006.01)C07C 57/03(2006.01)
(54)发明名称一种高纯度香榧籽油金松酸的分离方法(57)摘要本发明涉及一种高纯度香榧籽油金松酸的分离方法。本发明用区域选择性脂肪酶TLIM或RMIM适度催化香榧油、乙醇酯交换反应，实现金松酸初步富集，然后尿素包合除去饱和脂肪酸与低饱和度不饱和脂肪酸后进一步纯化金松酸。本发明通过选择适宜的香榧品种、1,3-选择性脂肪酶，优化固定化酶醇解条件及尿素包合参数，获得了高纯度的香榧金松酸分离方法。因此该富集方法具有设备简单、高效、绿色、富集纯度高等优
点。
权利要求书1页 说明书6页CN 109796328 A2019.05.24
CN 109796328
A1.一种高纯度香榧籽油金松酸的分离方法，所述方法包括：
(1)香榧籽油与95％乙醇按照料液质量比1:3～5混合，加入脂肪酶TLIM或RMIM，30～50
℃下进行酶促转酯化反应3～8h；
(2)按照尿素质量浓度30～40％将尿素加入乙醇中，水浴回流加热制成溶液，再按照脂
肪酸乙脂、尿素质量比为0.2～0.5:1，加入步骤(1)制得的混合脂肪酸乙酯，继续加热回流
2h得乙醇-尿素-香榧籽油混合乙酯混合液；
(3)将步骤(2)所得的混合液冷却至室温后静置在4～20℃条件下包合结晶6～8h，取出
后迅速冷抽滤分离，并分别用尿素饱和的95％乙醇溶液及3～5％盐酸氨溶液洗涤结晶物2
～3次，收集滤液；