对虾免疫

1 蒙古裸腹蚤在海水鱼类育苗上的应用研究 脂类 一般认为对虾饲料中脂肪含量为4%～8%，而以6%为佳，脂肪可提供能量，卵磷脂是细胞膜组成的重要成分，一般卵磷脂的添加量为1%为好。对虾对胆固醇在饲料中一般可添加0.5%～1%。因为许多激素和维生素的合成需要胆固醇。在饲料中应有2%鱼油。 维生素C 维生素C是一类相对分子质量较低的活性物质，对虾不能自身合成，虽需求量很小，但对其生命活动具有重要作用。维生素C在对虾的生理活动中具有极为重要的作用，具有广泛的生理功能：有助于胶原蛋白的形成，是微血管和结缔组织中不可缺少的成分；能提高肝脏解毒能力；能诱发多功能氧化酶的活性，加强对药物的异化作用，可提高机体的抗病力；能保护微血管，预防坏血病，帮助虾体伤口的愈合；对对虾的蜕皮和生长有一定促进作用。 因为维生素C在空气中易被氧化，所以添加在饲料中应使用含量90%的包膜维生素C，添加量为0.1%。为防止维生素C的损失，可把配好的维生素C液用喷雾器喷在加工好的饲料上。将500克维生素C溶解在2000克水中，再加1000克鸡蛋清或用1500克的海带粉充分混合后，把对虾饲料躺开均匀喷在50000克的饲料上晾干或用电风扇吹干后投喂。当天喷当天喂，这样操作损失少，成本较低。 大蒜 在对虾饲料中可加入适量的大蒜，因大蒜含有大蒜素有强烈的诱食性和广效杀菌作用，对防治对虾弧菌病效果很好，还能预防多种原生动物、细菌、霉菌引起的病害，对烂眼病和红腿病有特效，其添加量以5%为宜，即1公斤饲料加50克大蒜，生大蒜可压碎榨汁与饲料混合。 一、 南美白对虾病毒病发生的特点 1. 病毒对宿主易感性强 这是因为：①对虾是较低等的水生动物，相对鱼类来说它们的器官构造与机能较为简单，免疫系统相对低下，除了具有一些非特异性免疫功能外，目前还缺乏它具有特异性免疫机能的有力证据。②由于对虾具有脱壳的生理特点，在脱壳前停止进食，脱壳后身体又十分柔软，在此期间它们的活动能力很弱，常躲在水中阴暗处，对病原体和敌害的抵抗能力很差，这个阶段病原体极易感染。③对虾的鳃位于胸部附肢基部，也可看成颚足和步足的附属物，与水域环境直接接触，在进行呼吸机能时，恶劣的环境条件对其影响更大；此外有时它的鳃还兼负着排泄功能，因此病原体较易感染或较易经鳃进人体内。④对虾生长、发育的生命周期较短，体内各器官形成较快、也较低等和简单；较快的新陈代谢或较低等的器官构造导致它对病原体的抵抗能力较弱。 2. 发病率高、死亡率高 病毒病一般发病率、死亡率极高，病毒病发生后导致全军覆没的情况也十分普遍。如白斑综合症病毒病死亡率可高达80%～90%，桃拉综合症发生后，其死亡率更是高达80％～100％。 3. 病程进展快 南美白对虾的循环系统是开放式的，病原体感染后，均较易经血淋巴送至靶器官或全身各部位，导致疾病的快速发展，从发病到大量死亡往往只需3～4天时间。如患白斑综合症病毒病的白对虾一般3～10天内大量死亡。 4. 环境的恶化是诱发病毒病发生的一个重要原因 南美白对虾对环境因子的变化非常敏感，环境的恶化极易导致疾病发生，如①气温剧变，特别是水温超过28℃后。②水体透明度过低，小于20厘米。③氨氮含量高达0.5毫克/升以上。④溶解氧含量低，低于2.5毫克/升。⑤水体pH偏酸或pH高于9.0等等，它们使南美白对虾摄食减少，体质下降，为病毒的感染创造了条件。 此外，南美白对虾从咸水到淡水的淡化过程中，虾的各个器官的生理功能都相应处在较低下的程度，在它适应盐度的变化过程中，病毒病原体较易感染白对虾，此阶段环境因子的任何异常都会导致疾病的发生或导致随后疾病的发生，从而诱发病毒病。 5.病毒、细菌同时感染、互为感染条件的情况普遍 丁燏等（2000）研究发现病毒性流行病的暴发前期可能是由弧菌先感染，虾体免疫力下降，此时病毒可在短短几小时或十几个小时内大量增殖。也有学者认为先病毒感染，然后为细菌感染提供条件。总之，病毒、细菌的同时感染、互为感染的情况非常普遍，加重了病毒病的病情。 7. 还缺乏有效的治疗手段 病毒因其不能独立生活，须寄生于细胞内，并在体内大量繁殖复制，对其的治疗，从理论上须杀灭细胞，从而达到消灭病毒的目的，这显然是不现实的。通过提高白对虾自身免疫力来控制病毒是一个比较理想的途径，但对虾的免疫功能非常低下，这些都使得病毒病缺少有效的治疗手段。 二、南美白对虾病毒病的感染传播机制 病毒通过细胞破裂或从虾体细胞膜表面出芽的方式传播到其他细胞，也可通过水平传播的途径感染其它的对虾个体，对虾被病毒感染后，其组织器官功能降低或丧失，随后造成对虾死亡。 目前的研究表明，对虾病毒可能以下列方式进行传播： 1. 水平传播 2

通过带病毒的病虾、死虾、海水、污泥等病源传播，南美白对虾感染病毒后，病毒在细胞内进行繁殖，破坏对虾血液和肝胰细胞功能，导致对虾死亡，然后病毒释放到水中，感染新的宿主。其主要途径有：①虾池污泥；②未经消毒的海水；③媒介生物，如虾池中其它甲壳动物（包括野生的虾类、蟹类）与桡足类等；④虾池中病虾、死虾；⑤摄食过带病毒的对虾的飞鸟、池边鼠类等。⑥被病毒污染饵料等。 2.垂直传播 即通过带病毒的亲虾将病毒传播给虾苗。对于这一传播途径存在着较大的可能，但目前尚缺少直接证据。 三、南美白对虾的主要病毒病 1. 白斑综合症 ⑴病原 病毒为白斑综合症病毒，目前它们分类地位尚未确定，在Lightner等(1996)将这类病毒暂命名WSSV之前，其称呼有13种之多，它们均是一类无包涵体的杆状病毒。双链DNA，具有脂双层囊膜。病毒大小约为（129～164）纳米×(365～412)纳米。最早完成基因组全序列测定的是海洋局第三研究所徐洵(2000)，VanHulten(2001)认为WSSV的基因组为293.0kb。 ⑵ 症状与病理 初期病虾厌食，离群、不摄食，行动迟缓，肠胃内无食物，偶尔间断浮出水面；中期病虾在池边独游或潜伏池底；头胸甲及腹甲容易揭开而不粘连，体表常附有粘物，甲壳内侧白点，特别是头胸甲剥离后可见有黑白相间的不规则的斑点，有时变为淡黄色。发病后期典型的症状为体色稍变红或灰白，血淋巴浑浊，肝胰脏肿大、糜烂，呈现淡黄色或灰白色。 病灶在甲壳下上皮、结缔组织、造血组织等组织中，病理观察可见病变胞核肿大，核内H-E染色着色深且均匀，染色质与核仁消失。严重者核膜破裂，病毒粒子分散于细胞质中，细胞质混浊，细胞形态模糊不清；组织结构松散，呈现组织坏死状态。 ⑶ 流行情况 主要发生在6～8月份，传播迅速，蔓延广，一月龄左右的幼虾易被感染，一般3～10 d内大量死亡，死亡率可高达80%～90%，是当前最常见的南美白对虾暴发性流行病之一。与斑节对虾混养中，会出现交叉感染及继发感染病害。 2 桃拉病毒病 ⑴病原 病原为桃拉病毒，它属细小核酸病毒科的单链RNA病毒，该病毒无囊膜、有包涵体，大小30～32纳米、呈二十面体，在CsCl中的浮密度为1.338毫克/升。其衣壳为蛋白质，包括三个主要的和一个次要的多肽。TSV主要在细胞质中增殖，受外界因素的影响较小，若其感染条件得以基本满足，就可能在该地区定殖。病毒一般寄生于虾表皮的上皮细胞的细胞质中。但病毒感染后对虾不一定发病，其中环境因子是疾病诱发的重要原因之一。 ⑵症状与病理 早期对虾群体常出现环游现象，虾体无明显改变，仅尾扇出现蓝色斑点或有少量微小的白色斑点。肉眼分不出肝脏和心脏，只能看出肝脏肿大或变淡红。病毒感染后2～3天食欲猛增，大触须变红，肌肉变浑浊。后期肝胰脏肿大，变白；红须、红尾，壳软，体色变茶红色，尤其是尾扇和胸甲变红，部分病虾甲壳与肌肉容易分离，头胸甲有白斑；大部分病虾肠道发红且肿胀，镜检发现红色素细胞扩张；病虾摄食减少或不摄食，在水面缓慢游动，离水后即死亡，久病不愈的病虾甲壳上有不规则的黑斑。 病理切片显示角质及角质下层坏死，细胞质内有“胡椒状”包涵体，H—E染色出现从嗜曙红到强碱性反应，核固缩或破碎，炎症病灶处血细胞浸润。 ⑶流行 桃拉病毒病因首例病例发生在1992年厄瓜多尔的桃拉河河口附近而得名，是南美白对虾特有的病毒性疾病。其病原随从国外引进的亲虾而传播到我国，1999年始发于台湾地区，2000年以来随着我国南方各省规模化养殖南美白对虾，该病在广东、广西、海南等省区沿海海水养殖南美白对虾密集区中均有发现。 该病可发生于整个养殖期，一般出现在虾苗放养后的10～40天期间，一旦发病可造成40％～90％的幼虾死亡。急性传播时，死亡率可高达60％～90％，死亡大多数发生在虾脱皮间或脱皮后。该病特点是病程短，发病迅速，死亡率高，一般发现病虾至病虾不摄食仅5～7天，10天左右出现大规模死亡，在环境恶化时，死亡加剧。成虾感染此病多属慢性。 3 黄头病 ⑴病原 黄头症病毒，呈杆状，有囊膜，有囊膜，单链RNA，病毒粒子（50～95）纳米×（130～380）纳米，属单链RNA病毒。 ⑵ 症状与病理 病虾摄食量剧减，游动迟缓，头胸甲呈黄色或发白，膨大，鳃变成淡黄色到棕色，肝胰腺变成淡黄色。主要感染鳃组织、淋巴器官、血细胞和结缔组织等。该病毒毒力较强，养殖对虾被病毒感染后常常1d内完全停止摄食，3～5天内可全军覆灭。 ⑶流行 该病首先在印度斑节对虾的精养塘中发现，后在东南亚地区如泰国、中国、马来西亚、印尼等地流行。它可引起包括南美白对虾在内的多种对虾发病，并可与WSSV合并感染，危害幼虾、成虾。 4 传染性皮下及造血器官坏死病 南美白对虾也能被IHHNV感染，并引起发病，但对IHHNV有一定的抵抗性，并不引起南美白对虾明显的死亡。养殖的南美白对虾被慢性感染，结果会表现出体小综合症（RDS）[21]。 ⑴病原体 传染性皮下及造血器官坏死病病毒为球形，无囊膜，直径22纳米，属单链DNA细小病毒科。病毒粒子呈二十面体立体对称。具有一个4.1Kb的单链RNA基因组和核内复制体。 ⑵ 症状与病理