反相高效液相色谱法测定烟碱的含量
烟碱含量测定方法
烟碱含量测定方法烟碱（Nicotine）是烟草中的一种主要成分，也是烟草制品中的一种重要物质。
烟碱的浓度与烟草制品的烟碱含量直接相关，因此，准确测定烟碱含量对于烟草行业具有重要意义。
本文将介绍几种常用的烟碱含量测定方法。
一、气相色谱法气相色谱法是一种常用的烟碱含量测定方法。
首先，将烟草样品加入适量的溶剂中，进行提取。
然后，将提取液注入气相色谱仪中进行分析。
在气相色谱仪中，烟碱会与气相载气相互作用，通过气相色谱柱进行分离，并通过检测器进行定量分析。
最后，根据峰面积或峰高与标准曲线的关系，计算出烟草样品中烟碱的含量。
二、高效液相色谱法高效液相色谱法也是一种常用的烟碱含量测定方法。
与气相色谱法类似，首先将烟草样品加入适量的溶剂中进行提取。
然后，将提取液注入高效液相色谱仪中进行分析。
在高效液相色谱仪中，烟碱会与固定相相互作用，在流动相的作用下进行分离，并通过检测器进行定量分析。
最后，根据峰面积或峰高与标准曲线的关系，计算出烟草样品中烟碱的含量。
三、紫外分光光度法紫外分光光度法是一种简单快速的烟碱含量测定方法。
首先，将烟草样品制备成溶液，并将其置于紫外可见光谱仪中进行测定。
烟碱在紫外光波段有特定的吸收峰，通过测量吸光度，可以计算出烟草样品中烟碱的含量。
需要注意的是，由于烟草样品中可能存在其他物质的干扰，因此在测定前需要进行样品预处理，以消除干扰。
四、荧光光谱法荧光光谱法是一种高灵敏度的烟碱含量测定方法。
首先，将烟草样品制备成溶液，并将其置于荧光光谱仪中进行测定。
烟碱在激发光波长下会发射特定的荧光，通过测量荧光强度，可以计算出烟草样品中烟碱的含量。
与紫外分光光度法类似，荧光光谱法也需要进行样品预处理以消除干扰。
烟碱含量测定方法有气相色谱法、高效液相色谱法、紫外分光光度法和荧光光谱法等多种。
不同的方法适用于不同的实际情况，选择适合的方法可以提高测定结果的准确性和可靠性。
烟草行业可以根据自身需求选择合适的测定方法，确保产品质量的控制和监测。
高效液相色谱同时检测不同类型烟叶中的多种生物碱含量
基金项目：吉林烟草工业有限责任公司科技项目（JSZX-2019-03）
作者简介：林雨晟（1996-），女，在读研究生，主要从事烟草栽培与生理生化研究。E-mail：linyuchenfei523@
Simultaneous Determination of Alkaloids in Different Types of Tobacco by
HPLC
LIN Yucheng1, JIN Hongshi2, ZHANG Haonan1, JIN Jianghua2, GUO Wei2, LI Yu’e2, ZHAO Mingqin1, LIU Pengfei1*
色谱条件：岛津 Shim pack GIST C18（250 mm ×4.6 mm，5 μm），流动相 A（90%水+10%甲醇， pH 6.8，0.15%醋酸钠），流动相 B（90%甲醇+10% 水，pH 3.8），柱温：35 ℃；进样量：20 μL。
梯度洗脱程序为：0 min (0% B)-8.0 min (0% B)-15.0 min (4% B)-23.0 min (26% B)-34.0 min (35% B)-38.2 min (36% B)-39.0 min (40% B)-41.5 min (40% B)- 44.6 min (0% B)。 1.2.3 提取溶剂的筛选 分别配制 2%、4%、6%的 盐酸溶液、氢氧化钠溶液和氨水溶液以及 0%、5%、 10%的甲醇水溶液。称取各烟叶样品 100 mg，分别 放入锥形瓶中，加入溶液 20 mL，振荡提取 30 min， 过滤至 50 mL 容量瓶中，定容后取 10 mL 移至 100 mL 容量瓶中用对应溶液稀释定容，用磷酸或氢氧 化钠溶液调节至 pH：5（使用甲醇的处理不需要调 节 pH 值），待检测。 1.2.4 提取时间的影响 称取 100 mg 烟叶样品， 放入锥形瓶中，加入 5%甲醇水溶液 20 mL，分别 提取 10、15、20、25、30 min，过滤至 50 mL 容量 瓶中，定容后取 10 mL 移至 100 mL 容量瓶中，用 5%甲醇水溶液稀释定容，待检测。 1.2.5 提取温度的影响 称取 100 mg 烟叶样品， 放入锥形瓶中，加入 5%甲醇水溶液 20 mL，分别 在 25、30、35、40、45 ℃的条件下提取 30 min， 过滤至 50 mL 容量瓶中，定容后取 10 mL 移至 100 mL 容量瓶中，用 5%甲醇水溶液稀释定容，待检测。 1.2.6 料液比的影响 分别称取 50、100、150、200、 250 mg 烟叶样品，放入锥形瓶中，加入 5%甲醇水 溶液 20 mL，提取 30 min，过滤至 50 mL 容量瓶中， 定容后取 10 mL 移至 100 mL 容量瓶中，用 5%甲醇 水溶液稀释定容，待检测。
反相高效液相色谱法测定止嗽扫痰丸中盐酸麻黄碱含量
药物 鉴定
反相高效液相色谱法测定止嗽扫痰丸 中盐酸麻黄碱含量
张 虹 谢俊峰 樊钰库 ， ，
（．－ 夏 回族 自治 区人 民医院 ， 夏 银川 ７ ０ ０ ； ２ １７ ７ － ５ ０ １ ．宁夏 回族 自治 区隆德 县人 民医院 ， 宁夏 隆德 ７ ６ ０ ； ５ ０ ３ ３ ．宁夏 回族 自治 区 固原市 人 民医院 ， 宁夏 固原 ７ ６ ０ ） ５ ０ ０
Ａ ｓ ａ ｔ ｊｃｉ ｏｅｔｂ ｓ Ｐ Ｈ Ｌ ｅ ｏ ｒ ｈ ｏ ｔｎ ｄ ｔ ｍ ｎ ｔ ｎｏ ｅ ｈ ｄ ｎ ｙ ｒ ｈ ｒ ｅｉ Ｚ ｉ ｓｏ ｎ Ｐ ｌ Ｍｅｈ ｄ ｈ ｂ ｔ ｃ ： ｅ ｔ ｅＴ ｓ ｌ ｈａ Ｒ — Ｐ Ｃ ｍ ｔ ｄ ｆ ｅｃ ｎｅ ｔ ｅ ｒ ｉａ ｏ ｆ ｐ ｅ ｒ ｅｈ ｄｏ ｌ ｉ ｈｋ ａ ｔ ｉｓ ｔ ｏ ｓＴ ｅ ｒ Ｏｂ ｖ ａ ｉ ｈ ｏｔ ｅ ｉ ｉ ｅ ｏｄ ｎ ｅ ａ ｌ，
ｗ ｖ ｌｎ ｔ ａ ｔ２ ７ｎ ＬＲｅ ｕ ｔ ｈ ａ ｉｒ ｔ ｎ ｃ ｒｅ ｏ ｐ ｅ ｒ ｅ ｈ ｄ ｏ ｈｏ ｄ ａ ｍｖ ｄ ｔ ｅ ｌ ｅ ｒ ｉ ｈ ａ ｇ ｆ０ ０ ７—６ ７ ０ ａ ｅｅ ｇ ｈ ｗ ｓ ａ ０ ｎ ｓ ｌ Ｔ ｅ ｃ ｌ ａ ｉ ｕ ｖ ห้องสมุดไป่ตู้ ｆｅ ｈ ｄ ｎ ｙ ｒ ｃ ｌｒ ｅ ｗ ｓ ｐ ｅ ｏ ｂ ｉ ａ ｎ ｔ ｅ ｒｎ ｅ ｏ 。 ６ ｓ ｂ ｏ ｉ ｉ ｎ ．０
摘要 ： 目的 建 立 测 定止嗽 扫痰 丸 中盐酸 麻 黄碱 含 量 的反 相 高 效 液相 色谱 （ Ｐ—Ｈ Ｌ ） 。 法 色谱 柱 为 Ｋｏ ａｉＣｓ （５ ｍ× ． ｍ， Ｒ ＰＣ 法 方 ｒｍ ｓ ｉ柱 ２ ０ｍ ４ ６ｍ ｌ
反相高效液相色谱法测定消渴灵片中盐酸小檗碱的含量
河 北医药 ２０ ０７年 ６ 月第 ２ ９卷第 ６ 期
Ｈ ｂｉ ｅｉ ｌｏｒａ，ｕ ０７ Ｖ ｌ ９Ｎ ． ｅｅ Ｍ ｄ ａ Ｊｕｎ Ｊｎ２０ ， ｏ ２ ， ｏ６ ｃ ｌ
・
６３ ７
药 物 研究 与 分 析 ・
反相 高效液相色谱 法测定消渴灵 片 中 盐 酸 小 檗 碱 的含 量
二烷基磺酸钠 ） 为流动相 ， 检测波长 ２５ａ 流速 １０ ｌ ｉ 柱 ６ ｍ， ． ｍ／ ｎ ｍ ，
温 ４ｃ ｏｃ。
２ ２ 对照 品溶 液的制 备 精密 称取盐 酸小 檗碱 对照 品 １ ａ ． ０ｎ ｇ
质量监控 。
１ 仪器 与试 剂
置 １ ｌ ０ ｍ 量瓶 中 ， 甲醇一 酸（０ ：） 溶解 ， ０ 加 盐 １ Ｉ使 ０ 并稀释 至刻度 ， 摇匀， 精密量取 ５ｎ 置 ２ ｌ ｌ ５ ｌ ｌ ｎ 量瓶 中， 甲醇一 （０ ：） 加 盐酸 １０ １至刻
方 法重现性 良好 ，Ｓ ０６％（ ＲＤ＝ ． ６ ｎ＝ ） ５。
２ ８ 加样 回收率试验 ． 精 密称取 已知含量 的供试 品 （ 号） 批 适 量， ５ ， 共 份 分别精密加入盐酸 小檗碱 对照 品适 量 ， 依法 测定含 量 。计算 ， 均加样 回收率 为 ９ ．ｏ Ｒ Ｄ＝０ ３ ％（ｎ ＝５ 。 平 ９ ９ ％， Ｓ ．８ ）
３ 讨 论
作者单位 ： ５０５ 石家庄市 ， ００ ３ 河北 以岭药业集团质检科
３ １ 流动相的选择 ．
采用 高效液 相色 谱法测 定盐 酸小檗碱 含
见图 １ 。
￣ ，４ １６ ４９
｛
｛ ｝ｌ
ｆ
｝
对照 品（ ） 品 Ａ样
（ 阴 性 样 品 Ｂ）
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
生物碱是植物次生代谢产生的特殊含氮有机 制品的感官评吸质量、烟气特征和安全性[1-4]．前人
化合物．烟草中的生物碱主要有烟碱、降烟碱、新 已对烟叶烟碱和降烟碱积累的影响参数及这些参
1.4 统计分析方法
采用 SPSS10.0 统计软件包进行统计特征分析、方 差分析、多重比较和相关性分析[19]．总生物碱含量为 烟碱、降烟碱、假木贼碱、新烟草碱的含量和；总微 碱含量为降烟碱、假木贼碱、新烟草碱的含量和；烟 碱转化率=降烟碱含量/(烟碱含量+降烟碱含量) [2-4]．利 用 DPS6.5 统计软件包进行趋势面分析[20]．
GAO Zhi-qiang1，DENG Xiao-hua2*，ZHOU Qing-ming1，ZHOU Ji-heng1，ZENG Zhong-ping2 (1. Research Center of Tobacco Engineering and Technology，HNAU， Changsha 410128，China；2. Hunan Yongzhou Vocational and Technical College，Yongzhou，Hunan 425000，China)
根据样本微量生物碱含量的大致范围将其分 为 4 组，统计各组样本的百分率(图 1 至图 3)，不同 等级烤烟的微量生物碱含量分布差异较大．对降烟 碱来说，B2F 大多数样本分布在＞0.04%组；X2F 主要分布在＜0.02%组；C3F 在＜0.02%组分布较 少，而在其他 3 个组分布较多．对假木贼碱，B2F 大多数样本分布在＞0.014%组；X2F 主要分布在＜ 0.01%组；C3F 在＜0.01%组分布较少，而在其他 3 个组分布较多．对新烟草碱，B2F 大多数样本分布 在 0.09%～0.12%组；X2F 主要分布在＜0.06%组； 而 C3F 主要分布在 0.06%～0.09%组．
高效液相色谱法测定卷烟烟气总粒相物中的烟碱
高效液相色谱法测定卷烟烟气总粒相物中的烟碱
谢笑天;郑萍;朱伟明;赵革玲
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】2000(028)009
【摘要】采用反相高效液相色谱内标法测定卷烟烟气总粒相物中的烟碱含量,内标物为对氨基苯磺酸,方法的平均回收率为99.7%～100.1%,精密度好,操作简便、快速,可作为检测烟碱的一种可靠方法.
【总页数】3页(P1085-1087)
【作者】谢笑天;郑萍;朱伟明;赵革玲
【作者单位】云南师范大学化学系,昆明,650092;云南师范大学化学系,昆
明,650092;云南师范大学化学系,昆明,650092;云南省烟草质量监督检验站,昆明,650106
【正文语种】中文
【中图分类】O65
【相关文献】
1.光度法测定卷烟烟气总粒相物中烟碱有关问题的讨论 [J], 海晓民
2.用HPLC法测定卷烟总粒相物及烟碱盐中的烟碱含量 [J], 黄注传;朱子高
3.气相色谱法测定卷烟烟气总粒相物中的烟碱 [J], 黄晖;黄海东
4.卷烟烟气总粒相物中烟碱含量的测定方法研究 [J], 马明;穆怀静
5.气相色谱-质谱法测定卷烟烟气总粒相物中14种芳香胺 [J], 石杰;程玉山;刘婷;刘惠民;夏巧玲;徐鹏
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
我国是烟草大国,每年烟草产量在500万t 以上。
烟草中含有多种生物碱,其中烟碱又名尼古丁(nicotine ,NTC ),含量最高,约占烟草生物碱总量的95%。
我国新的国家标准对卷烟及其烟气提出了较为严格的要求,增加了烟气中烟碱含量的考核项目,并要求使用气相色谱法测定总粒相物中的烟碱。
目前,烟草行业测定烟草中烟碱含量的方法主要有硅钨酸重量法[1]、流动分析法[2]、紫外分光光度法[3-4]及气相色谱法[5-6]。
其中,用紫外分光光度法测定烟碱的前处理较为费时,不利于快速分析。
硅钨酸重量法可得到较为准确的结果,但缺点一是分析时间过长(一次分析周期为24~48h );二是不能区分烟碱和降烟碱,测定结果是烟碱类植物碱的总和;三是当溶液中有铰盐等无机盐存在时,不易形成沉淀,干扰测定。
气相色谱法具有快速、准确、灵敏的特点,但其易受到样品中物质沸点的限制。
高效液相色谱法已广泛应用于各个行业,不仅试剂使用量少,灵敏度高,还可以批量检测,因而开发液相色谱法测定烟草中烟碱含量具有重要意义。
1材料与方法1.1试验材料烟草样品由江苏中烟工业有限责任公司淮阴卷烟厂提供。
甲醇、0.01mol/L 氢氧化钠溶液、0~350mg/L 的五级烟碱工作溶液、磷酸盐缓冲溶液;试验用水均为超纯水。
主要仪器:Agilent1200高效液相色谱仪(美国Agilent 公司);电子天平,精确至0.1mg (瑞士梅特勒-托利多公司);振荡器。
1.2试验方法1.2.1试验准备与色谱条件。
称取烟末0.20g ,置于50mLPET 小瓶中,用定量加液器准确加入50mL 0.01mol/L 氢氧化钠溶液,在振荡器上以200r/min 的速度振荡30min ,静置后取清液过0.45μm 无机滤膜,滤液作分析备用,同时作为空白试剂对照。
色谱条件:流动相为等体积甲醇和0.02mol/L缓冲磷酸盐混合溶液,并添加硫酸铵,含量为0.5%,pH 值为6.8,以使烟碱的出峰时间较合适,同时硫酸铵的加入可以消除拖尾影响,检测波长为259nm ,流速0.5mL/min ,进样量5.0μL ,柱温35℃。
烟碱类杀虫剂检测国标
烟碱类杀虫剂检测国标烟碱类杀虫剂的检测国标可以根据不同的产品和应用领域而有所不同。
一般来说，烟碱类杀虫剂的检测方法包括气相色谱法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法等。
在国标中，对于烟碱类杀虫剂的检测方法、检测限、判定标准等都有明确的规定。
例如，对于噻虫胺和噻虫嗪这两种常见的烟碱类杀虫剂，国标中规定了其在不同蔬菜中的最大残留限量值，并提供了相应的检测方法。
对于噻虫胺，在豆类蔬菜中的最大残留限量值为0.01mg/kg，而对于噻虫嗪，在香蕉中的最大残留限量值为0.02mg/kg，在荚可食类豆类蔬菜（菜豆除外）中的最大残留限量值为0.3mg/kg。
烟碱类杀虫剂在农业生产中起着重要作用，但过量使用可能会对人体健康造成危害。
因此，国家制定了严格的烟碱类杀虫剂检测国标，以确保食品和环境的安全。
除了气相色谱法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法等检测方法外，还可以采用其他先进的检测技术，如液相色谱-串联质谱法、酶联免疫法等。
在烟碱类杀虫剂检测国标中，除了检测方法和检测限的规定外，还对实验操作流程、实验条件、数据处理和报告等方面进行了详细阐述。
为了保证检测结果的准确性和可靠性，检测机构需要严格按照国标进行操作，并定期对检测设备进行校准和维护，确保检测设备的性能达到最佳状态。
此外，烟碱类杀虫剂检测国标还强调了实验室的质量管理和质量控制。
检测机构需要建立健全的质量管理体系，通过内部质量控制和外部质量认证，确保检测报告的真实性和可信度。
同时，检测人员需要具备丰富的实践经验和专业技能，以应对各种复杂情况。
总之，烟碱类杀虫剂检测国标为检测机构和个人提供了明确的指导。
在进行烟碱类杀虫剂检测时，应参照相关国标和行业标准，选用合适的检测方法，严格按照标准操作流程进行，以确保检测结果的准确性和可靠性。
同时，检测机构需要加强质量管理，提高检测水平，为保障我国农产品质量和食品安全贡献力量。
液相色谱法检测水果蔬菜中的烟碱类农药残留
液相色谱法检测水果蔬菜中的烟碱类农药残留侯如燕;蔡荟梅;张正竹;宛晓春【期刊名称】《分析试验室》【年(卷),期】2010(0)2【摘要】建立了果蔬样品中5种烟碱类农药（噻虫嗪、吡虫啉、啶虫脒、噻虫啉、噻虫胺）残留的液相色谱快速检测方法。
样品采用乙腈提取，浓缩，水转溶后经ENVI-18固相萃取柱净化，0．02mol／LNaOH预淋洗除去柱上中等极性干扰物，100％乙腈1mL洗脱5种烟碱类残留，反相高效液相色谱-二极管阵列检测器检测。
在黄瓜空白基质中0．1～1．0mg／kg的加标浓度范围内，5种农药的回收率为50．8％～108．9％，相对标准偏差（RSD）小于15％；而苹果、梨、香蕉、西红柿和韭菜空白基质在0．1～1．0mg／kg添加水平下，5种农药的回收率均大于80％，RSD小于11％。
所测试的6种果蔬样品中噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉的检出限（IDD）为0．01～0．02mg／kg，啶虫咪和噻虫啉的LOD为0．03～0．05mg／kg，方法可满足水果蔬菜中烟碱类农药多残留分析的要求。
【总页数】5页(P59-63)【关键词】烟碱类农药;杀虫剂;高效液相色谱;二极管阵列检测器;水果;蔬菜【作者】侯如燕;蔡荟梅;张正竹;宛晓春【作者单位】安徽农业大学茶与食品科技学院,教育部、农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室,合肥230036【正文语种】中文【中图分类】O657.71【相关文献】1.蔬菜水果中的新烟碱类农药残留量与人群摄食暴露健康风险评价 [J], 谭颖;张琪;赵成;王心怡;李敬尧;王丹;周萤;卢晓霞2.中华人民共和国农业行业标准NY/T 761.1-2004 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法第1部分蔬菜和水果中有机磷类农药多残留检测方法 [J],3.中华人民共和国农业行业标准NY/T 761.2-2004蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法第2部分蔬菜和水果中有机氯类、拟除虫菊酯类农药多残留检测方法 [J],4.中华人民共和国农业行业标准NY/T 761.3-2004 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法第3部分蔬菜和水果中氨基甲酸酯类农药多残留检验方法 [J],5.中华人民共和国农业行业标准蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法第2部分蔬菜和水果中有机氯类、拟除虫菊酯类农药多残留检测方法 [J],因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量摘要：建立一种高效液相色谱法测定烟草中烟碱的含量。
方法:色谱柱C18 (250mmX 4．6 mm，5．0um)，流动相为甲醇：0．02 mol／L磷酸氢二钠缓冲溶液(用磷酸调节pH 6．0)=70：30；检测波长259 nm；流速1．0 mL／min；进样量20 uL；柱温30℃。
结果:溶液浓度在27．568~165．408 mg／L时峰面积与烟碱浓度呈良好的线性关系，相关系数r为0．999 0，方法的检测限(s／n=3)为0．011 mg／L，平均回收率为97．9％，相对标准偏差(兄 )为1．1％(n=5)。
结论:该方法简便易行，结果准确，可作为烟草中烟碱含量的检测方法。
关键词：HPLC：烟草；烟碱；含量烟草中含有多种生物碱，其中烟碱(又名尼古丁Nicotine，简称NTC)含量最高，约占烟草生物碱总量的95％。
其化学名称为1一甲基一2一(2一吡啶基)吡咯烷。
烟碱含量的高低不仅关系到烟草制品的质量，而且关系到人体健康。
所以，选择快速准确测量烟碱含量的方法具有重要意义。
目前测定烟草中烟碱含量的方法很多，包括有高效液相色谱法、重量分析法[51、分光光度法I6]以及连续流动法同等。
其中重量分析方法操作繁锁、耗时。
分光光度法可测量的浓度范围小，且需要蒸馏或萃取等复杂的前处理，易受外界条件影响。
目前烟草行业采用连续流动法测定烟草中的烟碱，采用的仪器昂贵，试剂剧毒，对人体不安全。
采用高效液相色谱法对烟草中的烟碱含量进行测定，该方法既能将烟碱与共存生物碱等组份分开，又能准确快速得到分析结果，同时与连续流动法的测定结果相比，无明显差异。
1 材料与方法1．1 仪器和试剂‘仪器：LC7000高效液相色谱仪，LC7020紫外/可见检测器，色谱柱 C 18(250．0 mm×4．6 mm，5．0 m)，空气浴振荡器试剂：烟碱标准品，甲醇(色谱纯)，磷酸(分析纯)、磷酸氢二钠(分析纯)，二次蒸馏水，烟草样品1、2、3号1.2 色谱条件流动相为甲醇：0．02 mol／L磷酸氢二钠缓冲溶液(用磷酸调节pH 6．0)=70：30；检测波长259 nm；流速1．0 mL／min；进样量20uL；柱温30℃。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
反相高效液相色谱法测定烟碱的含量
用反相高效液相色谱法测定烟碱含量的方法，外标法，等都洗脱，色谱柱为Kromasil C18 ( 250 mm×4.6 mm, 5 μm) 烟碱的检测条件、柱温35 ℃, 设置参数流速1.0 mL/min, 检测波长259 nm, 进样量20μL .
1、仪器与试剂.
仪器: 高效液相色谱Agilent 1100 Series LC sys- tem;
甲醇( 色谱纯) ; 超纯去离子水; 0.2mol磷酸二氢钠、0.2mol磷酸氢二钠、三乙胺( 均为分析纯)。
2、样品和标准溶液的配制
精确称取烟碱标准品10.0 mg ,置于25 mL 容量瓶中, 用甲醇溶液定容至刻度。
标准品称取两份。
精确称取烟碱待测品20.0 mg ,置于25 mL 容量瓶中, 用甲醇溶液定容至刻度。
（均需超声）。
3、流动相及配比
甲醇 300Ml、（三乙胺1.0mL）磷酸缓冲液 200mL【磷酸缓冲液（取0.2 mol/L 磷酸二氢钾溶液62mL，加氢氧化钠30mL，用水稀释至250mL）】
流动相配好后超声30min去气泡。
（流动相为甲醇: 0.02 mol/L- 1 磷酸缓冲溶液( 添加三乙胺, 含量为0.46 %, pH=6.5) = 60∶40,）
( 1.安徽工业大学化学与化工学院, 安徽马鞍山243002; 2.复旦大学环境科学与工程系, 上海200433 文章编号: 1672- 2043(2006)增刊- 0751- 04 )
4、配好的流动相超声10min。
5、用20%的甲醇冲洗柱子30min （每换一次流动相要排一次气）。
6、换配好的流动相冲洗柱子待基线平稳后开始进样。
7、分析处理峰，计算含量
8、检测完换20%、60%、80%、甲醇冲洗柱子，（基线平稳后换）
附注：
烟碱分子由两个氮杂环构成, 其中吡啶环上的氮原子由于芳香化的结果, 碱性较弱, pKb 值为8, 而吡咯氮杂环连接一个甲基, 且没有芳香性, 在水溶液中其pKb 值约为3[ 2] . 吡咯氮与色谱柱上残余硅羟基的氢键键合、质子化烟碱与硅羟基发生交换导致了拖尾。
三乙胺作为改性剂, 可掩蔽引起二次保留的硅羟基. 在pH 值6~ 7 时, 烟碱主要以单质子态存在( 大部分是质子化吡咯氮) , 三乙胺与残余硅羟基的结合能力不如吡咯氮, 所以仍有较明显的拖尾; 在pH
值3 左右, 部分单质子烟碱转化为双质子烟碱( 吡啶环上的氮也部分质子化) ,
此时三乙胺竞争能力增强, 很好地起到掩蔽作用, 消除了拖尾作用,
（ 1. 湖南师范大学化学化工学院, 中国长沙 410081;文章编号 100022537( 2005) 0320052203）
0.2M磷酸缓冲液液
附磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L）
pH值；0.2mol/LNa2HPO4溶液（mL）；0.2mol/LNaH2PO4溶液（mL）
5.8 ；8.0； 92.0
5.9 ；10.0 ； 90.0
6.0； 12.3 ； 8
7.7
6.1 ；15.0 ； 85.0
6.2 ；18.5 ； 81.5
6.3 ；22.5； 7
7.5
6.4 ；26.5 ； 73.5
6.5 ；31.5 ； 68.5
6.6 ；3
7.5； 62.5
6.7 ；43.5 ； 56.5
6.8 ；49.0； 51.0
6.9； 55.0 ； 45.0
7.0 ；61.0 ； 39.0
7.1 ；67.0 ； 33.0 （百度文库）。