结核分枝杆菌实验室检测方法 ppt课件
合集下载
结核病诊断TSPOT实验
14
02
结核杆菌实验室检查
结核诊断--临床应用
• 几乎所有的临床内科科室 都需要结核的鉴别诊断：
– 发热待查，结核排筛 – 结脑的鉴别诊断 – 胸腹水患者待查 – 儿童结核
16
结核杆菌
结核病 实验室检查
细菌学检查
分枝杆菌分离培养 分支杆菌药敏试验 分枝杆菌菌种鉴定
体液免疫学诊断
免疫学检查
细胞免疫学诊断
结核病诊断TSPOT实验文档ppt
目录
01. 分枝杆菌概述 02. 结核病实验室检查 03. 小结
2
01
分枝杆菌概述
3
分枝杆菌属分类
➢结核分枝杆菌(M.tuberculosis) ➢非结核分枝杆菌（NTM） ➢麻风分枝杆菌（）
4
结核分枝杆菌的发现
1882年 德国柯赫医生发现结核致病菌----结核杆菌
▪敏感性较直接涂片法高，理论上10-100条菌/毫升可检出阳性； ▪特异性较直接涂片法高，可以从菌落生长速度、色素产生初步判断非 结核分枝杆菌； ▪分离出具有活力的纯培养物，为进一步药敏试验提供基础。
▪需时长，根据接种量的大小，一般2-8周才能得到肉眼可见菌落。 ▪结果受标本保存运送时间、培养基成分和质量、前处理方法等影响， 操作较直接涂片法复杂，需经严格培训 。 ▪需培养基凝固灭菌器、离心机、涡旋振荡器、恒温培养箱等设备。 ▪成本是直接涂片法的7-8倍。
1份痰标本直接涂片抗酸杆菌镜检阳性+肺部影像学检查符合活动性肺结核表现。
细胞免疫学检查 *结[核Ep感ub染a者he体ad内o存f 在pr特int异] 的效应T淋巴细胞，PP效D应-T-淋结巴核细胞菌再素次受试到验
Janssens et al ERJ 2007 30(4):722-8
02
结核杆菌实验室检查
结核诊断--临床应用
• 几乎所有的临床内科科室 都需要结核的鉴别诊断：
– 发热待查，结核排筛 – 结脑的鉴别诊断 – 胸腹水患者待查 – 儿童结核
16
结核杆菌
结核病 实验室检查
细菌学检查
分枝杆菌分离培养 分支杆菌药敏试验 分枝杆菌菌种鉴定
体液免疫学诊断
免疫学检查
细胞免疫学诊断
结核病诊断TSPOT实验文档ppt
目录
01. 分枝杆菌概述 02. 结核病实验室检查 03. 小结
2
01
分枝杆菌概述
3
分枝杆菌属分类
➢结核分枝杆菌(M.tuberculosis) ➢非结核分枝杆菌（NTM） ➢麻风分枝杆菌（）
4
结核分枝杆菌的发现
1882年 德国柯赫医生发现结核致病菌----结核杆菌
▪敏感性较直接涂片法高，理论上10-100条菌/毫升可检出阳性； ▪特异性较直接涂片法高，可以从菌落生长速度、色素产生初步判断非 结核分枝杆菌； ▪分离出具有活力的纯培养物，为进一步药敏试验提供基础。
▪需时长，根据接种量的大小，一般2-8周才能得到肉眼可见菌落。 ▪结果受标本保存运送时间、培养基成分和质量、前处理方法等影响， 操作较直接涂片法复杂，需经严格培训 。 ▪需培养基凝固灭菌器、离心机、涡旋振荡器、恒温培养箱等设备。 ▪成本是直接涂片法的7-8倍。
1份痰标本直接涂片抗酸杆菌镜检阳性+肺部影像学检查符合活动性肺结核表现。
细胞免疫学检查 *结[核Ep感ub染a者he体ad内o存f 在pr特int异] 的效应T淋巴细胞，PP效D应-T-淋结巴核细胞菌再素次受试到验
Janssens et al ERJ 2007 30(4):722-8
结核感染T细胞检测在结核病潜伏感染中的临床应用ppt课件
问题：1. 如何诊断？2. 如何区别潜伏与活动？
PPT学习交流
7
内容
1 流行病学 2 结核病的诊断技术与IGRA检测 3 IGRA的临床应用
PPT学习交流
8
结核病常规诊断技术
o 病史和症状/体征 o 影像学检查 o 病原学检查 o 结核菌素皮肤试验（TST） o γ-干扰素释放试验（IGRA） o 支气管镜检查
Infection of Mtb
Development of TB
基础疾病的情况，如艾滋病
患者、肿瘤患者、婴幼儿等
Time after Mtb infection
o 特殊肺外结核：结脑灵敏度相对较低
o 实验非正常操作：细胞计数不够等
o 样本：不正确保存与运输、温度、存放时间、溶血等
PPT学习交流
31
-
假阳性可能性大 （BCG接种）
+
常出现在HIV感染 或免疫抑制者
-
基本不考虑结核分枝杆菌 感染
建议
按结核潜伏感染处理
结核分枝杆菌感染可能性大 ，建议暂时不给药物治疗， 增加随诊。 需结合临床症状，如怀疑结 核分枝杆菌的感染，按结核 潜伏感染处理 除非高度怀疑患者细胞免疫 被强烈抑制，否则不考虑抗 结核分枝杆菌治疗，必要时 8-10周后再次随访。
esa6cfp1016ppt学习交流血液胸腔积液中ifn水平显著高于外周血4倍阴性对照a抗原b抗原阳性对照17ppt学习交流tbigra质量标准每个样本均设有阳性及空白对照每批检测用标准品制作标准曲线18ppt学习交流elispot组别总例数临床诊断结核结核潜伏感染情况结核感染情况感染人数感染率感染人数感染率监狱人员92606522606522医务人员232609涂阳患者10000其它肺病675583705917tspottb在筛查结核潜伏感染人群中的应用价值19ppt学习交流elisa组别总例数临床诊断结核结核潜伏感染情况结核感染情况感染人数感染率感染人数感染率监狱人员21413060751366355医务人员87262989262989涂阳患者26260002610000其它肺病3363215646731885625tbigra在筛查结核潜伏感染人群中的应用价值20ppt学习交流有效性
PPT学习交流
7
内容
1 流行病学 2 结核病的诊断技术与IGRA检测 3 IGRA的临床应用
PPT学习交流
8
结核病常规诊断技术
o 病史和症状/体征 o 影像学检查 o 病原学检查 o 结核菌素皮肤试验（TST） o γ-干扰素释放试验（IGRA） o 支气管镜检查
Infection of Mtb
Development of TB
基础疾病的情况，如艾滋病
患者、肿瘤患者、婴幼儿等
Time after Mtb infection
o 特殊肺外结核：结脑灵敏度相对较低
o 实验非正常操作：细胞计数不够等
o 样本：不正确保存与运输、温度、存放时间、溶血等
PPT学习交流
31
-
假阳性可能性大 （BCG接种）
+
常出现在HIV感染 或免疫抑制者
-
基本不考虑结核分枝杆菌 感染
建议
按结核潜伏感染处理
结核分枝杆菌感染可能性大 ，建议暂时不给药物治疗， 增加随诊。 需结合临床症状，如怀疑结 核分枝杆菌的感染，按结核 潜伏感染处理 除非高度怀疑患者细胞免疫 被强烈抑制，否则不考虑抗 结核分枝杆菌治疗，必要时 8-10周后再次随访。
esa6cfp1016ppt学习交流血液胸腔积液中ifn水平显著高于外周血4倍阴性对照a抗原b抗原阳性对照17ppt学习交流tbigra质量标准每个样本均设有阳性及空白对照每批检测用标准品制作标准曲线18ppt学习交流elispot组别总例数临床诊断结核结核潜伏感染情况结核感染情况感染人数感染率感染人数感染率监狱人员92606522606522医务人员232609涂阳患者10000其它肺病675583705917tspottb在筛查结核潜伏感染人群中的应用价值19ppt学习交流elisa组别总例数临床诊断结核结核潜伏感染情况结核感染情况感染人数感染率感染人数感染率监狱人员21413060751366355医务人员87262989262989涂阳患者26260002610000其它肺病3363215646731885625tbigra在筛查结核潜伏感染人群中的应用价值20ppt学习交流有效性
结核病实验室诊断技术
GenoType MTBDR and 诊断结核感染及对利福 MTBDRplus；INNO- 平和异烟肼药物敏感性 LiPA Rif.TB
Frane; LW Scientific; Zeiss
诊断结核患者
Cepheid GeneXpert
诊断结核感染及对利福 平的耐药性
WHO推荐的结核新诊断技术
方法 DNA微阵列芯片法
有前景的几种新技术
❖ 分子诊断技术:GeneXpert（Cepheid公司） ❖ 分子线性探针技术:INNO-LIPA（Innogenetics公司） ❖ 反向点杂交技术:GenoType MTBDR （Hain Lifescience）
分枝杆菌菌种鉴定试剂盒（亚能生物） ❖ 基因芯片技术：微阵列芯片法（博奥生物） ❖ 细胞免疫学技术：T-SPOT.TB（Oxford Immunotec公司）
目前诊断方法回顾
细菌学检测方法 ： 涂片、常规培养、快培 其他辅助检查方法：皮试、结核抗体
目前诊断方法的局限性
涂片的缺点： 敏感性低； 特异性差； 无法区别死菌与活菌
培养的缺点： 耗时久，一般需4~8周； 阳性率低，约30%~50%；特异性差， 无法区别MTB与NTM
皮试的缺点： 敏感性低特异性差 抗体检测缺点：敏感性低特异性差
新型诊断技术产品比较
企业 美国 Cepheid
比利时 Innogenetics 德国 Hain Lifescience 中国 亚能生物
中国 博奥生物
英国 Oxford Immunotec
方法
产品特点
GeneXpert
同时检测MTBC和判断利福平耐药； 快速；简便；安全
线性探针杂交法 （INNO-LIPA）
➢ 新的实验诊断技术可弥补传统方法的不足，提高诊 断的灵敏度和特异性，但各有缺点或不足，难以完 全满足临床检测需求，因此，新型结核杆菌诊断技 术及产品的研发势在必行。
(2024年)《结核病防治》ppt课件图文
营养支持 对于严重营养不良的患者，可给予肠内或 肠外营养支持。
2024/3/26
指导患者合理饮食，保证充足热量和蛋白 质摄入。
鼓励患者多吃富含维生素和矿物质的食物 ，提高身体抵抗力。
18
04
结核病监测与评估体系建设
2024/3/26
19
监测指标设定和数据收集方法论述
2024/3/26
01
发病率
反映结核病疫情严重程度的重要指标。
结核病是由结核分枝杆菌引起的一种慢性传染病，可累 及全身多个器官，以肺结核最为常见。
分类
根据病变部位和临床表现，结核病可分为肺结核、淋巴 结核、骨结核、泌尿生殖系统结核等。
2024/3/26
4
发病原因及机制
发病原因
感染结核分枝杆菌是发病的根本原因，传播途径主要为飞沫传播。此外，免疫力低下、营养不 良、糖尿病等因素也可增加感染风险。
02
死亡率
衡量结核病对人群生命威胁程度的关键指标。
20
监测指标设定和数据收集方法论述
2024/3/26
• 耐药率：评估结核病治疗难度和防控效果的重要 指标。
21
监测指标设定和数据收集方法论述
被动监测
通过医疗机构报告、死亡 登记等方式收集数据。
实验室检测
通过细菌学、免疫学等实 验室检测方法获取数据。
的准确性和完整性。
推动新技术应用
探索将大数据、人工智能等新技术应 用于结核病监测与评估工作中，提高
工作效率和准确性。
2024/3/26
强化数据分析能力
提高数据分析的时效性和准确性，为 防控策略的制定和调整提供科学依据 。
加强国际合作与交流
学习借鉴国际先进经验和做法，加强 与国际组织和其他国家的合作与交流 ，共同推动全球结核病防治事业的发 展。
2024/3/26
指导患者合理饮食，保证充足热量和蛋白 质摄入。
鼓励患者多吃富含维生素和矿物质的食物 ，提高身体抵抗力。
18
04
结核病监测与评估体系建设
2024/3/26
19
监测指标设定和数据收集方法论述
2024/3/26
01
发病率
反映结核病疫情严重程度的重要指标。
结核病是由结核分枝杆菌引起的一种慢性传染病，可累 及全身多个器官，以肺结核最为常见。
分类
根据病变部位和临床表现，结核病可分为肺结核、淋巴 结核、骨结核、泌尿生殖系统结核等。
2024/3/26
4
发病原因及机制
发病原因
感染结核分枝杆菌是发病的根本原因，传播途径主要为飞沫传播。此外，免疫力低下、营养不 良、糖尿病等因素也可增加感染风险。
02
死亡率
衡量结核病对人群生命威胁程度的关键指标。
20
监测指标设定和数据收集方法论述
2024/3/26
• 耐药率：评估结核病治疗难度和防控效果的重要 指标。
21
监测指标设定和数据收集方法论述
被动监测
通过医疗机构报告、死亡 登记等方式收集数据。
实验室检测
通过细菌学、免疫学等实 验室检测方法获取数据。
的准确性和完整性。
推动新技术应用
探索将大数据、人工智能等新技术应 用于结核病监测与评估工作中，提高
工作效率和准确性。
2024/3/26
强化数据分析能力
提高数据分析的时效性和准确性，为 防控策略的制定和调整提供科学依据 。
加强国际合作与交流
学习借鉴国际先进经验和做法，加强 与国际组织和其他国家的合作与交流 ，共同推动全球结核病防治事业的发 展。
麻风分枝杆菌的实验室检查PPT课件
06
实验室检查的质量控制与改进
质量控制措施
01
02
03
04
标准化操作程序
建立并遵循标准化的实验室操 作程序，确保每个步骤的准确
性和可重复性。
仪器设备校准
定期对实验室仪器设备进行校 准和验证，确保其准确性和可
靠性。
试剂和耗材管理
严格控制试剂和耗材的质量， 确保其来源可靠、质量稳定。
人员培训与考核
对实验室人员进行专业培训和 定期考核，提高其操作技能和
麻风分枝杆菌的实验室检查 ppt课件
目
CONTENCT
录
• 麻风分枝杆菌概述 • 实验室检查方法 • 样本采集与处理 • 实验室检查结果解读 • 实验室诊断与鉴别诊断 • 实验室检查的质量控制与改进
01
麻风分枝杆菌概述
麻风分枝杆菌的生物学特性
形态与染色
麻风分枝杆菌为细长、微弯的 杆菌，常呈束状排列。革兰染 色阳性，抗酸染色呈红色。
续改进实验室服务质量。
提高实验室检测水平的方法
新技术新方法应用
关注行业动态，及时引进和应用新的 检测技术和方法，提高实验室检测能 力和水。
人员素质提升
鼓励实验室人员参加专业培训和学术 交流活动，提高其专业素质和技能水 平。
实验室环境改善
优化实验室布局和设备配置，改善实 验室工作环境，提高工作效率和检测 准确性。
信息化管理
建立实验室信息管理系统，实现检测 数据的自动化处理和分析，提高工作 效率和数据准确性。
THANK YOU
感谢聆听
培养特性
麻风分枝杆菌在营养丰富的培 养基上生长缓慢，一般需要数 周至数月才能形成可见的菌落。 最适生长温度为33-35℃， pH6.8-7.2。
分子诊断技术在结核病诊治中的应用幻灯片
WHO report，2013
全球结核病流行状况
WHO report，2013
全球结核病流行状况
➢全球结核死亡人数处于下降趋势 ➢斯威士兰结核病感染率最高
WHO report，2013
全球结核病流行状况
➢Globally, an estimated 3.6% of new cases and 20.2% of previously treated cases have MDR-TB ➢There were an estimated 450,000 new cases of MDR-TB worldwide in 2012 ➢On average, an estimated 9.6% of MDR-TB cases have XDR-TB
样本
细胞溶解
目标 r-RNA释放
加入探针
AE AE
AE
探针
60°C 杂交 15分钟
化学发光读数仪
荧光检测
AE AE
AE
AE
AE
选择性试剂
AE
60°C
AE
AE
杂交体
MTD技术特点
MTD结核分枝杆菌检测技术特点
采用分子技术快速鉴定（2.5小时）结核分枝杆菌复合群 标本可以是涂片阴性或者阳性的痰标本；也可以是培养物 唯一获得FDA推荐的凃阴样本快速检测技术 检测RNA，RNA只能来源于活的细菌，可鉴定活动性结核
➢高灵敏度、特异性 ➢活菌检测 ➢操作简单、快速
Gene-Probe(TMA/Hain)技 术
MTBCM-鉴定MTB和NTM
分类
MTBC-鉴定MTB复合群 MTBDRplus-鉴定MDR
MTBDRsl-鉴定XDR
TB-IGRA结核感染T细胞检测ppt课件
昆明三院
TB-IGRA 90.0% 90.7% 80.0%
QFT-GIT 86.8% 87.3% 80.0%
总标本数 342
322
20
老年医院
TB-IGRA 76.6% 76.5% 78.6%
QFT-GIT 67.3% 66.2% 85.7%
总标本数 248
234
14
厦门CDC
TB-IGRA 70.9% 70.6% 100.0%
精选ppt2021最新
6
特异性T细胞体外释放酶联免疫法检 测
TB-IGRA
精选ppt2021最新
7
TB-IGRA原理、方法
精选ppt2021最新
8
特异性T细胞体外检测在发达国家已广泛应用
• IGRA技术目前已获得美国FDA批准，在欧洲获得了CE标志认证，在日 本已经被MHLW批准
• “特异性T细胞体外检测”方法在国际上被越来越多地应用于TB感染 的辅助诊断，已成为欧美国家结核常规检测方法之一。
精选ppt2021最新
18
消化科/心内科/肾内科/骨科
肺外结核免疫学辅助诊断
40％的结核感染者存在肺外病灶，1/4的结核患者为肺 外结核。而对肺外结核取样难度大，用IGRA检测为阳性时，高 度怀疑结核。单肺外结核不具有传染性，可分布在综合医院的 呼吸科外的其他科室。
精选ppt2021最新
19
儿科
可判断传染 可进行定性
优点 性高低
及半 定量分 析
分子诊断
核酸检测
特异性高， 涂阳标本检 出率高
检出率20-
30%，不能
区分非结核
缺点
分枝杆菌； 取样难
检出率59% ，耗时长（ 2-6周）；缺 陷的活菌无 法培养；肺 外结核病人 取样困难
结核病汇报ppt课件
结核病
汇报人：XXX 2024-01-18
目录
• 结核病概述 • 临床表现与诊断 • 治疗与预防策略 • 并发症与合并症处理 • 结核分枝杆菌耐药性问题探讨 • 总结与展望
01
结核病概述
Chapter
定义与分类
定义
结核病是由结核分枝杆菌引起的 一种慢性传染病，可累及全身多 个器官，以肺结核最为常见。
患者心理干预和康复指导
心理干预
结核病患者往往存在焦虑、抑郁等心理问题，医生应关注患者的心理状况，提供心理支持和辅导，帮助患者树立 战胜疾病的信心。
康复指导
医生应根据患者的具体情况，制定个性化的康复计划，包括饮食调整、运动锻炼、呼吸训练等，以促进患者身体 和心理的全面康复。同时，医生还应向患者和家属传授结核病防治知识，提高患者的自我保健意识和能力。
05
结核分枝杆菌耐药性问题探讨
Chapter
耐药现象产生原因和机制分析
基因突变
结核分枝杆菌在复制过程中，基 因可能发生突变，导致对药物的
敏感性降低。
药物选择压力
长期使用单一药物或不合理用药 ，会对结核分枝杆菌产生选择压 力，使其逐渐适应药物环境，从
而产生耐药性。
传播途径
耐药菌株的传播途径与普通结核 分枝杆菌相似，通过飞沫传播等 方式在人群中传播，增加了耐药
06
总结与展望
Chapter
当前存在问题和挑战
耐药性问题
随着抗生素的广泛使用，结核杆 菌的耐药性逐渐增强，使得治疗 变得更加困难。
社会经济影响
结核病主要发生在贫困地区和弱 势群体中，对社会经济造成严重 影响。
01 02 03 04
诊断困难
结核病的早期症状不明显，且与 许多其他疾病的症状相似，导致 诊断困难。
汇报人：XXX 2024-01-18
目录
• 结核病概述 • 临床表现与诊断 • 治疗与预防策略 • 并发症与合并症处理 • 结核分枝杆菌耐药性问题探讨 • 总结与展望
01
结核病概述
Chapter
定义与分类
定义
结核病是由结核分枝杆菌引起的 一种慢性传染病，可累及全身多 个器官，以肺结核最为常见。
患者心理干预和康复指导
心理干预
结核病患者往往存在焦虑、抑郁等心理问题，医生应关注患者的心理状况，提供心理支持和辅导，帮助患者树立 战胜疾病的信心。
康复指导
医生应根据患者的具体情况，制定个性化的康复计划，包括饮食调整、运动锻炼、呼吸训练等，以促进患者身体 和心理的全面康复。同时，医生还应向患者和家属传授结核病防治知识，提高患者的自我保健意识和能力。
05
结核分枝杆菌耐药性问题探讨
Chapter
耐药现象产生原因和机制分析
基因突变
结核分枝杆菌在复制过程中，基 因可能发生突变，导致对药物的
敏感性降低。
药物选择压力
长期使用单一药物或不合理用药 ，会对结核分枝杆菌产生选择压 力，使其逐渐适应药物环境，从
而产生耐药性。
传播途径
耐药菌株的传播途径与普通结核 分枝杆菌相似，通过飞沫传播等 方式在人群中传播，增加了耐药
06
总结与展望
Chapter
当前存在问题和挑战
耐药性问题
随着抗生素的广泛使用，结核杆 菌的耐药性逐渐增强，使得治疗 变得更加困难。
社会经济影响
结核病主要发生在贫困地区和弱 势群体中，对社会经济造成严重 影响。
01 02 03 04
诊断困难
结核病的早期症状不明显，且与 许多其他疾病的症状相似，导致 诊断困难。