铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的溶原化条件及稳定性研究
【国家自然科学基金】_生物被膜形成_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140802
科研热词 推荐指数 生物被膜 5 生物膜 2 扫描电镜 2 阿奇霉素 1 铜绿假单胞菌野生菌株(paol) 1 铜绿假单胞菌 1 表皮葡萄球菌 1 菌体密度 1 耐药谱型 1 细菌生物被膜(bbf) 1 磷霉素 1 白念珠菌生物被膜 1 白念珠菌 1 生物被膜形成 1 激光共聚焦显微镜 1 沙门氏菌 1 氨基糖苷类药物 1 毒力因子 1 无害李斯特菌 1 控制 1 快速银染法 1 形成 1 密度感应信号ai-2 1 大肠杆菌 1 单核细胞增生李斯特菌 1 单核增生李斯特氏菌 1 作用机理 1 二氧化氯 1 xtt 1 tyrosol 1 sigmab(σ b) 1 prfa 1 ifd6 1
2008年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49
科研热词 生物被膜 铜绿假单胞菌 藻酸盐 胚乳 溶原性噬菌体 淀粉体 复粒淀粉 基因表达 黄芩 铜绿 酸酶 酸性磷 透射电镜术 贻贝棘尾虫 血液相容性 葡萄球菌,金黄色 肺疾病,慢性阻塞性 肺疾病 耐药机制 结构 细菌生物被膜 纤毛虫 红霉素 生物被膜控制 激光共聚焦显微镜 溶葡萄球菌酶 消化过程 流感 氧氟沙星 慢性阻塞性 小麦 小淀粉粒 定量分析 大麦 多重耐药 外排泵 嗜血杆菌,流感 嗜血杆菌 同源重组 变异链球菌 单粒淀粉 动物实验 免疫荧光显微术 假单胞菌,铜绿 假单胞菌 体外研究 rip/pc药物涂层 muca突变基因 luxs基因
科研热词 生物被膜 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌 黏附 耐药性 群体感应 细菌生物被膜 禽致病性大肠杆菌 白念珠菌 氨溴索 毒力基因 外阴阴道念珠菌病 入侵 ai-2 鱼腥草素钠 鱼腥草 食品添加剂 食品变质 阿萨希毛孢子菌 阿奇霉素 铜绿假单胞菌(pao1) 转录后调控蛋白csra 诱导压力 血清型 蜡样芽孢杆菌 茶多酚 苦参碱 胞外蛋白酶 肾上腺素 肉桂醛 结核分枝杆菌 细菌 第二信使 磷霉素 盐酸氨溴索 百肤青 病原性 生物被膜形成 生物膜 生物材料 浓度梯度递增法 沙门菌 氨基糖苷类药物 毒力因子 柠檬醛 杀菌作用 最小膜清除浓度 最小抑菌浓度 抗菌药 抗菌协同 抑制作用 抑制
棒状杆菌属
二、致病性与免疫性
1. 致病物质： 白喉毒素（diphtherotoxin） 索状因子（cord factor） K抗原（K antigen）
2. 致病机制 1）白喉外毒素：白喉杆菌本身无毒性，但β-棒状噬菌体带有毒素tox
基因进入菌体内，整合在宿主的染色体上，就具有 强烈的毒性。
白喉毒素有二个片断，即A、B片断：
咳嗽持续1〜6周。 恢复期：咳嗽逐渐恢复，但治疗不及时，可引发其他感染，如肺炎等。 免疫力：获得持久免疫力。
传染源：早期病人、带菌者， 传播途径：飞沫传播。 细菌→通过飞沫→附着于纤毛上皮细胞→大量繁殖 →产生毒素
→引起局部炎症、坏死、分泌物增加→剧烈咳嗽。 易感人群：儿童。
三、防治原则 预防
“白 百 破”（DPT）三联疫苗
冷却水中； 2）对氯或酸有一定抵抗力； 3）对化学消毒剂、干燥、紫外线较敏感。
二、致病性与免疫性
军团病 传播途径：飞沫、气溶胶。 ①肺炎型（重症型）：起病急，以肺部为主的多器官损伤，高热
、寒战、咳嗽、胸痛，病人死于呼吸衰竭，死亡率20％左右； ②流感型（轻型）：发热、头痛，3天左右自愈，预后良好； ③肺外感染：脑、肾、肝、脾，出现多部位症状。
治疗
首选红霉素
第三节 军团菌属 *军团病的病原体，首发于1976年的美国退伍军人一次聚会，
故称作军团病。
*军团菌在自然界普遍存在，在天然水源及人工冷、热水管 系统更多见，抵抗力强。
嗜肺军团菌
一、生物学性状
1.形态学特征 G－杆菌，不易着色，端生或侧生鞭毛能运动，有微荚膜和菌毛
,无芽胞。 Giemsa染色：呈红色。 Dieterle镀银染色：呈黑褐色。
免疫性 嗜肺军团菌为胞内寄生菌； 细胞免疫在抗感染中起主要作用。
微生物学教程第三版(周德庆版)
1、名词解释：微生物，微生物学，种，菌株、品系、克隆，菌落，菌苔。
微生物:微生物是形体微小、单细胞或个体结构简单的多细胞、甚或无细胞结构，用肉眼看不见或看不清的低等生物的总称。
微生物学:微生物学是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造、生理代谢、遗传变异、生态分布和分类进化等生命活动基本规律，并将其应用于工业发酵、医药卫生、生物工程和环境保护等实践领域的科学，其根本任务是发掘、利用、改善和保护有益微生物，控制、消灭或改造有害微生物，为人类社会的进步服务。
种：种是最基本的分类单位,它是一大群表型特征高度相似，亲缘关系极其相近，与同属内其它种有着明显差异的菌株的总称。
菌株（品系）：表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体极其一切后代；实际上是一个微生物达到遗传性纯的标志。
克隆：若菌落是由一个单细胞发展而来的，则它就是一个纯种细胞群或克隆。
菌落：在适宜的培养条件下，微生物在固体培养基表面（有时为内部）生长繁殖，形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。
菌苔：如果将某一纯种的大量细胞密集地接种到固体培养基表面，结果长成的各“菌落”互相连成一片，这就是菌苔。
2、简述微生物学发展史上5个时期的特点和代表人物。
①史前期——朦胧阶段（约8000年前-1676）特点：人们虽然没有看到微生物，但已经不自觉的利用有益微生物、防止有害微生物。
中国古代：②初创期--形态学时期（1676-1861）特点：这一时期微生物学的研究工作主要是对一些微生物进行形态描述。
代表人物——列文虎克：微生物学的先驱者③奠基期--生理学时期（1861 -1 897）特点：这一时期的主要工作是查找各种病原微生物，把微生物学的研究从形态描述推进到生理学研究的新水平，建立了系列微生物学的分支学科。
代表人物：巴斯德和科赫。
④发展期——生化水平研究阶段特点：微生物学的研究进入分子水平，微生物学家的研究工作从上一时期的查找病原微生物转移到寻找各种有益微生物的代谢产物。
微生物复习资料及题库
绪论（一）名词解释1．微生物（microorganism/ microbe）是广泛存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。
2．微生物学（microbiology）是生命科学的一个重要分支，是研究微生物的类型、分布、形态、结构、代谢、生长繁殖、遗传变异、进化及其与人类、动植物、自然界的相互关系的一门科学。
3．医学微生物学(medical microbiology)医学微生物学是微生物学的一个分支，主要研究与医学有关病原微生物的生物学特性、致病和免疫机制以及诊断、防治措施。
医学微生物学与军事、预防、检验、基础及临床各科关系密切，是一门重要的医学基础课。
4．非细胞型微生物（acellular microbe）最小。
无典型的细胞结构，无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长繁殖，核算类型为DNA或RNA，两者不同时存在。
如病毒。
5．原核细胞型微生物(prokaryotic microbe)细胞无核仁和核膜，核呈环状裸DNA团块结构，细胞器不完善，只有核糖体。
包括细菌、衣原体、立克次体、支原体、螺旋体及放线菌。
6．真核细胞型微生物(eukaryotic microbe)具有核膜、核仁和完整的细胞核，细胞器完整,如真菌。
（二）问答题1．试比较原核细胞型、真核细胞型和非细胞微生物的主要生物学特点。
答：原核细胞型、真核细胞型、非细胞微生物分化程度中高低，细胞结构有有无，能量系统+/-有无，细胞器不完善（只有核糖体）完善无，核酸DNA+RNA DNA+RNA DNA或RNA，核膜-+-，核仁-+-2．试述微生物的共同特点。
答：1、个体微小：肉眼直接看不见，需借助光镜、电镜放大才能看见；2、结构简单；3、繁殖迅速：微生物具有极高的生长和繁殖速度。
如大肠杆菌平均20分钟繁殖一代；4、数量巨大；5、种类繁多；6、分布广泛：微生物因其体积小、重量轻、数量多和适应性强等原因，可到处传播。
预防疾控微生物检验技术：细菌及细菌检验综合题必看考点三
预防疾控微生物检验技术：细菌及细菌检验综合题必看考点三1、单选哪一项不能获得有效的特异性免疫（）A.新生儿吸吮初乳B.注射丙种球蛋白C.接种卡介苗D.破伤风病愈后E.流脑流行期无症状感染者正确答案：D2、单（江南博哥）选澳大利亚学者J.R.Warren和B.J.Marsall获得了2005年生理学和医学诺贝尔奖，因为他们发现（）A.霍乱弧菌B.空肠弯曲菌C.幽门螺杆菌D.胎儿弯曲菌E.钩端螺旋体正确答案：C3、多选能诱导细菌形成L型的因素有（）A.链霉素B.胆汁C.宿主免疫因素D.青霉素E.溶菌酶正确答案：B, C, D, E4、单选一般不用革兰染色法染色鉴定的细菌是（）A.布鲁菌B.结核杆菌C.破伤风梭菌D.大肠杆菌E.伤寒沙门菌正确答案：B5、单选空肠弯曲菌引起的主要疾病是（）A.急性上呼吸道感染B.婴幼儿急性肠炎C.急性胃炎D.暴发性肺炎E.婴幼儿败血症正确答案：B6、单选弯曲菌的抵抗力是（）A.强，120℃30分钟才能杀死B.强，100℃30分钟才能杀死C.强，100℃10分钟才能杀死D.弱，56℃30秒即被杀死E.弱，56℃5分钟即被杀死正确答案：E7、单选结构组成中包含SPA表面蛋白的细菌是（）A.葡萄球菌B.乙型溶血性链球菌C.白喉棒状杆菌D.百日咳鲍特氏菌E.肉毒梭菌正确答案：A8、单选噬菌体可用于细菌的鉴定和分型是由于噬菌体（）A.严格的细胞内寄生B.有严格宿主特异性C.能使宿主菌成为溶原状态D.能裂解宿主菌E.能使细菌致病正确答案：B9、单选保护菌体，维持细菌的固有形态的结构是（）A.细胞壁B.细胞膜C.细胞质D.细胞浆E.包膜正确答案：A10、单选下列人体部位中，一般无正常菌群寄居的是（）A.皮肤B.胃肠道C.腹腔D.泌尿生殖道E.外耳道正确答案：C11、单选关于霍乱弧菌的叙述，错误的是（）A.菌体短小，弯曲成弧形或逗点形B.革兰染色阴性C.一端单鞭毛，运动活跃D.营养要求高，在普通培养基不能生长E.生长繁殖温度范围广，耐碱不耐酸正确答案：D12、单选革兰阴性菌细胞壁中与致病性密切相关的重要成分是（）A.特异性多糖B.脂蛋白C.肽聚糖D.脂多糖E.微孔蛋白正确答案：D13、单选根据流感嗜血杆菌荚膜特征，可将其分为6个型，其中致病性最强的是（）A.a型B.b型C.c型D.d型E.e型正确答案：B14、单选与细菌致病性无关的是（）A.侵袭性酶B.毒素C.荚膜D.芽胞E.粘附因子正确答案：D15、单选细菌核糖体的分子沉降系数为A.30SB.40SC.60SD.70SE.80S正确答案：D16、单选细菌的L型是指（）A.细菌的休眠状态B.细胞壁缺陷型细菌C.非致病菌D.不可逆性变异的细菌E.光滑型-粗糙型菌落（S-R）变异正确答案：B17、单选潜伏感染与带菌状态的区别在于后者（）A.病原菌与宿主免疫力处于相对平衡状态B.间歇而不是持续排出病原体C.病原菌不大量繁殖亦无临床表现D.病原菌存在体内的时间较前者长E.病原菌存在体内的时间较前者短正确答案：C18、多选医学上重要的质粒有（）A.R质粒B.F质粒C.Col质粒D.毒力质粒E.r质粒正确答案：A, B, C, D, E19、多选细菌的分解代谢产物是指（）A.细菌素B.硫化氢C.吲哚D.维生素E.外毒素正确答案：B, C20、单选下列关于细菌核质的叙述哪项是错误的？（）A.核质即细菌染色体B.核质含一个DNA分子C.细菌都含有一个核质D.DNA分子是双链的E.核质携带细菌的遗传信息正确答案：D21、单选伤寒病后，带菌者最常见的带菌部位是（）A.血液B.胆囊C.肠系膜淋巴结D.小肠上皮细胞E.吞噬细胞正确答案：B参考解析：伤寒病愈后，有部分患者成为恢复期带菌者，少数可排菌1年以上。
临床微生物学检验习题+参考答案
临床微生物学检验习题+参考答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.为了区分葡萄球菌和微球菌,可选择哪种培养基进行试验(2016年初级师)A、醋酸铅培养基B、0/F培养基C、葡萄糖蛋白胨水D、尿素培养基E、蛋白胨水正确答案：B2.以噬菌体为媒介,将供体菌的基因转移到受体菌内,导致受体菌基因改变的过程为(2013年初级士)A、转化B、转导C、原生质体融合D、接合E、溶原性转换正确答案：B3.关于K-B纸片扩散法操作的描述,下列说法错误的是(2014年初级师)A、各纸片中心距离不小于24mmB、纸片距平板内缘不应大于15mmC、直径90mm的平皿可贴6张纸片D、纸片贴牢后避免移动E、35℃培养16~18小时后阅读结果正确答案：B4.不属于细菌基本结构的是(2014年中级师)A、细胞质B、鞭毛C、细胞膜D、细胞壁E、核质正确答案：B5.结核杆菌传播的主要途径是(2017年初级士)A、消化道B、皮肤伤口C、接种D、呼吸道E、胎盘正确答案：D6.在正常胃酸条件下,需要大量霍乱弧菌才能引起感染原因是(2015年初级师)A、该菌不耐酸B、胃内有乳酸杆菌等拮抗该菌C、人体对其有较强的天然免疫力D、该菌致病力弱E、幽门螺杆菌拮抗该菌正确答案：A7.营养琼脂上生长具有迁徙现象的是(2014年中级师)A、臭鼻克雷伯菌B、奇异变形杆菌C、霍乱弧菌D、蜡样芽孢杆菌E、嗜水气单胞菌正确答案：B8.尿路感染大肠埃希菌,有诊断价值的是每毫升尿含菌量为(2014年中级师)A、100000B、10C、1000000D、1000E、100正确答案：A9.疑为白喉患者的最佳取材部位是A、假膜深处B、淋巴液C、血液D、假膜表面E、假膜边缘正确答案：E10.用Lancefield血清分型法将链球菌分为多个群,其中对人类有致病性的大多属于(2014年中级师)A、A群B、B群C、C群D、D群E、G群正确答案：A11.霍乱弧菌的主要致病物质是(2017年初级士)A、荚膜B、鞭毛C、霍乱毒素D、索状因子E、氧化酶正确答案：C12.关于葡萄球菌A蛋白描述正确的是(2013年初级师)A、为半抗原B、有型特异性C、有种属特异性D、是一种多糖抗原E、存在于葡萄球菌胞浆中正确答案：C13.患者女,41岁。
【国家自然科学基金】_可培养微生物_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140730
猪胃肠道 1 107 生长 狂犬病毒 1 108 生物预处理 物理模拟驱油 1 109 生物量 激活剂 1 110 生物絮凝剂 滴灌 1 111 生物接触氧化法 溶解有机碳 1 112 生物技术 温带半干旱区 1 113 生物工程 深层发酵 1 114 生物多样性 淀粉酶 1 115 生物剂量学 海洋细菌 1 116 琼胶酶 海洋沉积物 1 117 环境工程学 海洋微生物 1 118 环(4-羟脯-亮)二肽 海水 1 119 玉米秸秆 活性污泥 1 120 玉米根系 泉古菌,多样1 122 漂序 沙漠腹地 1 123 溶原化条件 汞 1 124 温度 水稻土 1 125 深海沉积物 水华 1 126 深海 水分状况 1 127 淫羊藿 氯代硝基苯 1 128 海葵 氮素矿化 1 129 海洋微生物 氮离子注入 1 130 油松 氮源 1 131 污灌区 植酸酶 1 132 污水处理 植物吸收 1 133 水解活性 棉花黄萎病 1 134 水解度(dh) 梯度凝胶变性电泳(dgge) 1 135 水稻土 核酸提取 1 136 水田 树突状细胞 1 137 水悬浮液 标本 1 138 氯氰菊酯 极端环境 1 139 氨基糖 未获得培养微生物 1 140 毒株 未可培养微生物 1 141 次生林 有机质稳定性 1 142 植被恢复 有机废水 1 143 植物生长调节剂 旱地 1 144 栽培 斜卧青霉 1 145 核糖体工程 放线菌多样性 1 146 核心抗原 放线菌b-20 1 147 极端环境微生物 拮抗细菌 1 148 条件选择 抗肿瘤活性 1 149 杂交水稻种子 抑制作用 1 150 机理 成纤维细胞 1 151 未培养微生物 总氮 1 152 木质素降解酶 微生物采油 1 153 木聚糖酶 微生物调剖 1 154 木糖利用酵母菌 微生物絮凝剂 1 155 有机质固定 微生物生物量氮 1 156 暖池区 微生物燃料电池 1 157 旱地 微生物油脂 1 158 无菌苗培养 微生物效应 1 159 无机磷 微生物多样性 1 160 施氮量
细菌检验中级要点浓缩
微生物：分非细胞型（结构最简单、最小、通过、无细胞结构、由单一核酸DNA/RNA和蛋白质外壳组成—病毒）、原核细胞型（仅有原始核、无核膜、核仁，单个裸露DNA分子、缺乏完整细胞器—细菌、立克次体、螺旋体）和真核细胞型（胞核分化高，有典型的核结构—DNA和组蛋白组成，有完整的细胞器——真菌）基本分类单位——种；细菌：入侵细胞——粘附、定值、侵入、转归。
L型缺细胞壁，均有肽聚糖，菌毛，与运动无关，与致病性有关，性菌毛—遗传物质传递。
可有抗原性，适宜PH7.2-7.6，霍乱是8.4-9.2，质粒是染色体外的双链闭合环状DNA，中介体——拟线粒体，荚膜：其成分多为糖类，功能：可保护细菌免受吞噬细胞的吞噬和消化，对细菌有保护作用。
2.致病作用；3.抗原性；4.鉴别细菌的依据之一。
肺炎链球菌的主要致病物质是荚膜！粘质沙雷菌是最小的细菌，用于检查滤菌器的除菌效果。
病毒可以通过，消毒：是消除或杀灭外环境中的病原微生物及其他有害微生物的过程。
防腐：是防止和抑制微生物生长繁殖的方法；灭菌：利用物理或化学的方法消除或杀灭物体上所有微生物的方法。
无菌：物体上无活菌。
无菌操作：防止微生物进入机体或其他物体的操作技术。
紫外线杀菌（效果——枯草芽胞黑色变种ATCC9372），是在265-266nm干扰细菌的DNA复制。
对四环霉素耐药的原因是获得外源DNA编码，产生泵出系统，将药物外排。
细菌间通过结合性耐药质粒（R质粒）加上细菌间的结合传递。
对氯霉素耐药——获得编码氯霉素转乙酰基酶的质粒，编码产生乙酰转移酶灭活。
克拉霉素——阻碍细胞核蛋白50s亚基的连接，抑制蛋白质的合成而产生抑菌作用。
干烤法（160-170度2小时）——玻璃器皿，巴士——牛奶消毒用；头孢他啶——影响细胞壁的合成。
过滤除菌法——室内空气消毒及不耐高温的血清、毒素、抗生素的消毒，高压蒸汽法（103.4千帕斯卡，121.3度15-20分钟、效果——嗜热脂肪芽胞杆菌ATCC7953）——常用。
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铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的溶原化条件及稳定性研究
王琳;饶贤才;胡福泉;李明;朱军民;陈志瑾;但云婕;谭银玲
【期刊名称】《医学研究生学报》
【年(卷),期】2009(22)11
【摘 要】目的:溶原性噬菌体在宿主菌基因组中的整合和切割作用介导基因在宿主
菌间的水平转移.文中研究铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的溶原化机制及生物学特性,
为阐明噬菌体介导的基因转移和由此而产生的生物多样性提供实验依据. 方法:在不
同的条件下利用该噬菌体感染其宿主菌-铜绿假单胞菌PA3,制备溶原菌基因组
DNA,用在噬菌体基因组中没有酶切位点的Pst Ⅰ进行酶切,通过脉冲场电泳图谱确
定最佳的溶原化条件.并通过噬菌体效价测定噬菌体PaP3对温度、PH值、离子强
度及柠檬酸钠浓度等理化因素的敏感性. 结果:噬菌体PaP3的最佳溶原化培养条件
为37℃,在NZYM培养基培养铜绿假单胞菌PA310h后,以20:1(宿主菌数目:噬菌
体数目)的比例加入噬菌体PaP3感染24h.噬菌体PaP3对温度有一定的耐受性,对
pH的适应范围较广,Ca2+与Mg2+可使PaP3的效价增加,而柠檬酸钠可抑制噬菌
体生长. 结论:通过溶原菌基因组DNA的酶切确定了噬菌体PaP3的最佳的溶原化
条件,并在基因水平上证明PaP3为溶原性噬菌体,在不同的理化因素下具有不同的
稳定性.
【总页数】5页(P1131-1135)
【作 者】王琳;饶贤才;胡福泉;李明;朱军民;陈志瑾;但云婕;谭银玲
【作者单位】第三军医大学微生物教研室,重庆,400038;济南军区总医院实验诊断
科,山东济南,250031;第三军医大学微生物教研室,重庆,400038;第三军医大学微生
物教研室,重庆,400038;第三军医大学微生物教研室,重庆,400038;第三军医大学微
生物教研室,重庆,400038;第三军医大学微生物教研室,重庆,400038;第三军医大学
微生物教研室,重庆,400038;第三军医大学微生物教研室,重庆,400038
【正文语种】中 文
【中图分类】Q782
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2.铜绿假单胞菌噬菌体PaP3多糖解聚酶基因的克隆表达及生物学活性 [J], 贾鸣;
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4.铜绿假单胞菌噬菌体PaP3整合位点的鉴定 [J], 王琳;饶贤才;胡福泉;陈志瑾;谭
银玲
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