高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程
1.目的
规范高效液相色谱分析仪的使用和维护。
2.范围
高效液相色谱的使用和维护。
3.系统组成
本系统由2487检测器(2414检测器),1515输液泵(1525输液泵),717自动进样器及EMPOWER系统组成。
4.程序
4.1 流动相和样液制备
4.1.1 过滤溶剂
溶剂在使用前一定要用0.45μm的过滤器过滤。
4.1.2 保持储液瓶的清洁
普通的溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子。
应用HPLC级的水或溶剂清洗,不能在清洗过程中留下污迹。
4.1.3 保证溶剂的质量
一定要用HPLC级的溶剂,水也应达到HPLC级,同样也要使用高纯度的缓冲液。
将流动相过滤、脱气后,用封口膜及时封好待用。
将待测的液体样品经0.45μm的水相滤膜过滤后,滤液备用。
4.2 开机
按照检测器、柱温箱、自动采样器、泵、计算机的顺序,依次接通电源。
每次使用示差折光检测器进行样品分析时,需要提前打开,预热稳定。
4.3 高压输液泵的操作
4.3.1 液相色谱系统泵的流速在0.1-10.0ml/min之间,要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,流动相的过滤和流动相的脱气。
下面列出预防泵故障的注意事项:(1)用高质量的试剂和HPLC级溶剂;(2)过滤流动相和溶剂;(3)脱气;(4)工作时使用泵头的排水孔不停的用10%甲醇/水的混合溶剂冲洗柱塞杆;(5)不让水和腐蚀性溶剂滞留在泵中;(6)定期更换垫圈;(7)加润滑油。
处于良好操作状态的泵,应该使色谱图上的基线平稳,保留时间的重复性良好。
等度洗脱时压力波动小于±2%。
梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。
4.3.2 常规准备工作包括:开通电源,溶剂脱气,泵头及溶剂管路除气泡及泵的启动。
4.3.3 接通系统电源,仪器各单元进行自检,数秒后通过,接受操作指令。
4.3.4 流动相脱气方式:超声波脱气10min。
4.3.5 系统中气泡的排除,泵启动时,调节所需要的通道流速为1ml/min,该通道调节为100%。
将抽液阀旋至draw位,用针筒抽液10ml,将抽液阀旋至inject位,并推出针筒中的液体,将抽液阀旋至run位。
此时参比阀排出的液体应连续,如不连续则重复以上抽液排液操作。
将流速减小至0.2ml/min,将参比阀关闭。
柱前气泡如不能排除,则管路在不与色谱柱连接的情况下,提高流速至9ml/min,数分钟后将流速减至1ml/min。
4.3.6等度操作按direct键,进入isocratic菜单。
依次设定流路配比,流动相流速,柱温。
设定方法如下:按光标移动键,至闪烁光标出现在所需设定位
置上。
用数字键设定数值,按enter键确认,注意每个流动相其组成之和应为100%,设定流速为0.1ml/min,逐渐增加流速至实验所需的流量,待系统平衡后开始实验。
4.3.7 梯度洗脱操作梯度洗脱需要编制梯度表和程序事件[Program event]表,在[OPERATE GRADIENT]屏幕时运行。
按[program method]键,进入梯度编辑窗口。
移动光标键至[table] 处,输入数字键(1-15),按enter键,将光标移至梯度表第一行,依次输入流速和流量配比,分别按enter键确认。
光标移至第二行,依次输入梯度时间,流速,配比及曲线号(1-11),重复以上操作,至梯度表全部编完,按显示屏对应功能键[save],并记住[table] 。
按[Program event]键,进入程序事件表的编制,移动光标键至[table] 处,输入数字键(1-15),按[enter]键,将光标移至事件表第一行,依次输入事件号(1-10)和开关,按enter 键确认,光标移至第二行,依次输入事件时间,事件号,和开关,按enter键确认,重复以上过程至事件表完成,按save键储存。
4.3.8 梯度程序运行按[operate methods]键,进入梯度方法运行窗口,
将光标移至[table]处,输入欲运行的表号(1-15),按显示屏对应功能键[start run],运行。
在设置时,如有疑问,可用HELP提示每个设置的含义。
4.3.9 实验结束时,对泵进行冲洗后,关闭流量,注意流速必须要逐步变化。
冲洗顺序:如果使用有缓冲液的流动相,则停泵前一定要用HPLC级纯水清洗HPLC系统。
同时用清水清洗柱塞杆。
若停泵存放时间超过一天,则停泵前还需用水/甲醇清洗系统。
5.进样
5.1 采用717自动进样器。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源,待仪器自检完成后,确保所有指示灯都亮起。
2.检查溶剂瓶的液位,确保足够的溶剂供给。
3.清洁好色谱柱并连接到系统中。
三、仪器启动1.打开色谱软件,选择相应的方法。
2.点击“系统”菜单,选择“启动系统”命令,系统开始进行初始化。
3.在系统初始化完成后,点击“准备”菜单,选择“准备系统”命令,系统开始进行一系列的自动化准备工作,比如冲洗和平衡柱子。
4.检查系统的压力和温度,确保在正常范围。
四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。
2.将样品装入进样瓶中,注意不要超过瓶口。
3.将进样瓶插入样品进样系统中,按照方法设置的条件进行进样。
4.点击软件界面上的“进样”按钮,开始进样。
五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点,选择合适的色谱柱。
2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。
3.检查色谱柱的压力和温度,确保在正常范围。
六、色谱条件设置根据分析方法的要求,设置好色谱条件,包括流量、温度、柱温等参数。
七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器,比如紫外检测器、荧光检测器等。
2.设置检测器的工作参数,如波长、增益、基线噪声等。
八、开始分析1.在样品进样后,点击软件界面上的“开始”按钮,开始进行色谱分析。
2.监控检测器输出的信号,根据需要可以对信号进行放大或调整。
九、结果解析1.根据所用方法的要求,对分析结果进行解析。
2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。
十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。
2.关闭色谱柱进样系统。
3.关闭色谱仪电源。
此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程,希望能对使用者提供一定的参考和帮助。
在操作过程中,应严格按照安全操作规范进行,并及时进行维护和保养,以保证仪器的正常运行。
Waters e2695高效液相色谱仪操作规程
Waters e2695高效液相色谱仪操作规程1 目得指导与规范Waters e2695高效液相色谱仪得操作。
2适用范围该操作规程适用于Water e 2695高效液相色谱仪得操作。
3职责检验员应按操作规程进行仪器操作,质量监督员负责监督该操作规程得正确执行。
4操作4、1仪器组成与开机4.1.1仪器组成本仪器由Waters e 2695分离单元、Waters2998二极管阵列检测器、Waters ELSD 2424蒸发光散射检测器、Empower3色谱工作站与打印机组成。
Waterse2695分离单元包括四元梯度洗脱得溶剂输送系统,四通道在线真空脱气,可容纳120个样品瓶得自动分离单元,柱温箱,内置得柱塞杆密封垫清洗系统,溶剂瓶托盘;显示器,键盘用户界面。
4.1.2开机4.1.2、1依次接通Waters e 2695分离单元、检测器、计算机与打印机得电源。
4.1.2、2接通Waterse2695分离单元后,约20s仪器开始自检,约3mn内各部件得初始化完成,待主屏幕上方标题区出现“Idle”时,仪器进入待命状态。
4、2溶剂管路系统得准备4.2.1流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂,按[Menu/Status】,进入“Status(1)”屏幕,光标选“Degasser”,按[Enter】。
4.2.2灌注当色谱仪流路没有溶剂或系统中有空气时,需进行干灌注(DryPrime),注入流动相。
否则,进行湿灌注(WetPrime)以驱除气泡。
干灌注:按主机面板上[Menu/Status】,进入“Status(1)”显示,按[Direct Function】,选择“Dry Prime”,选溶剂通道,如Open A,选“DurationIIi按数字键输入5分钟,按”COntinue”,待限定时间结束后,重复操作,使所需得溶剂通道注满流动相。
湿灌注:进入“Status(1)”显示,选溶剂通道,输入100%,按[DirectFunction],选“Wet Prime”,按【OK】,根据面板提示设置流速及时间(默认流速为7、5ml /min,一般不用更改,时间可设置为5min),按【0K】。
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程Agilent 1100高效液相色谱仪操作规程一、引言Agilent 1100高效液相色谱仪是一种常用的分析仪器,广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
本文将详细介绍Agilent 1100高效液相色谱仪的操作规程,以帮助用户正确、高效地使用该仪器。
二、仪器准备1. 检查仪器是否处于正常工作状态,包括电源是否连接、仪器是否通电等。
2. 检查仪器各部件的完整性,如进样器、泵、柱箱、检测器等。
3. 检查进样器的进样针是否干净,如有污染应及时清洗。
4. 检查溶剂瓶是否充足,必要时更换。
三、样品准备1. 根据实验要求准备样品,并确保样品的纯度和浓度符合要求。
2. 准备样品溶液,注意溶解度和稳定性。
3. 如需稀释样品,请使用纯净溶剂,并按照一定比例稀释样品。
四、仪器操作1. 打开Agilent 1100高效液相色谱仪的电源,确保仪器处于正常工作状态。
2. 打开色谱软件,并进行系统初始化。
3. 在色谱软件中设置实验方法,包括进样量、流速、梯度程序等。
4. 打开进样器盖,将样品注射器插入样品瓶中,吸取适量的样品溶液。
5. 关闭进样器盖,将样品注射器插入进样器,并按下进样按钮进行进样。
6. 打开泵的开关,调节流速至所需数值。
7. 检查柱箱的温度设置,根据实验要求进行调节。
8. 打开检测器,并设置检测器的参数,如波长、灵敏度等。
9. 开始实验运行,观察色谱图的变化并记录实验数据。
10. 实验结束后,关闭泵、检测器等设备。
11. 关闭色谱软件,并保存实验数据。
五、日常维护1. 每次使用后,及时清洗进样器和柱箱,避免样品残留。
2. 定期检查泵的密封件,如有磨损应及时更换。
3. 定期校准检测器,确保准确性和稳定性。
4. 定期更换柱子,避免柱子老化影响实验结果。
5. 清洗仪器外壳,保持仪器的整洁。
六、故障排除1. 若发现仪器无法正常启动,检查电源和连接线是否正常。
2. 若发现进样器无法正常工作,检查进样针是否堵塞或损坏。
Waters2487型高效液相色谱仪操作规程
目的:规范Waters高效液相色谱仪(2487检测器、515泵)操作规程,确保仪器的正常操作和检测结果的可靠性。
范围:适用于本公司Waters高效液相色谱仪(2487检测器、515泵)的操作职责人:操作人员。
规程:1 仪器的组成Waters 2487是由输液泵、手动进样器、色谱柱、2487紫外检测器、柱温箱和色谱数据处理系统组成。
2 操作前的准备2.1准备好流动相,换上色谱柱用Peek接头拧紧。
2.2 操作2.2.1 开启电脑,打开HS2000色谱数据工作站(通用版),打开通道A。
2.2.2按打开仪器各部件电源开关(515泵、柱温箱、2487紫外检测器,2410示差检测器),约5分钟后,紫外检测器通过自检,LCD面板显示【Ready】,可进行排气操作。
2.2.3泵排气:排液阀逆时针180度,在515泵LCD面板按▼选择到PURGE出现,按【Run/Stop】,开始排气泡,5分钟后自动停止,排液阀顺时针180度拧紧,在LCD面板按▲选择到FLOW。
2.2.4 设置流速按【Edit/Enter】至光标出现在需改动的数字位置上,用“▼”或“▲”键增加或减少数字,流速设定后按【Menu】,存贮设定值2.2.5 设置温度在示差检测器的LCD面板上,按【2nd/Func】和【Purge/9】切换到温度界面(面板左上角指示灯亮),按【2nd/Func】和【Set℃/4】,然后输入设定温度,按【Enter】确定。
2.2.6 设置波长等2487紫外检测器通过自检后,输入数字键,按【Enter】确定波长。
2.2.7 运行按【Run/Sotp】,则泵开始运行,即可进行平衡及实验操作。
2.2.8 数据处理点击【文件】选择【打开】选择需要处理的图谱,处理完毕,按【文件】下拉菜单的【打印】,即打印图谱。
2.3 冲洗和关机2.3.1、流动相如果有缓冲盐,先用20%甲醇水冲洗以1mol/min流速冲洗60分钟,然后再用有机溶剂如甲醇或乙睛,用1.0ml/min流速冲洗60分钟,如无缓冲盐则直接用有机溶剂冲洗。
高效液相色谱仪使用与操作规程
4 、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正
常。
第二步、开 机
接通电源,依次开启不间断电源、四 元泵、自动进样器、柱温箱、检测器,待 泵和检测器自检结束后,打开电脑显示器、
主机,最后打开色谱工作站。
一)参数设定
1、 波长设定: 2 、流速设定: 3 、流动相规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积
的流动相。
检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如
超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡,按检查管路后再操
作。
观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声
二、样品
1、采用过滤或离心方法处理样品,
确保样品中不含固体颗粒; 2、用流动相或比流动相弱(若为反
相柱,则极性比流动相大;若为
正相柱,则极性比流动相小)的 溶剂制备样品溶液,尽量用流动
相制备样品液;
3、手动进样时,进样量尽量小,使 用定量管定量时,进样体积应为 定量管的3~5倍;
第四步、注意事项
人的方法及实验结果;
3、使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒, 洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针
筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;
4、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过 滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用 5%稀硝酸溶液浸泡后再洗
四、出现肩峰或分叉
1.样品体积过大
1.用流动相配样,总的样品体积小于第一峰 的15% 2.样品溶剂过强 3.柱塌陷或形成短路通道 4.柱内烧结不锈钢失效 2.采用较弱的样品溶剂 3.更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程高效液相色谱仪(High-performance liquid chromatography, HPLC)是一种对样品进行分离、检测的仪器。
对于化学、生物等领域的研究者来说,熟练掌握HPLC 的操作规程非常重要。
本文将详细介绍高效液相色谱仪的操作流程和注意事项。
设备准备在操作HPLC仪器之前,需要先对设备进行准备。
首先,需要检查仪器周围的环境是否清洁整洁。
注意检查废液罐、洗涤液罐的液位,以免在后续的使用中发生意外。
其次,需要准备好各种试剂和标准品,确保它们的适用性和相应的浓度范围。
需要使用高纯度的溶剂,在使用之前应先过滤,去除其中的杂质,保证后续操作的准确性和稳定性。
最后,对仪器进行预热操作。
通常情况下,需要对色谱柱和检测器进行预热,保证它们的温度稳定。
样品的制备样品的制备是至关重要的一步。
通常情况下,为了提高样品的净化程度和浓度,需要使用不同的制备方法,如提取、稀释、过滤等。
在进行样品制备时,需要注意以下几点:1.确认样品是否熔点低于所用的溶剂的沸点;2.确认样品是否需要进行提取或加强洗涤效果;3.对于样品的稀释和过滤操作,需要注意其可能带来的影响。
色谱柱的选择选择合适的色谱柱对于操作效果的影响很大,需要充分考虑实验的目的和测试要求进行选择。
选择色谱柱时,应注意以下几点:1.选择合适的材料和孔径;2.确认所选柱是否能够满足测量要求;3.确认所选柱的分离效应是否满足实验要求。
操作流程1.开机操作:根据仪器所得操作指南进行开机操作。
2.准备工作:将所需样品移至自动进样器,调整电量,并确认流速和溶剂比例是否正确。
3.洗涤操作:洗涤色谱柱,将废液排出废液罐中。
4.样品进样:按照操作指南将样品注入样品进样器中。
5.柱温控制:调节色谱柱的温度以控制柱的温度稳定。
6.流速控制:根据样品要求调节流速。
7.数据收集操作:实时收集并记录数据,如果需要,可以修改柱温、流速等操作参数。
8.数据处理:对数据进行处理和分析。
Agilent 1200高效液相色谱仪使用操作规程
Agilent 1200高效液相色谱仪使用操作规程一、目的:建立高效液相色谱仪的标准操作规程,确保标准操作。
二、范围:适用于Agilent 1200高效液相色谱仪的操作过程。
三、责任者:质保部Agilent 1200高效液相色谱仪检验人员对本标准的实施负责。
四、程序:1、开机前的准备工作:熟悉检验标准操作规程,按要求配制流动相,并以0.45μm的微孔滤膜滤过,并经超声机超声脱气10~15分钟,备用。
2、开机测样:2.1打开计算机,进入“Windows XP”画面,并自动运行“Bootp Server”程序。
2.2打开1200LC液相仪各模块电源。
2.3待各模块自检完成后,双击联机图标,化学工作站自动与1200LC 通讯,进入工作站画面。
2.4从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面,单击“系统视图”、“命令行”、使其命令前有“√”标志,来调用所需的界面。
2.5把流动相放入溶剂瓶中。
2.6打开Purge阀。
2.7单击“泵”图标,单击“设置泵”选项,进入泵编辑画面。
2.8设置流速:3-5ml/min,单击“确定”。
2.9单击“泵”图标,出现参数设定菜单,单击“控制”选项,选中“启动”,单击“确定”,则系统开始清洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止。
2.10单击“泵”图标,出现参数设定菜单,单击“控制”选项,选中“关闭”,单击“确定”关泵,关闭Purge Valve阀。
2.11单击“泵”图标,出现参数设定菜单,单击“设置泵”选项,设流速:1.5ml/min。
单击“确定”。
2.12单击泵下面的瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积,也可输入停泵的体积,单击“确定”,泵开始运行。
2.13单击检测器图标,单击“设置VWD”选项,在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,点击“确定”。
单击检测器图标,单击“控制”选项,在“灯”下方选“开”,点击“确定”。
2.14待仪器就绪,基线平稳,点击“运行控制”,点击“样品信息”选项,在“操作者姓名”后输入操作者姓名,在子目录中输入样品名,在前缀框中输入计数器起始位,仪器会自动命名,如VWD001、VWD002……)。
Agilent 1200系列高效液相色谱仪操作规程
Agilent 1200系列高效液相色谱仪操作规程一、开机1.按顺序开启显示器、计算机主机,依次打开仪器各部件电源开关,仪器进入待机状态,此时仪器各部件指示灯应呈黄色;2.双击桌面“仪器1联机”,约30s后,进入工作站操作界面;3.调出一个分析方法,检查各参数的设置;4.用100%分析纯甲醇冲洗柱子和系统30min后,再用95%水冲0.5-1h,待换成流动相且柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况。
二、数据采集方法编辑(一)直接设定:1 由“运行控制”进入样品信息。
设定操作者姓名,样品数据文件名等。
2 泵参数设定:(以二元泵为例)(1)在流量处输入流量,如1ml/min,在溶剂B处输入70.0,(A=100-B) ,也可插入一行时间列表,编辑梯度。
在最大压力极限处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
(2)单击确定进入下一画面。
3 柱温箱参数设定:(1)在柱温下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击更多>>键,选中与左侧一致,使柱温箱的温度左右一致。
(2)点击确定进入下一画面。
4 VWD检测器参数设定:(1)在波长下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在峰宽(响应时间)下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)。
(2)在时间列表中可以插入一行,输入随时间切换的波长,如1min,波长=300nm。
(3)点击确定进入下一画面。
5 单击方法菜单,选中保存方法,输入一方法名,如“test”,单击确定。
(二)调用已设置好的方法文件:在命令栏“方法”下选择“调用方法”,选定“方法文件”,单击确定即完成。
(三)编辑新方法:在命令栏选择“编辑完整方法”,然后在每个参数设置页界面下输入设定值,完成后在命令栏“方法”下选择“另存为”进行保存。
三、数据采集1.由主菜单上的序列进入序列参数,设定操作者姓名、数据文件路径等。
2.由主菜单上的序列进入序列表,设定样品瓶位置、样品名、方法名称、进样次数等,设置好后点击确定。
安捷伦LC1260液相色谱操作规程及使用注意事项
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项一、操作规程㈠开机1.把经过滤、脱气的各流动相装入贮液瓶中。
2.打开计算机,打开主机各模块电源(从上至下),再双击桌面“LC1260(联机)”图标,进入化学工作站。
3.旋开排气阀(逆时针),右键单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流量设为“5mL/min”,溶剂A设为“100%”,打开泵,排出管路中的气体,直到由贮液瓶到泵入口整个管路中无气泡为止,此过程约需要5min。
4.依次切换到溶剂B、C、D,分别排气。
㈡数据采集1. 编辑样品信息:由“运行控制”进入“样品信息”,设定操作者姓名,样品数据,文件名等。
2. 编辑完整方法:从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项,单击“确定”进入“方法注释”,编辑好单击“确定”。
在“选择进样源”中选择“手动进样”单击“确定”,在“设置方法”中进行参数设定。
3. 四元泵参数设定:在“流速”处输入流量,如1mL/min,在“溶剂”处依据需要选中B、C、D并输入相应的百分数,在右侧注释栏中标明各溶剂的名称;设置“停止时间”和“后运行时间”,在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子,在“时间表”添加编辑梯度。
4. TCC(柱箱)参数设定:在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它,右侧选中“与左侧相同”,使柱箱的温度左右一致。
5. VWD检测器参数设定:在“波长”右侧的空白处输入所需的检测波长,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,再设置“停止时间”和“后运行时间”。
6. 仪器曲线设置:默认即可。
7. 关闭排气阀(顺时针),冲洗色谱柱20~30min,待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况。
8. 将进样器转动手柄逆时针转到LOAD位置,在环路全量进样时(定量环体积为20uL),用50~100 uL的液相进样针将2~5倍定量环体积的样品缓慢注入进样器中,再将进样器转动手柄顺时针方向迅速转到INJECT位置,将定量环中样品引入系统中。
高效液相色谱法操作规程与注意事项
高效液相色谱法操作规程与注意事项1.程序1.1.仪器及性能要求:所用的仪器为高效液相色谱仪,由泵系统,进样系统,色谱柱,检测器和色谱数据处理系统组成。
1.1.1.泵系统:HPLC泵系统通过高压力管和设备从溶剂瓶中吸取计量的流动相到柱子中。
现行的泵系统有一元或多元计算机控制的计量泵组成,这些泵可以按照梯度洗脱的要求改变流动相的比例或者是按等度洗脱的要求混合流动相。
1.1.2.进样系统:化合物被溶解在流动相或合适的溶剂中,可以通过手动进样器或定量环,或自动进样器转移到流动相中。
自动进样器由可存放进样瓶的卡盘组成,进样瓶的顶部有一个可以刺入的隔膜,进样针通过这个隔膜将样品转移到一个定量环中然后输送到色谱系统中。
1.1.3.色谱柱:最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。
反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅胶和氨基键合硅胶)也有使用。
正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。
离子交换色谱系统使用离子交换填充剂量;分子排阻色谱系统凝胶或系统高分子多孔微球等;对映异构体的分离通常使用手性柱。
除另有规定外,柱温为室温。
1.1.4.检测器:常用的检测器包括紫外分光检测器,示差折光检测器,二极管阵列检测器。
固定波长检测器在单一波长下运行,典型的波长是254nm,通过低压力的汞灯发射。
可变波长的检测器包含持续的能源,例如氘灯或高压力氙灯,通过单色器或干涉过滤器产生一定波长的单色光。
1.2.系统适用性试验1.2.1.为了确定最终运行系统的有效性,应当进行系统适用性试验。
整个系统可以用以下指标来评价:信噪比、理论塔板数,分离度,重复性,拖尾因子,其指标及计算方法应在相关分析方法中予以规定,如果没有专门的规定,按以下方法进行计算:信噪比:用于评价色谱系统检测微量物质的能力,美国药典的计算公式:S/N=2H/h,H为峰顶到基线的距离,h为基线中噪声峰最大值与最小值的差,该段基线需取≥5倍半峰高宽的距离,如果有可能,目标峰两侧取相等的距离(如图1)。
