胚胎的发育与培养
植物胚胎培养
培养(endosperm culture)、离体受精(in vitro pollination)等类型。 1904年Hanning最早成功培养萝 卜和辣根的胚。
植物胚胎培养
柱头
花柱 雌 蕊
花药 雄 蕊
花丝
子 胚珠 房
子房壁
植物胚胎培养
种子各部分的发育来源
植物胚胎培养
合子发育成胚
珠被发育成种皮 受精极核发育成胚乳
成果实，并含成熟种子。
三、胚珠和子房培养
2.胚珠培养和子房培养的技术 子房培养 影响子房培养的因素
❖ 材料的选择：品种间的差异、胚囊发育时期 ❖ 培养基：基本培养基、激素、蔗糖（3-10%） ❖ 接种方式：要注意极性；营养吸收
单倍体来源和发育途径
❖ 由助细胞或胚囊的无配子生殖产生单倍体 ❖ 卵细胞、助细胞、反助细胞均可发育产生单倍
2.胚培养技术
成熟胚培养：指子叶期至发育成熟的胚培养。成熟 胚是自养的，培养基需要简单。仅提供一定的温度、 湿度就可以发芽生成植物体。如种子的发育。
培养过程：
种子——95%酒精消毒——选取完好种子—
—70%酒精浸数秒——0.1%升汞或10%次氯酸钠浸
泡——无菌水冲洗——种子培养几天——剥离种
胚——接种在培养基上。 成熟胚培养一般较易获得成功
用于单倍体育种。 子房培养的意义: 获得杂种植株； 未授精子房培养为试管受精提供技术基础；
三、胚珠和子房培养
2.胚珠培养和子房培养的技术
胚珠培养：将胚珠从母株中分离出来，放 在无菌的人工环境条件下，让其进一步生长 发育，以致形成幼苗的过程。
根据胚珠是否受精分为两类：
植物胚胎培养
这类植物种子内存在大量的珠心胚，珠心胚生 活力很强，往往得不到合子胚后代，影响杂交育 种结果，利用胚培养可以尽早取出合子胚进行培 养，从而获得杂种后代。
E、获三倍体或单倍体植株 因被子植物胚乳细胞大多为三倍体，胚乳培养
可以获得三倍体植株，从而使植物胚胎培养成为 一种新的育种途径，用于果树、瓜类等经济作物 产生无子果实。另外，对远缘杂种的胚进行培养 时，可以通过染色体消失法获得单倍体。
2．植物胚乳的发育特性
植物胚乳可以分为两大类：被子植物胚乳 和裸子植物胚乳。
被子植物胚乳是双受精的产物，它由二个 极核和一个雄配子融合形成，所以，在染 色体倍性上它属于三倍体组织。
裸子植物胚乳在受精前就已形成。裸子植 物的胚乳为配子体的一部分，由大孢子直 接分裂发育而成，因此它属于单倍体组织。
（1）使种胚发育不全的植物获得后代。例如天麻、 兰花种子成熟时，胚只有6-7个细胞，利用离 体培养可以打破休眠提早萌发。
（2）使含抑制性物质不发芽的种胚发芽。苹果属离 体胚培养48h即可萌发，而用种子则要9个月
C、使生活力低下或无生活力的种子萌发
许多落叶果树，特别是杂交种产生早熟、生活 力低下甚至无活力的种子，利用胚胎培养可使种 子萌发，提高萌发率。例如桃、芭蕉、山芋等。
（3）蔗糖浓度 蔗糖浓度多在3～10％之间，因不同植
物材料而异。 诱导培养阶段蔗糖浓度高。 分化培养时蔗糖浓度要低。
3.接种方式 主要考虑两个方面的问题： 极性；营养吸收
三.植物胚乳培养(endosperm culture)
1．概况 胚乳培养的最早研究始于1933年，Lampe和
Mills首例进行了玉米胚乳培养。胚乳培养的研究 主要集中在以下一些问题的探讨： A、胚乳细胞的全能性
动物胚胎发育的基本过程(共26张PPT)
三新、生原 命肠的（作第用六1（周）分—化四图开肢始和中）脑的都开1始为初步_外分_化_胚了_，_层真_让，人激2动为__中__胚__层，
精子形成
内胚层：消化道、呼吸道上皮、肝、胰等腺体。
组织分化、器官形成（三胚层的分化）
“一孔3、为二腔内_、_三胚_胚_层层_” _，4为_囊__胚__腔_，5为__原_肠__腔_。
初级卵母细胞 新生命的第六周—四肢和脑都开始初步分化了，真让人激动
哺乳动物胚胎发育的基本过程
被卵泡细胞包围,形成卵泡
指由受精卵发育成为幼体的阶段。
三、原肠作用（分化开始） 指由受精卵发育成为幼体的阶段。
MⅠ
人类胚胎第8周时在子宫内的照片 ，胚初具人形
人类胚胎第8周时在子宫内的照片 ，胚初具人形
次级卵母细胞 第一极体 囊胚：细胞开始分化;内细胞团将来发育成各种组织,
顶体反应 头部进入
4、遗传物质的来源：
5、蛙受精卵的特点：
动物极 上端 卵黄少 密度小 颜色深 植物极 下端 卵黄多 密度大 颜色浅
二、卵裂
1、概念： 受精后，受精卵开始进行有序的有丝分裂，
这个过程叫做卵裂。
2、过程：
动物极
卵裂
卵裂
卵裂
植物极
3、特点
2细胞
4细胞
8细胞
囊胚腔
胚胎总体积不变、细胞越来越多、卵裂 球越来越小、细胞为全能干细胞
MⅡ 囊胚：细胞开始分化;内细胞团将来发育成各种组织, 滋养层将来发育成胎膜、胎盘;出现囊胚腔后，进一步扩大会导致孵化。
二腔: 缩小的囊胚腔和新形成的原肠腔。
内胚层：消化道、呼吸道上皮、肝、胰等腺体。
在受精过程完
卵子 第二极体 两个第二极体 囊胚：细胞开始分化;内细胞团将来发育成各种组织, 滋养层将来发育成胎膜、胎盘;出现囊胚腔后，进一步扩大会导致孵化。 成
小鼠胚胎获得实验报告
一、实验目的1. 掌握小鼠胚胎的采集方法。
2. 了解小鼠胚胎的发育过程。
3. 培养实验操作技能。
二、实验原理小鼠胚胎的获得是通过人工操作，将雌鼠的受精卵取出，进行体外培养，直至发育成胚胎。
该实验旨在研究小鼠胚胎的发育过程，为后续的胚胎移植、基因编辑等研究提供基础。
三、实验材料1. 实验动物：雌性小鼠、雄性小鼠2. 实验仪器：显微镜、解剖显微镜、培养箱、离心机、培养皿、手术器械等3. 实验试剂：生理盐水、DEPC水、培养液、抗凝剂、消毒剂等四、实验步骤1. 实验动物处理（1）将雌性小鼠和雄性小鼠分别饲养于清洁、通风的动物房中，保持适宜的饲养条件。
（2）雌性小鼠和雄性小鼠分别进行交配，交配后观察雌性小鼠的阴道涂片，确认受精情况。
2. 胚胎采集（1）雌性小鼠交配后第2天，用解剖显微镜观察雌性小鼠的阴道涂片，确认受精情况。
（2）雌性小鼠交配后第3天，将雌性小鼠麻醉，固定于解剖显微镜下。
（3）用手术器械取出雌性小鼠的子宫，置于培养皿中。
（4）在解剖显微镜下，用镊子取出受精卵，置于培养皿中。
3. 胚胎培养（1）将受精卵放入培养箱中，在37℃、5%CO2、95%空气的条件下培养。
（2）观察受精卵的发育过程，记录胚胎的形态变化。
4. 实验结果分析（1）观察胚胎的发育过程，记录胚胎的形态变化。
（2）分析胚胎发育过程中各阶段的形态特征。
五、实验结果1. 胚胎发育过程（1）受精卵在培养箱中培养24小时后，可见胚胎开始分裂。
（2）培养24小时后，胚胎发育至桑椹胚阶段。
（3）培养48小时后，胚胎发育至囊胚阶段。
（4）培养72小时后，胚胎发育至原肠胚阶段。
2. 胚胎形态特征（1）受精卵：透明、圆形，直径约100μm。
（2）桑椹胚：细胞数目增多，排列紧密，形成桑椹状。
（3）囊胚：细胞分化明显，形成囊胚腔。
（4）原肠胚：细胞分化更加明显，形成原肠。
六、实验结论1. 通过人工操作，成功获得小鼠胚胎。
2. 小鼠胚胎在体外培养过程中，经历了受精卵、桑椹胚、囊胚、原肠胚等阶段。
体外培养中胚胎发育潜能的评价
筮宣医堂里±苤壶垫!垒生垒旦丝至鲞丝至塑』望!!!!!卫坐!堕坐鱼：垒匹垫!垒：y!!至：盟!．兰体外培养中胚胎发育潜能的评价甄碌然郁琦(中国医学科学院，北京协和医学院妇产科，北京100730)自1978年世界上首例采用体外受精一胚胎移植(i n vi t r o fe r t i l i zat i on and em buo t r ansf er，I V F—ET)技术的婴儿诞生的30年以来，一系列辅助生殖技术蓬勃发展，并在全世界范围内广泛开展。
I V F—E T已经成为治疗不孕症最为有效的方法之一。
尽管技术不断完善，出生婴儿数目逐年上升，但辅助生殖技术的发展仍面临着一系列困难，包括I V F—E T过程的关键技术——卵母细胞与胚胎的体外培养。
通常患者每个周期促排卵治疗后会获得10个左右的受精卵。
卫生部规定每次移植2～3个胚胎。
胚胎质量是影响临床妊娠结局的重要因素，如何评判胚胎的质量，选择最有发育潜能的胚胎进行移植，是胚胎工作中面临的一个重要问题。
胚胎的形态学评估是人类辅助生殖实验室工作的一个关键部分。
形态学评估无损伤性，是辅助生殖技术中最为常用的用于评价胚胎质量的方法，甚至是目前判断胚胎质量的唯一较为公认的标准。
完善的胚胎的形态学评分标准的建立，有利于胚胎发育与种植潜能的预测，为临床妊娠提供保障。
一、形态学评分方法胚胎的形态学评分是目前最常用的评价胚胎质量的方法。
从卵母细胞成熟、受精到胚胎分裂、囊胚形成，是一个复杂的动态过程，目前常规采用的形态学指标，是根据胚胎的一些形态学观察指标对质量进行的分级，这种方法具有一定的局限性。
胚胎的形态并不能够准确反映卵子与胚胎的发育潜能，而且，除了分裂期胚胎的形态学观测有较为公认的评估指标以外，在其他时期胚胎质量评定缺少国际公认的标准。
此外，形态学评117综述价不可避免的带有观察者的主观因素，影响了胚胎质量评估的可重复性。
二、代谢组学的胚胎评估胚胎质量的检测是I V F—ET技术中很重要的步骤，目前常规采用的是形态学指标，根据胚胎的一些形态学观察指标对胚胎质量进行分级。
人的胚胎发育
人的胚胎发育摘要个体发育是指多细胞生物体从受精卵开始，经过细胞分裂、组织分化、器官形成，直到性成熟等过程。
该过程可以分为两个阶段，即胚胎发育和胚后发育。
胚胎发育是指从受精卵发育到成熟的胎儿的过程。
胚胎发育包括受精卵（0~1天），卵裂（1~3天），囊胚（4天），原肠胚（7~12天），胚胎前期（13~60天）和胎儿（61~280天）。
关键词：受精卵，卵裂，囊胚，原肠胚，胚胎前期，胎儿1.受精卵1.1受精：成熟获能后的精子与卵子结合成受精卵的过程，称为受精。
一般发生在输卵管壶腹部。
正常成年男性一次射精可射出3亿～5亿个精子，其中300 ～500个最强壮的精子能到达输卵管壶腹，但最终只有一个精子能与卵子结合。
1.2受精过程精卵相会就是形成受精卵。
这个过程就是受精的过程。
受精过程约需24小时。
当一个获能的精子进入一个次级卵母细胞的透明带时，受精过程即开始。
到卵原核和精原核的染色体融合在一起时，则标志着受精过程的完成。
1.3受精过程①精子穿过放射冠；②精子穿过透明带；③精、卵质膜融合，细胞核融合。
精子的进入激发卵子完成第二次成熟分裂，这时精子和卵子的细胞核分别称为雄原核和雌原核，二者在细胞中部靠拢染色质混合，形成受精卵，即合子。
2.卵裂受精卵形成后立刻开始向子宫方向运行，一边进行细胞分裂。
由于子细胞被透明带包裹，在分裂间期无生长过程，仅原受精卵的胞质不断分到子细胞中，故随着细胞数的增加，细胞体积不断变小。
受精卵这种特殊的有丝分裂称卵裂。
产生的子细胞，称卵裂球。
受精后第三天，卵裂球达12～16个，共同组成一个实心的细胞团，外观如桑椹，故称桑椹胚。
桑椹胚细胞继续分裂，但卵裂球达100个左右时，细胞间出现若干小的腔隙，逐渐融合为一个大腔，腔内充满液体。
此时透明带开始溶解，胚呈现为囊泡状，故称为胚泡。
由滋养层和内细胞群构成。
3. 囊胚随着胚胎的进一步发育，胚胎的内部开始出现了含有液体的囊胚—囊胚腔，这个时期的胚胎叫做囊胚。
实验九 鸡卵的人工孵育和胚胎发育观察
实验九鸡卵的人工孵育和胚胎发育观察实验内容与目的鸡胚作为生物学的实验材料，其历史已经相当悠久。
鸡蛋取材方便，孵育条件简单，且一年四季都有新鲜材料可取，是胚胎学、发育生物学教学、科研的良好材料。
鸡的个体发生中，许多早期发育如受精及卵裂过程并没有象蛙胚那样观察得如此清楚。
当鸡蛋产出时，胚胎发育已处于原肠期（原条形成期）。
随着温度的降低，发育停止。
只有将蛋放到孵育温度下才能继续发育。
实验目的：了解鸡胚发育的大体阶段以及各阶段的形态特征；了解实验室鸡胚胎孵化的基本条件，明确环境对胚胎发育和健康胚胎的重要性。
实验内容：学习和掌握鸡胚胎发育所需要的条件，观察鸡胚胎发育的外部形态变化，掌握器官形成的基本规律；明确环境因素对胚胎发育和健康的影响。
实验材料与实验仪器实验材料：鸡胚装片，共8片：24小时鸡胚装片，24小时鸡胚连续横切，48小时鸡胚装片，48小时鸡胚连续横切，72小时鸡胚装片，72小时鸡胚连续横切，96小时鸡胚装片，96小时鸡胚连续横切；受精鸡蛋。
实验仪器：孵蛋箱、检蛋灯、解剖器、解剖镜、温度计、湿度计、小碗、培养皿、光学显微镜等。
实验内容（一）观察鸡胚切片观察24小时至96小时鸡胚的整装片和横切片，掌握在鸡胚发育的不同时段的组织结构。
（二）学习鸡卵的人工孵育及其注意事项1、孵蛋箱结构及使用方法：孵蛋前几天，将孵蛋箱擦净后，再用来苏尔、或过氧乙酸、或70%酒精消毒灭菌。
然后接通电源，打开气窗，转动调温旋钮，将温度调节到37-39℃。
再将同1%HCl 浸洗冲净的砂粒放于盛水盘中，加入适量蒸馏水，使箱内湿度达到50-60%的相对湿度。
待温湿度稳定2-3天后，即可使用。
2、受精蛋的选择和保存：为保证较高的孵化率，必须对蛋进行选择。
最好选用刚产出一周以内的蛋。
过圆、过长或畸形蛋淘汰。
壳上具凹凸不平条纹的蛋不宜使用。
用照蛋灯检查时，要选气室小，无裂纹的蛋。
卵黄破散，蛋内有黑点或血块的蛋均不能使用。
3、孵育前蛋的消毒及升温处理：入孵前将蛋从10℃冰箱中取出，先放室温下平衡温度3-4小时，使之逐渐升温，再用温水（30-40℃）浸洗干净蛋壳上的污物。
选修III 3.2 体外受精与早期胚胎的发育
试管 苗
克隆 羊
核移植、 动物细胞 动物细 细胞培养 核的全能 胞工程 和胚胎移 性 植
3.2 体外受精和早期胚胎培养
一、从试管牛说起 1、问题
（1）我国大多数牛的品种，产肉量或产奶量与 国际上的优良品种相比都有一定差距。 我国 奶牛：3000kg； 国际良种奶牛：10000kg； 我国内蒙黄牛：300kg； 澳大利亚纯种海福特肉用牛(2岁)：800kg （2）不可能靠大量引进良种牛来提高产量。 3～5万元 （3）牛的生育率很低。 一头牛一生只生育4～5头牛犊
3.2 体外受精和早期胚胎培养
三、胚胎的早期培养 1、发育培养液（适合的温度和PH） 成分： 无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、 核苷酸等营养成分，以及血清等物质。 目的： 早期胚胎的培养； 受精状况和受精卵的发育能力 3、胚胎移植时间 （1）牛、羊等：桑椹胚或囊胚阶段 （2）小鼠和家兔等实验动物：卵裂期的胚胎 （3）人的试管胚胎：8-16 个细胞阶段
3.2 体外受精和早期胚胎培养
二、体外受精 （二）精子的采集和获能 2、精子获能 （1）培养法 人工配制的获能液； 适用啮齿动物、家兔和猪等的精子 （2）化学诱导法 一定浓度的肝素或钙离子载体 适用牛、羊等家畜的精子
3.2 体外受精和早期胚胎培养
二、体外受精 （三）受精 1、条件 （1）精子获能和卵子成熟 （2）获能溶液或专用的受精溶液 2、过程 3、意义 （1）成为常规的动物繁殖生物技术 （2）可研究动物生殖细胞的发生机制
如何快速繁育新品种呢？
3.2 体外受精和早胚胎培养
一、从试管牛说起 2、解决方法
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物总量减少。
答案：(1)囊胚 有丝分裂 (2)原肠胚期 囊胚期 滋养层 胎儿的所有组织和器官 增加
(3)减小
减少
【互动探究】 (1)图中②细胞具有全能性吗？试分析原因。 提示：有。②细胞为胚胎干细胞，未分化，具有发育的全能性。
(2)图中所示时期继续发育将形成什么结构？与该时期相比较最大的
区别是什么？ 提示：原肠胚。出现外、中、内三胚层的分化。
内胚层
胚的发育：
第三次卵裂 第二次卵裂 第一次卵裂 受精卵 原肠胚 囊胚
二、胚胎发育的过程：
1、受精卵 卵裂球（卵裂期）
卵裂球（ 2细胞期）
卵裂球 特点：受精卵新陈代谢旺盛，有丝分裂， 细胞的数量不断增加，但体积变小，整个胚 胎的总体积并不增加或略减少。 此时每个细胞具有全能性
2、桑椹胚（桑椹胚期） 细胞数目为32
答案：(1)a→b→f→g (2)滋养层 囊胚腔
胚胎移植
构建重组DNA分子
内细胞团
(3)受体子宫对外来胚胎不发生免疫排斥反应
【加固训练】下图为通过胚胎工程生产牛的过程。请据图回答：
(1)实施胚胎工程完成a过程时，卵细胞必须发育到减数第二次分裂的
中期，精子必须进行 处理。 处理，以保证二者的生
(2)受体母牛必须和供体牛进行 理状态相同。 (3)b过程应用的技术是
(4)移植的胚胎可以是由受精卵发育成的，也可以是由通过核移植得
到的重组细胞发育成的，不同来源的胚胎发育成的个体的遗传物质可 能不同。
答案：(1)获能 (2)同期发情
(3)胚胎移植
免疫排斥
(4)不一定相同 移入的多个胚胎可能是由不同的受精卵或重组细胞 发育成的，其遗传物质可能不同
类型三
胚胎工程与其他工程的联系
，大量的研究已经证明，受体对
移入子宫的外来胚胎基本上不发生
体内的存活提供了可能。
反应，这为胚胎在受
(4)一次给多个受体移入多个胚胎，产生的多个后代基因型都相同
吗？
，原因是
。
【解析】(1)精子需要获能后才具备受精能力。 (2)(3)胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的 转换，不发生免疫排斥反应。
(3)桑椹胚细胞具有发育上的全能性；囊胚开始出现细胞分化，已分
化为滋养层细胞和内细胞团细胞；原肠胚已有胚层分化，分化为外、 中、内三个胚层。
答案：(1)桑椹胚 囊胚 (2)内细胞团 囊胚腔 (3)全能 细胞分化
原肠胚 外胚层 原肠腔 内胚层
胚层分化
类型二
胚胎工程
【典例2】我国已实现部分“胚胎工程产业化”，如肉牛、奶牛胚胎 工程产业化。以下是科学家采用不同方法产业化培育良种牛的过程， a～h表示操作过程，请回答：
(1)该图所示为胚胎发育的
期，此时细胞分裂的方式为
。结构①为
，结构②将来发育成
。
(2)高等哺乳动物胚胎发育经历的时期是受精卵→卵裂期→32细胞期 →囊胚期→原肠胚期→幼体，其中最关键的时期是 ，细胞开
始分化的时期是
。
，卵裂球中
(3)随着卵裂的进行，卵裂球中每个细胞的体积 有机物含量 ，DNA含量 。
• 专能干细胞(成体干细胞) – 如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等 – 能分化出特定的组织
1.胚胎干细胞培养：
培养关键： 需要一种能促进胚胎干细胞的生 长，但抑制其分化的一种培养体系。 培养过程： 1、制备饲养层(胚胎成纤维细胞)；
2、培养胚胎到内细胞团突出饲养层； 3、酶消化或机械剥离内细胞团；
4、分为单个细胞。 5、加饲养层继续传代培养。
从屠宰厂收集牛卵巢
取出卵母细胞
（也可以活体进行穿刺取卵）
将获能的精子和成熟后的卵（母） 细胞共同培养，便可受精
胚胎体外培养：其实质是动物细胞培养，只不过培 养的全能性细胞，可以发育为个体。
培养液: 水、无机盐、有机盐、维生素、激素、 氨基酸、核苷酸以及动物血清等. 其他条件： 适宜的温度等。
一定要注意，“试管婴儿”并不是从试管中呱呱 坠地的，由于没有任何一个科学家可以在实验室 中模拟哺乳动物的子宫条件，所以，哺乳动物培 育到早期胚胎（一般是囊胚期），必须移植到代 孕母体的子宫中去。
明确胚胎移植对母畜的处理。
【解析】(1)培育“试管牛C”包括体外受精→胚胎移植→后代 (a→b→f→g)；d操作是指胚胎移植，h操作是指基因工程技术，其核 心是重组DNA分子的构建。
(2)囊胚的结构包括③(内细胞团)、①(滋养层)和②(囊胚腔)。
(3)根据受体子宫对外来胚胎不发生免疫排斥反应的原理使胚胎在受 体子宫中存活。
【典例3】(2012·山东高考)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒
山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单 流程如图。
(1)过程①中最常用的运载工具是 核酸内切酶和 (2)在过程②中，用 。
，所需要的酶是限制性
处理将皮肤组织块分散成单个
成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于 5%CO2的气体环境中， CO2的作用是 。
内含囊胚腔）
原肠胚（内
含原肠腔）
各种器 官原基
胎儿形成
*三、动物的个体发育（选学）
胚胎发育 阶段 划分 胚后发育
指受精卵发育为幼体 (卵膜内、母体内)
卵生动物： 幼体从卵膜内孵化出来→成体 胎生或卵胎生动物：
幼体从母体内生出来→成体
第二节
胚胎工程
胚胎工程
胚胎工程通常指各种胚胎操作技术。 胚胎工程的研究对象主要限定于高等脊椎 动物，特别是哺乳。研究的重点内容有体 外受精、胚胎体外培养、胚胎移植、胚胎 分割、胚胎干细胞培养等技术。
(1)培育“试管牛C”技术的操作流程是
(填字母)，
d操作的名称是
，h操作的核心是
，②
。
，
(2)图中数字标号代表的结构名称是：① ③ 。
(3)移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 。
【解题指南】解答本题的思路：分析图形→明确a～h各操作→推测培 育A、B、C、D所需要的工程技术→明确胚胎分割的时期和具体要求→
蛋白酶处理组织使其分散成单个细胞；CO2的作用是维持培养液的pH。
(3)成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行去核处理。 (4)重组细胞要进行早期胚胎培养，发育到桑椹胚或囊胚才能移植；
通过胚胎分割技术可以获得较多的胚胎。
答案：(1)质粒 DNA连接酶 (2)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 维持培养液的pH (3)去核 (4)(早期)胚胎培养 胚胎分割
动物个体发育的大致过程
受精卵
胚胎发育
幼体
性成熟个体
胚后发育
一、受精作用
• 1.概念：成熟的精卵融合成为受精卵的 过程。 • 2.受精过程：精卵识别、精子附着于卵 膜、精卵质膜融合、精卵细胞核融合。 • 3.精卵识别的基础：特异性蛋白 • 4.场所：输卵管
二、胚胎发育的过程：
外胚层
中胚层 原肠腔 囊胚腔
(3)成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行
处理。
(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是
胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。
。在
【解题指南】解答本题需要注意以下三点： (1)认真分析图形，区分图示中的基因工程、细胞工程和胚胎工程。 (2)清楚动物细胞培养和早期胚胎培养所需要的营养成分和外界条件。
(3)要成功培育转基因绒山羊有两个关键点：一是将目的基因顺利导
入受体细胞，二是将带有目的基因的体细胞核移植到去核的卵 (母)细 胞中。
【解析】(1)过程①为基因工程的步骤之一，最常用的运载工具为质 粒，在此过程中所需的酶是限制性核酸内切酶和 DNA连接酶。 (2)过程②为动物细胞工程中的动物细胞培养，要用胰蛋白酶或胶原
受体母牛
……同期发情处理…… 超数排卵 供体 公牛
配种
胚胎移植
获取早期胚胎 妊娠检查
分娩（胚胎移植的犊牛）
三、胚胎分割
借助显微操作技术将早 期胚胎切割成几等份，再移 植到代孕母的子宫中发育， 产生同卵多仔后代。 分割方法： 机械法(切割针、切割刀) 酶处理 处理对象：一般为卵裂球
四、胚胎干细胞的培养
“ 试 管 流动 程物 ” 技 术
采集卵母细胞
采集精子
精子体外获能 卵母细胞的体外培养 体外受精 受精卵 胚胎体外培养 早期胚胎 胚胎移植 在代孕母亲 子宫中发育
幼体
成体
二、胚胎移植
“借腹怀胎” 将良种 家畜的早期 胚胎分别移 植到同期发 情的代孕母 的子宫里， 通过代孕母 妊娠产仔的 技术。
供体母牛
【解题指南】解答本题需明确： (1)从图示知，该时期具有两个胚层，可据此判断为囊胚期。 (2)卵裂期细胞分裂较快又不能从外界及时吸取营养物质，据此可判
断每个细胞体积、卵裂球中有机物含量和 DNA含量的变化。
【解析】(1)图示为胚胎发育的囊胚期，图中①②依次为滋养层、内 细胞团；前者发育成胚胎的附属结构或胚外结构，后者发育成胎儿的 所有组织和器官，整个发育过程都进行有丝分裂。
2、胚胎干细胞核移植：
将胚胎干细胞核移植 到去核的卵细胞中，经过 胚激活、胚胎培养、胚胎 移植后直接由受体完成克 隆动物的技术。
3、胚胎干细胞的主要用途：
(1)基因敲除，获得移植器官。
(2)培育出人造组织器官， 用于器官移植。 (3)改良创造动物新品种。
类型一
胚胎发育的过程
Байду номын сангаас
【典例1】高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂，经 32细胞期、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的 幼体。如图是胚胎发育过程中某阶段示意图，据图回答下列问题：
5、三胚层的分化（具体内容不作要求）
外胚层：中枢神经系统和感觉器官，如脑、脊髓、 眼、耳、舌等；表皮及其附属结构，如毛、指甲、 汗腺、皮脂腺、黏液腺等。 中胚层：真皮、骨骼、肌肉、脊索、内脏器官的外膜、循 环系统、排泄系统、生殖系统等。 内胚层：消化道、呼吸道和肺的上皮组织、中耳、甲状腺等