实时荧光核酸恒温扩增技术在泌尿生殖道沙眼衣原体感染检测中的应用
实时荧光核酸恒温扩增技术在泌尿生殖道沙眼衣原体感染检测中的应用
发表时间：2014-07-04T13:54:51.310Z 来源：《中外健康文摘》2014年第10期供稿 作者： 陈敏1 谭浩1 石坚
[导读] 患者在16岁-24岁非常容易出现CT感染的情况，并且女性患者多于男性患者，在临床没有显著的特征表现。
陈敏1 谭浩1 石坚2
(1湖南省妇幼保健院检验科 410008 ;2解放军163医院检验科 164800)
【摘要】目的：探讨对泌尿生殖道沙眼衣原体（CT）感染进行检测的过程中，采用实时荧光核酸恒温扩增技术（SAT）获得的效果。方法：选取我院2011年10月—2013年10月200例疑似患者，针对所有患者尿样以及拭子标本在同一时间完成SAT检测以及CT培养检测，对
检测后表现出差异标本利用PCR方法针对拭子标本实施二次检测，最后由最终的检测结果对SAT技术在实施检测过程中具有的敏感性以及
特异性进行详细评估。结果：对细胞培养以及PCR最终的实验结果进行相关性分析，最终分别得出SAT技术在对尿样标本进行检测以及对
拭子标本进行检测后分别具有的敏感性以及特异性，仔细分析二者最终检测结果的符合率，发现没有显著差异（P>0.05）。结论：在对CT
试剂盒进行检测的过程中采用SAT技术表现出了诸多的优点，最终的检测结果表现出了较高的敏感性以及特异性，临床针对CT检测工作具
有重要的应用意义。
【关键词】实时荧光核酸恒温扩增技术 沙眼衣原体 尿样检测
【中图分类号】R691.3 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）10-0165-01
患者在16岁-24岁非常容易出现CT感染的情况，并且女性患者多于男性患者，在临床没有显著的特征表现。当前在进行CT检测的过程中，多数都将患者泌尿生殖道分泌物当作此次实验的检测标本，此种方式在对患者进行取样的过程中会对患者带来诸多的痛苦，进而导致
患者没有强烈的检测意愿，与此同时最终的检测结果也不能表现出显著的敏感性以及特异性[1]。本文主要针对我院2011年10月—2013年10
月200例疑似患者，对所有患者的尿样标本以及拭子分泌物实施CT检测，最终对检测具有的敏感性以及特异性进行准确评估。现将具体的
临床研究报告如下。
1、资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2011年10月—2013年10月200例疑似患者，其中男85例，女115例。患者最小年龄为22岁，患者最大年龄为65岁，患者的平均年龄为（42.13±2.5）岁。收集所有患者的分泌物以及尿样标本进行检测。针对男性患者，主要选择尿道拭子以及尿样作为最终的检测标
本，针对女性患者，主要选择宫颈拭子以及尿样作为最终的检测标本。
1.2 方法
1.2.1 采集标本
在准备针对患者进行标本的采集之前，要求患者在两个小时之内不能排尿。利用拭子进行分泌物的采集：在男性的尿道口或者女性的宫颈口将拭子（特制的无菌棉）伸入进行标本的采集，完成采集后，在生理盐水中（1.5毫升）对拭子进行洗涤。之后针对洗液进行充分震
荡，待混匀后，吸取洗液1毫升放入标本冷冻保存管中（内装有样本保存液1毫升），充分混匀；将标本放在温度在零下20摄氏度的环境下
进行保存，之后准备进行PCR或者SAT的检测。采用需要培养的标本：将利用拭子完成采集的分泌物标本放在运送培养基中（1毫升衣原
体），准备进行培养衣原体的实验。采用利用核酸进行检测的尿标本：在准备进行标本的采集之前要求患者在2个小时之内不可以排尿，对
患者的首段尿样进行收集，剂量约为1毫升，之后与保存液（1毫升样本）充分混匀，放置在零下20摄氏度的环境下保存，准备进行SAT的
检测[2]。
1.2.2 CT-SAT的技术原理
在温度相同的条件下，利用M-MLV逆转录酶形成RNA的一条双链，之后通过T7RNA多聚酶形成RNA拷贝，数量最少为100个，最多为
1000个[3-4]；之后任一个RNA拷贝通过逆转录完成扩增循环；与此同时，RNA拷贝会与探针（荧光标记）互相结合，最终出现荧光[5]。通过荧光检测仪器能够有效将荧光信号进行捕捉，充分表达出扩增循环的效果[6]。
1.3 统计学方法
在进行本次实验的研究过程中主要利用统计学软件SPSS15.0对相关数据进行具体分析并统计，利用t检验表示计量资料，利用卡方检验表示拭子标本与尿液标本二者最终检测结果具有的符合率，以P>0.05为不存在差异，无统计学意义。
2、结果
2.1 细胞培养与检测的最终结果
针对本次研究的200例患者，采用CT-SAT检测对拭子分泌物的标本进行检测后最终的阳性率为44.5%（89/200）；检测尿样标本最终的阳性率为41.0%（82/200）；采用CT细胞培养法对拭子标本进行检测后最终的阳性率为39.5%（79/200）。具体情况可见下表。
表1 CT细胞培养同SAT的检测结果
3、讨论
在进行本次的研究中发现，针对200例接受检查的患者，采用CT-SAT对其尿样标本以及拭子标本完成检测后，发现二者的符合率较高，没有表现出显著差异（P>0.05）。在对CT试剂盒进行检测的过程中采用SAT技术表现出了诸多的优点，最终的检测结果表现出了诸多
的敏感性以及特异性，成功凸显检测的价值与意义[7]。
参考文献
[1] 李林海,陈丽丹,刘文婷等.实时荧光核酸恒温扩增技术和液体培养法检测解脲脲原体的比较[J].生物技术通讯,2013,(2):251-253.
[2] 周璐,蔡筠,谢建生等.实时荧光核酸恒温扩增技术在不孕育龄妇女病原体检测中的应用研究[J].医药前沿 ,2013,(21):55-56.
[3] 孙玉华,陈峰,蔡瑞云等.实时荧光核酸恒温扩增技术检测尿液中沙眼衣原体的分析[J].中国现代医生,2011,49(22):124-125. [4] Li, Xiao,Donna M, Crabb,Stephen A, Moser,Lynn B, Duffy,John I, Glass,Vanya, Paralanov,Ken B, Waites . Genotypic
characterization of ureaplasma serovars from clinical isolates by pulsed-field gel electrophoresis. . Journal of clinical microbiology, 2011，
49（9）：:105-106.
[5] 高志华,金印,陈峰等.实时荧光核酸恒温扩增技术检测尿液中淋球菌的分析[J].国际检验医学杂志,2012,33(4):463-464.
[6] 张津萍,龚匡隆,尤永燕等.实时荧光核酸恒温扩增法检测泌尿生殖道淋球菌感染[J].国际皮肤性病学杂志,2010,36(3):137-139.
[7] 顾伟鸣,杨阳,吴磊等.实时荧光恒温扩增检测技术对泌尿生殖道沙眼衣原体感染检测的临床研究[C].//第五届全国性传播疾病防治学术研讨会论文集.2010:260-262.
实时定量PCR与微孔渗漏法联合检测沙眼衣原体
实时定量PCR与微孔渗漏法联合检测沙眼衣原体
孔亚军;喻海忠
【期刊名称】《中华医学研究与实践》
【年(卷),期】2004(002)008
【摘 要】目的 探索一种快速、经济、敏感的方法用来诊断泌尿生殖道中沙眼衣原体(Chlanydia traehonaris，CT)。方法 用微孔渗漏法、实时定量聚合酶链反应(read-time quantitative polymerase chain reaction，real-time Q-PCR)和直接免疫荧光分析法(DFA)和聚合酶链反应检测泌尿生殖道中CT。结果 微孔渗漏法阳性率为25．83％，DFA法为25．67％，PCR法为34．52％，teal-time Q-PCR法为52．63％。微孔渗漏法与DFA法二者阳性率无显著性差别(P>0．05)。且微孔渗漏法不需特殊仪器，测定时间短，工作量小，灵敏度高。teal-rime Q-PCR、PCR法和DFA法之间阳性率有显著性差别(P<0．01)。结论 因此微孔渗漏法与teal-time Q-PCR联合泌尿生殖道中CT具有简便、快速、检出率高的优点。
【总页数】2页(P15-16)
【作 者】孔亚军;喻海忠
【作者单位】江苏省南通市医院;江苏省南通市中西医结合医院226001
【正文语种】中 文
【中图分类】R446
【相关文献】 1.微孔渗漏法与聚合酶链反应联合检测沙眼衣原体 [J], 喻海忠;牛静娟;陈美荣
2.实时定量PCR和细胞培养及金标法检测不孕妇女沙眼衣原体 [J], 廖启洪;梁志东
3.微孔渗漏法与聚合酶链反应联合检测解脲脲原体 [J], 袁建芬;喻海忠
4.应用PCR法联合检测沙眼衣原体和解脲支原体 [J], 张彬;王立英
5.应用PCR杂交梳法联合检测淋病奈瑟氏菌、解脲支原体、沙眼衣原体 [J], 任健康;刘少棠;李亚娥
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买
应用荧光探针定量PCR检测生殖道沙眼衣原体和解脲脲原体
应用荧光探针定量PCR检测生殖道沙眼衣原体和解脲脲原体
乔刚;王永文;李艳;程茂玲;龚艳
【期刊名称】《检验医学》
【年(卷),期】2004(019)005
【摘 要】目的了解淋病奈瑟菌性尿道炎(GU)和非淋病奈瑟菌性尿道炎(NGU)患者同时感染沙眼衣原体(Ct)和解脲脲原体(Uu)的状况.方法应用荧光探针定量聚合酶链反应(PCR)对198例NGU患者和102例GU患者分别进行Ct和Uu检测.结果
NGU患者Ct、Uu的感染率分别为27.3%、18.2%,二者均感染的为8.1%;GU患者Ct、Uu的感染率分别为44.1%、38.2%,二者均感染的为15.7%.结论 GU患者中伴Ct、Uu感染的比NGU患者更多见.
【总页数】2页(P460-461)
【作 者】乔刚;王永文;李艳;程茂玲;龚艳
【作者单位】胶南市人民医院,山东,胶南,266400;通化市人民医院,吉林,通化,134000;胶南市人民医院,山东,胶南,266400;胶南市人民医院,山东,胶南,266400;胶南市人民医院,山东,胶南,266400
【正文语种】中 文
【中图分类】R446.5
【相关文献】
1.荧光定量聚合酶链反应在同时检测淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和解脲脲原体中的应用 [J], 杨晓英 2.荧光定量PCR检测淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体结果分析 [J], 张欠欠;仵恒立;胡军婷;成俊珍;任勇;杨晗;马莹
3.应用聚合酶链反应检测泌尿生殖道淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体 [J], 肖瑜
4.荧光定量PCR检测女性生殖道解脲脲原体原体的应用评价 [J], 黄会;赵香依;吴多荣;姚敏
5.应用荧光定量PCR与常规方法检测解脲脲原体、沙眼衣原体的比较 [J], 丁大朋;万丽平
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买
荧光定量聚合酶链式反应检测生殖道沙眼衣原体的临床应用
中国中西医结合皮肤性病学杂志２００８年第７卷第２期
荧光定量聚合酶链式反应检测生殖道沙眼衣原体的临床应用
陈暖，彭学宏，李粉莲 （汕头大学医学院第一附属医院，汕头５１５０４１） ・９５・
・ ｌ生病・
摘要：目的 探讨荧光定量聚合酶链式反应（ＦＱ—ＰＣＲ）￣，Ｉ技术在泌尿生殖道沙眼衣原体的应用。方法 用 ＦＱ—ＰＣＲ法和抗原检测法对怀疑有沙眼衣原体感染的６５例门诊患者分别进行检测。结果两种方法阴性符合率为 ９７．７３％，阳性符合率为７６．１９％（Ｐ＜０．０５），差异有统计学意义。结论ＦＱ—ＰＣＲ法作为一种核酸定量技术、具有高特异、 高敏感的特点，不仅可以准确诊断，而且其定量技术可指导临床用药，值得推广。 关键词：荧光定量聚合酶链式反应；沙眼衣原体；泌尿生殖道感染 中图分类号：Ｒ６９ｌＩ３ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７２—０７０９（２００８）０２—００９５－０２ 荧光定量ＰＣＲ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｑｕａｎｔｉｔａ—ｆｉｖｅ ＰＣＲ，ＦＱ—ＰＣＲ） 技术于１９９６年由美国Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ公司推出，由于该 技术不仅实现了ＰＣＲ从定性到定量的飞跃，而且与常规 ＰＣＲ相比，它具有特异性更强、有效解决ＰＣＲ污染问题、自 动化程度高等特点，目前已得到广泛应用。沙眼衣原体 （ｃｈｌａｍｙｄｉａ￣ａｃｈｏｍａｔｉｓ，ＣＴ）是引起非淋菌性泌尿生殖道炎症 的主要病原体，沙眼衣原体的实验室检测技术主要分为细胞 培养观察包涵体的经典细胞生物学方法、免疫学方法和以核 酸扩增技术为代表的分子生物学检测方法。但因操作复杂，受 影响因素多，一直未得到普遍应用。本实验采用荧光定量ＰＣＲ 方法ｌｌｌ２１，检测沙眼衣原体，取得了较好的效果，现报告如下。 １材料与方法 １．１标本来源标本均来自汕头大学医学院第一附属医院 皮肤科、妇产科、泌尿外科，从怀疑有沙眼衣原体感染的患者， 经同意取其宫颈、尿道分泌物或组织送检。共检测标本６５份。 １．２仪器与试剂ｌｉｇｈｔｃｙｃｌｅｒ ＴＭ型核酸扩增仪（德国罗氏公 司）；ＴＧＬ一１６Ｇ型低温离心机（上海安亭科学仪器厂）；ＨＢ— ｌ００型恒温金属浴（杭州博日科技有限公司）；ＨＦ～ｓａｆｅ一７６０ｓ 型生物安全柜（ＣｌａｓｓＩＩ，上海力申科学仪器有限公司）。沙眼 衣原体ＦＱ—ＰＣＲ诊断试剂盒为匹基生物工程有限公司产品； 衣原体抗原检测试剂盒为美国美迪公司产品。 １．３标本采集 用无菌棉拭子插入男性尿道２－３ ｃｍ或女性 宫颈１—１．５ ｃｍ，转动５—１０ Ｓ并停留数秒后，将棉拭子置入 １ ｍＬ无菌生理盐水试管中，密闭送检。 １．４检测方法衣原体抗原检测：按试剂盒说明书操作及判 定结果。ＦＱ—ＰＣＲ实验方法：：将沙眼衣原体标本１３ ０００ ｒ／ｒａｉｎ， 离心１０ ｍｉｎ，弃上清液，加入ＤＮＡ抽提液混匀，经消化、煮 沸、离心后，取上清液ＤＮＡ作为反应的模板进行ＦＱ—ＰＣＲ。反 应条件为：９３℃５ ｍｉｎ预变性，然后按９３℃４５ Ｓ，５５ｏＣ ４５ Ｓ，进 行４０个反应循环。反应结束后，由电脑自动分析计算出定量 结果。定量阳性质控方法：每批沙眼衣原体试剂盒，均按试剂 盒内提供的定量阳性质控标准品，做定量阳性质控。每次检 测均做阳性和阴性对照。 １．５统计学处理采用Ｅｘｃｅｌ ２００３统计软件对检测结果进 行统计学Ｘ 检验。 ２结果 ２．１工作曲线每次ＦＱ—ＰＣＲ的阴、阳性对照结果均正确。 沙眼衣原体的定量阳性质控标准品经ＦＱ—ＰＣＲ，以起始拷贝 数的自然对数为横坐标，以循环阈值为纵坐标，所得工作曲 线为一条严格的直线型标准曲线。 ２．２阳性检出率ＦＱ—ＰＣＲ从６５例标本中检出阳性２ｌ例， 占３２．３ｌ％。其中ｌ６例用抗原检测法也为阳性，５例阴性，阳 性符合率为７６．１９％。ＦＱ—ＰＣＲ检测阴性４４例，用抗原检测法 检测出阳性１例，阴性４３例，阴性符合率为９７．７３％。对两种 检测方法的结果进行统计学分析，经ｘ 检验，按仅＝９．０５水准 说明两种方法阳性检出率差异有显著性（ｘ ＝５．０４，Ｐ＜０．０５）。 即在检测沙眼衣原体的实验中ＦＱ—ＰＣＲ技术比抗原检测法 具有更高的灵敏性。 ２．３治疗前后平均值ＦＱ—ＰＣＲ检测的２ｌ份阳性标本定量 对数平均值为８．３￣１０５。经治疗后复查，阳性标本ＤＮＡ拷贝平 均值为３．９￣１０３，明显降低，差异有显著性（￣￣－－４．８９，Ｐ＜０．０５）。 ３讨论 实验结果提示，ＦＱ—ＰＣＲ技术比抗原检测法具有更高的 灵敏性，且具有很好的符合率。本实验对ＦＱ—ＰＣＲ技术检测 的６５例标本结果进行分析表明，与抗原检测法的阳性符合 率为７６．１９％。５例标本ＦＱ—ＰＣＲ检测阳性而抗原检测法为阴 性，上述现象的出现可能是ＦＱ—ＰＣＲ技术将病原体特异ＤＮＡ 片段扩增至数百万倍以上，其敏感性远高于抗原检测法，及 ＦＱ—ＰＣＲ可将已死亡的沙眼衣原体基因扩增出来等原因所造 成。本实验阴性符合率为９７．７３％，１例标本ＦＱ—ＰＣＲ检测阴 性而抗原检测法为阳性，这可能是由于Ｔａｑ酶抑制因子等成 分的存在及提取ＤＮＡ模板时处理不当而导致扩增失败。荧 光定量ＰＣＲ对病原体的检测有效的克服了免疫学检测的“窗 口期”问题。同时荧光定量基因检测方法可准确灵敏地反映沙 眼衣原体感染数量和治疗恢复情况，对沙眼衣原体诊断和疗 效的观察具有重要的指导作用。因此，荧光定量ＰＣＲ法作为 一种核酸定量技术、具有高特异、高敏感的特点，值得推广。 参考文献： ［１］程钢，何蕴韶，周新宇．荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病 毒ｍ．中华医学检验杂志，１９９９，２２（３）：１３５．
3种方法在泌尿生殖道沙眼衣原体检测中的应用和评价
・检验技术与方法・ 国际检验医学杂志２０１３年６月第３４卷第１１期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｊｕｎｅ ２０１３，Ｖ０ｌ＿３４，Ｎｏ．１１
３种方法在泌尿生殖道沙眼衣原体检测中的应用和评价
王礼 ，唐恒锋。
（１．深圳罗岗医院检验科，广东深圳５１８１１２；２．深圳市观澜人民医院检验科，广东深圳５１８１１０）
摘要：目的评价免疫层析法（ＩＣＡ）、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ－ＰＣＲ）三种方法在检测泌
尿生殖道沙眼衣原体（ＣＴ）中的应用价值。方法 采用ＩＣＡ、ＥＬＩＳＡ和ＦＱ－ＰＣＲ三种方法同时对该院性病门诊、妇科及泌尿外科
门诊８２５份泌尿生殖道标本进行ＣＴ检测，分别计算三种方法的灵敏度、特异性、约登指数、阴性预测值（ＮＰＶ）和阳性预测值
（ＰＰＶ）。结果８５８例标本中阳性结果１５４例，阴性结果７０４例，阳性率为２１．９ 。ＩＣＡ、ＥＩ ＩＳＡ和ＦＱ—ＰＣＲ三种方法的灵敏度
分别为５０．６ 、９２．９ 及９６．７ ，约登指数分别为５Ｏ．２ 、９１．５ 和９５．７ ，ＮＰＶ分别为９Ｏ．２ 、９８．４ 和９９．３ 。经比较， ＩｃＡ的灵敏度、约登指数和ＮＰＶ均明显低于ＥＬＩＳＡ和ＦＱ－ＰＣＲ，差异有统计学意义（Ｐ＜０．Ｏ１）。结论 ＥＩ ＩｓＡ与ＦＱ－ＰＣＲ具有 较一致灵敏度、特异性、约登指数、ＮＰＶ和ＰＰＶ，均可为临床治疗和监测ＣＴ提供可靠的依据；Ｉ（：Ａ虽然操作简便，但灵敏度较差，
作为实验诊断ＣＴ感染的方法不太理想。
关键词：沙眼衣原体； 免疫层析法； 酶联免疫吸附试验； 荧光定量聚合酶链反应
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３ ４１３０．２０１３．１１．０３２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３—４１３０（２０１３）１１—１４１８一Ｏ２
沙眼衣原体（ｃＴ）是一种常见的性病病原体，会引起泌尿
生殖道感染、包涵体包膜炎、性病淋巴肉芽肿等，但其感染在临
床上多呈隐性感染，表现为无症状或轻微症状而不为患者所重
荧光定量PCR检测解脲脲原体,沙眼衣原体效果
荧光定量PCR检测解脲脲原体,沙眼衣原体效果
【摘要】目的：分析荧光定量PCR检测解脲脲原体,沙眼衣原体效果。方法：选择我院2021年1月-2022年1月疑似解脲脲原体80例和沙眼衣原体感染患者80例，进行荧光定量PCR检测，并用传统检测技术作为对照，比较两种方法差异。结果：用荧光定量 PCR法测定解脲脲原体、沙眼衣原体的时间比传统方法短，阳性检出率与传统方法相比，差异有显著性（P<0.05）。结论：与传统的检测方法相比，荧光 PCR检测时间短，检出率高，可以满足临床快速、准确、简便的检测需求。
【关键词】荧光定量PCR检测；解脲脲原体；沙眼衣原体；效果
根据 WHO报告，沙眼衣原体和脲脲原体是性病的主要致病因子。我国 沙眼衣原体和 解脲脲原体感染率逐年上升，主要是由于反复感染和不合理使用抗生素所致。男性感染会引起尿道炎、附睾炎、前列腺炎等疾病；除了宫颈炎之外，
沙眼衣原体感染还会导致子宫内膜炎、子宫内膜炎、盆腔炎性疾病，还会引发异位妊娠、不孕、肛周炎、慢性盆腔痛等，此外， 沙眼衣原体、 解脲脲原体所致的慢性子宫颈炎也是宫颈癌的诱因之一。荧光定量PCR技术的问世，使得 PCR技术在分子生物学中已成为一种常用的检测手段，在遗传病、肿瘤和微小病变的诊断、临床标本中的病原体检测中也有广泛的应用[1]。荧光定量PCR是一种从定性到定量的跨越，它突破了传统 PCR技术所面临的诸多困难。荧光定量PCR技术具有高灵敏度、高准确性、高灵敏度和高特异性等特点，可以有效地解决传统方法中的高错误。本研究分析了荧光定量PCR检测解脲脲原体,沙眼衣原体效果，如下。
1资料与方法
1.1一般资料 选择我院2021年1月-2022年1月疑似解脲脲原体80例和沙眼衣原体感染患者80例，进行荧光定量PCR检测，并用传统检测技术作为对照，比较两种方法差异。其中，对照组男45例，女35例，年龄31-65（47.55±2.21）岁。观察组男44例，女36例，年龄32-67（47.23±2.67）岁。两组统计学比较显示P大于0.05。本研究经伦理批准。
FQ-PCR检测沙眼衣原体及解脲支原体
２００８年２月第４６卷第６期
ＦＱ—ＰｃＲ检测沙眼衣原体及解脲支原体
刘炜 马俊
（新疆维吾尔自治区昌吉州中医院检验科，新疆昌吉８３１１００） ・检验与临床・
［摘要】目的评价应用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ—ＰｃＲ）检测泌尿生殖道及宫颈分泌物中沙眼衣原体、解脲支原体在临床
诊断中的价值。方法实时跟踪荧光定量ＰＣＲ对４７８份分泌物进行ＣＴ ＤＮＡ、ｕｕ ＤＮＡ含量进行检测。结果所检的４７８份
标本中检出总阳性人数为１９９人次，阳性率为４１．６％（１９９／４７８），ＣＴ ＤＮＡ、ＵＵ ＤＮＡ阳性率分别为１１．７％（５６／４７８）、２９．９％
（１４３／４７８ ｏ结论应用ＦＱ—ＰＣＲ检测沙眼衣原体、解脲支原体具有简便、快速、准确的优点，１份标本可同时测２种病原体，
是目前快速诊断感染ＣＴ、ＵＵ病原体的可靠准确的方法。
［关键词】实时荧光定量ＰＣＲ；沙眼衣原体；解脲支原体 ［中图分类号】Ｒ４４６．５ ［文献标识码】Ａ ［文章编号】１６７３—９７０１（２００８）０６—１３９—０２
荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ—ＰＣＲ）技术已被广泛应用核酸
分析。南于采用荧光技术和闭管检测，由计算机自动分析定量，
减少了ＰＣＲ扩增产物的污染，具有极高的使用价值｝ｌ】。我们通
过对４７８份分泌物标本同时进行沙眼衣原体（ＣＴ）、解脲支原体 （ＵＵ）检测，探讨其与临床诊断的关系。
１材料与方法
１．１一般资料 ４７８份标本均取自于我院泌尿科和妇科门诊及住院患者，
男、女患者均用特制无菌拭子采样，男性采样拭子进入尿道２～
３ｃｍ取分泌物，女性采样拭子人宫颈内２ｃｍ并做停留后取出，试
管内放人含１ｍＬ无菌生理盐水加以洗涤备用。
１．２检测方法 ＣＴ ＤＮＡ、ＵＵ ＤＮＡ定量测定技术检测试剂盒南厦门安普利
生物工程有限公司提供，使用厦门安普利Ｇｅｎｅｌｉｇｈｔ９８００实时跟
踪荧光扩增仪。
１．３操作方法 操作方法及结果判断严格按照说明书进行。
免疫荧光法与免疫层析法检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的性能评价
免疫荧光法与免疫层析法检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的性能评价
发表时间：2018-11-21T15:25:58.853Z 来源：《医药前沿》2018年27期 作者： 杜丽伟1 杜倩2
[导读] 分析比较免疫荧光法和层析法对于检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的效果，旨在指导临床诊断。
杜丽伟1 杜倩2
（1深圳市罗湖医院集团医学检验中心/深圳市罗湖区妇幼保健院检验科 广东 深圳 518019）
（2山东省菏泽市中医医院ICU 山东 菏泽 274000）
【摘要】目的：分析比较免疫荧光法和层析法对于检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的效果，旨在指导临床诊断。方法：选取2017年1月至2018年1月间于我院进行诊断和治疗的124例泌尿生殖道沙眼衣原体感染的患者为研究对象，依据患者检测方法的不同，分成免疫荧光
组（n=62）和免疫层析组（n=62），比较两组患者的检测阳性率和敏感度。结果：免疫荧光组的男性阳性率为30.77%，免疫层析组的男
性阳性率为20.00%，则两组数据无明显差异（χ2=0.4308，P＞0.05）；免疫荧光组的女性阳性率为28.57%，免疫层析组的女性阳性率为
10.64%，则两组数据差异明显（χ2=4.8600，P＜0.05）。免疫荧光组的敏感性为86.67%，免疫层析组的敏感性为46.67%，则两组检测方法的敏感性差异明显（χ2=5.4000，P＜0.05）。结论：对于泌尿生殖道沙眼衣原体感染而言，采用免疫荧光法检测较好，方便快捷，且检
出率和敏感性高，具有广泛的临床应用前景。
【关键词】泌尿生殖道；沙眼衣原体；感染；免疫荧光；免疫层析；性能
【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）27-0154-02
泌尿生殖道是人体的自然通道，直接与外界环境接触，一旦菌群失调极易受到多种病原微生物的侵袭而发生感染，其中沙眼衣原体感染较为常见[1]。沙眼衣原体是一种主要寄生在细胞中，泌尿生殖道沙眼衣原体感染是一种性传播一并，一旦患病，将会对患者的正常生活
实时荧光核酸恒温扩增技术检测尿液中淋球菌的分析
国际检验医学杂志２０１２年２月第３３卷第４期Ｉｎｔ Ｊ ！ ！ ！ ：塑！ ：
素相关。关于ｕｕ的致病性目前尚无统一观点，钟山等＿７ 认为
不同生物群（基因群）的Ｕｕ与ＮＧＵ和宫颈炎无关，曹玉璞和
叶元康嘲则认为Ｕｕ生物２群为男性泌尿道感染的潜在病原
体，Ｕｕ生物１群较２群对男性生育力的破坏强＿８ ］，而徐小平
等 ” 研究发现女性Ｕｕ感染与寄居均以ｕｕ生物１群为主，
ｕｕ生物２群与妇女ＮＧＵ发病率具有显著相关［１ “］。ｕｕ可
一过性存在（或寄生）在人体泌尿生殖道而无临床症状，临床检
查到Ｕｕ并不能判断是携带状态还是感染状态，因此患者的临 床症状和体征对本病的诊断及是否需要治疗有重要指导作用。
本实验中男性患者的标本中Ｕｕ生物１群、２群的检出率与患 者的临床症状和体征的阳性率无统计学差异（ 一０．７７，Ｐ＞
０．０５）；而女性患者生物１群的检出率以及临床症状和体征的
阳性率显著高于生物２群（ 一４．８１，Ｐ＜Ｏ．０５），结果提示：ｕｕ
生物１群、２群对男性致病性无差异，而生物１群则是女性Ｕｕ
感染中的优势菌群。
ｕｕ分群有助于临床明确诊断，同时还可以用于指导临床
用药，国内外均有学者报道，不同Ｕｕ生物群对药物的敏感性
不同，ｕｕ生物１群对治疗ｕｕ的一线药物如大环内酯类的耐
药率比Ｕｕ生物２群高 。因此，开展临床Ｕｕ生物群的检
测，区别对待ｕｕ不同生物群感染的治疗，对合理地处理患者、
减少临床不合理使用抗菌药物、避免耐药菌株产生与播散等有
重要意义。下一步我们将扩大样本量，采用ＰＣＲ技术对不同 Ｕｕ生物群进行分型，并结合Ｕｕ培养鉴定、体外药敏试验及临
床治疗效果，进一步深入研究Ｕｕ生物群与泌尿生殖道感染的
相关性。
参考文献
［１］Ｋｏｎｇ Ｆ，Ｊａｍｅｓ Ｇ，Ｍａ ｚ，ｅｔ ａ１．Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｕｒｅａｐｌａｓ— ｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ ｓｕｐｐｏｒｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｓｐｅｃｉｅｓ， Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｐａｒｖｕｍＥＪ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｓｙｓｔ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，１９９９，４９（４）：１８７９— １８８９．
实时荧光定量PCR在生殖泌尿道疾病诊断中的应用
３．２ 阴道镜检查：阴道镜检查用于临床已有６０年的历史、可放 大２０～４０倍。它能直接观察宫颈病变的范围、程度及结构，也可 指示做活检的部位，凡属异常图片的病例，做阴道镜检查多能确 诊Ｃ１Ｎ浸润癌。阴道镜检查主要的异常变化为不典型转变区的上 皮及血管的改变：临床常见改变为：①上皮的改变为白色病变， 即由类白色上皮一白色上皮．白斑．角化病。镶嵌形状呈不平的猪油 状或脑回状；②血管异形即在白色上皮表面见异形血管呈点状、 螺旋状、镶嵌状血管，也可呈多形性（点状、螺旋形、蝌蚪形、 地图形、血管曲折紊乱）。一般认为宫颈涂醋酸后，出现均匀 的白色上皮，伴有不典型点状血管或镶嵌，多是ＣＩＮ。本组患者 ＣＩＮ检测准确率为９２．３％。 ３．３ 活体组织检查：为确诊ＣＩＮ的主要方法，一般在碘不染色区 或【凋道镜指示下定点取材，一般为鳞柱交界部相当时钟的１２、６、 ３、９点处 。病理组织学诊断分为非典型增生ｌ、Ⅱ、Ⅲ级与原 位癌，Ｉ级为轻度非典型增生，即异形细胞不超过全上皮层的下 吉林医学２０１１年１月第３２卷第３期 １／３ 细胞排列不齐，保持极性；Ⅱ级为中度非典型增生乃异形细 胞占全上皮层的下２／３，异形细胞显著，核分裂像增加；Ⅲ级为重 度非典型增生，异形细胞超过全上皮层的２／３，极性紊乱或消失； 原位癌系异形细胞占全上皮层，异形显著，极性消失，核分裂像 增多，基底膜完整。本组活检确诊ＬＳＩＬ为１４例（占２．８％），ＨＳＩＬ 为ｌ２例（占４．４％），息肉６例（占１．２％），原位癌３例（０．６％）。 ４参考文献 ［１］张新武（综述），纪小龙（审校）．宫颈癌常用筛查技术应用现状【Ｊ］． 武警医学，２００９，２０（１０）：９３９． 【２】曹文荣，孙倩．ＨＥ染色宫颈液基薄层细学检查在宫颈病变早期 诊断中的价值［Ｊ］．山东医药，２００９，１６（１１）：７８． ［３］郭宏伟，丛军兹．门诊筛查宫颈疾病ｌ ６６４例病理分析［Ｊ］．中国民 族民间医药杂志，２００８，９（１１）：５１． ［收稿日期：２０１０—０８．０４编校：朱建梅］ 实时荧光定量ＰＣＲ在生殖泌尿道疾病诊断中的应用 黄莲芬（广西北海市第二人民医院检验科，广西北海５３６０００） ［摘要】目的：探讨荧光定量ＰｃＲ在生殖泌尿道疾病诊断中的应用。方法：采Ｊ￣ｊＦＱ—ＰｃＲ法对４ １６０例泌尿生殖道感染疑似患者同时 进行ｕｕ、ＣＴ、ＨＳＶⅡ型、ＮＧ￣ＨＰＶ检测。结果：５种性病病原体的感染率比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；另外男女的ｕｕ感染 率比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），而ＣＴ感染率比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论：荧光定量ＰＣＲ技术检测常见性病病原 体，具有简便、快捷、准确、特异性高等优点，对临床诊断治疗及流行病学调查有重要意义。 ［关键词】性病传播；实时荧光ＰＣＲ；疾病诊断 与性行为传播相关的疾病，统称为性传播疾病（Ｓｅｘｕａｌｌｙ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｄｉｓｅａｓｅ，ＳＴＤ），它是当前世界上流行最广泛的传染 病，而且由过去的５种性病演变为与性行为接触密切相关的２Ｏ余 种传染病。目前，通过性传播解脲支原体（ＵＵ）、沙眼衣原体 （ＣＴ）、单纯疱疹病毒（ＨＳＶＩＩ型）、淋球菌（ＮＧ）和人乳头 瘤病毒（ＨＰＶ）所致的泌尿生殖道感染者，在我国成快速增长趋 势…。文章应用荧光定量ＰＣＲ技术，对在广西北海市第二人民 医院门诊４ １６０例疑似泌尿生殖道感染患者分别进行Ｔｕｕ、ＣＴ、 ＨＳＶ ＩＩ型、ＮＧ和ＨＰＶ检测，现将结果报告如下。 １资料与方法 １．１一般资料：选择２００９年ｌ０月 ２００９年１２到广西北海市第二 人民医院妇科门诊和男性科门诊就诊，疑为泌尿生殖道感染的患 者４ １６０例，其中男４０４例，女３ ７５６例，取其分泌物用实时荧光 ＰＣＲ法分别进行ｕｕ、ＣＴ、ＨＳＶⅡ型、ＮＧ和ＨＰＶ（ＨＰＶ包括低危 和高危型检测）。 １．２标本采集及处理方法：所有标本均由临床医师采集。男 性：取尿道分泌物，用细小棉拭子伸人尿道约２ ４ ｃｍ，略捻拭 子取出分泌物；女性：用无菌生理盐水棉球洗去宫外分泌物，再 用无菌棉拭子插入宫颈内，停５ ｓ后旋动棉拭子采取宫颈分泌物； 尿道口或患病部位刮片：用刮片刮取病灶脱落细胞，密闭于无菌 样品管送检。 １．３检测方法：按照说明书使用杭州博日科技有限公司生产的 ＬｉｎｅＧｅｎｅ Ｉ荧光定量ＰＣＲ检测系统和中山大学达安基因股份有限 公司生产的ＰＣＲｉ￣Ｉ］盒，严格按照卫生部颁发的《临床基因扩增 ＰＣＲ诊断实验室工作规范》要求进行检测；每次试验设阴性、 临界阳性、强阳性对照，处理方法同标本，根据设置的基线和阈 值，仪器自动显示检测结果。 １．４统计学方法：采用ＳＰＳＳ １３．０对数据进行Ｘ 检验。 ２结果 ４ １６Ｏ例疑为泌尿生殖道感染患者用荧光定量ＰＣＲ法分 别检测ＵＵ、ＣＴ、ＨＳＶⅡ型、ＮＧ和ＨＰＶ，阳性检出总例数 为１ ８２６例，阳性率３６．６８％，且每种病的具体情况分别为 １ ４３４例／７８．５３％，３３７例／１８．４６％，２８例／１．５３％，ｌ１例／０．６０％， １６例／０。８８％，经比较５种性病病原体的感染率比较差异有统计学 意义（Ｐ＜０．０１）；另外（ＵＵ＋ＣＴ）和（ＵＵ＋ＣＴ＋ＨＳＶⅡ）的混 合感染分别有１４８例和１２例，阳性率分别为８．１０％，０．６６％。ｕｕ和 ＣＴ的男、女感染情况见表１，可以看出女性的ｕｕ感染率远远超 过男性（Ｐ＜０．０５），而男、女ＣＴ感染率比较差异无统计学意义 （Ｐ＞０．０５）。 表１ ＵＵ￣Ｉ］ＣＴ的男、女感染情况［例（％）］
泌尿道感染沙眼衣原体RNA 和解脲脲原体RNA 检验分析
632019.04基础研究
泌尿道感染沙眼衣原体RNA和解脲脲原体RNA检验分析
陈晓祺
杭州市第三人民医院 浙江省杭州市 310009
【摘 要】目的：通过恒温扩增技术检测杭州市第三人民医院泌尿道感染患者沙眼衣原体RNA（CT-RNA）和解脲脲原
体RNA（UU-RNA），分析其感染情况及特点。方法：采集2193例泌尿道感染患者尿液样本，采用实时荧光恒温扩增检测
技术（SAT）检测解脲脲原体RNA和沙眼衣原体RNA。结果：CT阳性率男性明显高于女性（P<0.001），UU阳性率女性明
显高于男性（P<0.001），CT+UU混合感染阳性率男性高于女性（P<0.001）。结论：本院泌尿道感染患者CT和UU感染
率较高，其中CT阳性率男性明显高于女性，UU阳性率女性明显高于男性，同时≤25岁年龄段CT、UU、CT+UU阳性率皆
最高，宜加强监测。
【关键词】泌尿道感染；沙眼衣原体；解脲脲原体；RNA；实时荧光恒温扩增技术
沙眼衣原体（CT）和解脲脲原体（UU）
是经性接触传播引起的非淋菌性泌尿生殖
道感染（NGU）的主要病原，两者均可寄
生于健康人的泌尿生殖道，当机体免疫力
下降时，这些菌群会变成致病菌，从而造
成泌尿生殖道感染。以实时荧光恒温扩增
检测技术检测病原体RNA，避免了机体残
留病原体DNA核酸片段的干扰，具有较
高的灵敏度和特异性。本文探究2193例泌
尿道感染患者沙眼衣原体RNA和解脲脲
原体RNA检验结果，报告如下。
1 材料与方法
1.1 对象2016年1月至2017年12月在杭州
市第三人民医院初诊为泌尿道感染的患
者2193例（男1608例，女585例），最
小年龄15岁，最大年龄87岁，平均年龄
37.0±12.6岁。
1.2 标本采集
取清晨首次尿，或长时间（至少1小时）
不排尿后的首段尿2ml，于样本保存液混
合，待测。
1.3 检测方法
采用实时荧光恒温扩增检测技术，
分核酸提取和核酸检测两个步骤。在核酸提取过程中，CT、UU裂解释放出的核酸