USP35头孢唑林钠

210
0.08
0.33
1.0
头孢唑林开环内酯 d 或头孢唑
c
林 3-羟甲基 e
254
0.20
1.0
来自百度文库
0.5
f 甲基噻重氮硫醇
254
0.23
0.91
1.0
g 7-氨基头孢菌酸
254
0.42
1.1
1.0
3
h 头孢唑林 3-甲基类似物 i 头孢唑林内酯 j 头孢唑林乙酰氧基类似物 k 脱酰头孢唑林 l 头孢唑林开环异构体 — 头孢唑林 m 头孢唑林异构体 n 头孢唑林特戊酰 — 其他单个杂质 — 总杂
定义 按无水物计算，含效价以头孢唑林钠（C14H14NaN8O4S3）计应为89.1%~ 110.1%。
鉴别 z A.紫外吸收光谱<197U> 样品溶液：20μg/ml，在 0.1M 碳酸氢钠溶液中 限度：见要求 z B.在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对
照品溶液主峰的保留时间一致。 z C.鉴别试验——一般鉴别，钠<191>：见要求
CU 为供试品溶液的浓度（mg/ml） F 为相对相应因子（见表 2）
限度：见表 2。溶剂峰不计。
表2
代号
名称
检测波长 （nm）
相对保 留时间
校正因子 （F）
可接受标 准不得过 （%）
a 四氮唑乙酸
210
0.07
0.40
1.0
N-(2,2- 二 羟 乙 基 )-2-(1H- 四 唑
b
-1-基)乙酰胺
USP35 头孢唑林钠
Cefazolin Sodium
C14H13N8NaO4S3 476.49 (6R,7R)-3-[[(5- 甲 基 -1,3,4- 噻 二 唑 -2- 基 ) 硫 ] 甲 基 ]-7-[(lH- 四 唑 -1- 基 ) 乙 酰 氨 基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸钠盐[27164-46-1]
含量 z 程序 缓冲液A：0.9g/L无水磷酸二氢钠和1.298g/L一水柠檬酸水溶液 缓冲液B：5.68g/L无水磷酸二氢钠和3.63g/L磷酸二氢钾水溶液 流动相：乙腈-缓冲液 A（1:9），经 10μm 或更细孔径的膜过滤。 内标溶液：7.5mg/ml 水杨酸在甲醇-缓冲液 B（1:9）中。首先在 10%体积的 甲醇中溶解，然后用水稀释至终体积。 标准储备液：1mg/ml 头孢唑林对照品，在缓冲液 B 中。 标准溶液：取标准储备液和内标溶液制成含头孢唑林 50μg/ml 和含水杨酸 0.4mg/ml 的溶液，在缓冲液 B 中。 色谱条件 （见色谱法<621>，系统适用性） 模式：LC 检测器：UV 254nm 色谱柱：C18（4.0mm×30cm，10μm） 流速：2ml/min 进样体积：10μl 系统适用性 样品：标准溶液 [注意——水杨酸与头孢唑林相对保留时间分别为 0.7 和 1.0]
(2R)-2-[(R)-[2-(1H-tetrazol-1-yl)acetamido](carboxy)methyl]-5-
[(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-ylthio)methyl]-3,4-dihydro-2H-1,3-thiazine-4carboxylic acid（Cefazolin open-ring delta-2）
20
45
50
50
50
50
50
55
98
2
65
98
2
空白：使用溶液B。
系统适用性储备液：2mg/ml头孢唑林对照品，在0.05M氢氧化钠溶液中。室
温下放置5min。[注意——用氢氧化钠溶液处理得到头孢唑林差向异构体]
系统适用性溶液：系统适用性储备液-缓冲液B（1:24）
标准溶液：25μg/ml头孢唑林对照品，在溶液B中。
(2R)-2-[(R)-[2-(1H-四唑-1基)乙酰胺](羧基)甲基]-5-[(5-甲基-1,3,4噻二唑-2-巯 基)甲基]-3,4-二羟-2H-1,3-噻嗪-4-羧酸（头孢唑林开环∆-2）
(2R)-2-[(R)-[2-(1H-tetrazol-1-yl)acetamido](carboxy)methyl]-5[(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-ylthio)methyl]-5,6-dihydro-2H-1,3-thiazine-4carboxylic acid（Cefazolin open-ring delta-4）
缓冲液 A：乙腈-6.8mg/ml 磷酸二氢钾溶液(50:50)
溶液 B：6.8mg/ml 磷酸二氢钾溶液(用 10%氢氧化钠溶液调 pH 值至 6.8)
溶液 C：乙腈-缓冲液 A（1:1）
流动相：见表 1。
表1
时间(分钟)
溶液 B(%)
溶液 C(%)
0
98
2
7
98
2
15
85
15
30
80
20
35
80
[(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-ylthio)methyl]-3,6-dihydro-2H-1,3-thiazine-4carboxylic acid（Cefazolin open-ring delta-3）
(2R)-2-[(R)-[2-(1H-四唑-1-基)乙酰胺](羧基)甲基]-5-[(5-甲基)-1,3,4-噻二唑-2巯基)甲基]-3,6-二羟-2H-1,3-噻嗪-4-羧酸（头孢唑林开环∆-3）
4
杂 质 k ： (6R,7R)-7-Amino-3[5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-ylthio)methyl-8-oxo5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid（Cefazolin deacylated）
1
系统要求
分离度：分析物峰与水杨酸峰间分离度不得少于 4.0。 柱效：理论板数不得少于 1500 拖尾因子：不得大于 1.5 相对偏差：不得大于 2.0% 分析
样品：标准溶液和样品溶液
计算头孢唑林钠（C14H14NaN8O4S3）百分含量： 结果=（RU/RS）×（CS/CU）×（Mr1/ Mr2）×100 式中：
中文名：(6R,7R)-7-氨基-3-[(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-巯基)甲基]-8-氧-5-硫-1氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸（脱酰头孢唑林）
杂质l：该杂质标记为“l”，可能为头孢唑林开环开环∆-2、∆-3、∆-4。 (2R)-2-[(R)-[2-(1H-tetrazol-1-yl)acetamido](carboxy)methyl]-5-
分离度：254nm 下，头孢唑林峰与头孢唑林差向异构体峰间分离度不得小于 8.0。
分析
样品：空白，标准溶液和样品溶液
计算三氮唑乙酸及 N-(2,2-二羟乙基)-2-(1H-四唑-1-基)乙酰胺百分含量： 结果=（rU(210)/rS(254)）×（CS/CU）×（1/ F）×100 式中：
rS(254)为对照品溶液中头孢唑林峰面积 rU(210)为供试品溶液中头孢唑林峰面积 Cs 为对照品溶液的浓度（mg/ml） CU 为供试品溶液的浓度（mg/ml） F 为相对相应因子（见表 2）
样品溶液：2.5mg/ml头孢唑林钠，在溶液B中。
色谱系统
（见色谱法<621>，系统适用性）
2
模式：LC 检测器：UV 210nm 和 254nm 色谱柱：C18（4.6mm×25cm，5μm） 柱温：30℃ 流速：1.5ml/min 进样体积：10μl 系统适用性
样品：系统适用性溶液
[注意——水杨酸与头孢唑林相对保留时间分别为 0.7 和 1.0] 系统要求
254
0.44
0.87
1.0
254
0.50
0.85
1.0
254
0.61
0.68
1.0
254
0.68
1.2
1.0
254
0.84
1.0
0.5
254
1.0
—
—
254
1.2
0.98
1.0
254
1.4
0.92
1.0
254
—
1.0
0.1
—
—
—
3.5
杂质a：2-(1H-Tetrazol-1-yl)acetic acid（Tetrazolylacetic acid） 中文名：2-(1H-四唑-1-基)乙酸（四氮唑乙酸） 杂质b：N-(2,2-Dihydroxyethyl)-2-(1H-tetrazol-1-yl)acetamide （Tetrazolylacetamide acetal） 中文名：N-(2,2-二羟乙基)-2-(1H-四唑-1-基)乙酰胺 杂质c ：该杂质标记为“c”，可能为杂质d或e。 杂质d：(R)-2-[2-(1H-Tetrazol-1-yl)acetamido]-2-[(R)-7-oxo-2,4,5,7-tetrahydro1H-furo[3,4-d][1,3]thiazin-2-yl]acetic acid（Cefazolin open-ring lactone） 中文名：(R)-2-[2-(1H-四唑-1-基)乙酰氨基]-2-[(R)-7-氧-2,4,5,7-四氢-1H-呋喃 [3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]乙酸（头孢唑林开环内酯） 杂质e：(6R,7R)-7-[2-(1H-Tetrazol-1-yl)acetamido]-3-(hydroxymethyl)-8oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid（Cefazolin 3-hydroxymethyl） 中文名：(6R,7R)-7-[2-(1H-四唑-1-基)乙酰氨基]-3-(羟甲基)-8-氧-5-硫杂-1-氮 杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸（头孢唑林3-羟甲基） 杂质f：5-Methyl-1,3,4-thiadiazole-2-thiol(MMTD)（Methylthiadiazole thiol） 中文名：5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-巯（甲基噻重氮硫醇） 杂质g：(6R,7R)-3-(Acetoxymethyl)-7-amino-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo [4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid(7-ACA)（7-Aminocephalosporanic acid） 中文名：(6R,7R)-3-(乙酰甲基)-7-胺-8-氧-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2羧酸(7-ACA) （7-氨基头孢菌酸） 杂质h：(6R,7R)-7-[2-(1H-Tetrazol-1-yl)acetamido]-3-methyl-8-oxo-5-thia-1azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid（Cefazolin 3-methyl analog） 中文名：(6R,7R)-7-[2-(1H-四唑-1基)乙酰胺]-3-甲基-8-氧-5-硫杂-1-氮杂双环 [4.2.0]辛-2烯-2-羧酸（头孢唑林3-甲基同系物） 杂质i：N-[(5aR,6R)-1,7-dioxo-1,3,4,5a,6,7-hexahydroazeto[2,1-b]furo[3,4-d] [1,3]thiazin-6-yl]-2-(1H-tetrazol-1-yl)acetamide（Cefazolin lactone） 中文名：N-[(5aR,6R)-1,7-二氧-1,3,4,5a,6,7-己羟唑[2,1-b]呋喃[3,4-d][1,3]噻嗪 -6-基]-2-(1H-四唑-1-基)乙酰胺（头孢唑林内酯） 杂质j：(6R,7R)-7-[2-(1H-Tetrazol-1-yl)acetamido]-3-(acetoxymethyl)-8-oxo5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid（Cefazolin acetoxy analog） 中文名：(6R,7R)-7-[2-(1H-四唑-1基)乙酰胺]-3-(乙酰甲基)-8-氧-5-硫杂-1-氮 杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸（头孢唑林乙酰氧基同系物）
计算除三氮唑乙酸及 N-(2,2-二羟乙基)-2-(1H-四唑-1-基)乙酰胺外其他杂质
的百分含量：
结果=（rU(254)/rS(254)）×（CS/CU）×（1/ F）×100 式中：
rS(254)为对照品溶液中头孢唑林峰面积 rU(254)为供试品溶液中头孢唑林峰面积 Cs 为对照品溶液的浓度（mg/ml）
RS 为对照品溶液中头孢唑林峰面积 RU 为供试品溶液中头孢唑林峰面积 Cs 为对照品溶液的浓度（mg/ml） CU 为供试品溶液的浓度（mg/ml） Mr1 为头孢唑林钠的分子量，476.49 Mr2 为头孢唑林的分子量，454.51 限度：89.1%~110.1%，无水物计
杂质
z 有机杂质
[注意——样品溶液配制后立即进样]