致病性大肠埃希氏菌及其检验
致泻大肠埃希氏菌
3.
生化反应
生化反应十分活泼，是鉴定肠道菌的重要 依据。 乳糖发酵试验在初步鉴别肠道致病和非致 病菌时有重要意义，肠道致病一般不分解乳 糖，而非致病菌多数能分解乳糖。
鉴定中最重要的生化反应
乳糖发酵试验
肠道非致病菌（埃希菌属） 发酵乳糖、产酸产气＋
肠道致病菌（志贺菌属、
沙门菌属等）不发酵乳糖 —
4. 抗原构造复杂
在肉汤培养基中生长18-24小时变为均匀浑浊，而 后底部出现粘性沉淀物，并伴有臭味。
培养特性
部分菌落可出现β溶血。 在远藤琼脂上长成带金属光泽的红色菌落。
在SS琼脂平板上多不生长，少数生长的细菌
也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落。
在伊红美兰琼脂上形成具有金属光泽的黑色菌落。
在麦康凯琼脂上培养24小时后孤立菌落呈红色。
肠产毒性大肠埃希氏菌 （Enterotoxigenic E. coli,ETEC）
引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻， 也可呈严重的霍乱样症状。腹泻常为自限性， 一般2-3天即愈。致病因素是LT或ST，或两者 同时致病。有些菌株具有定居因子，常见者 为O6：K15：H16、O25：K7：H42。鉴定ETEC 主要测定大肠杆菌肠毒素，血清型有一定参 考意义。
分类
肠杆菌科
埃希氏菌属
大肠埃希氏菌
致泻大肠埃希氏菌
肠道致病性大 肠埃希氏菌 EPEC
肠道出血性大 肠埃希氏菌 EHEC
产肠毒素大肠 埃希氏菌 ETEC
肠道侵袭性大 肠埃希氏菌 EIEC
致泻大肠埃希氏菌
致泻性大肠埃希氏菌的形态特点、培养特性和生化 特性均与非致病的大肠埃希氏菌非常相似，以至难 以区分，只能通过血清学的方法，从抗原结构的差 异来区别。 在致泻性大肠埃希氏菌中，有些血清型能够引起人 的食物中毒，有些血清型能够引起人的肠道内外感 染。还有一些血清型的菌株能够使畜禽发病，危害 畜牧业，降低畜产食品的质量。致泻性大肠埃希氏 菌可从饮用水，未消毒牛乳，病畜脏器、禽类及其 人畜粪便污染的各种食品中分离出来。
大肠埃希菌
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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细菌特性
• 形态特征
• 培养特性
• 生化反应
• 抗原结构
大肠埃希菌革兰染色
大肠埃希菌电镜图
大肠埃希菌菌落特征（血平板）
大肠埃希菌菌落特征（MAC）
大肠埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－）
大肠埃希菌IMViC试验（＋＋－－）
微生物学检验
（一）检验程序 （二）标本采集 （三）检验方法 （四）耐药性 （五）结果分析与报告
பைடு நூலகம்
大肠埃希菌检验程序
检验方法
1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定 – ETEC – EPEC – EIEC – EHEC – EaggEC
ST检测（乳鼠灌胃试验）
LT 检测（ CHO细胞培养）
O157:H7菌落特征（MAC）
O157:H7菌落特征（山梨醇麦康凯琼脂平板）
返回
右侧为对照（－－＋＋）
大肠埃希菌抗原结构
临床意义
致病物质
所致疾病
致病物质
• 侵袭力 • 内毒素 • 肠毒素 耐热肠毒素（ST） 不耐热肠毒素（LT） 菌毛、K抗原
所致疾病
• 肠道外感染 泌尿道感染（最常见）
胆道感染、腹膜炎、肺炎 菌血症、新生儿脑膜炎 • 肠道感染 ETEC、EPEC、EIEC、 EHEC、EaggEC
致病性大肠埃希氏菌ESBLs基因型的检测及其抑制剂的抑酶保护作用
致病性大肠埃希氏菌ESBLs基因型的检测及其抑制剂的抑酶保护作用张春辉;张晓根;张晓风;王建华【摘要】[目的]检测致病性大肠埃希氏菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型,初步研究β-内酰胺酶抑制剂(BLI)-他唑巴坦的抑酶保护作用.[方法]对产生ESBLs的5株致病性大肠埃希氏菌,设计并合成TEM-1和是SHV-1 2对引物,用PCR方法进行了ESBLs的DNA扩增、测序和基因型分析;用试管二倍稀释法测定头孢噻呋与BLI-他唑巴坦钠以不同配比对产生ESBLs大肠埃希氏菌的最小抑菌浓度.[结果]从产生ESBLs细菌中均扩增出了TEM型ESBLs产物,但未扩增出SHV型ESBLs产物;头孢噻呋与BLI-他唑巴坦钠(质量比1∶1～8∶1)联合使用,对产生ESBLs的大肠埃希氏菌的最小抑菌浓度较头孢噻呋单独使用基本降低,最高可降低16倍.[结论]国内畜禽产生ESBLs的大肠埃希氏菌未通过质粒进行细菌间耐药基因的交换, ESBLs 的产生与生物种属没有关系,BLI-他唑巴坦有较强的抑制ESBLs作用.【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2009(037)005【总页数】5页(P24-28)【关键词】β-内酰胺酶;BLI-他唑巴坦;大肠埃希氏菌;耐药性;基因型【作者】张春辉;张晓根;张晓风;王建华【作者单位】郑州牧业工程高等专科学校,药物工程系,河南,郑州,450011;西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨凌,712100;郑州牧业工程高等专科学校,药物工程系,河南,郑州,450011;郑州牧业工程高等专科学校,药物工程系,河南,郑州,450011;西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】S855.1;Q781动物专用的第3代头孢类抗生素,如头孢噻呋(又名塞得福)，抗菌谱广、抗菌活性强，生物利用度高，在国内外正逐渐广泛应用于畜禽疾病的治疗。
《大肠埃希氏菌》课件
提高公众健康意识
加强公众对大肠埃希氏菌的认 知，提高自我保护意识。
保障食品安全
对食品进行大肠埃希氏菌检测 ，确保食品安全，保护消费者 权益。
控制疫情爆发
及时发现并控制大肠埃希氏菌 疫情爆发，减少社会恐慌和损
失。
PART 04
大肠埃希氏菌的基因组学 研究
基因组结构与功能
基因组结构
大肠埃希氏菌基因组由单条环状 染色体组成，包含约4.6×10⁶个 碱基对，编码约2000个基因。
总结词
大肠埃希氏菌具有一些独特的生物学特性，如发酵葡萄糖、不发酵乳糖等。
详细描述
大肠埃希氏菌能够发酵葡萄糖，产酸产气，不发酵乳糖，不能利用柠檬酸盐作 为碳源。在麦康凯培养基上生长，形成红色菌落。此外，大肠埃希氏菌还具有 抗原构造和抵抗力等特点。
发现历史
总结词
大肠埃希氏菌的发现历史可以追溯到19世纪中叶，自那时以来，人们对这种细菌的认 识不断深入。
开发多价疫苗
针对大肠埃希氏菌的不同血清型，开发多价疫苗，以提高疫苗的 保护范围和效果。
新型疫苗技术
研究新型疫苗技术，如基于mRNA的疫苗和DNA疫苗，以提供 更安全、有效的免疫保护。
疫苗接种策略
制定针对不同人群的疫苗接种策略，以提高疫苗接种的覆盖率和 效果。
对公共卫生的影响
监测与控制
加强大肠埃希氏菌的监测和防控，及时发现和遏制疫情爆发，以 保护公众健康。
PART 02
大肠埃希氏菌的致病性
致病机制
01
02
03
粘附机制
大肠埃希氏菌通过粘附素 粘附在肠道上皮细胞上， 进而侵入细胞内或细胞下 组织。
毒素产生
某些大肠埃希氏菌能产生 肠毒素，引起肠道分泌增 加，导致腹泻等症状。
大肠埃希氏菌重点课件
确诊大肠埃希氏菌感染需要符合一定的诊断标准。一般来说， 需要满足以下条件：粪便培养或抗原检测阳性；临床表现符 合大肠埃希氏菌感染的特征；排除其他常见病因。
大肠埃希氏菌的防治
预防措施
保持个人卫生
勤洗手，特别是接触公共设施后，以及在处理食物前后。 洗手时应使用肥皂和水，或者使用含有至少60%酒精的 手部消毒液。
实验室检测
对采集的标本进行培养、抗原检 测、核酸检测等实验室检查，以
确定是否存在大肠现、实验室检 测结果以及其他相关检查结果， 进行综合评估，做出最终诊断。
诊断标准
临床诊断
根据患者的临床表现、体征以及可能的感染途径，结合实验 室检测结果进行诊断。例如，对于腹泻患者，若粪便培养或 抗原检测出大肠埃希氏菌，可考虑为大肠埃希氏菌感染。
大肠埃希氏菌重点课件
• 大肠埃希氏菌简介
大肠埃希氏菌简介
定义与分类
定义
大肠埃希氏菌是一种革兰氏阴性 杆菌，属于肠杆菌科的一种。
分类
大肠埃希氏菌可以分为多种不同 的血清型，其中一些血清型对人 体有致病性，如O157:H7型等。
生物学特性
形态与染色
大肠埃希氏菌为短杆菌，两端钝圆， 无芽孢，无鞭毛。
流行病学特征
流行地区
大肠埃希氏菌感染在全球 范围内均有发生，但发达 国家发病率更高。
季节性特征
夏季和秋季是感染的高发 季节，可能与食物制备和 储存不当有关。
人群特征
儿童、老年人、身体虚弱 者和免疫系统受损者更容 易感染大肠埃希氏菌。
大肠大埃肠希埃氏希菌氏的菌检的测检与测诊与断诊断
检测方法
01
粪便检测
THANKS
感谢观看
通过粪便培养或抗原检测，可检测出大肠埃希氏菌的存在。粪便培养是
大肠埃希菌(业界特制)
制作人：xxxxx xxxxx
行业倾力
1
目录：
一、引起疾病症状（致病性、流行病学情况）---3-4 二、基本情况及特征 ---5-12 三、培养特性 ---13-14 四、生化特性 ---15-18 五、抗原特征 ---19-20 六、检验方法（举例阐述检验某一食品、商品中该菌
的详细操作过程）---21-23
株只含有一种O抗原，其种类以阿拉伯数字表示；可
用抗O单因子血清通过凝行集业倾试力 验鉴定。
19
抵抗力
该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55℃ 经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。 在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低 的粪便中存活更久。胆盐、煌绿等对大肠杆菌有 抑制作用。对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感， 但易耐药，是由带有R因子的质粒转移而获得的。
行业倾力
4
科肠杆菌科与(医Ent学ero有bact关eri的acea属e)
种
埃希氏菌属
沙门氏菌属
一大群寄居肠杆在菌人属 和动物肠道中大生肠埃物希学菌 性状近似、
革兰氏阴性、遗志传贺氏学菌上属 有亲缘关系蟑的螂肠埃希道菌杆菌。现已
肠杆菌科 知有44个菌属，克1雷7伯0氏多菌个属 菌种 ，包弗括格三森埃大希类菌 别： 摩根菌属 1. 致病菌：如沙门菌，志贺菌、鼠赫尔疫曼耶埃希尔菌森菌； 沙雷氏菌属 2. 机会致病菌变：形杆大菌肠属 埃希菌、奇异伤口变埃形希菌杆菌等；
H抗原： 即抗鞭原毛抗结原；构不及耐热分，类
80℃可破坏其抗原性。1个菌株 仅有1种H抗原。
K抗原：即荚膜抗原；个别位于 菌毛中。不耐热。O不凝集性： 具有K抗原的菌株不会被其相应的 抗O血清凝集。
O抗原：即菌体抗原，化学本质为多糖-磷脂-蛋白质
大肠埃希菌检查法
资料范本本资料为word版本，可以直接编辑和打印，感谢您的下载大肠埃希菌检查法地点：__________________时间：__________________说明：本资料适用于约定双方经过谈判，协商而共同承认，共同遵守的责任与义务，仅供参考，文档可直接下载或修改，不需要的部分可直接删除，使用时请详细阅读内容大肠埃希菌检查法Escherichia Coli Test Method1.目的建立大肠埃希菌检查法的标准操作程序。
2.范围适用于大肠埃希菌检查的操作。
3.责任者QC化验员。
4.程序：4.1.简述4.1.1. 大肠埃希菌(Escherichia coli)即大肠埃希菌，为肠埃希菌科埃希菌属的模式种。
埃希菌属除大肠埃希菌外，新近发现有非脱羧埃希氏菌等5个种。
大肠埃希菌是人和温血动物肠道内的栖居菌，随粪便排出体外。
在药品中检出大肠埃希菌，表明该样品受到人和温血动物的粪便污染，即可能污染肠道病原体。
大肠埃希菌除普通大肠埃希菌外尚有致病性大肠埃希菌，可引起婴幼儿、成人爆发性腹泻。
为保证人体健康，口服药品必须检查大肠埃希菌。
4.1.2. 用4-甲基伞形酮葡糖苷酸(4-Methylumbelliferyl-β-D-glucuronide，MUG)和靛基质(Indole)试验检查大肠埃希菌是一项新技术，其检验步骤为：增菌培养后，转种MUG-蛋白胨培养基培养，多数情况下不需要从混合菌中分离单个菌，如MUG、Indole试验为阳性或阴性即可报告结果。
4.1.3. 原理：利用目标菌限定酶作用的底物的水解产物，产生颜色或荧光反应作为指示系统来鉴定目标菌。
实验证明，96％的大肠埃希菌含β-葡糖苷酸酶(β-glucuronidase，GUD)，约10％的沙门菌属一些菌种也含有此酶。
MUG被GUD水解，产生荧光，由于荧光反应的敏感度较颜色反应强千万倍，易于观察，没有主观性，因而用MUG鉴定大肠埃希菌已被广泛应用于临床、食品、饮水、污水等的检测。
大肠埃希菌
大肠埃希菌埃希菌属：大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌、伤口埃希菌致病因素；侵袭力K抗原和菌毛与炎症相关内毒素与发热、休克、DIC相关肠毒素耐热肠毒素和不耐热肠毒素cAMP水平升高，与腹泻相关所致疾病：肠道外感染：泌尿系统感染、菌血症、胆囊炎、肺炎及新生儿脑膜炎常见于肠穿孔激发腹膜炎、腹腔内脓肿、肠道手术后激发感染肠道内感染：微腹泻至霍乱样严重腹泻、溶血性尿毒综合征根据其不同的血清型，毒力和所致临床症状的不同，分为：危险因素感染类型发病年龄主要临床表现肠毒素型大肠埃希菌（ETEC）海外旅行旅行者腹泻成人、儿童水样便肠致病型大肠埃希菌（EPEC) 急性腹泻﹤2岁婴儿、成人水样便肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC) 海外旅行志贺样脓血便成人粘液脓血便，含红白细胞肠出血型大肠埃希菌（EHEC) 未熟牛肉牛奶出血性肠炎儿童、老人血便、发热（白）肠凝聚型大肠埃希菌（EaggEC）急、慢性腹泻儿童腹泻水泻、呕吐ETEC：儿童腹泻和旅行者腹泻EPEC;：黏液便但无血液EIEC：志贺样脓血便（有红细胞、白细胞）EHEC：多为水源性或食源性感染，人与人之间通过粪口感染，产生Veno细胞毒素，抑制蛋白质合成并致Veno细胞病变，潜伏期3--5天，血便中无白细胞EaggEC:：:与世界各地慢性腹泻有关。
形态结构;:格兰阴性直短杆菌，多有鞭毛，能运动；引起场外感染的菌株有荚膜和周身菌毛抗原成分：O抗原多糖磷脂复合物(LPS），耐热，分型基础H抗原不耐热蛋白质K抗原多糖荚膜抗原，对热稳定血清型按O:K:H顺序培养特性：兼性厌氧，营养要求不高血琼脂上产生β溶血肠道选择培养基，发酵乳糖，形成有色菌落发酵多种糖产酸产气，吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐（1MVC)试验结果为+ + - -动力、吲哚、脲酶（MIU）反应为+ + -克氏铁琼脂上斜面和底层产酸产气，硫化氢阴性（AA+ -）微生物学检验采集标本;：静脉血，血培养痰液、脓、分泌物等尿液，3000r/min 10min，沉淀物涂片镜检：格兰阴性杆菌分离培养：痰液血平板、巧克力平板、沙保弱氏培养基尿液血平板、MAC、沙保弱氏培养基血液血培养鉴定：EMB上，扁平、粉红色有金属光泽MAC上粉红色或红色SS上红-粉或中央为粉红色，周围无色的菌落XLD上，不透明黄色的菌落大肠埃希菌一般不产生硫化氢血清分型：ETEC：生化反应鉴定加血清分型加肠毒素测定EPEC：生化反应鉴定加血清分型乳糖阳性用ELISA和细胞培养来检测EPECEIEC;：生化反应加血清分型及毒力鉴定多数此型菌动力阴性，乳糖不发酵或迟缓发酵，O152 和O124,，与志贺菌有的抗血清有交叉反应豚鼠眼结膜试验：角膜上皮细胞出现大量细菌和志贺菌鉴别：醋酸钠、葡萄糖胺利用试验和黏质酸盐产酸大肠埃希菌均阳性，志贺菌均阴性EHEC：生化鉴定加血清分型O157 ：H7 ，不发酵山梨醇。