蛋白酶抑制剂筛选模型
应用于粉刺治疗的植物单体5α-还原酶抑制剂活性筛选
第３６卷第１期
２０１２年１月 江西师范大学学报（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉａｎｇｘｉ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ） Ｖ０１．３６Ｎｏ．１ Ｊａｎ．２０ｌ２
文章编号：１０００．５８６２（２０１２）０１—０００５－０３
应用于粉刺治疗的植物单体５ ．还原酶抑制剂活性筛选
付时雨，孙常磊，任宇红
（华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海２００２３７）
摘要：建立一种简单的５ 一还原酶抑制剂体外筛选模型，用于２０种植物单体物质的５ａ一还原酶抑制活性检测， 以寻求对粉刺治疗有效的药物．以睾酮为底物、ＮＡＤＰＨ为供氢体，对５ａ．还原酶体外测定体系进行了优化， 并测定了２Ｏ种中草药标准品的５ａ一还原酶抑制活性．确定了５ａ．还原酶反应的最适底物浓度为２５￣ｔｍｏｌ／Ｌ，最 适反应温度为３７℃，最适反应ｐＨ值为６．５．确定了知母总苷、连翘素、蛇麻酮对５ｎ．还原酶有抑制作用，其 半数抑制常数（ＩＣ５ｏ）分别为１２．４、２０．８和４５．６ Ｉ．ｔｇ／ｍＬ．知母皂、连翘素和蛇麻酮在抗粉刺领域具有潜在应用 价值． 关键词：粉刺；５ａ．还原酶抑制剂；植物单体 中图分类号：Ｑ ９３５ 文献标志码：Ａ
粉刺是一种复杂的、慢性的和普遍性的皮脂腺
功能紊乱疾病，主要发生在青少年的脸部、前胸和 后背．近年来，粉刺的发病机理已经被发现了很多，
但是还是有一些机理尚未明确．简单地说，粉刺发 生的主要机理有：雄激素分泌过多引起的皮脂腺功
能亢进；角质化细胞增生过度堵塞毛囊；厌氧细菌 尤其是痤疮丙酸杆菌的大量繁殖；炎症的产生…．
近年来，通过研究发现，粉刺的产生与过氧化物酶
体增生物受体（ＰＰＡＲ）、Ｐ物质、细胞因子、金属蛋白 酶等都有重要的关系［２】．
雄激素分泌过多引起的皮脂腺功能亢进是粉刺 产生的一个重要原因，睾酮（Ｔ），尤其二氢睾酮（ＤＨＴ）
是刺激粉刺产生的主要雄性激素．甾醇硫酸脱氢 酶、３ 一羟基甾醇脱氢酶（３／ｔ．ＨＳＤ）、细胞色素Ｐ４５０Ｃ１９
NDM-1型金属-β-内酰胺酶及其抑制剂研究进展
NDM-1型金属-β-内酰胺酶及其抑制剂研究进展
孙影;周紫薇;冯迪;刘湲;郑珩
【摘 要】金属β-内酰胺酶(MBLs)尤其是NDM-1型金属酶介导的细菌耐药性在全球范围内不断扩散,给人类健康带来日益严重的威胁.虽然使用抑制剂阻止酶的水解作用是临床上应对产β-内酰胺酶耐药菌的重要手段,并已成功上市了奥格门汀等药物,但临床所用抑制剂仅对丝氨酸β-内酰胺酶有效,对MBLs尤其是NDM-1没有效果.本综述概述了近年来NDM-1抑制剂的研究进展,介绍了MBLs抑制剂筛选新方法,以期为研究者们提供新的思路,更有效地设计或筛选出活性较好的MBLs抑制剂.
【期刊名称】《国外医药（抗生素分册）》
【年(卷),期】2018(039)002
【总页数】8页(P91-98)
【关键词】金属酶;NDM-1;抑制剂;筛选方法
【作 者】孙影;周紫薇;冯迪;刘湲;郑珩
【作者单位】中国药科大学生命科学与技术学院,南京210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京210009
【正文语种】中 文
【中图分类】R978
1 引言
β-内酰胺类抗生素是目前临床应用较广、用量较大的一类抗菌抗感染药物。自1940年青霉素首次应用于临床以来，该类抗生素在控制与治疗细菌感染性疾病方面发挥着重要作用[1]。然而随着抗生素的乱用与滥用，细菌对β-内酰胺类抗生素的耐药现象日益严重，并且机制多种多样，其中β-内酰胺酶的产生被认为是最重要的原因，尤其是近年来造成严重细菌耐药性的金属-β-内酰胺酶(MBLs)，威胁最大的莫过于B1类的新德里金属-β-内酰胺酶(NDM-1)。NDM-1最初是从一名2008年在印度的新德里做过选择性外科手术的瑞典病人身上的肺炎克雷伯杆菌中分离得到，该菌株能分解除替加环素和多黏菌素之外的所有抗生素，故被称为“超级细菌”[2]。自2010年Kumarasamy等[3]报道了产NDM-1肠杆菌科在印度、巴基斯坦、英国等国家的流行情况，使得NDM-1金属酶真正引起国际性的关注以来，科学家们陆续在美国、德国、日本、中国等地检出携带NDM-1的菌株，多为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌等[4]。迄今为止，已发现有NDM亚型17种(NDM-1～NDM-17)[5]， 与NDM-1相比，NDM-17具有三个氨基酸取代(V88L，M154L和E170K)，能够显著增强碳青霉烯酶活性。并且编码NDM-17的基因(blaNDM-17)位于IncX3质粒上，易转移到受体大肠埃希菌J53，表明其快速传播的可能性。临床检出的表达NDM-1的耐药菌株，其基因绝大多数也位于质粒中[6]。由于突变体转移性和碳青霉烯酶活性的增强，这些新型变体的出现极可能对公共卫生构成越来越严重的威胁。
真菌来源的蛋白酶体抑制剂F04W2166A的研究
６６２ 中国抗生素杂志２０１ １年９月第３６卷第９期
文章编号：１００１—８６８９（２０１１）０９—０６６２—０５
真菌来源的蛋白酶体抑制剂Ｆ０４Ｗ２１６６Ａ的研究
王亚婷 可爱兵ｚ 王福生 张雪莲 李业英 范玉玲ｚ路新华：， 郑智慧ｚ 蒋沁ｚ 张华２赵宝华 （１河北师范大学，石家庄０５００１６；２华北制药集团新药研究开发有限责任公司，石家庄０５００１５）
摘要：目的 通过蛋白酶体抑制剂筛选模型从微生物代谢产物中筛选出具有蛋白酶体抑制活性的化合物。方法 对１株 筛选得到的阳性真菌进行放大发酵，通过硅胶和Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ一２０柱色谱等分离手段进行单体化合物分离。结合理化性质和质 及核磁 振等数据的分析，确定其化学结构。测定化合物的蛋白酶体抑制活性以及抗肿瘤细胞增殖活性。结果 从ｌ株具有 活性的轮枝孢霉菌Ｆ０４Ｗ２１６６ ｒｔ￣得到活性化合物Ｆ０４Ｗ２１６６Ａ，并确定其结构与环缩酚酞类已知化合物Ｐｕｌｌｕｌａｒｉｎ ｃＪｒＨ吲。体外酶
抑制活性说明该化合物对蛋ｒＩ酶体有很强的抑制活性，其ＩＣ 为３．１ｇｇ／ｍＬ。进…步的抗肿瘤细胞增殖活性结果证明该化合物
对人结肠癌细胞株ＨＴ ２９和人乳腺癌细胞株ＭＤＡ．ＭＢ一２３１的增殖均有很高的抑制活性，其Ｉｃ 分别为２８．３￣１２７１．６ｎｇ／ｍＬ。结论 Ｆ０４Ｗ２ｌ６６Ａ是一个环缩酚酞类的蛋白酶体抑制剂，具有强的体外抗肿瘤细胞增殖活性。 关键词：蛋白酶体抑制剂；环缩酚酞；Ｐｕｌｌｕｌａｒｉｎ Ｃ；抗肿瘤 中图分类号：Ｒ９７９．１ 文献标识码：Ａ
Ｆ０４Ｗ２１６６Ａ，ａ ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ ｉｎｎｈｉｂｉｔｏｒ ｆｒｏｍ ｆｕｎｇａｌ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ
Ｗａｎｇ Ｙａ－ｔｉｎｇ ，Ｋｅ Ａｉ—ｂｉｎｇ ，Ｗａｎｇ Ｆｕ—ｓｈｅｎｇ ，Ｚｈａｎｇ Ｘｕｅ—ｌｉａｎ ，Ｆａｎ Ｙｕ－ｌｉｎｇ ，Ｌｕ Ｘｉｎ—ｈｕａ ， Ｚｈｅｎｇ Ｚｈｉ—ｈｕｉ ，Ｊｉａｎｇ Ｑｉｎ ，Ｚｈａｎｇ Ｈｕａ ａｎｄ Ｚｈａｏ Ｂａｏ—ｈｕａ （１ Ｈｅｂｅｉ Ｎｏｒｍｏａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈ￣ｉａｚｈｕａｎｇ ０５００１６；２ ＮＣＰＣ Ｎｅｗ Ｄｒｕｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｃｏ，Ｌｔｄ．，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ ０５００１５）
HIV-1蛋白酶抑制剂前药的研究进展
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可编辑 HIV21蛋白酶抑制剂前药的研究进展
[摘 要] 综述HIV-1蛋白酶抑制剂前药的研究进展。HIV-1蛋白酶抑制剂前药是以HIV-1蛋白酶抑制剂为母体,通过引入亲脂性或亲水性基团等结构修饰而得到的一类药物前体,尤其是基于蛋白酶抑制剂和逆转录酶抑制剂为母体药物设计的“双药”型抗HIV-1前药,它们能在体内水解释放出母体药物,从而提高母体药物活性及生物利用度,降低其耐药性或交叉耐药性。
[关键词] 前药；HIV-1蛋白酶抑制剂;逆转录酶抑制剂；抗HIV活性；生物利用度
艾滋病(AIDS)是一种由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的免疫和中枢神经系统的退行性疾病。通过对AIDS致病机制的长期研究,人们发现HIV-1逆转录酶!蛋白酶和整合酶是HIV-1基因在复制过程中的3个关键酶,到目前为止抗HIV/AIDS药物的研究与开发主要是针对这3个关键酶进行设计。有效治疗AIDS的化学法是由蛋白酶抑制剂与逆转录酶抑制剂的联合给药,俗称“鸡尾酒疗法“,又称“高效抗逆转录病毒疗法”(HAART)。然而,在治疗AIDS过程中,不管是“鸡尾酒疗法”还是单独给药都会不同程度地出现药物依赖性、药物间相互作用、耐药性以及药物无法进入病毒宿主或“避难所”(如淋巴系统或中枢神经系统)等问题。目
前尚无有效的HIV疫苗问世,而新出现的HIV病毒株又表现出对临床治疗药物越来越明显的耐药性。于是开发新一代的HIV蛋白酶抑制剂就具有更加紧迫的现实意义。
对现在临床使用的HIV-1蛋白酶抑制剂进行结构修饰,进而制成前药,不失为进一步提高其用药安全性、水溶性、生物利用度和疗效以及改善药代动力学特征的有效途径。而在这些HIV-1蛋白酶抑制剂的羟基上连接脂肪酸链、氨基酸、D2葡萄糖等是提高其口服利用度的常用方法。为了克服它们在体内的血液循环中与血浆蛋白结合而失活及快速代谢,将其与诸如聚乙二醇等亲水性多聚物结合,则可延长它们在血液循环系统中的循环时间,进而也可改善其生物利用度。
蛋白酶体抑制剂制备帕金森病模型的研究进展
山东医药２００８年第４８卷第３７ 蛋白酶体抑制剂制备帕金森病模型的 研究进展 张海娜，陈秋惠，韩艳秋，胡国华 （吉林大学第二临床学院，吉林长春１３００４１） ・综述与讲座・
［关键词］ 帕金森病；蛋白酶体抑制剂；细胞模型；动物模型 ［中图分类号］ Ｒ７４２．５ ［文献标识码］ Ａ ［文章编号］ １００２－２６６Ｘ（２００８）３７－０１０７－０３ 帕金森病（ＰＤ）是一种中老年人常见的神经系统变性疾 病，以黑质多巴胺（ＤＡ）能神经元的变性缺失和残存的神经 元胞质内Ｌｅｗｙ小体形成为病理特征。由于发病率的增加及 其不可根治性等特点，ＰＤ已成为神经领域的研究热点，而制 备稳定的疾病模型成为研究的主要手段。近年来蛋白酶体 抑制剂成为制备ＰＤ模型的新型药物，下面就该药物在ＰＤ 模型中的研究进展作一综述。 １ 蛋白酶体 １９７９年，Ｇｏｌｄｂｅｒｇ等首先报道在大鼠肝脏和网织红细胞 中存在一种相对分子质量为７００ Ｘ １０。的受ＡＴＰ激活的中性 蛋白水解酶。此后，一些在形态、功能及免疫学特征上与之 相同的颗粒通过不同途径被分离出来，被统一命名为蛋白酶 体。蛋白酶体存在于所有真核细胞的胞质及核内，是高度保 守具有多种催化功能的蛋白酶复合物。２６Ｓ蛋白酶体包括１ 个２０Ｓ的催化单位和２个１９Ｓ的调节单位，２０Ｓ蛋白酶体呈 桶状外形，由内层２个Ｂ环和外层２个仪环组成，每个环含 有７个亚基。仪亚单位促使底物移位进人中央孔隙水解中 心，并使２０Ｓ复合体和１９Ｓ调节复合体之间发生构象改变；Ｂ 亚单位Ｎ末端苏氨酸残基是蛋白酶体的水解中心，１３１、１３，２、 Ｂ５亚单位分别具有半胱氨酸蛋白酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶 样活性。 ２泛素一蛋白酶体系统和ＰＤ 蛋白降解是调节细胞内蛋白水平的重要机制之一，涉及 细胞周期、细胞发育、细胞信号转导及抗体的形成、细胞毒物 的排出等。泛素～蛋白酶体途径（ＵＰＳ）是生物体内蛋白质 选择性降解的重要途径之一，存在于所有的细胞核和细胞质 中，参与真核细胞内８０％～９０％的蛋白质降解。ＵＰＳ由泛 素、连接酶、２６Ｓ蛋白酶复合物组成，其活性中心在２６Ｓ蛋白 酶体中。它可清除细胞中突变、损伤和异常折叠的蛋白质， 起到维持细胞内外环境稳定的作用，其成分的改变将引起蛋 ［基金项目］国家自然科学基金资助项目（３０４７０５９０）；吉林省科委基 金项目（２００５０５１２７）。 ＋通讯作者，Ｅ—ｍａｉｌ：ｈｏｏｇｕｏｈｕａ＠１２６．ｃｏｒｎ 白降解异常，导致细胞功能紊乱。 许多证据表明，ＰＤ以及其他神经变性病可能是一类蛋 白降解障碍疾病。家族性ＰＤ的致病基因与ＵＰＳ密切相关， 目前发现的此类基因有０【一ｓｙｎｕｃｌｅｉｎ、Ｐａｒｋｉｎ、泛素羧基水解酶 Ｌ１等，它们的突变或缺失均导致ＵＰＳ功能障碍。 ．ｓｙｎｕｃｌｅｉｎ 是蛋白酶体的底物，突变的仪一ｓｙｎｕｃｌｅｉｎ不易于被降解，而在 细胞内积聚产生毒性。Ｐａｒｋｉｎ是一种Ｅ３连接酶，它的突变 或缺失使多聚泛素链与底物不能连接，从而导致降解障碍。 泛素羧基水解酶Ｌ１的突变影响泛素的循环利用，从而使蛋 白酶体系统降解障碍。一些研究显示，蛋白酶体功能缺陷导 致散发性ＰＤ。ＰＤ患者尸检结果显示，黑质致密处蛋白酶体 活性降低，蛋白酶体 亚单位选择性丢失…。最新证据表 明，ＵＰＳ对蛋白降解能力的破坏是ＰＤ发病过程中的一个重 要因素 。ＵＰＳ功能异常或衰竭导致细胞内异常蛋白蓄积、 细胞功能障碍，甚至细胞死亡。 ３常用蛋白酶体抑制剂 理想的ＰＤ模型应具备如下特征：①容易检测到ＰＤ的 运动缺陷；②随年龄发展的选择性和渐进性ＤＡ神经元缺 失；￣Ｌｅｗｙ小体样细胞质包涵体的生成；④相对较短的疾病 周期，便于经济快速进行药物筛选；⑤技术操作简单，重复性 良好。 ＰＤ的病因被认为是环境毒素对遗传敏感者的作用，而 蛋白酶体抑制剂在自然界中天然存在。目前常用的用于ＰＤ 研究的蛋白酶体抑制剂有天然化合物ｅｐｏｘｙｍｙｃｉｎ、ｌａｃｔａｃｙｓｔｉｎ 和合成化合物ＰＳＩ、ＭＧ１３２等。自然情况下，ｅｐｏｘｏｍｉｃｉｎ和 ｌａｃｔａｃｙｓｔｉｎ由放线茵（链霉菌）产生，普遍存在于土壤、花园、 农田的水生环境当中，ＰＳＩ和ＭＧ１３２是合成的活性药效基 团，是可逆的蛋白酶体抑制剂，具有细胞通透性，能有效地抑 制ＵＰＳ，也存在于环境当中。 目前关于蛋白酶体抑制剂诱导的ＰＤ模型的机制研究很 多。在给人的成神经细胞瘤细胞（ＳＨ．ＳＹ５Ｙ）应用小剂量的 蛋白酶体抑制剂之后，这些细胞内的蛋白氧化增多、蛋白聚 集增多，线粒体平衡被打破 ］。Ｚａｆａｒ等 认为蛋白酶体抑 制诱导的凋亡是通过ＤＡ来源的代谢产物发生的。所以，他
白细胞弹性蛋白酶抑制剂筛选模型的建立及抑制剂F02ZA-2554A的研究
中国抗生素杂志２００７年５月第３２卷第５期 ２７３
文章编号：１００１ ８６８９（２００７）０５—０２７３—０４
白细胞弹性蛋白酶抑制剂筛选模型的建立及抑制剂Ｆ０２ＺＡ一２５５４Ａ的研究
郑智慧ｈ 任晓 司书毅ｈ 穆栋 路新华 崔晓兰。 董悦生 张华 贺建功
（１中国医学科学院 中国协和医科大学 医药生物技术研究所， 北京１０００５０；
２华北制药集团新药研究开发中心微生物药物国家工程研究中心， 石家庄０５００１５）
摘要： 利用人源的白细胞弹性蛋白酶建立了一种快速、微量、灵敏的高通量体外筛选方法。利用该模型从微生物菌种库菌株
的次生代谢产物中筛选得到一阳性真菌Ｆ０２ＺＡ一２５５４。该菌株发酵液经有机溶剂提取、硅胶柱层析、及ＨＰＬＣ ＯＤＳ反相柱层析等
活性跟踪下的分离纯化，得到活性化合物Ｆ０２ＺＡ一２５５４ Ａ，该化合物对白细胞弹性蛋白酶有中等强度的抑制活性，其ＩＣｓｏ为３２．４
／￣ｍｏｌ／Ｌ。通过对该化合物的紫外、质谱、核磁等理化分析，确定该化合物为葸醌类化合物中的大黄素甲醚（ｐｈｙｓｃｉｏｎ），该化合物的抗
炎活性属首次报道。 关键词： 人白细胞弹性蛋白酶抑制剂； 大黄素甲醚； 抗炎作用
中图分类号：Ｒ９７９．１ 文献标识码：Ａ
Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｈｉｇｈ ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ＨＬＥ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ
ａｎｄ ａｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ Ｆ０２ＺＡ一２５５４Ａ
Ｚｈｅｎｇ Ｚｈｉ—ｈｕｉ ‘ 。，Ｒｅｎ Ｘｉａｏ ，Ｓｉ Ｓｈｕ—ｙｉ ，Ｍｕ Ｄｏｎｇ ，Ｌｕ Ｘｉｎ—Ｈｕａ ，
Ｃｕｉ Ｘｉａｏ—ｌａｎ ，Ｄｏｎｇ Ｙｕｅ—ｓｈｅｎｇ ，Ｚｈａｎｇ Ｈｕａ ａｎｄ Ｈｅ Ｊｉａｎ－ｇｏｎｇ
（１ Ｉｎｓｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｐｅｋｉｎｇ Ｕｎｉｏｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ａｎｄ
基于结构的HIV-1蛋白酶抑制剂的虚拟筛选
昆明医科大学学报２０１３，（８）：１９～２２
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｋｕｎｍｌｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
基于结构的ＨＩＶ一１蛋白酶抑制剂的虚拟筛选 ＣＮ ５３—１２２１／Ｒ
谷万港”，张丽２），张旋∞
（１）遵义医学院基础医学院免疫学教研室，贵州遵义５６３０００；２）昆明医科大学学报编辑部；３）药学
院暨云南省天然药物药理重点实验室，云南昆明 ６５０５００）
［摘要］日的通过新的虚拟筛选工具ＰｙＲＸ运行ＡｕｔｏＤｏｃｋ Ｖｉｎａ，对ＺＩＮＣ数据库的２万个化合物进行虚拟
筛选，发现新的ＨＩＶ蛋白酶抑制剂，并且对新的抑制剂与ＨＩＶ蛋白酶的结合模型进行探索．方法以ＨＩＶ蛋白
酶为靶点，通过虚拟筛选程序ＡｕｔｏＤｏｃｋＶｉｎａ对ＺＩＮＣ数据库的化合物进行虚拟筛选．与以前研究不同的是，本研
究通过新的虚拟筛选工具ＰｙＲｘ运行ＡｕｔｏＤｏｃｋ Ｖｉｎａ．ＨＩＶ蛋白酶晶体结构（ＰＤＢ ＩＤ：４ｐｈｖ）从ＰＤＢ下载，通过
ＡｕｔｏＤｏｃｋＴｏｏｌｓ对结构进行处理．化合物结构下载自ＺＩＮＣ数据库，通过ＰｖＲｘ导人，处理成ｐｄｂｑｔ格式．ＰｙＲｘ运
行ＡｕｔｏＤｏｃｋ Ｖｉｎａ以后，筛选以后的化合物构象导人ＡｕｔｏＤｏｃｋＴｏｏｌｓ进行分析，数据处理用ＰｙＭＯＬ完成．结果
从大约２万个化合物库中进行高通量筛选，得到１ ０００个类药小分子化合物的库．再从这１ ０００个小分子化合物
中筛选针对蛋白酶的抑制剂．通过对建立的化合物数据库进行３轮筛选，发现５个高活性的ＨＩＶ蛋白酶抑制剂．
结论５个新的抑制剂的进一步开发，将对ＨＩＶ的治疗和基础研究带来帮助．也对药物虚拟筛选和基于结构的药
物开发提供新的信息．
［关键词］ＨＩＶ一１；蛋白酶；抑制剂；虚拟筛选；１５ｒＲｘ
［中图分类号］Ｑ７８９［文献标识码］Ａ［文章编号］２０９５－－６１０Ｘ（２０１３）０８—００１９一ｏ４
Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ Ｐｒｏｔｅａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ＨＩＶ・－・１ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
白细胞弹性蛋白酶抑制剂
《生命的化学》2011年31卷2期CHEMISTRY OF LIFE 2011，31(2)· 238 ·● Mini Review
文章编号: 1000-1336(2011)02-0238-06
白细胞弹性蛋白酶抑制剂
胡显腾 宋 歌 孔令超 刘小宇第二军医大学生物化学与分子生物学教研室，上海 200433
摘要：人白细胞弹性蛋白酶广泛参与体内的组织损伤反应，与炎症反应、自身免疫、肿瘤形成和转移等有密切关系。目前人白
细胞弹性蛋白酶抑制剂已成为新药开发的热点，具有很高的应用价值，其中西维来司钠已经成功进入市场。本文对近几年发现
的人白细胞弹性蛋白酶抑制剂的结构及其作用进行综述。关键词：人白细胞弹性蛋白酶；抑制剂；西维来司钠
中图分类号：Q71；Q74
收稿日期：2010-07-12第二军医大学大学生创新能力培养计划基金项目(MS2009029)资助作者简介：胡显腾(1987-)，男，本科生，E-mail: thefalling snow@；宋歌(1988-)，男，本科生，E-mail：sganthem @；孔令超(1988-)，男，本科生，E-mail：790215986@；刘小宇(1971-)，女，硕士，副教授，通讯作者，E-mail：liuxiaoyu8888@人白细胞弹性蛋白酶(human leukocyte elastase, HLE)，是多形核白细胞(polymorphonuclear leukocyte,
PMNL)因受炎症刺激而释放出的一种破坏性丝氨酸
蛋白酶[1]，其功能酶包含218个氨基酸残基，构成两
个β-桶状(β-barrel)结构域，由4个二硫键维持稳定[2]，
定位于多形核白细胞嗜苯胺蓝颗粒中，可以水解纤
连蛋白、胶原、软骨等组织连接成分[3]。细胞因子、
内毒素、血小板活化因子(platelet-activating factor, PAF)和甲酰甲硫氨酰亮氨酰苯丙氨酸(N-formyl-methionyl-leucylphenylalanine, fMLP)可激活HLE的释放[4]，同
基于虚拟筛选方法从化合物数据库中筛选SARS-COV-2的2’-O-甲基转移酶抑制剂
基于虚拟筛选方法从化合物数据库中筛选SARS-COV-2的2’-O-甲基转移酶抑制剂
储晓慧;宋昱;温泽宇;王晓雨;于宗霞
【期刊名称】《化学研究与应用》
【年(卷),期】2022(34)5
【摘 要】由SARS-CoV-2病毒引起的新型冠状病毒肺炎COVID-19对世界各国的日常生活和卫生保健系统造成了前所未有的冲击,治疗该疾病的特效药仍在紧张的研制中。2’-O-甲基转移酶(nsp16)催化了SARS-COV-2的RNA“加帽”反应,是维持该病毒RNA稳定性的重要步骤,因此通过筛选nsp16的抑制剂,干扰SARS-COV-2的稳定性,具有一定的药物开发价值。Sinefungin是一种泛甲基转移酶抑制剂,对nsp16具有较好的抑制效果,被用作本文抑制剂筛选的阳性对照。首先依据RMSD值对分子动力学模拟过程中产生的nsp16-Sinefungin结合构象进行聚类分析,构建并优化药效团模型,该模型包含芳香特征R15、氢键供体特征D9、正电特征P14和负电特征N13各一个。随后利用该药效团模型进行小分子数据库筛选、分子对接、MM-GBSA结合自由能计算、分子动力学模拟,并对筛选得到的化合物进行成药性评价,最终得到C1(CAS:1224032-33-0)、C2(CAS:1224020-56-7)、C3(CAS:1224031-61-1)和C7(CAS:1224035-30-6)四个化合物。结果表明四个化合物均可稳定结合于nsp16活性口袋。
【总页数】9页(P1016-1024)
【作 者】储晓慧;宋昱;温泽宇;王晓雨;于宗霞
【作者单位】大连大学生命科学与技术学院 【正文语种】中 文
【中图分类】Q555
【相关文献】
1.基于新型冠状病毒SARS-CoV-2主蛋白酶结构的小分子抑制剂虚拟筛选2.基于新型冠状病毒SARS-CoV-2主蛋白酶结构的小分子抑制剂虚拟筛选3.基于虚拟筛选方法从中药中发现SARS-CoV-2抑制剂4.基于多组学技术探究慢性心衰靶向EGR1中药化合物抑制剂的虚拟筛选5.基于TCMSP数据库的分子对接虚拟筛选JAK3特异性抑制剂
高通量筛选技术的研究
高通量筛选技术的研究
高通量筛选技术是一种快速、高效、精准的分子层次筛选技术,
它可以在很短的时间内对大量的化合物进行筛选和评估。与传统的人工筛选相比，高通量筛选技术具有时间和效率上的优势。因此，它得到了广泛的应用。近年来，高通量筛选技术在药物发现、基因研究、生物学和化学领域得到了广泛的关注和研究。
一、高通量筛选技术的原理
高通量筛选技术是基于自动化仪器实现的化合物筛选。其基本原理是将大量的化合物分别加入到不同的小孔孔板中，然后通过机器自动化进行筛选、分析和评估。通过分析化合物与分子之间的相互作用原理，筛选出具有特殊生物活性的化合物。
在高通量筛选技术中，通常采用生物测定法或化学测定法进行化合物的筛选，其中，最常用的是生物测定法。生物测定法主要分为细胞测定法和细胞外测定法。细胞测定法是以细胞为主要评判指标，通过测定化合物与细胞的交互作用来评估药效和生物活性。细胞外测定法是基于化学分析的，通过测定化合物与特定蛋白质或酶的相互作用来评估生物活性。
二、高通量筛选技术的应用
1.药物发现
高通量筛选技术在药物发现领域用途广泛。传统的药物筛选通常依赖于病理学和分子生物学方法，筛选结果需要长时间的验证和评估，效率较低。而高通量筛选技术通过自动化仪器快速进行化合物筛选，能够大大提高药物发现的效率和精准度。许多成功的药物开发项目都是采用高通量筛选技术进行的，例如抗癌药物樟脑醇的发现，以及蛋白酶抑制剂类药物的研究等。
2.基因研究
高通量筛选技术在基因研究领域也有广泛应用。通过筛选和分析大量的化合物，可以发现对特定基因的表达有影响的化合物，从而寻找到治疗特定基因疾病的药物。高通量筛选技术有望成为研究细胞信号转导、疾病基因表达和蛋白质相互作用等方面的强有力工具。
3.生物学领域
高通量筛选技术在生物学领域也有着广泛的应用。研究者们可以利用高通量筛选技术来寻找对特定人体细胞和组织有生物活性的化合物，探索不同化合物与人体细胞之间的相互作用模式和机制，进而深入了解生物学过程和机制。