人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立
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・论 丕塑垦堕堕垫 ！ 生 旦箜 鲞箜 塑 ！ ０ｆ ｏ１ｌＩｈｅａｓｌＣｈｉｎａ，Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．２，Ｍ ．２０１２
人结肠癌ＳＷ４８０细胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立
张胜行，张诗兰，兰小鹏
［摘要］ 目的建立人结肠癌ＳＷ４８０细胞移植瘤模型，研究其形态学及生物学特性。方法将处 于对数生长期的人结肠癌ＳＷ４８０细胞接种于１０只裸鼠右侧背部皮下，待瘤体生长至直径１～２ Ｃｍ时处 死裸鼠，取出肿瘤组织，将其磨碎并与培养基混合、过滤，滤液与基质胶混合，再将基质胶细胞悬液接种
于３０只裸鼠右侧背部皮下，７ ｄ后处死裸鼠，观察肿瘤大体特征，光镜及电镜下观察肿瘤病理学特征。 结果接种ＳＷ４８０细胞的裸鼠于接种后４周有３只成瘤。接种基质胶细胞悬液的裸鼠在接种后７ ｄ有 ２８只成瘤，瘤体形状规则，肿瘤组织呈现典型癌变特征。结论本实验成功建立了人结肠癌裸鼠皮下 移植瘤模型，该模型成瘤率高，瘤体形状规则，病理学改变与临床非常相似，为研究人结肠癌干预措施提
供了较为理想的动物模型。 ［关键词］ 结肠癌；裸鼠；皮下移植；ＳＷ４８０细胞；模型
［中图分类号］ Ｒ９６９．４ ［文献标志码］Ａ ［文章编号］ １６７２．２７１Ｘ（２０１２）０２－０１０８－０３
Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｔｕｍｏｒ ｍｏｄｅｌ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ
ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ Ｓ、Ｖ４８０ ｉｎ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ
ＺＨＡＮＧＳｈｅｎｇ—ｈａｎｇ，ＺＨＡＮＧＳｈｉ—ｌａｎ，ＬＡＮＸｉａｏ－ｐｅｎｇ．Ｐｅｏｐｌｅ ＬｉｂｅｒａｔｉｏｎＡ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，
Ｆｕｚｈｏｕ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＮａｎｆｉｎｇ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｃｏｍｍａｎｄ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ ３５００２５，Ｃｈｉｎａ
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ ｍｏｄｅｌ ｂｙ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ ＳＷ４８０
ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ａｎｄ ｓｔｕｄｙ ｉｔｓ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＷ４８０ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｌｏｇａｒｉｔｈｍｉｃ ｇｒｏｗｔｈ ｐｈａｓｅ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｏｎ ｔｈｅ ｂａｃｋ ｏｆ １０ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ．Ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｆ ｔｒａｎｓ－ ｐｌａｎｔｅｄ ｔｕｍｏｒｓ ｗａｓ １—２ ｅｍ，ｔｈｅ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｋｉｌｌｅｄ．Ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗｅｒｅ ｔａｋｅｎ ｏｕｔ，ｔｈｅｎ ｇｒｉｎｄｅｄ．Ｔｈｅ ＳＵＳ—
ｐｅｎｓｉｏｎ ｏｆ Ｍａｔｒｉｇｅｌ ａｎｄ ＳＷ４８０ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｏｎ ｔｈｅ ｂａｃｋ ｏｆ ３０ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ．Ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｔｕｍｏｒｓ ｗｅｒｅ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｂｙ ｖｉｓｕａｌ ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒａｎｓ— ｐｌａｎｔｅｄ ｔｕｍｏｒｓ ｗｅｒｅ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ ａｎｄ ｌｉｇｈｔ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｔｕｍｏｒｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ３ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ ｉｎｃｕｂａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＳＷ４８０ ｃｅｌｌｓ ａｆｔｅｒ ｆｏｕｒ ｗｅｅｋｓ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｔｕｍｏｒｓ ｗｅｒｅ ｏｂ— ｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ２９ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ ｉｎｃｕｂａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｏｆ Ｍａｔｒｉｇｅｌ ａｎｄ ＳＷ４８０ ｃｅｌｌｓ ａｆｔｅｒ ｓｅｖｅｎ ｄａｙｓ．Ｔｈｅ ｔｒａｎｓ—
ｐｌａｎｔｅｄ ｔｕｍｏｒｓ ｗｅｒｅ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｒ ｓｈａｐｅ ａｎｄ ｏｆ ｔｙｐｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｂｅｈａｖｉｏｒ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｌａｓｓｉｃａｌ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒ— ｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ ｍｏｄｅｌ ａｒｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ．Ｔｈｅ ｔｒａｎｓｐｌａｎ— ｔｅｄ ｔｕｍｏｒｓ ａｒｅ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｒ ｓｈａｐｅ ａｎｄ ｏｆ ｔｙｐｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｂｅｈａｖｉｏｒ．Ｉｔ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ａｎ ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ ａｎｄ ｕｓｅｆｕｌ ａｎｉｍａｌ
ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ｓｔｕｄｙｉｎｇ ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ；ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ；ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ；ＳＷ４８０ ｃｅｌｌ；ｍｏｄｅｌ
结肠癌属四大最常见的恶性肿瘤，发病逐年增
多，晚期患者预后差，长期生存率低，因此一直是临
床研究的热点。建立适当的人结肠癌动物模型，对
进一步研究结肠癌的生物学特性、探讨结肠癌的发
病机理与防治措施起到非常关键的作用。皮下移植
基金项目：福建省科技厅国际合作重点项目（２００４１０１２） 作者简介：张胜行（１９７６一），男，河北衡水人，硕士研究生，主 管技师，研究方向：免疫学和科研管理 作者单位：３５００２５福建福州，南京军区福州总医院全军检 验医学研究所 通讯作者：兰小鹏，Ｅ—ｍａｉｌ：ｌａｎｘｐ＠ｓｉｎａ．ｃｏｒｎ．ｅｎ 瘤模型操作简单，成瘤率高，应用广泛…，目前研究
者多采用细胞悬液注射法建立小鼠结肠癌模型，结果
不尽相同，方法有待改进。本研究应用人结肠癌
ＳＷ４８０细胞接种裸鼠，鼠间异体移植建立人结肠癌裸
鼠皮下移植瘤模型，并观察其形态学和生物学特性。
１材料与方法
１．１ 实验动物和主要试剂２～３周龄ＢＡＬＢ／ｃ裸
鼠４０只，雌雄各半，购于上海西普尔一必凯实验动物
公司［动物合格证号为ＳＣＸＫ（沪）２００７－０００７］，ＳＰＦ
级条件下饲养。人结肠癌细胞株ＳＷ４８０购自南京 ・１１０・ 塑垦堕堕垫 生 旦箜 鲞笙 塑 些 ！ ｉｃ ｏｆ Ｓｏｕｔｈｅａｓｔ Ｃｈｉｎａ，Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．２，Ｍ ．２０１２
图４肿瘤组织的超微结构改变（透射电镜×１０ ０００）
３讨论
目前，结肠癌动物模型可分为自发性、诱发性、
移植性和转基因动物肿瘤模型，其中移植瘤模型因
成功率高、生物学性状稳定、建立周期短．基本上能
满足肿瘤的生物学行为研究、药物评价的需要而被
广泛应用 。
本研究选用人结肠腺癌细胞株ＳＷ４８０，该细胞
株具有恶性程度高、增殖旺盛、倍增时问短、传代迅
速等特点，能很好地满足移植瘤的需要。ＢＡＬＢ／ｃ
裸鼠和ＳＣＩＤ鼠均有免疫功能缺陷，常用于肿瘤动
物模型的建立，而裸鼠对培养条件等要求低，易于动
态观察肿瘤的生长状态 。
移植瘤形成及动物模型建立受诸多因素影响，
如实验动物的种系、健康状况、性别、育龄、细胞培养
的条件、细胞的制备情况、细胞的数量及活力、接种
的方法及部位等。本研究主要考虑以下影响因素：
①鼠龄：一般宜选择２—３周龄的裸鼠进行实验 ，
鼠龄过大，裸鼠体内产生较多的ＮＫ细胞，影响肿瘤
的移植成功率；②接种瘤细胞量：接种量过少，移植
瘤不易成活；接种量过大，引起肿瘤的失控生长，对
将来的实验干预带来负面影响；③裸鼠的营养状况：
在本实验开始时仅用高压灭菌饲料喂养，裸鼠体重
及肿瘤均生长缓慢；加喂灭菌葵花子和熟鸡蛋后，裸
鼠体重及肿瘤生长均明显改观。
肿瘤移植的部位文献报道不同，皮下接种操作
简单，肿瘤表浅，便于观察，潜伏期短，肿瘤生长速度
较快，本研究第一批１０只裸鼠接种细胞后３周，多
数裸鼠可见类圆形的肿物生成，４周时成瘤率为
７０％，５周时成瘤率为８０％，有两只裸鼠未长出肿 瘤。之所以没有达到文献报道的１００％移植成功
率，可能与肿瘤细胞接种数量偏差及裸鼠免疫活性
的个体差异有关。之后改用体内和体外交替传代的
方法，取第一批裸鼠皮下移植瘤细胞悬液接种于第
二批裸鼠皮下，成瘤率即达９６％。
细胞皮下接种时，由于裸鼠皮肤组织较为松弛，
细胞悬液流动性强，一般需要３０ ｄ左右才能观察到
肿瘤的生长，而且肿瘤的形状很不规则，不利于对瘤
体积测量和计算，影响结果分析。因此本研究参考
文献方法 Ｊ，把细胞重悬于基质胶中。基质胶是一
种细胞外基质复合物凝胶，其成分和哺乳动物的细
胞基底膜类似 Ｊ，具有促进细胞增殖、细胞分化、胶
原分泌、血管生成、组织成形的作用 。基质胶在
低温时（Ｏ℃～４℃）是液状，而温度高于２５℃时即可
成胶状，因此可以把细胞悬液固定在裸鼠皮下，防止
细胞悬液向周围流动，益于细胞增殖。应用基质胶
可显著提高肿瘤细胞在动物体内的致肿瘤性 。
本研究采用基质胶之后，细胞成瘤时问缩短，７ ｄ左
右即可在接种部位观察到肿瘤，且形状规则。
本研究建模方法简便，成瘤率高，瘤组织形状规
则易于测量，为较理想的模型制作方法，可为深入研
究人结肠癌提供较为理想的动物模型。
【参考文献】
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人结肠腺癌细胞SW480[SW-480]
![人结肠腺癌细胞SW480[SW-480]](https://360docs-1393072327.cos.ap-beijing.myqcloud.com/7f5233b4a58da0116c1749ee.webp)
中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/干细胞库细胞说明书
第1页/共3页人结肠腺癌细胞SW480[SW-480]说明书目录号：SCSP-5033细胞名称：SW480[SW-480]细胞描述：SW480和SW620取自同一患者，SW480是原发性结肠腺癌。CSAp和结肠抗原3阴性。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。p53基因第273位密码子的G->A突变导致Arg->His替代，309位密码子的C->T突变导致Pro->Ser替代。细胞p53蛋白表达水平升高。致癌基因c-myc,K-ras,H-ras,N-ras,myb,sis和fos的表达呈阳性。未检测到致癌基因N-myc的表达。不表达细胞溶解酶，一种与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶。有报道称该细胞表达GM-CSF。无CO2培养。物种：白人，男性，50岁组织：结肠细胞来源：2017年引进生物安全等级：BSL-1完全培养液配方：见下方备注。无CO2培养批次/冻存日期：详见冻存管/培养瓶标识参考传代比例：1:3参考传代周期：4-5天参考换液频率：每周2次冻存液配方：完全培养液95%，DMSO5%细胞形态：贴壁生长，无CO2培养支原体检测结果：阴性STR鉴定结果：D5S818:13D13S317:12D7S820:8D16S539:13vWA:16THO1:8Amelogenin:XTPOX:11CSF1PO:13,14中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/干细胞库细胞说明书
第2页/共3页SW480[SW-480]细胞照片参考文献：FoghJ,etal.AbsenceofHeLacellcontaminationin169celllinesderivedfromhumantumors.J.Natl.CancerInst.58:209-214,1977.PubMed:833871GoodfellowM,etal.Onehundredandtwenty-sevenculturedhumantumorcelllinesproducingtumorsinnudemice.J.Natl.CancerInst.59:221-226,1977.PubMed:77210034LelbovitzA,etal.Detectionandanalysisofaglucose6-phosphatedehydrogenasephenotypeBcelllinecontamination.J.Natl.CancerInst.63:635-645,1979.PubMed:288927AdachiA,etal.Productive,persistentinfectionofhumancolorectalcelllineswithhumanimmunodeficiencyvirus.J.Virol.61:209-213,1987.PubMed:3640832SchroyPC,etal.Detectionofp21rasmutationsincolorectaladenomasandcarcinomasbyenzyme-linkedimmunosorbentassay.Cancer76:201-209,1995.PubMed:8625092TrainerDL,etal.Biologicalcharacterizationandoncogeneexpressioninhumancolorectalcarcinomacelllines.Int.J.Cancer41:287-296,1988.PubMed:3338874WeissJ,etal.Mutationandexpressionofthep53geneinmalignantmelanomacelllines.Int.J.Cancer54:693-699,1993.PubMed:8514460NigroJM,etal.Mutationsinthep53geneoccurindiversehumantumourtypes.Nature342:705-707,1989.PubMed:2531845BarnettSW,etal.Characterizationofhumanimmunodeficiencyvirustype1strainsrecoveredfromthebowelofinfectedindividuals.Virology182:802-809,1991.PubMed:2024498LeibovitzA,etal.Classificationofhumancolorectaladenocarcinomacelllines.CancerRes.36:4562-4569,1976.PubMed:1000501GeiserAG,etal.Suppressionoftumorigenicityinhumancellhybridsderivedfromcelllinesexpressingdifferentactivatedrasoncogenes.CancerRes.49:1572-1577,1989.PubMed:2647289LahmH,etal.Secretionofbioactivegranulocyte-macrophagecolony-stimulatingfactorbyhumancolorectalcarcinomacells.CancerRes.54:3700-3702,1994.PubMed:8033086RodriguesNR,A87:7555-7559,1990.PubMed:1699228中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/干细胞库细胞说明书
rhuCD40L对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用
rhuCD40L对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用
【摘要】
目的：通过动物体内实验研究证实rhucd40l对人结肠癌的治疗作用，从而进一步探讨其抗肿瘤机制。
方法：将皮下接种ht-29人结肠癌细胞后建立人结肠癌模型的20只裸鼠随机分为二组，治疗组以rhucd40l作皮下注射；对照组以生理盐水作皮下注射，定期观察裸鼠的生活状况并测量其体重，治疗5周后处死裸鼠并取瘤，测量两组瘤大小及瘤重，并比较结果。
结果：20只裸鼠全部成瘤，实验过程中所有裸鼠生活状况均良好，无一裸鼠死亡；对照组与治疗组之间的瘤大小及瘤重存在差异，差异有统计学意义（p<0.05）。
结论：rhucd40l对人结肠癌有一定的治疗作用。
【关键词】cd40；cd40配体；人工合成三聚体cd40l；裸小鼠；结肠癌
the therapeutic action of rhucd40l to nude mice with person
colon cancer hypodermic transplant lump
zhu xiaochao1 zhou guangjun2 shikun2 mu
xiangming2
【abstract】purpose: to confirms the therapeutic action
of rhucd40l through the animal in vivo experimental study to
the person colon cancer , thus further discusses its
anti-tumor mechanism.methods: after hypodermic vaccinating
the ht-29 person colon cancer cell, we established the person
去甲斑蝥素对裸鼠结肠癌移植瘤血管生成的影响及其机制
第４２卷第３期第２７８页 ２Ｏ１３年６月 华中科技大学学报（医学版） Ａｃｔａ Ｍｅｄ Ｕ『ｎｉｖ Ｓｃｉ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ｖｏ１．４２ Ｎｏ．３ Ｐ．２７８ Ｊｕｎ． ２０１３
去甲斑蝥素对裸鼠结肠癌移植瘤血管生成的
影响及其机制
袁昌劲 ， 余 涛 ， 侯风刚 ， 李 丹。， 刘 礼 ， 吕秀玮 ， 任 丽
华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院中西医结合肿瘤科，武汉４３００１４ 上海中医药大学附属上海市中医医院肿瘤科，上海２０００７１ 。武汉大学人民医院药学部，武汉４３００６０
摘要：目的观察去甲斑蝥素（ＮＣＴＤ）对人结肠癌裸鼠移植瘤血管生成及瘤体血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）、内 皮细胞钙黏蛋白（ＶＥ—Ｃｄ）、基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ一２）表达的影响，以探讨ＮＣＴＤ影响血管生成的可能机制。方法 裸 鼠皮下移植人结肠癌细胞（ＨＣＴ１１６）瘤块建立人结肠癌皮下移植瘤模型，随机分为模型组，ＮＣＴＤ高、中、低剂量组和氟 尿嘧啶（５－Ｆｕ）组。分别腹腔注射生理盐水、ＮＣＴＤ ８、５、２ ｍｇ／ｋｇ和５一ＦＵ ２０ ｍｇ／ｋｇ，每周２次，连续给药３周。给药结束 后剥取瘤体并称重，常规石蜡包埋、制片，采用免疫组化法分析瘤体内微血管密度（ＭＶＤ）以及ＶＥＧＦ、ＶＥ—Ｃｄ、ＭＭＰ一２等 促血管生成因子的表达水平。结果与模型组相比，经ＮＣＴＤ干预的荷瘤裸鼠生长状态基本不受影响，但瘤体生长受 到抑制，瘤内微血管密度降低，ＶＥＧＦ、ＶＥ－Ｃｄ、ＭＭＰ ２蛋白表达减少，且此效应随剂量增大而增强。结论 ＮＣＴＤ在不 影响荷瘤裸鼠生长状态的前提下，对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长和瘤内微血管的形成具有抑制作用，其机制跟下调 ＶＥＧＦ、ＶＥ—Ｃｄ、ＭＭＰ一２等促血管生成因子的表达有关。 关键词：去甲斑蝥素； 结肠癌； 血管生成； 血管内皮生长因子； 内皮细胞钙黏蛋白； 基质金属蛋白酶２ 中图分类号：Ｒ７３５．３ ＤＯＩ：１０．３８７０／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－０７４１．２０１３．０３．００７
敏感性编码技术MR扩散成像在人结肠癌裸鼠异位移植瘤模型中的探讨
５８６ 放射学实践２００８年６月第２３卷第６－期Ｒａｄｉｏｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ．Ｊ ！ ０Ｊ ！ 竺
实验研究
敏感性编码技术ＭＲ扩散成像在人结肠癌裸鼠异位移植瘤模型
中的探讨 －
郑力强，谢琦，江新青，柏沙关，梁碧玲，梁志伟
【摘要】 目的：探讨在人结肠癌裸鼠异位移植瘤模型中使用敏感性编码技术磁共振扩散成像的可行性和最佳参数。
方法：裸鼠２１只，于ＳＷ４８０人结肠癌细胞株皮下种植后７～１４ ｄ行扩散加权成像（ＤＷＩ）扫描。１３只荷裸鼠使用头部相
控阵线圈扫描，作为实验组。成像参数的加速因子（ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ）取值为１、２。８只荷裸鼠使用ｃ３表面线圈进行扫描， 作为对照组。研究实验组使用敏感性编码后ＤＷＩ扫描时间、图像信噪比变化及最佳参数。比较实验组使用敏感性编码
技术后与对照组ＤＷＩ图像信噪比的差别。结果：实验组ＤＷＩ中应用敏感性编码成像缩减因子为‘２时扫描时间缩短而图
像的信噪比没差别（Ｐ≥０．０５）。ｂ值５００ ｓ／ｒａｍ 时荷裸鼠人结肠癌移植瘤具有最高信噪比为１０５．５±６１．６，ＡＤＣ值为
（１．５９８±０．３８４）×１０ ｍｎｌ ／ｓ。与对照组相比实验组ＤＷＩ图像细节显示更清晰，呼吸伪影更少，信噪比更高，时间更短。
结论：合理应用敏感性编码技术能缩短扫描时间而图像信噪比没有差别，扩散敏感系数（ｂ值）为５００ ｓ／ｒａｍ 是最优ｂ值。
使用敏感性编码技术头部相控阵线圈扫描ＤＷＩ图象质量明显优于Ｃ３表面线圈。 【关键词】结肠肿瘤；磁共振成像；扩散；动物实验
【中图分类号】Ｒ４４５．２；Ｒ７３５．２５【文献标识码】Ａ【文章编号】１０００—０３１３（２００８）０６ ０５８６—０４ ７
ＳＥＮＳＥ Ｔｅｃｈｎｉｃ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＲ Ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ－ｗｅｉｇｈｔｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ Ｎｕｄｅ Ｍｉｃｅ Ｇｒａｆｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｈｕｍａｎ Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ Ｃａｎｃｅｒ ＭＯｄ—
CA-4的结构修饰、抗肿瘤活性及丹参酮类化合物抗炎活性研究的开题报告
CA-4的结构修饰、抗肿瘤活性及丹参酮类化合物抗炎活性研究的开题报告
一、研究背景
CA-4是一种天然的、来源于木兰科的植物生物碱，具有强大的抗肿瘤活性。然而，CA-4具有极强的毒性和低生物利用度，限制了其在临床上的应用。因此，研究CA-4衍生物的结构修饰和抗肿瘤活性，是目前研究的热点和难点。
丹参酮类化合物是从丹参中提取的一类活性成分，具有广泛的药理活性，如抗炎、抗氧化、抗肿瘤等。因此，研究丹参酮类化合物的抗炎活性，对深入了解其药理作用具有重要意义。
二、研究内容
1. CA-4的结构修饰
通过对CA-4的结构进行合理的修饰，可提高其溶解度、生物利用度和抗肿瘤活性，并减少毒性。本研究将对CA-4进行化学修饰，合成一系列新的衍生物，并通过荧光光谱、质谱分析和核磁共振等手段对其结构进行表征。
2. 新化合物的抗肿瘤活性
通过体外细胞实验和体内小鼠模型，测试新合成的CA-4衍生物的抗肿瘤活性。选取多个肿瘤细胞系（如人类结肠癌细胞SW480、人肺癌细胞A549等）进行体外评价，同时建立小鼠人肺癌移植瘤模型，测试衍生物的体内抗肿瘤活性。
3. 丹参酮类化合物的抗炎活性
通过体外实验，评价丹参酮类化合物对炎症细胞系的抗炎活性。选取常用的RAW264.7和THP-1细胞系等进行细胞毒性测定和炎症因子的制备。利用ELISA、Western blot和RT-PCR等技术方法，考察丹参酮类化合物对炎症相关因子的影响。
三、研究意义
1. 为CA-4药物的开发提供新思路和新途径，为其在临床上的应用提供更为可行的方案。
2. 深入研究丹参酮类化合物的抗炎活性，有助于揭示其药理机制，并为开发新的抗炎药物提供理论依据。
3. 通过研究新合成的CA-4衍生物，获得对其结构与活性之间的相互关系的深入认识，并为药物的设计和优化提供参考。
四、研究方法
1. 实验室合成CA-4新衍生物，采用荧光光谱、质谱分析和核磁共振等手段对其结构进行表征。
塞来昔布对人结肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制
塞来昔布对人结肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制
赵士彭;赵发;许明月;张啸尘;蔡建辉
【期刊名称】《第三军医大学学报》
【年(卷),期】2008(30)14
【摘 要】目的研究不同剂量环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对人结肠癌裸鼠移植瘤生长的影响及机制。方法将人结肠癌HT-29细胞注射于裸鼠背部皮下建立移植瘤模型,16d后,将裸鼠以随机数字表法分为5组:对照组、塞来昔布1组(25mg.kg-1.d-1)、塞来昔布2组(50mg.kg-1.d-1)、塞来昔布3组(75mg.kg-1.d-1)、塞来昔布4组(100mg.kg-1.d-1),并给予相应剂量的塞来昔布。每周测量肿瘤体积,给药35d后,处死裸鼠,切取移植瘤组织检测COX-2,survivin表达,VEGF
mRNA表达和微血管密度(MVD)。结果塞来昔布1、2、3、4组的抑瘤率分别为34.94%、39.20%、53.50%、59.20%,与对照组比较移植瘤体积明显缩小(P<0.05)。与对照组比较,塞来昔布各组COX-2、survivin的表达水平均明显降低(P<0.05),并且抑制程度呈药物剂量依赖性。低剂量(25mg·kg-1·d-1)塞来昔布可明显抑制VEGF mRNA表达和结肠癌移植瘤微血管生成(P<0.05,vs对照组),其抑制作用并未随用药剂量的增加而增强。结论不同剂量的塞来昔布均能明显抑制结肠癌移植瘤的生长,其抑制作用呈用药剂量依赖性,这种作用可能是通过抑制sur-vivin的表达实现的。低剂量塞来昔布可抑制人结肠癌裸鼠移植瘤微血管生成,可能对防止肿瘤转移起到重要作用。
【总页数】4页(P1338-1341)
【关键词】结肠癌;微血管生成;环氧化酶-2抑制剂;survivin 【作 者】赵士彭;赵发;许明月;张啸尘;蔡建辉
【作者单位】河北医科大学:第三医院肛肠外科,河北省大肠肛门病研究中心,石家庄050051;河北医科大学:第二医院胃肠外科,石家庄050000
人胃癌组织块裸鼠胃癌原位移植模型的建立实验具体方法及步骤
人胃癌组织块裸鼠胃癌原位移植模型的建立实验具体方法及步骤
一、实验材料准备
BALB /C nu /nu裸鼠12只，雌雄兼用， 4～6周龄，体质量18～20 g，SPF级条件下饲养。传代于裸鼠皮下的SGC-7901人胃癌细胞株。
二、裸鼠皮下移植瘤的建立和传代
1. 收集体外培养的SGC-7901细胞，使细胞含量为5 x107 /ml，制成细胞悬液然后取0.
2 ml注入裸鼠颈背部皮下。
2. 当皮下移植瘤长至直径为1 cm左右时无菌操作取出移植瘤，去除坏死组织，漂洗后，将瘤组织切成约1～2 mm的小块，研磨过滤制备成单细胞悬液局部注入另一只裸鼠颈背部皮下，如此成瘤后鼠间反复传5代。
三、原位移植模型的建立
1. 将第5代致瘤的裸鼠脱颈处死后无菌操作取出第5代皮下移植瘤，剔除纤维包膜和坏死组织，选取生长良好呈淡红色鱼肉状的瘤组织用眼科剪切成1 mmx1 mm x2 mm的小块，浸泡于已配好的纤维蛋白原溶液中置于冰袋上备用。
2. 实验裸鼠术前禁食，以1 ml氯胺酮( 5 g/ml)腹腔注射麻醉后，固定四肢并进行常规皮
肤消毒，选腹左侧正中切开皮肤1. 5 cm，逐步进腹，显露胃壁后将胃拉出，在胃大弯处近胃窦旁用1 ml无菌空针头划破胃壁浆肌层，植入3～4块瘤组织块，并在瘤表面滴上约10 μl凝血酶，使其覆盖瘤组织表面，约10 s左右待凝血酶与纤维蛋白原发生反应形成胶状物后，瘤组织块黏合在胃壁破损处，然后将胃壁口纳入腹腔。
3.
分别采用6-0缝合线缝合腹膜(含肌层) ，3-0缝合线缝合腹壁，关腹结束手术，以上操作均在超净台内进行，共建6例模型。
四、原位移植致瘤率及移植瘤侵袭和转移情况观察
1. 移植术后精心饲养，
定时观察所有裸鼠全身状况、进食情况、运动情况和腹部体征。
2. 当荷瘤鼠出现消瘦、精神萎靡及弓背等全身衰竭体征时，脱颈处死，探查腹腔中瘤体生长状况、有无腹腔积液形成及周围脏器受累情况。
人结肠癌动物皮下实体瘤模型的建立
第３３卷第２期 ２０１２年３月 中山大学学报（医学科学版） ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＳＵＮ ＹＡＴ－ＳＥＮ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＭＥＤＩＣＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥＳ） Ｖｏ１．３３ Ｍａｌ＂． Ｎｏ．２ ２０１２
・技术研究・
人结肠癌动物皮下实体瘤模型的建立
黄文革 ，陈凤英 ，郭芬芬 ，刘慰华 ，李婕 ，黄河清 （１．中山大学实验动物中心，广东广州５１００８０；２．广州医学院第二附属医院广州心血管疾病研究所，广东广州５１０２６０）
摘 要：【目的】建立临床背景清楚的结肠癌动物皮下实体瘤模型，为结肠癌发病机制及治疗策略的研究提供可靠的实 验动物模型。【方法】采用组织块直接移植法将收集到的１２例结肠癌组织临床标本移植到免疫缺陷小鼠右侧肩胛皮下，第 １－２代用ＮＯＤ—Ｓｃｉｄ小鼠；将每个病例的第２代皮下肿瘤，分别连续皮下接种至ＮＯＤ．Ｓｃｉｄ小鼠和ＢＡＬＢ／Ｃ裸小鼠两组动物 中，传代至第５代。观察每个病例在两种品系动物的成瘤时间、标本的成瘤率：进行ＨＥ染色和ＣＤＸ．２及ＣＫ２０免疫组化检 测。【结果】本实验ＮＯＤ—Ｓｃｉｄ小鼠组的第３代和第５代皮下移植瘤的病例成瘤率分别为９２％、５８％，ＢＡＬＢ／Ｃ裸小鼠组的分 别为７５％、５０％。病理切片显示肿瘤组织细胞排列成不规则腺体状，有病理性核分裂相。ＣＤＸ一２、ＣＫ２０染色呈阳性。【结论】 初步建立了临床背景清楚的人结肠癌的ＮＯＤ．Ｓｃｉｄ小鼠和ＢＡＬＢ／Ｃ裸小鼠皮下移植瘤模型，为进一步研究结肠癌发病机理 及治疗策略奠定基础。 关键词：结肠癌；ＮＯＤ．Ｓｃｉｄ小鼠；裸鼠；移植瘤模型 中图分类号：Ｒ９６５．１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２—３５５４（２０１２）０２．０２４１—０４
Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒ Ｍｉｃｅ Ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｃｏｌｏｎ Ｃａｒｃｉｎｏｍａ
ＨＵＡＮＧ Ｗｅｎ—ｇｅ ，ＣＨＥＮ Ｆｅｎｇ—ｙｉｎｇ ，ＧＵＯ Ｆｅｎ—ｆｅｎ ，ＬＩＵ Ｗｅｉ－ｈｕａ ，ＬＩ Ｊｉｅ ，ＨＵＡＮＧ Ｈｅ—ｑｉｎｇ （１．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆＳｕｎ Ｙａｔ—ｓｅｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１００８０，Ｃｈｉｎａ；２．Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｓｅｃｏｎｄ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５ １０２６０，Ｃｈｉｎａ）
人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤DcR3基因的RNA干扰及其作用
物 技 术 通 讯ｖ・２３ＥＴＴＥＲＳ ＩＮ ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ Ｏ１． Ｎ。．３，ｌＶ…ｌａｙ，ＺＵ・Ｉ—Ｚ Ｌ Ｖ ｏ・ｊ ３５７
ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００９—０００２．２０１２．０３．０１ １ 研究报告
人结肠癌ＳＷ４８０细胞裸鼠皮下移植瘤ＤｃＲ３基因的ＲＮＡ
干扰及其作用
张胜行，兰小鹏 南京军区福州总医院检验科，福建福州３５００２５
［摘要］ 目的：观察ＤｃＲ３基因小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）对人结肠癌ＳＷ４８０细胞裸鼠皮下移植瘤ＤｃＲ３基因表达的影响。 方法：建立结肠癌ＳＷ４８０细胞裸鼠皮下移植瘤模型，瘤体注射脂质体与ＤｃＲ３ ｓｉＲＮＡ混合物，转染ＤｃＲ３ ｓｉＲＮＡ，免疫 组织化学及ＲＴ—ＰＣＲ检测观察ＤｃＲ３基因的表达。结果：建立了结肠癌ＳＷ４８０细胞裸鼠皮下移植瘤模型；治疗后，治 疗组移植瘤明显减小，空白对照组、阴性对照组肿瘤体积显著大于治疗组（Ｐ＜０．０１）；各组肿瘤组织中ＤｃＲ３基因均有 不同程度的表达，治疗组表达程度明显低于阴性对照组及空白对照组（ＲＴ—ＰＣＲ Ｐ＜０．０５，免疫组化Ｐ＜Ｏ．０１）。结论： 人结肠癌ＳＷ４８０细胞在裸鼠皮下有良好的成瘤性；脂质体与ＤｃＲ３ ｓｉＲＮＡ混合物可特异性抑制结肠癌裸鼠皮下移植 瘤内ＤｃＲ３基因的表达。 ［关键词］结肠癌；ＳＷ４８０细胞；ＤｃＲ３基因；小干扰ＲＮＡ；裸鼠；脂质体 ［中图分类号］Ｑ７８９ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］ １００９—０００２（２０１２）０３—０３５７—０４
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＤｃＲ３ ｓｉＲＮＡ ｉｎ Ｎｕｄｅ Ｍｉｃｅ Ｓｕｂ－Ｓｋｉｎ Ｍｏｄｅｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ
Ｃｏｌｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ＳＷ４８０ Ｃｅｌｌｓ
ＺＨＡＮＧ Ｓｈｅｎｇ—Ｈａｎｇ，ＬＡＮ Ｘｉａｏ—Ｐｅｎｇ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｆｕｚｈｏｕ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｒｅｇｉｏｎ，Ｆｕｚｈｏｕ ３５００２５，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ，Ｅ－ｍａｉｌ：Ｌａｎｘｐ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ．ｃｎ
突变型p27基因治疗裸鼠大肠癌移植瘤的研究
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突变型p27基因治疗裸鼠大肠癌移植瘤的研究
（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）
作者：杜勇，徐少勇，杨建业，张丽[摘 要] 目的：研究外源性突变型p27(p27 mt)基因对大肠癌的体内抑制作用。方法：应用细胞移植法把人大肠癌SW480细胞接种于BALB/c裸鼠皮下，构建大肠癌裸鼠模型，将腺病毒介导的突变型p27（Ad-p27 mt）及LacZ注射到瘤体内，绘制肿瘤生长曲线，计算肿瘤生长抑制率，并进行细胞凋亡及MMP－9的相关检测。结果：Adp27 mt基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制，MMP9的表达也明显较低，与LacZ、空白对照组比较，有显著性差异（P＜0.01）。结论：Adp27 mt基因对大肠癌裸鼠的体内肿瘤有明显的抑制作用，并能抑制MMP9。
[关键词] 腺病毒；p27 mt；大肠癌；裸鼠；MMP9
Abstract:Objective To investigate the inhibitory effect of
adenovirus mediated p27mt gene tramsfer on xenograft of in
colorectal carcinoma nude mice. Methods The xenograft model of
colorectal carcinoma in nude mice was established by inoculating DOC格式论文，方便您的复制修改删减
the SW480 cells of human colorectal carcinoma. Adp27mt and
LacZ was injected into the tumors respectively. The growth curves