人白介素6酶联免疫分析试剂盒使用方法
白细胞介素-6定量方法研究进展
I n s p e c t i o n/检验检测白细胞介素-6定量方法研究进展燕茹，林婧(南京市计量监督检测院，江苏南京210049)摘要：细胞介素-6 (IL-6)是一种重要的细胞因子，在机体病理和生理活动中发挥着多种作用。
因此需要高 准确度测定丨L-6的水平。
文章综述了近年来国内外IL-6不同定量方法的研究进展，包括酶联免疫法、免疫 放射法、电化学免疫法，讨论了 IL-6不同定量方法的特点，并展望了其发展趋势。
关键词：白细胞介素-6;检测方法1弓丨言白介素6 (Interleukin-6, IL-6)是一种炎症因 子，由212个氨基酸组成的糖蛋白，健康人体内一般 小于7 pg/m L,当机体受到细菌感染时，含量急剧升 高，其含量与感染程度呈正相关。
IL-6在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与 分化及在炎症反应中起重要作用。
检测IL-6有助于 评价糖尿病、心血管病、炎症性疾病和感染性疾病等。
患者IL-6的连续监测，有助于评估炎症反应的严重 程度，脓毒症及其预后情况；日本指南推荐将IL-6 用于脓毒症辅助诊断，IL-6可以作为脓毒症的早期 预警指标。
研究发现，2019-n C o V感染的患者血清中IL-6 等炎症细胞因子显著升高。
患者血清中IL-6的含量 有助于新型冠状病毒肺炎的临床分型及预测疾病严重 程度和患者预后。
《新型冠状病毒肺炎诊疗方法（试 行第七版）》将外周血炎症因子IL-6进行性上升作 为新型冠状病毒肺炎重型、危重型临床预警指标。
IL-6作为感染性疾病的早期诊断、病情评估、疗效监控和预后判断的诊断指标。
IL-6的准确测定 具有重要意义。
为准确地测定血清中IL-6的含量，提高检测结果准确性，本文对IL-6的定量方法进行 综述。
2丨L-6定量检测方法根据IL-6的检测原理及方法的不同，对IL-6的 检测分为：免疫学方法、生物学检测方法。
2.1免疫学方法免疫分析方法的原理为利用特定抗体与抗原发生 的特异性识别和结合，对待测抗体或者抗原进行分析 测定的方法。
降钙素原与白介素—6检测结果对ICU不同病原菌感染的诊断价值
降钙素原与白介素—6检测结果对ICU不同病原菌感染的诊断价值作者：刘振江来源：《健康必读·下旬刊》2018年第11期【摘要】：目的为研究血清降钙素原（PCT）及IL-6对于监测重症监护室（ICU）内不同病原菌感染中的临床价值。
方法：选取2015年1 月至2017年10月在西山煤电职工总医院ICU 感染患者50例及正常人10例，患者于抗生素使用前及正常人均采血送血培养，鉴别其感染病原菌类别。
同时采集血液标本进行PCT与IL-6的检测。
依据检测结果分析PCT及IL-6 水平在鉴别不同病原菌感染中的诊断价值。
结果单一病菌感染时，正常人与不同病菌感染下的PCT含量比较均有差异（P0.05）；复合病菌感染下，正常人与不同病菌为主感染下的PCT与IL-6含量比较均有显著差异（P0.05）。
结论单一病菌感染时，G-菌感染者PCT 水平及阳性率较高，而G+ 菌及真菌感染者较低。
IL-6不能用于鉴别不同细菌感染，但在感染性疾病中IL-6可作为一个敏感的诊断指标。
【关键词】降钙素原；白介素一6；感染；不同病原菌；鉴别诊断【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2018）11-03--01重症监护室（intensive careunit，ICU）患者病情危重，抵抗力低下，加之多有各种留置管道，因此患者感染的发生率较高，而重症感染又是导致患者死亡的主要原因之一[1]。
早期明确感染菌种并及时给予有效药物干预有助于减少耐药现象，并改善患者预后。
血培养是目前诊断感染的金标准，但该方式阳性率较低且耗时较长。
血清降钙素原（procalcitonin，PCT）是降钙素的前体激素，正常机体中含量极低，但在细菌感染状态下其水平可显著升高，研究发现其可作为部分疾病中检测细菌感染的敏感指标之一，白介素-6（interleukin，IL-6）是多功能炎性细胞因子，是炎性介质网络的关键成份，在炎症反应中起重要作用。
牙龈癌患者血清白介素—6和白介素—8的水平改变与其临床病理特征分析
牙龈癌患者血清白介素—6和白介素—8的水平改变与其临床病理特征分析摘要目的探讨牙龈癌患者血清白介素-6和白介素-8 的水平改变与其发生及发展、浸润和发生转移的关系。
方法牙龈癌患者36例作为观察组，牙龈瘤患者30例作为良性病变组，同时选择健康体检者30例作为对照组。
检测并比较三组的白介素-8和白介素-6水平。
结果观察组白介素-6和白介素-8水平分别高于良性病变组和对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。
良性病变组白介素-6和白介素-8水平分别高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。
Ⅲ期患者的白介素-6和白介素-8水平分别高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，差异有统计学意义（P ＜0.05）。
Ⅱ期患者的白介素-6和白介素-8水平分别高于Ⅰ期患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。
转移患者的白介素-6和白介素-8水平分别高于未转移患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论白介素-6和白介素-8参与牙龈癌的发生和发展、浸润及转移过程，观察其水平改变有助于了解牙龈癌病理特征，值得借鉴。
关键词牙龈癌；白介素-6；白介素-8；病理特征在颌面部肿瘤种类中，牙龈癌较为常见。
研究认为，在肿瘤形成过程中，白介素-6和白介素-8在其中起着重要作用[1]。
在牙龈癌的病理发展过程中，上述白介素类物质是否在其中存在水平改变，以及其水平改变和牙龈癌临床病理特征是否有关系，需要进一步研究[2，3]。
本文选择本院收治的牙龈癌患者，观察白介素-6和白介素-8水平改变与其病理特征关系。
现报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料入选的36例牙龈癌患者（均经病理组织学检查证实）为本院2011年1月～2015年1月收治的患者，上述患者术前没有经过抗肿瘤等相关治疗，将其作为观察组，其中男20例，女16例，平均年龄67.5岁；TNM分期：Ⅰ期12例、Ⅱ期18例、Ⅲ期6例；观察组中肿瘤转移12例，肿瘤未转移24例。
选择同期牙龈瘤良性病变患者30例作为良性病变组，其中男19例，女11例，平均年龄41.3岁。
人白介素4IL4酶联免疫分析
人白介素4（IL-4）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T15ng/L -480ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白介素4（IL-4）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素4（IL-4）水平。
用纯化的人白介素4（IL-4）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素4（IL-4），再与HRP标记的白介素4（IL-4）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素4（IL-4）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白介素4（IL-4）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
小鼠酶联免疫检测试剂盒,小鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)酶联分析检测ELISA试剂盒使用说明书
小鼠酶联免疫检测试剂盒,小鼠粒细胞集落刺激因子（G-CSF）酶联分析检测ELISA试剂盒使用说明书国内权威的科研试剂供应商，乔羽生物专业经营进口分装和原装、国产的Elisa试剂盒，品质保证，技术严格，无效果退款退货。
Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆上海乔羽生物专业供应：使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本组织因子途径抑制物（G-CSF）含量。
试验原理：G-CSF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知G-CSF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将G-CSF和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中G-CSF的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48小鼠份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗G-CSF抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
铁调素联合白介素-6、骨髓铁染色在慢性病贫血诊断中的价值
铁调素联合白介素-6、骨髓铁染色在慢性病贫血诊断中的价值发布时间：2021-09-30T03:51:39.169Z 来源：《医师在线》2021年24期作者：钟莉华[导读] 探讨血清铁调素(Hepcidin)联合骨髓铁染色及炎性介质白介素-6（IL-6)等在慢性病贫血诊断中的价值及相关性评价。
钟莉华自贡市第三人民医院，四川自贡643000【摘要】目的探讨血清铁调素(Hepcidin)联合骨髓铁染色及炎性介质白介素-6（IL-6)等在慢性病贫血诊断中的价值及相关性评价。
方法选取我院2018年1月至2020年12月以符合“慢性病贫血专家共识”的慢性病贫血（ACD）患者以及同期因单纯血小板减少做骨髓检查的患者作为研究对象，且所选患者骨髓铁染色外铁均为阳性(+～++++），按铁粒幼细胞的比例将ACD患者分为ACD1组（铁粒幼细胞≤15%）和ACD2组（铁粒幼细胞＞15%），把单纯血小板减少做骨髓检查的非贫血患者作为对照组，采集三组患者的血样检测血清铁调素（Hepcidin）、白介素-6（IL-6）、C反应蛋白(CRP)、血清铁（SI）、铁蛋白（Fer)、转铁蛋白受体（sTfR），记录所有检测数据，并将观察指标在三组间进行比较。
结果血清铁（SI）水平在ACD1组明显低于ACD2组和对照组，差异具有统计学意义（P＜0.001），ACD2组与对照组差异不明显（P＞0.05）；sTfR水平在ACD1组明显高于ACD2组和对照组，差异具有统计学意义（P＜0.001），ACD2组与对照组差异不明显（P＞0.05）；Fer、Hepc、IL-6、CRP水平在ACD1组明显高于ACD2组和对照组，差异具在统计学意义（P＜0.001），ACD2组明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；相关性比较：血清铁调素水平与IL-6、CRP、Fer、sTfR水平呈正相关（P＜0.05），与SI呈负相关。
结论血清铁调素与患者体内铁的分布有密切的关系，是ACD患者的主要致病因素，联合其他铁代谢指标和炎性介质对ACD诊断及鉴别诊断具有重要的临床价值。
人TAA试剂盒,人肿瘤相关抗(TAA)分析检测ELISA试剂盒使用说明书
人肿瘤相关抗（TAA）分析检测ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆上海乔羽生物专业供应：使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本肿瘤相关抗（TAA）含量。
试验原理：TAA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知TAA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将TAA和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中TAA的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗TAA抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
临床检验白介素-6的临床应用
临床检验白介素-6的临床应用临床检验白介素-6的临床应用一、介绍白介素-6（Interleukin-6，IL-6）是一种细胞因子，被广泛应用于临床检验中。
本文将详细介绍白介素-6的临床应用。
二、白介素-6的生理功能1.促进炎症反应：IL-6通过调节免疫细胞的活化作用，促进炎症反应的发生和发展。
2.促进组织修复：IL-6在组织损伤后的修复过程中起重要作用，促进细胞增生和再生。
3.调节代谢：IL-6参与调节能量代谢，影响脂质代谢、糖代谢等。
4.其他作用：IL-6还与肿瘤发生、骨代谢、纤维化等过程相关。
三、临床检验中的白介素-61.临床样本采集：白介素-6的检测常用血液样本，包括全血、血清和血浆。
2.检测方法：目前常用的检测方法有酶联免疫吸附法（ELISA）、放射免疫测定法（RIA）、流式细胞术等。
3.临床应用：a.炎症性疾病的诊断和监测：IL-6水平的变化可以反映炎症反应的程度和预后。
b.免疫功能评估：IL-6水平的检测可以评估机体的免疫功能状态。
c.肿瘤相关疾病的评估：IL-6与某些肿瘤的发生、发展和预后密切相关，可以作为肿瘤相关疾病的评估指标。
d.自身免疫性疾病的诊断和监测：IL-6与自身免疫性疾病的发生和发展有关，可以用于其诊断和监测。
e.其他临床应用：IL-6在心血管疾病、神经系统疾病、肝炎等方面也有一定的应用。
四、附件本文档涉及的附件请参见附件文件。
五、法律名词及注释1.细胞因子：促进或抑制生物体内干细胞或免疫细胞的增生、分化和功能的一类蛋白质。
2.ELISA：酶联免疫吸附测定法，一种通过酶的作用来检测目标物质的方法。
3.RIA：放射免疫测定法，一种通过放射性同位素标记来检测目标物质的方法。
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人白介素6酶联免疫分析试剂盒使用方法
试剂盒的准备：
1.将试剂盒从2-8摄氏度的冰箱中取出，并让其在室温下平衡至少30分钟。
试剂盒的组分：
1. 直接固相酶联免疫试剂盒（包含96孔微孔板、检测酶标板均相成份、Diluent（稀释液）和Substrate Solution（底物溶液）等）
2.标准品（即标准曲线）
3.探针A、B及探针稀释液
4. 洗涤缓冲液（含有Tween20）
5.底物溶液停用溶液
实验步骤：
1.将所需的微孔板取下所需数量。
将其室温孵育至少30分钟，以确保板子表面的缚合剂(不活性物质)足够被样品、对照和标准物质中的IL-6和IL-6-HRP结合。
2.将微孔板的空孔标出样品编号和名字，然后使用反应盘（反应盘含5号、7号孔轻压得等刚好可以嵌入微孔板的样品编号的小孔）管以及质量吸量机等将相应的反应溶液加载至微孔板。
3.添加标准曲线各样品，包括空白对照（不加IL-6）和其他浓度的标准品，并将其标在微孔板上的空孔中。
对于每个样品，按照试剂盒说明书中所列示的方法稀释。
4.加载前，将如下的工具也相应的摆放在专用工具槽中：125/250uL 混匀，注射器4只，避光板1快板1，封盖膜1个，微孔吸头1箱，洗条2个，反应板50张，300uL延展管5只，液相稀释用盖板，稀释杯
5.用探针A和B将样品或标准物质进行稀释。
6.加载稀释后的样品。
7.将盘里的样品于37度及逆时针旋转250-300转混奖15-30秒。
8.设置试剂盘，选择确定孔数为96孔。
9.设定试验方法，记录稀释质量.
10.打开仪器的试剂因素设置模式，设定标准畸变模式.
11.如无特殊记载于用试剂液前加U为U。
实验结果的测定：
1.根据试剂盒说明书上述步骤所得结果，使用光谱分析机的波长，利用计算机软件进行结果计算。
2.对每个孔进行吸光度测定，然后利用标准品制作标准曲线，并通过比对样品吸光度值与标准曲线的结果来计算样品的IL-6含量。
注意事项：
1.手术孔一定要按照试剂盒说明书中的顺序添加试剂，不得顺序颠倒或遗漏。
2.在实验过程中严格遵守操作规程，避免污染抗体和底物。
3.每一步操作都要停顿适当的时间，以充分反应。
4.为了获得准确结果，要严格按照试剂盒说明书中所建议的洗孔过程进行洗涤。
5.试剂盒的稳定期内，尽量在同一时间内进行操作。
6.标准溶液的制备要按照说明书中的比例配制，尽量避免溶液的浓度变化对结果的影响。
总结：
人白介素6酶联免疫分析试剂盒是一种用于定量检测人体内IL-6含量的试剂盒。
通过严格按照试剂盒说明书中的步骤进行操作，可以获得准确的IL-6含量测定结果。
在操作过程中，要注意各步骤的顺序和时间控制，以及避免污染和溶液浓度变化对结果的影响。