蒽酮比色法测定可溶性糖
蒽酮比色法测定可溶性糖
一、原理：
糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛，生成的糖醛或羟甲基糖醛可与
蒽酮反应生成蓝绿色糖醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质，在可见光区的吸收峰为630nm，可在此波长下
进行比色，故可用于糖的定量。
二、材料、仪器设备及试剂
（一）材料
阴干野扁桃果实
（二）仪器设备
分光光度计、水浴锅、具塞刻度试管、移液管、容量瓶、定性滤纸等
（三）试剂
浓硫酸（比重1.84）、分析纯蔗糖、分析纯蒽酮、乙酸乙酯
蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，
在黑暗中可保存数周，用时微热溶解结晶。
三、实验步骤
（一）标准曲线
1、1%蔗糖标准液
将分析纯蔗糖在80℃下（2h）烘至恒重，精确称取1.000g，加少量水溶解，
转入100ml容量瓶中，加入0.5ml浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度。
2、100μg/L蔗糖标准液
精确吸收1%蔗糖标准液1ml转入100ml容量瓶中，加水至刻度。
3、标准曲线
取20ml刻度试管11支，从0-10分别编号，按下表加入溶液和水。
试剂 0 1、2 3、4 5、6 7、8 9、10
100μg/L蔗糖液/ml 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
蒸馏水/ml 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0
然后按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立
即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空
白作参比，在630nm波长下测其吸光度，的数据如下：
吸光度
0 0.18 0.35 0.53 0.70 0.90
蔗糖含量 0
20 40 60 80 100
标准曲线
0.00
0.10
0.20
0.30
0.40
0.50
0.60
0.70
0.80
0.90
1.00
0.0020.0040.0060.0080.00100.00120.00
蔗糖含量
吸
光
度
（二）可溶性糖的提取
1、提取
取野扁桃样品，擦净表面污物，称取果肉、果仁各5份（共10组）（详重见
下表）分别放入10支刻度试管中，加5ml蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提
取30min，提取液滤入25ml容量瓶，反复漂洗试管残渣，定容至刻度。
2、显色测定
吸取样品提取液0.5ml于20ml刻度试管中，加蒸馏水1.5ml。按顺序向试
管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸
水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm
波长下测其吸光度，结果见下表：
果仁 样品干重（g） 吸光度 果肉 样品干重（g） 吸光度
1 0.04 0.279 6 0.04 0.227
2 0.04 0.622 7 0.06 0.452
3 0.03 0.321 8 0.07 0.335
4 0.03 0.262 9 0.05 0.344
5 0.03 0.25 10 0.05 0.333
平均 0.034 0.3458 平均 0.054 0.3382
y=112.12x+0.2923
R²=0.9995
四、结果计算
从回归方程求得糖量（y） ×提取液量（5）×稀释倍数（5）
可溶性糖含量＝ 吸取样品液的体积（0.5） ×100％
样品干重（0.05）×106
实验结果：
野扁桃果仁可溶性糖含量＝5.74％
野扁桃果肉可溶性糖含量＝3.54％
新疆野扁桃果实糖酸
含量的测定
——蒽酮比色法测可溶性糖
指导老师：曾斌
实验指导老师：帕提曼
实验学生：苏瑞（063231240）
实验时间：2008年10月
蒽酮比色法快速测定葡萄糖
蒽酮比色法快速测定葡萄糖、果糖、蔗糖及可溶性总糖含量一、分析原理蒽酮试剂与碳水化合物生成一种蓝绿色物质，是糖类特有的反应。
不经分离而进行系统测定葡萄糖、果糖、蔗糖和可溶性总糖含量基于以下三点：1、室温下葡萄糖与蒽酮试剂不显色，此温度下果糖显色5分钟的吸收值与果糖在100℃下显色5分钟的吸收值几乎相等。
2、稀碱与糖溶液共热时，可以破坏葡萄糖、果糖而蔗糖不被破坏。
3、在浓硫酸的脱水作用下，蒽酮与糖类（包括多糖在内）作用。
二、仪器设备分析天平（万分之一）、分光光度计、水浴锅炉、离心机、试管三、试剂1、蒽酮试剂：0.4g蒽酮溶于100ml 88%的硫酸中（约84份体积97%的浓硫酸与16份体积水混合，密封在磨口瓶中）。
溶解后置水中冷却备用。
此液当天配制。
2、2N KOH溶液 3N HCL溶液 3N NaOH溶液3、标准糖储备液：精确称取250mg干燥的分析纯的糖（葡萄糖、果糖、蔗糖），分别移至250ml容量瓶中，溶剂可用蒸馏水。
4、标准糖工作液：用移液管吸取10ml标准糖储备液于100ml容量瓶中，用蒸馏水定容。
5、蒽酮-醋酸乙酯：1g蒽酮溶解于50ml醋酸乙酯中，可微加热（该试剂只可用一天，若储于棕色瓶中，暗中可保存数星期）四、测定步骤1、工作曲线绘制：用2ml移液管按表取标准糖工作液（葡萄糖不多于160µg,果糖不多于80µg，蔗糖不多于100µg）于干洁的试管中，用蒸馏水分别调整体积为2.00ml。
各管中分别加入蒽酮试剂6.00ml。
摇匀并立即置于沸水浴中加热5分钟，取出立即在冷水中迅速冷却并不断摇动。
用2.00ml蒸馏水重复上述操作，作为空白。
在分光光度计上以640nm波长测消光度，以消光度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准工作曲线。
馏水补充至2ml，加0.5ml蒽酮-醋酸乙酯试剂，加5ml浓硫酸，摇匀，立即放入沸水浴中保温1分钟，取出冷却后在620nm下比色，做标准曲线。
可溶性糖含量的测定蒽酮法心得体会
可溶性糖含量的测定蒽酮法心得体会在进行可溶性糖含量测定时，蒽酮法是一种常用的分析方法。
通过该方法，我们可以准确地测定样品中的可溶性糖含量。
进行样品的制备非常重要。
我们需要将样品完全溶解在适当的溶剂中，以确保蒽酮法能够准确地测定可溶性糖的含量。
避免在样品制备过程中引入任何可能干扰测定结果的物质。
蒽酮法的操作相对简单，但仍需要严格控制实验条件。
在进行分析时，我们应遵循标准操作程序，确保测定结果的准确性和可重复性。
此外，正确选择蒽酮试剂的浓度和使用适当的仪器设备也是关键。
在进行测定过程中，注意对实验环境的控制也是十分重要的。
避免有害物质的污染以及其他外界因素对实验结果的干扰，可以提高测定结果的可靠性。
对于蒽酮法测定结果的解读，我们需要结合样品的特性和实际需求进行分析。
根据测定结果，我们可以评估样品的可溶性糖含量，并据此进行后续的数据处理和实验设计。
通过蒽酮法测定可溶性糖含量是一项重要的实验技术。
在实验过程中，我们应严格控制实验条件、合理选择试剂和仪器，并对实验结果进行准确解读。
这将有助于我们更好地理解样品中的可溶性糖含量，并为后续研究提供有价值的参考数据。
蒽酮法测定可溶性糖
蒽酮法测定可溶性糖植物组织可溶性糖及淀粉测定(蒽酮法)一、材料、仪器设备及试剂1( 材料新鲜或烘干的植物叶片2( 仪器设备分光光度计、水浴锅、刻度试管、刻度吸管。
3(试剂蒽酮乙酸乙酯试剂:取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数周，如有结晶析出，可微热溶解;9.2mol/L HCIO浓硫酸(相对密度1.84);l,蔗糖标准液:将分析纯蔗糖在80?下烘至恒重，精确称取1.000g。
加少量水溶解移入100ml容量瓶中，加入0.5ml浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度;100μg蔗糖标准液:精确吸取1,蔗糖标准液1ml加入100ml容量瓶中，加水定容。
淀粉标准溶液:准确称取100mg纯淀粉，放入100ml容量瓶中，加60-70ml热蒸馏水，放入沸水浴中煮沸，冷却后加蒸馏水稀释至刻度，则每ml含淀粉1mg，吸取此液5.0ml，,g加蒸馏水稀释至50ml，却为每ml含淀粉100的标准液。
二、实验步骤1( 标准曲线的制作取20ml刻度试管11支，从0~10分别编号，按表加人溶液和水，然后按顺序向试管内加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡,，立即将试管放入沸水浴中，逐管准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白为对照，在630nm波长下测其吸光度。
比色液总体积为8ml(以糖含量为横坐标;光密度为纵坐标，绘制标准曲线，求出标准直线方程。
表管号试剂 0 1,2 3,4 5,6 7,8 9,10-1100μg?L蔗糖液/ml 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0水/ ml 2.0 1.8 12.6 1.4 1.2 1.0蔗糖量/μg 0 20 40 60 80 1002(可溶性糖的提取新鲜植物叶片或干材料，擦净表面污物，剪碎混匀，称取0.10~0.30g ,共3份，分别放入3支刻度试管中，加人5,10ml蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min(提取2次)，提取液过滤入25ml容量瓶中，反复冲洗试管及残渣，定容至20ml。
蒽酮法测定可溶性糖方法[仅供参考]
![蒽酮法测定可溶性糖方法[仅供参考]](https://360docs-1393072327.cos.ap-beijing.myqcloud.com/d594d35c7375a417876f8f16.webp)
蒽酮法测定可溶性糖方法（一) 实验原理糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区吸收峰为630 nm，故在此波长下进行比色。
（二）材料、仪器设备及设计1 材料12种源砂生槐叶片，2种处理，4个重复，共96个样。
2 仪器设备分光光度计，恒温水浴锅，20 ml刻度试管，5 ml和1 ml刻度吸管，5 ml和1 ml的移液枪，记号笔，吸水纸适量。
3 试剂（1）蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1 g，溶于50 ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数周，如有结晶析出，可微热溶解。
（2）100 ug/L蔗糖溶液：1%蔗糖标准液：精确称取蔗糖1.000 g，加入少量水溶解，移入100 ml容量瓶，加0.5 ml 浓硫酸，定容至刻度线。
100 ug/L蔗糖溶液的配制：用移液枪精确吸取1%蔗糖标准液1 ml，加入到100 ml容量瓶，加蒸馏水定容。
（3）浓硫酸（比重1.84）（三）实验步骤1．标准曲线的制作：按表1加入标准的蔗糖溶液，然后按顺序向试管中加入0.5 ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5 ml 浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管准确保温1 min取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630 nm波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。
管号试剂0 1，2 3,4 5,6 7,8 9,10100µg.1-1蔗糖0 0.2 0.4 0.6 0.8 1/ml水/ml 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 蔗糖量/µg 0 20 40 60 80 1002．取样取不同种源砂生槐幼苗，用蒸馏水冲洗干净，随后用吸水纸吸干水分。
将叶片切下，用锡箔纸包住，放入液氮中冷冻。
取完后将样品放入-80℃冰箱中保存。
蒽酮——硫酸比色法测定枇杷叶中可溶性多糖的含量
蒽酮——硫酸比色法测定枇杷叶中可溶性多糖的含量摘要：目的：建立枇杷叶中可溶性多糖的含量测定方法。
方法：采用蒽酮—硫酸比色法。
结果：显示624nm处有最大吸收峰，线性关系较好(r=0.9999)，平均回收率为99.58%(n=5，RSD=2.85%)，枇杷叶可溶性多糖的含量为8%以上。
结论：该方法快速准确、重现性好，可为枇杷叶中水溶液多糖的检测提供参考方法。
关键词：枇杷叶多糖；蒽酮—硫酸比色法；含量测定枇杷叶为蔷薇科(Rosaceae)植物枇杷(Eriobotrya japonica Thunb Lindl)的干燥叶，在我国已有2200多年的栽培历史。
目前已报道枇杷叶中熊果酸和齐墩果酸的含量测定方法，但是采用蒽酮比色法测定枇杷叶中水溶性多糖含量方法的研究报道较少[1]。
本试验探讨了枇杷叶中水溶性多糖的含量测定方法，旨在为今后产业化利用枇杷资源的含量检测提供参考。
1 材料试验用枇杷叶采自成都中医药大学峨嵋学院植物种植园，由王书林教授鉴定为蔷薇科(Rosaceae)植物枇杷(Eriobotrya japonica Thunb Lindl)的干燥叶。
1.1 试药无水葡萄糖(AR)、枇杷叶、蒽酮(AR)、硫酸(AR)、无水乙醇。
1.2 主要仪器设备UV2450紫外-可见分光光度计、R-201旋转蒸发仪、101-2A电热恒温鼓风干燥箱、W201C数控恒温水浴锅、SHB-Ⅲ循环水真空泵、2G 10-2.4A离心机。
2 方法2.1 样品溶液的制备将枇杷叶洗涤后于60℃干燥，粉碎备用。
精密称取约10g，加水150mL，在80℃回流提取3h[1]，趁热过滤，重复提取一次，合并上述滤液，离心，上清液减压浓缩至约25mL，精密吸取浓缩液10mL，加乙醇调含醇量至含乙醇量为85%，密闭置4℃冰箱中静置过夜。
回收乙醇，沉淀用水适量超声溶解，摇匀定容至50mL，精密吸取上述定容液0.5mL用水定容至100mL作为待测液。
2.2 标准液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖100.00mg，加蒸馏水100mL，配置成浓度为1mg/mL的葡萄糖标准液备用。
10实验10-可溶性总糖的测定(蒽酮法)
３、测定 吸取１ml提取液于大试管中，加入5.0ml 蒽酮试剂，用上述同样的方法。以0号管调零， 波长625nm下记录吸光度，在标准曲线上查出 葡萄糖的含量（μg）。
五、结果处理
植物样品含糖量（％）＝查表所得糖含量（μg） ×稀释倍数／样品重（g）×106×100
含糖总量一般为：2.1—20%
1、植物样品中可溶性糖的提取
将小麦研磨微碎，准确称取１克，放入10ml 离心管中，管内加入4ml80%乙醇，在80度水浴 中不断搅拌30分钟，离心（3000转、15分钟）， 收集上清液，其残渣加2ml80%乙醇重复提取2 次，合并上清液，80%乙醇定容至10ml ，过滤 后待测。
四、操作步骤
2、葡萄糖标准曲线的制作 取７支大试管，按下表数据配制一 系列不同浓度的葡萄糖溶液：
管号
葡萄糖 标准液 （ml）
80%乙 醇体积 （ml） 葡萄糖 含量 （μg）
0
0
1
0.1
20.230.440.6
5
0.8
6
1.0
1
0.9
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0
10
20
40
60
80
100
在每支试管中立即加入蒽酮试剂5.0ml， 混匀，盖上塞子，沸水浴中，准确煮沸10分钟 取出，用流水冷却，室温放置10分钟，在 625nm波长下比色。以标准葡萄糖含量作横坐 标，以吸光值作纵坐标作标准曲线。
三、仪器、试剂和材料
１、仪器 分光光度计；电子天平；三角瓶；大管；试管架；漏斗； 容量瓶；试管；水浴锅 ２、试剂 葡萄糖标准液：称取已在80℃烘箱中烘至恒重的D-葡萄 糖50 mg，用80%乙醇配制成500 mL 溶液，即得每毫升 含糖为100μg的标准液；浓硫酸； 蒽酮试剂：100 mg 经过纯化的蒽酮溶于100 mL 硫酸溶 液（76 mL 相对密度1.84的浓硫酸加24 mL水），贮藏在 棕色瓶中。 ３、材料：小麦
可溶性糖
实验15 植物组织中可溶性糖含量的测定(蒽酮法)一、目的学会植物组织中可溶性糖含量的测定方法，了解不同的植物组织可溶性糖含量的高低。
二、材料用具及仪器药品1.材料：水果或蔬菜2.仪器用具：分光光度计、天平、恒温水浴锅、研钵、三角烧瓶、烧杯、容量瓶、试管、移液管、漏斗3.药品：乙醚、草酸钠、饱和醋酸铅标准葡萄糖母液：在电子天平上称取100mg分析纯无水葡萄糖，溶于蒸馏水中，定容至500ml，则得每ml 含糖量为200ug的标准溶液。
蒽酮试剂：称取1g蒽酮结晶粉末，溶解于1000ml稀硫酸溶液中即得。
[稀硫酸溶液由760ml浓硫酸（比重1.84）稀释成1000ml而成]三、原理植物在个体发育的各个时期代谢活动都发生相应的变化，碳水化合物的代谢也不例外，其含量也随之发生变化，本实验介绍的是蒽酮比色法，糖在硫酸存在下生成糠醛，糠醛再和蒽酮作用形成蓝绿色的缩合物，其颜色的深浅代表着糖含量的高低。
H2SO4糖糠醛脱水糠醛+蒽酮蓝绿色的缩合物四、方法步骤1.标准曲线的制作。
取标准糖溶液将其稀释成一系列不同浓度的溶液各10毫升，浓度分别为每毫升含糖0、25、50、75、100、120、150、200微克。
将试管编号，依次将每管中加入1毫升上述葡萄糖标准溶液及5毫升的蒽酮试剂，震荡使之完全混合，在沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却，然后在分光光度计波长620纳米下比色，测定各溶液的光密度，以光密度为纵坐标，糖溶液浓度为横坐标，在坐标纸上绘出标准曲线。
2.测定样品的可溶性糖含量称取重量5g的新鲜植物叶子，于研钵中仔细研磨，研磨时加乙醚少许，直至为止，倒入烧杯中，用热水（70o C）洗涤研钵，洗涤液并入烧杯中，再加入蒸馏水约30～40ml。
将烧杯放在水浴锅上加热，保持温度70～80o C半小时，冷却后一滴一滴地加入饱和中性醋酸铅以除去混合液中的蛋白质，直至不再形成白色沉淀为止，然后将此混合物连同残渣一并洗水100ml容量瓶中，加水至刻度，充分摇荡，用漏斗过滤到三角烧瓶中，瓶中事先放有少量（约0.2——0.4g）的草酸钠粉末，以除去滤液中过量的醋酸铅，使生成草酸铅沉淀，再行过滤，所得透明滤液即为可溶性糖提取液。
蒽酮比色法测总糖
蒽酮比色法测总糖实验五总糖的测定——蒽酮比色法一、目的：1.掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。
2.学习植物可溶性糖的一种提取方法。
二、原理：糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后，与蒽酮(C14H10O)脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色。
该物质在620 nm处有最大吸收，在150 µg/ml范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。
这一方法有很高的灵敏度，糖含量在30 µg左右就能进行测定，所以可做为微量测糖之用。
一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。
三、仪器、试剂和材料1.仪器：电热恒温水浴锅，分光光度计，电子天平，容量瓶，刻度吸管等2.试剂：(1)葡萄糖标准液：l00 µg/ml(2)浓硫酸(3)蒽酮试剂：0.2 g蒽酮溶于100 ml浓 H2SO4中。
当日配制使用。
3.材料：甜糜秸秆四、操作步骤1.葡萄糖标准曲线的制作取7支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0m1，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖，以防蒸发。
自水浴重新煮沸起，准确煮沸l0 min取出，用冰浴冷却至室温，在620 nm波长下以第一管为空白，迅速测其余各管吸光值。
以标准葡萄糖含量（µg）为横坐标，以吸光值为纵坐标，作出标准曲线。
2.植物样品中可溶性糖的提取：将样品剪碎至2 mm以下，105 ºC烘干至恒重，精确称取1~5 g，置于50 ml三角瓶中，加沸水25 m1，加盖，超声提取10 min，冷却后过滤（抽滤），残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤（抽滤），滤液收集在50 m1容量瓶中，定容至刻度，得提取液。
3.稀释：吸取提取液2 m1，置于另一50 m1容量瓶中，以蒸馏水稀释定容，摇匀。
4.测定吸取1 ml已稀释的提取液于试管中，加入4.O ml蒽酮试剂，平行三份；空白管以等量蒸馏水取代提取液。
优化蒽酮比色法测定甜玉米中可溶性糖的含量
色法测 定甜 玉米 中可溶性 糖含 量 的反 应条件 。 结果表 明 ， 蒽酮比 色法适 宜 的测定 条件 为 ： 蒽酮 的最佳 浓度 １ ５ ｍｅ ｄ ｍＬ ． 显 色反应 温度 ８ ０℃， 加 热 时间 １ ５ ｍ ｉ ｎ 。在 此 条件 下葡 萄糖 标 准品浓度 与吸 光度之 间具 有 良好 的 线性 关 系（ ： １ ５ ． ９ ５ ４ ＋ ０ ． ０ ９ ７ ６ ， Ｒ２ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ２ ） 。采 用此优 化条 件 测定甜 玉米籽 粒 中可溶性 糖含 量． 其 测定 结果具 有 良好 的 重复性 （ Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ４ ７ ％） 和 准确度 （ 平均 回收 率 为 １ ０ １ ． ９ ２ ％） 。
保 鲜 与 加 工
保 鲜 研Leabharlann 究 Ｓｔ ｏｒ ａｇ ｅ ａ ｎｄ Ｐｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ
２ ０ １ ３， １ ３ （ ４ ） ： ２ ４ — ２ ７
优化蒽酮 比色法测定 甜玉米 中可溶性糖 的含量
李 晓 旭 ． 李 家政 。 ，
（ １ ． 天津科技大学包装与印刷学院， 天津 ３ ０ ０ ２ ２ ２ ；２ ． 国家农产品保鲜工程技术研究 中心（ 天津 ） ， 天津市农产品采后生理与贮藏保鲜重点实验室 ， 天津 ３ ０ ０ ３ ８ ４ ）
Ｌ Ｉ Ｘｉ ａ ｏ — Ｘ Ｕ ． Ｌ Ｉ Ｊ ｉ ａ — ｚ ｈ ｅ ｎ ｇ （ １ ． Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｐ ａ ｃ ｋ ａ ｇ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ Ｐ ｒ ｉ ｎ ｔ ｉ ｎ ｇ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｉ ｒ ｎ ｇ ， Ｔ ｉ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｔ ｉ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ ３ ０ ０ ２ ２ ２ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ： ２ ． Ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｃ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ Ｐ ｒ ｅ ｓ ｅ ｒ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｓ （ Ｔ ｉ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ ） ，
植物组织中可溶性糖含量的测定实验报告
植物组织中可溶性糖含量的测定实验报告植物组织中可溶性糖含量的测定实验报告10科四谭晓东20102501024一、实验目的掌握蒽酮比色法测定可溶性糖含量的提取和方法原理；掌握分光光度计中标准曲线制作的使用程序。
二、实验原理植物组织中的糖（包括还原糖和非还原糖）可以与浓硫酸反应生成糠醛，糠醛和蒽酮反应可以生成蓝绿色络合物，在625nm处有最大光吸收值。
三、实验材料大白菜叶片与叶柄四、实验步骤1. 可溶性糖的提取大白菜叶柄和叶片各0.5g鲜重，研磨+10ml 80%乙醇80度水浴30mi n过滤后定容至25ml葡萄糖浓度020*********（ug/ml）标准匍萄糖液吸00.10.20.30.40.5取量（ml）蒸馏水（ml）10.90.80.70.60.5蒽酮（ml）5混匀，沸水浴10min，冷却后在625nm下比色0.1ml提取液+0.9ml蒸馏水冷却后对照标准曲线比色五、实验结果1.葡萄糖标准曲线标准方程：y=184.6x-1.973 R=0.99402. 根据标准曲线测到，叶片的吸光度是0.249，葡萄糖浓度为43.96ug/ml，含糖量为13.82% ;叶柄的吸光度为0.276，葡萄糖浓度为49.01ug/ml，含糖量为15.41%六、分析与讨论植物体内的可溶性糖和淀粉均是光合作用产物。
可溶性糖以蔗糖为主，是植物糖类运输的主要形式，其次是葡萄糖、果糖、麦芽糖、戊糖和糖苷等。
可溶性糖在硫酸作用下生成糖醛或羟甲基糠醛化合物，糖醛或羟甲基糠醛可与蒽酮作用形成蓝绿色络合物（糖醛衍生物），在一定波长范围内，其颜色的深浅与糖含量有定量关系，在625 nm波长下的吸光值与可溶性糖含量成正比。
由于蒽酮与可溶性糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同一时间内比色。
该实验方法简便，灵敏度高，可溶性糖含量在30卩g左右就能进行测定，所以可作为测定微量可溶性糖之用。
该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量.在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值?但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差.此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。