枸杞子水提物中多糖含量的测定
酶法提取枸杞多糖的工艺研究
酶法提取枸杞多糖的工艺研究
李阳;赵春玲;王晓晓;张成军;万端极
【摘 要】研究了酶法提取枸杞多糖的工艺，探讨了酶的种类、 pH值、料液比、酶解温度、酶解时间等对多糖提取率的影响。结果表明：果胶酶的提取效果最好；果胶酶最佳工艺条件为pH值为3.5，料液比为1：45，温度为55℃，时间为2 h，此条件下枸杞多糖的提取率达7.40％。%The enzymatic hydrolysis method
was used for extraction of polysaccharide from lycium barbarum was
investigated.The effects of the kinds of enzymes , pH, solid -liquid ratio,
temperature and time on the extraction of polysaccharide were
studied.The experimental results showed that using pectinase to extract
polysaccharide could achieve the optimal effect.The optimized process
parameter was pH 3.5, solid-liquid ratio 1:45, temperature 55℃, and time 2
h.Under optimal conditions , the extraction rate was 7.40%.
【期刊名称】《广州化工》
【年(卷),期】2014(000)020
【总页数】3页(P59-60,65)
【关键词】果胶酶;枸杞多糖;提取
【作 者】李阳;赵春玲;王晓晓;张成军;万端极
【作者单位】湖北工业大学轻工学部，湖北 武汉 430068;湖北工业大学轻工学部，湖北 武汉 430068;湖北工业大学轻工学部，湖北 武汉 430068;湖北工业大学轻工学部，湖北 武汉 430068;湖北工业大学轻工学部，湖北 武汉 430068 【正文语种】中 文
酶法提取枸杞多糖工艺研究
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C
酶法提取枸杞多糖工艺研究
梁敏1邹东恢1，2郭建华1，2
（1．齐齐哈尔大学2．黑龙江省普通高校齐齐哈尔大学农产品加工重点实验室）
【摘要】本文研究了酶法提取枸杞多糖的最佳工艺条件以及枸杞中多糖的分离方法。采用木瓜蛋白酶处理，对作用温度、加酶量、最适pH值、作用时间进行正交试验。确定了酶法提取枸杞多糖的最佳工艺：加酶量0．3％，酶解反应的pH值为7．0，温度为45℃，反应时间为2h，提取率可达14．9％。【关键词】枸杞多糖；酶法提取；正交试验；工艺中图分类号：TS255．7文献标识码：A文章编号：1673-7199(2010)03-0104-03
枸杞子为茄科植物枸杞的成熟果实，是我国传统
的滋补中药材。《本草纲目》中记载枸杞子具有坚筋
骨、补精气诸不足、明目安神、令人长寿等功效。目
前人们对枸杞子多糖进行了较广泛的研究，发现枸杞
多糖具有增强机体免疫力、抗肿瘤、抗衰老、降血脂、
降血糖、抗疲劳、护肝、防辐射、抗缺氧等功效，且
无任何毒副作用，因此枸杞多糖的分离纯化及其药理
作用研究已成为一个热点课题。近年来生物酶广泛应
用于各个领域，在国内也开始将其应用于药物提取中，
枸杞多糖通常被包裹在植物细胞壁内，并且多糖往往
和蛋白质结合在一起，以蛋白多糖的形式存在。研究
表明中性蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白
质，从而将多糖释放出来而提高多糖的得率，提高了
多糖的纯度，对枸杞多糖的研究开发具有现实意义。
1试验方法与工艺过程
1．1试验原料
从市场中购得新鲜枸杞，清洗干净，去除杂质，
之后适当切块放入真空干燥箱干燥，待枸杞恒重，放
入粉碎机中粉碎，将粉碎后的枸杞粉依次通过40、60、80、100目的筛，过筛之后把各级枸杞粉分别装到清洁
干燥的烧杯中，置于真空干燥箱中待用。1．2试验试剂与仪器
木瓜蛋白酶，北京世纪时尚科贸有限公司；SephadexG－75，Pharmacia；苯酚，天津市科密欧化学
试剂开发中心；葡萄糖、活性炭，天津市凯通化学试
浸提法提取枸杞多糖工艺优选
北方药学2015年第12卷第10期·药剂与工艺·浸提法提取枸杞多糖工艺优选寿鸿飞１马天宇２苏苗３俞腾飞３＊（１．乌兰察布市中心医院乌兰察布０１２０００；２．内蒙古锡林郭勒盟医院锡林郭勒０２６０００；３．内蒙古医科大学药学院呼和浩特０１０１１０）摘要：目的：优选浸提法提取枸杞多糖的工艺条件。方法：以提取得到的枸杞多糖得率为指标，采用热水浸提法提取，先单因素后正交试验，对热水提枸杞多糖的料液比（A）、提取时间（B）、提取次数（C）三个因素进行优选组合。并采用苯酚-浓硫酸法测定枸杞多糖的含量。结果：以提取得到的枸杞多糖得率为指标，热水浸提法提取枸杞多糖的最佳工艺条件为A1B3C3：料液比为1∶15；提取时间2h；提取次数3次。结论：当大规模提取枸杞多糖时，可选用热水浸提法。关键词：枸杞多糖浸提法单因素试验正交试验中图分类号：Ｒ２８６文献标识码：Ｂ文章编号：１６７２－８３５１（２０１５）１０－００７８－０３ExtractiontoextractLBPprocessoptimizationShouHongfei1MaTianyu2SuMiao3Yutengfei3*（1.WulanchabuCentralHospital，0120002.XilinGolLeagueinInnerMongoliaHospital0260003.InnerMongoliamedicaluniversitymedicine，Hohhot010110）Abstract：ObjectiveoptimizingtechnologicalconditionsofextractiontoextractLBP;Method：toextracttheLBPrateasanindex，USESthehotwaterextraction，extractionusingorthogonaltestaftersinglefactorfirst，forthehotwaterofLBPandsolid-liquidratio（A）（B），extractiontime，extractiontimes（C）ingphenol-sulfuricacidmethodfordeterminingthecontentofLBP;Consequence：ToextracttheresultofChinesewolfberrypolysaccharidesyieldasindex，thehotwaterextractiontoextractthebestprocessconditionsforLBPA1B3C3:materialliquidratiois1∶15;Extractingtime2h;Extractiontimes3times.Conclusion：whenlarge-scaleextractLBP，hotwaterextractionisthepreferredmethod.Keywords:LBPExtractionSinglefactorexperimentOrthogonaltest枸杞（学名：Lyciumchinense）是茄科枸杞属的多分枝灌木植物，国内外均有分布，果实称枸杞子，果实中含有大量枸杞多糖，是枸杞的主要活性成分。该多糖系蛋白多糖，由木糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖6种单糖成分组成[1]，具备抗氧化、免疫调节、抗疲劳、降血糖降血脂等多重功效[2]。国内枸杞资源丰富，分布广。关于枸杞多糖的提取方法研究较多，提取枸杞多糖的方法目前有微波提取法、超声波提取法、酶法提取法、浸提法等[3]。微波提取法热效率高，升温快速均匀，大大缩短了提取时间，提高了提取效率，适合工业化生产，但微波提取法工业化具有局限性[4]。超声波提取枸杞多糖，相比浸提法，枸杞多糖提取得率略高，更省时，更节能，提取效率更高，但超声波提取需要购进特殊设备，一次性投资较大[5]。酶法提取法与浸提法提取枸杞多糖比较，多糖的得率要高3.1%，具有快速、高效、反应时间温和、反应过程明确易控制的优点。但是酶法提取多糖需要消耗大量的酶，提取成本较高[6]。因此，若考虑大规模生产枸杞多糖，选择浸提法提取[7]。但是，对于浸提法中有关料液比、提取时间、提取次数的研究较少。因此，研究影响浸提法的各种因素、优化浸提法的工艺条件具有重要意义。本实验将对影响热水浸提法提取枸杞多糖的三个因素：料液比（A）、提取时间（B）、提取次数（C）进行探索，具体如下：1仪器与试药1.1仪器：电子天平（PL203型，梅特勒-托利多仪器有限公司）、电热套（SXKW型，北京永光明医疗仪器厂）、冷凝回流装置、旋转蒸发仪（RE-201D型，巩义市瑞德仪器设备有限公司）、循环水式多用真空泵（SHZ-CA型，巩义市英峪仪器厂）、鼓风式干燥箱、紫外可见分光光度计（TU-1901型，北京普析通用仪器有限公司）。1.2试药：枸杞子（产地:内蒙古巴彦淖尔盟乌拉特前旗）、葡萄糖标准品（由内蒙古食品药品检验所提供）、无水乙醇、苯酚（分析纯）、浓硫酸（分析纯）。2多糖含量测定本实验采用苯酚-浓硫酸法测定多糖含量[8]：2.1标准液的制备：精密称取葡萄糖标准品100.0mg，加适量水于烧杯中溶解，转移至100mL容量瓶中，加水至刻度摇匀配置成浓度为1mg/mL的葡萄糖标准溶液，吸取上述溶液10mL，再定容至另一个100mL容量瓶中，稀释至刻度定容，制得浓度为0.1mg/mL的葡萄糖溶液。2.2测定波长的选择：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1.0mL于具塞试管中，加蒸馏水1.0mL，每一试管中加1.0mL5%苯酚溶液，混匀迅速加5mL浓硫酸，摇匀将其置于沸水浴中加热20min，取出后置于冷水浴5min。于400～700nm波长范围内进行扫描，确定最大吸收波长。经测定最大吸收波长为490nm。2.3标准曲线的绘制：以葡萄糖标准液精密配置成浓度为0.02、0.06、0.1、0.15、0.2、0.3、0.4mg/mL的溶液各2mL，加入5%的苯酚1mL，摇匀，迅速加入浓硫酸5mL，摇匀将其置于沸水浴中加热20min，取出后置于冷水浴5min。最后于490nm波长下测吸光值。取每次提取得到的粗多糖，精密称取10.0mg复溶，溶解于烧杯中，转移至100mL容量瓶定容，按照标准溶液的测定方法测定吸光度，根据线性回归方程y=0.0044x+0.0042.r=0.999计算此100mL多糖溶液的多糖含量。再根据此次提取的总多糖质量，即可得到此次提取的多糖得率。计算公式为：多糖含量（%）=样品浓度×稀释倍数×样品体积多糖样品质量×100%枸杞多糖得率（%）=计算得枸杞多糖的质量枸杞样品质量×100%3方法与结果3.1枸杞预处理：将干燥的枸杞子轻微捣成碎粒，电子天平称取10.0g枸杞碎粒浸泡过夜[9]。3.2提取方法：电子天平称取10.0g枸杞碎粒浸泡过夜，热水浸提，过滤或离心，滤渣复提，合并滤液，弃去滤渣，浓缩滤液至含原药1g/mL，以两倍体积的80%乙醇沉淀多糖，过滤并干燥，得粗多糖提取物[10]。3.3单因素试验：选用影响热水浸提法提取枸杞多糖的三个因素：料液比（1∶10；1∶15；1∶20；1∶25；1∶30）、提取时间（1h；2h；3h；4h；5h）、提取次数（1次；2次；3次；4次）进行试验。78北方药学2015年第12卷第10期3.3.1料液比对枸杞多糖提取的影响：表1单因素-料液比图1单因素-料液比由表1与图1可见，当料液比小于1∶15时，提取得率呈上升趋势，但大于1∶15时，多糖提取率反而逐渐下降。料液比越大将加大后期旋蒸浓缩多糖溶液的难度，在旋蒸过程中无法避免对多糖的损失。综合考虑各种因素，确定料液比在1∶15时较为合适。3.3.2提取时间对枸杞多糖提取的影响：表2单因素-提取时间图2单因素-提取时间由表2和图2可以看出，随着提取时间的增加，吸光度呈降低趋势，证明长时间加热将破坏多糖大分子。使多糖浓度降低，提取时间不宜过长。3.3.3提取次数对枸杞多糖提取的影响：表3单因素-提取次数图3单因素-提取次数由表3和图3可以看出，提取次数越多，多糖的质量及其吸光度都呈下降趋势。将枸杞多次提取后的滤液合并，旋蒸浓缩难度加大，旋蒸过程中无法避免对多糖的损失。提取次数不宜过多。3.4正交试验：为了观察各因素对热水浸提法提取枸杞多糖的影响程度，并进一步优化热水浸提法提取枸杞多糖，采用三因素三水平正实验L9（33）设计，对料液比、提取时间、提取次数进行考察，因素与水平见表4，结果分析见表5。表4因素与水平表表5正交实验及结果分析3.5结果分析：由正交实验可见，极差R1最大，故因素A料液比对试验结果影响最大，其次是C和B。所以，因素对多糖含量指标影响大小的排序为A>C>B。再比较各个因素不同水平的综合平均值，比较K1、K2、K3，可见，最佳料液比为1∶15，最佳提取时间为2h，最佳提取次数为3次。4方法学考察4.1回收率试验：称取标示精制品，加水溶解，按样品含量测定步骤进行，测定含量，结果见表6。表6测定方法回收率4.2精密度实验：精密吸取一定量对照品溶液，按“2.3”项下方法测定吸光度，连续测定6次，RSD=1.681%。4.3重复性实验：精密称取同批次复方中药粉末5份各10.0mg，平行制取6份样品溶液。按“2.3”项下操作测定吸光度，并计算多糖含量，RSD=1.11%。4.4稳定性实验：精密吸取在放置0h、2h、4h、6h、8h、24h后的对照品溶液和样品溶液各1.0mL置具塞试管中，按“2.3”项下操作，测定吸光度，RSD=2.205%。5结论枸杞中的主要活性成分是枸杞多糖，具有抗氧化、免疫调节、抗疲劳、降血糖、降血脂等多重药理学作用。本实验通过单因素与正交试验，对影响枸杞多糖提取的三个因素进行比较优化。在这三个因素中，对多糖得率影响最大的因素是料液比，其次为提取次数和提取时间：料液比越大多糖得率呈现降低趋势，且加大后期旋蒸浓缩提取液的难度，增加多糖的流失；提取时间越长，枸杞多糖被高温破坏的程度越大，单位质量的多糖含量越低；提取次数的增加也影响枸杞多糖的提取得率，经热水浸提，滤渣多次复提，滤液合并后浓缩得到的多糖得率，
枸杞果实化学成分
枸杞果实化学成分
1．糖类
枸杞果实含有大量游离糖，因此枸杞子味甜。缪细泉测定了市售枸杞子果糖、蔗糖与醛糖的含量，并提出枸杞子的质量标准。齐宗韶报道宁夏枸杞子总糖含量为46.5%。 王杰测得济南产枸杞果实中总糖含量31.39%，还原糖23.1%。高向东对宁杞1号干果中各种糖类物质含量进行了系统分析，并与大麻叶枸杞干果的糖类含量进行了比较研究。
2．枸杞多糖
李力平1985年国内首次分离出枸杞粗多糖，戴寿芝药理实验发现多糖是枸杞子中促进免疫功能的有效成分，引起了国内专家对枸杞多糖研究的关注。近十多年来，在枸杞多糖含量测定、分离提取、分级纯化、组分鉴定及结构研究等方面取得一些进展。
3．蛋白质、氨基酸、超氧化物歧化酶（SOD）
不同品种、产地和等级的枸杞，其氨基酸成分及含量也不尽一致。齐宗韶国内首次报道了宁夏枸杞果实、枸杞叶和枸杞果柄化学成分的系统研究成果。枸杞的蛋白质含量占果实干重的12-20%，其中含20种基本氨基酸。孟协中从宁夏枸杞鲜果、冻干枸杞子、枸杞子中测定出18种氨基酸的含量，其中含有人体必需的8种氨基酸（如异亮氨酸、色氨酸等）。 王杰、邵玉芹对济南产枸杞子中氨基酸进行分离鉴别，测出17种氨基酸，含量均比较高。陈绥清对不同等级的宁夏枸杞、枸杞、北方枸杞果实的氨基酸含量进行测定，不同样品均含多种氨基酸，种类大体相同，含量有差异。首次发现宁夏枸杞、枸杞等果实中均含牛磺酸及γ-氨基丁酸，其中，宁夏枸杞一级品的牛磺酸含量高达果实干重的0.7%。李继成用氨基酸自动分析仪测定宁夏枸杞果实中16种氨基酸含量，脯氨酸含量高达7.60mg/g。张敏、刘玉梅分别测定新疆产宁夏枸杞鲜果、干果中18种氨基酸含量。高向东进行了宁杞1号和大麻叶枸杞鲜果、干果中氨基酸含量的比较分析。牛磺酸是婴幼儿生长发育过程中必需的氨基酸。研究表明，植物中少见的牛磺酸在枸杞中的含量却相对丰富。谢航报道用OPA-urea柱前衍生HPLC法可快速测定枸杞子中的牛磺酸。陈红军测定黑果枸杞中17中氨基酸含量。
宁夏枸杞多糖的提取分离与组成
一２４６一 江苏农业科学２０１３年第４ｌ卷第６期 苟春林，张艳，李健．宁夏构杞多糖的提取分离与组成［Ｊ］．江苏农业科学，２０１３，４１（６）：２４６—２４７ 宁夏枸杞多糖的提取分离与组成 苟春林 ，张艳 ，李健 （１．宁夏农林科学院农产品质量监测中心，宁夏银川７５０００２；２．新疆精河县质量与计量研究所，新疆精河８３３３００） 摘要：宁夏枸杞经三氯甲烷一甲醇脱脂、水提醇沉、乙醇、丙酮和乙醚洗涤干燥、双氧水脱色、Ｓａｖａｇｅ法除蛋白后可 得枸杞多糖；高效液相色谱测定枸杞多糖分子量为７３ ９５０—１３８ ０９０ ｕ；枸杞多糖中单糖分别有葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李 糖、半乳糖、木糖和甘露糖，其中含量较多的是葡萄糖、阿拉伯糖和半乳糖，其他单糖含量较低。 关键词：宁夏枸杞；枸杞多糖；分子量；单糖 中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２—１３０２（２０１３）０６－０２４６－０２ 宁夏枸杞（Ｌｙｃｉｕｍ ｂａｒｂａｒｕｍ Ｌ．）系茄科枸杞属多年生落 叶灌木 ，果实味甘，性平，有滋肾补髓、养肝明目和祛风的 作用，是传统滋补中药。近几十年来，许多学者对枸杞进行了 深入研究，发现它在调节免疫、抗衰老、抗肿瘤、降低血脂和血 糖等方面表现出广阔的应用前景，同时对枸杞子的化学成分 及其药理也进行了大量的研究，发现枸杞含有丰富的氨基酸、 无机盐、微量元素和维生素。目前枸杞质量评价指标是枸杞 多糖（ＬＢＰ）、甜菜碱、总糖的含量，其中尤以枸杞多糖为主。 枸杞中所含主要活性成分枸杞多糖具有增强免疫力，抗肿瘤、 防衰老方面的药理作用，枸杞多糖含量是反映枸杞品质的重 要指标。枸杞多糖不但能显著增强机体免疫功能，而且还具 有免疫调节作用。研究发现，ＬＢＰ能够对抗环磷酰氨对脾脏 和胸腺造成的免疫损伤 ，具有正向免疫调节作用，能增强 ＮＫ细胞杀伤活性及增加白细胞数量 ，齐春会等研究结果 表明，ＬＢＰ是枸杞中主要免疫活性成分，口服ＬＢＰ对ＬＡＣＡ小 鼠脾细胞增殖反应和抗体生成反应均具有明显的促进作 用 。结果发现枸杞中具有免疫活性的有效成分是一类结 构复杂的糖缀合物，其糖链部分可能是其发挥免疫活性的主 要活性结构 。马兴铭等在比较ＬＢＰ、灵芝多糖、茯苓多糖等 ６种多糖对免疫功能的影响时发现，ＬＢＰ加强小鼠腹腔巨噬 细胞的吞噬能力最强 。罗琼等对ＬＢＰ的量效关系进行了 研究，结果表明ＬＢＰ有其最适剂量，并非剂量越大效果越 好 ，并与ＬＢＰ粗品进行比较，各项免疫指标均有极显著差 异。临床研究还发现，ＬＢＰ对Ⅱ型糖尿病有明显的免疫调节 效应 。ＬＢＰ在预防糖尿病并发症发生中起重要作用 ，能 使四氧嘧啶糖尿病小鼠免疫功能恢复接近正常… ，对四氧嘧 啶糖尿病小鼠及正常小鼠均有降血糖作用 。这为深层次 开发利用枸杞资源及其临床应用提供了依据。 １试验材料及仪器设备 １．１试验材料 宁夏枸杞采自宁夏中宁；葡聚糖标准品（Ｓｉｇａｍ公司，购 收稿１３期：２０１２—１１—２３ 基金项目：宁夏回族自治区科技攻关项目（编号：０８２１６４０３４）。 作者简介：苟春林（１９８０一），男，陕西汉中人，硕士，助理研究员，从事 农产品质量检测及方法研究。Ｅ—ｍａｉｌ：ｇｏｕｅｈｕｎｌｉｎ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ。 于上海楚柏试验室设备有限公司）；单糖标准品（Ｓｉｇａｍ公司， 购于上海楚柏试验室设备有限公司）。 １．２仪器设备 旋转蒸发仪（ＲＥ一２０００Ａ，上海亚荣生化仪器厂提供）； 电子天平（ＰＬ２０２一Ｌ，瑞士ＭＥＬＴＬＥＲ ＴＯＬＥＤＯ公司提供）；纯 水机（美国Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司提供）；Ｗａｔｅｒｓ ｅ２６９５高效液相色谱 仪附２４２４蒸发光散射检测器（美国Ｗａｔｅｒｓ公司提供）；离子 色谱仪（ＩＣＳ一３０００，美国戴安公司提供）。 ２研究内容 ２．１粗多糖提取 宁夏枸杞干果粉碎，三氯甲烷一甲醇（２：１）回流脱脂 ８～１０ ｈ近无色，挥干溶剂以后将脱脂后的宁夏枸杞样品放 入烧杯中，分３次加１５、１２、１Ｏ倍量的蒸馏水于９０℃水浴提 取，每次２ ｈ；收集３次的滤液减压浓缩至约２００ ｍＬ，转移到 大烧杯中，加４倍量的９５％乙醇，沉淀１２ ｈ后抽滤，并依次用 无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤，干燥后便得到枸杞多糖的粗 制品。 ２．２粗多糖精制 多糖粗品加水溶解，４ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ后取上清 液，加３０％双氧水适量，４ＪＤ℃保温４～６ ｈ后，加三氯甲烷一 正丁醇（４：１，Ｓｅｖａｇ法）溶液沉淀蛋白，取上清液；此步骤反 复多次，直到无白色絮状沉淀出现为止。将除完蛋白的多糖 溶液浓缩后，转移到分子排阻为８ ０００～１０ ０００ Ｄａ的透析袋 中，流水透析２４ ｈ，蒸馏水透析过夜，溶液颜色变淡，浓缩后真 空干燥得枸杞多糖精制品。 ２．３多糖相对分子量的测定 凝胶渗透色谱法（ＧＰＣ）测定多糖相对分子质量，以标准 分子量葡聚糖Ｄｅｘｔｒａｎ ２５ ０００（Ｍ＝２３ ８００ ｕ）、Ｄｅｘｔｒａｎ ５０ ０００ （Ｍ＝４８ ６００ Ｕ）、Ｄｅｘｔｒａｎ ８０ ０００（Ｍ＝８０ ９００ Ｕ）、Ｄｅｘｔｒａｎ １５０ ｏｏｏ（Ｍ＝１４７ ６００ Ｕ）、Ｄｅｘｔｒａｎ ２７０ ０００（Ｍ＝２７３ ８００ Ｕ）、 Ｄｅｘｔｒａｎ ４１０ ０００（Ｍ＝４０９ ８００ ｕ）为标准曲线，配制成浓度为 １．０ ｍｇ／ｍＬ的溶液。 高效液相色谱仪Ｗａｔｅｒｓ ｅ２６９５，蒸发光散射检测器Ｗａ－ ｔｅｒｓ ２４２４，流动相流速为０．５ ｍＬ／ｍｉｎ，色谱柱柱温为２５℃，进 样测定。检测器为蒸发光散射检测器（ＥＬＳＤ），色谱柱为Ｓｈｏ－ ｄｅｘ Ｏｈｐａｋ ＳＢ一８０３ ＨＱ（３００ ｍｍ×８ ｍｍ），流动相为高纯水，
一种枸杞多糖的提取方法
一种枸杞多糖的提取方法
引言
枸杞是一种常见的中药材，被广泛用于保健和治疗多种疾病。其中的多糖具有很高的药用价值，因此研究枸杞多糖的提取方法对于提高药用效果具有重要意义。本文介绍了一种高效的枸杞多糖提取方法。
背景
枸杞多糖是一种天然产物，含有多种生物活性成分，具有抗氧化、免疫调节和抗肿瘤等多种药理作用。因此，寻找得到高纯度的枸杞多糖的提取方法是很有必要的。
方法
材料准备
1. 新鲜的枸杞果实
2. 蒸馏水
3. 乙醇
提取步骤
1. 将新鲜的枸杞果实进行清洗，去除杂质并切碎成小片状。
2. 取适量的枸杞果实放入大容量烧杯或锅中，加入足够的蒸馏水，浸泡一段时间。
3. 将浸泡后的枸杞果实放入蒸馏器中，进行蒸馏提取。蒸馏时间和温度要根据具体实验条件进行调整。
4. 将提取得到的蒸馏液过滤，去除固体颗粒和杂质。
5. 将过滤得到的液体进行浓缩，可以选择低温浓缩或真空浓缩的方法。 6. 浓缩后的液体中加入适量的乙醇，使其浓度达到一定比例，然后进行搅拌混匀。
7. 将混匀后的液体置于冷却设备中进行冷却结晶，得到白色的结晶沉淀。
8. 用乙醇重复提取多次，直到枸杞多糖得到充分提取。
9. 最后将提取得到的枸杞多糖进行干燥，得到干燥的多糖产物。
结果与讨论
采用上述提取方法，可以得到高纯度的枸杞多糖。通过实验验证，该提取方法具有以下优点：
1. 采用蒸馏提取的方法可以有效提取多糖，得到高纯度的产物。
2. 通过乙醇重复提取，可以实现对多糖的充分提取，提高产量。
3. 采用乙醇结晶的方法可以得到高纯度的结晶产物。
此外，本文所介绍的提取方法具有操作简单、成本较低等优点。进一步的研究还可进一步优化提取方法，提高产量和纯度。
结论
综上所述，本文介绍了一种高效的枸杞多糖提取方法，该方法通过蒸馏提取和乙醇结晶的过程，能够得到高纯度的枸杞多糖。该方法具有操作简单、成本较低的优点，并为进一步研究枸杞多糖的药理作用和应用提供了坚实的基础。
枸杞多糖的药理研究进展
枸杞多糖的药理研究进展
摘要】 对枸杞多糖在枸杞子中的含量及化学成分进行了概述，并对近年来枸杞多糖的药理作用研究进行了总结和归纳，并为枸杞多糖的进一步研究及开发提供一些参考和依据。
【关键词】 枸杞多糖 提取 精制 药理 化学成分 枸杞子
枸杞系落叶灌木,果实枸杞子味甘、性平,有滋肾补髓、养肝明目和祛风的作用,是传统滋补中药.医学研究表明,枸杞含有多种营养成分和微量元素[1],其有效成分枸杞多糖(LBP, Lycium Bar2barum Polysaccharides) ，以阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖与半乳糖醛酸组成的酸性杂多糖同多肽或蛋白质构成的复合多糖为主,还含有中性杂多糖和葡聚糖同多肽或蛋白质构成的复合多糖[1]，具有广泛的药理学作用,可促进造血、降血脂、保肝及抗癌等作用[2] 。
近年来,枸杞多糖成为一个研究的热点,国内对枸杞多糖的提取分离、化学分析、药理作用及临床应用等进行了大量的研究,并形成了较广泛的研究基础. 本文就枸杞多糖近年来的药理研究进行综述,为枸杞多糖的进一步研究提供一些参考和依据。
1 枸杞多糖的药理作用
1. 1 抗衰老作用
人体衰老主要是细胞氧化所致,枸杞多糖在体外可以直接清除羟自由基并能抑制自发或由羟自由基引发的脂质过氧化反应。灌服枸杞多糖能提高D 半乳糖致衰老小鼠体内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px) 和超氧化物歧化酶(SOD) 活性,从而可以清除过量的自由基,起到延缓衰老的作用[8] 。
1. 2 降血糖和降血脂作用
徐曼艳等[9]从细胞水平研究了枸杞多糖对糖尿病的保护作用,结果表明,枸杞多糖明显增强受损胰岛细胞内SOD的活性,提高了胰岛细胞的抗氧化能力,减轻了过氧化物对细胞的损伤,降低了丙二醛生成量,表明枸杞多糖对四氧嘧啶损伤的离体大鼠胰岛细胞有一定的保护作用。
水浸提黑果枸杞果实多糖的前处理研究
第２７卷第３期
２００８年９月 《新疆师范大学学报》（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｅｄｉｔｉｏｎ） ７３
Ｖｏ１．２７．ＮＯ．３ Ｓｅｐ．２００８
水浸提黑果枸杞果实多糖的前处理研究
汪建红， 陈晓琴， 张蔚佼
（新疆师范大学生命与环境科学学院，新疆乌鲁木齐８３００５４） －
摘 要：文章研究了水浸提黑果枸杞果实多糖的前处理条件，即温度、固液配比和时间对低分子糖去除效果的影响，确定
了８Ｏ 乙醇前处理除去低分子糖的实验条件：提取温度为７０＂Ｃ，固液配比为１：８，提取时间为４０ｍｉｎ。
关键 司：黑果枸杞；水浸提；多糖；前处理
中图分类号： Ｒ１５１．３ 文献标识码： Ａ 文章编号： １００８—９６５９（２００８）０３—００７３—０４
黑果枸杞（ ｃｉｕｍ Ｒｕｔｈｅｎｉｃｕｍ Ｍｕｒｒ．）藏药称为“旁玛”，为茄科（Ｓｏｌａｎｃｅａｅ）、茄族（Ｓｏｌａｎｃｅａｅ Ｒｅｉｈｂ）、枸杞亚族
（Ｌｙｃｉｉｎａｅ ｗｅｔｔｓｔ）枸杞属（Ｌｙｃｉｕｍ Ｌ．）。多年生灌木，具棘刺，浆果球形，成熟后为紫黑色，有很高的光合效率和较强抗逆性，是 我国西北特有的抗盐抗旱野生植物种［】 ］。分布于新疆、西藏、青海、甘肃、宁夏、陕西北部，中亚、高加索和欧洲亦有［ ］。黑果
枸杞味甜多汁，含丰富的维生素、有机酸及糖类，民间常生食或榨汁做饮料；黑果枸杞也具有一定的医疗保健功能，其味甘、性
平、清心热，藏医用于治疗心热病、心脏病、月经不调、停经等病症，并且药效显著，被收载于《四部医典》、《晶珠本革》等藏医药 经典著作中ｌ５ ；《维吾尔药志》记载，维吾尔族医生常用黑果枸杞果实及根皮治疗尿道结石、月经不调、癣疥、齿龈出血等病症，
民间用作滋补强壮、明目及降压药 ］。据现代研究报道，植物多糖具有多方面的生物功效，如抗肿瘤、抗病毒、抗凝血及抗氧
枸杞多糖提取条件初探
・３４・ 陕西农业科学
枸杞多糖提取条件初探
郭建宏，符虎刚
（西安职业技术学院农科校区，陕西西安７１００７７）
提要：枸杞的药用成分很多，提取物非单一成分，而是多种化学成分的混合物。所以本试验以枸杞水提 液固形物总含量（近视认为是枸杞多糖）为指标，通过改变提取料液比、提取时间、提取温度、提取次数四 个因数来探讨枸杞多糖提取率的高低与各因数的关系，同时通过正交实验，综合考虑后得出了枸杞多糖 提取的理想工艺条件：提取温度８５￣Ｃ，提取时间６０ｒａｉｎ，提取料液比１：２５，提取次数２次。 关键词：枸杞多糖；提取率；条件
枸杞为茄科落叶植物Ｌｙｃｉｕｍ ｂａｒｂａｒｕｍ Ｌ。的
干燥成熟果实，它是历史悠久、药食同源、驰名中外 的名贵中药材。它的化学成分主要包括枸杞多糖
（ＬＢＰ），甜菜碱（ｂｅｔａｉｎｅ），类胡萝卜素（ｃａｒｏｔｏｉｄｓ）， 类胡萝卜素酯，维生素Ｃ，莨菪亭（ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ），多种 氨基酸及多种微量元素。此外，枸杞中还含有玉米
黄素及玉米黄素二棕榈酸酯（ｚｅａｘａｎｔｈｉｎ ｄｉｐａｌｍｉ— ｔａｔｅ），环肽（ｃｙｃｌｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅｓ）及枸杞素Ａ—Ｄ，脑苷
脂类等。它早在《神农本草经》中就被列为上品，称
之为“久服，轻身不老，耐寒暑”；《本草纲目》中介 绍枸杞治病强身的方子达３０多条；《本经汇言》指
出：“枸杞能使气可充，血可补，阳可生，阴可长，
火可降，风湿可去，有十全之妙用。”近年来，对枸 杞的药理作用进行了深入的研究。现代医学认为，
枸杞含有的多糖具有调节和增强人体非特异性免
疫的功能，可参与提高机体的免疫功能，增强抗病
能力，从而达到抗衰老、抗癌、抗辐射、抗肝炎以及 抗艾滋病等作用，并能增强网状内皮系统的吞噬 能力。
枸杞是一种传统的具有抗疲劳，保护视力，提
高免疫力，降血脂等多种保健功能的药食同源的中 药材，安全无毒副作用，并且廉价易得，提取方法简
便，所以用作提取药用物质的原材料是理想的选
两种不同方法提取枸杞多糖的比较研究
Ｊｏｕｒｎａｌ Ｄ，Ａｎｓｈａｎ Ｎｏｒｍａｌ Ｃ 如Ｐ 鞍山师范学院学报 ２０１０・０８．１２（４）：３９—４３
两种不同方法提取枸杞多糖的比较研究
王月因，辛广，翁 霞
（鞍山师范学院化学系，辽宁鞍山１１４００７）
摘要：以枸杞多糖为研究对象，比较两种不同提取方法对枸杞多糖的提取效果，采用单因素和正交试验 对枸杞多糖提取工艺（热水法和微波法）进行了初步探讨，比较了料液比、浸提温度、提取时间、提取次数 等因素对多糖提取率的影响．结果表明：传统热水法提取的最佳条件为提取温度９ｏ℃，提取时间３．５ ｈ，料 液比１：１０（ｍＬ／ｇ），提取次数３次；微波提取的最佳条件为微波功率４８０ Ｗ，微波时间２０ ｍｉｎ，料液 比１：３０（ｍＬ／ｇ），提取次数２次．通过两种方法的比较，微波法提取多糖提取率提高近４０％，微波法提取枸 杞多糖优于热水浸提法． 关键词：枸杞；多糖；微波提取；热水浸提；比较 中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章篇号：１００８－２４４１（２ｏｌｏ）０４－００３９－０５
枸杞为茄科植物的干燥成熟果实，具有多种药理作用和生物功能．它的化学成分主要包括枸杞多糖 （Ｌｙｃｉｕｍ ｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＢＰ）、胡萝卜素、ＶＢ族、ＶＣ和微量元素钙、磷、铁等多种活性成 分［１］．大量实验表明，枸杞多糖（ＬＢＰ）是其主要的保健功能因子，具有调节免疫功能，降血糖、抗疲劳、 抗衰老等作用ｌ ２１．枸杞多糖不仅具有良好的保健功能，而且在食用安全方面也是许多保健品无法比
拟的． 传统枸杞多糖的提取方法包括：传统热水法、超声波法、微波法、酶法、碱法等提取方法．传统的枸杞
多糖提取工艺复杂，浸提剂用量大，收率低，成本高；利用微波射线穿透性极好，在接近环境温度下抽提 所需的有效成分，对热敏性成分的浸提极为有效【３１．本试验将微波技术应用于枸杞多糖的提取，并与传
统的热水提取工艺进行了对比研究，建立经济的枸杞多糖提取工艺，为后续多糖保健产品的研制开发奠 定了基础．