手性高效液相色谱法
反相高效液相色谱法测定选荞1号中的手性肌醇
反相高效液相色谱法测定选荞1号中的手性肌醇
引言
手性肌醇（myo-inositol）是一种重要的生物活性物质，广泛存在于各种生物体内，并且具有很多生物学活性，比如参与糖代谢和神经传导等过程。手性肌醇的不对称合成和制备是目前研究和开发手性药物和化学品的热点领域之一。
反相高效液相色谱法（RP-HPLC）由于其快速，灵敏和准确的性能，已经成为手性分析领域中最常用的技术之一。本文旨在介绍利用RP-HPLC方法对选荞1号中的手性肌醇进行分离和检测的研究。
实验部分
实验仪器和试剂
• RP-HPLC仪器：Waters e2695 HPLC系统
• 色谱柱：Waters XSelect HSS T3 C18 (4.6×150 mm, 5 μm)
• 手性肌醇标准品：Sigma-Aldrich
• 乙腈
• 磷酸盐缓冲液（pH 2.5）
样品制备
将选荞1号植物茎叶样品加入2 mL离心管中，加入200 μL乙腈，超声处理10分钟，过滤后，取滤液进行分析。
标准曲线
将手性肌醇标准品10 mg/L加入磷酸盐缓冲液中，用乙腈稀释获得不同浓度的标准溶液，分别注入色谱柱中进行分析。根据峰面积-浓度的线性关系，建立手性肌醇标准曲线。
手性肌醇的分离和检测
使用RP-HPLC对样品中的手性肌醇进行分离和检测。采用磷酸盐缓冲液和乙腈为流动相，在流动相的pH值为2.5时，在色谱柱上分离出手性肌醇的两个对映异构体。分离出的手性肌醇峰进行峰面积积分，根据标准曲线计算样品中手性肌醇的浓度。 结果与讨论
通过RP-HPLC，成功分离了选荞1号样品中的手性肌醇异构体。手性肌醇峰面积随浓度的增加呈现出良好的线性关系，建立了手性肌醇的标准曲线，浓度范围为0.01-10 mg/L，R2=0.99993。
选荞1号茎叶中含有手性肌醇，其对映异构体峰分别出现在9.1和10.5分钟处。通过比较对应的标准品的峰面积，计算样品中手性肌醇的浓度为2.3 mg/L。
高效液相色谱技术在药物分析中的应用
高效液相色谱技术在药物分析中的应用
导语：
药物分析是药学领域中的重要分支，它涉及到药物的质量控制、研究与开发等方面。而高效液相色谱技术（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）由于其高灵敏度、高分辨率、高选择性和广泛适用性等特点，在药物分析领域得到了广泛的应用。
一、HPLC技术原理
HPLC技术是一种液相色谱分离方法，其原理是将待测样品通过一定方式注入到固定相柱中，再通过流动相的作用下，样品成分在固定相上发生分离。在HPLC系统中，流动相的选择和条件的控制对于药物分析具有重要的意义。
二、药物分析中常用的HPLC技术
1. 反相色谱法
反相色谱法是药物分析中应用最广的HPLC技术之一。常用的反相色谱固定相包括C18、C8、C4等。反相色谱法适用于疏水性药物的分析，其分离效果好，分析时间短。
2. 离子对色谱法
离子对色谱法适用于具有阴、阳离子特性的药物分析。通过加入适当的离子对试剂，可以改变流动相的离子性，使某些离子化合物在色谱柱上发生离子对形成，从而实现对药物的选择性分离。
3. 手性色谱法 手性色谱法主要用于对具有手性结构的药物进行分析。由于手性药物对于人体的作用机制存在差异，因此对药物的手性分析具有重要意义。手性色谱可通过手性固定相或手性添加剂来实现对手性化合物的选择性分离。
三、HPLC技术在药物质量控制中的应用
药物质量控制是药物研究与开发的重要环节，而HPLC技术在药物质量控制中起到了关键作用。通过HPLC技术，可以对药物的纯度、含量、残留物等进行准确测定，确保药物的质量安全。
四、HPLC技术在药物研究与开发中的应用
在药物研究与开发过程中，HPLC技术发挥了重要的作用。通过HPLC技术，可以对药物的代谢产物、药代动力学等进行研究，从而了解药物在体内的转化和效应。此外，HPLC技术还可用于药物配方的优化和稳定性研究等方面。
五、HPLC技术在中药分析中的应用
氨基酸手性色谱分离
218 Univ. Chem. 2023, 38 (10), 218–224
收稿：2023-01-26；录用：2023-02-13；网络发表：2023-02-28 *通讯作者，Email:*******************.cn基金资助：国家重点研发计划
(2018YFC1602400) •知识介绍• doi: 10.3866/PKU.DXHX202301022
氨基酸手性色谱分离
杜瑾，石宜灵，唐安娜*，孔德明
南开大学化学学院，分析科学研究中心，天津市生物传感与分子识别重点实验室，化学国家级实验教学示范中心，
天津 300071
摘要：光学活性和立体构象不同的氨基酸，具有不同的生理活性和作用，因此，实现氨基酸的有效手性分离具有重
要意义。色谱法是常用的氨基酸手性分离方法，具有分离效率高、速度快、灵敏、成本低和绿色环保等特点，在氨
基酸手性分离和检测领域应用广泛。本文综述了色谱法在氨基酸手性分离方面的最新进展，并对其发展趋势进行了
展望。
关键词：氨基酸；手性分离；色谱法
中图分类号：G64；O6
Chiral Separation of Amino Acids by Chromatography
Jin Du, Yiling Shi, Anna Tang *, Deming Kong
Research Center for Analytical Sciences, Tianjin Key Laboratory of Biosensing and Molecular Recognition, National Demonstration Center for Experimental Chemistry Education, College of Chemistry, Nankai University, Tianjin 300071, China. Abstract: Amino acids with different optical activities and stereo-configurations have different physiological activities and effects. Therefore, it is important to achieve the chiral separation of amino acids effectively. Chromatography is a commonly used method for the chiral separation and detection of amino acids, and is characterized by high separation efficiency, high speed, sensitivity, low cost, and environmental friendliness. In this paper, we review the recent progress of chromatographic methods in the chiral separation and analysis of amino acids and provide an outlook on their development trends. Key Words: Amino acids; Chiral separation; Chromatographic methods
液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸手性对映体的含量
液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸手性对映体的含量
发布时间：2021-05-19T08:35:39.553Z 来源：《中国科技人才》2021年第8期 作者： 王利英[导读] D-对羟基苯甘氨酸，白色或类白色结晶性粉末，含量≥98.5%，比旋光度-156°-161°，主要合成B-内酰胺类半合成抗生素的侧链，用于生产阿莫西林、头孢氨苄等抗生素类药物的主要原料，国内主要生产厂家生产的D-对羟基苯甘氨酸分析方法主要是高氯酸滴定主含量（仲裁法）或高效液测检方法来决定物质的纯度，未对产品中的手性对映体具体含量进行分析，随着医药行业对产品质量的提高且对映体含量的控制直接关系到下游药品的质量和转化，为此对手性物质对映体的研究尤为重要。
河南新天地药业股份有限公司 河南许昌 461500
摘要：建立液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸中手性对映体的含量。方法：采用高效液相色谱法，在选定的工作条件下，紫外检测器，手性色谱柱CR0WNPAK CR(-)，检测波长220nm，通过色谱柱使样品中各组分分离，用面积归一化法，测得手性对映体的含量。
关键词： 液相色谱法；D-对羟基本甘氨酸；手性对映体含量
D-对羟基苯甘氨酸，白色或类白色结晶性粉末，含量≥98.5%，比旋光度-156°-161°，主要合成B-内酰胺类半合成抗生素的侧链，用于生产阿莫西林、头孢氨苄等抗生素类药物的主要原料，国内主要生产厂家生产的D-对羟基苯甘氨酸分析方法主要是高氯酸滴定主含量（仲裁法）或高效液测检方法来决定物质的纯度，未对产品中的手性对映体具体含量进行分析，随着医药行业对产品质量的提高且对映体含量的控制直接关系到下游药品的质量和转化，为此对手性物质对映体的研究尤为重要。
根据D-对羟基苯甘氨酸的生产工艺主要是化学拆分法和生物酶法，国内大多厂家采用的工艺是化学拆分法，主要反应步骤有拆分、消旋工艺，对映体的产生对产品质量存在潜在的质量影响，开发液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸中手性对映体的含量，能够快速、准确测定其限度范围，方法可靠，能够对D-对羟基苯甘氨酸的质量控制提供主要依据。
高效液相色谱手性流动相添加法拆分奥昔布宁对映体
2008年
3月
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谱
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布宁对映体
摘要
：采用C
。。固定相
，以羟丙基
巾
一环糊精为手性流动相添加剂
，建
立了奥昔布
宁对映体的高效液相色谱拆分方法
。
考察
了手性添加剂
、有机极性调节剂
、缓冲盐的种类
和浓度
以及流动相的
pH值
和流速及柱
温等
因素
对对映体分离
的影响
。在最佳分离条件下
，奥昔布宁对映体的分离度为
1
．54
，检测限为
1
．0
ng
。该方法简便
，重复性好
，比手性
固定相法更加
经济
。
关键词
：高效液相色谱
法
；奥昔布宁
；对映体
；羟丙基
口
一环糊精
；流动相添加剂
中
图分类
号
：0658文献标识码
：A文章编号
：1000
—8713(2008)02
—0259
—03栏目类别
：技术与应用
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高效液相色谱法对白酒中的L-乳酸和D-乳酸的手性分离和测定
高效液相色谱法对白酒中的L-乳酸和D-乳酸的手性分离和测定
江锋; 赵振宇; 聂叶; 李清亮; 刘松; 王和玉
【期刊名称】《《酿酒科技》》
【年(卷),期】2019(000)009
【总页数】5页(P93-97)
【关键词】L-乳酸; D-乳酸; 高效液相色谱; 手性柱; 白酒
【作 者】江锋; 赵振宇; 聂叶; 李清亮; 刘松; 王和玉
【作者单位】贵州茅台酒股份有限公司 贵州 仁怀 564501
【正文语种】中 文
【中图分类】TS262.3; TS261.7
乳酸（Lactic acid）学名2-羟基丙酸，结构式为CH3CHOHCOOH，相对分子质量为90.08，由于分子内含有一个不对称碳原子，因此具有旋光异构现象[1]，可区分为L-乳酸和D-乳酸，当两者以等比例混合时，即成为内消旋的DL-乳酸。
目前，分离和测定L-乳酸与D-乳酸手性对映体的方法主要包括酶法[2]、气相色谱(GC)[3]、气质联用(GC-MS)[4]、毛细管电泳(CE)[5]、液质联用(LCMS)[6]、手性高效液相色谱法(HPLC)[7]以及柱前衍生将手性对映体改变成非手性物质再用HPLC 测定的方法[8]。不同的方法都有局限性，如酶法测定步骤多，酶易失活，测定误差大；EDTA 定钙法测量误差大，对乳酸的两种对映体无法精确定量，如果采用普通的有机酸色谱柱，是无法区分乳酸的两种对映体的。
自然界中天然的乳酸是L-乳酸，D-乳酸主要通过合成产生。D-乳酸的合成方法可以分为化学合成法、酶法和微生物发酵法。乳酸是白酒中重要的有机酸，其含量的多少对白酒的口味和后味有较大影响，国内暂无白酒中乳酸构型的文献报道。因此，建立能快速、灵敏和高效拆分检测白酒中两种乳酸对映异构体的方法非常必要。
本研究利用手性色谱柱中青霉胺与二价铜离子配位体，对乳酸的两种对映体的络合能力的不同[9]，将L-乳酸和D-乳酸进行拆分并定量，研究了该法对于乳酸标准品和酒样样品的乳酸检测重现性，还研究了在白酒中添加L-乳酸和D-乳酸标准品后的检测回收率，最后用该法检测了20 种市售白酒中的L-乳酸和D-乳酸含量。
固相萃取-高效液相色谱手性流动相添加剂法测定血浆中氧氟沙星对映体
山 豇口Ｚ压亏院学搪 ２０１２年第２２卷第１期 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｈａｎｘｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｆｏｒ Ｃｏｎｔｉｎｕｉｎｇ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ Ｖｏ１．２２ Ｎｏ．１ ２０１２
・基础医学・
固相萃取一高效液相色谱手性流动相添加剂法
测定血浆中氧氟沙星对映体
王乃毅 ．白小红 （１．山西职工医学院，山西太原０３００１２；２．山西医科大学，山西太原０３０００１）
［摘 要］ 目的：建立固相萃取一高效液相色谱法（ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｏｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）拆分及测定 血浆中氧氟沙星对映体的方法。方法：以Ｌ一异亮氨酸为配合剂，ｃｕ 为配合离子，采用ＨＰＬＣ手性流动相添加 剂法测定血中氧氟沙星对映体的含量。色谱柱为ＯＤＳ—ＢＰ柱（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｌＴｌ，５ ｍ），内标物为环丙沙星，流 动相为手性添加剂溶液（含１．３１ ｇ／Ｌ Ｌ一异亮氨酸和０．８０ ｇ／Ｌ ＣｕＳＯ４）一甲醇（８１．５：１８．５），激发波长为３３０ ｎｍ， 发射波长为５０４ ｎｍ，流速为０．８ ｍＬ／ｍｉｎ。其中，应用ｃ 固相萃取小柱萃取血浆中的氧氟沙星。结果：在经过优选 的色谱条件下，对映体可以良好分离，分离度达到１．５以上；Ｓ一（一）一与Ｒ一（＋）一氧氟沙星的线性范围均为 ０．０８～２０ ｇ／ｍＬ（ｒ分别为０．９９４ ５和０．９９４ ７），最小检测限均为４ ｎｇ／ｍＬ，平均萃取回收率分别为８９．７７％和 ８８．０７％，平均回收率分别为９７．１９％和９８．３９％，日内ＲＳＤ分别为２．９％和３．０％，日间ＲＳＤ为２．０％和２．２％。结 论：该法血样处理简单，干扰小，灵敏度高，精密度好，可以作为对血浆中左、右旋氧氟沙星分别测定的方法。 ［关键词］ 固相萃取；高效液相色谱法；手性流动相添加剂法；氧氟沙星对映体 ［中图分类号］ Ｒ９２７．２ ［文献标识码］ Ａ ［文章编号］ １６７１－０１２６（２０１２）Ｏｌ－０００１－０４
高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展
高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展
一、概述
高效液相色谱（HPLC）是一种广泛应用于药物分析的重要技术，具有快速、高效、灵敏度高和分辨率高等特点。自20世纪70年代以来，随着色谱理论和仪器技术的不断发展，HPLC已成为药物分析领域中不可或缺的工具。其利用不同物质在固定相和流动相之间的分配差异，通过高压泵将流动相推动通过装有固定相的色谱柱，实现样品中各组分的分离。随后，通过检测器对分离后的组分进行检测，从而实现对药物成分的定性和定量分析。
近年来，随着药物分析需求的不断提高，HPLC在药物分析中的应用研究也取得了显著的进展。在药物质量控制方面，HPLC可用于药物有效成分的含量测定、杂质含量的检测以及药物制剂中各组分的分离分析等。HPLC还可应用于药物代谢产物的分析，为药物研发提供重要的参考信息。
在药品检验中，HPLC的应用不仅提高了检验的准确性和效率，还有助于实现药品检验的自动化和智能化。同时，随着HPLC技术的不断发展，其在药物分析中的应用也将不断拓展和完善。本文旨在综述HPLC在药物分析中的应用研究进展，为相关领域的研究和实践提供参考和借鉴。
1. 高效液相色谱技术简介
高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种重要的色谱分析技术，广泛应用于化学、医学、工业、农学、商检和法检等多个学科领域。作为色谱法的一个重要分支，HPLC以液体为流动相，通过高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱。在柱内，各成分因与固定相发生作用的大小、强弱不同，而在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，进入检测器进行检测，实现对试样的分析。
HPLC具有“四高一广”的特点，即高压、高速、高效、高灵敏度和应用范围广。高压是因为流动相为液体，流经色谱柱时受到的阻力较大，需要高压泵来推动流动相通过色谱柱。高速则体现在分析速度快，通常一个样品的分析时间在1530分钟内完成，甚至可以在5分钟内完成，这极大地提高了分析效率。高效体现在其高分离效能上，通过选择适当的固定相和流动相，可以实现比工业精馏塔和气相色谱更高的分离效能。高灵敏度则得益于现代检测器的发展，如紫外检测器可以达到01ng的灵敏度。应用范围广是因为HPLC适用于百分之七十以上的有机化合物的分析，尤其在高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析上显示出明显优势。
高效液相色谱手性固定相法拆分阿折地平对映体
２０１０年２月 Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１０ 色 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ 语 ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ Ｖｏ１．２８ Ｎ０．２ ２１５～２１７
技朱与虚强 Ｄ０Ｉ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１ １２３．２０ｌ０．００２１５
高效液相色谱手性固定相法拆分阿折地平对映体
张 恺 ，
（１．河北医科大学药学院， 薛 娜。 ０李．．林 李 凡 ， 杜玉民
河北石家庄ｏ５０ｍ７ 河ｊ 化工医药职业技术学院，河北石家庄０５００２６）
摘要：建立了阿折地平对映体的高效液相色谱拆分方法。采用Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ—Ｈ（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５．０ ｔｘｍ，Ｄａｉ— ｃｅｌ公司）手性色谱柱在正相条件下直接拆分阿折地平对映体，考察了固定相种类、流动相组成及柱温等对阿折地 平对映体分离的影响。确定了最佳的拆分条件：流动相为正己烷一异丙醇（９０：ｌ０，ｖ／ｖ），流速为Ｏ．８ ｍＬ／ｍｉｎ，检测 波长为２５４ ｎｍ；柱温为２Ｏ℃；在此条件下阿折地平对映体的分离度为３．３。该法简单快速，重现性好。 关键词：高效液相色谱法；手性固定相；手性拆分；阿折地平 中图分类号：０６５８ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００—８７１３（２０１０）Ｏ２—０２１５—０３
Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｉｃ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｚｅｌｎｉｄｉｐｉｎｅ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ
ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｗｉｔｈ ｃｈｉｒａｌ ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ ｐｈａｓｅ
ＺＨＡＮＧ Ｋａｉ ，ＸＵＥ Ｎａ２，Ｕ Ｌｉｎｌ，ＬＩ Ｆａｎ ，ＤＵ Ｙｕｍｉｎ
（ ．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｈｅｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ ０５００１７，Ｃｈｉｎａ ２．Ｈｅｉｂｅｉ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ ０５００２６，Ｃｈｉｎａ）
柱前手性荧光衍生反相高效液相色谱法分离甲状腺素对映体
２００８年９月 Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２００８ 色 谱 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｙ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ＶＯｌ｜２６ ＮＯ．５ ５５９～５６２
摘要：以Ｒ（一）一４－Ｎ，Ⅳ＿二甲基磺酰胺一７一（３一异氰酸吡咯烷）一２，１，３－苯并氧杂咪唑（ （一）一ＤＢＤ—ＰｙＮＣＳ）为手性荧 光衍生化试剂，成功地拆分了甲状腺素对映体Ｄ，Ｌ一四碘甲状腺原氨酸（Ｔ ）和Ｌ一三碘甲状腺原氨酸（Ｔ ）。在反应 温度为４Ｏ℃、反应时间为２０ ｒａｉｎ时，Ｒ（一）一ＤＢＤ—ＰｙＮＣＳ在碱性介质中可与甲状腺素对映体生成稳定的非对映体 衍生物。该衍生物在以乙腈一水一醋酸（体积比为６０：４０：１）为流动相，流速为１．０ ｍＬ／ｍｉｎ，色谱柱为Ｉｎｔｅｒｓｉｌ￣－ＯＤＳ一 ３ ｃ 柱（１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ ｍ）的色谱条件下得到了充分的分离。采用荧光检测器在激发波长４６０ ｎｉｎ、发射波 长５５０ ｎｍ下检测。Ｄ，Ｌ－Ｔ 和Ｌ—Ｔ 分别在０．０１６～０．３０ ｇ／ Ｌ和０．００６ ７～０．２２ ｇ／ Ｌ范围内，峰面积与浓度呈 良好的线性关系（ｒ＞０．９９９）。Ｄ，Ｌ－Ｔ 和Ｌ—Ｔ 的最低检出限分别为０．０２￣ｇ／ｍＬ和０．８５￣ｇ／ｍＬ（Ｓ／Ⅳ＝３）。在Ｄ— Ｔ 、Ｌ—Ｔ 、Ｌ—Ｔ 质量浓度分别为０．１０ ｇ／ Ｌ下测得峰面积的相对标准偏差分别为３．４０％，１．６３％，３．３０％（ｎ＝７）。 该方法成功地应用于甲状腺片中Ｔ 和Ｔ 的含量测定。 关键词：高效液相色谱；荧光检测；柱前衍生化；荧光衍生化试剂；手性拆分；甲状腺素对映体 中图分类号：Ｏ６５８ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００～８７１ ３（２００８）０５—０５５９—０４ 栏目类别：研究论文
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｈｉｇｈｌｙ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｃｈｉｒａｌ ｔａｇｇｉｎｇ ｒｅａｇｅｎｔ，Ｒ（一）一４一（Ｎ，Ｎ—ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｓｕｌｆｏｎｙ１）一