分光光度法测定聚乙二醇-壳聚糖的接枝率
温敏性水凝胶开题报告
温敏性水凝胶开题报告目的：温度敏感性水凝胶是一种能够响应环境温度变化的智能高分子材料，可以随着温度的变化发生相转变，反相温敏性凝胶材料的特点是，在低温下为液态溶胶状，高温时转变成固态或者半固态的凝胶状。
一些温敏性凝胶材料的凝胶温度与人体体温相近，可作为药物载体，用于局部注射，其在生物医用中有着良好的应用前景。
本课题选用单甲氧基聚乙二醇和壳聚糖两种生物可降解的高分子材料，研究单甲氧基聚乙二醇接枝壳聚糖温度敏感性水凝胶的制备方法，对其理化性能进行了测定，并研究了该温度敏感性水凝胶的药物体外释放规律，为其作为蛋白控释载体提供了理论依据。
方法：采用我们修正的两步法：首先应用醋酸酐氧化法制备单甲氧基聚乙二醇醛，然后应用还原氢化的方法将接枝到壳聚糖主链上制备壳聚糖接枝共聚物。
应用傅立叶红外光谱仪测试样品的结构变化；应用热重分析仪测试共聚物的接枝率。
将共聚物在PBS中以1.5、2.0、2.5、3的质量浓度溶解制备成水凝胶溶液，应用流变仪测定其凝胶温度及时间。
最后，以温敏水凝胶为载体，应用牛血清白蛋白（BSA）作为模型药物，研究了该温度敏感性水凝胶的药物体外释放行为。
结果：在一定范围内，与壳聚糖的接枝率与这二者的摩尔比率呈正相关，与的摩尔比率呈负相关。
是具有温度敏感性能的亲水凝胶，该接枝共聚物溶液的凝胶温度与其质量浓度有关，在接枝率为百分之六十八、溶液浓度为百分之一点五到二点五时，该共聚物溶液在低温下是流动性的液体，温度升高至体温附近时形成固态凝胶；凝胶的温敏性能受到溶液的浓度的影响，其水溶液的质量浓度越大，则其黏度越大，凝胶强度越高，凝胶温度越低，凝胶时间越短。
水凝胶材料溶胶-凝胶的转变过程是可逆的，当把已成固态的凝胶重新放入4度冰箱时，固态凝胶又重新变成液态溶胶。
药物体外释放研究结果表明，在37度的PBS溶液中，蛋白质药物在水凝胶中的释放缓慢，但开始阶段的释放速率较大，随着时间的延长，释放量逐渐趋于恒定。
药物在溶液中的扩散及凝胶自身的降解速度是释放的限速步骤，药物从凝胶中的释放量与凝胶的降解速度成正相关；温度、的浓度也影响药物的释放速率。
聚羧酸系减水剂的分光光度测定法研究
■—530. 0 nm； ●—532. 5 nm； ▲—535. 0 nm； ▼—537. 5 nm； ★—540. 0 nm； ☆—542. 5 nm
图 2 不同波长下不同质量浓度 PC 与 吸光度的关系
表 1 PC 吸收波长与拟合方程和方差的关系
λ / nm 530. 0 532. 5 535. 0 537. 5
在 50 mL 的磨口带塞三角瓶中分别加入 1. 0 g 水泥，10 mL 一系列质量浓度的 PC 溶液，塞紧瓶塞， 于 25℃ 下恒温振荡 15 min，混合液倒入 5 mL 离心 管中，16 000 r / min 离心 15 min； 移取上层清液稀释 至 0. 001 ～ 0. 035 g / L，取 10 mL 于比色管中，加显色 剂显色一段时间后，测定 PC 浓度。
直接用于测定 PC 在水泥上的吸附等温线，获得了满意的效果。
关键词： 分光光度计； 聚羧酸系减水剂； 聚乙二醇； 吸附
中图分类号：TU528． 042． 2
文献标识码：A
文章编号：0253 － 4320（ 2011） 10 － 0089 － 03
Spectrophotometric determination of polycarboxylate superplasticizer and its application
应，这种吸收在紫外区较弱，而且在试验中发现这种 方法容易受到水泥颗粒中游离无机离子的影响，特 别在摩尔浓度较低时不容易测定其含量。
有人认为利用碘的显色效应，用紫外分光光度 计直接扫描聚氧乙烯长侧链的最大紫外吸收波长可 检测其浓度［1 － 3］，碘作为一种电子受体能与聚氧乙 烯型 非 离 子 表 面 活 性 剂 反 应 形 成 络 合 物。 Ross 等［4］和 Becher 等［5］利用碘的这一性质测定了聚氧 乙烯型非离子表面活性剂的临界胶束浓度。而 PC 主要由羧基、聚氧乙烯长侧链和线性主链组成，基于 以上原理，本实验以碘－碘化钾（ KI －I2 ） 溶液为显色 剂，扫描显色溶液体系的可见光光谱，确定其特征吸 收波长，于特征吸收波长下测定 PC 的浓度。研究 表明，此测定方法准确度比较高、检测范围大、试剂 易得、操作简单且干扰因素少，适合 PC 在复杂水泥 浆体体系中的浓度测定。
壳聚糖_活性炭纤维复合膜的制备及对甲基橙的吸附研究
经甲基橙标准浓度工作曲线转化为浓度。 ( 2) 并由吸附率 (% )公式 [ 9] 求吸附率:
X
=
C0 - C C0
∀ 100%
( 1)
由吸附量 ( m g / g) 公式 [ 10] 求吸附量:
Q = C0 - C ∀V
( 2)
M
式中 X # # # 复合膜的吸附率, % ;
Q # # # 复合膜单位质量的吸附量, m g / g;
目前, 我国的印染废水污染日益严重, 随着纺织 工业的发展, 印染废水的处理已成为人们普遍关注 的问题。治理印染废水 [ 1] 首先是通 过物理化学方
法将其进行预处理脱色, 然后通过后续生化处理, 达 到综合治理的目的。物 理化学 [ 2 ] 处 理是十分关键
的步骤, 其中应用最多的是吸附法。吸附法是一种 操作简便、可实现废水中有用资源回收利用, 对高、 低浓度废水均适用的物理化学方法, 并且处理流量 大, 出水水质较 好, 不生成 有害物质。吸附法 [ 3] 所 用的吸附剂有硅藻土、炉渣、活性炭、纤维素、树脂
第 39卷第 9期 2010年 9月
应用化工 A pplied Chem ica l Industry
V o.l 39 N o. 9 Sep. 2010
壳聚糖 /活性炭纤维复合膜的制备 及对甲基橙的吸附研究
胡思前, 邱蓓
(江汉大学 化学与环境工程学院, 湖北 武汉 430056)
摘 要: 通过化学交联法制备了纯壳聚糖膜和壳聚糖 /活性炭纤维 复合膜 (质量比 为 1 1. 1 ); 探 讨时间、pH 值、温
中图分类号: O 636. 1
文献标识码: A
文章编号: 1671- 3206( 2010) 09- 1328- 03
分光光度法测定纳滤膜对聚乙二醇的截留率
分光光度法测定纳滤膜对聚乙二醇的截留率摘要:利用分光光度法可以准确且便捷的测定不同分子量聚乙二醇(PEG)水溶液的浓度;而利用不同分子量的聚乙二醇水溶液可以检测过滤膜的分离性能。
本文在利用分光光度法测定聚乙二醇水溶液的实验基础上,初步研究了纳滤膜对不同分子量聚乙二醇的截留率。
关键词:分光光度法聚乙二醇纳滤膜截留率Determination of Nanofiltration Membrane Rejection Coefficient of Polyethylene Glycol by Spectrophotometry①Abstract:It is convenient and accurate for determination for different molecular weight polyethylene glycol(PEG) aqueous solution concentration by spectrophotometry. And we can use this method to determine the separation performance of the filter membranes. This paper research the rejection coefficient for the different molecular weight polyethylene glycol of nanofiltration membrane, which is based on the experiments for determination for polyethylene glycol aqueous solution concentration by spectrophotometry.Key words:spectrophotometry;polyethylene glycol(PEG);nanofiltration membrane;rejection coefficient材料是当代工业三大支柱之一,在名目众多的新材料中,功能膜近年来备受业界学者关注;而分离膜则是研究相对深入,应用最为广泛的功能膜。
壳聚糖提取实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习并掌握壳聚糖的提取方法。
2. 了解壳聚糖的化学性质及其在生物医学、食品工业等领域的应用。
3. 掌握实验操作技能，提高实验数据分析能力。
二、实验原理壳聚糖是一种天然多糖，存在于甲壳类动物的外壳中，如虾、蟹、龙虾等。
它由N-乙酰葡萄糖和葡萄糖单元通过1,4-糖苷键连接而成。
在提取过程中，首先将甲壳素原料进行脱乙酰化处理，使其转化为壳聚糖。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：虾壳、氢氧化钠、盐酸、无水乙醇、蒸馏水等。
2. 实验仪器：烧杯、漏斗、玻璃棒、离心机、分光光度计、电子天平等。
四、实验步骤1. 原料处理：将虾壳洗净、干燥、粉碎，过筛后备用。
2. 碱液提取：将粉碎后的虾壳加入一定浓度的氢氧化钠溶液中，加热煮沸，搅拌，使甲壳素溶解。
3. 水洗：将提取液过滤，用蒸馏水反复洗涤，去除杂质。
4. 酸沉淀：将洗涤后的溶液用盐酸调节pH值至4.5-5.5，使壳聚糖沉淀。
5. 离心分离：将沉淀物用离心机离心分离，收集壳聚糖沉淀。
6. 干燥：将壳聚糖沉淀物在60℃下干燥至恒重。
五、实验结果与分析1. 壳聚糖提取率：根据实验数据计算壳聚糖的提取率，并与文献报道值进行比较。
2. 壳聚糖纯度：采用分光光度法测定壳聚糖的纯度，并与理论值进行比较。
3. 壳聚糖分子量：采用凝胶渗透色谱法测定壳聚糖的分子量，并与文献报道值进行比较。
六、实验讨论1. 实验过程中，影响壳聚糖提取率的因素主要有：碱液浓度、提取时间、温度等。
2. 实验过程中，影响壳聚糖纯度的因素主要有：水洗次数、酸沉淀pH值等。
3. 实验过程中，影响壳聚糖分子量的因素主要有：提取方法、干燥温度等。
七、实验结论1. 本实验成功提取了壳聚糖，提取率为（根据实验数据计算）。
2. 提取的壳聚糖纯度为（根据实验数据计算）。
3. 提取的壳聚糖分子量为（根据实验数据计算）。
八、实验总结1. 本实验通过碱液提取法成功提取了壳聚糖，为后续壳聚糖的应用研究奠定了基础。
壳聚糖温敏水凝胶的质-构关系及研究进展
壳聚糖温敏水凝胶的质-构关系及研究进展孔明;程晓杰;陈西广【摘要】壳聚糖温敏水凝胶是一种非化学交联智能水凝胶，其成胶性能取决于凝胶组分，形成特定的质-构关系。
温和的制备条件和良好的生物活性，使壳聚糖水凝胶在组织工程、药物缓释，特别是细胞培养、液态栓塞剂等领域的研究应用取得了新进展。
综述了壳聚糖温敏水凝胶的分类、成胶性能、相变机制及其在生物医药领域研究和应用的新进展。
%Chitosan based thermosensitive hydrogel was a type of intelligent gel that was nonchemical-crosslinked,whose structures are closely correlated with specific ingredients.Its mildpreparation,desirable bioactivity and biocompatibility make it broadly applied in tissue engineering and drug controlled release.Nota-bly,its applications as fluid embolizing agent and cell culture matrix for ready harvest have attracted numerous attentions recently.This review intends to summarize its categorization,gelling behavior,mode of gelation and novel applications.【期刊名称】《功能材料》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】6页(P8007-8012)【关键词】壳聚糖水凝胶;质构关系;温敏可逆相变;无酶处理;液体栓塞【作者】孔明;程晓杰;陈西广【作者单位】中国海洋大学海洋生命学院，山东青岛 266003;中国海洋大学海洋生命学院，山东青岛 266003;中国海洋大学海洋生命学院，山东青岛 266003【正文语种】中文【中图分类】TB381;Q8191 引言水凝胶是由聚合物网络及其内部的液体介质所组成的分散体系［1］。
壳聚糖含量的测定研究
壳聚糖含量的测定研究
江燕
【期刊名称】《科技资讯》
【年(卷),期】2022(20)17
【摘要】壳聚糖是膳食纤维素的阳离子聚合物,是第三代机能性食品。
它是几丁质脱乙酰基的产物,是唯一的商业碱性多糖。
采用分光光度法间接测定壳聚糖含量,通过单因素试验探讨样品量、水浴时间、硫酸浓度等各种因素对壳聚糖含量测定的影响,选择测定的最优条件测得样品含量为82.89%,精密度1.21%(n=6),平均回收率为97.7%。
该方法操作简单,精密度高,回收率好,适用于壳聚糖的定量分析。
【总页数】3页(P72-74)
【作者】江燕
【作者单位】广东省城市技师学院
【正文语种】中文
【中图分类】R155
【相关文献】
1.电化学法测定壳聚糖粗制品中壳聚糖含量
2.壳聚糖中蛋白质含量测定方法的研究
3.壳聚糖抗菌纤维中壳聚糖含量测定方法研究
4.壳聚糖抗菌凝胶中银的表征及含量测定方法研究
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分光光度法测定壳聚糖含量的方法研究
分光光度法测定壳聚糖含量的方法研究
李辉;贾宏新;卢桂华
【期刊名称】《中国公共卫生》
【年(卷),期】2002(18)10
【总页数】2页(P1248-1249)
【关键词】分光光度法;测定;壳聚糖;含量
【作者】李辉;贾宏新;卢桂华
【作者单位】辽宁省疾病预防控制中心
【正文语种】中文
【中图分类】R155.5
【相关文献】
1.分光光度法测定壳聚糖含量适宜条件的研究 [J], 高贵珍;刘小阳
2.分光光度法测定肥料中壳聚糖含量 [J], 韩书霞;李德波;陈菊;于朋玲;饶飞;赵玉美
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4.统计模拟分光光度法测定复方制剂组分含量的研究───小儿复方苯巴比妥片组分含量测定新方法的制订 [J], 王玺;卢静华;周炬;朱舸;毕开顺;杜立颖;罗旭
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分光光度法测定肥料中壳聚糖的含量
分光光度法测定肥料中壳聚糖的含量1 方法原理肥料中壳聚糖经水解后生成氨基葡萄糖，与乙酰丙酮和对二甲基苯甲醛生成红色化合物，在525nm波长处用分光光度计测定。
2 试剂与材料盐酸溶液：1+1氢氧化钠溶液：200g/L碳酸钠溶液：c（1/2Na2CO3）=0.5mol/L乙酰丙酮溶液：取乙酸丙酮2.0ml，加入碳酸钠溶液至50ml，置冰箱中备用，应于使用前一日配置。
盐酸氨基葡萄糖标准溶液：ρ（盐酸氨基葡萄糖）=0.100mg /ml。
称取105℃干燥至恒重的盐酸氨基葡萄糖0.5g（准确至0.0002g），置500ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，移取10.00nl，至100ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀。
无醛乙醇对二甲基苯甲醛溶液：称取对二甲基苯甲醛0.8g，加无醛乙醇15ml及盐酸溶液15ml，摇匀。
3 仪器设备一般实验室仪器和设备分析天平分光光度计4 分析步骤4.1 试验溶液的制备称取试样1g（准确至0.0002g）于100ml容量瓶中，加入5ml盐酸溶液，加塞，摇匀，于100℃水解6h，冷却，用氢氧化钠溶液中和至中性，用水稀释至刻度，摇匀，备用4.2 求标准曲线方程式（绘制标准曲线）移取盐酸氨基葡萄糖标准溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml分别置于具塞试管中，用水稀释至5.00ml，各加入乙酰丙酮溶液1.00ml，摇匀，于100℃水浴中（1min后加盖）静置25min，取出，用冰水迅速冷却后，加入无醛乙醇3.00ml，于60℃水浴中静置10min后，再加入对二氨基苯甲醛溶液1.00ml，用力振摇后，由60℃水浴中静置1h，取出立即用冷水冷却至室温。
在波长525nm处，用1cm比色皿，以试剂空白为参比液，测其吸光值。
根据测得的数据求关于吸光值和氨基酸葡萄糖质量的标准曲线方程式（绘制标准曲线）。
4.3 试样的测定移取试验溶液（4.1）1.00ml置于具塞试管中，按4.2中“用水稀释至5.00ml”，及其后面的步骤进行。
分光光度法测定纳滤膜对聚乙二醇的截留率
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工 业 技 术
Ｓ Ｃ ｌ Ｅ Ｎ Ｃ Ｅ ＆Ｔ Ｅ Ｃ Ｈ Ｎ Ｏ Ｌ Ｏ Ｇ Ｙ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ．
皿圆
分 光 光度 法 测 定 纳 滤 膜 对 聚 乙 ＝醇 的截 留 率 ①
冯超群 杨峰 ｌ 陈天缘 ｌ 周尚寅 （ １ ． 杭州北 斗星 膜制 品有限公 司 浙 江杭 州 ３ １ ０ ０ ２ ２ ；２ ． 杭 州水处 理技 术研 究开发 中心有 限公 司 浙江杭 州 ３ １ ０ ０ １ ２ ） 摘 要： 利用分光光度 法可以准确且便 捷的 测定不 同分子量聚 乙二醇（ Ｐ Ｅ Ｇ） 水溶液 的浓度 ， 而利 用不 同分子量 的聚 乙二 醇水溶液 可以检 洲 过 滤 膜 的分 离性 能 。 本 文 在 利 用 分 光 光度 法 测 定 聚 乙 二 醇 水 溶 液 的 实 验 基 础 上 ， 初 步 研 究 了纳 滤 膜 对 不 同 分 子 量 聚 乙 二 醇 的 藏 留率 。 关键词 ： 分 光光度 法 聚 乙二醇 纳滤膜 截 留率 中图分 类 号 ： Ｔ Ｑ０ ２ ８． ８ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章编 号 ： １ ６ ７ ２ －３ ７ ９ １ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ２ （ ｃ ） 一０ ０ ８ ７ －０ ２
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【 摘 要】 目的 用 亲水性 的 聚乙 二醇 对壳 聚糖 进行 改性 。探 索 分光 光度法 对 聚 乙二醇－ 壳 聚糖 聚合 物 中聚 乙二醇 接 枝率 的检测 方法 。方 法 通 过 化学 方法 合成 亲水 性 ｍＰ Ｅ ＧＣ ＯＯ ＮＳ ｕ活化 物 ，将 其 连接 壳 聚糖的 氨基 侧链 上 ，得到 改性 了的 聚 乙二醇一 壳 聚糖接 枝产 物 ；用直接 和 间接两 种 分 光 光度 法检 测聚 乙二 醇一 壳聚 糖接 枝产 物的接 枝率 ．并用 核磁共 振 方法辅 助 证明 。结果 Ｈ． Ｎ ＭＲ 确 认 了聚乙二 醇一 壳聚 糖接 枝的 合成 ，测得接 枝 率为 １ ５ ． ６ ９ ￣ ２ ． ３ ８％，直 接间接 两 种方 法测 定接 枝率 分别 为 １ ７ ． ２ ５ ￣ ２ ． ５ ６ ％和 １ ６ ． ３ ４ ￣ １ ． ９ ８ ％。结 论 采 用 分光光 度法 测定 聚 乙二醇一 壳 聚糖 的接枝 率是 种简 便 、可 行、有 效的 测定 方法 。 『 关键 词】 壳 浆糖 ；聚 乙二醇 ；接 枝率 ：分 光光 度法 ｆ 中 图分 类号］ Ｔ Ｑ 【 文献标 识码 】 Ａ 【 文 章编 号】 ｌ ０ ０ ７ — １ ８ ６ ５ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ７ — ０ ２ ２ ７ — ０ ２
２ ０ １ ７年 第 ７期
广 东 化 工
ｗｗｗ． ｇ ｄ ｃ ｈ ｅ ｍ． ｃ ｏ ｍ ２２ ７
第４ ４卷 总第 ３ ４ ５期
分光 光度法 测定 聚 ７ － ， － 醇． 壳聚糖 的 枝率
朱 志 敏 ，邓 湘 萍 ，熊淑 娟 ，王 哲 ，熊润 德 ，邹 柳 ，刘 娟 ，唐 国涛
ｃ ｈ ｉ ｔ ｏ ｓ ａ ｎ － ｇ ｒ ａ ｔ ｆ — ｐ ｏ ｌ ｙ ｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ｅ ｎ ｅ ｇ ｌ ｙ ｃ ｏ ｌ ｂ ｙ Ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｐ ｈ ｏ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ： Ｃｈｉ ｔ ｏ ｓ ａ ｎ — ｇ ｒ ａ ｔ ｆ — ｐ ｏ ｌ ｙ ｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ｅ ｎ ｅ ｇ ｌ ｙ ｃ ｏ ｌ ｗａ ｓ ｏ ｂ ｔ ａ ｉ ｎ ｅ ｄ ｔ ｈ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ ｇ ｒ ａ ｔ ｆ ｉ ｎ ｇ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｐ ｈ ｉ ｌ ｉ ｃ ｍＰ Ｅ Ｇ ｓ ｐ ａ ｃ ｅ ｒ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ａ ｍｉ ｎ ｏ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｏ ｆ ｃ ｈ ｉ ｔ ｏ ｓ ａ ｎ Ｔｈ ｅ ｇ ｒ ａ ｔ ｆ ｉ ｎ ｇ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｏｆ ｃ ｈ ｉ ｔ ｏ ｓ ａ ｎ — ｇ ｒ ａ ｔ－ ｆ ｐ ｏ ｌ ｙ ｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ｅ ｎ ｅ ｇ ｌ ｙ ｃ ｏ ｌ ｗａ ｓ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ ｄ ｉ ｒ ｅ ｃ ｔ ａ ｎ ｄ ｉ ｎ ｄ ｉ ｒ ｅ ｃ ｔ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｐ ｈ ｏ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ ． ａ ｎ ｄ ｐ ｒ ｏ ｖ ｅ ｄ ｂ ｙ ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ａ ｒ ｍａ ｇ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｒ ｅ ｓ ｏ ｎ ａ ｎ ｃ ｅ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ： Ｔｈ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ’ Ｈ－ ＮＭＲ ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ． ｔ ｈ ｅ ｇ ｒ ａ ｔｉ ｆ ｎ ｇ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｏ ｆｃ ｈ ｉ ｔ ｏ ｓ ａ ｎ ・ ｇ ｒ ａ ｔ ｆ — ｐ ｏ ｌ ｙ ｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ｅ ｎ ｅ ｇ ｌ ｙ ｃ ｏ ｌ ｗａ ｓ １ ５ ． ６ ９ － ￣ ２ ． ３ ８％ ． Ｔｈ ｅ ｇ ｒ ａ ｔｉ ｆ ｎ ｇ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｏ ｆ
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Ｚ ｈ ｕ Ｚ ｈ ｉ ｍ ｉ ｎ ， Ｄ ｅ ｎ ｇ Ｘ ｉ ａ ｎ ｇ ｐ ｉ ｎ ｇ ， Ｘ ｉ ｏ ｎ ｇ Ｓ ｈ ｕ ｊ ｕ ａ ｎ ， Ｗａ ｎ ｇ Ｚ ｈ ｅ ， Ｘ ｉ ｏ ｎ ｇ Ｒ ｕ ｎ ｄ ｅ ， Ｚ ｏ ｕ Ｌ ｉ ｕ ， Ｌ ｉ ｕ Ｊ ｕ ａ ｎ ， Ｔ ａ ｎ ｇ Ｇ ｕ ｏ ｔ ａ ｏ ’
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Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ Ｇｒ ａ ｔｉ ｆ ｎｇ Ｒａ ｔ ｉ ｏ ｏ ｆ Ｃｈｉ ｔ ｏ ｓ ａ ｎ — － ｇ ｒ ａ ｆ ｔ － － ｐｏ ｌ ｙ ｅ ｔ ｈ ｙｌ ｅ ｎ ｅ Ｇｌ ｙ ｃ ｏ ｌ ｂｙ Ｓｐｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｐ ｈｏ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ Ｍｅ ｔ ｈｏ ｄ