小鼠肾纤维化模型
小鼠肾纤维化模型 肾积水(hydronephrosis)是指尿液从肾盂排出受阻，蓄积后肾内压力增高，肾盂肾盏扩张，肾实质萎缩，导致肾功能减退。梗阻性肾病其主要的病理生理改变是肾积水、肾盂及肾小管压力升高、肾间质水肿、炎性细胞浸润、肾间质内成纤维细胞增生、肾间质胶原蛋白聚集、肾间质增宽、肾小管萎缩，最终导致肾间质纤维化和肾单位减少，引起肾功能衰竭。 单侧输尿管梗阻是比较成熟的肾间质纤维化模型，结扎2周就可有成纤维细胞的增生和间质细胞外基质的生成。但是由于输尿管的结扎使患侧肾盂中的尿液不能外排，加上对侧肾脏的代偿作用，所以一般情况模型组血肌酐、尿素氮、NAG以及24h尿蛋白仅明显高于正常组，但还处于正常范围之内，同时对侧肾一般也无明显改变，而患侧肾脏组织中大量炎症细胞浸润、肾小管和间质的结构严重破坏以及肾间质纤维化，最后肾间质呈现广泛的纤维化，而肾小球几乎没有病变。因此单侧输尿管梗阻模型在研究肾间质纤维化方面使研究的靶点明确，有利于其病变机理及抗间质纤维化治疗的研究。 1.实验动物 SPF级Balb/C小鼠，健康，雄性，4~6W，体重为18g~20g 2.实验分组 实验随机分组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组，每组15只动物。 3.实验周期 7d，14d，21d，28d 4.建模方法 1. 小鼠3%戊巴比妥钠80mg/kg腹腔麻醉后侧卧，左侧背部脱毛 2. 在大腿上方脊椎左侧1cm处开口，剪开皮肤及肌肉， 3. 分离出左侧输尿管，在其上1/3处游离输尿管，6号线结扎2道，在其间剪断输尿管，清理伤口后分两层缝合，待小鼠清醒后，将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养，定期观察小鼠状态及死亡情况并做好记录。 4. 在模型建立后7d，14d，21d，28d分别处死小鼠，取左侧部分肾组织于4%多聚甲醛溶液固定，石蜡包埋；其余肾组织液氮冷冻，-80度保存。 5.模型的评价 1. 蛋白尿含量、尿NAG活性测定 模型组术后2周、4周的24h尿蛋白含量以及尿酶NAG活性比正常组和假手术组明显上升。
2. 血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量测定 手术4周后，模型组血清Scr和BUN含量相对于正常组和假手术组有稳定的升高。 3. 形态学观察：术后取左肾于4%多聚甲醛固定，依次脱水、透明、石蜡包埋、切片。做HE染色及Masson染色，光镜观察肾小球、肾小管-间质的病理变化及炎性细胞浸润情况。可见模型组小鼠的肾间质出现炎症细胞浸润，肾小管上皮细胞萎缩、刷状缘消失、肾小管管腔扩张呈囊状，管腔塌陷，间质明显增宽，间质内可见大量炎性细胞浸润，伴有较多的成纤维细胞增生。并随时间的延长炎症细胞浸润加重，小管上皮细胞扁平、脱落，肾小管萎缩、扩张加重，甚至塌陷、消失，胶原纤维增生，间质纤维化加重 。 6.注意事项 1 分离输尿管时注意不要损伤肾脏。 2 注意清理伤口，防止感染。 3.取下肾脏后要剥离肾表面的结缔组织薄膜。
图1 肾脏大体图（左边为未结扎侧肾，右边为输尿管结扎侧肾，肾实质已发生严重萎缩）
图2 正常小鼠。肾小球、 肾小管及肾间质结构正常(HE染色)
图3 肾纤维化小鼠。肾小管管腔扩张呈囊状，管腔塌陷，间质明显增宽，纤维化显著，间质内可见大量炎性细胞浸润(HE染色) 武汉云克隆诊断试剂研究所
肾小管间质纤维化动物模型的研究进展
ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２０１０ ＶＯＬ．２１ ＮＯ．４ 时珍国医国药２０１０年第２１卷第４期 ◇文献综述◇ 肾小管间质纤维化动物模型的研究进展 张新志 ，何立群 （１．上海中医药大学附属曙光医院肾内科、肝肾疾病病证教育部重点实验室，上海２０１２０３； ２．上海市高校中医内科Ｅ一研究院，上海２０１２０３） 摘要：肾间质纤维化与肾功能的恶化密切相关，而动物实验是研究肾间质纤维化尤为重要的手段。文章拟对常见的肾 间质纤维化动物模型，包括单侧输尿管梗阻模型、环孢素Ａ肾病模型、马兜铃酸肾病模型、镇痛剂肾病模型、阿霉素肾病 模型等１０种模型的制作和研究进展作一综述，以利于实验者根据不同的实验目的选择适宜的动物模型。 关键词：肾小管ｆ．－Ｉ质纤维化；动物模型 中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０８０５（２０１０）０４－０９６９－０３ Ｒｅｃｅｎｔ Ａｄｖａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｎ Ａｎｉｍａｌ Ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ Ｒｅｎａｌ Ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ ＺＨＡＮＧ Ｘｉｎ—ｚｈｉ ．ＨＥ Ｌ ｉ—ｑｕｎ （１．Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｅｐｈｒｏｌｏ— ｇＹ，Ｓｈｕｇｕａｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｌｉｖｅｒ ａｎｄ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｓｈａｎｇｈａｉ， ２０００２１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｒｅｎａｌ ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｃｌｏｓｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｄｅｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｎａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｏｎ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ａｒｅ ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｒｅｎａｌ ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｓｔｉｔｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｄｖａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｎ ｔｅｎ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｒｅｎａｌ ｔｕｂｕｌｏ ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｕｎｉｌａｔｅｒａｌ ｕｒｅｔｅｒａｌ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ，ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ Ａ ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ ｍｏｄｅｌ，ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉｃ ａｃｉｄ Ｂｅ— ｐｈｒｏｐａｔｈｙ ｍｏｄｅｌ，ａｎａｌｇｅｓｉｃ ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ ｍｏｄｅｌ，ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ ｍｏｄｅｌ ａｎｄ ＳＯ ｏｎ ｗｅｒｅ ｒｅｖｉｅｗｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ．Ｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓ ｓｈｏｕｌｄ ｆｉｎｄ ｏｕｔ ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｒｅｎａｌ ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ：Ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌ 肾问质纤维化（ｒｅｎａｌ ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ，ＲＩＦ），既是慢性进展 性肾脏病共同典型的病理形态学表现，又是决定。肾功能衰竭进程 的关键因素，是多种慢性肾脏病长期迁延，最终导致慢性肾功能 衰竭的主要病理基础。由慢性。肾小管间质损伤导致的肾间质纤 维化已成为几乎所有肾脏疾病的共同最终结局…。近年来，大 量临床和动物实验证明，各种原因导致的慢性肾功能衰竭与肾小 管间质纤维化的关系较与。肾小球损伤的关系更为密切。为此， ＲＩＦ的研究成为近年来。肾脏病学界的主流与热点。 造成肾小管间质纤维化的方法主要有手术（单侧输尿管结 扎、 肾脏缺血一再灌注等）和药物（环孢素Ａ、氨基糖苷类抗生 素、’肾毒性药物等）两大类。其中，目前应用最广泛的。肾小管间 质纤维化动物模型是单侧输尿管梗阻（ＵＵＯ）动物模型。本文对 常见模型综述如下。 １手术诱导模型 １．１ 单侧输尿管梗阻动物模型单侧输尿管梗阻（ｕｎｉｌａｔｅｒａｌ ｕｒｅ— ｔｅｒａｌ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ，ＵＵＯ）模型是研究肾间质纤维化发生机制、肾脏 细胞转分化和评价肾纤维化治疗方法的理想模型 。 造模方法：常规麻醉、消毒，下腹部正中切口，分离左侧输尿 管并结扎。研究发现，梗阻肾在术后１ ｄ，即出现体积增大，３ ｄ时 收稿日期：２００９－０８－２６；修订日期：２００９－１１－１９ 基金项目：国家自然科学基金（Ｎｏ．３０８７３２５９）； 上海市优秀学科带头人培养计划资助（Ｎｏ．０８ＸＤ１４０３９）； 上海市教育委员会Ｅ一研究院建设计划资助（Ｎｏ．Ｅ０３００８） 作者简介：张新志（１９７４一），男（汉族），河南滑县人，现为上海中医药大学 ２００７级博士研究生，硕士学位，主要从事肾小管间质疾病的研究工作． 通讯作者简介：何立群（１９５９一），男（汉族），浙江宁波人，现任上海中医 药大学教授，主任医师，博士学位，主要从事肾脏疾病的临床与科研工作． 显著大于对侧。小鼠在手术后７ ｄ，大鼠２～３周即可表现出问质 纤维。特别是在术后１４ ｄ，出现严重的‘肾盂积水，肾皮质萎缩，肾 小管管腔塌陷，大量上皮细胞死亡，问质表现为广泛而严重的纤 维化，而未见明显的肾小球改变 Ｊ。郭华等 用ｓＤ大鼠制备 ＵＵＯ模型，发现术后３ ｄ，肾组织出现炎症细胞浸润、细胞增殖、 小管扩张等病理改变，此后呈进行性小管萎缩及间质纤维化。目 前用抑制ＴＧＦ—ｐ。的信号转导来预防肾纤维化。Ｍｏｏｎ 给 ＵＵＯ大鼠腹腔内注射ＩＮ２１１３０（ＴＧＦ—ｐ 受体的抑制剂），观察 到给药的ＵＵＯ大鼠ＴＧＦ—Ｂ，、胶原Ｉ、ｐＳｍａｄ２的ｍＲＮＡ水平较 ＵＵＯ对照大鼠下降。张悦等 实验证实抗纤灵冲剂可通过增加 。肾纤维化保护性因子ＨＧＦｍＲＮＡ的表达及抑制肾组织ＭＡＰＫ通 路分子ＥＲＫ１／２和ｐ３８磷酸化以改善ＵＵＯ肾间质纤维化模型大 鼠。肾功能，抑制成纤维细胞增殖，减少胶原含量。 多种证据表明，ＵＵＯ模型的一些研究结果与梗阻性。肾病患 者的观察结果相似，故而啮齿类动物的ＵＵＯ模型可以反映人类 梗阻性肾病和纤维化。肾脏疾病的过程’ 。 ＵＵＯ是目前研究肾间质纤维化的理想模型，文献报道较多， 模型成功率高，对动物损伤小、死亡率低。方法简便，病变均一， 有较好的重复性。然而大鼠单侧输尿管梗阻属于急性机械性损 伤，不能适应肾小管和问质损伤及其纤维化的所有情况，但是该 方法能够在短期内造成纤维化，就研究‘肾间质纤维化的发病规律 及机制探讨而言，是一种较为快速、可靠的动物模型 。 １．２缺血一再灌注模型Ｊａｉｎ等 用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，切除左 。肾，钳夹右。肾蒂４５ ｍｉｎ造模，表明可迅速发生蛋白尿、间质纤维 化、肾功能丧失。缺血性急性肾功衰可导致小管周围毛细血管永 久性坏死，从而易发生进行性慢性肾功能衰竭－－…。霍冬梅等 采用经背部双侧肋弓下缘切口建立模型，认为具有比经腹正中切 口手术方式切口小、操作简单、手术视野清晰、干净，术前无需禁 食，存活率较高等优点。 －９６９・
小鼠肾脏移植模型具体步骤及说明
小鼠肾脏移植模型具体步骤及说明
动物案例
57BL/6、BALB/C
造模方法
血管吻合采用供受体腹主动脉和下腔静脉端-侧连续缝合，尿路重建采用供受体输尿管端-端吻合
供体手术
腹部正中切口，选择左肾作为供肾，显露左肾及血管，游离左肾血管下方1.0～1.2cm处的腹主动脉及下腔静脉，结扎并剪断其侧支和左侧精索动静脉、左肾上腺动静脉，游离左肾及输尿管，阻断远心端腔静脉和腹主动脉，于左肾血管上方分别结扎阻断腹主动脉和下腔静脉，并在左肾血管下方约5mm处剪断下腔静脉，以使灌注液从此处流出，6号套管针穿刺腹主动脉远端，拔取针芯，低压、匀速(0.8～10ml/min)注入10～15ml4℃的H-CA液，直至从下腔静脉流出清凉的灌注液和左肾变为黄白色为止。灌注完毕，在结扎线以上剪断腹主动脉和腔静脉，在左肾输尿管中段剪断输尿管。此时左肾、血管及输尿管均已完全游离，将左肾及其附带的血管、输尿管放入4℃H-CA液中保存。
受体手术
腹部正中切口，肠管右置，盐水纱布覆盖，充分暴露左肾及血管。将4℃肝素盐水2ml(50U/ml)注入右侧腹膜后进行全身肝素化。以5/0的线结扎肾蒂，行包膜下肾切除。游离左肾动脉下方1.0～1.2cm处的腹主动脉和下腔静脉，并结扎其所有的侧支，在腹主动脉的预计吻合口处，仔细剪去部分血管外膜，以备血管吻合。在受体大鼠腹部左侧，将供肾放在两层冰棉片之间，维持供肾的低温状态。分别在左肾血管下方和髂血管水平处用阻血夹阻断下腔静脉和腹主动脉的血流。判断确无血液回流后，将下腔静脉和腹主动脉分别纵向剪开一与供体血管口径相吻合的小口，长约4～6mm。在6～10倍手术显微镜视野下，先吻合动脉后吻合静脉，第1针从12点的位置开始，用9/0线做连续吻合血管右侧壁直至6点位置，然后连续吻合左侧壁，每侧缝6～7针，以同样的方法吻合下腔静脉。吻合结束后，开放阻血夹，可见供肾迅速转红，肾动脉有明显搏动，肾静脉充盈。如果吻合口有渗血，轻压2～3min，不要随便加针，以免造成吻合口狭窄。
复方鳖甲软肝片对小鼠肾纤维化的防治作用
复方鳖甲软肝片对小鼠肾纤维化的防治作用
熊英;刘宗泽;李佑敬;王岚;秦臻;许键炜
【摘 要】目的:观察复方鳖甲软肝片对小鼠肾纤维化的防治作用.方法:40只昆明种小鼠随机分为对照组、模型组、治疗组和干预组,模型组、治疗组和干预组皮下注射CCl4与橄榄油混合液持续6周建立肾纤维化动物模型,干预组于造模同时开始给予复方鳖甲软肝片干预,共12周,对照组代以等体积橄榄油皮下注射;造模后治疗组复方鳖甲软肝片连续灌胃给药6周,模型组和对照组则予等体积生理盐水灌胃;实验第12周时检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平,ELISA法检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-Col),采用HE染色和Masson染色评价肾间质纤维化损伤程度,免疫组织化学染色检测肾脏组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和肿瘤坏死因子(TNF-α)表达.结果:与对照组比较,模型组血清BUN、Scr、HA、LN、PC Ⅲ、Ⅳ-Col均明显增高(P＜0.05),肾间质纤维化明显,肾组织α-SMA和TNF-α高表达(P＜0.05);与模型组比较,治疗组和干预组上述肾功能和肾纤维化指标均显著降低(P＜0.05),肾间质纤维化改善,肾组织中α-SMA和TNF-α表达降低(P＜0.05).结论:复方鳖甲软肝片能有效减轻并预防CCl4诱导的小鼠肾纤维化及肾脏损害.
【期刊名称】《贵阳医学院学报》
【年(卷),期】2019(044)002
【总页数】6页(P163-168)
【关键词】复方鳖甲软干片;肾纤维化;模型,动物;α-平滑肌动蛋白;肿瘤坏死因子α
【作 者】熊英;刘宗泽;李佑敬;王岚;秦臻;许键炜 【作者单位】贵州医科大学机能实验室,贵州贵阳550025;贵州省黎平县人民医院急诊科,贵州黎平557300;贵州省从江县人民医院外科,贵州从江557400;贵州医科大学医学科学研究所,贵州贵阳550004;贵州医科大学药理学教研室,贵州贵阳550025;贵州医科大学药理学教研室,贵州贵阳550025;贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心,贵州贵阳550004
上皮间质转化和内皮间质转化在肾纤维化中的研究进展
上皮间质转化和内皮间质转化在肾纤维化中的研究进展
金芬;张忠寿;黄卫锋
【摘 要】上皮间质转化(EMT)和内皮间质转化(EndMT)参与各种纤维化疾病的发病机制，EMT和EndMT已经成为器官纤维化研究的一个重点课题。EMT和EndMT在肾的纤维化过程中起到至关重要的作用。越来越多细胞内外分子可控制EMT和EndMT的表达，尤其是microRNA (miRNA)在EMT和EndMT中的调控作用，已被确定可利用于开发治疗纤维化。本文综述了EMT和EndMT在肾纤维化中的研究进展，了解EMT和EndMT参与肾病纤维化过程的机制，这将会给人类肾纤维化疾病的治疗提供一种新的靶点和方法。
【期刊名称】《海南医学》
【年(卷),期】2014(000)018
【总页数】3页(P2723-2725)
【关键词】上皮间质转化;内皮间质转化;肾的纤维化;miRNA
【作 者】金芬;张忠寿;黄卫锋
【作者单位】三峡大学医学院，湖北 宜昌 443002;三峡大学医学院，湖北 宜昌
443002;三峡大学医学院，湖北 宜昌 443002
【正文语种】中 文
【中图分类】R692.1+2
肾纤维化是肾长期损伤或正常伤口愈合过程中功能失调，导致过量的细胞外基质(ECM)沉积造成的。EMT与EndMT过程中激活产生的成纤维细胞是肾成纤维细胞的主要来源。在肾纤维化过程中，肾成纤维细胞发挥着重要的作用。在EMT和EndMT过程中存在复杂的调控，最新的研究表明，miRNA在EMT和EndMT过程中发挥重要的调节作用。miRNA是小的非编码RNA，通过抑制蛋白质翻译或诱导mRNA降解来抑制靶基因的表达。miRNA可调控细胞的分化、增殖、死亡、代谢等多种病理生理机制的基本过程[1]。因此，研究EMT和EndMT过程在纤维化中的作用，可以推进我们对常见发病机制的理解，也可能为治疗干预提供新的靶点。这篇综述侧重于上皮间质转化和内皮间质转化在肾脏疾病中的生物学角色。
肾衰泄浊汤对肾间质纤维化小鼠HGF、TGFβ1的调节作用
・７４・ 中国中医药科技２ＯＯ７年３月第１４卷第２期Ｍａｒ．２ＯＯ７ Ｖｏ１．１４ Ｎｏ．２
肾衰泄浊汤对肾间质纤维化小鼠ＨＧＦ、ＴＧＦ ｌ３ 的调节作用
晏子友赵海赖小美
（江西中医学院附属医院・南昌３３０００６）
摘要 目的：观察中药复方肾衰泄浊汤对肾间质纤维化小鼠肾组织肝细胞生长因子（ＨＧＦ）、转化生长
因子岛（ＴＧＦ Ｂ）蛋白表达的调节作用，探讨其抗肾间质纤维化的机制。方法：将６０只小鼠随机分为假手
术组，模型组，中药低、高剂量组，苯那普利组，采用单侧输尿管梗阻（ＵＵＯ）动物模型，术后７天观察梗阻
肾组织病理改变，用免疫组化方法检测肾组织ＨＧＦ、ＴＧＦ岛蛋白，Ｉ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及ＦＮ的表达。结果：中
药高剂量组和苯那普利组较模型组小鼠肾组织ＨＧＦ蛋白表达增强，ＴＧＦ Ｂ蛋白表达减弱，而Ｉ、Ⅲ、Ⅳ型
胶原、ＦＮ生成减少，两组无显著差异，而ＨＧＦ表达与ＴＧＦ晶表达呈明显负相关。结论：肾衰泄浊汤可能
是通过诱导ＨＧＦ蛋白表达，抑制ＴＧＦ岛表达，抑制Ｉ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及ＦＮ等ＥＣＭ的过度沉积，加强肾保
护作用，对抗肾间质纤维化。
主题词 肾硬化症，中医药疗法 ＠肾衰泄浊汤，治疗应用 肾硬化症，病理学 小鼠
肾间质纤维化几乎是所有肾脏疾病进展到终末期肾衰
的共同转归，是肾功能衰竭的主要病理表现。抗肾间质纤维
化是延缓肾脏疾病进展的重要手段。本研究采用单侧输尿
管梗阻（ｕｎｉｌａｔｅｒａｌ ｕｒｅｔｅｒａｌ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ，ｕｕｏ）诱导肾间质纤维化
动物模型，观察了肾衰泄浊汤对肝细胞生长因子（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ
ｇｒｏ￣ｈ ｆａｃｔｏｒ，ＨＧＦ）、转化生长因子岛（ＴＧＦ岛）蛋白表达的作
用，并探讨其抗肾间质纤维化的机制，现报告如下。
１材料和方法 ‘
１．１动物造模与分组 取健康成年 小鼠４８只（清洁
级），雌雄各半，体重（３０ ４－３）ｇ，由江西中医学院动物中心提
供，动物许可证号：ｓＹＸＫ（赣）２００４—０ＯＯｌ。小鼠测体重，随机
高血压的小鼠模型研究
高血压的小鼠模型研究
高血压是一种常见的心血管疾病，且在全球范围内呈现上升趋势。它被定义为持续性的血压升高，通常是由于动脉内压力过高引起。高血压对人类健康造成严重影响，可导致心脏疾病、脑卒中、肾脏疾病等多种并发症。
为了更好地理解高血压的发病机制以及寻找有效的治疗手段，研究者们常常采用小鼠模型进行实验。小鼠与人类有着相似的解剖和生理特征，可以提供有关高血压的重要信息，并且具有较低的实验成本和更短的实验周期。
建立高血压的小鼠模型首先需要选择适合的小鼠品系。一般来说，选择易于高血压导致的品系，例如对高盐饮食敏感的SHR（Spontaneously hypertensive rat）品系。同时，也可以通过基因改造的方式获得高血压小鼠模型，例如通过敲除或过表达特定基因来模拟人类高血压相关突变。
在小鼠模型中，最常用的建立高血压的方法是通过高盐饮食。小鼠可以通过长期暴露于高盐饮食中来诱导高血压。高盐饮食会导致体内钠离子浓度增加，血浆容量增多，进而引起血管阻力和体液容量的改变，从而最终导致血压升高。
另外，研究者还可以通过生物技术手段来建立高血压的小鼠模型。例如，腹主动脉结扎法可以通过结扎小鼠腹腔主动脉来诱导高血压。结扎后，小鼠会出现血压升高，可能是由于外周血管阻力增加和体液容量减少导致的。
在建立小鼠模型之后，研究者们可以通过多种实验手段来评估小鼠的高血压程度和相关病理生理指标。其中，最常用的是测量小鼠的血压。常用的测量方法包括有创测量法和无创测量法。有创测量法需要将压力导管插入小鼠动脉内，直接测量血压。而无创测量法则可以通过尾动脉等位置的压力传感器测量血压，效果相对较差。
除了测量血压，还可以通过检测小鼠的心肌结构和功能变化来评估高血压的程度。例如，用超声心动图检测小鼠心脏的大小、射血分数和心室重构等指标。这些指标的改变可用于判断高血压对心脏的损伤程度。
此外，研究者还可以采样小鼠的血液和组织，进一步研究高血压病理生理的变化。通过检测血液中的肾素、血管紧张素等因子以及组织中的心肌细胞增生和纤维化等指标，可以对高血压的发病机制进行更详细的研究。
JNK在cGVHD狼疮样小鼠肾组织表达及在肾纤维化中作用研究
・９０・ 紊［南大学学报（Ｍ‘医学ｉ版ｉ； ２００９，Ａｐｒ；２８（２）：９０ ９５Ｓｏｕｔｈｅａｓｔ Ｕｎｉｖ Ｍｅｄ Ｓｃ Ｅｄ Ｊ ）…一 ’ ‘
ＪＮＫ在ｃＧＶＨＤ狼疮样小鼠肾组织表达
及在肾纤维化中作用研究
兰灵，王美美
（东南大学附属中大医院风湿免疫科，江苏南京２１０００９）
［摘要］目的：观察ｃ—Ｊｕｎ氨基末端激酶（ＪＮＫ）在慢性移植物抗宿主病（ｃＧＶＨＤ）狼疮样小鼠肾组织中的表达情况，初步探讨其 在狼疮肾炎肾脏纤维化中所起的作用。方法：建立ｃＧＶＨＤ狼疮样小鼠模型。将小鼠分为１２周正常对照组、１６周正常对照组、 １２周模型组及１６周模型组４组，每组６只，于１２周末处死ｌ２周正常对照组和１２周模型组小鼠，１６周末处死１６周正常对照 组和１６周模型组小鼠，采用双缩脲比色法观察各组小鼠２４ ｈ尿蛋白排泄量，ＨＥ和Ｍａｓｓｏｎ染色观察肾间质纤维化程度，免疫 组织化学法定位检测ＪＮＫ、ｐ－ＪＮＫ在肾组织的表达，ＲＴ—ＰＣＲ法检测各组ＪＮＫ ｍＲＮＡ表达及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ技术半定量检测 ＪＮＫ、ｐ－ＪＮＫ蛋白表达水平。结果：１２周模型组小鼠２４ ｈ尿蛋白排泄量，ＪＮＫ、ｐ－ＪＮＫ蛋白及ｍＲＮＡ的表达与正常对照组相比均 明显增加（Ｐ＜０．０１），１６周模型组更甚（Ｐ＜０．０１）。结论：ＪＮＫ、ｐ－ＪＮＫ蛋白及ｍＲＮＡ表达在ｃＧＶＨＤ狼疮样小鼠肾组织中明显 上调，其可能在狼疮肾炎肾纤维化进程中起着重要作用。
［关键词］慢性移植物抗宿主病；狼疮肾炎；ｃ‘Ｊｕｎ氨基末端激酶；肾纤维化；小鼠 ［中图分类号］Ｒ５９３．２４２；Ｒ一３３ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１６７卜６２６４（２００９）０２—００９０—０６
狼疮肾炎（１ｕｐｕｓ ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，ＬＮ）是系统性红斑狼疮
（ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｌｕｐｕｓ ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ，ＳＬＥ）患者最常见和最严 重的并发症之一，也是ＳＬＥ患者的主要死亡原因之
小鼠肾成纤维细胞 鉴定 vimentin-概述说明以及解释
小鼠肾成纤维细胞 鉴定 vimentin-概述说明以及解释
1.引言
1.1 概述
概述部分的内容主要是对小鼠肾成纤维细胞的研究背景和意义进行简要介绍。可以根据以下内容进行编写：
概述
小鼠肾成纤维细胞是一类重要的细胞类型，广泛存在于小鼠肾脏组织中，并在多种生理和病理过程中发挥着重要的作用。这些细胞具有独特的表型和功能，可以通过特定的鉴定方法来准确识别。近年来，随着生物学研究和生物医学领域的发展，对小鼠肾成纤维细胞的鉴定与研究引起了广泛的关注和研究兴趣。
通过对小鼠肾成纤维细胞的鉴定，我们可以深入了解其表型和功能特点。首先，可以通过特定的细胞标记物如vimentin进行免疫细胞化学染色，从而确认其在组织中的定位和分布情况。其次，通过研究小鼠肾成纤维细胞的特征和功能，可以了解其参与肾脏发育、维持肾脏结构和功能稳定的调节机制。此外，小鼠肾成纤维细胞在肾脏疾病的发生和发展过程中也扮演着重要角色，其异常激活可能引起肾脏纤维化等病理变化。
深入研究小鼠肾成纤维细胞的重要性不仅可以加深对肾脏生物学过程的理解，也有助于揭示相关疾病的发生机制。此外，对小鼠肾成纤维细胞进行进一步的应用和研究，也有助于发展针对肾脏疾病的新疗法和药物靶点。
本文将重点介绍小鼠肾成纤维细胞的鉴定方法、特征和功能，以及其在相关研究中的重要性和应用。我们希望通过本文的撰写和阐述，能够促进对小鼠肾成纤维细胞的深入认识，进一步推动相关领域的研究发展，并为未来的研究方向提供重要参考。
1.2 文章结构
文章结构部分的内容可以涉及以下几个方面：
文章结构部分介绍了整篇文章的组织框架，主要包括引言、正文和结论三个部分。
引言部分是整篇文章的开篇，用来引入研究主题和背景，概述小鼠肾成纤维细胞的鉴定以及其重要性和应用。接下来，文章会详细介绍小鼠肾成纤维细胞的鉴定方法、特征和功能，以及其在相关研究中的重要性和应用。
正文部分是本文的核心内容，主要分为2.1、2.2和2.3三个小节。
慢性肾脏病血管钙化小鼠模型的建立
第３８卷第３期 ２０１７年３月 河 北 医 科 大 学 学 报 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＨＥＢＥＩ ＭＥＤＩＣＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ Ｖｏ１．３８ Ｎｏ．３ Ｍａｒ．２０１７ ・２５３・ 慢性肾脏病血管钙化小鼠模型的建立 王文伟 ，田露露 ，熊艳文。，陈启菁 ，彭 文 ，殷佩浩 论 著 （１＿复旦大学基础医学院生理与病理生理学系，上海２０００３２；２．复旦大学药学院药理学教研室，上海２０１２１０； ３．上海市普陀区利群医院中医科，上海２００３３３；４．上海中医药大学附属普陀医院肾内科，上海２０００６２； ５．上海中医药大学附属普陀医院中西医结合肿瘤介入研究所，上海２０００６２） ［摘要］ 目的提供一种慢性肾脏病血管钙化小鼠模型的建立方法。方法利用昆明种小鼠，采用腺嘌呤联合 维生素Ｄｓ，配合高磷饮食，建立慢性肾脏病血管钙化模型。结果以腺嘌呤联合维生素Ｄｓ，配合高磷低蛋白饮食喂 养小鼠６周后，模型组６Ｏ只小鼠中，死亡６只，１Ｏ只小鼠胸主动脉发生明显钙化（成功率约１７％）；模型小鼠血清中 尿素氮、血肌酐、尿酸、血磷和血钙均较对照小鼠显著增加（Ｐ＜０．０５）。未发生明显钙化的小鼠血管均发生血管壁 明显增厚、中层纤维变形的血管病变。结论采用腺嘌呤联合维生素Ｄ。和高磷饮食６周可导致慢性肾病血管钙 化。此方法简便易行、成模时间短、稳定性好，适于慢性肾病及血管钙化的研究。 ［关键词］ 肾疾病；血管钙化；疾病模型，动物ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７—３２０５．２０１７．０３．００２ ［中图分类号］Ｒ６９２．９ ［文献标志码］Ａ ［文章编号］ １００７—３２０５（２０１７）０３—０２５３～０６ Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｒｅｎａｌ ｖａｓｃｕｌａｒ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ＷＡＮＧ Ｗａｎ—ｗｅｉ ，ＴＩＡＮ Ｌｕ—ｌｕ ，ＸＩＯＮＧ Ｙａｎ～ｗｅｎ。， ＣＨＥＮ Ｑｉ－ｊｉｎｇ ，ＰＥＮＧ Ｗａｎ ，ＹＩＮ Ｐｅｉ—ｈａｏ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐ ＾Ｄ夕＾ ｓ ０ｚ０ｇ ，Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｂａｓｉｃ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｆｕｄａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００３２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｆｕｄａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１２１０，Ｃｈｉｎａ；３．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｐｕｔｕｏ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ｌｉｑｕｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｈｇｈａｉ ２００３３３，Ｃｈｉｎａ；４．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ，Ｐｕｔｕｏ Ｈｏｓｐｉｔａｌ， Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００６２， Ｃｈｉｎａ； ５．Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎ ｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｐｕｔｕｏ Ｈｏｓｐｉｔａｌ， Ｓｈａｎｇｈａｉ［Ｉｎ ｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００６２，Ｃｈｉｎａ） ［＇Ａｂｓｔｒａｃｔ＇］０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｖａｓｃｕｌａｒ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｃｈｒｏｎｉｃ ｋｉｄｎ＠ｄｉｓｅａｓｅ（ＣＫＤ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｕｒｉｎｅ ＣＫＤ ｗａｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｏｒａｌ ｄｏｓｉｎｇ ｗｉｔｈ ａｄｅｎｉｎｅ．１，２５ （ＯＨ）２Ｄ３ ａｎｄ ｈｉｇｈ—ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｉｅｔ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅ ｖａｓｃｕｌａｒ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｓｅｒｕｍ ｕｒｅａ ｎｉｔｒｏｇｅｎ，ｓｅｒｕｍ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ，ｕｒｉｃ ａｃｉｄ，ｃａｌｃｉｕｍ ａｎｄ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ．ＨＥ ｓｔａｉｎｉｎｇ ａｎｄ Ｖｏｎ ｋｏｓｓａ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｘａｍｉｎｅ ｔｈｅ ｍｏｒｐｈｏ１ｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｋｉｄｎｅｙ ａｎｄ ａｏｒｔａ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｆｔｅｒ ａｄｅｎｉｎｅ ｄｏｓｉｎｇ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ １，２５（ＯＨ）２Ｄ３ ａｎｄ ｈｉｇｈ—ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｉｅｔ，ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｏｒｔｉｃ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ａｂｏｕｔ １ ７％ａｎｉｍａｌｓ ａｔ ６ ｗｅｅｋｓ，ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｅｒｕｍ ｕｒｅａ ｎｉｔｒｏｇｅｎ，ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ，ｕｒｉｃ ａｃｉｄ，ｓｅｒｕｍ ｃａｌｃｉｕｍ ａｎｄ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ａｎｄ ａｌｌ ｍｏｄｅｌ ａｎｉｍａｌｓ ｓｈｏｗｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｒｔｅｒｉａｌ ｗａｌＩ ｔｈｉｃｋｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｍｅｄｉａｌ ｅｌａｓｔｉｃ ｆｉｂｅｒｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅｓｅ ｄａｔａ ｓｕｇｇｅｓｔ ｔｈａｔ ｍｉｃｅ ｄｏｓｅｄ ｏｒａｌｌｙ ｗｉｔｈ ａｄｅｎｉｎｅ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ［收稿日期］２０１６－－０９—１２；［修回日期］２０１６—１ｏ一２８ ［基金项目］上海市卫生局科研课题（２０１２４００７，２０１３４１２０） ［作者简介］王文伟（１９６６一），女，上海人，复旦大学基础医学院 实验师，医学硕士，从事心血管电生理研究。 ＊通讯作者。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｉｎｐｅｉｈａｏｌ９７５＠ｈｏｔｍａｉ［．
顺铂诱导肾损伤模型在C57BL／6小鼠J和N亚型中的差异性研究
网络出版时间：２０２４－０４－１１１０：５９：５１ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．Ｒ．２０２４０４１０．１８２４．０５２
◇实验方法学◇
顺铂诱导肾损伤模型在Ｃ５７ＢＬ／６小鼠
Ｊ和Ｎ亚型中的差异性研究
王 婵，邱会琴，唐亚婷，朱方媛，范彦英，杨彩红
（山西医科大学基础医学院药理学教研室，山西太原 ０３０００１）
收稿日期：２０２４－０１－０６，修回日期：２０２４－０３－０２基金项目：山西省自然科学基金资助项目（Ｎｏ２０１９０１Ｄ１１１１９８，２０２３０３０２１２１１１２５）；山西医科大学教学改革项目（ＮｏＳＺＬ２０２００３０１）作者简介：王 婵（１９９７－），女，硕士生，研究方向：心血管药理学与毒理学，Ｅｍａｉｌ：２９３２６２４５４８＠ｑｑ．ｃｏｍ；杨彩红（１９７４－），女，博士，副教授，硕士生导师，研究方向：心血管药理学与毒理学，通信作者，Ｅｍａｉｌ：ｔｙｙａｎｇｘｉａｏｌｕｏ＠１６３．ｃｏｍｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２３１１０４４
文献标识码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２４）０４－０７９２－０７
中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ３２２６１；Ｒ３６４５；Ｒ６９２５；Ｒ９７９１９
摘要：目的 探讨Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ和Ｎ亚型小鼠在顺铂诱导肾损
伤模型中的易感性差异，为选择药物肾损伤模型提供理论依
据。方法 雄性Ｃ５７ＢＬ／６小鼠Ｊ和Ｎ两种亚型，各随机分
为正常组（Ｃｏｎｔｒｏｌ）、模型组（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ，ＣＤＤＰ）。模型组腹腔
注射顺铂（３３３ｍｇ·ｋｇ－１），隔天给药，持续２周，记录小鼠
体重变化、存活率；检测Ｓｃｒ、ＢＵＮ和β２ＭＧ评价肾功能；
ＨＥ、Ｍａｓｓｏｎ和ＰＡＳ染色法观察肾皮质病理改变。ＩＬ６、ＩＬ
１β和ＩＬ１８等炎症因子检测顺铂导致的肾脏炎症反应。结
果 与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，ＣＤＤＰ组两种亚系小鼠Ｓｃｒ、ＢＵＮ和