固态发酵食醋中有机酸HPLC分析方法的优化_余永建_邓晓阳_陆震鸣_史劲松_许正

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浙江玫瑰醋补料发酵工艺条件的优化

浙江玫瑰醋补料发酵工艺条件的优化

中国调味品

ChinaCondiment第

44卷第

8期

2019年

8月技术研发

浙江玫瑰醋补料发酵工艺条件的优化

陈笑钗】,李婷

2,黄炳文

2,蒋予箭

2*

(1.浙江五味和食品有限公司,浙江湖州

313213#

2.浙江工商大学

食品与生物工程学院,杭州

310018)

摘要:在玫瑰醋经过糖化和酒化的发酵过程后,采用补料发酵对浙江玫瑰醋的醋酸发酵阶段进行工艺改

良

$通过单因素试验探究初始酸度、补料体积、补料次数和补料发酵温度对玫瑰醋发酵工艺过程的影

响,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken

中心响应面法优化其发酵工艺参数$结果表明,玫瑰醋

补料发酵的最佳工艺条件为:初始酸度达到2. 85 g/dL

时补酒液,补料体积分数为33%

,补料1

次,发

酵温度为32 C

。在此条件下,醋酸发酵结束时玫瑰醋最高产酸量可以达到(5. 59

士0.27

) g/dL,

比传统

发酵玫瑰醋(4. 81

士0. 12) g/dL

的产酸量高,达到工艺改良的目的$

关键词:浙江玫瑰醋;单因素试验;补料发酵;醋酸发酵;工艺优化

中图分类号:

TS201. 5 文献标志码:

A doi:10. 3969/j. issn. 1000-9973. 2019. 08. 030

文章编号:

1000-9973(2019)08-0152-06

Optimization of Fed-batch Fermentation Process Conditions

for Rose Vinegar in Zhejiang Provinee

CHEN Xiao-chai1 ,

LI Ting2 ,

HUANG Bing-wen2 ,

JIANG Yu-jian2

*

(1. Zhejiang Wuweihe Food Co. ,

Ltd. ,

Huzhou 313213, China;

2. College of Food and

Biotechnology ZhejiangGongshang University Hangzhou310018 China)

复合乳酸菌发酵沙棘汁降酸的工艺优化及特性分析

复合乳酸菌发酵沙棘汁降酸的工艺优化及特性分析

宁志雪,朱立斌,朱丹,等. 复合乳酸菌发酵沙棘汁降酸的工艺优化及特性分析[J]. 食品工业科技,2023,44(18):235−243. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022100232NING Zhixue, ZHU Libin, ZHU Dan, et al. Process Optimization and Characteristic Analysis of Sea Buckthorn Juice Deacidificationby Compound Lactic Acid Bacteria Fermentation[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(18): 235−243. (in Chinesewith English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022100232 · 工艺技术 · 

复合乳酸菌发酵沙棘汁降酸的工艺优化及

特性分析

宁志雪1,2,朱立斌1,2,朱 丹3, *,牛广财1,2, *,魏文毅1,2,徐瑞航1,2(1.黑龙江八一农垦大学食品学院,黑龙江大庆 163319;2.黑龙江省农产品加工工程技术研究中心,黑龙江大庆 163319;3.黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆 163319)

摘 要:为了研究复合乳酸菌发酵对沙棘汁降酸效果的影响,以酒酒球菌和短乳杆菌为菌株发酵沙棘汁。以总酸降解率为指标,通过单因素实验和响应面试验优化沙棘汁发酵降酸工艺,并研究发酵过程中黄酮、多酚、总酸、pH、总可溶性固形物(TSS)、还原糖、有机酸以及抗氧化活性的变化。结果表明:复合乳酸菌发酵的最优工艺条件为酒酒球菌:短乳杆菌比例为1:1、初始pH3.7、发酵温度31 ℃、发酵时间18 h、接种量5%,在该条件下总酸降解率为38.52%,此时,黄酮、多酚、总酸、pH和TSS含量与发酵前相比,均具有显著性差异(P<0.05)。沙棘发酵液中黄酮、多酚含量比发酵前分别增加了44.74%和22.22%,pH由3.71升高至3.85,总酸含量由8.49 g/L下降至5.22 g/L,TSS含量下降了20.29%,还原糖含量无显著变化(P>0.05)。发酵液中苹果酸含量显著下降(P<0.05),降解率为94.59%,乳酸含量显著增加(P<0.05),达到10.37 mg/mL,奎宁酸、抗坏血酸、酒石酸、草酸和柠檬酸的变化不显著(P>0.05)。沙棘汁经复合乳酸菌发酵后,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2'-azino-bis (3-ethylben-zothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基清除率及铁离子还原能力最大值分别达到78.20%、64.48%和1.1626 mmol/L。因此,复合乳酸菌发酵沙棘汁能有效降低其酸度,提高其品质和抗氧化活性,为沙棘汁的降酸工艺和相关产品的开发提供了理论依据。关键词:沙棘汁,乳酸菌,降酸工艺,成分分析,抗氧化活性

白酒窖池中不同部位窖泥挥发性化合物的差异性分析

白酒窖池中不同部位窖泥挥发性化合物的差异性分析

白酒窖池中不同部位窖泥挥发性化合物的差异性分析

李恒;孙夏冰;陆震鸣;王松涛;沈才洪;许正宏;史劲松

【期刊名称】《食品与发酵工业》

【年(卷),期】2013(039)003

【摘 要】采用顶空固相微萃取(HS-SPME)与气相色谱-质谱(GC-MS)联用的方法,对泸州老窖50年窖龄窖池中窖壁与窖底窖泥中的挥发性物质进行检测和分析.结果表明,窖泥中共检测到以酯类、酵类、酸类、醛酮类及酚类化合物为主的65种挥发性化合物.窖壁窖泥与窖底窖泥中的醇类、醛酮类以及酚类化合物差异不大,而酸类与酯类化合物无论在种类还是数量上均存在显著差异,其中己酸、己酸丁酯、己酸己酯是窖壁窖泥中的主要特征成分,而窖底窖泥中则含有丰富的己酸甲酯.

【总页数】5页(P158-162)

【作 者】李恒;孙夏冰;陆震鸣;王松涛;沈才洪;许正宏;史劲松

【作者单位】江南大学药学院,江苏无锡,214122;江南大学药学院,江苏无锡,214122;江南大学药学院,江苏无锡,214122;中国科学院天津工业生物技术研究所天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,天津,300308;国家固态酿造工程技术研究中心,四川泸州,646000;国家固态酿造工程技术研究中心,四川泸州,646000;江南大学药学院,江苏无锡,214122;国家固态酿造工程技术研究中心,四川泸州,646000;中国科学院天津工业生物技术研究所天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,天津,300308;江南大学药学院,江苏无锡,214122;国家固态酿造工程技术研究中心,四川泸州,646000

【正文语种】中 文 【相关文献】

1.浓香型白酒不同窖龄窖池窖泥中古菌群落结构分析 [J], 邓杰;卫春会;边名鸿;黄治国

2.浓香型白酒窖泥、出窖糟醅细菌区系的相似性分析 [J], 王涛;田时平;赵东;游玲;冯瑞章;王松;崔晓龙

3.诗仙太白酒不同窖龄窖泥微生物差异性研究 [J], 付勋;刘中利;刘弘;陈吉裕;宋燕;张艳;赵群芳;周忠斌

高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸含量的方法优化

高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸含量的方法优化

产业与科技许坨2019年第18卷第11期

高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸含量的方法优化□吴宁宁高运通

[内容摘要】以国标GB5009. 121 -2016为基础,对高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸含量的方法进行了优化,优化后的方法 前处理过程更加简单快捷,回收率90%以上,线性相关系数0. 99987,方法检出限为0. 002g/kg,重复性良好(RSD <0. 6%),色谱峰拖尾明显改善。【关键词】高效液相色谱法;脱氢乙酸;食品安全【作者简介】吴宁宁(1987. 12 ~ ),女,河北衡水人;河北美创检测科技有限公司助理工程师;研究方向:食品检验高运通(198& 11 ~ ),男,河北衡水人;河北华普环境检测有限公司工程师;研究方向:环境检测

脱氢乙酸及其钠盐,作为常用食品防腐剂代表,被广 泛应用于果蔬汁、糕点、酱菜等,以高效、低毒、广谱而著 称,对酵母菌、霉菌具有较强的抑菌能力,但脱氢乙酸及 其钠盐能够快速被人体吸收,分散在器官与血液中,对多 种氧化酶具有一定的抑制作用,影响人体健康,为此食品 安全国家标准对不同种类食品中脱氢乙酸及其钠盐的含 量限值进行了明确规定,其允许添加的最大限值为l.Og/ 超速试验规程的试验条件:汽轮机在10%额定负荷运行8小 时,使汽轮机充分暖机后,才减负荷至零负荷再进行汽轮机机 械超速试验,每次试验的时间控制在15分钟。如果汽轮机长 期运行在10%额定功率以上,在这种情况下,汽轮机处于充分 暖机状态,汽机动静部分的温度都是均匀的,若此时再进行超 速试验,则可直接减负荷到零,然后进行机械超速试验。如果达到了机械超速保护的定值,而机械超速保护不能 正常动作时,则需要停机处理。对脱扣机构、危急泄油滑阀 和超速飞锤进行检查,必要时应该调整超速飞锤弹簧的压紧 力以防止弹簧过度压紧。确认以上检査都正常后,再一次进 行机械超速试验。(三)手动脱扣试验。汽轮机手动脱扣试验周期是汽轮 机每次启动都必须进行的试验,它是为了检查脱扣机构及危 急泄油滑阀的性能正常。在汽轮机机头利用手动打闸手柄 对汽轮机打闸,以验证汽轮机的手动打闸功能。三、机械超速与电超速的比较(一) 机械超速在实际运行时的经验反馈。汽轮机机械 超速试验时,对叶片的损伤较大;飞锤的弹簧压紧程度调整 比较困难,进而影响了超速定值,误差比较大;进行注油试验 时,增加了油回路漏油点,影响了油回路的完整性,增加了维 修工作;大修后起机时做机械超速试验前,需要带低负荷暖 机8小时,影响二次并网的时间,经济效益差。(二) 电超速的优点及改造项目。DEH数字技术已经成 熟稳定,目前供电、控制、保护功能均已冗余,安全可靠。根据运行经验,进行如下改造:第一,取消机械超速相关 kg。国标GB5009. 121 -2016规定了脱氢乙酸含量检测方 法,其中气相色谱法方法比较复杂,重复性差,影响因素多, 故常用高效液相法对食品中脱氢乙酸及其钠盐进行含量测 定,但按照国标方法提供的液相条件进行检测,色谱峰拖尾 严重,前处理过程复杂,为此笔者对样品前处理及色谱条件 进行了优化,经优化色谱峰拖尾有了明显的改善、前处理过 程更加简单快捷。的装置及设备,保留飞锤本身(用紧固螺丝拧紧);第二,增加 一套独立电超速装置,包括一个三取二的跳机块和一个带指 示灯的就地跳机按钮用于新增的独立电超速保护系统,取代 目前使用的就地手动打闸及机械超速保护系统。在操纵员 站增加相关图形按钮;第三,在汽轮机前箱陆侧附近布置一 个新增的电超速保护装置,安装位置的选择偏于日常检修和 日常巡检。在前箱内新增四个电超探头及更换探头支架。改造完成后,有两个并联布置的跳机模块,其中一个是 OPC - AST联合四取二跳机块,一个是新增用于实现独立电 超速保护跳机功能的三取二跳机块。四、结语汽轮机机械超速保护取消,增加电超速保护,对于运行 的日常巡检和操作有如下改变:第…,汽轮机机械超速保护 取消后,取消了机械超速试验;第二,汽轮机保护通道逻辑检 查试验增加了电超速逻辑通道试验的内容;第三,汽轮机机 头取消了手动打闸手柄,增加了一个电超速模块DOPS,汽轮 机冲转前手动跳闸试验需要按下手动打闸按钮;第四,汽轮 机超速保护跳闸装置动作试验,取消机械超速的试验内容, 增加了电超速保护装置的试验内容。[参考文献】[1] 张涛.CP600 3 ,4号机组操纵人员应知应会(上册)[MJ. 北京:中国原子能出版社,2013[2] 姚莹,杨翠仙.汽轮机运行与检修1000问[M].北京:中 国电力出版社,2005• 68 •Industrial & Science Tribune2019 (18)

高效液相色谱法定量分析固态发酵食醋中有机酸的方法优化

高效液相色谱法定量分析固态发酵食醋中有机酸的方法优化

高效液相色谱法定量分析固态发酵食醋中有机酸的方法优化

余永建;邓晓阳;陆震鸣;史劲松;许正宏

【期刊名称】《食品科学》

【年(卷),期】2014(035)004

【摘 要】优化固态发酵食醋中9种有机酸的高效液相色谱定量分析方法.色谱条件:以C18色谱柱进行分离,流动相为NaH22PO4溶液,流速为0.9 mL/min,检测波长为210 nm,可在14 min内完成检测.在优化的色谱条件下,9种有机酸的检测线性范围较宽,最低检出限为0.02~1.79 mg/L,加标回收率为96.02%~104.55%,相对标准偏差0.46%~3.52%.该方法具有灵敏、准确、稳定等优点,可用于固态发酵食醋中有机酸的测定.

【总页数】5页(P55-59)

【作 者】余永建;邓晓阳;陆震鸣;史劲松;许正宏

【作者单位】江南大学药学院,江苏无锡 214122;江南大学药学院,江苏无锡

214122;江南大学药学院,江苏无锡 214122;中国科学院天津工业生物技术研究所天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,天津 300308;江南大学药学院,江苏无锡 214122;国家固态酿造工程技术研究中心,四川泸州 646000;江南大学药学院,江苏无锡 214122;中国科学院天津工业生物技术研究所天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,天津 300308;国家固态酿造工程技术研究中心,四川泸州 646000

【正文语种】中 文

【中图分类】TS207.3 【相关文献】

1.高效液相色谱法测定啤酒、发酵液和麦汁中的可发酵糖和有机酸 [J], 单连菊;王成红;单凌青;林艳

2.去除固态发酵食醋中浑浊沉淀的生产工艺 [J], 母先富;张国升;陈德飞

3.固态发酵食醋中污染菌的控制研究综述 [J], 程晔

4.食醋固态发酵中丙酸含量变化及生成机理研究 [J], 李永丽; 潘中乔亚; 于刚; 肖宇;

俞洪宝

5.食醋固态发酵中丙酸含量变化及生成机理研究 [J], 李永丽; 潘中乔亚; 于刚; 肖宇;

镇江香醋有机酸风味特征的分析

镇江香醋有机酸风味特征的分析

第38卷第l1期 2013年l1月 中目调味昌 China Condiment 分析检测 

镇江香醋有机酸风味特征的分析 

李国权。,陆震鸣h ,余永建h ,史劲松 。,许正宏h。 

(1.江南大学药学院,江苏无锡214122;2.江苏恒顺醋业股份有限公司,江苏镇江214043I 

3.国家固态酿造工程技术研究中心,四川泸州646000;4.中国科学院天津工业 

生物技术研究所天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,天津300308) 

摘要:采用高效液相色谱分析镇江地区22个镇江香醋醋样的有机酸组成,评价镇江香醋的有机酸风味 

特征。结果表明:在所有醋样中均检测出9种有机酸,总有机酸含量为4806.O~7204.1 mg/dL。不同 

厂家生产的镇江香醋中乳酸jf口乙酸为主体有机酸,两者含量之和大于总有机酸的75 ,但柠檬酸、a-lPi 

戊二酸、丙酮酸含量具有一定差异。通过感官评价分析,乙酸、乳酸、柠檬酸、焦谷氨酸争琥珀酸具有较 

高的风味强度,是影响镇江香醋口感的重要有机酸。 

关键词:镇江香醋;有机酸;风味特征;液相色谱 

中图分类号t TS264.22 文献标志码;A doi:10.3969 ̄.issn.i000—9973.2013.11.017 

文章编号:1000—9973(2013)11—0063—03 

Analysis of Flavor Characteristics of Organic Acids 

in Zhenj iang Aromatic Vinegar 

LI Guo-quan。,LU Zhen-ming ”,YU Yong-jian ,SHI Jin-song ,XU Zheng-hong ’。’¨ 

(1.College of Pharmaceutical Science,Jiangnan University,Wuxi 214122,China; 

2.Jiangsu Hengshun Vinegar Industry Co.,Ltd.,Zhenjiang 214043,China; 

红枣醋发酵过程中酒精发酵条件的优化研究(1)

中国酿造2010年第12期总第225期

[7]KIERSJL,LaekenAEAV,RomboutsFM,etal.InvitrodigestibilityofBacillusfermentedsoyabean[J].IntJFoodMicrobiol,2000,60(2-3):163-169.[8]MEJIAED,LumenBOD.Soybeanbioactivepeptides:anewhorizonginpreventingchronicdiseases[J].SexReprodMenopause,2006,4(2):91-95.[9]PRIPPAH,S覫RENSENR,STEPANIAKL,etal.Relationshipbetweenproteolysisandangiotensin-I-convertingenzymeinhibitionindifferentcheeses[J].LWT-FoodSciTechnol,2006,39(6):677-683.[10]TAVARIAFK,FRANCOI,CARBALLOFJ,etal.AminoacidandsolublenitrogenevolutionthroughoutripeningofSerradaEstrelacheese[J].IntDairyJ,2003,13(7):537-545.红枣属鼠李科(Rhamnaceae)枣属植物枣树(ZizphusjujubaMill)的果实,是药食同源的食品。红枣营养极其丰富。研究表明,枣果中含有桦木酸等7种以上有机酸[3]及缬氨酸、亮氨酸、苏氨酸等17种氨基酸。同时红枣含有钙、镁、钼等36种矿物质元素[3]和VA、VB、VC、VP,其中VC的含量极高,在鲜枣中含量为250mg/100g~600mg/100g,居百果之冠,而VP含量更为惊人,为3385mg/100g。红枣中还含有环磷酸腺苷(cAMP),在鲜枣中含量达50mg/100g[4]。红枣中含糖量也相当高,一般鲜枣含糖量超过30%,干枣的含糖量超过70%,其中以葡萄糖为主,可以很好地被微生物所利用。本试验以新鲜红枣为原料,主要对红枣醋酒精发酵阶段的发酵条件进行了优化,为红枣醋的生产提供理论依据。1材料与方法1.1材料1.1.1原料及菌种新鲜冬枣:采自北京平谷县。酵母菌:葡萄酒酵母(Saccharomycescerevisiae)2.1421、乳酸菌:肠膜明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)1.20:中科院微生物研究所。酵母菌斜面培养基:12°Bx麦芽汁100mL,琼脂1.5g。乳酸菌斜面培养基:蔗糖13.0g,蛋白胨0.2g,KH2PO40.03g,Na2HPO40.14g,琼脂1.5g,蒸馏水100mL,pH值7.0~7.2。酵母菌扩培培养基:经酶解、灭菌后的鲜枣汁。乳酸菌扩培培养基:经酶解、灭菌后的鲜枣汁。1.1.2主要试剂果胶酶(酶活力1800U/mg)(Fluka公司),琼脂(福建惠安化工厂)为食品级,柠檬酸(北京化学试剂公司)为食品级,蔗糖(华资食品有限公司)为食品级,蛋白胨、酵母提取物(北京化学试剂公司)为生化试剂。1.1.3主要设备HPS-250生化培养箱(哈尔滨东明医疗仪器厂),SK-1快速混匀器(江苏省荣华仪器制造有限公司),JA12002电子天平(上海天平仪器厂),SFG-01B电热恒温鼓风干燥箱(湖北恒风医疗器械有限公司),JT75-1型隔水式培养箱(余姚市恒温箱厂),PHS-3B型精密pH计(上海雷诺仪器厂),超净工作台(苏州净化设备厂),电热恒温水浴锅(山西省文水医疗器械厂),手持糖度仪等。1.2方法1.2.1测定方法红枣醋发酵过程中酒精发酵条件的优化研究玛丽娜1,敖日格乐2(1.内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古呼和浩特010018;2.内蒙古农业大学动物科学学院,内蒙古呼和浩特010018)摘要:研究旨在通过试验方法对红枣醋发酵过程中的酒精发酵条件进行优化。得出相关试验结论,果胶酶最佳水解条件为温度36.61℃、pH值4.19、时间1.50h、酶量0.12%。酒精发酵过程最佳发酵条件为温度28℃,糖度16%,酵母菌接种量3%,乳酸菌接种量2%。关键词:红枣醋;酒精发酵;优化中图分类号:TS264.2文献标识码:A文章编号:0254-5071(2010)12-0027-03OptimizationofalcoholicfermentationconditionsofreddatevinegarMALINA1,AORIGELE2(1.CollegeofLifeSciences,InnerMongoliaAgriculturalUniversity,Hohhot010018,China;2.CollegeofAnimalScience,InnerMongoliaAgriculturalUniversity,Hohhot010018,China)Abstract:Conditionsofalcoholicfermentationofpreparationofreddatevinegarwereoptimized.Theresultsshowedthattheoptimumconditionsfortreatmentofpectinaseweretemperature36.61℃,pHvalue4.19,applicationofenzymeby0.12%andtreatedfor1.50hAndtheoptimumfermentationconditionsweretemperature28℃,sugarlevel16%,withinoculumofyeastandlacticacidbacteriaby3%and2%,respectively.Keywords:reddatevinegar;alcoholicfermentation;optimization

hplc_草酸和草酰乙酸_解释说明

hplc 草酸和草酰乙酸 解释说明

1. 引言

1.1 概述

草酸和草酰乙酸都是重要的有机化合物,在不同领域广泛应用。草酸具有多种用途,包括作为食品添加剂、螯合剂、清洗剂等;而草酰乙酸主要用于制备草醋组分和防腐剂。为了确保这些化合物的质量和安全性,研究人员一直在开发高效准确的分析方法。本文通过介绍HPLC技术在草酸和草酰乙酸分析中的应用,旨在总结目前的研究进展并展望未来的发展方向。

1.2 文章结构

本文分为五个部分进行讨论。首先是引言部分,概述了文章的背景和目标。第二部分将详细介绍HPLC技术的定义与原理,并探讨其在不同领域中的应用。第三和第四部分将重点关注草酸和草酰乙酸,包括它们的定义、性质以及在分析中的应用情况。最后一部分将对HPLC技术在草酸和草酰乙酸研究中的综述进行总结,并展望其未来的发展前景和面临的挑战。

1.3 目的

本文旨在探讨和评估HPLC技术在草酸和草酰乙酸分析中的应用。通过对已有研究成果的综述,我们将了解到当前HPLC技术在这两种化合物分析方面的优势和局限性。同时,我们将对未来该领域研究的发展方向进行展望,并指出可能面临的挑战。通过本文的撰写和阅读,期望能够为进一步促进HPLC技术在草酸和草酰乙酸分析中的应用提供参考。

2. HPLC

2.1 定义与原理

高效液相色谱(High-Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种广泛应用于化学、生物化学和分析化学领域的分离技术。它基于溶液通过固定在柱子中的固体填料之间进行相互作用和分配行为来实现样品组分的分离。HPLC使用高压泵将流动相(溶剂组成的混合物)通过填料包装的柱子,并利用样品中不同组分与填料表面发生不同程度交互作用的性质来实现分离。被吸附或反应较强的组分会停留更长时间,而与填料相互作用较弱或无相互作用的组分则会更快地通过柱子。

2.2 应用领域

HPLC已经成为许多科学领域中常用的分离和纯化技术。它广泛应用于药物研究和开发、食品安全检测、环境监测、生物医学研究等领域。在药学中,HPLC常用于药物含量和纯度测试以及药物代谢产物鉴定。在食品领域,HPLC可以检测食品中的添加剂、残留农药和有害物质。在环境领域,HPLC用于监测水体、土壤和大气中的污染物。此外,HPLC还在生物制药、色谱法开发和分析方法验证等方面具有广泛的应用。

L-异亮氨酸产生菌的融合育种选育及其关键酶与发酵条件的研究(1)

天津科技大学硕士学位论文L-异亮氨酸产生菌的融合育种选育及其关键酶与发酵条件的研究姓名:王菲申请学位级别:硕士专业:发酵工程指导教师:张克旭20040101天津科技大学硕士学位论文

摘要

本论文根据代谢控制发酵理论,研究了L-异亮氨酸生产菌的选育及其发

酵条件。主要研究内容和结果如下:

(1)建立了发酵液中L异亮氨酸定量测定的偏最小二乘分光光度法,并对

该方法的应用条件进行了研究。以高速氨基酸分析仪测定结果为参比,用偏

最小二乘分光光度法测定结果的准确度比纸层析一色斑洗脱比色法高,且方

法较简便。

f2)确定了亲株ISW330和ASl.495原生质体形成和再生及进行原生质体

融合的最佳条件,采用原生质体融合技术最终筛选出一株带有目的遗传标记

的L,异亮氨酸高产菌SW0370(Leu一+Met一+AEC7十a.ABr)。该菌株在未优化条

件下可产L异亮氨酸14.279/L。经验证,菌株SW0370的遗传性能稳定。

(3)初步研究了菌株SW0370发酵过程中关键酶苏氨酸脱氨酶的提取、测

定方法与调节性质。在得到的酶活测定与提取方法的最佳条件的基础上,分

别考察了不同L异亮氨酸浓度和不同氨基酸对酶活力的影响。

(4)研究了菌株SW0370的摇瓶分批发酵条件。应用二次回归正交旋转组

合设计获得该菌株优化的发酵培养基配比,并对分批发酵和补料分批发酵培

养条件进行了研究。在优化条件下,菌株SW0370摇瓶补料分批发酵96h,

可产L,异亮氨酸21.96g/L。本论文在L异亮氨酸代谢控制发酵研究领域韵创新之处在于,成功地利

用原生质体融合技术选育出一株带有双缺标记的L-异亮氨酸高产菌SW0370,

并研究了菌株SW0370发酵过程中关键酶苏氨酸脱氨酶的酶活测定与纯化方

法和反馈调节性质。对以后继续进行L广异亮氨酸的育种工作有指导性意义。

菌株sw0370,采用补料分批发酵工艺,在摇瓶上发酵96h可产L一异亮氨酸

21.969/L,具备了在发酵罐上生产的潜力,达到国内先进水平。

梯度洗脱高效液相色谱法快速测定1_3_丙二醇发酵液中有机酸_概要

食品与发酵工业

F OOD AND FERMENTAT I ON I N DU ST R I ES

梯度洗脱高效液相色谱法快速测定

1, 3 丙二醇发酵液中有机酸

*

王元好 , 董悦生 , 修志龙

(大连理工大学环境与生命学院 生物科学与工程系 , 辽宁 大连 , 116024

摘 要 提出了一种快速分 析发酵液中 9种有 机酸的高效 液相色谱方 法 。 该方法利 用 R Spak KC -811色 谱柱 (300mm 8mm i d , 采用超纯 水 -4mm ol/L高氯酸为流动 相进行梯 度洗脱 。 流动相 流速 1 0mL /mi n , 紫外 检测波长 210nm, 柱温 60

时 , 能够快速 、 准确 地分离 测定发 酵液中 的丙 酮酸 、 柠檬 酸 、 苹果酸 、 延

胡索 酸 、 琥 珀 酸 、 乳酸 、 甲酸 、 乙酸等 8种有机酸 , 分析时间只需 15m i

n 。 各种有机酸的线性 相关系数 R 2! 0 9992, 精密 度的 相对标准偏差为 0. 97%-2.

72%, 样品回收率为 96 8%-102 5%, 具 有较高的精 密度和准确 度 , 可 以用于 1, 3 丙二醇发酵液中有机酸的分 析 。

关键词 高效液相色谱 , 梯度洗脱 , 有 机酸 , 1, 3 丙二醇 , 发酵液

第一作者 :博士研究生 (修志龙教授为通讯作者 。 *

∀ 863#计 划 项 目 (2007AA02Z208 和 ∀ 973#计 划 项 目 (2007CB 714306

收稿日期 :2009-07-10, 改回日期 :2009-11-16

代谢组学 (m e tabono m ics 是近几年 来的一门新 兴学科 , 主要应用高效液相色谱、 气相色谱 质 谱、 液 相色谱 质谱以及核磁共振等现代分析仪器手段 , 定 性定量的研究生物体内代谢产物及其随时间变化的

规律 [1]

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